鸡苦胆低成本生产鹅去氧胆酸的工艺的制作方法
本发明属于鹅去氧胆酸，具体涉及一种鸡苦胆低成本生产鹅去氧胆酸的工艺。
背景技术：
1、鹅去氧胆酸(cdca)主要作用是降低胆汁内胆固醇的饱和度，家禽的胆汁中含有鹅去氧胆酸、石胆酸和少量的胆酸。因此，从家禽制备鹅去氧胆酸的方法是本领域公知的，但是由于原料供应减少和产率低的原因这种方法在经济上并不可行。常规的制备方法是将胆汁粗品中含有的胆酸等水溶性物质通过萃取等方式或者成盐的方式去除，然后再精制得到鹅去氧胆酸。公开号为cn1432579a的中国发明专利公开了一种鹅去氧胆酸粗品的精制方法，利用稀氨水作为萃取剂，除去鹅去氧胆酸中的胆酸等亲水性杂质，胆汁的利用率低，使用萃取溶剂沸点高，难以回收利用，增加生产成本，不适于规模化生产。另外，直接成盐的形式去除鹅去氧胆酸中的胆酸成分，成盐成本高，并且存在成盐不完全的问题。
技术实现思路
1、本发明提供一种鸡苦胆低成本生产鹅去氧胆酸的工艺，生产工艺操作简单，生产效率高，产品收率高，生产成本低，适合规模化生产。
2、本发明的技术方案为：
3、鸡苦胆低成本生产鹅去氧胆酸的工艺，包括破碎-皂化-酸化-脱脂-酶转化-黄明龙还原反应-乙酸乙酯结晶-析晶纯化，具体为：
4、1)破碎：将鸡苦胆破碎后置于反应釜中，升温至80-95℃，过滤去除胆皮，得到胆汁；
5、2)皂化：向胆汁中加入氢氧化钠升温，发生皂化反应；
6、3)酸化：将皂化后的胆汁冷却到15-20℃，滴加盐酸调节ph至2.5-3.0，胆膏析出，弃除酸水保留固体，加碱水，泵入脱脂釜中；
7、4)脱脂：向脱脂釜中加入脱脂溶剂，脱脂后分层弃除上层溶剂层；
8、5)酶转化：向下层水相加氢氧化钠调节ph，加入丙酮、12a-羟基固醇脱氢酶(12a-hsdh-酶)、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nadp)和异丙醇脱氢酶；保持37-40℃反应3-6h，液相检测胆酸纯度低于1％加入盐酸调ph至2.5-3.0终止反应，升温蒸出丙酮，冷却降温离心；
9、6)黄明龙还原反应：向步骤5)的离心物中加入一缩二乙二醇、氢氧化钠和盐酸肼，加热回流30-60min，继续升温蒸出水直至温度达到190-205℃回流反应3-6小时后终止反应，得鹅去氧胆酸粗品；
10、7)乙酸乙酯结晶：向鹅去氧胆酸粗品中加入乙酸乙酯，并加热，保温至鹅去氧胆酸粗品完全溶解后加入除水剂去除乙酸乙酯中的水分，检查水分不大于1％后，过滤去除除水剂，乙酸乙酯浓缩、降温，再加入乙酸乙酯结晶，离心去除乙酸乙酯母液并回收；
11、8)析晶纯化：向步骤7)离心的得到的固体中加水，氢氧化钠调节ph至8.5-9.0加热回收乙酸乙酯，降温至25℃-30℃，酸化析晶，离心、烘干得到鹅去氧胆酸。
12、优选地，脱脂溶剂为石油醚或正庚烷中的一种。
13、优选地，除水剂为无水碳酸钠、无水硫酸钠、无水碳酸钙中的一种。
14、优选地，步骤5)中丙酮：12a-羟基固醇脱氢酶、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(nadp)和异丙醇脱氢酶质量比为100-105：0.4-0.6：0.05-0.1：0.0.3-0.6。
15、优选地，步骤2)中皂化反应的温度为120-130℃皂化12-24h。
16、优选地，步骤4)中脱脂温度为40-50℃，脱脂时间为30-60min。
17、优选地，步骤5)中加氢氧化钠调节ph值至7.5-8.5。
18、优选地，步骤7)中加热温度为55-65℃。
19、优选地，步骤2)中氢氧化钠的加入量与鸡苦胆质量比为1：0.05-0.06。
20、本发明的工艺反应原理如下所示：
21、
22、本发明与现有技术相比，具有以下有益效果：
23、本发明采用鸡苦胆为原料，在不提取鹅去氧胆酸成分的情况下，将鸡苦胆中含有的胆酸直接转化为鹅去氧胆酸，乙酸乙酯直接结晶法，生产工艺简单易操作，所用溶剂沸点低易回收，产品纯度高、收率高，鹅去氧胆酸纯度达99％以上，适合规模化生产，生产成本低等优点，解决了其他工艺中成盐成本高的特点。
技术特征：
1.鸡苦胆低成本生产鹅去氧胆酸的工艺，其特征在于，包括破碎-皂化-酸化-脱脂-酶转化-黄明龙还原反应-乙酸乙酯结晶-析晶纯化，具体为：
2.如权利要求1所述的鸡苦胆低成本生产鹅去氧胆酸的工艺，其特征在于，脱脂溶剂为石油醚或正庚烷中的一种。
3.如权利要求1所述的鸡苦胆低成本生产鹅去氧胆酸的工艺，其特征在于，除水剂为无水碳酸钠、无水硫酸钠、无水碳酸钙中的一种。
4.如权利要求1所述的鸡苦胆低成本生产鹅去氧胆酸的工艺，其特征在于，步骤5)中丙酮：12a-羟基固醇脱氢酶、烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸和异丙醇脱氢酶质量比为100-105：0.4-0.6：0.05-0.1：0.0.3-0.6。
5.如权利要求1所述的鸡苦胆低成本生产鹅去氧胆酸的工艺，其特征在于，步骤2)中皂化反应的温度为120-130℃皂化12-24h。
6.如权利要求1所述的鸡苦胆低成本生产鹅去氧胆酸的工艺，其特征在于，步骤4)中脱脂温度为40-50℃，脱脂时间为30-60min。
7.如权利要求1所述的鸡苦胆低成本生产鹅去氧胆酸的工艺，其特征在于，步骤5)中加氢氧化钠调节ph值至7.5-8.5。
8.如权利要求1所述的鸡苦胆低成本生产鹅去氧胆酸的工艺，其特征在于，步骤7)中加热温度为55-65℃。
9.如权利要求1所述的鸡苦胆低成本生产鹅去氧胆酸的工艺，其特征在于，步骤2)中氢氧化钠的加入量与鸡苦胆质量比为1：0.05-0.06。
技术总结
本发明公开了一种鸡苦胆低成本生产鹅去氧胆酸的工艺，属于鹅去氧胆酸技术领域。其技术方案为：1)破碎：鸡苦胆破碎，过滤去除胆皮；2)皂化：加入氢氧化钠发生皂化反应；3)酸化：盐酸调节pH，胆膏析出，弃除酸水保留固体，加碱水；4)脱脂：加入脱脂溶剂，脱脂后分层弃除上层溶剂层；5)酶转化：加入丙酮、12a‑HSDH‑酶、NADP和异丙醇脱氢酶；6)黄明龙还原反应：加入一缩二乙二醇、氢氧化钠和盐酸肼，加热回流，得鹅去氧胆酸粗品；7)乙酸乙酯结晶：加入乙酸乙酯，加热，除水，过滤，浓缩；8)析晶纯化：酸化析晶，离心、烘干得到鹅去氧胆酸。本发明生产工艺操作简单，产品收率高，生产成本低，适合规模化生产。
技术研发人员：薛正余,秦洪彪,郭稳廷,郭天廷
受保护的技术使用者：山东江正生物技术有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23