一种反相色谱体系检测右布洛芬手性异构体杂质的检测方法与流程
本发明涉及药物分析领域，具体涉及一种反相色谱体系检测右布洛芬手性异构体杂质的检测方法。
背景技术：
1、布洛芬(ibuprofen)，化学名为(2)-2-[4-(2-甲基丙基)苯基]丙酸，为新一代非甾体消炎镇痛药物，与阿司匹林相比，具有更强的解热、消炎和镇痛作用，且副作用小，故自20世纪70年代末上市以来，布洛芬获得了迅速发展，现已成为生产量和使用量最大的消炎解热镇痛药质疑，全球的年产量超万吨。布洛芬上市以来，一直以外消旋形式销售。但研究表明，外消旋布洛芬的两种异构体右布洛芬和左布洛芬在药动学和生物转化方面不同，右布洛芬具有明显较高的临床效果。
2、非甾体抗炎药右布洛芬(dexibuprofen)，化学名为(2s)-2-[4-(2-甲基丙基)苯基]丙酸，为布洛芬的右旋体。两者作用和用途相同，但前者剂量150mg和300mg分别于后者200mg和400mg疗效相当，在安全性和药动学特性方面优于布洛芬，由g.broschek gebro公司于1994年在奥地利上市。其相关制剂产品的上市情况为：奥地利gebro pharma gmbh公司生产右旋布洛芬片剂陆续获批上市，分别为：1993年4月，商品名：规格：200mg、300mg；1998年5月，商品名：规格：400mg；2000年3月，商品名：规格为200mg、300mg、400mg；2008年12月，该公司开发的右布洛芬干混悬剂获批，商品名：规格为300mg、400mg，适应症人群为成人，无儿童适应症。美国：1989年9月19日，由mcneil consumer公司研发的布洛芬混悬液获批上市，商品名：motrin，规格：100mg/5ml，目前已退市。1995年6月16日，由j and j consumer inc公司研发的布洛芬混悬液上市，商品名：children's motrin，规格：100mg/5ml，适应人群为12岁以下。1996年06月10日，由jand j consumer inc公司研发的布洛芬混悬滴剂上市，商品名：children's motrin，规格：40mg/ml，适应人群为2岁以下。2000年1月12日，glaxosmithkline研发的布洛芬混悬滴剂获批，商品名：infant's advil，规格：50mg/1.25ml，适应人群为2岁以下。
3、右布洛芬与左布洛芬的结构如下：
4、与
5、鉴于右布洛芬与左布洛芬在安全性和药动学特性上的差异，有效控制右布洛芬的手性纯度，降低左布洛芬的含量，对提高药品有效性和安全性有显著帮助。
6、中国药典公布了右布洛芬中手性异构体杂质的检测方法，为正相方法，采用是是正己烷-叔丁甲醚-醋酸体系，方法检测环境污染大，且整个体系流动相极性小，无法满足水溶性制剂产品的检测需求，无法广泛应用。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种检测精密度更高、检测时间更短，系统适用性更好的反相体系检测方法，使其专属性、定量限、检测限、线性范围、重复性、准确度等方面完全符合标准。
2、为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
3、采用反相高效液相色谱法检测右布洛芬手性异构体杂质，色谱柱为手性色谱柱，以三氟乙酸-乙腈(58～62∶38～42)作为流动相a，流动相a中三氟乙酸水溶液的浓度为0.04％～0.06％，以乙腈为流动相b，将对照溶液和供试品溶液进样分析，按照自身对照法计算右布洛芬手性异构体杂质的含量。计算公式：供试品中左布洛芬的含量(％)＝a左/a对×1％，其中：a左为供试品溶液中左布洛芬的峰面积；a对为对照溶液的主峰面积。右布洛芬手性异构体杂质为左布洛芬，左布洛芬结构如下：
4、
5、具体地，优选以0.05％三氟乙酸-乙腈(60∶40)作为流动相a，以乙腈为流动相b；设置检测波长和进样量，以体积比计，通过c18色谱柱梯度洗脱，洗脱程序为：以流动相a为100％，流动相b为0％等度洗脱40分钟，40分钟后逐步减少流动相a比例，逐渐增加流动相b比例，至45分钟流动相a达到20％，流动相b达到80％，继续洗脱5分钟至50分钟，51分钟时回调流动相a与流动相b比例至初始比例，维持至60分钟。
6、根据本发明的实施方式，按中国药典右布洛芬标准，左布洛芬限度质控限度为1.0％。在定量限的试验中，左布洛芬定量限浓度低于其质控限度，检测限浓度低于其质控限度的1/10以下，采用本发明的高效液相色谱法进行梯度洗脱时，左布洛芬浓度在0.03％～2.0％可被有效检出，表明左布洛芬在质控限度3/100以上均可被有效检出。
7、具体地，采用本发明的高效液相色谱法进行梯度洗脱时，检测波长为218～222nm，优选220nm。柱温为25℃～35℃，优选30℃。流速为0.5～0.7ml/min，优选0.6ml/min。进样量优选10μl，手性色谱柱优选纤维素-三-(4-甲基苯甲酸酯)为填充剂，色谱柱优选chiral mj(2)-rh柱，规格为4.6×250mm，5μm。与现有技术相比，本发明具有下述有益技术效果：与现有技术相比，本发明采用0.05％三氟乙酸-乙腈梯度洗脱体系，不仅能使得手性异构体左布洛芬和右布洛芬以及其他已知杂质均能有效分离，且峰型对称性较好，还能快速检测出低于质控限度3/100的左布洛芬，同时在专属性、定量限、检测限、线性范围以及重复性上表现出显著的优势，具有检测方法更环保、适用性更广、精密度和准确度高、重复性好以及系统适用性好等优点，为右布洛芬药品的质量控制提供重要的方法检测参考依据。
技术特征：
1.一种反相色谱体系检测右布洛芬手性异构体杂质的检测方法，其特征在于，所述检测方法采用反相高效液相色谱法，色谱为手性色谱柱，以三氟乙酸水溶液与乙腈的混合溶液为流动相a，乙腈为流动相b，三氟乙酸水溶液：乙腈＝58～62:38～42，所述流动相a中三氟乙酸水溶液的浓度为0.04％～0.06％，所述右布洛芬手性异构体杂质为左布洛芬，所述左布洛芬结构如下：
2.根据权利要求1所述的一种反相色谱体系检测右布洛芬手性异构体杂质的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱法的检测条件包括：
3.根据权利要求1所述的一种反相色谱体系检测右布洛芬手性异构体杂质的检测方法，其特征在于，所述三氟乙酸水溶液的浓度为0.05％。
4.根据权利要求3所述的一种反相色谱体系检测右布洛芬手性异构体杂质的检测方法，其特征在于，所述0.05％三氟乙酸水溶液：乙腈＝60:40。
5.根据权利要求1所述的一种反相色谱体系检测右布洛芬手性异构体杂质的检测方法，其特征在于，所述手性色谱柱以纤维素-三-(4-甲基苯甲酸酯)为填充剂。
6.根据权利要求2所述的一种反相色谱体系检测右布洛芬手性异构体杂质的检测方法，其特征在于，所述的流速为0.6ml/min。
7.根据权利要求2所述的一种反相色谱体系检测右布洛芬手性异构体杂质的检测方法，其特征在于，所述的柱温为30℃。
8.根据权利要求2所述的一种反相色谱体系检测右布洛芬手性异构体杂质的检测方法，其特征在于，所述检测波长为220nm。
技术总结
本发明公开了一种反相色谱体系检测右布洛芬手性异构体杂质的检测方法。运用高效液相色谱法，以三氟乙酸‑乙腈、乙腈为流动相体系，设置色谱条件的柱温、流速、检测波长，通过纤维素‑三‑(4‑甲基苯甲酸酯)填料色谱柱洗脱梯度。由于本品采用反相洗脱体系，本发明采用的高效液相色谱法不仅可以用于右布洛芬手性异构体杂质的检测，还可用于其制剂样品(如混悬液等)中手性异构体杂质的检测的分离，峰型良好，分离度较佳，在专属性、定量限、检测限、线性范围以及重复性上表现出显著优势，具有精密度和准确度更高、重复性好及系统适用性好等优点，为右布洛芬药品原料及多种类型的制剂产品提供关于异构体杂质的重要检测方法。
技术研发人员：王琴琴,杜鹏程,朱兵,程晓佳,王蓉蓉
受保护的技术使用者：南京华威医药科技集团有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23