噻吩并嘧啶类的制作方法
专利名称：噻吩并嘧啶类的制作方法
噻吩并嘧啶类
背景技术：
本发明的目的是发现具有有价值的性质的新化合物，特别是能用于制备药物的 化合物。本发明涉及化合物和化合物的用途，其中激酶、特别是TGF-0受体激酶对信号 转导的抑制、调节和/或调控发挥作用，本发明还涉及包含这些化合物的药物组合物和 这些化合物用于治疗激酶诱导的疾病的用途。转化生长因子0是TGF-0超家族(一族高度保守的多效生长因子)的原型， 其在胚胎发育和成年生物中发挥重要的功能。在哺乳动物中，已经鉴定了 TGF-0的三 种同工型(TGFM、2 和 3)，TGF-3 1 是最常见的同工型(Kingsley (1994) Genes Dev 8 133-146)。TGF- ^ 3例如仅在间质细胞中被表达，而TGF- ^ 1见于间质细胞和上皮细胞 中。TGF-0作为前蛋白原被合成并以无活性形式被释放到细胞外基质(DerynCk(1985) Nature 316 701-705 ； Bottinger(1996)PNAS 93 5877-5882)。除 了 被裂解开的原区 (proregion)(其也被称为潜性相关肽(latency associated pepetide，LAP),保持与成熟区的 联系)之外，潜性TGF-3结合蛋白的4种同工型之一(LTBP 1-4)也可与TGF-3结合 (Gentry (1988) Mol Cell Biol 8 4162-4168，Munger(1997)Kindey Int 51 1376-1382)。 对于TGF-0的生物学作用的出现而言必需的无活性复合物的活化还没有被完全阐明。 然而，蛋白酶解加工、例如纤溶酶、血浆转谷氨酰胺酶或者血小板反应蛋白的蛋白酶解 加工当然是必需的(Munger(1997)Kindey lnt 51 1376-1382)。活化的配体TGF-3通 过膜上的三种TGF-0受体介导它的生物学作用，所述三种TGF-0受体是被广泛表 达的I型和II型受体以及III型受体0聚糖和内皮糖蛋白，后者仅在内皮细胞中被表 达(Gougos(1990)J Biol Chem 264 8361-8364，Loeps-Casillas (1994) J Cell Biol 124 557-568)。两种III型TGF-3受体都缺少帮助信号传递到细胞中的细胞内激酶结构 域。由于III型TGF-0受体以高亲和性与所有三种TGF-0同工型结合且II型TGF-3 受体对于与III型受体结合的配体也具有较高的亲和性，生物学功能被认为在于I型和 II 型 TGF-3 受体的配体的可利用性的调节(Lastres(1996)J Cell Biol 133 1109-1121 ； Lopes-Casillas(1993)Cell 73 1435-1344)。在胞质区域中，结构密切相关的I型和II型受 体具有负责信号传递的丝氨酸/苏氨酸激酶结构域。II型TGF-0受体与TGF-0结合， 之后I型TGF-0受体向该信号-传递复合物募集。II型受体的丝氨酸/苏氨酸激酶结构域 是组成型活性的，能在I型受体的所谓GS结构域中磷酸化该复合物中的丝氨酰残基。这 种磷酸化活化I型受体的激酶，此刻它本身能磷酸化细胞内信号介质-SMAD蛋白，从而 启动细胞内信号传递(总结于 Derynck(l997)BiochimBiophysActa 1333 F105-F150)。SMAD家族的蛋白用作所有TGF-3家族受体激酶的底物。迄今为止，已经 鉴定了 8种SMAD蛋白，其被分成3组(1)受体相关SMAD(R-SMAD)是TGF-3 受体激酶的直接底物(SMAD 1、2、3、5、8) ； (2)C0_SMAD，其在信号级联过程中与 R-SMAD结合(SMAD4)；禾P (3)抑制性SMAD (SMAD6、7)，其抑制上述SMAD蛋白 的活性。在各种不同的R-SMAD中，SMAD2和SMAD3是TGF- 3特异性信号介质。因此，在TGF-0信号级联中，SMAD2/SMAD3被I型TGF-0受体磷酸化，使得它们与 SMAD4结合。得到的SMAD2/SMAD3与SMAD4的复合物此刻能被转移到细胞核中， 在那里它能直接或者通过其它蛋白启动TGF-0调节的基因的转录(总结于ltoh(2000)Eur J Biochern 267 6954-6967 ； Shi (2003) Cell 113 685-700 中)。TGF- 3的功能谱是广泛的，取决于细胞类型和分化状态(Roberts (1990) Handbook of Experimental Pharmacology 419-472)。被 TGF- 3 影响的细胞功能包 括细胞凋亡、增殖、分化、运动和细胞粘附。因此，TGF-0在非常多种生物学过 程中发挥重要的作用。在胚胎发育过程中，它在形态发生的位点、特别是在具有上 皮-间质相互作用的区域被表达，在那里它诱导重要的分化过程(Pelton(4991)JCell Biol 115 1091-1105)。TGF-0在自我更新和维持干细胞的未分化状态中发挥关键 作用(Mishra(2005) Science310 68-71)。 此外，TGF-3还在免疫系统的调节中发 挥重要的功能。由于它尤其抑制淋巴细胞的增殖和限制组织巨噬细胞的活性，所以它 一般具有免疫抑制作用。因此，TGF-0使得炎性反应再消退，从而防止过度的免疫 反应(Bogdan (1993) Ann NY Acad Sci 685 713-739，总结于 Letterio (1998) Annu Rev Immunol 16 137-461中)。TGF- 3的另一个功能是调节细胞增殖。TGF- 3抑制 内皮、上皮和造血来源的细胞的生长，但促进间质来源的细胞的生长(Tucker(1984) Science 226 705-707，Shipley (1986) CancerRes 46 2068-2071，Shipley (1985) PNAS 82: 4147-4151)。TGF-0的另一个重要的功能是调节细胞粘附和细胞-细胞相互 作用。TGF-0通过诱导细胞外基质的蛋白(例如纤连蛋白和胶原蛋白)促进细胞 外基质的积累。此外，TGF-0减少基质-降解金属蛋白酶和金属蛋白酶抑制剂的 表达(Roberts (1990) Ann NV Acad Sci 580 225-232 ； Ignotn (1986) J Biol Chem 261 4337-4345 ； Overall (1989) J Biol Chem 264 1860-1869) ； Edwards (1987) EMBO J 6 1899-1904)。TGF-0的作用的光谱说明TGF-0在许多生理情况例如伤口愈合中和在病理过 程例如癌症和纤维化中起重要的作用。TGF-0是伤口愈合中的关键生长因子之一(总结 于 0' Kane (1997) Int J Biochem Cell Biol 29 79-89 中)。在肉芽形成阶段中，TGF-3
在损伤部位处从血小板中被释放。然后TGF-0调节它自己在巨噬细胞中的产生，诱导 其它生长因子的分泌，例如单核细胞的生长因子分泌。在伤口愈合过程中，最重要的功 能包括刺激炎性细胞趋化、合成细胞外基质和调节伤口愈合过程所涉及的所有重要细胞 类型的增殖、分化和基因表达。在病理条件下，这些TGF-3介导的作用、特别是调节细胞外基质(ECM)的产 生可导致皮肤的纤维化和疤痕(Border(1994)NEngl JMed331 1286-1292)。对于纤维化疾病、糖尿病性肾病和肾小球肾炎，已经证明TGF-3促进肾脏 细胞过度生长和细胞外基质的病理性蓄积。通过用抗TGF-0抗体处理阻断TGF-3 信号传导途径可防止肾小球膜基质的扩张、肾功能的进行性降低和减轻糖尿病动物的 已确定的糖尿病性肾小球病损伤(Border(1990)346 371-374，Yu(2004)Kindney Int 66 1774-1784，Fukasawah (2004) Kindney Int 65 63-74，Sharma (1996) Diabetes 45 522-530)。TGF-e在肝纤维化中也起重要作用。TGF-e刺激对于肝纤维化的发展必需的肝星形细胞(肝硬化的发展过程中细胞外基质的主要生产者)的活化。此处也已经证 明，TGF-3信号传导途径的阻断减少实验模型中的纤维化(Yata(2002)HepatOlOgy 35 1022-1030 ； Arias(2003)BMCGastroenterol 3 29)。TGF-3 在癌症的形成中也起关键作 用(总结于 Derynck(2001)Nature Genetics 29 117-129 ； Elliott(2005) J Clin One 23 2078-2093中)。在癌症发展的早期阶段，TGF-0对抗癌症的形成。这种肿瘤抑制作 用主要基于TGF-0抑制上皮细胞分裂的能力。相反，TGF-0在晚期肿瘤阶段促进癌症 生长和转移灶的形成。这可归因于大多数上皮性肿瘤对TGF-0的生长抑制作用产生抗 性，TGF-0同时通过其它机制支持癌症细胞的生长。这些机制包括促进血管生成、支持 肿瘤细胞避免免疫系统的控制功能的免疫抑制作用(免疫监视)以及促进转移灶的侵袭和 形成。肿瘤细胞的侵袭表型的形成对于转移灶的形成而言是首要的必要条件。TGF-3 通过它的调节细胞粘附、运动和细胞外基质形成的能力促进该过程。而且，TGF-日诱 导从细胞的上皮表型到侵袭间质表型的转化(上皮间质转化=EMT)。一些研究也证明 了 TGF-0在促进癌症生长中所发挥的重要作用，所述研究表明了强TGF-0表达与预 后不良之间的相关性。尤其是在患有前列腺癌、乳腺癌、肠癌和肺癌的患者中已发现 TGF-3 水平增加(Wikstr6m (1998) Prostate 37 19-29 ； Hasegawa (2001) Cancer 91 964-971 ； Friedman (1995), Cancer Epidemiol Biomarkers Prev.4 549-54)。由于上述TGF-0的癌症-促进作用，抑制TGF-0信号传导途径(例如通过 抑制TGF-0I型受体来抑制TGF-0信号传导途径)是可能的治疗观念。在大量的临 床前试验中已经证明阻断TGF-3信号传导途径确实抑制癌症生长。因此，用可溶的 TGF-0 II型受体进行治疗减少转基因小鼠中随着时间的推移发展成侵袭性乳腺癌的转移 灶的形成(Muraoka (2002) J Clinlnvest 109 1551-1559，Yang (2002) J Clin Invest 109 1607-1615)。表达有缺陷的TGF-3II型受体的肿瘤细胞系显示肿瘤和转移灶生长减少 (Oft (1998) Curr Biol 8 1243-1252，McEachern (2001) Int J Cancer 91 76-82，Yin (1999) Jclin Invest 103 197-206)。“特征在于TGF-3活性增加”的情况包括其中TGF-3合成被刺激以至于 TGF-0以增加的水平存在或者其中潜性TGF-0蛋白被不利地活化或被转化成活性 TGF-0蛋白或者其中TGF-0受体被上调或者其中TGF-0蛋白对疾病部位的细胞或细 胞外基质表现出结合增强的那些。因此，在各种情况中，“活性增加”指其中TGF-3 的生物活性不期望地高的任何情况，不管原因是什么。许多疾病与TGF-M过量产生有关。细胞内TGF-3信号传导途径的抑制剂对 纤维增殖性疾病而言是合适的治疗。具体而言，纤维增殖性疾病包括与TGF-0活性失 调有关的肾障碍和过度纤维化，包括肾小球肾炎(GN)，如肾小球膜增殖性GN、免疫性 GN和新月体性GN。其它肾病症包括糖尿病性肾病、肾间质性纤维化和接受环孢菌素的 移植患者的肾纤维化、以及HIV-相关性肾病。胶原血管障碍包括进行性系统性硬化病、 多肌炎、硬化性皮炎、皮肌炎、嗜酸细胞性筋膜炎(eosinophilic fasciitis)、硬斑病或与出 现雷诺综合征(Raynaud’ s syndrome)有关的那些。过度的TGF-0活性导致的肺纤维化 包括成人型呼吸窘迫综合征、特发性肺纤维化和经常与自身免疫性障碍(如系统性红斑 狼疮和硬化性皮炎)、化学接触或变态反应有关的间质性肺纤维化。另一种与纤维增殖特征有关的自身免疫性障碍是类风湿性关节炎。与纤维增殖性病症有关的眼病包括伴有增殖性玻璃体视网膜病变的视网膜复置 术、具有眼内晶状体植入的白内障摘除术和青光眼滤过术后，并且与TGF-0 1过度产生有关。可以将与TGF-0 1过度产生有关的纤维化疾病分成慢性病症如肾、肺和肝的纤 维化，以及更多的是急性病症如皮肤瘢痕形成和再狭窄(Chamberlain，J.Cardiovascular Drug Reviews, 19(4) 329-344)。如在患有侵袭性脑肿瘤或乳腺肿瘤的患者中看到的， 肿瘤细胞的TGF-0 1合成和分泌也能导致免疫抑制(Arteaga等人(1993) J.Clin.Invest.92 2569-2576)。小鼠中利什曼原虫感染的过程被TGF- ^ 1极大地改变(Barral_Netto等人 (1992) Science 257 545-547)。TGF-0 1使疾病加重，而TGF-0 1抗体阻碍遗传上易 感性小鼠的疾病的进展。施用TGF-0 1后遗传上有抗性的小鼠变得对利什曼原虫感染易 感。对细胞外基质沉积的深远影响已有综述(Rocco和Ziyadeh (1991)，Contemporary Issues in Nephrology v.23, Hormones, autocoids and thekidney.Jay Stein 编辑，Churchill Livingston, New Vork 第 391-410 页；Roberts 等人(1988) Rec.Prog.Hormone Res.44
157-197)，包括刺激细胞外基质组分的合成和抑制细胞外基质组分的降解。由于肾小球 的结构和过滤性质在很大程度上由肾小球膜决定，因此TGF-0 1对肾具有深远影响不足 为奇。增殖性肾小球肾炎(Border等人(1990)Kidney Int.37 689-695)和糖尿病性肾病 (Mauer等人(1984) J.Clin.Invest.74 1143-1155)中肾小球膜基质的蓄积是所述疾病的清 楚且显著的病理学特征。在人糖尿病性肾小球硬化(晚期神经病)中TGF-0 1水平升 高(Vamamolo 等人(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.90 1814-1818)。TGF-3 1 在许多动物模 型的肾纤维化的发生中是重要的介质(Phan等人(1990)Kidney Int.37 : 426 ； Okuda等人 (1990)J.Clin.Invest.86 453)。已经用针对 TGF-3 1 的抗血清(Border 等人(1990) Nature 346 371)以及用能与TGF-M结合的细胞外基质蛋白饰胶蛋白聚糖(Border等人(1992) Nature 360 361-363)在大鼠中证明了实验诱导的肾小球肾炎的抑制。过量的TGF-0 1导致皮肤瘢痕组织形成。被注射到大鼠的愈合伤口边缘的中和 TGF-0 1抗体已经显示出对瘢痕形成的抑制，但不干扰伤口愈合速度或伤口的张力强度 (Shah等人(1992)lancet 339 213-214)。同时血管生成减少、伤口处巨噬细胞和单核细 胞数量减少、瘢痕组织中排列紊乱的胶原纤维沉积的数量减少。TGF-0 1可能是由气囊血管成形术后动脉中平滑肌细胞增殖和细胞外基质的沉 积引起的动脉壁进行性变厚中的因子。再狭窄的动脉的直径可以被这种增厚减小90%， 由于大多数直径减小是由于细胞外基质而不是平滑肌细胞造成的，因此仅通过减少过度 的细胞外基质沉积使这些血管再打开至50%是可能的。在用TGF-0 1基因体内转染的 未受损的猪动脉中，基因表达与细胞外基质合成和增生有关(Nabel等人(1993)ProC.Natl. Acad.Sci USA 90 10759-10763)。TGF-3 1 诱导的增生不象 PDGF-BB 所诱导的增生 那样广泛，但是使用TGF-0 1转染子细胞外基质更广泛。在这种基因转移猪模型中， 细胞外基质沉积与FGF-1 (FGF的分泌形式)诱导的增生无关(Nabel(1993)Nature 362 844-846)。存在各种不同类型的癌症，其中肿瘤产生的TGF-0 1可能是有害的。用表达小鼠TGF-3 1的载体转染后，MATLyLu大鼠前列腺癌细胞(Steiner和Barrack(1992) Mol.Endocrinol 6 15-25)和 MCF-7 人乳腺癌细胞(Arteaga 等人(l"3)Cell Growth and Differ.4 193-201)变得更具致瘤性和转移性。TGF-0 1已经被与人前列腺癌和晚期肠癌 中的血管生成、转移和预后不良相关联(Wikstrom，P.等人(1988)Prostate 337 ； 19-29 ； Saito, H.等人(1999) Cancer 86 1455-1462)。在乳腺癌中，预后不良与 TGF-3 升 高有关(Dickson 等人(1987) Proc.Natl.Acad.Sci.USA 84 837-841 ； Kasid 等人(1987) Cancer Res.47 5733-5738 ； Daly 等人(1990) J.Cell Biochem.43 199-211 ； Barreltt-Lee 等人(1990)Br.J.Cancer 61 612-617 ； King 等人(1989) J.Steroid Biochem.34 133-138 ； Welch 等人(1990)Proc.Natl.Acad.Sci USA 87 7678-7682 ； Walker 等人(1992) Eur. J.Cancer 238 641-644)，他莫昔芬治疗对 TGF- 3 1 的诱导(Butta 等人(1992) Cancer Res.52 4261-4264)已经被与他莫昔芬治疗乳腺癌失败相关联(Thompson等人(1991) Br.J.Cancer 63 609-614)。抗TGF- 3 1抗体抑制无胸腺小鼠中MDA-231人乳腺癌细胞 的生长(Arteaga等人(1993) J.Clin.Invest.92 2569-2576)，该治疗与脾中天然杀伤细胞 活性的增加有关。在裸鼠中用潜性TGF-0 1转染的CHO细胞也显示出NK活性下降和 肿瘤生长增加(Wallick等人(1990)J.Exp.Med.l72 177-1784)。因此，乳腺肿瘤分泌的 TGF-0可引起内分泌免疫抑制。对于晚期乳腺癌患者而言，TGF-0 1的高血浆浓度表明 预后不良(Anscher等人(1993)N.Engl.J.Med.328 1592-1598)。在高剂量化疗和自体骨 髓移植之前具有高循环TGF-0的患者具有高的肝静脉阻塞性疾病(所有患者中15-50% 的死亡率高达50% )和特发性间质性肺炎(所有患者中40-60% )的风险。这些发现表 明l)TGF-3 1血浆水平升高可用于鉴别处于风险中的患者和2)TGF-0 1的减少可降低这 些用于乳腺癌患者的常规治疗的发病率和死亡率。许多恶性肿瘤细胞分泌转化生长因子(TGF-0)-—种强免疫抑制剂，这表明 TGF-3产生可能代表一种重要的肿瘤逃避宿主免疫监视机制。在荷瘤宿主中建立具有 中断的TGF-0信号传导途径的白细胞亚群提供了一种用于癌症免疫治疗的有效措施。 T细胞中具有中断的TGF-0信号传导途径的转基因动物模型能根除通常致命的过度表达 TGF-3 的淋巴瘤 EL4 (Gorelik 和 Flavell, (2001)Nature Medicine 7(10) 1118-1112)。 肿瘤细胞中TGF-0分泌的下调导致宿主中免疫原性的恢复，而T细胞对TGF-0的不敏 感导致分化和自身免疫加速，其中的因素可能被需要以便在耐受宿主中对抗自体抗原表 达肿瘤。根据他们的CD4/CD8T细胞计数，TGF-3的免疫抑制作用也参与到免疫应答 比预期低的 HIV 患者亚组中(Garba 等人，J.Immunology (2002) 168 2247-2254)。中和 TGF-0的抗体能逆转培养物中的该作用，这表明TGF-0信号传导途径抑制剂可能适合 于逆转这种HIV患者亚组中存在的免疫抑制。在癌发生的最早阶段，TGF-0 1可作为强肿瘤抑制剂起作用并且可介导一些 化学预防剂的作用。在恶性肿瘤的发生和进展过程中的某个点，肿瘤细胞似乎逃离 TGF-0-依赖性生长抑制，同时在微环境中出现生物活性的TGF-日。已经在角质形成细 胞的过度表达TGF-3的转基因系统中最清楚地阐明了 TGF-3的肿瘤抑制/肿瘤促进双 重作用。尽管转基因系统对良性皮肤损伤的形成更有抵抗力，但是转基因系统中转移性 转化的速度大大增加(Cui等人，(1996) Cell 86 (4) 531-42)。原发性肿瘤中恶性肿瘤细 胞的TGF-0 1产生似乎随着肿瘤进展的阶段推进而增加。许多主要的上皮癌研究表明人癌症的TGF-0产生增加在肿瘤进展过程中作为较迟的事件出现。而且，这种肿瘤相关性 TGF- 0使肿瘤细胞具有选择性优势并加速肿瘤进展。TGF- 0对细胞-细胞和细胞-间 质相互作用的影响导致更大的侵袭和转移倾向。肿瘤相关性TGF-0可使得肿瘤细胞逃避 免疫监视，因为它是活化淋巴细胞克隆扩增的强抑制剂。还已经证明TGF-0抑制血管抑 素的产生。癌症治疗方式如放射治疗和化学治疗诱导肿瘤中活化TGF-0的产生，从而 选择对TGF-0生长抑制作用具有抗性的恶性肿瘤细胞向外生长。因此，这些抗癌治疗 增加风险并且促进具有增加的生长和侵袭的肿瘤的发展。在这种情况中，靶向于TGF-3 介导的信号转导的物质可能是非常有效的治疗策略。已经证明肿瘤细胞对TGF-0的抗性 否定了许多放射治疗和化学治疗的细胞毒性作用，间质中TGF-0的治疗依赖性活化甚至 可能是有害的，因为它使微环境更有助于肿瘤进展并促成导致纤维化的组织损伤。开发 TGF-0信号转导抑制剂可能有益于单独使用的和与其它疗法组合使用的晚期癌症治疗。所述化合物适合用于通过给患者施用化合物来抑制需要它们的患者的TGF-3 来治疗癌症和其它受TGF-0影响的病症。TGF-0还适合用于对抗动脉粥样硬 化(T.A.McCaffrey TGF- 3 s and TGF- 3 Receptors inAtherosclerosis Cytokine and Growth Factor Reviews 2000, 11，103-114)和阿尔茨海默病(Masliah，E. ； Ho, G.； Wyss-Coray，T. Functional Role ofTGF- 3 in Alzheimer' s Disease Microvascular Injury Lessons fromTransgenic Mice Neurochemistry International 2001, 39, 393—400)。已经发现本发明的化合物和其盐具有非常有价值的药理学性质，同时耐受性良 好。具体而言，它们显示出TGF-0受体I激酶-抑制性质。本发明的化合物优选表现出有利的生物学活性，能容易地在基于酶的测定例如 本文所述的测定中证明这种生物学活性。在这类基于酶的测定中，本发明的化合物优选 表现出并引起抑制作用，该抑制作用通常是由在合适范围内、优选在微摩尔范围内并且 更优选在纳摩尔范围内的IC5(I值证明的。如本文所讨论的，这些信号传导途径与多种疾病相关。因此，本发明的化合物 通过与一种或多种所述信号传导途径相互作用而用于预防和/或治疗依赖于所述信号传 导途径的疾病。因此，本发明涉及作为本文所述的信号传导途径的促进剂或抑制剂、优选作为 抑制剂的本发明的化合物。因此，本发明优选涉及作为TGF0信号传导途径的促进剂或 抑制剂、优选作为抑制剂的本发明的化合物。本发明还涉及一种或多种本发明的化合物在治疗和/或预防由TGF0活性增加 引起、介导和/或传播的疾病、优选本文所述的疾病中的用途。因此，本发明涉及作为治疗和/或预防所述疾病的药物和/或药物活性化合物的 本发明的化合物和本发明的化合物在制备用于治疗和/或预防所述疾病的药物中的用途 以及用于治疗所述疾病的方法，所述方法包括给需要这类施用的患者施用一种或多种本 发明的化合物。主体或患者可以属于任何哺乳动物种属，例如灵长类动物，特别是人；啮齿类 动物，包括小鼠、大鼠和仓鼠；兔；马、牛、狗、猫等。动物模型对实验研究而言是重 要的，其为人类疾病的治疗提供了模型。可以用体外测试来测定特定细胞对用本发明的化合物进行的治疗的敏感性。通常将细胞培养物与各种不同浓度的本发明的化合物混合足以使活性剂诱导细胞死亡或抑 制迁移的一段时间，通常为约1小时至1周。可以用来自活组织检查样品的培养的细胞 来进行体外测试。然后对处理后存活的细胞进行计数。剂量根据所用的特定化合物、特定疾病、患者状态等变化。治疗剂量通常十分 充分地减少靶组织中不期望的细胞群，同时维持患者的生存力。一般而言，治疗持续至 已经出现细胞负荷量的大幅度降低，例如细胞负荷量降低至少约50%，并且可以持续至 体内基本上再也检测不到不期望的细胞。对于信号转导途径的鉴定以及各种信号转导途径之间的相互作用的检测而言， 许多科学家已经开发了适合的模型或模型系统，例如细胞培养模型(例如Khwaja等人， EMBO，1997，16，2783-93)和转基因动物模型(例如 White 等人，Oncogene，2001， 20，7064-7072)。为了确定信号转导级联中的某些阶段，可以理由相互作用的化合物以 调控信号(例如Stephens等人，Biochemical J.，2000, 351，95-105)。本发明的化合物 也能在动物和/或细胞培养模型中或在本申请中所提及的临床疾病中用作检测激酶依赖 性信号转导途径的试剂。激酶活性的测定是本领域技术人员公知的一种技术。文献(例如 Campos-Gonzalez, R.和 Glenney，Jr., J.R.1992, J.Biol.Chem.267,第 14535 页)描述了 使用底物例如组蛋白(例如Alessi等人，FEBS Lett. 1996，399，3，第333-338页)或碱 性髓磷脂蛋白测定激酶活性的通用试验系统。对于激酶抑制剂的鉴定而言，有多种测定系统可用。在闪烁亲近测定法法(Sorg 等人，J.of.Biomolecular Screening，2002，7，11-19)和快速板测定法中，用 yATP 测 量作为底物的蛋白或肽的放射性磷酸化。在存在抑制性化合物的情况下，可检测到放射 性信号降低或者根本检测不到放射性信号。此外，均勻的时间分辨荧光共振能量转移 (HTR-FRET)和荧光偏振(FP)技术也是适合的测定方法(Sills等人，J.of Biomolecular Screening, 2002，191—214)。其它非放射性ELISA测定方法使用特异性磷酸_抗体(磷酸-AB)。该磷酸_AB 仅与磷酸化底物结合。可以使用过氧化物酶_轭合的抗_绵羊第二抗体通过化学发光来 检测这种结合(Ross等人，2002，BiochemJ.,即将出版，原稿BJ20020786)。
现有技术W02007/084560描述了用于抑制TNF- a、PDE4和B-RAF的其它噻吩并嘧啶类。发明_既述本发明涉及式I化合物
其中R1是苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、咪唑并[1，2a]吡啶、喹啉基、异 喹啉基或呋喃基，其各自是未被取代的或者被A和/或Hal单-、二-或三-取代，或者 是被A和/或Hal单-、二-或三-取代的吡啶基，R2 可以是 H、Alk、Het1、Cyc、AlkNH2、AlkNHA、AlkNAA，、AlkOH、 AlkOA、AlkCyc、AlkHet1、AlkOAlkOH、AlkO (CH2) mNAA'、AlkCHOH (CH2)mOH> AlkO (CH2) Jiet1、AlkAr 或 AlkO (CH2) mAr，X可以是单键、NH、S或S02，Alk可以是具有1至6个C原子的亚烷基，其中1至4个H原子可以被F、C1和 /或& 代替，Cyc可以是具有3至7个C原子的环烷基，其中1至4个H原子可以被A、Hal、 OH和/或OA代替，Het1可以是具有1至4个N、O和/或S原子的单环或二环的饱和的、不饱和的 或芳族的杂环，其可以被A、OH、OA、Hal、S02A和/或=O (羰基氧)单_、二-或 三-取代，Ar可以是苯基，其是未被取代的或者被A、OH、OA、Hal、S02NH2、S02NA 和/或SO2NAA，单-、二-或三-取代，A、A’可以各自彼此独立地是具有1-10个C原子的直链或支链烷基，其中1、
2或3个CH2基团可以彼此独立地被-CH = CH-和/或-C三C-基团代替和/或1_5个 H原子可以被F、C1和/或Br代替，Hal 可以是 F、CI、Br 或 I，m 可以是 1、2、3 或 4，以及其可药用的衍生物、盐、溶剂合物、互变异构体和立体异构体，包括它们 所有比例的混合物。本发明还涉及这些化合物的旋光活性形式(立体异构体)、对映体、外消旋物、 非对映体以及水合物和溶剂合物。术语化合物的溶剂合物指的是由于惰性溶剂分子与化 合物之间的相互吸引力而形成的溶剂分子与化合物的加合物。溶剂合物有例如单水合物 或二水合物或醇化物。可药用的衍生物指的是例如本发明的化合物的盐，还有所谓的前药化合物。前药衍生物指的是已经通过例如烷基或酰基、糖或寡肽修饰并且在生物体内迅 速裂解成本发明的有效化合物的本发明的化合物。还包括本发明的化合物的生物可降解 的聚合物衍生物，例如在InU.Pharm.115，61-67(1995)中所述的那些。表述“有效量”表示在组织、系统、动物或人中导致研究人员或医师所寻求或 期望的生物学或医学反应的药物或药物活性化合物的量。此外，表述“治疗有效量”表 示与没有接受该量的相应个体相比具有下列结果的量疾病、症状、病症、不适、障碍 或副作用的治疗得到改善、被治愈、被预防或被消除，或者还有疾病、不适或障碍的进 展被减少。表述“治疗有效量”还包括有效增强正常生理学功能的量。本发明还涉及本发明的化合物的混合物，例如两种非对映体的混合物，例如比 例为 1 1、1 2、1 3、1 4、1 5、1 10、1 100 或 1 1000 的两种非对映体的混合物。特别优选立体异构化合物的混合物。本发明涉及式I的化合物及其盐和制备权利要求1至7的式I化合物及其可药用 的衍生物、溶剂合物、盐、互变异构体和立体异构体的方法，其特征在于为了制备式I化合物，将式II的化合物
权利要求
1.式I化合物
2.根据权利要求1所述的化合物， 其中R1表示苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、咪唑并[1，2-a]吡啶、喹啉基或呋 喃基，其各自是未被取代的或者被A和/或Hal单-或二-取代，或者表示被A和/或 Hal单-或二-取代的吡啶基，以及其可药用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
3.根据权利要求1或2所述的化合物， 其中R2 表示 H、Alk、Het1、Cyc> AlkNH2> AlkNHA、AlkNAA'、AlkOH> AlkOA、 AlkHet1 > AlkOAlkOH > AlkO(CH2)mNAA'、AlkO (CH2) mHet\ AlkAr 或 AlkO(CH2) mAr，以及其可药用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
4.根据权利要求1至3中一项或多项所述的化合物，其中Alk可以是亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚戊基或亚己基，以及其可药用的衍 生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
5.根据权利要求1至4中一项或多项所述的化合物， 其中Cyc表示环丙烷、环丁烷、环戊烷或环己烷，其各自可以是未被取代的或者被OH或 OA单取代，以及其可药用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
6.根据权利要求1至5中一项或多项所述的化合物， 其中Het1表示具有1至2个N和/或O原子的单环的饱和的杂环，其可以被A和/或= 0(羰基氧)单-或二-取代，以及其可药用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
7.根据权利要求1至6中一项或多项所述的化合物， 其中Ar表示苯基，其被S02NH2、SO2NA或SO2NAA'单取代，以及其可药用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
8.根据权利要求1至7中一项或多项所述的化合物， 其中A、A’表示具有1-6个C原子的直链或支链烷基，其中1或2个CH2基团可以被-CH =CH-和/或-C ε C-基团代替和/或1-5个H原子可以被F和/或Cl代替，以及其可药用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
9.根据权利要求1至8中一项或多项所述的化合物， 其中R1表示苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、咪唑并[1，2-a]吡啶、喹啉基或呋 喃基，其各自是未被取代的或者被A和/或Hal单-或二-取代，或者表示被A和/或 Hal单-或二-取代的吡啶基，R2 表示 H、Alk、Het1、Cyc> AlkNH2> AlkNHA、AlkNAA'、AlkOH> AlkOA、 AlkHet1 > AlkOAlkOH > AlkO(CH2)mNAA'、AlkO (CH2) mHet\ AlkAr 或 AlkO(CH2) mAr，Alk表示亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚戊基或亚己基，Cyc表示环丙烷、环丁烷、环戊烷或环己烷，其可以是未被取代的或者被OH单取代，Het1表示具有1至2个N和/或O原子的单环的饱和的杂环，其可以被A和/或= 0(羰基氧)单-或二-取代，Ar表示苯基，其是未被取代的或者被S02NH2、SO2NA或SO2NAA'单取代， A、A’表示具有1-6个C原子的直链或支链烷基，其中1或2个CH2基团可以被-CH =CH-和/或-C ε C-基团代替和/或1-5个H原子可以被F和/或Cl代替， Hal 表示 F、Cl、Br 或 I， m 表示 1、2、3、4, η 表示 O、1、2、3、4，以及其可药用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
10.选自下组的化合物·5_氨基-2-环丙基-4- (5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“Al” )，·5_氨基-2-环丙基-4- (6-甲基吡啶-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A2，，)，·5-氨基-4-苯并呋喃-2-基-2-环丙基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A3” )， 5-氨基-2-环丙基-4-(4，5- 二甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲酰胺 ("A4，，)，·5-氨基-2-环丙基-4-呋喃-2-基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A5” )， 5-氨基-2-环丙基-4-咪唑并[1，2-a]吡啶_2_基噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲酰胺 ("A6，，)，·5-氨基-4-苯并噻唑-2-基-2-环丙基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A7” )， 5-氨基-4-呋喃-2-基-2-甲硫基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A8” )， 5-氨基-4-苯并呋喃-2-基-2-甲硫基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A9” )， 5_氨基-4- (5-甲基呋喃-2-基)-2-甲硫基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A10，，)，·2，5-二氨基-4-呋喃-2-基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“All”)， 2，5-二氨基-4-(5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“Alia”)， 2，5-二氨基-4-苯并呋喃-2-基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A12”)， 5_氨基-4-苯并呋喃-2-基-2-吡啶-3-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A13，，)，·5_氨基-4- (6-甲基吡啶-2-基)-2-吡啶-3-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A14，，)，·2，5- 二氨基-4-喹啉-6-基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A15” )， 5-氨基-2-(3，5- 二甲基吡唑-1-基)-4_呋喃-2-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰 胺(“A16，，)，·2，5-二氨基-4-(5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺(“A17” )，5_氨基-4- (6-甲基吡啶-2-基)-2-吡啶-2-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A18，，)，5-氨基-4- (5-甲基呋喃-2-基)-2-吡唑-1-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A19，，)，2，5- 二氨基-4- (6-甲基吡啶-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺(“A20” )， 5_氨基-4-苯并呋喃-2-基-2-吗啉-4-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A21，，)，2，5- 二氨基-4- (4，5- 二甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A22，，)，5-氨基-4- (4，5- 二甲基呋喃-2-基)-2-吡啶-2-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰 胺(“A23，，)，5_氨基-4-苯并呋喃-2-基-2-吡啶-2-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A24，，)，5-氨基-2-叔丁基-4-呋喃-2-基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A25” )， 5_氨基-2-叔丁基-4- (5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A26，，)，5-氨基-4-苯并呋喃-2-基-2-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A27” )， 5-氨基-4-呋喃-2-基-2-甲基氨基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A28” )， 5_氨基-4-苯并呋喃-2-基-2-甲基氨基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺 (“A29，，)，5_氨基_4-(4，5-二甲基呋喃-2-基)-2_甲基噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A30，，)，5-氨基-4-呋喃-2-基-2-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A31 ” )， 5-氨基-2-甲磺酰基-4-(5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A32，，)，5_氨基-2-叔丁基-4- (6-甲基吡啶-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A33，，)，5_氨基-2-甲基氨基-4-(5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺 (“A34，，)，5_氨基-2-(3-二甲基氨基丙基氨基)-4-(5_甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3_d]嘧 啶-6-甲酰胺(“A35”)，5-氨基-2-(4-乙磺酰基哌嗪-1-基)-4-(5_甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3_d]嘧 啶-6-甲酰胺(“A36，，)，5-氨基-2- (3-羟基丙基氨基)-4- (6-甲基吡啶-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲 酰胺(“A37，，)，5_氨基-2-(4-二甲基氨基丁基氨基)-4-(5_甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3_d]嘧 啶-6-甲酰胺(“A38，，)，5_氨基-4-苯并噻唑-2-基-2-甲基氨基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺 (“A39，，)，5_氨基-4-苯并呋喃-2-基-2-(2-二乙基氨基乙基氨基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲 酰胺(“A40”)，5_氨基-4-苯并[b]噻吩-2-基-2-吗啉-4-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A41，，)，2-烯丙基氨基-5-氨基-4-(5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A42，，)，5_氨基_4-(4，5-二甲基呋喃-2-基)-2-(3，5-二甲基吡唑-1-基)噻吩并[2，3-d] 嘧啶-6-甲酰胺(“A43”)，5_氨基-2-(3-苄氧基丙基氨基)-4-(5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲 酰胺(“A44”)，5_氨基-4-(5-甲基呋喃-2-基)-2-[3-(4_甲基哌嗪基)丙基氨基]噻吩并[2， 3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A45”)，5-氨基-2- (3-羟基丙基氨基)-4- (5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲 酰胺(“A46”)，5_氨基-2-[3-(2-二甲基氨基乙氧基)丙基氨基]-4-(5-甲基呋喃-2-基)噻吩并 [2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A47” )，5-氨基-4-呋喃-2-基-2-甲磺酰基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A48” )，2-烯丙基氨基-5-氨基-4-(6-甲基吡啶-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A50，，)，5_氨基-4- (5-甲基呋喃-2-基)-2-吗啉-4-基噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A51，，)，5-氨基-4-(6-甲基吡啶-2-基)-2_丙-2-炔基氨基噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲酰 胺(“A52，，)，5_氨基-4- (6-甲基吡啶-2-基)-2-吗啉-4-基噻吩并[2，3_d]嘧啶-6-甲酰胺 (“A53，，)，5_氨基-2-(3-苄氧基丙基氨基)-4-(6-甲基吡啶-2-基)噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲 酰胺(“A54”)，5_氨基-2-环丙基-4-(5-氟吡啶-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A55，，)，5-氨基-2-(2-氰基乙基氨基)-4-(6-甲基吡啶-2-基)噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲 酰胺(“A56” )和5_氨基-4-(5-甲基呋喃-2-基)-2-(2_吗啉-4-基乙基氨基)噻吩并[2，3_d]嘧 啶-6-甲酰胺(“A57”)，以及其可药用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
11.制备权利要求1至10所述的式I化合物以及其可药用的衍生物、盐、溶剂合物、 互变异构体和立体异构体的方法，其特征在于为了制备式I化合物，将式II的化合物
12.药物，其包含至少一种权利要求1至10中一项或多项所述的化合物和/或其可药 用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物，并任选包含赋 形剂和/或辅料。
13.权利要求1至10中一项或多项所述的化合物以及其可药用的衍生物、盐、溶剂合 物、互变异构体和立体异构体、包括它们所有比例的混合物在制备药物中的用途，所述 药物用于治疗和/或对抗癌症、肿瘤生长、转移生长、纤维化、再狭窄、HIV感染、阿尔 茨海默病、动脉粥样硬化和/或用于促进伤口愈合。
14.根据权利要求13所述的用途，其中所述肿瘤选自鳞状上皮肿瘤、膀胱肿瘤、 胃肿瘤、肾肿瘤、头颈肿瘤、食管肿瘤、宫颈肿瘤、甲状腺肿瘤、肠肿瘤、肝肿瘤、脑 肿瘤、前列腺肿瘤、生殖泌尿道肿瘤、淋巴系统肿瘤、胃肿瘤、喉肿瘤、肺肿瘤、肺腺 癌、小细胞肺癌、胰腺癌、成胶质细胞瘤、结肠癌、乳腺癌、血液和免疫系统肿瘤、急 性髓性白血病、慢性髓性白血病、急性淋巴性白血病、慢性淋巴性白血病。
15.权利要求10所述的化合物和/或其生理学上可接受的盐和溶剂合物在制备用于治 疗实体瘤的药物中的用途，其中治疗有效量的式I化合物与选自下组的化合物组合施用 1)雌激素受体调节剂，2)雄激素受体调节剂，3)类视色素受体调节剂，4)细胞毒物质， 5)抗增殖剂，6)异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，7)HMG-CoA还原酶抑制剂，8)HIV蛋白 酶抑制剂，9)逆转录酶抑制剂和10)其它血管生成抑制剂。
16.权利要求10所述的化合物和/或其生理学上可接受的盐和溶剂合物在制备用于治 疗实体瘤的药物中的用途，其中治疗有效量的式I化合物与放射治疗和选自下组的化合物 组合施用1)雌激素受体调节剂，2)雄激素受体调节剂，3)类视色素受体调节剂，4)细 胞毒物质，5)抗增殖剂，6)异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，7)HMG-CoA还原酶抑制齐U， 8)HIV蛋白酶抑制剂，9)逆转录酶抑制剂和10)其它血管生成抑制剂。
17.药物，其包含至少一种权利要求1至10中一项或多项所述的化合物和/或其可药 用的衍生物、溶剂合物和立体异构体，包括它们所有比例的混合物，和至少一种另外的 药物活性化合物。
18.套药包(药盒)，其由以下的独立包装组成(a)有效量的权利要求1至10中一项或多项所述的式I化合物和/或其可药用的衍生 物、溶剂合物和立体异构体，包括它们所有比例的混合物； 和(b)有效量的另外的药物活性化合物。
全文摘要
式(I)的新的噻吩并嘧啶类是TGF-β受体激酶抑制剂，尤其是可用于治疗肿瘤，其中R1、R2和X具有权利要求1中所示的含义。
文档编号A61P31/00GK102015724SQ200980112245
公开日2011年4月13日 申请日期2009年3月23日 优先权日2008年4月9日
发明者C·阿门特, F·岑克, G·赫尔策曼, H·格雷纳尔 申请人:默克专利有限公司
噻吩并嘧啶类
背景技术：
本发明的目的是发现具有有价值的性质的新化合物，特别是能用于制备药物的 化合物。本发明涉及化合物和化合物的用途，其中激酶、特别是TGF-0受体激酶对信号 转导的抑制、调节和/或调控发挥作用，本发明还涉及包含这些化合物的药物组合物和 这些化合物用于治疗激酶诱导的疾病的用途。转化生长因子0是TGF-0超家族(一族高度保守的多效生长因子)的原型， 其在胚胎发育和成年生物中发挥重要的功能。在哺乳动物中，已经鉴定了 TGF-0的三 种同工型(TGFM、2 和 3)，TGF-3 1 是最常见的同工型(Kingsley (1994) Genes Dev 8 133-146)。TGF- ^ 3例如仅在间质细胞中被表达，而TGF- ^ 1见于间质细胞和上皮细胞 中。TGF-0作为前蛋白原被合成并以无活性形式被释放到细胞外基质(DerynCk(1985) Nature 316 701-705 ； Bottinger(1996)PNAS 93 5877-5882)。除 了 被裂解开的原区 (proregion)(其也被称为潜性相关肽(latency associated pepetide，LAP),保持与成熟区的 联系)之外，潜性TGF-3结合蛋白的4种同工型之一(LTBP 1-4)也可与TGF-3结合 (Gentry (1988) Mol Cell Biol 8 4162-4168，Munger(1997)Kindey Int 51 1376-1382)。 对于TGF-0的生物学作用的出现而言必需的无活性复合物的活化还没有被完全阐明。 然而，蛋白酶解加工、例如纤溶酶、血浆转谷氨酰胺酶或者血小板反应蛋白的蛋白酶解 加工当然是必需的(Munger(1997)Kindey lnt 51 1376-1382)。活化的配体TGF-3通 过膜上的三种TGF-0受体介导它的生物学作用，所述三种TGF-0受体是被广泛表 达的I型和II型受体以及III型受体0聚糖和内皮糖蛋白，后者仅在内皮细胞中被表 达(Gougos(1990)J Biol Chem 264 8361-8364，Loeps-Casillas (1994) J Cell Biol 124 557-568)。两种III型TGF-3受体都缺少帮助信号传递到细胞中的细胞内激酶结构 域。由于III型TGF-0受体以高亲和性与所有三种TGF-0同工型结合且II型TGF-3 受体对于与III型受体结合的配体也具有较高的亲和性，生物学功能被认为在于I型和 II 型 TGF-3 受体的配体的可利用性的调节(Lastres(1996)J Cell Biol 133 1109-1121 ； Lopes-Casillas(1993)Cell 73 1435-1344)。在胞质区域中，结构密切相关的I型和II型受 体具有负责信号传递的丝氨酸/苏氨酸激酶结构域。II型TGF-0受体与TGF-0结合， 之后I型TGF-0受体向该信号-传递复合物募集。II型受体的丝氨酸/苏氨酸激酶结构域 是组成型活性的，能在I型受体的所谓GS结构域中磷酸化该复合物中的丝氨酰残基。这 种磷酸化活化I型受体的激酶，此刻它本身能磷酸化细胞内信号介质-SMAD蛋白，从而 启动细胞内信号传递(总结于 Derynck(l997)BiochimBiophysActa 1333 F105-F150)。SMAD家族的蛋白用作所有TGF-3家族受体激酶的底物。迄今为止，已经 鉴定了 8种SMAD蛋白，其被分成3组(1)受体相关SMAD(R-SMAD)是TGF-3 受体激酶的直接底物(SMAD 1、2、3、5、8) ； (2)C0_SMAD，其在信号级联过程中与 R-SMAD结合(SMAD4)；禾P (3)抑制性SMAD (SMAD6、7)，其抑制上述SMAD蛋白 的活性。在各种不同的R-SMAD中，SMAD2和SMAD3是TGF- 3特异性信号介质。因此，在TGF-0信号级联中，SMAD2/SMAD3被I型TGF-0受体磷酸化，使得它们与 SMAD4结合。得到的SMAD2/SMAD3与SMAD4的复合物此刻能被转移到细胞核中， 在那里它能直接或者通过其它蛋白启动TGF-0调节的基因的转录(总结于ltoh(2000)Eur J Biochern 267 6954-6967 ； Shi (2003) Cell 113 685-700 中)。TGF- 3的功能谱是广泛的，取决于细胞类型和分化状态(Roberts (1990) Handbook of Experimental Pharmacology 419-472)。被 TGF- 3 影响的细胞功能包 括细胞凋亡、增殖、分化、运动和细胞粘附。因此，TGF-0在非常多种生物学过 程中发挥重要的作用。在胚胎发育过程中，它在形态发生的位点、特别是在具有上 皮-间质相互作用的区域被表达，在那里它诱导重要的分化过程(Pelton(4991)JCell Biol 115 1091-1105)。TGF-0在自我更新和维持干细胞的未分化状态中发挥关键 作用(Mishra(2005) Science310 68-71)。 此外，TGF-3还在免疫系统的调节中发 挥重要的功能。由于它尤其抑制淋巴细胞的增殖和限制组织巨噬细胞的活性，所以它 一般具有免疫抑制作用。因此，TGF-0使得炎性反应再消退，从而防止过度的免疫 反应(Bogdan (1993) Ann NY Acad Sci 685 713-739，总结于 Letterio (1998) Annu Rev Immunol 16 137-461中)。TGF- 3的另一个功能是调节细胞增殖。TGF- 3抑制 内皮、上皮和造血来源的细胞的生长，但促进间质来源的细胞的生长(Tucker(1984) Science 226 705-707，Shipley (1986) CancerRes 46 2068-2071，Shipley (1985) PNAS 82: 4147-4151)。TGF-0的另一个重要的功能是调节细胞粘附和细胞-细胞相互 作用。TGF-0通过诱导细胞外基质的蛋白(例如纤连蛋白和胶原蛋白)促进细胞 外基质的积累。此外，TGF-0减少基质-降解金属蛋白酶和金属蛋白酶抑制剂的 表达(Roberts (1990) Ann NV Acad Sci 580 225-232 ； Ignotn (1986) J Biol Chem 261 4337-4345 ； Overall (1989) J Biol Chem 264 1860-1869) ； Edwards (1987) EMBO J 6 1899-1904)。TGF-0的作用的光谱说明TGF-0在许多生理情况例如伤口愈合中和在病理过 程例如癌症和纤维化中起重要的作用。TGF-0是伤口愈合中的关键生长因子之一(总结 于 0' Kane (1997) Int J Biochem Cell Biol 29 79-89 中)。在肉芽形成阶段中，TGF-3
在损伤部位处从血小板中被释放。然后TGF-0调节它自己在巨噬细胞中的产生，诱导 其它生长因子的分泌，例如单核细胞的生长因子分泌。在伤口愈合过程中，最重要的功 能包括刺激炎性细胞趋化、合成细胞外基质和调节伤口愈合过程所涉及的所有重要细胞 类型的增殖、分化和基因表达。在病理条件下，这些TGF-3介导的作用、特别是调节细胞外基质(ECM)的产 生可导致皮肤的纤维化和疤痕(Border(1994)NEngl JMed331 1286-1292)。对于纤维化疾病、糖尿病性肾病和肾小球肾炎，已经证明TGF-3促进肾脏 细胞过度生长和细胞外基质的病理性蓄积。通过用抗TGF-0抗体处理阻断TGF-3 信号传导途径可防止肾小球膜基质的扩张、肾功能的进行性降低和减轻糖尿病动物的 已确定的糖尿病性肾小球病损伤(Border(1990)346 371-374，Yu(2004)Kindney Int 66 1774-1784，Fukasawah (2004) Kindney Int 65 63-74，Sharma (1996) Diabetes 45 522-530)。TGF-e在肝纤维化中也起重要作用。TGF-e刺激对于肝纤维化的发展必需的肝星形细胞(肝硬化的发展过程中细胞外基质的主要生产者)的活化。此处也已经证 明，TGF-3信号传导途径的阻断减少实验模型中的纤维化(Yata(2002)HepatOlOgy 35 1022-1030 ； Arias(2003)BMCGastroenterol 3 29)。TGF-3 在癌症的形成中也起关键作 用(总结于 Derynck(2001)Nature Genetics 29 117-129 ； Elliott(2005) J Clin One 23 2078-2093中)。在癌症发展的早期阶段，TGF-0对抗癌症的形成。这种肿瘤抑制作 用主要基于TGF-0抑制上皮细胞分裂的能力。相反，TGF-0在晚期肿瘤阶段促进癌症 生长和转移灶的形成。这可归因于大多数上皮性肿瘤对TGF-0的生长抑制作用产生抗 性，TGF-0同时通过其它机制支持癌症细胞的生长。这些机制包括促进血管生成、支持 肿瘤细胞避免免疫系统的控制功能的免疫抑制作用(免疫监视)以及促进转移灶的侵袭和 形成。肿瘤细胞的侵袭表型的形成对于转移灶的形成而言是首要的必要条件。TGF-3 通过它的调节细胞粘附、运动和细胞外基质形成的能力促进该过程。而且，TGF-日诱 导从细胞的上皮表型到侵袭间质表型的转化(上皮间质转化=EMT)。一些研究也证明 了 TGF-0在促进癌症生长中所发挥的重要作用，所述研究表明了强TGF-0表达与预 后不良之间的相关性。尤其是在患有前列腺癌、乳腺癌、肠癌和肺癌的患者中已发现 TGF-3 水平增加(Wikstr6m (1998) Prostate 37 19-29 ； Hasegawa (2001) Cancer 91 964-971 ； Friedman (1995), Cancer Epidemiol Biomarkers Prev.4 549-54)。由于上述TGF-0的癌症-促进作用，抑制TGF-0信号传导途径(例如通过 抑制TGF-0I型受体来抑制TGF-0信号传导途径)是可能的治疗观念。在大量的临 床前试验中已经证明阻断TGF-3信号传导途径确实抑制癌症生长。因此，用可溶的 TGF-0 II型受体进行治疗减少转基因小鼠中随着时间的推移发展成侵袭性乳腺癌的转移 灶的形成(Muraoka (2002) J Clinlnvest 109 1551-1559，Yang (2002) J Clin Invest 109 1607-1615)。表达有缺陷的TGF-3II型受体的肿瘤细胞系显示肿瘤和转移灶生长减少 (Oft (1998) Curr Biol 8 1243-1252，McEachern (2001) Int J Cancer 91 76-82，Yin (1999) Jclin Invest 103 197-206)。“特征在于TGF-3活性增加”的情况包括其中TGF-3合成被刺激以至于 TGF-0以增加的水平存在或者其中潜性TGF-0蛋白被不利地活化或被转化成活性 TGF-0蛋白或者其中TGF-0受体被上调或者其中TGF-0蛋白对疾病部位的细胞或细 胞外基质表现出结合增强的那些。因此，在各种情况中，“活性增加”指其中TGF-3 的生物活性不期望地高的任何情况，不管原因是什么。许多疾病与TGF-M过量产生有关。细胞内TGF-3信号传导途径的抑制剂对 纤维增殖性疾病而言是合适的治疗。具体而言，纤维增殖性疾病包括与TGF-0活性失 调有关的肾障碍和过度纤维化，包括肾小球肾炎(GN)，如肾小球膜增殖性GN、免疫性 GN和新月体性GN。其它肾病症包括糖尿病性肾病、肾间质性纤维化和接受环孢菌素的 移植患者的肾纤维化、以及HIV-相关性肾病。胶原血管障碍包括进行性系统性硬化病、 多肌炎、硬化性皮炎、皮肌炎、嗜酸细胞性筋膜炎(eosinophilic fasciitis)、硬斑病或与出 现雷诺综合征(Raynaud’ s syndrome)有关的那些。过度的TGF-0活性导致的肺纤维化 包括成人型呼吸窘迫综合征、特发性肺纤维化和经常与自身免疫性障碍(如系统性红斑 狼疮和硬化性皮炎)、化学接触或变态反应有关的间质性肺纤维化。另一种与纤维增殖特征有关的自身免疫性障碍是类风湿性关节炎。与纤维增殖性病症有关的眼病包括伴有增殖性玻璃体视网膜病变的视网膜复置 术、具有眼内晶状体植入的白内障摘除术和青光眼滤过术后，并且与TGF-0 1过度产生有关。可以将与TGF-0 1过度产生有关的纤维化疾病分成慢性病症如肾、肺和肝的纤 维化，以及更多的是急性病症如皮肤瘢痕形成和再狭窄(Chamberlain，J.Cardiovascular Drug Reviews, 19(4) 329-344)。如在患有侵袭性脑肿瘤或乳腺肿瘤的患者中看到的， 肿瘤细胞的TGF-0 1合成和分泌也能导致免疫抑制(Arteaga等人(1993) J.Clin.Invest.92 2569-2576)。小鼠中利什曼原虫感染的过程被TGF- ^ 1极大地改变(Barral_Netto等人 (1992) Science 257 545-547)。TGF-0 1使疾病加重，而TGF-0 1抗体阻碍遗传上易 感性小鼠的疾病的进展。施用TGF-0 1后遗传上有抗性的小鼠变得对利什曼原虫感染易 感。对细胞外基质沉积的深远影响已有综述(Rocco和Ziyadeh (1991)，Contemporary Issues in Nephrology v.23, Hormones, autocoids and thekidney.Jay Stein 编辑，Churchill Livingston, New Vork 第 391-410 页；Roberts 等人(1988) Rec.Prog.Hormone Res.44
157-197)，包括刺激细胞外基质组分的合成和抑制细胞外基质组分的降解。由于肾小球 的结构和过滤性质在很大程度上由肾小球膜决定，因此TGF-0 1对肾具有深远影响不足 为奇。增殖性肾小球肾炎(Border等人(1990)Kidney Int.37 689-695)和糖尿病性肾病 (Mauer等人(1984) J.Clin.Invest.74 1143-1155)中肾小球膜基质的蓄积是所述疾病的清 楚且显著的病理学特征。在人糖尿病性肾小球硬化(晚期神经病)中TGF-0 1水平升 高(Vamamolo 等人(1993)Proc.Natl.Acad.Sci.90 1814-1818)。TGF-3 1 在许多动物模 型的肾纤维化的发生中是重要的介质(Phan等人(1990)Kidney Int.37 : 426 ； Okuda等人 (1990)J.Clin.Invest.86 453)。已经用针对 TGF-3 1 的抗血清(Border 等人(1990) Nature 346 371)以及用能与TGF-M结合的细胞外基质蛋白饰胶蛋白聚糖(Border等人(1992) Nature 360 361-363)在大鼠中证明了实验诱导的肾小球肾炎的抑制。过量的TGF-0 1导致皮肤瘢痕组织形成。被注射到大鼠的愈合伤口边缘的中和 TGF-0 1抗体已经显示出对瘢痕形成的抑制，但不干扰伤口愈合速度或伤口的张力强度 (Shah等人(1992)lancet 339 213-214)。同时血管生成减少、伤口处巨噬细胞和单核细 胞数量减少、瘢痕组织中排列紊乱的胶原纤维沉积的数量减少。TGF-0 1可能是由气囊血管成形术后动脉中平滑肌细胞增殖和细胞外基质的沉 积引起的动脉壁进行性变厚中的因子。再狭窄的动脉的直径可以被这种增厚减小90%， 由于大多数直径减小是由于细胞外基质而不是平滑肌细胞造成的，因此仅通过减少过度 的细胞外基质沉积使这些血管再打开至50%是可能的。在用TGF-0 1基因体内转染的 未受损的猪动脉中，基因表达与细胞外基质合成和增生有关(Nabel等人(1993)ProC.Natl. Acad.Sci USA 90 10759-10763)。TGF-3 1 诱导的增生不象 PDGF-BB 所诱导的增生 那样广泛，但是使用TGF-0 1转染子细胞外基质更广泛。在这种基因转移猪模型中， 细胞外基质沉积与FGF-1 (FGF的分泌形式)诱导的增生无关(Nabel(1993)Nature 362 844-846)。存在各种不同类型的癌症，其中肿瘤产生的TGF-0 1可能是有害的。用表达小鼠TGF-3 1的载体转染后，MATLyLu大鼠前列腺癌细胞(Steiner和Barrack(1992) Mol.Endocrinol 6 15-25)和 MCF-7 人乳腺癌细胞(Arteaga 等人(l"3)Cell Growth and Differ.4 193-201)变得更具致瘤性和转移性。TGF-0 1已经被与人前列腺癌和晚期肠癌 中的血管生成、转移和预后不良相关联(Wikstrom，P.等人(1988)Prostate 337 ； 19-29 ； Saito, H.等人(1999) Cancer 86 1455-1462)。在乳腺癌中，预后不良与 TGF-3 升 高有关(Dickson 等人(1987) Proc.Natl.Acad.Sci.USA 84 837-841 ； Kasid 等人(1987) Cancer Res.47 5733-5738 ； Daly 等人(1990) J.Cell Biochem.43 199-211 ； Barreltt-Lee 等人(1990)Br.J.Cancer 61 612-617 ； King 等人(1989) J.Steroid Biochem.34 133-138 ； Welch 等人(1990)Proc.Natl.Acad.Sci USA 87 7678-7682 ； Walker 等人(1992) Eur. J.Cancer 238 641-644)，他莫昔芬治疗对 TGF- 3 1 的诱导(Butta 等人(1992) Cancer Res.52 4261-4264)已经被与他莫昔芬治疗乳腺癌失败相关联(Thompson等人(1991) Br.J.Cancer 63 609-614)。抗TGF- 3 1抗体抑制无胸腺小鼠中MDA-231人乳腺癌细胞 的生长(Arteaga等人(1993) J.Clin.Invest.92 2569-2576)，该治疗与脾中天然杀伤细胞 活性的增加有关。在裸鼠中用潜性TGF-0 1转染的CHO细胞也显示出NK活性下降和 肿瘤生长增加(Wallick等人(1990)J.Exp.Med.l72 177-1784)。因此，乳腺肿瘤分泌的 TGF-0可引起内分泌免疫抑制。对于晚期乳腺癌患者而言，TGF-0 1的高血浆浓度表明 预后不良(Anscher等人(1993)N.Engl.J.Med.328 1592-1598)。在高剂量化疗和自体骨 髓移植之前具有高循环TGF-0的患者具有高的肝静脉阻塞性疾病(所有患者中15-50% 的死亡率高达50% )和特发性间质性肺炎(所有患者中40-60% )的风险。这些发现表 明l)TGF-3 1血浆水平升高可用于鉴别处于风险中的患者和2)TGF-0 1的减少可降低这 些用于乳腺癌患者的常规治疗的发病率和死亡率。许多恶性肿瘤细胞分泌转化生长因子(TGF-0)-—种强免疫抑制剂，这表明 TGF-3产生可能代表一种重要的肿瘤逃避宿主免疫监视机制。在荷瘤宿主中建立具有 中断的TGF-0信号传导途径的白细胞亚群提供了一种用于癌症免疫治疗的有效措施。 T细胞中具有中断的TGF-0信号传导途径的转基因动物模型能根除通常致命的过度表达 TGF-3 的淋巴瘤 EL4 (Gorelik 和 Flavell, (2001)Nature Medicine 7(10) 1118-1112)。 肿瘤细胞中TGF-0分泌的下调导致宿主中免疫原性的恢复，而T细胞对TGF-0的不敏 感导致分化和自身免疫加速，其中的因素可能被需要以便在耐受宿主中对抗自体抗原表 达肿瘤。根据他们的CD4/CD8T细胞计数，TGF-3的免疫抑制作用也参与到免疫应答 比预期低的 HIV 患者亚组中(Garba 等人，J.Immunology (2002) 168 2247-2254)。中和 TGF-0的抗体能逆转培养物中的该作用，这表明TGF-0信号传导途径抑制剂可能适合 于逆转这种HIV患者亚组中存在的免疫抑制。在癌发生的最早阶段，TGF-0 1可作为强肿瘤抑制剂起作用并且可介导一些 化学预防剂的作用。在恶性肿瘤的发生和进展过程中的某个点，肿瘤细胞似乎逃离 TGF-0-依赖性生长抑制，同时在微环境中出现生物活性的TGF-日。已经在角质形成细 胞的过度表达TGF-3的转基因系统中最清楚地阐明了 TGF-3的肿瘤抑制/肿瘤促进双 重作用。尽管转基因系统对良性皮肤损伤的形成更有抵抗力，但是转基因系统中转移性 转化的速度大大增加(Cui等人，(1996) Cell 86 (4) 531-42)。原发性肿瘤中恶性肿瘤细 胞的TGF-0 1产生似乎随着肿瘤进展的阶段推进而增加。许多主要的上皮癌研究表明人癌症的TGF-0产生增加在肿瘤进展过程中作为较迟的事件出现。而且，这种肿瘤相关性 TGF- 0使肿瘤细胞具有选择性优势并加速肿瘤进展。TGF- 0对细胞-细胞和细胞-间 质相互作用的影响导致更大的侵袭和转移倾向。肿瘤相关性TGF-0可使得肿瘤细胞逃避 免疫监视，因为它是活化淋巴细胞克隆扩增的强抑制剂。还已经证明TGF-0抑制血管抑 素的产生。癌症治疗方式如放射治疗和化学治疗诱导肿瘤中活化TGF-0的产生，从而 选择对TGF-0生长抑制作用具有抗性的恶性肿瘤细胞向外生长。因此，这些抗癌治疗 增加风险并且促进具有增加的生长和侵袭的肿瘤的发展。在这种情况中，靶向于TGF-3 介导的信号转导的物质可能是非常有效的治疗策略。已经证明肿瘤细胞对TGF-0的抗性 否定了许多放射治疗和化学治疗的细胞毒性作用，间质中TGF-0的治疗依赖性活化甚至 可能是有害的，因为它使微环境更有助于肿瘤进展并促成导致纤维化的组织损伤。开发 TGF-0信号转导抑制剂可能有益于单独使用的和与其它疗法组合使用的晚期癌症治疗。所述化合物适合用于通过给患者施用化合物来抑制需要它们的患者的TGF-3 来治疗癌症和其它受TGF-0影响的病症。TGF-0还适合用于对抗动脉粥样硬 化(T.A.McCaffrey TGF- 3 s and TGF- 3 Receptors inAtherosclerosis Cytokine and Growth Factor Reviews 2000, 11，103-114)和阿尔茨海默病(Masliah，E. ； Ho, G.； Wyss-Coray，T. Functional Role ofTGF- 3 in Alzheimer' s Disease Microvascular Injury Lessons fromTransgenic Mice Neurochemistry International 2001, 39, 393—400)。已经发现本发明的化合物和其盐具有非常有价值的药理学性质，同时耐受性良 好。具体而言，它们显示出TGF-0受体I激酶-抑制性质。本发明的化合物优选表现出有利的生物学活性，能容易地在基于酶的测定例如 本文所述的测定中证明这种生物学活性。在这类基于酶的测定中，本发明的化合物优选 表现出并引起抑制作用，该抑制作用通常是由在合适范围内、优选在微摩尔范围内并且 更优选在纳摩尔范围内的IC5(I值证明的。如本文所讨论的，这些信号传导途径与多种疾病相关。因此，本发明的化合物 通过与一种或多种所述信号传导途径相互作用而用于预防和/或治疗依赖于所述信号传 导途径的疾病。因此，本发明涉及作为本文所述的信号传导途径的促进剂或抑制剂、优选作为 抑制剂的本发明的化合物。因此，本发明优选涉及作为TGF0信号传导途径的促进剂或 抑制剂、优选作为抑制剂的本发明的化合物。本发明还涉及一种或多种本发明的化合物在治疗和/或预防由TGF0活性增加 引起、介导和/或传播的疾病、优选本文所述的疾病中的用途。因此，本发明涉及作为治疗和/或预防所述疾病的药物和/或药物活性化合物的 本发明的化合物和本发明的化合物在制备用于治疗和/或预防所述疾病的药物中的用途 以及用于治疗所述疾病的方法，所述方法包括给需要这类施用的患者施用一种或多种本 发明的化合物。主体或患者可以属于任何哺乳动物种属，例如灵长类动物，特别是人；啮齿类 动物，包括小鼠、大鼠和仓鼠；兔；马、牛、狗、猫等。动物模型对实验研究而言是重 要的，其为人类疾病的治疗提供了模型。可以用体外测试来测定特定细胞对用本发明的化合物进行的治疗的敏感性。通常将细胞培养物与各种不同浓度的本发明的化合物混合足以使活性剂诱导细胞死亡或抑 制迁移的一段时间，通常为约1小时至1周。可以用来自活组织检查样品的培养的细胞 来进行体外测试。然后对处理后存活的细胞进行计数。剂量根据所用的特定化合物、特定疾病、患者状态等变化。治疗剂量通常十分 充分地减少靶组织中不期望的细胞群，同时维持患者的生存力。一般而言，治疗持续至 已经出现细胞负荷量的大幅度降低，例如细胞负荷量降低至少约50%，并且可以持续至 体内基本上再也检测不到不期望的细胞。对于信号转导途径的鉴定以及各种信号转导途径之间的相互作用的检测而言， 许多科学家已经开发了适合的模型或模型系统，例如细胞培养模型(例如Khwaja等人， EMBO，1997，16，2783-93)和转基因动物模型(例如 White 等人，Oncogene，2001， 20，7064-7072)。为了确定信号转导级联中的某些阶段，可以理由相互作用的化合物以 调控信号(例如Stephens等人，Biochemical J.，2000, 351，95-105)。本发明的化合物 也能在动物和/或细胞培养模型中或在本申请中所提及的临床疾病中用作检测激酶依赖 性信号转导途径的试剂。激酶活性的测定是本领域技术人员公知的一种技术。文献(例如 Campos-Gonzalez, R.和 Glenney，Jr., J.R.1992, J.Biol.Chem.267,第 14535 页)描述了 使用底物例如组蛋白(例如Alessi等人，FEBS Lett. 1996，399，3，第333-338页)或碱 性髓磷脂蛋白测定激酶活性的通用试验系统。对于激酶抑制剂的鉴定而言，有多种测定系统可用。在闪烁亲近测定法法(Sorg 等人，J.of.Biomolecular Screening，2002，7，11-19)和快速板测定法中，用 yATP 测 量作为底物的蛋白或肽的放射性磷酸化。在存在抑制性化合物的情况下，可检测到放射 性信号降低或者根本检测不到放射性信号。此外，均勻的时间分辨荧光共振能量转移 (HTR-FRET)和荧光偏振(FP)技术也是适合的测定方法(Sills等人，J.of Biomolecular Screening, 2002，191—214)。其它非放射性ELISA测定方法使用特异性磷酸_抗体(磷酸-AB)。该磷酸_AB 仅与磷酸化底物结合。可以使用过氧化物酶_轭合的抗_绵羊第二抗体通过化学发光来 检测这种结合(Ross等人，2002，BiochemJ.,即将出版，原稿BJ20020786)。
现有技术W02007/084560描述了用于抑制TNF- a、PDE4和B-RAF的其它噻吩并嘧啶类。发明_既述本发明涉及式I化合物
其中R1是苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、咪唑并[1，2a]吡啶、喹啉基、异 喹啉基或呋喃基，其各自是未被取代的或者被A和/或Hal单-、二-或三-取代，或者 是被A和/或Hal单-、二-或三-取代的吡啶基，R2 可以是 H、Alk、Het1、Cyc、AlkNH2、AlkNHA、AlkNAA，、AlkOH、 AlkOA、AlkCyc、AlkHet1、AlkOAlkOH、AlkO (CH2) mNAA'、AlkCHOH (CH2)mOH> AlkO (CH2) Jiet1、AlkAr 或 AlkO (CH2) mAr，X可以是单键、NH、S或S02，Alk可以是具有1至6个C原子的亚烷基，其中1至4个H原子可以被F、C1和 /或& 代替，Cyc可以是具有3至7个C原子的环烷基，其中1至4个H原子可以被A、Hal、 OH和/或OA代替，Het1可以是具有1至4个N、O和/或S原子的单环或二环的饱和的、不饱和的 或芳族的杂环，其可以被A、OH、OA、Hal、S02A和/或=O (羰基氧)单_、二-或 三-取代，Ar可以是苯基，其是未被取代的或者被A、OH、OA、Hal、S02NH2、S02NA 和/或SO2NAA，单-、二-或三-取代，A、A’可以各自彼此独立地是具有1-10个C原子的直链或支链烷基，其中1、
2或3个CH2基团可以彼此独立地被-CH = CH-和/或-C三C-基团代替和/或1_5个 H原子可以被F、C1和/或Br代替，Hal 可以是 F、CI、Br 或 I，m 可以是 1、2、3 或 4，以及其可药用的衍生物、盐、溶剂合物、互变异构体和立体异构体，包括它们 所有比例的混合物。本发明还涉及这些化合物的旋光活性形式(立体异构体)、对映体、外消旋物、 非对映体以及水合物和溶剂合物。术语化合物的溶剂合物指的是由于惰性溶剂分子与化 合物之间的相互吸引力而形成的溶剂分子与化合物的加合物。溶剂合物有例如单水合物 或二水合物或醇化物。可药用的衍生物指的是例如本发明的化合物的盐，还有所谓的前药化合物。前药衍生物指的是已经通过例如烷基或酰基、糖或寡肽修饰并且在生物体内迅 速裂解成本发明的有效化合物的本发明的化合物。还包括本发明的化合物的生物可降解 的聚合物衍生物，例如在InU.Pharm.115，61-67(1995)中所述的那些。表述“有效量”表示在组织、系统、动物或人中导致研究人员或医师所寻求或 期望的生物学或医学反应的药物或药物活性化合物的量。此外，表述“治疗有效量”表 示与没有接受该量的相应个体相比具有下列结果的量疾病、症状、病症、不适、障碍 或副作用的治疗得到改善、被治愈、被预防或被消除，或者还有疾病、不适或障碍的进 展被减少。表述“治疗有效量”还包括有效增强正常生理学功能的量。本发明还涉及本发明的化合物的混合物，例如两种非对映体的混合物，例如比 例为 1 1、1 2、1 3、1 4、1 5、1 10、1 100 或 1 1000 的两种非对映体的混合物。特别优选立体异构化合物的混合物。本发明涉及式I的化合物及其盐和制备权利要求1至7的式I化合物及其可药用 的衍生物、溶剂合物、盐、互变异构体和立体异构体的方法，其特征在于为了制备式I化合物，将式II的化合物
权利要求
1.式I化合物
2.根据权利要求1所述的化合物， 其中R1表示苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、咪唑并[1，2-a]吡啶、喹啉基或呋 喃基，其各自是未被取代的或者被A和/或Hal单-或二-取代，或者表示被A和/或 Hal单-或二-取代的吡啶基，以及其可药用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
3.根据权利要求1或2所述的化合物， 其中R2 表示 H、Alk、Het1、Cyc> AlkNH2> AlkNHA、AlkNAA'、AlkOH> AlkOA、 AlkHet1 > AlkOAlkOH > AlkO(CH2)mNAA'、AlkO (CH2) mHet\ AlkAr 或 AlkO(CH2) mAr，以及其可药用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
4.根据权利要求1至3中一项或多项所述的化合物，其中Alk可以是亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚戊基或亚己基，以及其可药用的衍 生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
5.根据权利要求1至4中一项或多项所述的化合物， 其中Cyc表示环丙烷、环丁烷、环戊烷或环己烷，其各自可以是未被取代的或者被OH或 OA单取代，以及其可药用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
6.根据权利要求1至5中一项或多项所述的化合物， 其中Het1表示具有1至2个N和/或O原子的单环的饱和的杂环，其可以被A和/或= 0(羰基氧)单-或二-取代，以及其可药用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
7.根据权利要求1至6中一项或多项所述的化合物， 其中Ar表示苯基，其被S02NH2、SO2NA或SO2NAA'单取代，以及其可药用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
8.根据权利要求1至7中一项或多项所述的化合物， 其中A、A’表示具有1-6个C原子的直链或支链烷基，其中1或2个CH2基团可以被-CH =CH-和/或-C ε C-基团代替和/或1-5个H原子可以被F和/或Cl代替，以及其可药用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
9.根据权利要求1至8中一项或多项所述的化合物， 其中R1表示苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻吩基、咪唑并[1，2-a]吡啶、喹啉基或呋 喃基，其各自是未被取代的或者被A和/或Hal单-或二-取代，或者表示被A和/或 Hal单-或二-取代的吡啶基，R2 表示 H、Alk、Het1、Cyc> AlkNH2> AlkNHA、AlkNAA'、AlkOH> AlkOA、 AlkHet1 > AlkOAlkOH > AlkO(CH2)mNAA'、AlkO (CH2) mHet\ AlkAr 或 AlkO(CH2) mAr，Alk表示亚甲基、亚乙基、亚丙基、亚丁基、亚戊基或亚己基，Cyc表示环丙烷、环丁烷、环戊烷或环己烷，其可以是未被取代的或者被OH单取代，Het1表示具有1至2个N和/或O原子的单环的饱和的杂环，其可以被A和/或= 0(羰基氧)单-或二-取代，Ar表示苯基，其是未被取代的或者被S02NH2、SO2NA或SO2NAA'单取代， A、A’表示具有1-6个C原子的直链或支链烷基，其中1或2个CH2基团可以被-CH =CH-和/或-C ε C-基团代替和/或1-5个H原子可以被F和/或Cl代替， Hal 表示 F、Cl、Br 或 I， m 表示 1、2、3、4, η 表示 O、1、2、3、4，以及其可药用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
10.选自下组的化合物·5_氨基-2-环丙基-4- (5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“Al” )，·5_氨基-2-环丙基-4- (6-甲基吡啶-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A2，，)，·5-氨基-4-苯并呋喃-2-基-2-环丙基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A3” )， 5-氨基-2-环丙基-4-(4，5- 二甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲酰胺 ("A4，，)，·5-氨基-2-环丙基-4-呋喃-2-基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A5” )， 5-氨基-2-环丙基-4-咪唑并[1，2-a]吡啶_2_基噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲酰胺 ("A6，，)，·5-氨基-4-苯并噻唑-2-基-2-环丙基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A7” )， 5-氨基-4-呋喃-2-基-2-甲硫基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A8” )， 5-氨基-4-苯并呋喃-2-基-2-甲硫基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A9” )， 5_氨基-4- (5-甲基呋喃-2-基)-2-甲硫基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A10，，)，·2，5-二氨基-4-呋喃-2-基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“All”)， 2，5-二氨基-4-(5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“Alia”)， 2，5-二氨基-4-苯并呋喃-2-基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A12”)， 5_氨基-4-苯并呋喃-2-基-2-吡啶-3-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A13，，)，·5_氨基-4- (6-甲基吡啶-2-基)-2-吡啶-3-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A14，，)，·2，5- 二氨基-4-喹啉-6-基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A15” )， 5-氨基-2-(3，5- 二甲基吡唑-1-基)-4_呋喃-2-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰 胺(“A16，，)，·2，5-二氨基-4-(5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺(“A17” )，5_氨基-4- (6-甲基吡啶-2-基)-2-吡啶-2-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A18，，)，5-氨基-4- (5-甲基呋喃-2-基)-2-吡唑-1-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A19，，)，2，5- 二氨基-4- (6-甲基吡啶-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺(“A20” )， 5_氨基-4-苯并呋喃-2-基-2-吗啉-4-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A21，，)，2，5- 二氨基-4- (4，5- 二甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A22，，)，5-氨基-4- (4，5- 二甲基呋喃-2-基)-2-吡啶-2-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰 胺(“A23，，)，5_氨基-4-苯并呋喃-2-基-2-吡啶-2-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A24，，)，5-氨基-2-叔丁基-4-呋喃-2-基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A25” )， 5_氨基-2-叔丁基-4- (5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A26，，)，5-氨基-4-苯并呋喃-2-基-2-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A27” )， 5-氨基-4-呋喃-2-基-2-甲基氨基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A28” )， 5_氨基-4-苯并呋喃-2-基-2-甲基氨基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺 (“A29，，)，5_氨基_4-(4，5-二甲基呋喃-2-基)-2_甲基噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A30，，)，5-氨基-4-呋喃-2-基-2-甲基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A31 ” )， 5-氨基-2-甲磺酰基-4-(5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A32，，)，5_氨基-2-叔丁基-4- (6-甲基吡啶-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A33，，)，5_氨基-2-甲基氨基-4-(5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺 (“A34，，)，5_氨基-2-(3-二甲基氨基丙基氨基)-4-(5_甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3_d]嘧 啶-6-甲酰胺(“A35”)，5-氨基-2-(4-乙磺酰基哌嗪-1-基)-4-(5_甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3_d]嘧 啶-6-甲酰胺(“A36，，)，5-氨基-2- (3-羟基丙基氨基)-4- (6-甲基吡啶-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲 酰胺(“A37，，)，5_氨基-2-(4-二甲基氨基丁基氨基)-4-(5_甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3_d]嘧 啶-6-甲酰胺(“A38，，)，5_氨基-4-苯并噻唑-2-基-2-甲基氨基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺 (“A39，，)，5_氨基-4-苯并呋喃-2-基-2-(2-二乙基氨基乙基氨基)噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲 酰胺(“A40”)，5_氨基-4-苯并[b]噻吩-2-基-2-吗啉-4-基噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A41，，)，2-烯丙基氨基-5-氨基-4-(5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A42，，)，5_氨基_4-(4，5-二甲基呋喃-2-基)-2-(3，5-二甲基吡唑-1-基)噻吩并[2，3-d] 嘧啶-6-甲酰胺(“A43”)，5_氨基-2-(3-苄氧基丙基氨基)-4-(5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲 酰胺(“A44”)，5_氨基-4-(5-甲基呋喃-2-基)-2-[3-(4_甲基哌嗪基)丙基氨基]噻吩并[2， 3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A45”)，5-氨基-2- (3-羟基丙基氨基)-4- (5-甲基呋喃-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲 酰胺(“A46”)，5_氨基-2-[3-(2-二甲基氨基乙氧基)丙基氨基]-4-(5-甲基呋喃-2-基)噻吩并 [2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A47” )，5-氨基-4-呋喃-2-基-2-甲磺酰基噻吩并[2，3-d]嘧啶-6-甲酰胺(“A48” )，2-烯丙基氨基-5-氨基-4-(6-甲基吡啶-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A50，，)，5_氨基-4- (5-甲基呋喃-2-基)-2-吗啉-4-基噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A51，，)，5-氨基-4-(6-甲基吡啶-2-基)-2_丙-2-炔基氨基噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲酰 胺(“A52，，)，5_氨基-4- (6-甲基吡啶-2-基)-2-吗啉-4-基噻吩并[2，3_d]嘧啶-6-甲酰胺 (“A53，，)，5_氨基-2-(3-苄氧基丙基氨基)-4-(6-甲基吡啶-2-基)噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲 酰胺(“A54”)，5_氨基-2-环丙基-4-(5-氟吡啶-2-基)噻吩并[2，3-d]嘧啶_6_甲酰胺 (“A55，，)，5-氨基-2-(2-氰基乙基氨基)-4-(6-甲基吡啶-2-基)噻吩并[2，3_d]嘧啶_6_甲 酰胺(“A56” )和5_氨基-4-(5-甲基呋喃-2-基)-2-(2_吗啉-4-基乙基氨基)噻吩并[2，3_d]嘧 啶-6-甲酰胺(“A57”)，以及其可药用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物。
11.制备权利要求1至10所述的式I化合物以及其可药用的衍生物、盐、溶剂合物、 互变异构体和立体异构体的方法，其特征在于为了制备式I化合物，将式II的化合物
12.药物，其包含至少一种权利要求1至10中一项或多项所述的化合物和/或其可药 用的衍生物、溶剂合物、盐和立体异构体，包括它们所有比例的混合物，并任选包含赋 形剂和/或辅料。
13.权利要求1至10中一项或多项所述的化合物以及其可药用的衍生物、盐、溶剂合 物、互变异构体和立体异构体、包括它们所有比例的混合物在制备药物中的用途，所述 药物用于治疗和/或对抗癌症、肿瘤生长、转移生长、纤维化、再狭窄、HIV感染、阿尔 茨海默病、动脉粥样硬化和/或用于促进伤口愈合。
14.根据权利要求13所述的用途，其中所述肿瘤选自鳞状上皮肿瘤、膀胱肿瘤、 胃肿瘤、肾肿瘤、头颈肿瘤、食管肿瘤、宫颈肿瘤、甲状腺肿瘤、肠肿瘤、肝肿瘤、脑 肿瘤、前列腺肿瘤、生殖泌尿道肿瘤、淋巴系统肿瘤、胃肿瘤、喉肿瘤、肺肿瘤、肺腺 癌、小细胞肺癌、胰腺癌、成胶质细胞瘤、结肠癌、乳腺癌、血液和免疫系统肿瘤、急 性髓性白血病、慢性髓性白血病、急性淋巴性白血病、慢性淋巴性白血病。
15.权利要求10所述的化合物和/或其生理学上可接受的盐和溶剂合物在制备用于治 疗实体瘤的药物中的用途，其中治疗有效量的式I化合物与选自下组的化合物组合施用 1)雌激素受体调节剂，2)雄激素受体调节剂，3)类视色素受体调节剂，4)细胞毒物质， 5)抗增殖剂，6)异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，7)HMG-CoA还原酶抑制剂，8)HIV蛋白 酶抑制剂，9)逆转录酶抑制剂和10)其它血管生成抑制剂。
16.权利要求10所述的化合物和/或其生理学上可接受的盐和溶剂合物在制备用于治 疗实体瘤的药物中的用途，其中治疗有效量的式I化合物与放射治疗和选自下组的化合物 组合施用1)雌激素受体调节剂，2)雄激素受体调节剂，3)类视色素受体调节剂，4)细 胞毒物质，5)抗增殖剂，6)异戊烯基蛋白转移酶抑制剂，7)HMG-CoA还原酶抑制齐U， 8)HIV蛋白酶抑制剂，9)逆转录酶抑制剂和10)其它血管生成抑制剂。
17.药物，其包含至少一种权利要求1至10中一项或多项所述的化合物和/或其可药 用的衍生物、溶剂合物和立体异构体，包括它们所有比例的混合物，和至少一种另外的 药物活性化合物。
18.套药包(药盒)，其由以下的独立包装组成(a)有效量的权利要求1至10中一项或多项所述的式I化合物和/或其可药用的衍生 物、溶剂合物和立体异构体，包括它们所有比例的混合物； 和(b)有效量的另外的药物活性化合物。
全文摘要
式(I)的新的噻吩并嘧啶类是TGF-β受体激酶抑制剂，尤其是可用于治疗肿瘤，其中R1、R2和X具有权利要求1中所示的含义。
文档编号A61P31/00GK102015724SQ200980112245
公开日2011年4月13日 申请日期2009年3月23日 优先权日2008年4月9日
发明者C·阿门特, F·岑克, G·赫尔策曼, H·格雷纳尔 申请人:默克专利有限公司
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