酶解卵白蛋白复配口服液的制作方法
专利名称：酶解卵白蛋白复配口服液的制作方法
酶解卵白蛋白复配口服液本发明涉及保健品技术领域，具体地说是一种酶解卵白蛋白复配口服液。 [背景技术]酶解卵白蛋白是利用现代高科技把卵清进行生化酶解，得到具有很强生物活性的 小分子多肽就是酶解卵白蛋白。多肽因组成结构的不同而对人体具有不同的功能，概括起 来为抑制、激活、修复和促进，抑制细胞病变，增强人体免疫力；激活细胞活性，清除对人体 有害的自由基；修复人体已经病变的细胞，改善新陈代谢；促进人体蛋白质、酶和酵素的合 成与调控。敏皮木瓜 Chaenomeles speciosa (Sweet)Nakai [C. Iagenaria(Loisel) Koidz]，为蔷薇科木瓜属植物贴梗海棠的果实。据现代医学论证，皱皮木瓜果实含有皂苷、苹果酸、维生素、超氧化物歧化酶(简 称SOD)及黄酮类等人体所需的营养成分，主要具有舒经活络和胃化湿，增强机体的免疫功 能；减轻肝细胞坏死、促进其修复，防止肝细胞肿胀、气球变样，并有显著降低血清丙氨酸转 氨酶水平的作用；明显抑制抗肿瘤作用；对葡萄球菌有明显抑菌作用，此外对志贺痢疾杆 菌、福氏痢疾杆菌、宋内痢疾杆菌及其变种、致病性大肠杆菌、普通大肠杆菌、变形杆菌、肠 炎杆菌、绿脓杆菌、甲型溶血性链球菌等均有抑制作用；对牛凝血酶引起的人血纤维蛋白酶 凝聚时间有显著延长作用。这里所说的皱皮木瓜指的是产地为安徽宣城、湖北资丘、浙江淳 安、四川、湖南、陕西、山东、云南等地的木瓜。本发明的目的是采用酶解卵白蛋白与皱皮木瓜的提取物复配，而获得的一种增强 人体免疫力的口服液。为实现上述目的，设计一种酶解卵白蛋白复配口服液，其特征在于采用如下原料 复配而得酶解卵白蛋白占固体重量40%，皱皮木瓜提取物占固体重量的60%，将两种称 量好的固体物置入具有加热装置的反应釜内，注入水，水与固体物的重量比为99 1，加 热，加热温度为25°C 35°C，进行搅拌，搅拌时间为1小时 1.2小时，自然冷却后，过滤即 可得成品。所述的皱皮木瓜提取物采用如下方法制备而得将带皮的皱皮木瓜粉碎后的干 燥粉末置于萃取釜中，连续通入CO2进行萃取洗脱，萃取釜中CO2为温度31°C以上，压力为 7. 2Mpa以上的超临界状态，收集萃取时间为0. 5 5小时的流出萃取釜的CO2,卸压至常压， CO2放空或加压后回用，获得卸压后的残留物即为皱皮木瓜提取物。以每公斤皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末计，CO2的通入量为2 25公斤/小时。在通入CO2进行萃取时，加入助剂，所述的助剂采用水或体积浓度为30 95%的 乙醇，加入量为皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末重量的10 20%。本发明同现有技术相比，能增强人体免疫力，激活细胞活性，清除对人体有害的自由基；修复人体已经病变的细胞，改善新陈代谢；促进人体蛋白质、酶和酵素的合成与调 控；减轻肝细胞坏死。下面对本发明作进一步地说明，本发明对本技术领域的人来说还是比较清楚的。实施例一、准备原料 1、皱皮木瓜提取物将带皮的皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末置于萃取釜中，连续通入CO2进行萃取洗脱， 萃取釜中CO2为温度31 °C以上，压力7. 2Mpa以上的超临界状态，优选的温度为32 65°C， 压力为8 15Mpa ；收集萃取时间为0. 5 5小时的流出萃取釜的CO2,卸压至常压，CO2放 空或加压后回用，获得卸压后的残留物，即为皱皮木瓜提取物，以每公斤皱皮木瓜粉碎后的 干燥粉末计，CO2的通入量为2 25公斤/小时；按照本发明优选的方法，在通入CO2进行萃取过程中，可加入助剂，所说的助剂采 用水或体积浓度为30 95%的乙醇，加入量为皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末重量的10 20%。采用本方法提取木瓜中有效成份，选择性高，能够满足有关方面的需要。上述皱皮木瓜提取物有效成份可采用如下方法检测1、黄酮含量测定黄酮提取称取0.5g左右干样，加入IOml 70%的乙醇浸泡，在70°C的条件下间歇 振荡6h，G3砂心漏斗抽滤，加入IOml 70%的乙醇浸泡，在70°C的条件下间歇振荡6h，重复 3次。合并滤液，定容至50ml，作为待测液；黄酮测定制作标准曲线，取18个50ml容量瓶，分别吸取0、2、4、6、8、10、12、14、 16、18、20、22、24、26、28、30、32、34mll00ug/L 芦丁溶液(30% 乙醇配制)，分别加入 30% 乙 醇 10ml，0. 7ml 5% NaN02，5min 后加入 10% Al (NaNO3) 3，6min 后加入 5ml 40% NaOH,混 勻，用30%乙醇定容至刻度，35°C水溶显色，IOmin后在510mm处测OD 510nm，得回归方程 Y(100ug/ml) = 0. 5605+91. 9819 OD 510mm[r = 0. 99**]，再转换计算黄酮百分含量。测定取待测液5ml加入到25ml容量瓶中，显色测定同标准曲线。2、Vc 含量(AsA)的测定IOg皱皮木瓜的果肉加入冰冷的IOml三氯乙酸5% (w/v)，研磨勻浆，纱布过滤， 4°C下16000g离心lOmin，上清夜用作AsA和DHA测定。AsA分析反应体系包含0. Iml，提取样品，0. 5ml无水乙醇，0. 6mol/L三氯乙酸， 3Xl(T3mol/L bathophenanthroline,8X 10_3mol/LH3PO4,0. 17X 10_3mol/L FeCl3,最后总 体积1. 5ml,反应混合物在30°C水溶90min，检测534nm处的吸光值。按照此方法绘制 1-10 μ mol AsAd标准曲线，根据标准曲线计算AsA的含量。3、皂苷含量测定取30g上述制备而得的皱皮木瓜提取物做为样品粉末，乙醚回流脱脂，过滤，挥 发乙醚，烘干；再称取烘干后的粉末2g，乙醇回流提取4小时，提取液过滤，滤液水浴浓缩 干燥，加8ml甲醇溶解，然后加入80ml丙酮，沉淀过滤，滤渣烘干后用甲醇溶解，并定容至 50ml，得皂苷溶液，取Iml溶液于试管中，在60°C水溶中蒸干溶剂，加入新鲜配制的5%香草醛-冰乙酸溶液0. 2ml，摇勻，以齐墩果酸为标准品绘制标准曲线进行测定。4、齐墩果酸含量的性测定取0.5g上述制备而得的皱皮木瓜提取物做为，加入20ml乙醇，30°C下浸泡2h，35°C超声波水浴提取30min，重复提取两次，合并滤液，35°C减压蒸干，蒸干的固体溶解到 Iml甲醇中，转到1.5ml Eppendorf管中离心去掉沉淀，用Φ 13、有机系、孔径0. 30 μ m的针 头式微孔过滤器过滤，取少量滤液进行HPLC分析，HPLC分析条件流动相为甲醇A和pH值 2. 8的0. 03mol/L磷酸缓冲液B，甲醇A 磷酸缓冲液B的体积比为85 15，流速为Iml/ min，检测波长为210nm，在室温下进行。采用上述检测方法测得皱皮木瓜提取物有效成份含量为，总黄酮460. 0mg/100g Fff以上，Vc 209. 0mg/100g Fff以上，总皂苷896. 0mg/100g FW以上，齐墩果酸 62. 0mg/100g Fff 以上。2、酶解卵白蛋白通过市场采购而得，如上海益人生化技术开发有限公司所售的酶解卵白蛋白粉。二、复配将准备好的原料进行复配，其中，酶解卵白蛋白占固体重量的40%，皱皮木瓜提取 物占固体重量的60%，将两种称量好的固体物置入具有加热装置的反应釜内，注入上述总 固体物重量99倍的水，加热，加热温度为25°C 35°C，进行搅拌，搅拌时间为1小时 1. 2 小时，自然冷却后，过滤即可得成品。三、病例1、崔晓雯，女，15岁，患淋巴肿瘤，是一种NHL型白血病。当时白血球有3.5万，住 院一周后上升到12万，后进行化疗，病情得以控制，但白细胞跌得很低。后服用本发明中口 服液，胃口明显变好，白细胞很快上升，三个月后，白细胞继续上升，肝功能正常，骨髓粒子 下降到1. 5%。2、白巧英，女，83岁，患慢性肝炎后转为肝硬化，发展成肝腹水并伴有胸水，经二 次抢救脱险，服用本发明中的产品四周后，腹水、胸水和下肢浮肿逐渐消退，精神和胃口也 大大改善，长期服用的利尿药开始停用，经化验血清总蛋白68g/L，白蛋白38g/L，球蛋白 30g/L，白 / 球比例 1. 3/1。
权利要求
一种酶解卵白蛋白复配口服液，其特征在于采用如下原料复配而得酶解卵白蛋白占固体重量40％，皱皮木瓜提取物占固体重量的60％，将两种称量好的固体物置入具有加热装置的反应釜内，注入水，水与总固体物的重量比为99∶1，加热，加热温度为25℃～35℃，进行搅拌，搅拌时间为1小时～1.2小时，自然冷却后，过滤即可得成品。
2.如权利要求1所述的一种酶解卵白蛋白复配口服液，其特征在于所述的皱皮木瓜提 取物采用如下方法制备而得将带皮的皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末置于萃取釜中，连续通 入CO2进行萃取洗脱，萃取釜中CO2为温度31°C以上，压力为7. 2Mpa以上的超临界状态，收 集萃取时间为0. 5 5小时的流出萃取釜的CO2,卸压至常压，CO2放空或加压后回用，获得 卸压后的残留物即为皱皮木瓜提取物。
3.如权利要求2所述的一种酶解卵白蛋白复配口服液，其特征在于以每公斤皱皮木 瓜粉碎后的干燥粉末计，CO2的通入量为2 25公斤/小时。
4.如权利要求2所述的一种酶解卵白蛋白复配口服液，其特征在于在通入CO2进行萃 取时，加入助剂，所述的助剂采用水或体积浓度为30 95%的乙醇，加入量为皱皮木瓜粉 碎后的干燥粉末重量的10 20%。
全文摘要
本发明涉及保健品技术领域，具体地说是一种酶解卵白蛋白复配口服液，其特征在于采用如下原料复配而得酶解卵白蛋白占固体重量40％，皱皮木瓜提取物占固体重量的60％，将两种称量好的固体物置入具有加热装置的反应釜内，注入水，水与固体物的重量比为99∶1，加热，加热温度为25℃～35℃，进行搅拌，搅拌时间为1小时～1.2小时，自然冷却后，过滤即可得成品。本发明同现有技术相比，能增强人体免疫力，激活细胞活性，清除对人体有害的自由基；修复人体已经病变的细胞，改善新陈代谢；促进人体蛋白质、酶和酵素的合成与调控；减轻肝细胞坏死。
文档编号A61K36/732GK101884785SQ201010185049
公开日2010年11月17日 申请日期2010年5月28日 优先权日2010年5月28日
发明者王有才, 蒋金媛 申请人:蒋金媛;王有才
酶解卵白蛋白复配口服液本发明涉及保健品技术领域，具体地说是一种酶解卵白蛋白复配口服液。 [背景技术]酶解卵白蛋白是利用现代高科技把卵清进行生化酶解，得到具有很强生物活性的 小分子多肽就是酶解卵白蛋白。多肽因组成结构的不同而对人体具有不同的功能，概括起 来为抑制、激活、修复和促进，抑制细胞病变，增强人体免疫力；激活细胞活性，清除对人体 有害的自由基；修复人体已经病变的细胞，改善新陈代谢；促进人体蛋白质、酶和酵素的合 成与调控。敏皮木瓜 Chaenomeles speciosa (Sweet)Nakai [C. Iagenaria(Loisel) Koidz]，为蔷薇科木瓜属植物贴梗海棠的果实。据现代医学论证，皱皮木瓜果实含有皂苷、苹果酸、维生素、超氧化物歧化酶(简 称SOD)及黄酮类等人体所需的营养成分，主要具有舒经活络和胃化湿，增强机体的免疫功 能；减轻肝细胞坏死、促进其修复，防止肝细胞肿胀、气球变样，并有显著降低血清丙氨酸转 氨酶水平的作用；明显抑制抗肿瘤作用；对葡萄球菌有明显抑菌作用，此外对志贺痢疾杆 菌、福氏痢疾杆菌、宋内痢疾杆菌及其变种、致病性大肠杆菌、普通大肠杆菌、变形杆菌、肠 炎杆菌、绿脓杆菌、甲型溶血性链球菌等均有抑制作用；对牛凝血酶引起的人血纤维蛋白酶 凝聚时间有显著延长作用。这里所说的皱皮木瓜指的是产地为安徽宣城、湖北资丘、浙江淳 安、四川、湖南、陕西、山东、云南等地的木瓜。本发明的目的是采用酶解卵白蛋白与皱皮木瓜的提取物复配，而获得的一种增强 人体免疫力的口服液。为实现上述目的，设计一种酶解卵白蛋白复配口服液，其特征在于采用如下原料 复配而得酶解卵白蛋白占固体重量40%，皱皮木瓜提取物占固体重量的60%，将两种称 量好的固体物置入具有加热装置的反应釜内，注入水，水与固体物的重量比为99 1，加 热，加热温度为25°C 35°C，进行搅拌，搅拌时间为1小时 1.2小时，自然冷却后，过滤即 可得成品。所述的皱皮木瓜提取物采用如下方法制备而得将带皮的皱皮木瓜粉碎后的干 燥粉末置于萃取釜中，连续通入CO2进行萃取洗脱，萃取釜中CO2为温度31°C以上，压力为 7. 2Mpa以上的超临界状态，收集萃取时间为0. 5 5小时的流出萃取釜的CO2,卸压至常压， CO2放空或加压后回用，获得卸压后的残留物即为皱皮木瓜提取物。以每公斤皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末计，CO2的通入量为2 25公斤/小时。在通入CO2进行萃取时，加入助剂，所述的助剂采用水或体积浓度为30 95%的 乙醇，加入量为皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末重量的10 20%。本发明同现有技术相比，能增强人体免疫力，激活细胞活性，清除对人体有害的自由基；修复人体已经病变的细胞，改善新陈代谢；促进人体蛋白质、酶和酵素的合成与调 控；减轻肝细胞坏死。下面对本发明作进一步地说明，本发明对本技术领域的人来说还是比较清楚的。实施例一、准备原料 1、皱皮木瓜提取物将带皮的皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末置于萃取釜中，连续通入CO2进行萃取洗脱， 萃取釜中CO2为温度31 °C以上，压力7. 2Mpa以上的超临界状态，优选的温度为32 65°C， 压力为8 15Mpa ；收集萃取时间为0. 5 5小时的流出萃取釜的CO2,卸压至常压，CO2放 空或加压后回用，获得卸压后的残留物，即为皱皮木瓜提取物，以每公斤皱皮木瓜粉碎后的 干燥粉末计，CO2的通入量为2 25公斤/小时；按照本发明优选的方法，在通入CO2进行萃取过程中，可加入助剂，所说的助剂采 用水或体积浓度为30 95%的乙醇，加入量为皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末重量的10 20%。采用本方法提取木瓜中有效成份，选择性高，能够满足有关方面的需要。上述皱皮木瓜提取物有效成份可采用如下方法检测1、黄酮含量测定黄酮提取称取0.5g左右干样，加入IOml 70%的乙醇浸泡，在70°C的条件下间歇 振荡6h，G3砂心漏斗抽滤，加入IOml 70%的乙醇浸泡，在70°C的条件下间歇振荡6h，重复 3次。合并滤液，定容至50ml，作为待测液；黄酮测定制作标准曲线，取18个50ml容量瓶，分别吸取0、2、4、6、8、10、12、14、 16、18、20、22、24、26、28、30、32、34mll00ug/L 芦丁溶液(30% 乙醇配制)，分别加入 30% 乙 醇 10ml，0. 7ml 5% NaN02，5min 后加入 10% Al (NaNO3) 3，6min 后加入 5ml 40% NaOH,混 勻，用30%乙醇定容至刻度，35°C水溶显色，IOmin后在510mm处测OD 510nm，得回归方程 Y(100ug/ml) = 0. 5605+91. 9819 OD 510mm[r = 0. 99**]，再转换计算黄酮百分含量。测定取待测液5ml加入到25ml容量瓶中，显色测定同标准曲线。2、Vc 含量(AsA)的测定IOg皱皮木瓜的果肉加入冰冷的IOml三氯乙酸5% (w/v)，研磨勻浆，纱布过滤， 4°C下16000g离心lOmin，上清夜用作AsA和DHA测定。AsA分析反应体系包含0. Iml，提取样品，0. 5ml无水乙醇，0. 6mol/L三氯乙酸， 3Xl(T3mol/L bathophenanthroline,8X 10_3mol/LH3PO4,0. 17X 10_3mol/L FeCl3,最后总 体积1. 5ml,反应混合物在30°C水溶90min，检测534nm处的吸光值。按照此方法绘制 1-10 μ mol AsAd标准曲线，根据标准曲线计算AsA的含量。3、皂苷含量测定取30g上述制备而得的皱皮木瓜提取物做为样品粉末，乙醚回流脱脂，过滤，挥 发乙醚，烘干；再称取烘干后的粉末2g，乙醇回流提取4小时，提取液过滤，滤液水浴浓缩 干燥，加8ml甲醇溶解，然后加入80ml丙酮，沉淀过滤，滤渣烘干后用甲醇溶解，并定容至 50ml，得皂苷溶液，取Iml溶液于试管中，在60°C水溶中蒸干溶剂，加入新鲜配制的5%香草醛-冰乙酸溶液0. 2ml，摇勻，以齐墩果酸为标准品绘制标准曲线进行测定。4、齐墩果酸含量的性测定取0.5g上述制备而得的皱皮木瓜提取物做为，加入20ml乙醇，30°C下浸泡2h，35°C超声波水浴提取30min，重复提取两次，合并滤液，35°C减压蒸干，蒸干的固体溶解到 Iml甲醇中，转到1.5ml Eppendorf管中离心去掉沉淀，用Φ 13、有机系、孔径0. 30 μ m的针 头式微孔过滤器过滤，取少量滤液进行HPLC分析，HPLC分析条件流动相为甲醇A和pH值 2. 8的0. 03mol/L磷酸缓冲液B，甲醇A 磷酸缓冲液B的体积比为85 15，流速为Iml/ min，检测波长为210nm，在室温下进行。采用上述检测方法测得皱皮木瓜提取物有效成份含量为，总黄酮460. 0mg/100g Fff以上，Vc 209. 0mg/100g Fff以上，总皂苷896. 0mg/100g FW以上，齐墩果酸 62. 0mg/100g Fff 以上。2、酶解卵白蛋白通过市场采购而得，如上海益人生化技术开发有限公司所售的酶解卵白蛋白粉。二、复配将准备好的原料进行复配，其中，酶解卵白蛋白占固体重量的40%，皱皮木瓜提取 物占固体重量的60%，将两种称量好的固体物置入具有加热装置的反应釜内，注入上述总 固体物重量99倍的水，加热，加热温度为25°C 35°C，进行搅拌，搅拌时间为1小时 1. 2 小时，自然冷却后，过滤即可得成品。三、病例1、崔晓雯，女，15岁，患淋巴肿瘤，是一种NHL型白血病。当时白血球有3.5万，住 院一周后上升到12万，后进行化疗，病情得以控制，但白细胞跌得很低。后服用本发明中口 服液，胃口明显变好，白细胞很快上升，三个月后，白细胞继续上升，肝功能正常，骨髓粒子 下降到1. 5%。2、白巧英，女，83岁，患慢性肝炎后转为肝硬化，发展成肝腹水并伴有胸水，经二 次抢救脱险，服用本发明中的产品四周后，腹水、胸水和下肢浮肿逐渐消退，精神和胃口也 大大改善，长期服用的利尿药开始停用，经化验血清总蛋白68g/L，白蛋白38g/L，球蛋白 30g/L，白 / 球比例 1. 3/1。
权利要求
一种酶解卵白蛋白复配口服液，其特征在于采用如下原料复配而得酶解卵白蛋白占固体重量40％，皱皮木瓜提取物占固体重量的60％，将两种称量好的固体物置入具有加热装置的反应釜内，注入水，水与总固体物的重量比为99∶1，加热，加热温度为25℃～35℃，进行搅拌，搅拌时间为1小时～1.2小时，自然冷却后，过滤即可得成品。
2.如权利要求1所述的一种酶解卵白蛋白复配口服液，其特征在于所述的皱皮木瓜提 取物采用如下方法制备而得将带皮的皱皮木瓜粉碎后的干燥粉末置于萃取釜中，连续通 入CO2进行萃取洗脱，萃取釜中CO2为温度31°C以上，压力为7. 2Mpa以上的超临界状态，收 集萃取时间为0. 5 5小时的流出萃取釜的CO2,卸压至常压，CO2放空或加压后回用，获得 卸压后的残留物即为皱皮木瓜提取物。
3.如权利要求2所述的一种酶解卵白蛋白复配口服液，其特征在于以每公斤皱皮木 瓜粉碎后的干燥粉末计，CO2的通入量为2 25公斤/小时。
4.如权利要求2所述的一种酶解卵白蛋白复配口服液，其特征在于在通入CO2进行萃 取时，加入助剂，所述的助剂采用水或体积浓度为30 95%的乙醇，加入量为皱皮木瓜粉 碎后的干燥粉末重量的10 20%。
全文摘要
本发明涉及保健品技术领域，具体地说是一种酶解卵白蛋白复配口服液，其特征在于采用如下原料复配而得酶解卵白蛋白占固体重量40％，皱皮木瓜提取物占固体重量的60％，将两种称量好的固体物置入具有加热装置的反应釜内，注入水，水与固体物的重量比为99∶1，加热，加热温度为25℃～35℃，进行搅拌，搅拌时间为1小时～1.2小时，自然冷却后，过滤即可得成品。本发明同现有技术相比，能增强人体免疫力，激活细胞活性，清除对人体有害的自由基；修复人体已经病变的细胞，改善新陈代谢；促进人体蛋白质、酶和酵素的合成与调控；减轻肝细胞坏死。
文档编号A61K36/732GK101884785SQ201010185049
公开日2010年11月17日 申请日期2010年5月28日 优先权日2010年5月28日
发明者王有才, 蒋金媛 申请人:蒋金媛;王有才
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