miR-25-3p在调控间充质干细胞成骨分化中的用途的制作方法
本发明涉及干细胞，特别是涉及mir-25-3p在调控间充质干细胞成骨分化中的用途。
背景技术：
1、近年来，组织工程学的迅速发展使得利用其原理和方法再生组织或器官的特点和优势得到广泛认同。作为组织工程研究的重要领域，骨组织工程在骨缺损修复中的应用取得了重大进展。骨组织工程是一种很有前途的利用干细胞和支架结构来修复和再生受损的骨组织的方法。
2、在各种干细胞来源中，间充质干细胞由于其多向分化潜能、低免疫原性和一般不涉及伦理问题，已成为一种潜在的候选干细胞，在组织工程、再生医学领域有着良好的应用前景，在治疗骨质疏松症以及骨伤后的修复重建方面具有重大意义。然而，在广泛应用于临床实践之前，仍然存在着成骨效率低下的缺点，因此提高间充质干细胞的成骨能力是目前需要解决的问题。
技术实现思路
1、基于此，本发明有必要提供mir-25-3p在制备调控间充质干细胞成骨分化的产品中的应用。此外，还有必要提供一种促进间充质干细胞成骨分化的方法。
2、技术方案包括如下：
3、mir-25-3p在以下任一项中的应用：
4、(1)在制备调控间充质干细胞成骨分化的产品中的应用；
5、(2)在制备治疗骨质疏松症和骨缺损的药物中的应用。
6、在其中一个实施例中，所述产品以mir-25-3p促进剂或抑制剂为活性成分。
7、在其中一个实施例中，所述mir-25-3p促进剂包括mir-25-3p或其模拟物。
8、在其中一个实施例中，所述产品还包括药学可接受的辅料，如表达载体。
9、在其中一个实施例中，所述表达载体包括慢病毒载体。
10、在其中一个实施例中，间充质干细胞包括人脐带来源的间充质干细胞。
11、在其中一个实施例中，所述产品调节间充质干细胞成骨分化是通过过表达mir-25-3p使得成骨细胞分化相关标志物表达明显上调，从而促进msc成骨分化能力。
12、在其中一个实施例中，所述成骨细胞分化相关标志物包括alp、runx2和opn。
13、一种调控间充质干细胞成骨分化的制剂，所述制剂以mir-25-3p抑制剂或促进剂为活性成分。
14、在其中一个实施例中，所述mir-25-3p促进剂包括促进mir-25-3p表达或活性功能的试剂。
15、在其中一个实施例中，所述促进mir-25-3p表达的试剂为含有mir-25-3p基因的表达载体，可选，所述载体包括慢病毒载体。
16、所述的制剂在制备治疗骨质疏松症和骨缺损的药物中的应用。
17、一种促进间充质干细胞成骨分化的方法，包括如下步骤：
18、1)获取间充质干细胞，进行传代培养；
19、2)构建过表达mir-25-3p载体；
20、3)将构建的过表达mir-25-3p载体转染至间充质干细胞，然后培养。
21、在其中一个实施例中，所述转染包括将生长状态良好的huc-msc接种到培养板中，待细胞贴壁状态良好，进行细胞换液并加入慢病毒(moi＝20)和感染增强液进行转染。
22、在其中一个实施例中，所述感染增强液包括感染增强液a(hitrans a)。
23、相对于传统技术，本申请具备如下有益效果：
24、本发明通过构建稳定过表达mir-25-3p的huc-msc，发现与正常的msc相比，mir-25-3phighhuc-msc形态和表型没有发生变化，但成骨分化功能受到影响，过表达mir-25-3p基因使成骨细胞分化相关标志物表达明显上调，从而促进间充质干细胞成骨分化能力，这一发现有助于更清楚的了解huc-msc的成骨分化，为临床治疗骨质疏松症和骨缺损起到指导作用。
技术特征：
1.mir-25-3p在以下任一项中的应用：
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品以mir-25-3p促进剂或抑制剂为活性成分。
3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述mir-25-3p促进剂包括mir-25-3p或其模拟物。
4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述mir-25-3p促进剂还包括表达载体；可选地，所述表达载体包括慢病毒载体。
5.根据权利要求1至4中任一项所述的应用，其特征在于，所述间充质干细胞包括人脐带来源的间充质干细胞。
6.根据权利要求1至4中任一项所述的应用，其特征在于，所述产品调节间充质干细胞成骨分化是通过过表达mir-25-3p使得成骨细胞分化相关标志物表达明显上调，从而促进间充质干细胞成骨分化能力。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述成骨细胞分化相关标志物包括alp、runx2和opn。
8.一种促进间充质干细胞成骨分化的方法，其特征在于，包括如下步骤：
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述转染包括将生长状态良好的huc-msc接种到培养板中，待细胞贴壁状态良好，进行细胞换液并加入慢病毒(moi＝20)和感染增强液进行转染。
技术总结
本发明涉及miR‑25‑3p在调控间充质干细胞成骨分化中的用途，通过构建稳定过表达miR‑25‑3p的hUC‑MSC，研究其生物学特性，发现与正常的MSC相比，miR‑25‑3phighhUC‑MSC成骨分化功能受到影响，说明miR‑25‑3p可有效调控hUC‑MSC的成骨分化功能，这一发现有助于更清楚的了解hUC‑MSC的成骨分化，为临床治疗骨质疏松症起到指导作用。
技术研发人员：郑义哲,单佳盟
受保护的技术使用者：盛嘉华生物科技（上海）有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/9/23