一种原花青素脂质体的制备方法

xiaoxiao2020-6-23  726

专利名称:一种原花青素脂质体的制备方法
技术领域
本发明涉及一种脂质体的制备方法。
背景技术
近代研究发现,原花青素具有抗氧化、抗血栓形成、调节血管细胞功能、降低血小 板凝聚、抗炎、抗微生物、减轻缺血再灌注损伤、减缓早老性痴呆和帕金森氏病发展进程等 作用。国外对原花青素的性能研究较多,并广泛用于食品、化妆品及保健药品等领域。许 多研究表明,原花青素在体内其抗氧化、清除自由基的能力是Ve的50倍、Vc的20倍,以安 全低毒、高效、高生物利用率而著称,其在食品添加剂、保健品、药物、化妆品等领域得到了 广泛的应用。由此可见,对原花青素的研究可以更好的利用这一宝贵资源。1961年英国学 者Bangham和Standish在电镜下发现当磷脂分子分散在水中时会自然形成有序排列的类 似生物膜结构的多层囊泡,后来人们将这种具有双层膜形态的生物膜结构的中空小球通称 为脂质体。原花青素水溶性较好,但稳定性较差,易受外界条件影响,如易氧化,对光、温度、 PH值敏感等,这使其应用受到限制。目前研究较多的是原花青素微胶囊,并且已经进行了工 业化生产,但是其粒径较大,不利于人体吸收,如何在有效保护原花青素的同时减小其粒径 一直是个难题。

发明内容
本发明目的是为了解决现有采用微胶囊的形式保护原花青素存在粒径较大,不利 于人体吸收的问题,而提供一种原花青素脂质体的制备方法。原花青素脂质体的制备方法按以下步骤实现一、将0. 2672 0. 3638g的大豆 卵磷脂和0. 0362 0. 1328g的胆固醇置于梨形烧瓶中,然后加入乙醚和无水乙醇的40 400mL混合液,再加入0. 0053 0. 0364g的原花青素和2 20mL的磷酸盐缓冲液并震荡混 合,得混合物;二、将混合物置于25°C的水浴中,在强度为IOOMPa的条件下超声处理5min, 然后置于30 50°C的水浴中,在400 700MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入8 80mL 的磷酸盐缓冲液,水合5 IOmin后得粗混悬液溶;三、粗混悬液溶过0. 45 μ m的滤膜,即完 成原花青素脂质体的制备;其中步骤一中乙醚和无水乙醇的混合液中乙醚和无水乙醇的体 积比为1:1。脂质体作为这种营养成分的有效载体,可以增加易氧化、易挥发、光敏性和热敏性 物料的稳定性;控制芯材的释放;降低某些物质的毒性;减少副作用;屏蔽不良味道与气味寸。本发明采用逆相蒸发法制备原花青素脂质体,把原花青素包埋在内水相中,降低 了对外界环境的敏感性,使原花青素更加稳定;原花青素脂质体的包埋率高达88. 89%,并 且适合进行大规模工业操作。本发明采用脂质体包埋原花青素,粒径较小,具有靶向性,有利于人体吸收,实现了在有效保护原花青素的同时减小其粒径这一技术难题,并且制备工艺简单,具有广泛的 应用前景。
具体实施例方式本发明技术方案不局限于以下所列举具体实施方式
,还包括各具体实施方式
间的 任意组合。
具体实施方式
一本实施方式原花青素脂质体的制备方法按以下步骤实现一、 将0. 2672 0. 3638g的大豆卵磷脂和0. 0362 0. 1328g的胆固醇置于梨形烧瓶中,然后加 入乙醚和无水乙醇的40 400mL混合液,再加入0. 0053 0. 0364g的原花青素和2 20mL 的磷酸盐缓冲液并震荡混合,得混合物;二、将混合物置于25°C的水浴中,在强度为IOOMPa 的条件下超声处理5min,然后置于30 50°C的水浴中,在400 700MPa的条件下旋转蒸 发成膜,再加入8 SOmL的磷酸盐缓冲液,水合5 IOmin后得粗混悬液溶;三、粗混悬液 溶过0. 45 μ m的滤膜,即完成原花青素脂质体的制备;其中步骤一中乙醚和无水乙醇的混 合液中乙醚和无水乙醇的体积比为1:1。本实施方式步骤一中磷酸盐缓冲液的pH值为7. 0,含有质量浓度为0. 2%的叠氮化 钠。本实施方式步骤三中所得的原花青素脂质体为混悬液,可在4°C下保存,也可以制 备成冻干粉末或者喷干成粉末。
具体实施方式
二 本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤一中将0. 2672g的 大豆卵磷脂和0. 1328g的胆固醇置于梨形烧瓶中。其它步骤及参数与具体实施方式
一相 同。
具体实施方式
三本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤一中将0. 3638g的 大豆卵磷脂和0. 0362g的胆固醇置于梨形烧瓶中。其它步骤及参数与具体实施方式
一相 同。
具体实施方式
四本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤一中将0. 2765g的 大豆卵磷脂和0. 1235g的胆固醇置于梨形烧瓶中。其它步骤及参数与具体实施方式
一相 同。
具体实施方式
五本实施方式与具体实施方式
一不同的是步骤一中将0. 2976g的 大豆卵磷脂和0. 1024g的胆固醇置于梨形烧瓶中。其它步骤及参数与具体实施方式
一相 同。
具体实施方式
六本实施方式与具体实施方式
一至五之一不同的是步骤一中加入 乙醚和无水乙醇的100 300mL混合液。其它步骤及参数与具体实施方式
一至五之一相同。
具体实施方式
七本实施方式与具体实施方式
一至五之一不同的是步骤一中加入 乙醚和无水乙醇的200mL混合液。其它步骤及参数与具体实施方式
一至五之一相同。
具体实施方式
八本实施方式与具体实施方式
一至七之一不同的是步骤一中加入 0. 006 0. 03g的原花青素和5 15mL的磷酸盐缓冲液。其它步骤及参数与具体实施方式
一至七之一相同。
具体实施方式
九本实施方式与具体实施方式
一至七之一不同的是步骤一中加入 0. 009g的原花青素和SmL的磷酸盐缓冲液。其它步骤及参数与具体实施方式
一至七之一相同。
具体实施方式
十本实施方式与具体实施方式
一至七之一不同的是步骤一中加入 0. 025g的原花青素和IOmL的磷酸盐缓冲液。其它步骤及参数与具体实施方式
一至七之一 相同。
具体实施方式
十一本实施方式与具体实施方式
一至十之一不同的是步骤二中 30°C的水浴中,在700MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入SmL的磷酸盐缓冲液,水合5min 后得粗混悬液溶。其它步骤及参数与具体实施方式
一至十之一相同。
具体实施方式
十二 本实施方式与具体实施方式
一至十之一不同的是步骤二中 500C的水浴中,在400MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入SOmL的磷酸盐缓冲液,水合IOmin 后得粗混悬液溶。其它步骤及参数与具体实施方式
一至十之一相同。具体实施 方式十三本实施方式与具体实施方式
一至十之一不同的是步骤二中 35 45°C的水浴中,在450 650MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入20 60mL的磷酸盐 缓冲液,水合6 9min后得粗混悬液溶。其它步骤及参数与具体实施方式
一至十之一相同。
具体实施方式
十四本实施方式与具体实施方式
一至十之一不同的是步骤二中 40°C的水浴中,在500MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入50mL的磷酸盐缓冲液,水合Smin 后得粗混悬液溶。其它步骤及参数与具体实施方式
一至十之一相同。
具体实施方式
十五本实施方式原花青素脂质体的制备方法按以下步骤实现 一、将0. 3532g的大豆卵磷脂和0. 0468g的胆固醇置于梨形烧瓶中,然后加入乙醚和无水乙 醇的40mL混合液,再加入0. 0053 0. 0364g的原花青素和2mL的磷酸盐缓冲液并震荡混 合,得混合物;二、将混合液置于25°C的水浴中,在强度为IOOMPa的条件下超声处理5min, 然后置于30°C的水浴中,在500MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入SmL的磷酸盐缓冲液, 水合6min后得粗混悬液溶;三、粗混悬液溶过0. 45 μ m的滤膜,即完成原花青素脂质体的制 备;其中步骤一中乙醚和无水乙醇的体积比为1:1。本实施方式所得原花青素脂质体,把原花青素包埋在内水相中,降低了对外界环 境的敏感性,使原花青素更加稳定;原花青素脂质体的包埋率达88. 89%。
具体实施方式
十六本实施方式原花青素脂质体的制备方法按以下步骤实现 一、将0. 2672g的大豆卵磷脂和0. 1328g的胆固醇置于梨形烧瓶中,然后加入乙醚和无水乙 醇的40 400mL混合液,再加入0. 0065g的原花青素和5mL的磷酸盐缓冲液并震荡混合, 得混合物;二、将混合液置于25°C的水浴中,在强度为IOOMPa的条件下超声处理5min,然后 置于35°C的水浴中,在600MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入20mL的磷酸盐缓冲液,水合 Smin后得粗混悬液溶;三、粗混悬液溶过0. 45 μ m的滤膜,即完成原花青素脂质体的制备; 其中步骤一中乙醚和无水乙醇的体积比为1:1。本实施方式所得原花青素脂质体的包埋率达88. 52%。
具体实施方式
十七本实施方式原花青素脂质体的制备方法按以下步骤实现 一、将0. 3638g的大豆卵磷脂和0. 0362g的胆固醇置于梨形烧瓶中,然后加入乙醚和无水乙 醇的40 400mL混合液,再加入0. 0282g的原花青素和IOmL的磷酸盐缓冲液并震荡混合, 得混合物;二、将混合液置于25°C的水浴中,在强度为IOOMPa的条件下超声处理5min,然后 置于40°C的水浴中,在500MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入30mL的磷酸盐缓冲液,水合 7min后得粗混悬液溶;三、粗混悬液溶过0. 45 μ m的滤膜,即完成原花青素脂质体的制备;其中步骤一中乙醚和无水乙醇的体积比为1:1。
本实施方式所得原花青素脂质体的包埋率达88. 01%。
具体实施方式
十八本实施方式原花青素脂质体的制备方法按以下步骤实现 一、将0. 3246g的大豆卵磷脂和0. 0753g的胆固醇置于梨形烧瓶中,然后加入乙醚和无水乙 醇的40 400mL混合液,再加入0. 0302g的原花青素和15mL的磷酸盐缓冲液并震荡混合, 得混合物;二、将混合液置于25°C的水浴中,在强度为IOOMPa的条件下超声处理5min,然后 置于50°C的水浴中,在450MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入50mL的磷酸盐缓冲液,水合 IOmin后得粗混悬液溶;三、粗混悬液溶过0. 45 μ m的滤膜,即完成原花青素脂质体的制备; 其中步骤一中乙醚和无水乙醇的体积比为1:1。本实施方式所得原花青素脂质体的包埋率达88. 63%。
权利要求
一种原花青素脂质体的制备方法,其特征在于原花青素脂质体的制备方法按以下步骤实现一、将0.2672~0.3638g的大豆卵磷脂和0.0362~0.1328g的胆固醇置于梨形烧瓶中,然后加入乙醚和无水乙醇的40~400mL混合液,再加入0.0053~0.0364g的原花青素和2~20mL的磷酸盐缓冲液并震荡混合,得混合物;二、将混合物置于25℃的水浴中,在强度为100MPa的条件下超声处理5min,然后置于30~50℃的水浴中,在400~700MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加入8~80mL的磷酸盐缓冲液,水合5~10min后得粗混悬液溶;三、粗混悬液溶过0.45μm的滤膜,即完成原花青素脂质体的制备;其中步骤一中乙醚和无水乙醇的混合液中乙醚和无水乙醇的体积比为1:1。
2.根据权利要求1所述的一种原花青素脂质体的制备方法,其特征在于步骤一中将 0. 2765g的大豆卵磷脂和0. 1235g的胆固醇置于梨形烧瓶中。
3.根据权利要求1所述的一种原花青素脂质体的制备方法,其特征在于步骤一中将 0. 2976g的大豆卵磷脂和0. 1024g的胆固醇置于梨形烧瓶中。
4.根据权利要求1、2或3所述的一种原花青素脂质体的制备方法,其特征在于步骤一 中加入乙醚和无水乙醇的100 300mL混合液。
5.根据权利要求1、2或3所述的一种原花青素脂质体的制备方法,其特征在于步骤一 中加入乙醚和无水乙醇的200mL混合液。
6.根据权利要求5所述的一种原花青素脂质体的制备方法,其特征在于步骤一中加入 0. 006 0. 03g的原花青素和5 15mL的磷酸盐缓冲液。
7.根据权利要求5所述的一种原花青素脂质体的制备方法,其特征在于步骤一中加入 0. 009g的原花青素和SmL的磷酸盐缓冲液。
8.根据权利要求5所述的一种原花青素脂质体的制备方法,其特征在于步骤一中加入 0. 025g的原花青素和IOmL的磷酸盐缓冲液。
全文摘要
一种原花青素脂质体的制备方法,它涉及一种脂质体的制备方法。它解决了现有采用微胶囊的形式保护原花青素存在粒径较大,不利于人体吸收的问题的问题。方法一、将大豆卵磷脂和胆固醇置于梨形烧瓶中,然后加入乙醚和无水乙醇的混合液,再加入原花青素和磷酸盐缓冲液并混合得混合液;二、混合液置于25℃的水浴中超声处理,然后置于30~50℃的水浴中,在400~700MPa的条件下旋转蒸发成膜,再加磷酸盐缓冲液,水合后得粗混悬液溶;三、粗混悬液溶过0.45μm的滤膜即完成。本发明采用脂质体包埋原花青素,使原花青素更加稳定,且粒径较小,具有靶向性,有利于人体吸收,原花青素脂质体的包埋率高达88.89%,制备工艺简单。
文档编号A61P9/10GK101884617SQ20101018471
公开日2010年11月17日 申请日期2010年5月27日 优先权日2010年5月27日
发明者刘宁, 胡博 申请人:东北农业大学

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