抗生素化合物的制作方法

专利名称：：抗生素化合物的制作方法抗生素化合物交叉引用本发明案要求享受申请于2004年9月22日的临时申请USSN60/611,951的优先权。
背景技术：
：本发明涉及对于治疗细菌感染有用的广谱噻唑基-肽抗生素化合物。由于许多细菌是耐各种抗生素的，因此医学界对由细菌所引起感染的关注不断增长。这样的细菌包括金黄色葡萄球菌(^fl//^/o"cc"sflwmw)、溶血性葡萄球菌(5te/7/ej/ococc附/re附o/W/ais)、片球菌属菌种(卿.)以及化脓性链球菌(Are/7似coccm/"^ies)、肺炎链球菌(5^e/^ococc"spwe"附ow/fle)、铜绿假单胞菌(i^"do歸w"saenig/mwfl)、霍乱弧菌(Ki'6nVcAo/eme)、副溶血性弧菌(F/6/7'o/mrflAe附o/j;"ciis)、乙酸钾不动杆菌(^!"/wo6fl"e/"cfl/coae"ctw)、嗜麦芽寡养单胞菌(^e"W/Y/^o附OM"sm""o/7似/i'fl)。因此，本发B月的抗生素包括对治疗耐各种已知抗生素的感染的治疗法的重要贡献。一种也是噻唑基-肽且用于治疗细菌感染的现有技术化合物为硫链丝菌肽、GE2270A、nocathiacins、glycothiohexide及诺西肽。在本发明中，所述噻唑基-肽抗生素由诺卡氏菌属菌种(A^owYZ/flW/7.)发酵来制备并具有抗敏感和对现有抗生素耐受的细菌感染的抗菌活性。发明概述本发明涉及式I的新噻唑基-肽抗生素<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage8</formula>或其药学上可接受的盐、酯、对映异构体、非对映异构体或混合物其中R表示-C(0)冊2、-C(0)NHC=CH2C(0)NH2;RhR2及R3独立地表示OH;或者RhR2及R3合起来表示<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage8</formula>i连接点R，连接点Rj表示OH，OH以及Rs表示氢或OH。本发明还涉及一种制备式I化合物的方法，其通过诺卡氏菌属菌种的发酵。本发明还涉及一种用于从所述发酵液分离式I化合物的方法。发明详述本发明还涉及式I化合物，尤其是结构式Ia、Ib、Ic、Id、Ie、If、Ig、Ih及Ii的化合物<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage10</formula><formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage11</formula><formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage12</formula>或其药学上可接受的盐、酯、对映异构体、非对映异构体或混合物。本发明的化合物的药学上可接受的盐包括由无毒的无机或有机碱形成的常规无毒盐。例如，这样的常规无毒盐包括源于无机碱例如碱金属或碱土金属氬氧化物，例如，钾、钠、锂、钙或镁等等的那些；以及从有机碱例如胺，例如二节基乙二胺(dibenzylethylene-diamine)、三甲胺、哌啶、吡咯烷、节胺等等，或者氢氧化季铵例如氢氧化四甲铵等等制备的盐。可以通过常规的化学方法从本发明的化合物合成所述药学上可接受的盐。一般地，所述盐通过将游离酸与按化学式计算量的或与过量来制备。本发明的化合物为一种对治疗细菌感染有用的广谱抗生素。它们所显示的抗菌活性主要是抗金黄色葡萄球菌(51.做M"s)、粪肠球菌(五./flecafc)、屎肠球菌(/flw'w附)、肺炎链球菌(51./mew附ort/fle)、枯草芽孢杆菌(双sm6"7m)，它们包括耐许多已知抗生素的种类。用于这些试验林的最低抑菌浓度(MIC)值在从0.01到小于200ug/mL的范围用于试验林例如金黄色葡萄球菌、溶血性葡萄球菌、化脓性链球菌、肺炎链球菌以及粪肠球菌。可以通过将所述化合物与药学上可接受的载体相组合而将本发明的化合物配制在药物组合物中。这样的载体的例子在下文中给出。可以以粉末或晶体形式、以液体溶液形式或以混悬液形式使用所述化合物。它们可以通过各种方法给药；主要感兴趣的那些包括局部给药、口服以及通过注射(静脉内或肌内注射)的胃肠外途径给药。用于注射(一种给药途径)的组合物可以以单位剂量形式制备在安瓿中或在多剂量容器中。所述可注射的组合物可以采取如油性或含水介质中的混悬液、溶液或乳剂的形式，以及可以包含各种配制剂。可选地，所述活性组分可以以粉末(冻干的或非冻干的)形式用于在给药时用适宜的介质例如无菌水重建(reconstitution)。在可注射的组合物中，所述载体典型地由无菌水、盐水或另一种可注射的液体例如用于肌肉注射的花生油组成。还可以包括各种緩冲剂、防腐剂等等。局部用药可以配制在载体例如疏水性或亲水性基剂中从而形成软青剂、乳骨剂、洗剂，配制在含水、油性或醇性液体中从而形成涂剂或者配制在干稀释剂中从而形成粉剂。口服组合物可以采取如片剂、胶嚢剂、口服混悬液及口服溶液的形式。所述口服组合物可以使用载体例如常规的配制剂，以及可以包括緩释特性以及迅速输送形式。所述给药剂量在很大程度上取决于所治疗对象的状况及尺寸，给药的途径及频率，所述病原体对所述化合物的敏感性，所述感染的毒力及其他因素。然而，这样的问题留待医生根据抗菌领域中众所周知的治疗原则做出常规的判断。用于对人类给药的每单位剂量组合物，无论液体或固体，可以包含从大约0.01%到高达大约99%的化合物I，所述范围的一个实施方案为大约10-60%。所述组合物一般将包含从大约2mg到大约2.5g的化合物I，该范围的一个实施方案为大约2mg到1000mg。在胃肠外给药时，所述单位剂量典型地将包括无菌水溶液中的纯化合物I或以用于溶液的可溶性粉剂形式，可以将其调节为中性pH值且具等渗性。在此所描述的本发明还包括一种在需要这样的治疗的哺乳动物中治疗细菌感染的方法，其包括将式I化合物以对治疗所述感染有效的量对所述哺乳动物给药。式I化合物给药方法的一个实施方案包括口服的及胃肠外的方法，例如，i.v.输注、i.v.快速浓注及i.m.注射。对于成人，优选以每公斤体重大约0.1-50mg的式I化合物、每曰一到四次给药。优选的剂量2mg到1000mg的抗菌药、每日一到四次给药。更具体地说，对于轻度感染，推荐剂量为大约5-200mg、每日二或三次给药。对于中度感染，抗高敏感性革兰氏阳性菌的推荐剂量为大约20-1000mg、每日三或四次给药。对于严重且具有生命危险的感染，以对所述抗生素的敏感度为上限，抗菌的推荐剂量可以为大约100-2000mg、每日三到四次给药。对于儿童，一般推荐以每公斤体重大约0.1-50mg的式I化合物、每曰一到四次给药。当所述剂量为2mg到1000mg的所述抗菌药、每日一到四次给药时，本发明的另一个方面得以实现。本发明的另一个方面为一种用于制备所述式I化合物的方法，其包括在适宜的营养培养基中培养诺卡氏菌属菌种(A^awY//fl印.)微生物以及然后从所述发酵液回收本发明的化合物。所讨论的生物体得自美国典型培养物保藏中心(AmericanTypeCultureCollection,ATCC)，12301ParklawnDrive,Rockville，Maryland,20852，其以登记号ATCC202099注册。其在Merck培养物保藏中心(Merckculturecollection)中以登记号MA7332存放。任何关于公众获得所述微生物的限制将基于专利的公开而不可撤回地去除。尽管该具体种的应用被描述来与本发明有关，还存在能够制备化合物I的上述生物体的其他种及突变体，而且它们的应用在实施本发明的方法中是可预料的。所述结构式I的化合物通过在控制条件下以ATCC登记号202099的培养物接种到适宜培养基上进行需氧发酵来制备。所述适宜培养基优选含水的以及包含可同化的碳、氮及无机盐的来源。用于发酵的所述培养基主要是众所周知的Difco胰蛋白酶大豆肉汤(DifcoTrypticSoyBroth)，单独的或者伴以通常为本领域技术人员所使用的附加营养成分。应当注意的是在此所描述的营养培养基仅仅是可以采用的众多培养基的示例而并非意味着以任何方式限定本发明的范围。所述发酵在从大约101C到大约40TC的温度范围下进行；但是，为了达到最佳结果，优选在大约31-32TC下进行所述发酵。在所述发酵期间，所述营养培养基的pH值可以为大约5.5到大约7.5。应理解的是对于本发明化合物的发酵生产，本发明不限于使用ATCC登记号为202099的具体诺卡氏菌属菌种。尤其希望及意欲的是然或人工突变体，或者所述诺卡氏菌属的其他变种或种，只要它们可以制备本发明的化合物。可以通过常规的物理或化学诱变原来实现ATCC202099的诺卡氏菌属的突变种或林的人工生产，例如，所描述的菌种的紫外线照射，或者亚硝基胍处理，等等。还可以证明重组DNA技术例如原生质体融合、质粒插入、染色体片段插入等等是有用的。实施例1步骤la:用于制备化合物Ia、Ic、Id、Ie、If、Ih及Ii的发酵。在250hiL烧瓶中，将1mL诺卡氏菌属菌种ATCC202099(MA7332)的冷冻无性原种培养物(vegetativestockculture)接种到50mL种子培养基中，该培养基每升水包含以下组分淀粉20g、葡萄糖5g、N-Z胺(KerryBio-Science，HoffmanEstates,IL)3g、酵母提取物2g、Pharmamedia(TradersProtein,Memphis,TN)5g、碳酸钧lg。将所述培养物在321C下在以220rpm运转的旋转振动器上培养3天。在2L烧瓶中，将二十亳升所得到的培养物接种到500mL种子培养基中，该培养基包含针对以上所列的50mL培养物相同的组分。将所述培养物在32TC下在以180rpm运转的旋转振动器上培养l天。在30L发酵罐中，将所得到的500mL培养物接种到20L培养基中，该培养基每升水包含以下组分葡萄糖20g、蛋白胨5g、初生酵母10g、Allophosite(珪酸铝)5g、P2000防泡剂(是一种由DowChemical,Midland,MI制备的防止起泡沫的聚合材料)lmL。所述生产发酵在温度321C、背压5psi及搅拌速率300rpm下运行。空气以10slpm喷射通过所述发酵罐并用NaOH及H2S04#pH值控制在7.0。将所述发酵罐运行13天，在此时采集所述培养物，按步骤2a所描述的方法提取及分离化合物。步骤lb-l:用于制备化合物Ib的发酵在250mL烧瓶中，将1mL诺卡氏菌属菌种ATCC202099(MA7332)的冷冻无性原种培养物接种到50mL种子培养基中，该培养基每升水包含以下组分淀粉20g、葡萄糖5g、N-Z胺3g、酵母提取物2g、Pharmamedia5g、碳酸钾lg。将所述培养物在32匸下在以220rpm运转的旋转振动器上培养2天。在2L烧瓶中，将二十毫升所得到的培养物接种到500mL种子培养基中，该培养基包含针对以上所列的50mL培养物相同的组分。将所述培养物在321C下在以180rpm运转的旋转振动器上培养2天。在23L发酵罐中，将所得到的500mL培养物接种到15L培养基中，该培养基每升水包含以下组分可溶性淀粉25g、葡萄糖15g、酸水解酪蛋白7.5g、酵母提取物12g、大豆粕3.5g、牛肉提取物3.5g、防泡剂(P2000)lmL。所述生产发酵在温度32X:、背压5psi及搅拌速率300rpm下运行.空气以5标态升/分钟(slpm)喷射通过所述发酵罐并用NaOH及H2S04将pH值控制在7.0。将所述发酵罐运行10天，在此时采集所述培养物并按以下所描述的方法提取从而分离化合物Ib。步骤lb-2:用于分离化合物Ig的发酵在250mL烧瓶中，将1mL诺卡氏菌属菌种ATCC202099(MA7332)的冷冻无性原种培养物接种到50mL种子培养基中，该培养基每升水包含以下组分淀粉20g、葡萄糖5g、N-Z胺3g、酵母提取物2g、Pharmamedia5g、碳酸钩lg。将所述培养物在321C下在以220rp迈运转的旋转振动器上培养2天。在2L烧瓶中，将二十亳升所得到的培养物接种到500mL种子培养基中，该培养基包含针对以上所列的50mL培养物相同的组分。将所述培养物在321C下在以180rpm运转的旋转振动器上培养2天。在30L发酵罐中，将所得到的500mL培养物接种到20L培养基中，该培养基每升水包含以下组分葡萄糖20g、蛋白胨5g、初生酵母10g、Allophosite(硅酸铝)5g、P2000防泡剂(是一种防止起泡沫的聚合材料)2mL。所述生产发酵在温度32*C、背压5psi及搅拌速率300rpm下运行。空气以10slpm喷射通过所述发酵罐并用NaOH及H2S04将pH值控制在7.0。将所述发酵罐运行10天，在此时采集所述培养物并用乙酸乙酯提取从而回收化合物Ig。步骤2a:化合物Ia、Ic、Id、Ie、If、Ih及Ii的分离。在室温下，将18升发酵液(pH值=5.0)用各18及16升乙酸乙酯通过振摇过夜而提取两次。将所述乙酸乙酯层分离，合并并在减压下浓缩从而得到7.1克固体。将所述含水层过滤过硅藻土并将所述滤饼用各8升丙酮提取两次。将所合并的丙酮提取液浓缩至干从而得到15.6克固体，将其装载到烧结漏斗上而后用己烷(4x150mL)洗涤得到12.8克固体，将该固体悬浮在250mL的1:1二氯甲烷-甲醇中并过滤。将一小份35克的S印hadexLH20倾倒在所述滤液上而后在减压下将溶剂去除。将包衣有所述化合物的LH20粉末装载到填充在1:4己烷-二氯甲烷中的2.0升SephadexLH20柱的顶部上。将该柱用各2倍柱体积的1:4己烷-二氯甲烷(级份3)、2.5%甲醇-二氯曱烷(级份4-6)、1.5倍柱体积的5%甲醇-二氯甲烷(级份7-11)、1倍柱体积的10%甲醇-二氯甲烷(级份12-15)、各1.5倍柱体积的20(级份16-18)、50(19-21)以及最后用100%甲醇洗脱。将各级份基于TLC及分析型HPLC的分析结果合并得到级份1-21，如与所述洗脱溶剂一起列于括号中的。化合物Ia的分离将LH20级份3(l克)溶解于50%曱醇-二氯曱烷中而后吸附到5g硅胶60(230-400目，E-MScientific,Germany)上。将其在真空下干燥而后在20cmID烧结漏斗中的100g硅胶60(230-400目，E-MScientific,Germany)上使用真空液相色谱法进行纯化。将其用0.5L氯仿接着用lL10Vo甲醇-氯仿、0.5L20o/o甲醇-氯仿、1L50%甲醇-氯仿洗脱以及最后用在50%甲醇-氯仿中的5%氢氧化铵洗涤。将来自所述10%甲醇-氯仿洗脱的级份在减压下浓缩并冷冻干燥从而得到650mg固体物料，将其用制备型HPLC以13次相同的操作进行纯化，该13次相同的操作都使用ZorbaxSBPhenyl[(21x250mm)，使用包含0.1%TFA的40到50%乙腈-水以12mL/min的流速进行36min梯度洗脱。化合物Ia在32-33分钟洗脱。将其冷冻干燥从而得到42mg浅黄色粉状物质，将其进一步用2次制备型HPLC进行纯化，该制备型HPLC在ZorbaxSBPhenyl(21x250mm，使用包含0.1%TFA的40至50%乙腈-水以12mL/min进行42min梯度洗脱上使用变浅的梯度进行。化合物Ia在33-37分钟洗脱。将所述级份合并并冷冻干燥从而得到浅黄色粉末状的化合物Ia。化合物Ic的分离将在二氯曱烷中的5%甲醇中洗脱的LH-20级份07浓缩至干从而得到400mg物质，将其在预填充的烧结玻璃漏斗中进行硅胶层析处理(40g硅胶，EMscience,颗粒尺寸230-240mm，用各100mL的乙酸/甲醇/氯仿1:0:99、1:1:98、1:2:97、1:3:96、1:4:95，1:5:94(5xl00mL),然后用氢氧化铵/甲醇/氯仿1:7.5:91.5(100mL)、1:10:89(3xl00mL)、1:25:74(2x謂mL)、1:99:0(100mL)洗脱。将用最后300mL的l:5:94乙酸/甲醇/氯仿洗脱溶剂洗脱的级份合并并用氢氧化铵调节到pH值=7.0，浓缩至干，与水一同研磨，过滤，而后将所述滤液浓缩至干从而得到33.5mg物质，将其在制备型HPLC上进行色谱处理(YMCODS-AQ，20x250mm，5mL/min，含0.05%TFA的40-50%乙腈水溶液，经历60min，215nm)。将在46分钟洗脱的级份冷冻干燥从而得到化合物Ic。化合物Id的分离将如前文所描述的在23L发酵罐中成长7天的15L诺卡氏菌属菌种的发酵物用15L乙酸乙酯提取并过滤。将所述滤液用旋转蒸发器在减压下浓缩并冷冻干燥从而制备15g油状物质。将干燥的乙酸乙酯提取物(15g)溶解于50mL9(T/o甲醇-二氯甲烷中而后装载到2LSephadexLH20柱上并用甲醇-二氯曱烷(3:1)以5mL/min流速洗脱。收集四十亳升级份。所关心的化合物在级份21-36(0.8-1.4倍柱体积)中洗脱。将这些级份合并并浓缩至干从而得到4.5g油状物质。将其溶解于50%甲醇-二氯曱烷中并吸附到12g硅胶60(230-400目，E-MScientific,Germany)上。将其在真空下干燥而后在8.5ID烧结漏斗中的100g硅胶60(230-400目，E-MScientific,Germany)上使用真空液相色谱法进行纯化。将其用2L甲醇-水-二氯曱烷(3:0.025:97)洗涤并且化合物Id用2L曱醇-水-二氯甲烷(35:0.025:65)洗脱。将其在减压下浓缩并冷冻干燥从而得到1.8g固体物质，将其溶解于10%甲醇-二氯甲烷中并吸附到3gDiol(DL12S50，120A,s画50jimYMCCo.Ltd.Japan)上。将其在真空下干燥而后在150gDiol(DL12S50,120A，s曙50,YMCCo.Ltd.Japan)柱(1.75x8英寸)上以5mL/min流速纯化。将其用下列洗脱剂洗脱二氯曱烷，接着是甲醇-水-二氯曱烷(1:0.5:99)溶剂体系，其具有逐渐增加的甲醇百分比且以甲醇-水-二氯甲烷(15:1:84)结束，以及最后用(10:1:89)甲醇-氢氧化铵-二氯甲烷洗涤，收集50mL级份。将用最后的溶剂洗脱的级份合并从而得到48mg半纯化的级份，将其溶解于10%曱醇-二氯甲烷中而后预吸附到0.5g硅胶60(230-400目，E-MScientific,Germany)上并且在10g娃胶60(230-400目，E-MScientific,Germany)柱(0.5x8.5英寸)上以1.5mL/min流速纯化。将其用250mL氯仿，接着是含有逐渐增加百分比的甲醇的氯仿-氢氧化铵即，甲醇-氢氧化铵-氯仿2.5:0.125:97.5(600mL)、3:0.125:97(800mL)、5:0.125:95(歸mL)、10:0.125:卯(1.4L)、15:0.125:85(600mL)、25:0.125:75(200mL)、40:0.125:60UOOmL)洗脱。将包含化合物Id的级份用10:0.125:90(甲醇-氢氧化铵-氯仿)洗脱。将它们合并并在减压下浓缩且冷冻干燥从而得到4mg化合物Id。化合物Ie的分离将LH20级份16(432mg)溶解于氯仿/甲醇(1:1)中而后预吸附到2g硅胶上，并在减压下除去溶剂，接着将该粉末装载到填充有硅胶的烧结玻璃漏斗(25g，EMscience,颗粒尺寸230-240mm)上，安放在真空中，用各lOOmL的2.5%、5.0%、7.5%、10%、15%、20%、30%、50%、75%的甲醇/氯仿洗脱，最后用400mL100%甲醇洗涤。将所述甲醇级份浓缩从而得到84.4mg物质，将其进行制备型HPLC分级分离(YMCODS-AQ，20x250mm,lOmL/min,不含TFA的25-35%乙腈，经历40min，215nm)。将在25分钟洗脱的HPLC级份冷冻干燥从而得到粉末状的化合物Ie。化合物If的分离将在二氯甲烷中的5%甲醇中洗脱的LH-20级份07浓缩至干从而得到400mg物质，将其在预填充的烧结玻璃漏斗中进行硅胶层析处理(40g硅胶，EMscience,颗粒尺寸230-240mm，用各100mL乙酸/曱醇/氯仿1:0:99、1:1:98、1:2:97、1:3:96、1:4:95，1:5:94(5xl00mL)，然后是氬氧化铵/甲醇/氯仿1:7.5:91.5(100mL)、1:10:89(3xl00mL)、1:25:74(2xl00mL)、1:99:O(lOOmL)洗脱。将用最后的300mLl:5:94乙酸/甲醇/氯仿洗脱溶剂洗脱的级份合并并用氢氧化铵调节到pH值=7.0，浓缩至干，与水一同研磨，过滤，而后将所述滤液浓缩至干从而得到33.5mg物质，将其在制备型HPLC上进行色谱处理(YMCODS-AQ，20x250mm，5mL/min，含0.05%TFA的40-50%乙腈水溶液，经历60min，215nm)。将在31min洗脱的级份冷冻干燥从而得到化合物If。化合物Ih与Ii的分离将用50%曱醇-二氯甲烷洗脱的LH-20级份21(175.0mg)进行制备型HPLC处理，该制备型HPLC使用YMCODS-AQ，20x250mm柱，以10mL/min的流速，使用40分钟含有0.05%TFA的25-35%乙腈水溶液梯度，在214nm检测。将在22及31分钟洗脱的级份冷冻干燥从而分别得到粉末状的化合物Ii及Ih。化合物Ib的分离将来自如步骤Ib-l所描述的6个罐的100L发酵液用50L乙酸乙酯提取。将上部的乙酸乙酯层去除，而后将所述水层用硅藻土过滤。将所述乙酸乙酯提取液浓缩至干并与己烷一同研磨从而得到10g物质。将滤饼用2x20L丙鲷提取。在去除丙酮之后，将所沉淀的化合物过滤过烧结漏斗.将来自乙酸乙酯及丙酮提取物的固体合并并用己烷(500mL)洗涤而后溶解于l:1甲醇/二氯甲烷(500mL)中并过滤过烧结漏斗。将所述滤液浓缩至干从而得到42克固体，将其溶解于l:l二氯甲烷/甲醇(200mL)中，而后预吸附到50g硅胶上并装载到填充有550g硅胶的12x17cm烧结玻璃漏斗上，然后顺序用下列洗脱剂洗脱(500mL/级份，总计54级份)含有1%乙酸的1%甲醇/氯仿2L、含有1%乙酸的2%曱醇/氯仿1L、含有1%乙酸的3%甲醇/氯仿1L、含有1%乙酸的4%甲醇/氯仿1L、含有1%乙酸的5%甲醇/氯仿4L、含有1%乙酸的6%曱醇/氯仿1L、含有1%乙酸的7.5%曱醇/氯仿3L、含有l"/。氢氧化铵的7.5%甲醇/氯仿5L、含有1%氢氧化铵的15%甲醇/氯仿2L、含有1°/。氢氧化铵的30°/。曱醇/氯仿2L、含有1%氢氧化铵的60%甲醇/氯仿2L、含有1%氢氧^铵的100%甲醇3L。将级份30浓缩至干从而得到146.5mg粉末，将其进行制备型HPLC处理(ZorbaxSB-phenyl，21.2x250mm，12mL/min，含0.1%TFA的40-50%在水中的乙腈，经历45min,214nm)。将在39-40min洗脱的级份合并并冷冻干燥从而得到化合物Ib。化合物Ig的分离将步骤lb-2的十四升发酵液用14升乙酸乙酯提取。将所述混合物过滤并用各2升丙酮将所述细胞提取两次并合并。将所述丙酮提取物在真空下浓缩到1.5升含水液导致沉淀，将其过滤得到5.8克固体。将一小份五克所述固体溶解于甲醇-二氯甲烷中并加入5克硅胶。将所述溶剂在减压下去除从而得到粉末，将其加入到在99-1氯仿-乙酸中的2升烧结漏斗中的250克二氧化硅床的顶部。所述洗脱以如下洗脱剂进行各3倍体积的99-1氯仿-乙酸、99-1-1氯仿-甲醇-乙酸，接着是98-2-1、97-3-1、96-4-1、95-5-1、90-10-1及90-10-1氯仿-甲醇-氢氧化铵。将用溶剂组合物95-5-1洗脱的级份17及18合并(105mg)，溶解并加入到3-5g硅胶中而后浓缩至干。将其加入到15g硅胶干法填充的柱的顶部并用30倍柱体积的97-3-1氯仿-甲醇-水洗脱，总共155份，每级份6毫升。将级份首先经二氧化硅TLC分析而后通过HPLC试验选择级份。将级份21-50(20mg)加入到1g硅胶中并浓缩至干。将其加入到15g硅胶干法填充的柱的顶部并用48倍柱体积的98-2-1氯仿-甲醇-水洗脱，总共240份，每级份6毫升。将级份180到210合并并浓缩至干从而得到3.2mg主要是Ig的物质，将其在具有多重进样的Zorbaxphenyl半制备型HPLC柱(9.4x250mm)上使用伴随2min保持(hold)的21分钟40-60%乙腈水溶液梯度洗脱来进一步纯化。将在14分钟洗脱的级份合并并冷冻干燥从而得到化合物Ig。步骤3:Ia-Ie的物理化学特性通过使用质谱、NMR及"CNMR来确定化合物Ia、Ib、Ic、Id、Ie、If、Ig、Ih及Ii的结构。化合物Ia:分子量1434分子式C6iHmNmO，,S5HRES1MS(m/z):1435.2696(对M+H的观察值)，1435.2734(计算值)UV(曱醇)X"(loge)222(4.77)，288(4.40)，358(4.08)nmIR(净的)v鹏3389,3096,2929,1669,1638,1535,1476,1424,1387，，320,1253,1203,1229,1099,1038，1016cm.'1HNMR(CDC13+CD30D)5ppmS8.38(1H,d'A10Hz),8.31(1H,s),8.27(1H,s),8.21(1H,s),8.08(IH,d,J-11.5Hz),7.93(1H，s),7.76(IH,d,/一8.5Hz),7.68(IH,s),7.64(IH,s),7.36(1H,^/=8.5Hz),7.16(IH,<U-7.0他),6.58(IH,s),5.96(1Hd,J=12.0Hz),5.3(1H，(!，/=10.0Hz),5.70(IH,m),5.59(IH,s),5.26(旧,m),5.04(1H,t,/=7.0Hz),4.97(IH,d,J=5.0Hz),4.91(1H,d,>/-12.5Hz),4.84(IH,d,7-10.0Hz),4.40(1H,d,9.5Hz),4.24(lJim),4.19(，H,d,J-5.5他),4,16(IH，d,12.0Hz)，3.87(IH,d'6.0Hz)，3.81(3H,s)，3.56(1H，10.5Hz),2.91(1H,m),2.70(IH^^^GH'dd^-16.0,5.5Hz),1.卯(3H,s),I.MUH.dd^-15.0,7.0Hz)，1.40(3H，s)，1.39(3H，6.0Hz),0.72(3H,d,6.5Hz)."CNMR(CDCI3+CD30D)5172.0,169.7,169.4,167.8,166.6,166.2,165.5，，62.3162.0,161,7,161.6,160.6,159.5,158,8,155.3,151.7,149.9，149.8,149.3,146.1,144.1，135.5,134.8，133.1,130.3,127.9,126.9,126.6,125.7,125.4,124.9,124.3,124.0,120.5,，19.6,112.4,110.5,110.1,104.3,93.9,84.8,81.6,72.0,70.0,68.3,66.3,64.7,64.2,64.2,56.5,55.9,41.3,35.9,25.4，18.2,16.3,13.8.化合物lb:分子量1448分子式CH6oN,40,,SsUV(甲醇+THF,l:l)X^222(e52736)'288(e23110),362(e9383)IR(ZnSe)v鹏3387,2978，1742,1667(br,强)，1531,1475,1422,1320,1252,1200，，128,1097,1070,1025,832,801,72WHRESIMS:，449.2930(对M+H的观察值),1449.2892(对M+H的计算值)HNMR(CDCI3+CD30D)8(ppm):8.39(IH,d,J=10.8Hz),8.33(IH,brs),8.24(IH,brs),8.21(1H,s),8.10(旧,10.9Hz),7.93(IH，s),7.94(IH，brs),7.76(IH,7.2Hz),7.69(1H,s)'7.62(IH，brs)，7.37(1H>7.0Hz),7.13(1H，d,7.0Hz),6.57(IH,brs〉，5.98(1H,m),5.96(1H,m),5.67(IH,dd,J-10.1,5.1Hz),5.58(IH,brs),5.27(IH,eld,)-10.1,5.1Hz),5.07(IH,6.3Hz),4.93(IH,d,J=12.3Hz),4.84(旧,d,J=10.1Hz),4.46(IH,brs),4.43(1Hd,/=9.1Hz)，4.41(1H,d,/=10.9Hz),4.22(，H,brs),4.17(IH，d，>10.3Hz),3.93(IH,q,/-6.5Hz),3.S1(〗H，d,J-10.0Hz),3.80(3H,s)，3.00(IH,brs),2.94(IH，brs),2.73(3H,s)，2.41(IH,dd,J-15.7,S.SHz),1.89(3H,s),1.80(IH,dd，J-15.7,7.8Hz),1.45(3H,brs),1.40(3H,brs),1.39(3H，s),0.75(3H,d,/=6.1Hz).'3CNMR(CDC13+CD30D)S(ppm)171.4,169.3,169.，167.4,166.3,165.9,165.1,62.1,161.7,161.4,161.3,160.3,159.2,158.4,155.0,151.3，149.6,149.5,148.9,145.8,143.8,135.2,134.4,132.8,129.9,，27.5,126.6,126.3，，26.3,125.4，124.9,124.3,124.0,123.7,120.，119.3，111.9,110.1,109.7,103.7,93.1，91.9,81.0,79.3'72.6,69.2,67.1,65.9,64.1,64.1,63.5,56.0，55.3,48.7,48.4,39.6'35.4,24.8,17.5,15.，，14.5,13.3.化合物Ic:分子量1409分子式C5HNl30,jS5HRESIMS:1410.2429(对m+h的观察值)，1410.2419(对m+h的计算值)，HNMR(CDC13+CD30D)58.31(1H,s),8.29(1H，s)，8.24(1H,s),8.00(1H,s),7.83<U=8.6Hz),7.69(1H,s),7.66(H,s),7.42(IH,dd,8.6,7.0Hz),7.16(IH,d,/=7.0Hz),6.62(IH,s),6.07(IH,d，/=12.3Hz)，5.81(，H,brd乂-9.1Hz),5.69dd,10.2,5.4Hz),5.54(IH,s),5.30(IH,dd,J-11.3,5.9Hz),4,95(，H,d，J-12.3Hz),4.卯(1H,d,■/■=10.7Hz),4.89(IH,d,>/=4.3Hz),4.44(IH,dd,/=11.3,9.7Hz),4.42(1Hd,J豕10.2Hz),4.28(1H,d乂-4.3Hz),4.23(1H，d,/=10.7Hz),3.91(IH,(U-10.2Hz),3,83(3H,s)，3.35(IH,m),3.05(llicU=9.7Hz),2.93(IH,m)，2.17(1H,d,13,9Hz),1.91(3H,s)，1,89(1H,<!，/-13.9Hz),1.49(3H,s),1,39(3H,d,J-6.4Hz),0.67(3H,d，<7=6.4Hz).化合物Id:分子量1351分子式C"HsgN，30,6S5ESIMS:)352(对m+h的观察值)，lHNMR(CDCl3+CD3OD)5(ppm)8.44(IH,d,J-9.5Hz),8.38(1H,s),8,29(1H,s),8.25(IH，s),8.00(IH,s),7.83(IH,d,10.5Hz),7.74(1H,s),7.71(IH,(!,/-8,5Hz),7.60(1H,s),7.39(2H,m>,7.16<1H，d,J-9.0Hz),6.15(IH,<!,/=12.5Hz),5.82(，H,brd^-8.0Hz),5.76(1Hdd,J豕11,4Hz),5.38(IH,dd,J-，1,4.5Hz),5.16(1H,d,J-10Hz),5.05(IH,d,J-5Hz),4.95(IH,d,/=12.5Hz);4.65(IH,d,J頃11.5他),4.43(IH,d,9.5他),4.30(IH,m),4.21(IH,d,/=10Hz),3.99(IH,brd,/=6Hz),3.94(IH,dd,■/9.S,UHz),3.86(3Hs),2.60(6Hs),2,29(，H,m),2.07(IH,d,/14.5Hz),1.97(lH,m),1.95(3H，s),1.57(3H,s),.32讽6Hz),0.78(3H<U=7Hz)化合物Ie:分子量1253分子式C5oH"NuOwS5UV(甲醇+THF,1:1)^w224(e60244),364(e11502)IR(ZnSe)v鹏3368,1657(br,强)，1536,1479,1423,1321,1251，1124，1025,887,761cm1HRESIMS:254.2551(对m+h的观察值)，1254.2571(对m+h的计算值)lHNMR8(ppm):10.08(IH,s,NH),9.55(IH,brs,NH)，8.61(1H,brs,NH),8.55(IH,s),8.51(IH,d,8.8HaNH),8.43(1H,s),8.35(IH,s)，8.19(IH,s),8.05(IH,brs,NH),7.59(IH,brs,NH),7.87(IH,s),7.81(1H，s),7.38(1Hbrs,NH),5.72(IH,brs),6.35(1H,brs)，5.66(1H，dd,/=9.3,2.7Hz),5.26(1H,ddd,J-9.3,9.3,4.4Hz),5.12(1H,brs),4.78(IH,brs),4.66(IH,7.9Hz),4.55(H,brs),4.02(IH,m),4.00(1Hm>,3.88(3H,s>,3.72(IH,m),3.50(IH,t^J-10.2Hz),3.70(，H,m),2.60(6H,s),2.36(IH,brs),2.02(3H,s),1.88(IH,dd，J-13.6,3.4Hz),1.74(1Hd,J-,3.6Hz),1.46(3H,s),1.30(3H,d,/=5.7Hz),0.95(3ft(!，■/=6.2Hz).13CNMR(DMSO-D6)5(ppm)171.7，169.3,169.2，168.8,166.7，165.1,164.2,162.2,160.8，160.5,160.1,160.0,158.5,153.6,151.5,149.9,149.4,149.2,146.6，141.6,135.1，134.3,129.5，127.2,127.1,125.4,124.8,123.0,118.4,110.2,103.5,94.4，72.7,72.4,69,4,68.4,67.2,65.1,62.1,56.0,55.7,52.9,49.6,44.1,40.1,30.1,20.9,18.2,12.7化合物If:分子量1249分子式CS2H43N,3015SjHRESIMS(m/z):1250.1670(对M+H的观察值)，1250.1683(对M+H的计算值)'HNMR(CDCI3-CD3OD)S(ppm)10.7(IH,brs,NH),9.7(旧,s,NH),8.32(IH,s),8.31(IH,d,9.7Hz),8.23(IH,s),8.18(1Hs)，8.的(IH,brs,OH),7.92(s),7.81(1H,d,/=10.8Hz),7.72(IH,s),7.61(IH,d,■/=8,5Hz)，7.57(1H,s),7.30(IH,m),7.30(1H,d,J-7.5Hz)，7.07(IH,d，/=7.0Hz),S.99(IH,d,12.3Hz),4.93(1H,d,/=12.6Hz),5.95(IH,dd9.6,1.8Hz),5.70(IH,dd,/，11,0'3.9Hz)，5.57(1H<!,/=1,7Hz)，6.52(旧,UHz)，5.31(1Hdd,Js11,8,4.4Hz),4.59(IH，d,/=11.4Hz)，5.07(IH,d,10.1Hz),4.08(IH，d,</=10.0Hz),4.21(1Hb喊</7.4Hz),4.20(1H，d,/-9.3Hz),3.74(3H,s),3.65(1Hdd,9,6,1.9Hz),1.85(3Hs),，.85(1H,m),1.25(3H,d,6.3恥'3CNMR(CDCIrCD3OD)S(ppm)174.4,169.3,168.2,168.2,166.4,166.3,165.7,164.3,161.8,161.7,161.4,159.2，159.2,158.5,154.9,151.6,150.1,149.4,149.1,146.0,142.6,136.4,134.2,132.8,129.5，127.0,126.3,125.9,125.9,124.3，124.1,，24.1,123.6,123.4,122.8,119.3,115.8，115.8,110.0,103.7,81.4,68.0,67.3,66.2,64.4,62.0,55.3,54.6,50.7,49.2,17.6,12.9.化合物Ig:分子量1196分子式CwH4oNuOi5SsHRESIMS(m/z):1197.1420(对M+H的观察值)，1197.1412(对M+H的计算值)'HNMR(DMS(We):S(ppm)10.83(IH,s),8.95(1H,s),8.64(IH,s)，8.56(IH,s),8.51(IH,s),8.45(IH,s),8.38(IH,d,风5Hz),8.24(IH,s),7.99s),7.91(IH,d,■/=11Hz),7.86(1H>s),7.71(，H,sbr〉,7.70，(Hsbr)，7.38(IH,8.0Hz),7.34(1H,t,J-8.0Hz),7.17(H,a,/-7.0Hz),6.08(IH,d,J-7.0Hz),5.92(1H,d,J。12.0Hz),5.87(IH,d,/9.5Hz),5.75(IH,s),5.74(1H,m),5.22(IH,m),5.02(IH(!,■/=12.0Hz),4-69(lH,d,/-10.5Hz),4.53(1H>m),4.卯,(IH,10.5Hz),4.20(IH，m),4.10(出,m),4.02(IH,9.5,7.5〉,3.88(31^s)，3.73(IH,d,/9.5Hz),2.53(，H,m),12,9(3H,s),1.16(3H,sbr)."CNMR(DMSCX)S(ppm)174.3,167.9,167.9,167.7,167.6,，63.8,162.7,61.0,160.9,160.2,160.2,159.1,157.8,157.5,150.9,150,6,149.4,148.6,45.9,143.1,134.8,134.4,130.0,128.4，127.4，，26.7,126.2,125.4，125.0，124.0，122.9,120.0，119.4,，2.3，1",2,109.7,8.3,67.7,67.1,65.1,64.3,63.1,56.0，55,7,49.5,49.3,17.8,13.0.化合物Ih:分子量1082分子式C"HmO"NuS5HRESIMS(m/z):1083.1277(对M+H的观察值),1083.1312(对M+H的计算值)'HNMR(DMSarf)8(ppm)8.59(1H,s)，8.45(IH,s),8.40(1H,s),8.20(1H,s),7.92(llis),7.86(1Hs),6.34(IH,s)，5.88(1H，dd,9.7,2.5Hz)，5.74s),5.32(1H，ddd,9.5，9.5,5,2Hz),4,66(IH,bd，/-8.8Hz),4.05(IH,bs),3.89(3H,s),3.73(IH,dd,J=11.1,4.4Hz),3.68(1H，brs),3.60(1H，brs),3.51(IH,10.2Hz)，2.05(3H,s),O.卯(3H,d,J-6.5Hz)l3CNMR(DMSCk/6)8(ppm〉173.6,169.4,169.4,169.1，167.1,165.1,164.0,162.2,，60.5,160.5,160.4,160.4,158.4，153.4,150.8,，49.8,149.8,149,2,146.6,142.6,135.1,，34.3,129.6,127.3,127.1,125.7,125.5，123.5,119.0，110.0,103.8,73.6,71.5，66.1,62.2,56.3,55.8,53.1，49.7,16.9，12.7.化合物Ii:分子量10，3分子式:C3，H3:0，3N，，SsHRESIMS(m/z):1014.1073(对M+H的观察值),1014.1097(对M+H的计算值)'HNMR(DMSO匈8(ppm)8.56(1H,s),8.45(IH,s),8.39(1H,s),8.19(1Hs),7.94(IH,s),7.84(IH,s),5.86(IH，brd,9.4Hz),5.31(IH,m),4.65(IH,bd,7.3Hz〉,4.03(1Hm),3.88(3H,s),3.77(IH,m),3.73(IH,m),3.59(1H,m),3.49(IH,m),2.03(3H,s),0.88(3H,d,/-6.5Hz).用来测定化合物I的抗菌活性的流程描述如下。材料阳离子调节的MuellerHinton肉汤(MH;BBL)50。/。溶解马血(LHB;BBL)(冷冻储藏)RPMI1640(BioWhittaker)人血清(Pel國Freez)RPMI1640(BioWhittaker)嗜血杆菌属试验培养基(HTM，Remel)胰蛋白酶解酪蛋白大豆肉汤(TSB，5mL/管；BBL)0.9%氯化钠(盐水；Baxter)胰蛋白酶解酪蛋白大豆+5%绵羊血琼脂平板(TSA;BBL)Sabouraud葡萄糖琼脂平板(BBL)巧克力琼脂平板(BBL)2X脱脂乳(Remel)Microbank珠(KramerScientific)MIC2000微量滴定板接种器2X胰蛋白酶解酪蛋白大豆肉汤(TSB，BBL)+15M甘油/50%马血清96-孔微量滴定板，盖子，接种盘(DynexLaboratories)8-通道Finn多道移液器，0.5-10jiL体积方法培养基制备阳离子调节的MuellerHinton肉汤(BBL):根据制造商说明书制备(22克溶解于lOOOmL水中；高压灭菌22分钟)。冷藏储藏。在使用前使用Corning0.45Tm醋酸纤维素滤纸过滤消毒。50%溶解马血将去纤维蛋白的马血用无菌蒸馏水l:l稀释；冷冻，解冻及再冷冻(至少7次)，然后离心。在-20TC下冷冻储藏。阳离子调节的MuellerHinton+2.5%溶解马血将5mL50%溶解马血无菌地加入100mL阳离子调节的MuellerHinton肉汤中。在使用前使用Corning0.45Tm醋酸纤维素滤纸过滤灭菌。阳离子调节的MuellerHinton+50%人血清将50mL人血清无菌地加入50mL2X阳离子调节的MuellerHinton肉汤中。在使用前使用Corning0.45Tm醋酸纤维素滤纸过滤灭菌。嗜血杆菌属试验培养基(Remel):接受由制造商制备的。在使用前使用Corning0.45Tm醋酸纤维素滤纸过滤灭菌。0.9%氯化钠(盐水；AbbottLabs):接受由制造商制备的。2X脱脂乳(Remel):接受由制造商制备的。所有琼脂平板接受由制造商制备的。<table>complextableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>所侧视抗生素的最高浓度=64μG/ML(当从50%DMSO中的一MG/MLSOL'N开始时)各孔DMSO的最终浓度=3.2%分离物的选择及保存所使用的菌林是来自Merck培养物保藏中心(MerckCultureCollection)、Merck临床培养物保藏中心(MerckClinicalCultureCollection)或者来自临床检验所(ClinicalTrials)的分离物。流感嗜血杆菌林是一种在Merck用于体内试验的小鼠病原体。大肠杆菌林是一种细胞壁可渗透的林。白色念珠菌林用作对照。这些培养物在-80lC下以冷冻原种方式保存在a)Microbank珠；b)2X脱脂乳；或者c)2X胰蛋白酶解酪蛋白大豆肉汤+15%甘油/50%马血清(嗜血杆菌属及肺炎链球菌)中。接种物制备将所选择的分离物传代培养(sub-culture)到巧克力琼脂平板上(流感嗜血杆菌)、到胰蛋白酶解酪蛋白大豆+5%绵羊血琼脂平板上(肺炎链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、肠球菌、芽孢杆菌)或者到Sabouraud葡萄糖琼脂上(念珠菌)并在35TC下培养。将嗜血杆菌及肺炎链球菌在5%C02中培养；将所有其他分离物在环境空气中培养。在检测以前将分离物传代培养2X。从平板上选择菌落并用于制备相当于在胰蛋白酶解酪蛋白大豆肉汤中的0.5McFarland标准品的接种物。对于肺炎链球菌制备密度相当于1.0McFarland标准品的接种物。所有培养物的接种物密度都为在TSB中的~108CFU/mL。将该TSB接种物在无菌盐水中进行1:10稀释(4mL接种物+36mL盐水；相当于~107CFU/mL)并保存在冰上直到用于接种微量滴定板。在随机选择的分离物上进行菌落计数从而确定CFU/孔(TSB接种物以l(T5、10"涂布到TSAII+57。SB上或者到巧克力琼脂平板上，培养过夜，351C，C02)平板填充将96-孔微量滴定板(Dynex)的所有孔填充以100TL培养基。制备嗜血杆菌属试验培养基平板来测试流感嗜血杆菌；制备阳离子调节的MuellerHinton+5%溶解马血平板来测试肺炎链球菌；制备阳离子调节的MuellerHinton肉汤平板来测试肠球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌及枯草芽孢杆菌。将RPMI1640用于测试念珠菌。在阳离子调节的MuellerHinton中及在阳离子调节的MuellerHinton+50%人血清中测定抗51.Smith的MICs从而确定所述化合物是否会由于血清中的一些成分而失活(由MIC的增加表明)。将填充了的平板包裹在塑料袋中(以使蒸发最小化)，冷冻储藏并在使用前解冻。化合物的制备所述化合物以重量为基础制备。在100%DMSO中将化合物制备成2-10mg/mL，然后在1:1稀释度的DMSO/2xCAMHB(最终浓度=50%DMSO/50%CAMHB)中稀释至1mg/mL。将化合物在BDBiosciences深孔聚丙烯96孔板中在50%DMSO/50%CAMHB中做1:l连续稀释(起始浓度l-5mg/mL)。微肉汤(MICROBROTH)稀释测定使用Finn自动多通道移液管(0.5-10nL体积)将6.4TLs的抗菌剂工作溶液加入到已填充了的微量滴定板的孔中(在笫一孔中的抗菌剂浓度=512-64微克/毫升；DMSO浓度=3.2%)。抗菌剂以这样的方式加入从而使DMSO在各孔中的量保持不变(以保持化合物呈增溶状态并对被DMSO非特异性杀灭的可能性作出说明)。最后一排包含3.2%DMSO的生长对照。每个试验都设有对照。它们是青霉素G及氯霉素，用与所述化合物一样的方法制备。所述血清蛋白结合试验的对照包括厄他培南(ertapenem)。平板接种用MIC2000系统将(盐水稀释的)培养物接种到微量滴定板的所有孔中，所述MIC2000系统是一种自动平板接种装置，其向各孔输送1.5TL接种物。将各板在35TC下在环境空气中培养。同时培养未接种的平板作为无菌性验证。在22-24小时的培养之后记录结果。各板读数为无生长。所述MIC定义为导致在22-24小时培养之后无生长的最低抗菌剂浓度。化合物Ia-Ii显示抗金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、屎肠球菌、枯草芽孢杆菌及肺炎链球菌的各种菌林的抗菌活性。化合物Ia-Ii还显示抗各种耐许多已知抗生素的菌林的抗菌活性例如耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)、耐万古霉素的肠球菌属菌种(VRE)、耐多药的屎肠球菌、耐大环内醋的金黄色葡萄球菌及表皮葡萄球菌印Me/7mVfe)以及耐利奈唑胺(linezolid)的金黄色葡萄球菌及屎肠球菌。对于这些试验菌林的最低抑菌浓度(MIC)值介于从0.01到200ug/mL的范围。MICs是按照NCCLS指南获得。权利要求1.一种结构式I的化合物id="icf0001"file="A2005800318520002C1.gif"wi="113"he="80"top="42"left="22"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>或其药学上可接受的盐、酯、对映异构体、非对映异构体或混合物，其中R表示-C(O)NH2、-C(O)NHC＝CH2C(O)NH2；R1、R2及R3独立地表示OH；或者R1、R2及R3合起来表示id="icf0002"file="A2005800318520002C2.gif"wi="73"he="49"top="175"left="62"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>R4表示OH，id="icf0003"file="A2005800318520003C1.gif"wi="114"he="36"top="29"left="49"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>以及R5表示氢或OH。2.—种化合物，其为:<formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage3</formula><formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage4</formula><formula>complexformulaseeoriginaldocumentpage5</formula>或其药学上可接受的盐、酯、对映异构体、非对映异构体或混合物。3.—种用于制备权利要求l的结构式I化合物的方法，其包括在营养培养基中培养ATCC登记号为202099的诺卡氏菌属菌种或者其天然或人工突变体以及从发酵液回收结构式I的化合物。4.权利要求3的方法，其中所述发酵在大约IOTC到大约40TC的温度下进行。5.权利要求4的方法，其中所述发酵在大约31-32TC的温度下进行。6.—种药物组合物，其包含药学上可接受的载体以及有效量的权利要求l的结构式I化合物。7.权利要求1的式I化合物用于制造在需要治疗的主体中治疗细菌感染的药物的用途。全文摘要诺卡氏菌属菌种(Nocardiaspp.)与营养培养基发酵得到结构式(I)的新广谱抗生素化合物或药学上可接受的盐、酯、对映异构体、非对映异构体或混合物。文档编号A61K31/00GK101198318SQ200580031852公开日2008年6月11日申请日期2005年9月16日优先权日2004年9月22日发明者C·张,H·贾亚苏里亚,J·F·巴雷特,J·G·安迪卡,K·B·赫拉思,P·S·马苏雷卡,S·B·辛申请人:默克公司