一种治疗更年期综合征的中药组合物及其制备方法
专利名称：一种治疗更年期综合征的中药组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及中医药领域，具体涉及一种治疗更年期综合征的中药组合物及其制备 方法。
背景技术：
更年期综合征指妇女在绝经前后由于卵巢功能逐渐衰退、雌激素水平下降，引起 下丘脑_垂体-卵巢轴的功能失调，出现以植物神经功能紊乱为主，伴有精神心理症状的一 组临床症候群，又称为围绝经期综合征。国外资料统计有84. 2%的妇女在围绝经期出现症 状，据2000年全国人口普查资料表明，我国45岁-65岁的妇女约为1亿2千万，流行病学 研究显示，这一人群中至少60%出现或多或少、或轻或重的绝经相关症状。随着社会老龄 化，妇女寿命的延长，此病的发病率有上升的趋势，若治疗不及时还直接关系到女性老年期 疾病的发生。因此更年期综合征对妇女的身心健康、工作和生活危害极大。对该病的治疗，西医多以雌激素补充疗法及激素替代疗法(HRT)为主，疗效虽好， 但副作用较大，如雌激素有增加妇女患上子宫内膜癌的可能，滥用刺激素会出现副反应，长 期单用刺激素制剂尤其是剂量较大可以增加子宫内膜癌的危险性，弊大于利，且这两种治 疗方法并不适合每一位更年期妇女。针对上述目前更年期综合征治疗现状和存在问题，我们以名老中医经验方为基 础，将中医辨证与现代医学辨病相结合，研制出疗效确切、副作用少，服用方便、价格经济的 更年期综合征治疗药物，从而满足社会需求，并带来较好的经济效益和社会效益。
发明内容
本发明的发明目的在于克服现有治疗更年期综合征的西药治疗效果不理想且副 作用大的缺陷，提供一种治疗更年期综合征针对性强、疗效显著且副作用小的中药组合物。为了实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案—种治疗更年期综合征的中药组合物，其原料包含白芍、女贞子、黄柏。中医认为围绝经期综合征属经断前后诸症，经断前后，天葵渐竭，肾水枯涸，肝木失养，肝肾阴虚致经断前后诸症，据此病机遣方，方中以白芍为君，用其养血调经、平肝止 痛、敛阴止汗之功，以解血虚、阴虚有热致月经不调，肝阴不足致头痛眩晕、肋胁疼痛以及阴 虚盗汗等证；女贞子为臣药，以其补肝肾阴、清热明目之效，除腰膝酸痛，阴虚内热，骨蒸劳 热，头晕目眩等之痹；黄柏清热燥湿，泻火解毒，退热除蒸为佐使药，助白芍、女贞子解阴虚 致烘热汗出，五心烦热等证。三药相伍，共奏补益肝肾，滋阴退热，除烦安神之效。本发明所述中药组合物具有补益肝肾，滋阴退热，除烦安神功能，主治女性更年期 综合征，中医辩证为肝肾阴虚证，证见经断前后烘热汗出、烦躁易怒、神疲乏力、健忘失眠、 腰膝酸痛、头晕耳鸣、口干便艰；月经紊乱，量多色红或淋漓不绝；舌红少苔，脉弦细等。本发明所述中药组合物，其原料优选包括白芍1000 1600重量份、女贞子 800 1400重量份、黄柏800 1400重量份。
进一步优选地，本发明中药组合物的原料包括白芍1333重量份、女贞子1111重 量份、黄柏1111重量份。本发明所述中药组合物经过常规加工直接或间接加入药学上可接受的辅料制成 颗粒剂、丸剂、散剂、片剂、胶囊剂、口服液等常规制剂。本发明所述中药组合物的优选剂型 为胶囊剂。更优选的，所述辅料包括磷酸氢钙。本发明还提供一种治疗更年期综合征的中药组合物的制备方法，包括以下步骤步骤1 取白芍加乙醇回流提取，提取液过滤取滤液回收乙醇，浓缩干燥得白芍提 取物；步骤2 取女贞子加乙醇回流提取，提取液过滤取滤液回收乙醇至滤液体积一半， 加水稀释，离心取沉淀干燥得女贞子提取物；步骤3 取黄柏加乙醇回流提取，提取液过滤取滤液回收乙醇，浓缩干燥得黄柏提 取物；步骤4 将所述白芍提取物、女贞子提取物、黄柏提取物混合。作为优选，步骤1具体为取白芍分别加10倍、8倍、6倍重量的70%乙醇，分别加 热回流1.5小时、1小时、1小时提取三次，合并提取液，滤过，取滤液回收乙醇，浓缩至干，于 60°C下真空干燥，粉碎过40目筛。作为优选，步骤2具体为取女贞子加10倍、8倍重量80%乙醇，分别加热回流2 小时、1小时提取两次，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇浓缩至滤液体积一半时，加等量水 稀释，离心取沉淀干燥，粉碎过40目筛。作为优选，步骤3具体为取黄柏分别加10倍、8倍、6倍重量65%乙醇，加热回流 1小时提取三次，合并提取液，滤过取滤液回收乙醇，浓缩至干，60°C下真空干燥，粉碎过40 目筛。更优选地，，所述白芍、女贞子与黄柏的重量比为1000 1600 800 1400 800 1400。动物实验表明，本发明所述中药组合物可以显著减少去势模型大鼠水平活动次 数，对去势模型大鼠有较好的镇静作用，还可显著增加去势模型大鼠E2含量，降低FSH、LH 活性，对去势模型大鼠内分泌系统失调有较好的改善作用。本发明所述中药组合物可以显著提高去势大鼠GSH-PX活性，降低去势模型大鼠 MDA含量，对去势模型大鼠自由基代谢有较好的改善作用。以上结果表明，本发明所述中药组合物可以调节改善女性更年期综合征模型去势 大鼠内分泌，提高模型大鼠雌激素水平，有效清除模型大鼠体内自由基，并对下丘脑神经递 质有一定影响，还有较好的镇静作用，可以有效改善女性更年期综合征症状。动物实验还发现，本发明所述中药组合物可以显著减少去势小鼠自主活动次数， 有较好的镇静催眠作用。本发明所述中药组合物还可可显著改善去势模型小鼠记忆功能，对东莨菪碱致小 鼠记忆障碍有一定的改善作用。本发明所述中药组合物可以减少温热药阴虚内热模型小鼠自主活动次数，显著降 低阴虚内热小鼠体温，对阴虚内热模型小鼠有较好的治疗。本发明所述中药组合物还对毛果芸香碱致大鼠发 汗有较好的止汗作用。
本发明所述中药组合物弥补了 HRT的不足，依据辨证论治，标本兼治，疗效显著， 副作用小。本发明化载古方，提供的一种治疗更年期综合征的中药组合物，处方小，具有标 本兼治、疗效显著、副作用小、服用方便、价格经济等优点，其生产工艺先进，利于工业化生产。
具体实施例方式本发明公开了一种治疗更年期综合征的中药组合物及其制备方法，本领域技术人 员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动 对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的产品、方法及 应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围 内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。下面结合实施例，进一步阐述本发明实施例1 本发明所述药物组合物的制备步骤a 白芍提取物的制备方法取白芍1600g加16000毫升、12000毫升、9600毫 升70%乙醇，加热回流提取三次，时间1.5小时、1小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收 乙醇，浓缩至干，于60°C下真空干燥，取出，粉碎，过40目筛，得约270g干膏，备用；步骤b 女贞子提取物的制备取女贞子1400g加14000毫升、11200毫升80% 乙醇，加热回流提取两次，时间2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至 1400ml，加水至2800毫升，静置过夜，离心，取沉淀干燥，粉碎，过40目筛，得约83g干膏，备 用；步骤c 黄柏提取物的制备取黄柏1400g加14000毫升、11200毫升、8400毫升 65%乙醇，加热回流提取三次，时间1小时、1小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙 醇，浓缩至干，于60°C下真空干燥，取出，粉碎，过40目筛，得约157g干膏，备用。步骤d 将步骤a、b、c所得提取物混合均勻。实施例2 本发明所述药物组合物的胶囊剂制备步骤a 白芍提取物的制备方法取白芍IOOOg加10000毫升、8000毫升、6000毫 升70%乙醇，加热回流提取三次，时间1.5小时、1小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收 乙醇，浓缩至干，于60°C下真空干燥，取出，粉碎，过40目筛，得约170g干膏，备用；步骤b 女贞子提取物的制备取女贞子800g加8000毫升、6400毫升80%乙醇， 加热回流提取两次，时间2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至1 1时， 加水至药材含量为1 2，静置过夜，离心，取沉淀干燥，粉碎，过40目筛，得约42g干膏，备 用；步骤c 黄柏提取物的制备取黄柏800g加8000毫升、6400毫升、4800毫升65% 乙醇，加热回流提取三次，时间1小时、1小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓 缩至干，于60°C下真空干燥，取出，粉碎，过40目筛，得约89g干膏，备用。 步骤d 加磷酸氢钙约60g，与步骤a、b、c所得提取物混合均勻，分装于1000粒胶
囊中，即得。实施例3 本发明所述药物组合物的胶囊剂制备步骤a 白芍提取物的制备方法取白芍1333g加13330毫升、10664毫升、7998毫升70%乙醇，加热回流提取三次，时间1.5小时、1小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收 乙醇，浓缩至干，于60°C下真空干燥，取出，粉碎，过40目筛，得约226g干膏，备用；步骤b 取女贞子Illlg加11110毫升、8888毫升80%乙醇，加热回流提取两次， 时间2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至1 1时，加水至药材含量为 1 2，静置过夜，离心，取沉淀干燥，粉碎，过40目筛，得约66g干膏，备用；步骤c 取黄柏Illlg加11110毫升、8888毫升、6666毫升65%乙醇，加热回流提 取三次，时间1小时、1小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至干，于60°C下 真空干燥，取出，粉碎，过40目筛，得约124g干膏，备用。步骤d 加磷酸氢钙约83g，与步骤a、b、c所得提取物混合均勻，分装于1000粒胶
囊中，即得。 实施例4 本发明所述药物组合物的颗粒剂制备步骤a 白芍提取物的制备方法取白芍1333g加13330毫升、10664毫升、7998毫 升70%乙醇，加热回流提取三次，时间1.5小时、1小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收 乙醇，浓缩至干，于60°C下真空干燥，取出，粉碎，过40目筛，得约226g干膏，备用；步骤b 取女贞子Illlg加11110毫升、8888毫升80%乙醇，加热回流提取两次， 时间2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至1 1时，加水至药材含量为 1 2，静置过夜，离心，取沉淀干燥，粉碎，过40目筛，得约66g干膏，备用；步骤c 取黄柏Illlg加11110毫升、8888毫升、6666毫升65%乙醇，加热回流提 取三次，时间1小时、1小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至干，于60°C下 真空干燥，取出，粉碎，过40目筛，得约124g干膏，备用。步骤d 加淀粉、糊精，与步骤a、b、c所得提取物制成颗粒，即得。实施例5 本发明所述中药组合物的疗效观察本发明所述中药组合物具有补益肝肾，滋阴退热，除烦安神的功效，临床用于治疗 女性更年期综合征，为了验证其疗效，为临床试验提供依据，我们对本发明所述中药组合物 的主要药效学进行了试验研究，现将结果报告如下1试验材料1. 1试验动物Wistar大鼠，雌性；KM小鼠，雌性；均由青岛市实验动物和动物实验中心提供，许 可证号SCXK (鲁)20030010。1. 2试验药品受试药物本发明所述中药组合物，实施例1-4任一例中步骤a、b、c所得提取物 的混合物。阳性对照药坤宝丸，北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂，批号703505802。2试验内容2. 1本发明所述中药组合物对去势大鼠模拟女性更年期综合征的影响2. 1. 1动物分组、给药取60只雌性大鼠以戊巴比妥钠麻醉，腹部朝上进行腹部固定，从大鼠背部最末肋 骨下腋中线和距脊柱外侧2cm交叉处剪毛，切开皮肤和背肌约1. 5-2cm，结扎卵巢下端输卵 管后摘除卵巢，术后将子宫角回腹腔，缝合肌肉及皮肤。同样方法摘除另一侧卵巢，连续注射3天青霉素以防感染，术后第5天开始阴道涂片观察大鼠动情周期，连续5天，以大鼠不 再出现动情周期(全部处于动情间期)为去势成功。随机分组为模型组，阳性药组及受试 药大、中、小剂量组，10/组，另取10只雌性大鼠(不做去势手术)做为正常对照组。术后第 9天开始按表1所示剂量灌胃给药，其中坤宝丸相当于人临床用药量的5倍，本发明所述中 药组合物大、中、小剂量分别相当于人临床用药量的10倍、5倍、2. 5倍，对照组及模型组灌 胃等量常水，1次/天，连续30天。各组大鼠禁食不禁水12h至次日试验。2. 1. 2指标测定
2. 1.2. 1开野活动观察各组动物末次给药后lh，以开野试验法观察大鼠自主活动状况，即将各组动物分 别置于高40cm，长宽均为80cm，周壁为黑色，底面用黑线划分为面积相等的25块，以动物 穿越底面方块数作为水平活动得分，以直立次数作为垂直活动得分，每只大鼠仅进行1次 测定，每次3min记录水平、垂直活动得分。2. 1. 2. 2血清激素水平及下丘脑检测神经递质检测大鼠取血分离血清，以放免法检测血清中E2、FSH、LH、β -EP含量，并检测GSH-PX、 S0D、MDA活性及含量；处死大鼠迅速取下丘脑，以高效液相-电化学检测法检测神经递质下 丘脑中E、NA、DA、5-HT含量。2. 1. 3试验结果结果见表1-4。表1本发明所述中药组合物对去势大鼠开野试验的影响(无，n = 10) 注与对照组比较，*Ρ < 0.05，**Ρ < 0.01，；与模型组比较，ΔΡ < 0. 05,ΔΔΡ < 0. 01，。结果显示，去势模型大鼠水平活动次数增多，与正常对照组差异有显著性意义(P < 0.01)，垂直活动增加，与正常对照组差异无显著性意义；坤宝丸(阳性药)及更舒大、 中、小剂量组大鼠水平、垂直活动与正常对照组差异无显著性意义。阳性药、本发明所述中 药组合物大、中、小剂量组大鼠与模型组比较水平活动减少，且阳性药、更舒中、小剂量组大 鼠与模型组大鼠水平活动差异有显著性意义(分别P < 0. 05、P < 0. 05、P < 0. 01)；阳性药、更舒大、中、小剂量组大鼠与模型组比较垂直活动差异无显著性意义。试验表明，本发明所述中药组合物中、小剂量可以显著减少去势模型大鼠水平活 动次数，对去势模型大鼠有较好的镇静作用。表2本发明所述中药组合物对去势大鼠血清中激素的影响(无土s ,η = 10) 注与正常对照组比较，*Ρ < 0. 05，**Ρ < 0. 01，***Ρ < 0. OOl ；与模型组比较，ΔΡ < 0. 05，δδΡ < 0. 01，ΔΔΔΡ < 0. 001。结果显示，去势模型组大鼠与正常组大鼠比较血清雌二醇(E2)含量减少，促卵泡 激素(FSH)、黄体生成素(LH)活性增加，且均有有显著性意义(分别P < 0. 05、P < 0. 01、 P <0.01)；阳性药及更舒大、中、小剂量组大鼠E2与正常对照组比较差异无显著性意义； 本发明所述中药组合物大、中剂量组大鼠FSH与对照组比较，活性降低，且差异有显著性意 义(分别P <0.01、P <0.01)；阳性药及本发明所述中药组合物大、中、小剂量组大鼠LH 与正常对照组比较，活性增高，差异无显著性意义(分别P < 0. 001、P < 0. 05、P < 0. 01、 P < 0. 01)。阳性药及本发明所述中药组合物大、中、小剂量组大鼠E2与去势模型组大鼠比 较，含量增加，且差异无显著性意义(均Ρ<0.05)；更舒大、中、小剂量组大鼠FSH与模型 组大鼠比较，活性降低，差异有显著性意义(分别P < 0. 001、P < 0. 001、P < 0. 01)；本发 明所述中药组合物大、中、小剂量组大鼠LH与模型组大鼠比较，活性降低，差异有显著性意 义(均 P < 0.01)。试验表明，本发明所述中药组合物可以显著增加去势模型大鼠E2含量，降低FSH、 LH活性，对去势模型大鼠内分泌系统失调有较好的改善作用。表3本发明所述中药组合物对去势大鼠血清自由基的影响(无，η = 10) 注与正常对照组比较，*Ρ < 0. 05，**Ρ < 0. 01，***Ρ < 0. 001 ；与模型组比较，ΔΡ < 0. 05，δδΡ < 0. 01，ΔΔΔΡ < 0. 001。结果显示，去势模型大鼠还原谷胱甘肽(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)活性降 低，丙二醛(MDA)含量增高，但与正常对照组比较差异无显著性意义；阳性药及本发明所述 中药组合物大、中、小剂量GSH-PX、SOD、MDA，与正常对照组比较差异无显著性意义。本发明 所述中药组合物大、中、小剂量组大鼠与模型组比较，GSH-PX活性增高，差异均有显著性意 义(均P<0.05)；本发明所述中药组合物中剂量组大鼠与模型组比较，SOD活性增高，差异 有显著性意义(P <0.05)；本发明所述中药组合物大、中、小剂量组大鼠与模型组比较，MDA 含量降低，差异无显著性意义。试验表明，本发明所述中药组合物可以显著提高去势大鼠GSH-PX活性，本发明所 述中药组合物中剂量可以显著提高去势大鼠SOD活性，本发明所述中药组合物可以降低去 势模型大鼠MDA含量，对去势模型大鼠自由基代谢有较好的改善作用。表4本发明所述中药组合物对去势大鼠下丘脑中激素的影响(〒士^，η = 10)
注与正常对照组比较，*P<o．05，“P<o．ol，“*P<o．OOl；与模型组比较，／l P<o．05，““P<o．ol，“““P<o．ool。
结果显示，去势模型组大鼠下丘脑神经递质肾上腺素(E)、多巴胺(DA)含量减少，去甲肾上腺素(ΝΑ)、五羟色胺(5-ΗΤ)含量增加，与正常对照组比较差异无显著性意义。 阳性药及本发明所述中药组合物大、中、小剂量组与模型组比较Ε、NA、DA增高，五羟色胺 (5-ΗΤ)含量减少，差异均无显著性意义。以上试验表明，本发明所述中药组合物可以调节改善女性更年期综合征模型(去势)大鼠内分泌，提高模型大鼠雌激素水平，有效清除模型大鼠体内自由基，并对下丘脑神 经递质有一定影响，还有较好的镇静作用，可以有效改善女性更年期综合征症状。2. 2本发明所述中药组合物对去势小鼠镇静作用的影响2. 2. 1本发明所述中药组合物对去势雌性小鼠自主活动的影响2. 2. 1. 1动物分组、给药取60只雌性KM小鼠以戊巴比妥钠麻醉，剃去背毛(肋骨之后脊柱部分)，消毒皮 肤，于卵巢部的肌膜上做一小切口，然后用眼科镊子取出卵巢，以丝线结扎并切除，缝合肌 肉和皮肤，涂以碘酒，同样方法摘除另一侧卵巢，连续注射3天青霉素以防感染，术后第5天 开始阴道涂片观察小鼠动情周期，连续5天，以小鼠卵巢摘除完全无动情周期变化者为去 势合格，选取去势合格者用于试验。随机分组为模型组，阳性药组及受试药大、中、小剂量 组，10/组，另取10只雌性小鼠(不做去势手术)做为正常对照组。术后第9天开始按表 4所示剂量灌胃给药，其中坤宝丸相当于人临床用药量的10倍，本发明所述中药组合物大、 中、小剂量分别相当于人临床用药量的20倍、10倍、5倍，正常对照组及模型组灌胃等量常 水，1次/天，连续10天。各组大鼠饮食饮水不限。2. 2. 1. 2 指标测定各组动物于末次给药后lh，分别置于ZYC-I型自由活动仪中，适应3min后，记录 5min内活动次数。2. 2. 1. 3 试验结果结果见表5。表5本发明所述中药组合物对去势小鼠自主活动的影响(无±5，!!= 10) 注与正常对照组比较，*Ρ < 0. 05，**Ρ < 0. 01，***Ρ < 0. 001 ；与模型组比较，ΔΡ< 0. 05，δδΡ < 0. 01，ΔΔΔΡ < 0. 001。
结果显示，去势模型小鼠自主活动增多，但与正常对照组比较，差异没有显著性意 义；本发明所述中药组合物大、中、小剂量组小鼠自主活动减少，且本发明所述中药组合物 大剂量组小鼠自主活动次数与模型组比较，差异有显著性意义(P < 0. 05)。结果表明，本发明所述中药组合物大剂量可以显著减少去势小鼠自主活动次数， 有较好的镇静作用。2. 2. 2本发明所述中药组合物对戊巴比妥钠阈下催眠去势模型小鼠睡眠的影响 [4]2. 2.2. 1动物分组、给药取60只雌性KM小鼠切除卵巢，阴道涂片以确定去势成功(同2.2. 1)，取去势成功 小鼠50只随机分组给药，另取10只雌性小鼠(不做去势手术)做为正常对照组，按体重将 其随机分为6组(同2. 2. 1)，各组小鼠灌胃给药(剂量同2. 2. 1)，正常对照组灌胃等量常 水，每天灌胃1次，连续10天。末次给药前禁食不禁水。2. 2. 2. 2 指标检测末次给药后lh，即刻腹腔注射35mg · kg—1戊巴比妥钠，将小鼠置于37°C温暖热板 上观察，凡在30min内出现正反反射消失达Imin以上者即发生睡眠，记录各组小鼠睡眠的 个数。2. 2. 2. 3 试验结果结果见表6。表6本发明所述中药组合物对去势模型小鼠阈下催眠睡眠的的影响(Zl1S )
" 1剂量/g · kg-1 动物数/只 睡眠数/只
正常对照 等体积常水Io3
等体积常水Ioi
坤宝丸16. 667102
大剂量10. 667104
~中剂量5. 333107 Δ
小剂量2.667103注与常水组比较，ΔΡ < 0.05。结果显示，本发明所述中药组合物中剂量组与模型组比较，小鼠睡眠只数增加，差 异有显著性意义。结果表明，本发明所述中药组合物中剂量对去势小鼠有较好镇静催眠作用。2. 3本发明所述中药组合物记忆功能的试验2. 3. 1本发明所述中药组合物对东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍的影响
2. 3.3. 1动物分组、给药取雌性KM小鼠60只，体重(20士2) g，按体重随机分为正常对照组、模型组、阳性药 组、及受试药大、中、小剂量组，10/只，各组动物灌胃给药(剂量同2. 2. 1)，正常对照组及模 型组灌胃等量常水，1次/d，连续10天，各组小鼠饮食饮水不限。
2. 3. 3. 2 指标测定各组动物分别于末次给药后lh，除正常组外其余各组小鼠灌胃东莨菪碱3mg/kg， IOmin后进行跳台训练，适应3min，训练5min，24h后重新进行测试，将小鼠放在跳台上，记 录5min内错误(从跳台上来)次数。2. 3. 3. 3 试验结果结果见表7。表7本发明所述中药组合物对东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍的影响(〒± 5 ) 注与正常对照组比较，*P < 0. 05，**P < 0. 01，***P < 0. 001 ；与模型组比较，ΔΡ < 0. 05，δδΡ < 0. 01，ΔΔΔΡ < 0. 001。结果显示，模型组小鼠错误次数增多，但与正常对照组比较，差异尚无显著性意 义，各给药组小鼠与模型组比较错误次数减少，差异尚无显著性意义。结果表明，本发明所述中药组合物对东莨菪碱致小鼠记忆障碍有一定的改善作 用。2. 3. 2本发明所述中药组合物对去势小鼠学习记忆功能的影响2. 3.2. 1动物分组、给药取雌性KM小鼠50只，体重(20 士 2) g，去势造模同前，检查去势合格者用于试验，按 体重随机分为模型组、阳性药组、及受试药大、中、小剂量组，10/只，另取10雌性小鼠(不做 去势手术)做正常对照组，于术后第9天开始给药，剂量同同2. 2. 1，1次/天，连续10天， 各组小鼠饮食饮水不限。2. 3. 2. 2 指标测定
各组动物分别于末次给药前进行训练，给药24h后测试记忆成绩，测第1次跳下平 台饿潜伏期及5min内的错误次数。2. 3. 2. 3 试验结果结果见表8。表8本发明所述中药组合物对去势小鼠记忆功能的影响(Ji1S ) 注与正常对照组比较，*Ρ < 0. 05，**Ρ < 0. 01，***Ρ < 0. 001 ；与模型组比较，ΔΡ
<0. 05，δδΡ < 0. 01，ΔΔΔΡ < 0. 001。结果显示，去势模型小鼠错误次数增多，较正常对照组差异有显著性意义(P
<0. 05)；本发明所述中药组合物小剂量组小鼠错误次数较模型组减少，且差异有显著性 意义(P < 0. 05)。结果表明，本发明所述中药组合物小剂量可显著改善去势模型小鼠记忆功能。2. 4本发明所述中药组合物对温热药致小鼠阴虚内热模型的影响2. 4. 1动物分组、造模、给药取雌性KM小鼠60只，体重(20 士 2) g，按体重将其随机分组为正常对照组、模型组、 阳性药组及受试药本发明所述中药组合物大、中、小剂量组，除正常对照组外各组小鼠灌胃 给温热药造模，剂量为0. 2ml/10g，正常对照组灌胃等量常水，每天灌胃1次，连续2周。各 组小鼠同期灌胃给药(剂量同2. 1. 1)，正常对照组、模型组灌胃等量常水，每天灌胃1次，连 续2周，各组小鼠饮食饮水不限。2.4. 2指标检测各组动物于末次给药后lh，测量记录小鼠体温(肛温)，然后分别置于ZYC-I型自 由活动仪中，适应3mi η后，记录5min内活动次数。2. 4. 3试验结果结果见表9。表9本发明所述中药组合物对阴虚内热模型小鼠的影响(〒土 S ) 结果显示，正常对照组比较阴虚内热模型小鼠自主活动次数增加，无显著性意义， 体温升高，差异有显著性意义(P <0.05)；阳性药及本发明所述中药组合物大、中、小剂量 组小鼠自主活动减少，差异无显著性意义，本发明所述中药组合物中剂量体温降低，差异有 显著性意义(P <0.05)。与模型组比较，阳性药及本发明所述中药组合物大、中、小剂量组 小鼠自主活动减少，差异无显著性意义，体温降低，差异有显著性意义(分别P < 0. 01、P
<0. 05, P < 0. OUP < 0. 01)。结果表明，本发明所述中药组合物可以减少温热药阴虚内热模型小鼠自主活动次 数，显著降低阴虚内热小鼠体温，对阴虚内热模型小鼠有较好的治疗。2. 5对毛果云香碱所致大鼠汗腺分泌的影响2. 5.1动物分组、给药取Wistar大鼠50只，雌性，体重(200 士 20) g，按体重随机分为常水组、阳性药组及 本发明所述中药组合物大、中、小剂量组，每组10只，灌胃给药，剂量同2. 1. 1，常水组灌胃 等量常水，连续10天，各组动物饮食进水不限。2. 5. 2指标检测于末次给药后30min，各组大鼠皮下注射毛果芸香碱3. 5mg · lOOg—1，30min后，将 各组大鼠足跖部用干棉签轻轻拭干，于大鼠足跖皮肤涂上和田-高垣试剂A液，待干燥后， 再薄薄涂上和田_高垣试剂B液，然后每IOmi η观察记录汗点数1次，共观察30min。2. 5. 3数据处理数据结果以表示，以SPSS11. 5统计软件进行统计分析，组间t检验，比较差异
显著性。2. 5. 4试验结果结果见表10。表10本发明所述中药组合物对毛果芸香碱致大鼠汗液分泌的影响(S )
注与常水组比较，*Ρ< 0. 05，**Ρ < 0. 01，结果显示，本发明所述中药组合物大、中剂量组大鼠汗点数较常水组减少，差异有 显著性意义(均P < 0. 05)。结果表明，本发明所述中药组合物大、中剂量对毛果芸香碱致大鼠发汗有较好的 止汗作用。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应 视为本发明的保护范围。
权利要求
一种治疗更年期综合征的中药组合物，其原料包白芍、女贞子、黄柏。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述原料包括白芍1000 1600 重量份、女贞子800 1400重量份、黄柏800 1400重量份。
3.根据权利要求2所述的中药组合物，其特征在于，所述原料包括白芍1333重量份、 女贞子1111重量份、黄柏1111重量份。
4.权利要求1、2或3所述的中药组合物经过常规加工直接或间接加入药学上可接受的 辅料制成的临床制剂。
5.根据权利要求4所述的临床制剂，其特征在于，所述辅料包括磷酸氢钙。
6.一种治疗更年期综合征的中药组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤 步骤1 取白芍加乙醇回流提取，提取液过滤取滤液回收乙醇，浓缩干燥得白芍提取物；步骤2 取女贞子加乙醇回流提取，提取液过滤取滤液回收乙醇至滤液体积一半，加水 稀释，离心取沉淀干燥得女贞子提取物；步骤3 取黄柏加乙醇回流提取，提取液过滤取滤液回收乙醇，浓缩干燥得黄柏提取物；步骤4 将所述白芍提取物、女贞子提取物、黄柏提取物混合。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤1具体为取白芍分别加10倍、 8倍、6倍重量的70%乙醇，分别加热回流1. 5小时、1小时、1小时提取三次，合并提取液，滤 过，取滤液回收乙醇，浓缩至干，于60°C下真空干燥，粉碎过40目筛。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤2具体为取女贞子加10倍、8 倍重量80%乙醇，分别加热回流2小时、1小时提取两次，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇 浓缩至滤液体积一半时，加水稀释，离心取沉淀干燥，粉碎过40目筛。
9.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤3具体为取黄柏分别加10倍、 8倍、6倍重量65%乙醇，加热回流1小时提取三次，合并提取液，滤过取滤液回收乙醇，浓缩 至干，60°C下真空干燥，粉碎过40目筛。
10.根据权利要求6-9任一项所述的制备方法，其特征在于，所述白芍、女贞子与黄柏 的重量比为 1000 1600 800 1400 800 1400。
全文摘要
本发明涉及中医药领域，公开了一种治疗更年期综合征的中药组合物，其原料包含白芍、女贞子、黄柏。优选地，其原料重量配比为白芍1000～1600份、女贞子800～1400份、黄柏800～1400份。本发明还提供所述中药组合物的制备方法。本发明所述中药组合物治疗女性更年期综合征疗效显著、组方简单、副作用小。本发明所述制备方法提取率高，操作简单，适合工业化生产。
文档编号A61K36/756GK101843689SQ20101018550
公开日2010年9月29日 申请日期2010年5月28日 优先权日2010年5月28日
发明者朱鸿龙 申请人:朱鸿龙
技术领域：
本发明涉及中医药领域，具体涉及一种治疗更年期综合征的中药组合物及其制备 方法。
背景技术：
更年期综合征指妇女在绝经前后由于卵巢功能逐渐衰退、雌激素水平下降，引起 下丘脑_垂体-卵巢轴的功能失调，出现以植物神经功能紊乱为主，伴有精神心理症状的一 组临床症候群，又称为围绝经期综合征。国外资料统计有84. 2%的妇女在围绝经期出现症 状，据2000年全国人口普查资料表明，我国45岁-65岁的妇女约为1亿2千万，流行病学 研究显示，这一人群中至少60%出现或多或少、或轻或重的绝经相关症状。随着社会老龄 化，妇女寿命的延长，此病的发病率有上升的趋势，若治疗不及时还直接关系到女性老年期 疾病的发生。因此更年期综合征对妇女的身心健康、工作和生活危害极大。对该病的治疗，西医多以雌激素补充疗法及激素替代疗法(HRT)为主，疗效虽好， 但副作用较大，如雌激素有增加妇女患上子宫内膜癌的可能，滥用刺激素会出现副反应，长 期单用刺激素制剂尤其是剂量较大可以增加子宫内膜癌的危险性，弊大于利，且这两种治 疗方法并不适合每一位更年期妇女。针对上述目前更年期综合征治疗现状和存在问题，我们以名老中医经验方为基 础，将中医辨证与现代医学辨病相结合，研制出疗效确切、副作用少，服用方便、价格经济的 更年期综合征治疗药物，从而满足社会需求，并带来较好的经济效益和社会效益。
发明内容
本发明的发明目的在于克服现有治疗更年期综合征的西药治疗效果不理想且副 作用大的缺陷，提供一种治疗更年期综合征针对性强、疗效显著且副作用小的中药组合物。为了实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案—种治疗更年期综合征的中药组合物，其原料包含白芍、女贞子、黄柏。中医认为围绝经期综合征属经断前后诸症，经断前后，天葵渐竭，肾水枯涸，肝木失养，肝肾阴虚致经断前后诸症，据此病机遣方，方中以白芍为君，用其养血调经、平肝止 痛、敛阴止汗之功，以解血虚、阴虚有热致月经不调，肝阴不足致头痛眩晕、肋胁疼痛以及阴 虚盗汗等证；女贞子为臣药，以其补肝肾阴、清热明目之效，除腰膝酸痛，阴虚内热，骨蒸劳 热，头晕目眩等之痹；黄柏清热燥湿，泻火解毒，退热除蒸为佐使药，助白芍、女贞子解阴虚 致烘热汗出，五心烦热等证。三药相伍，共奏补益肝肾，滋阴退热，除烦安神之效。本发明所述中药组合物具有补益肝肾，滋阴退热，除烦安神功能，主治女性更年期 综合征，中医辩证为肝肾阴虚证，证见经断前后烘热汗出、烦躁易怒、神疲乏力、健忘失眠、 腰膝酸痛、头晕耳鸣、口干便艰；月经紊乱，量多色红或淋漓不绝；舌红少苔，脉弦细等。本发明所述中药组合物，其原料优选包括白芍1000 1600重量份、女贞子 800 1400重量份、黄柏800 1400重量份。
进一步优选地，本发明中药组合物的原料包括白芍1333重量份、女贞子1111重 量份、黄柏1111重量份。本发明所述中药组合物经过常规加工直接或间接加入药学上可接受的辅料制成 颗粒剂、丸剂、散剂、片剂、胶囊剂、口服液等常规制剂。本发明所述中药组合物的优选剂型 为胶囊剂。更优选的，所述辅料包括磷酸氢钙。本发明还提供一种治疗更年期综合征的中药组合物的制备方法，包括以下步骤步骤1 取白芍加乙醇回流提取，提取液过滤取滤液回收乙醇，浓缩干燥得白芍提 取物；步骤2 取女贞子加乙醇回流提取，提取液过滤取滤液回收乙醇至滤液体积一半， 加水稀释，离心取沉淀干燥得女贞子提取物；步骤3 取黄柏加乙醇回流提取，提取液过滤取滤液回收乙醇，浓缩干燥得黄柏提 取物；步骤4 将所述白芍提取物、女贞子提取物、黄柏提取物混合。作为优选，步骤1具体为取白芍分别加10倍、8倍、6倍重量的70%乙醇，分别加 热回流1.5小时、1小时、1小时提取三次，合并提取液，滤过，取滤液回收乙醇，浓缩至干，于 60°C下真空干燥，粉碎过40目筛。作为优选，步骤2具体为取女贞子加10倍、8倍重量80%乙醇，分别加热回流2 小时、1小时提取两次，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇浓缩至滤液体积一半时，加等量水 稀释，离心取沉淀干燥，粉碎过40目筛。作为优选，步骤3具体为取黄柏分别加10倍、8倍、6倍重量65%乙醇，加热回流 1小时提取三次，合并提取液，滤过取滤液回收乙醇，浓缩至干，60°C下真空干燥，粉碎过40 目筛。更优选地，，所述白芍、女贞子与黄柏的重量比为1000 1600 800 1400 800 1400。动物实验表明，本发明所述中药组合物可以显著减少去势模型大鼠水平活动次 数，对去势模型大鼠有较好的镇静作用，还可显著增加去势模型大鼠E2含量，降低FSH、LH 活性，对去势模型大鼠内分泌系统失调有较好的改善作用。本发明所述中药组合物可以显著提高去势大鼠GSH-PX活性，降低去势模型大鼠 MDA含量，对去势模型大鼠自由基代谢有较好的改善作用。以上结果表明，本发明所述中药组合物可以调节改善女性更年期综合征模型去势 大鼠内分泌，提高模型大鼠雌激素水平，有效清除模型大鼠体内自由基，并对下丘脑神经递 质有一定影响，还有较好的镇静作用，可以有效改善女性更年期综合征症状。动物实验还发现，本发明所述中药组合物可以显著减少去势小鼠自主活动次数， 有较好的镇静催眠作用。本发明所述中药组合物还可可显著改善去势模型小鼠记忆功能，对东莨菪碱致小 鼠记忆障碍有一定的改善作用。本发明所述中药组合物可以减少温热药阴虚内热模型小鼠自主活动次数，显著降 低阴虚内热小鼠体温，对阴虚内热模型小鼠有较好的治疗。本发明所述中药组合物还对毛果芸香碱致大鼠发 汗有较好的止汗作用。
本发明所述中药组合物弥补了 HRT的不足，依据辨证论治，标本兼治，疗效显著， 副作用小。本发明化载古方，提供的一种治疗更年期综合征的中药组合物，处方小，具有标 本兼治、疗效显著、副作用小、服用方便、价格经济等优点，其生产工艺先进，利于工业化生产。
具体实施例方式本发明公开了一种治疗更年期综合征的中药组合物及其制备方法，本领域技术人 员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动 对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的产品、方法及 应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围 内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。下面结合实施例，进一步阐述本发明实施例1 本发明所述药物组合物的制备步骤a 白芍提取物的制备方法取白芍1600g加16000毫升、12000毫升、9600毫 升70%乙醇，加热回流提取三次，时间1.5小时、1小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收 乙醇，浓缩至干，于60°C下真空干燥，取出，粉碎，过40目筛，得约270g干膏，备用；步骤b 女贞子提取物的制备取女贞子1400g加14000毫升、11200毫升80% 乙醇，加热回流提取两次，时间2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至 1400ml，加水至2800毫升，静置过夜，离心，取沉淀干燥，粉碎，过40目筛，得约83g干膏，备 用；步骤c 黄柏提取物的制备取黄柏1400g加14000毫升、11200毫升、8400毫升 65%乙醇，加热回流提取三次，时间1小时、1小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙 醇，浓缩至干，于60°C下真空干燥，取出，粉碎，过40目筛，得约157g干膏，备用。步骤d 将步骤a、b、c所得提取物混合均勻。实施例2 本发明所述药物组合物的胶囊剂制备步骤a 白芍提取物的制备方法取白芍IOOOg加10000毫升、8000毫升、6000毫 升70%乙醇，加热回流提取三次，时间1.5小时、1小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收 乙醇，浓缩至干，于60°C下真空干燥，取出，粉碎，过40目筛，得约170g干膏，备用；步骤b 女贞子提取物的制备取女贞子800g加8000毫升、6400毫升80%乙醇， 加热回流提取两次，时间2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至1 1时， 加水至药材含量为1 2，静置过夜，离心，取沉淀干燥，粉碎，过40目筛，得约42g干膏，备 用；步骤c 黄柏提取物的制备取黄柏800g加8000毫升、6400毫升、4800毫升65% 乙醇，加热回流提取三次，时间1小时、1小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓 缩至干，于60°C下真空干燥，取出，粉碎，过40目筛，得约89g干膏，备用。 步骤d 加磷酸氢钙约60g，与步骤a、b、c所得提取物混合均勻，分装于1000粒胶
囊中，即得。实施例3 本发明所述药物组合物的胶囊剂制备步骤a 白芍提取物的制备方法取白芍1333g加13330毫升、10664毫升、7998毫升70%乙醇，加热回流提取三次，时间1.5小时、1小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收 乙醇，浓缩至干，于60°C下真空干燥，取出，粉碎，过40目筛，得约226g干膏，备用；步骤b 取女贞子Illlg加11110毫升、8888毫升80%乙醇，加热回流提取两次， 时间2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至1 1时，加水至药材含量为 1 2，静置过夜，离心，取沉淀干燥，粉碎，过40目筛，得约66g干膏，备用；步骤c 取黄柏Illlg加11110毫升、8888毫升、6666毫升65%乙醇，加热回流提 取三次，时间1小时、1小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至干，于60°C下 真空干燥，取出，粉碎，过40目筛，得约124g干膏，备用。步骤d 加磷酸氢钙约83g，与步骤a、b、c所得提取物混合均勻，分装于1000粒胶
囊中，即得。 实施例4 本发明所述药物组合物的颗粒剂制备步骤a 白芍提取物的制备方法取白芍1333g加13330毫升、10664毫升、7998毫 升70%乙醇，加热回流提取三次，时间1.5小时、1小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收 乙醇，浓缩至干，于60°C下真空干燥，取出，粉碎，过40目筛，得约226g干膏，备用；步骤b 取女贞子Illlg加11110毫升、8888毫升80%乙醇，加热回流提取两次， 时间2小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至1 1时，加水至药材含量为 1 2，静置过夜，离心，取沉淀干燥，粉碎，过40目筛，得约66g干膏，备用；步骤c 取黄柏Illlg加11110毫升、8888毫升、6666毫升65%乙醇，加热回流提 取三次，时间1小时、1小时、1小时，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇，浓缩至干，于60°C下 真空干燥，取出，粉碎，过40目筛，得约124g干膏，备用。步骤d 加淀粉、糊精，与步骤a、b、c所得提取物制成颗粒，即得。实施例5 本发明所述中药组合物的疗效观察本发明所述中药组合物具有补益肝肾，滋阴退热，除烦安神的功效，临床用于治疗 女性更年期综合征，为了验证其疗效，为临床试验提供依据，我们对本发明所述中药组合物 的主要药效学进行了试验研究，现将结果报告如下1试验材料1. 1试验动物Wistar大鼠，雌性；KM小鼠，雌性；均由青岛市实验动物和动物实验中心提供，许 可证号SCXK (鲁)20030010。1. 2试验药品受试药物本发明所述中药组合物，实施例1-4任一例中步骤a、b、c所得提取物 的混合物。阳性对照药坤宝丸，北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂，批号703505802。2试验内容2. 1本发明所述中药组合物对去势大鼠模拟女性更年期综合征的影响2. 1. 1动物分组、给药取60只雌性大鼠以戊巴比妥钠麻醉，腹部朝上进行腹部固定，从大鼠背部最末肋 骨下腋中线和距脊柱外侧2cm交叉处剪毛，切开皮肤和背肌约1. 5-2cm，结扎卵巢下端输卵 管后摘除卵巢，术后将子宫角回腹腔，缝合肌肉及皮肤。同样方法摘除另一侧卵巢，连续注射3天青霉素以防感染，术后第5天开始阴道涂片观察大鼠动情周期，连续5天，以大鼠不 再出现动情周期(全部处于动情间期)为去势成功。随机分组为模型组，阳性药组及受试 药大、中、小剂量组，10/组，另取10只雌性大鼠(不做去势手术)做为正常对照组。术后第 9天开始按表1所示剂量灌胃给药，其中坤宝丸相当于人临床用药量的5倍，本发明所述中 药组合物大、中、小剂量分别相当于人临床用药量的10倍、5倍、2. 5倍，对照组及模型组灌 胃等量常水，1次/天，连续30天。各组大鼠禁食不禁水12h至次日试验。2. 1. 2指标测定
2. 1.2. 1开野活动观察各组动物末次给药后lh，以开野试验法观察大鼠自主活动状况，即将各组动物分 别置于高40cm，长宽均为80cm，周壁为黑色，底面用黑线划分为面积相等的25块，以动物 穿越底面方块数作为水平活动得分，以直立次数作为垂直活动得分，每只大鼠仅进行1次 测定，每次3min记录水平、垂直活动得分。2. 1. 2. 2血清激素水平及下丘脑检测神经递质检测大鼠取血分离血清，以放免法检测血清中E2、FSH、LH、β -EP含量，并检测GSH-PX、 S0D、MDA活性及含量；处死大鼠迅速取下丘脑，以高效液相-电化学检测法检测神经递质下 丘脑中E、NA、DA、5-HT含量。2. 1. 3试验结果结果见表1-4。表1本发明所述中药组合物对去势大鼠开野试验的影响(无，n = 10) 注与对照组比较，*Ρ < 0.05，**Ρ < 0.01，；与模型组比较，ΔΡ < 0. 05,ΔΔΡ < 0. 01，。结果显示，去势模型大鼠水平活动次数增多，与正常对照组差异有显著性意义(P < 0.01)，垂直活动增加，与正常对照组差异无显著性意义；坤宝丸(阳性药)及更舒大、 中、小剂量组大鼠水平、垂直活动与正常对照组差异无显著性意义。阳性药、本发明所述中 药组合物大、中、小剂量组大鼠与模型组比较水平活动减少，且阳性药、更舒中、小剂量组大 鼠与模型组大鼠水平活动差异有显著性意义(分别P < 0. 05、P < 0. 05、P < 0. 01)；阳性药、更舒大、中、小剂量组大鼠与模型组比较垂直活动差异无显著性意义。试验表明，本发明所述中药组合物中、小剂量可以显著减少去势模型大鼠水平活 动次数，对去势模型大鼠有较好的镇静作用。表2本发明所述中药组合物对去势大鼠血清中激素的影响(无土s ,η = 10) 注与正常对照组比较，*Ρ < 0. 05，**Ρ < 0. 01，***Ρ < 0. OOl ；与模型组比较，ΔΡ < 0. 05，δδΡ < 0. 01，ΔΔΔΡ < 0. 001。结果显示，去势模型组大鼠与正常组大鼠比较血清雌二醇(E2)含量减少，促卵泡 激素(FSH)、黄体生成素(LH)活性增加，且均有有显著性意义(分别P < 0. 05、P < 0. 01、 P <0.01)；阳性药及更舒大、中、小剂量组大鼠E2与正常对照组比较差异无显著性意义； 本发明所述中药组合物大、中剂量组大鼠FSH与对照组比较，活性降低，且差异有显著性意 义(分别P <0.01、P <0.01)；阳性药及本发明所述中药组合物大、中、小剂量组大鼠LH 与正常对照组比较，活性增高，差异无显著性意义(分别P < 0. 001、P < 0. 05、P < 0. 01、 P < 0. 01)。阳性药及本发明所述中药组合物大、中、小剂量组大鼠E2与去势模型组大鼠比 较，含量增加，且差异无显著性意义(均Ρ<0.05)；更舒大、中、小剂量组大鼠FSH与模型 组大鼠比较，活性降低，差异有显著性意义(分别P < 0. 001、P < 0. 001、P < 0. 01)；本发 明所述中药组合物大、中、小剂量组大鼠LH与模型组大鼠比较，活性降低，差异有显著性意 义(均 P < 0.01)。试验表明，本发明所述中药组合物可以显著增加去势模型大鼠E2含量，降低FSH、 LH活性，对去势模型大鼠内分泌系统失调有较好的改善作用。表3本发明所述中药组合物对去势大鼠血清自由基的影响(无，η = 10) 注与正常对照组比较，*Ρ < 0. 05，**Ρ < 0. 01，***Ρ < 0. 001 ；与模型组比较，ΔΡ < 0. 05，δδΡ < 0. 01，ΔΔΔΡ < 0. 001。结果显示，去势模型大鼠还原谷胱甘肽(GSH-PX)、超氧化物歧化酶(SOD)活性降 低，丙二醛(MDA)含量增高，但与正常对照组比较差异无显著性意义；阳性药及本发明所述 中药组合物大、中、小剂量GSH-PX、SOD、MDA，与正常对照组比较差异无显著性意义。本发明 所述中药组合物大、中、小剂量组大鼠与模型组比较，GSH-PX活性增高，差异均有显著性意 义(均P<0.05)；本发明所述中药组合物中剂量组大鼠与模型组比较，SOD活性增高，差异 有显著性意义(P <0.05)；本发明所述中药组合物大、中、小剂量组大鼠与模型组比较，MDA 含量降低，差异无显著性意义。试验表明，本发明所述中药组合物可以显著提高去势大鼠GSH-PX活性，本发明所 述中药组合物中剂量可以显著提高去势大鼠SOD活性，本发明所述中药组合物可以降低去 势模型大鼠MDA含量，对去势模型大鼠自由基代谢有较好的改善作用。表4本发明所述中药组合物对去势大鼠下丘脑中激素的影响(〒士^，η = 10)
注与正常对照组比较，*P<o．05，“P<o．ol，“*P<o．OOl；与模型组比较，／l P<o．05，““P<o．ol，“““P<o．ool。
结果显示，去势模型组大鼠下丘脑神经递质肾上腺素(E)、多巴胺(DA)含量减少，去甲肾上腺素(ΝΑ)、五羟色胺(5-ΗΤ)含量增加，与正常对照组比较差异无显著性意义。 阳性药及本发明所述中药组合物大、中、小剂量组与模型组比较Ε、NA、DA增高，五羟色胺 (5-ΗΤ)含量减少，差异均无显著性意义。以上试验表明，本发明所述中药组合物可以调节改善女性更年期综合征模型(去势)大鼠内分泌，提高模型大鼠雌激素水平，有效清除模型大鼠体内自由基，并对下丘脑神 经递质有一定影响，还有较好的镇静作用，可以有效改善女性更年期综合征症状。2. 2本发明所述中药组合物对去势小鼠镇静作用的影响2. 2. 1本发明所述中药组合物对去势雌性小鼠自主活动的影响2. 2. 1. 1动物分组、给药取60只雌性KM小鼠以戊巴比妥钠麻醉，剃去背毛(肋骨之后脊柱部分)，消毒皮 肤，于卵巢部的肌膜上做一小切口，然后用眼科镊子取出卵巢，以丝线结扎并切除，缝合肌 肉和皮肤，涂以碘酒，同样方法摘除另一侧卵巢，连续注射3天青霉素以防感染，术后第5天 开始阴道涂片观察小鼠动情周期，连续5天，以小鼠卵巢摘除完全无动情周期变化者为去 势合格，选取去势合格者用于试验。随机分组为模型组，阳性药组及受试药大、中、小剂量 组，10/组，另取10只雌性小鼠(不做去势手术)做为正常对照组。术后第9天开始按表 4所示剂量灌胃给药，其中坤宝丸相当于人临床用药量的10倍，本发明所述中药组合物大、 中、小剂量分别相当于人临床用药量的20倍、10倍、5倍，正常对照组及模型组灌胃等量常 水，1次/天，连续10天。各组大鼠饮食饮水不限。2. 2. 1. 2 指标测定各组动物于末次给药后lh，分别置于ZYC-I型自由活动仪中，适应3min后，记录 5min内活动次数。2. 2. 1. 3 试验结果结果见表5。表5本发明所述中药组合物对去势小鼠自主活动的影响(无±5，!!= 10) 注与正常对照组比较，*Ρ < 0. 05，**Ρ < 0. 01，***Ρ < 0. 001 ；与模型组比较，ΔΡ< 0. 05，δδΡ < 0. 01，ΔΔΔΡ < 0. 001。
结果显示，去势模型小鼠自主活动增多，但与正常对照组比较，差异没有显著性意 义；本发明所述中药组合物大、中、小剂量组小鼠自主活动减少，且本发明所述中药组合物 大剂量组小鼠自主活动次数与模型组比较，差异有显著性意义(P < 0. 05)。结果表明，本发明所述中药组合物大剂量可以显著减少去势小鼠自主活动次数， 有较好的镇静作用。2. 2. 2本发明所述中药组合物对戊巴比妥钠阈下催眠去势模型小鼠睡眠的影响 [4]2. 2.2. 1动物分组、给药取60只雌性KM小鼠切除卵巢，阴道涂片以确定去势成功(同2.2. 1)，取去势成功 小鼠50只随机分组给药，另取10只雌性小鼠(不做去势手术)做为正常对照组，按体重将 其随机分为6组(同2. 2. 1)，各组小鼠灌胃给药(剂量同2. 2. 1)，正常对照组灌胃等量常 水，每天灌胃1次，连续10天。末次给药前禁食不禁水。2. 2. 2. 2 指标检测末次给药后lh，即刻腹腔注射35mg · kg—1戊巴比妥钠，将小鼠置于37°C温暖热板 上观察，凡在30min内出现正反反射消失达Imin以上者即发生睡眠，记录各组小鼠睡眠的 个数。2. 2. 2. 3 试验结果结果见表6。表6本发明所述中药组合物对去势模型小鼠阈下催眠睡眠的的影响(Zl1S )
" 1剂量/g · kg-1 动物数/只 睡眠数/只
正常对照 等体积常水Io3
等体积常水Ioi
坤宝丸16. 667102
大剂量10. 667104
~中剂量5. 333107 Δ
小剂量2.667103注与常水组比较，ΔΡ < 0.05。结果显示，本发明所述中药组合物中剂量组与模型组比较，小鼠睡眠只数增加，差 异有显著性意义。结果表明，本发明所述中药组合物中剂量对去势小鼠有较好镇静催眠作用。2. 3本发明所述中药组合物记忆功能的试验2. 3. 1本发明所述中药组合物对东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍的影响
2. 3.3. 1动物分组、给药取雌性KM小鼠60只，体重(20士2) g，按体重随机分为正常对照组、模型组、阳性药 组、及受试药大、中、小剂量组，10/只，各组动物灌胃给药(剂量同2. 2. 1)，正常对照组及模 型组灌胃等量常水，1次/d，连续10天，各组小鼠饮食饮水不限。
2. 3. 3. 2 指标测定各组动物分别于末次给药后lh，除正常组外其余各组小鼠灌胃东莨菪碱3mg/kg， IOmin后进行跳台训练，适应3min，训练5min，24h后重新进行测试，将小鼠放在跳台上，记 录5min内错误(从跳台上来)次数。2. 3. 3. 3 试验结果结果见表7。表7本发明所述中药组合物对东莨菪碱致小鼠记忆获得障碍的影响(〒± 5 ) 注与正常对照组比较，*P < 0. 05，**P < 0. 01，***P < 0. 001 ；与模型组比较，ΔΡ < 0. 05，δδΡ < 0. 01，ΔΔΔΡ < 0. 001。结果显示，模型组小鼠错误次数增多，但与正常对照组比较，差异尚无显著性意 义，各给药组小鼠与模型组比较错误次数减少，差异尚无显著性意义。结果表明，本发明所述中药组合物对东莨菪碱致小鼠记忆障碍有一定的改善作 用。2. 3. 2本发明所述中药组合物对去势小鼠学习记忆功能的影响2. 3.2. 1动物分组、给药取雌性KM小鼠50只，体重(20 士 2) g，去势造模同前，检查去势合格者用于试验，按 体重随机分为模型组、阳性药组、及受试药大、中、小剂量组，10/只，另取10雌性小鼠(不做 去势手术)做正常对照组，于术后第9天开始给药，剂量同同2. 2. 1，1次/天，连续10天， 各组小鼠饮食饮水不限。2. 3. 2. 2 指标测定
各组动物分别于末次给药前进行训练，给药24h后测试记忆成绩，测第1次跳下平 台饿潜伏期及5min内的错误次数。2. 3. 2. 3 试验结果结果见表8。表8本发明所述中药组合物对去势小鼠记忆功能的影响(Ji1S ) 注与正常对照组比较，*Ρ < 0. 05，**Ρ < 0. 01，***Ρ < 0. 001 ；与模型组比较，ΔΡ
<0. 05，δδΡ < 0. 01，ΔΔΔΡ < 0. 001。结果显示，去势模型小鼠错误次数增多，较正常对照组差异有显著性意义(P
<0. 05)；本发明所述中药组合物小剂量组小鼠错误次数较模型组减少，且差异有显著性 意义(P < 0. 05)。结果表明，本发明所述中药组合物小剂量可显著改善去势模型小鼠记忆功能。2. 4本发明所述中药组合物对温热药致小鼠阴虚内热模型的影响2. 4. 1动物分组、造模、给药取雌性KM小鼠60只，体重(20 士 2) g，按体重将其随机分组为正常对照组、模型组、 阳性药组及受试药本发明所述中药组合物大、中、小剂量组，除正常对照组外各组小鼠灌胃 给温热药造模，剂量为0. 2ml/10g，正常对照组灌胃等量常水，每天灌胃1次，连续2周。各 组小鼠同期灌胃给药(剂量同2. 1. 1)，正常对照组、模型组灌胃等量常水，每天灌胃1次，连 续2周，各组小鼠饮食饮水不限。2.4. 2指标检测各组动物于末次给药后lh，测量记录小鼠体温(肛温)，然后分别置于ZYC-I型自 由活动仪中，适应3mi η后，记录5min内活动次数。2. 4. 3试验结果结果见表9。表9本发明所述中药组合物对阴虚内热模型小鼠的影响(〒土 S ) 结果显示，正常对照组比较阴虚内热模型小鼠自主活动次数增加，无显著性意义， 体温升高，差异有显著性意义(P <0.05)；阳性药及本发明所述中药组合物大、中、小剂量 组小鼠自主活动减少，差异无显著性意义，本发明所述中药组合物中剂量体温降低，差异有 显著性意义(P <0.05)。与模型组比较，阳性药及本发明所述中药组合物大、中、小剂量组 小鼠自主活动减少，差异无显著性意义，体温降低，差异有显著性意义(分别P < 0. 01、P
<0. 05, P < 0. OUP < 0. 01)。结果表明，本发明所述中药组合物可以减少温热药阴虚内热模型小鼠自主活动次 数，显著降低阴虚内热小鼠体温，对阴虚内热模型小鼠有较好的治疗。2. 5对毛果云香碱所致大鼠汗腺分泌的影响2. 5.1动物分组、给药取Wistar大鼠50只，雌性，体重(200 士 20) g，按体重随机分为常水组、阳性药组及 本发明所述中药组合物大、中、小剂量组，每组10只，灌胃给药，剂量同2. 1. 1，常水组灌胃 等量常水，连续10天，各组动物饮食进水不限。2. 5. 2指标检测于末次给药后30min，各组大鼠皮下注射毛果芸香碱3. 5mg · lOOg—1，30min后，将 各组大鼠足跖部用干棉签轻轻拭干，于大鼠足跖皮肤涂上和田-高垣试剂A液，待干燥后， 再薄薄涂上和田_高垣试剂B液，然后每IOmi η观察记录汗点数1次，共观察30min。2. 5. 3数据处理数据结果以表示，以SPSS11. 5统计软件进行统计分析，组间t检验，比较差异
显著性。2. 5. 4试验结果结果见表10。表10本发明所述中药组合物对毛果芸香碱致大鼠汗液分泌的影响(S )
注与常水组比较，*Ρ< 0. 05，**Ρ < 0. 01，结果显示，本发明所述中药组合物大、中剂量组大鼠汗点数较常水组减少，差异有 显著性意义(均P < 0. 05)。结果表明，本发明所述中药组合物大、中剂量对毛果芸香碱致大鼠发汗有较好的 止汗作用。以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人 员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应 视为本发明的保护范围。
权利要求
一种治疗更年期综合征的中药组合物，其原料包白芍、女贞子、黄柏。
2.根据权利要求1所述的中药组合物，其特征在于，所述原料包括白芍1000 1600 重量份、女贞子800 1400重量份、黄柏800 1400重量份。
3.根据权利要求2所述的中药组合物，其特征在于，所述原料包括白芍1333重量份、 女贞子1111重量份、黄柏1111重量份。
4.权利要求1、2或3所述的中药组合物经过常规加工直接或间接加入药学上可接受的 辅料制成的临床制剂。
5.根据权利要求4所述的临床制剂，其特征在于，所述辅料包括磷酸氢钙。
6.一种治疗更年期综合征的中药组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤 步骤1 取白芍加乙醇回流提取，提取液过滤取滤液回收乙醇，浓缩干燥得白芍提取物；步骤2 取女贞子加乙醇回流提取，提取液过滤取滤液回收乙醇至滤液体积一半，加水 稀释，离心取沉淀干燥得女贞子提取物；步骤3 取黄柏加乙醇回流提取，提取液过滤取滤液回收乙醇，浓缩干燥得黄柏提取物；步骤4 将所述白芍提取物、女贞子提取物、黄柏提取物混合。
7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤1具体为取白芍分别加10倍、 8倍、6倍重量的70%乙醇，分别加热回流1. 5小时、1小时、1小时提取三次，合并提取液，滤 过，取滤液回收乙醇，浓缩至干，于60°C下真空干燥，粉碎过40目筛。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤2具体为取女贞子加10倍、8 倍重量80%乙醇，分别加热回流2小时、1小时提取两次，合并提取液，滤过，滤液回收乙醇 浓缩至滤液体积一半时，加水稀释，离心取沉淀干燥，粉碎过40目筛。
9.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，步骤3具体为取黄柏分别加10倍、 8倍、6倍重量65%乙醇，加热回流1小时提取三次，合并提取液，滤过取滤液回收乙醇，浓缩 至干，60°C下真空干燥，粉碎过40目筛。
10.根据权利要求6-9任一项所述的制备方法，其特征在于，所述白芍、女贞子与黄柏 的重量比为 1000 1600 800 1400 800 1400。
全文摘要
本发明涉及中医药领域，公开了一种治疗更年期综合征的中药组合物，其原料包含白芍、女贞子、黄柏。优选地，其原料重量配比为白芍1000～1600份、女贞子800～1400份、黄柏800～1400份。本发明还提供所述中药组合物的制备方法。本发明所述中药组合物治疗女性更年期综合征疗效显著、组方简单、副作用小。本发明所述制备方法提取率高，操作简单，适合工业化生产。
文档编号A61K36/756GK101843689SQ20101018550
公开日2010年9月29日 申请日期2010年5月28日 优先权日2010年5月28日
发明者朱鸿龙 申请人:朱鸿龙
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