Hcv抑制性双环嘧啶的制作方法
专利名称：Hcv抑制性双环嘧啶的制作方法
技术领域：
本发明涉及双环嘧啶作为HCV复制抑制剂的用途以及其在用于治疗或对抗HCV感染的药物组合物中的用途。另外，本发明涉及用于制备这些药物组合物的方法。本发明还涉及本发明双环嘧啶与其它抗HCV剂的组合。
自从1989年被发现为涉及大多数病毒非A，非B肝炎的试剂(Choo等人，Science 244，359-362，1989)，肝炎C病毒(HCV)已成为许多医学研究的重点(Lauer，G.M和Walker，B.D.，New Eng.J Med.345，41-52，2001)。HCV是肝炎病毒类病毒的黄热病毒属，和与包括许多涉及人疾病的病毒，如登革病毒和黄热病毒的黄热病毒类，和与包括牛病毒腹泻病毒(BVDV)的动物pestivirus属密切相关。HCV是正向，单束RNA病毒，具有约9,600bp的基因组。基因组包含呈现RNA二级结构的5′和3′未翻译区域，和编码约3,010-3,030氨基酸的单个聚蛋白质的中心开放读取架构。聚蛋白质编码通过以宿主和病毒蛋白酶为媒介的或一系列被精心安排的同时和后翻译内蛋白水解裂解而由前体聚蛋白质生成的十个基因产物。病毒结构蛋白质包括核壳包核酸蛋白质，和两个被膜糖蛋白E1和E2。非结构(NS)蛋白质编码一些基本病毒酶功能(解螺旋酶，聚合酶，蛋白酶)，以及未知功能的蛋白质。病毒基因组的复制以RNA依赖性RNA聚合酶为媒介，后者由非结构蛋白质5b(NS5B)编码。除了聚合酶，都在双功能NS3蛋白质中编码的病毒解螺旋酶和蛋白酶功能已经表现出对于黑猩猩感染模型中HCV RNA复制的必要性(Kolykhalov，A.A.，Mihalik，K.，Feinstone，S.M.，和Rice，CM.J Virol.74，2046-2051，2000)。除了NS3丝氨酸蛋白酶，HCV还编码NS2区域中的金属蛋白质酶。
HCV优先在肝细胞中复制但不是直接细胞变性的，导致持续感染。尤其是，剧烈T-淋巴细胞响应的缺乏和高病毒变异倾向似乎促进高比率的慢性感染。有6种主要的HCV基因型和超过50种的子型，地理上各异地分布。1型HCV在美国和欧洲是主要的基因型。例如，1型HCV占美国所有HCV感染的70至75％。HCV的广泛遗传性蛋白异质性具有重要的诊断和临床意义，可解释疫苗发展的困难和对治疗响应的缺乏。世界上估计1.7亿人被肝炎C病毒(HCV)感染。在起始急性感染之后，大多数感染的个体产生慢性肝炎，可发展成肝纤维化，导致肝硬化，晚期肝疾病，和HCC(肝蜂窝癌)(National Institutesof Health ConsensusDevelopment Conference StatementManagement of HeptitisC.Heptology，36，5 Suppl.S3-S20，2002)。由于HCV感染的肝硬化是仅美国每年死亡约10,000人的原因，而且是肝移植的主要原因。HCV的传输可通过与污染的血液或血液制品接触而进行，例如在输血或静脉内药物使用之后。用于血液筛选的诊断试验的引入导致输血后HCV发病率的下降趋势。但如果缓慢发展成晚期肝疾病，现有感染数十年来仍表示一种严重的医学和经济负担(Kim，W.R.Heptology，36，5 Suppl.S30-S34，2002)。
对该慢性疾病的治疗是一种未满足的临床需要，因为目前的治疗仅部分有效且受不受欢迎的副作用的限制。
目前的HCV治疗基于与利巴韦林相结合的(聚乙二醇化)干扰素-α(IFN-α)。该组合治疗对于基因型1病毒所感染的40％以上的患者和基因型2和3所感染的约80％以上的病人产生持续的病毒响应。除了对HCV型1的局限效力，组合治疗具有明显副作用和对许多患者的耐受不好。例如，在聚乙二醇化干扰素和利巴韦林的登记试验中，明显副作用导致约10至14％患者的不连续治疗。组合治疗的主要副作用包括流感状症状，血液异常，和神经精神病症状。公共卫生的一个主要目标是开发更有效的，适宜的和耐受的治疗。因此，医学上非常需要能够抑制HCV复制的低分子量化合物。通过抑制HCV复制，可快速降低被肝炎C病毒感染的病人的病毒负荷。病毒负荷的下降证实了HCV抑制剂的临床抗病毒活性的原理。通过保持病人的低至未可检测水平的病毒负荷，疾病发展得到延迟或甚至停止，避免因此产生慢性肝炎，肝纤维化，肝硬化，晚期肝疾病，和HCC(肝蜂窝癌)。
病毒，和尤其是HCV病毒针对抑制剂的耐性也是治疗失败的一个原因。接受抗HCV治疗的许多患者不完全对该治疗作出反应，主要由于病毒对一种或多种所用药物的耐性。另外有人指出，耐性病毒被传送至新感染的个体，导致严重限制了这些新用药患者的治疗方案。因此本领域需要用于抗病毒治疗，更尤其用于肝炎治疗的新化合物。本领域尤其需要不仅对野生型HCV病毒，而且对越来越常见的耐性HCV病毒有活性的化合物。
用于本发明的化合物是嘧啶或三嗪的衍生物。PCT出版物WOO1/47921描述了嘧啶和三嗪化合物，它们是与各种炎症症状相关的激酶活性的抑制剂。另外，PCT出版物WO00/12497和WO02/076976描述了喹唑啉衍生物，它们是TGFβR受体激酶和TGF-β为媒介的信号传送的抑制剂。
WO04/087056涉及TGF-β的双环嘧啶抑制剂，其中嘧啶核在(5)和(6)位被桥接和进一步在位(2)和(4)上被包含芳族部分的取代基取代。这些化合物可通过抑制TGFβ活性以缓和症状而治疗被试者。
WO03/097615涉及治疗与TGF-β信号传送有关的增生病症的方法，其中将TGF-β的非肽小分子抑制剂具体地结合至型I TGF-β受体(TGFβ-R1)上。抑制剂是喹唑啉衍生物。
WO04/065392涉及缩合吡啶和嘧啶和其作为ALK-5受体配体的用途。这些化合物是治疗活性的，尤其用于治疗或预防特征通过转化生长因子β(TGF-β)的过度表达的病症。公开了用于这些治疗的药物组合物。
WO03/078426公开作为蛋白质激酶抑制剂的唑基氨基吖嗪，包含所述化合物的药物可接受组合物，和使用该组合物治疗各种疾病，症状，或病症的方法。
WO03/078427公开作为蛋白质激酶抑制剂的唑基氨基吖嗪，包含所述化合物的药物可接受组合物，和使用该组合物治疗各种疾病，症状，或病症的方法。
WO2003077921公开作为蛋白质激酶抑制剂的吖嗪基氨基吡咯，包含所述化合物的药物可接受组合物，和使用该组合物治疗各种疾病，症状，或病症的方法。
WO03/078423公开可用作蛋白质激酶抑制剂的化合物，包含所述化合物的药物可接受组合物，和使用该组合物治疗各种疾病，症状，或病症的方法。
WO02/22601描述了用于治疗疾病如癌，糖尿病和阿耳茨海默氏疾病的吡唑组合物，包含药物可接受载体和可用作蛋白质激酶抑制剂，尤其aurora-2和GSK-3的抑制剂的化合物。
发明公开本发明化合物是包含稠环桥接位5和6的嘧啶衍生物。该化合物具有结构式 或其药物可接受盐，其中嘧啶环稠环桥接位5和6是饱和，不饱和或芳族的。稠环是视需要取代的环和包含4-7个环原子，其中每一环原子独立地是C，N，O或S。但如果所述稠环包含6个环原子，它不是芳族的。每一Ar1和Ar2独立地是视需要取代的芳族部分或视需要取代的杂芳族部分，其中所述杂芳族部分包含一个或多个O，S，和/或N；通常这些部分包含5-12个环原子。
R1是H，或视需要取代的烷基(1-10C)，链烯基(2-10C)，或炔基(2-10C)。
可用于本发明的化合物是嘧啶的衍生物，包含在5-6位上的桥和在对应于嘧啶的2-和4-位的位置上的指定取代基。进一步，非干扰性取代基也可被包括。
本发明涉及下式化合物 或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6是包含4-7个环原子的视需要取代的饱和，不饱和或芳族环，其中X是选自N，O，或S的原子；n是0，1，2，或3；每一Ar1和Ar2独立地是视需要取代的芳族部分或视需要取代的杂芳族部分，其中所述杂芳族部分包含一个或多个O，S，和/或N，和这些芳族或杂芳族部分包含5-12个环原子；
R1是H，或视需要取代的烷基(1-10C)，链烯基(2-10C)，或炔基(2-10C)；前提是如果桥接嘧啶环的位5和6的所述稠环包含6个环原子，那么它不是芳族环；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性，防止或治疗与HCV有关的症状。
在本发明的一个实施方案中，提供了具有结构式(1)的化合物用于制造药物的用途，所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于防止趋向慢性肝炎，肝纤维化，肝硬化，晚期肝疾病，HCC(肝蜂窝癌)和类似疾病的疾病发展。
在本发明的一个实施方案中，提供了具有结构式(1)的化合物用于制造药物的用途，所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于治疗慢性肝炎，肝纤维化，肝硬化，晚期肝疾病，HCC(肝蜂窝癌)和类似疾病。
可用于本发明的化合物是嘧啶衍生物，包含在5-6位上的桥和在对应于嘧啶的2-和4-位的位置上的指定取代基。进一步，也可包括非干扰性取代基。
在本发明的一个实施方案中，Ar1和Ar2分别独立地是视需要取代的芳族部分或视需要取代的杂芳族部分，其中所述杂芳族部分包含一个或两个O，S，和/或N，和这些芳族或杂芳族部分包含5-12个环原子。
在一个实施方案中，本发明涉及下式化合物 或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6是包含5或6个环原子的视需要取代的饱和，不饱和或芳族环，其中X是选自N或O的原子；n是0，1，或2；每一Ar1和Ar2独立地是视需要取代的芳族部分或视需要取代的杂芳族部分，其中所述杂芳族部分包含一个或两个N，和这些芳族或杂芳族部分包含5-7个环原子；R1是H，或视需要取代的烷基(1-10C)；前提是如果所述嘧啶环的稠环桥接位5和6包含6个环原子，那么它不是芳族环；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性，防止或治疗与HCV有关的症状。
在一个实施方案中，本发明涉及下式化合物 或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6是包含5或6个环原子的视需要取代的饱和，不饱和或芳族环，其中X是选自N或O的原子；n是0，1，或2；每一Ar1和Ar2独立地是视需要取代的苯基或视需要取代的吡啶基；R1是H，或视需要取代的烷基(1-6C)；前提是如果所述嘧啶环的稠环桥接位5和6包含6个环原子，那么它不是芳族环；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性，防止或治疗与HCV有关的症状。
在一个实施方案中，本发明涉及下式化合物 或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6是包含5或6个环原子的视需要取代的饱和，不饱和或芳族环，其中X是选自N或O的原子；n是0，1，或2；R1是H，或视需要取代的烷基(1-6C)；每一R3独立地是氢，卤代，氰基，硝基，烷基(1-6C)，聚卤代烷基(1-6C)，-COR，-CONR2，-COOR，-OR，-OCOR，-NR2，或-NRCOR；每一R4独立地是氢，卤代，氰基，硝基，聚卤代烷基(1-6C)，或烷基(1-6C)；其中每一R独立地是氢，羟基，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，环烷基(3-7C)，Het，或烷基(1-6C)视需要用一个或两个选自羟基，环烷基(3-7C)，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，和Het的取代基取代；Het是包含1至2个分别独立地选自氮，氧和硫的杂原子的5或6元饱和，部分不饱和或完全不饱和杂环环，和其中基团Het总体上可视需要用一个，两个或三个分别独立地选自卤代，烷基(1-6C)，羟基，和氧代的取代基取代；前提是如果所述嘧啶环的稠环桥接位5和6包含6个环原子，那么它不是芳族环；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性，防止或治疗与HCV有关的症状。
在一个实施方案中，本发明涉及下式化合物 或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6与嘧啶环一起形成选自以下的基团
其中任何这些基团可视需要用一个或两个选自烷基(1-6C)，苯基，和苄基的取代基取代；R3是氢，卤代，烷基(1-6C)，-CF3，-COR，-CONR2，或-COOR；每一R4aR4b独立地是氢或卤代；其中每一R独立地是氢，羟基，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，环烷基(3-7C)，Het，或烷基(1-6C)，视需要用一个或两个选自羟基，环烷基(3-7C)，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，和Het的取代基取代；Het是选自以下的基团 其中基团Het可视需要用一个或两个分别独立地选自烷基(1-6C)，和氧代的取代基取代；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性，防止或治疗与HCV有关的症状。
在一个实施方案中，本发明涉及使用下式化合物
或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6与嘧啶环一起形成选自以下的基团 其中任何这些基团可视需要用一个或两个烷基(1-6C)取代；R3是氢，烷基(1-6C)，或-CONR2；每一R4aR4b独立地是氢或卤代；其中每一R独立地是氢，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，或烷基(1-6C)，视需要用一个羟基取代；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性，防止或治疗与HCV有关的症状。
本文所用的″非干扰性取代基″是定性上使具有结构式(1)的化合物抑制HCV活性的能力保持原样的取代基。因此，该取代基可改变抑制度，但只要具有结构式(1)的化合物保持抑制活性的能力，该取代基被划分为″非干扰性。″本文所用的术语″烷基，″″链烯基″和″炔基″包括直链，支化-链和环状单价取代基，当它们未被取代时，包含仅C+H。例子包括甲基，乙基，异丁基，环己基，环戊基乙基，2-丙烯基，3-丁炔基，和类似物。通常，烷基，链烯基和炔基取代基包含1-10C(烷基)或2-10C(链烯基或炔基)。优选它们包含1-6C(低级烷基)或2-6C(低级链烯基或低级炔基)。
杂烷基，杂链烯基和杂炔基被类似地定义但可在主链残基内包含1或多个O，S或N杂原子或其组合。
本文所用的″酰基″包括烷基，链烯基，炔基的定义，和杂酰基包括分别通过羰基基团被偶联至其它残基上的相关杂原子。
″芳族″部分或″芳基″部分是指单环或稠合双环部分如苯基或萘基；″杂芳族″还表示包含一个或多个选自O，S和N的杂原子的单环或稠合双环环体系。杂原子的夹杂允许5-元环以及6-元环的夹杂。因此，典型的芳族/杂芳族体系包括吡啶基，嘧啶基，吲哚基，苯并咪唑基，苯并三唑基，异喹啉基，喹啉基，苯并噻唑基，苯并呋喃基，噻吩基，呋喃基，吡咯基，噻唑基，唑基，咪唑基和类似物。因为互变异构体是理论可能的，邻苯二甲亚氨基也被认为是芳族的。在环体系的电子分布方面具有芳族性特性的任何单环或稠环双环体系被包括在该定义中。通常，环体系包含5-12环成员原子。
类似地，″芳基烷基″和″杂芳基烷基″是指通过碳链(包括取代的或未取代的，饱和或不饱和碳链，通常1-8C，或其杂形式)偶联至另一残基上的芳族和杂芳族体系。这些碳链也可包括羰基基团，因此使得它们能够提供取代基作为酰基或杂酰基部分。
作为基团或基团一部分的术语″聚卤代烷基(1-6C)″被定义为单-或多卤代取代的烷基(1-6C)，尤其是用最高1，2，3，4，5，6，或更多个卤代原子取代的烷基(1-6C)，如被一个或多个氟原子取代的甲基或乙基，例如，二氟甲基，三氟甲基，三氟乙基。优选的是三氟甲基。还包括全氟烷基(1-6C)基团，它是其中所有的氢原子被替换为氟原子的烷基(1-6C)基团，如五氟乙基。如果一个以上的卤素原子连接到在聚卤代烷基(1-6C)定义内的烷基基团上，卤素原子可相同或不同。
一般来说，包含在取代基中的任何烷基，链烯基，炔基，酰基，或芳基基团可自身视需要被其它的取代基取代。这些取代基的性质类似于对原取代基自身所述的那些。因此，如果取代基的实施方案是烷基，该烷基可视需要被作为使得化学上合理和不会损害烷基本身的尺寸限度的取代基列举的剩余取代基取代；如，用于这些实施方案，被烷基或通过链烯基取代的烷基简单地扩展碳原子的上限。但被芳基，氨基，烷氧基，和类似物取代的烷基被包括。本发明化合物的特点由结构式(1)，(2)，和(3)定义和取代基的性质不太重要，只要取代基不影响该碱性结构的所述生物活性。
术语卤代是氟，氯，溴和碘的通称。本文以前所用的术语氧代或(＝O)在连接到碳原子上时形成羰基部分。只要环或环体系用氧代基团取代，键接氧代的碳原子是饱和碳。
用于定义变量的基团包括所有的可能异构体，除非另有所指。例如吡啶基包括1-吡啶基，2-吡啶基，3-吡啶基和4-吡啶基；戊基包括1-戊基，2-戊基和3-戊基。
如果任何变量在任何成分中出现一次以上，每一定义是独立的。
Ar1或Ar2上的非干扰性取代基，包括，但不限于，烷基，链烯基，炔基，卤代，-OR，-NR2，-SR，-SOR，-SO2R，-OCOR，-NRCOR，-NRCONR2，-NRCOOR，-OCONR2，-RCO，-COOR，-NRSOR，-NRSO2R，-SO3R，-CONR2，SO2NR2，其中每一R独立地是H或烷基(1-8C)，-CN，-CF3，和NO2，和类似取代基。Ar1或Ar2上的非干扰性取代基，包括，但不限于，烷基，链烯基，炔基，卤代，-OR，-NR2，-SR，-SOR，-SO2R，-OCOR，-NRCOR，-NRCONR2，-NRCOOR，-OCONR2，-RCO，-COR，-COOR，-NRSOR，-NRSO2R，-SO3R，-CONR2，SO2NR2，其中每一R独立地是H或烷基(1-8C)，-CN，-CF3，和NO2，和类似取代基。R的优选实施方案是H，烷基(1-10C)或其含杂原子的形式，分别视需要取代，尤其(1-4C)烷基；烷氧基(1-8C)，酰基酰氨基，芳基氧基，芳基烷基氧基，尤其其中芳基基团是邻苯二甲亚氨基基团，和烷基或芳基烷基胺。
优选Ar1和Ar2是视需要取代的苯基，2-，3-或4-吡啶基，吲哚基，2-或4-嘧啶基，哒嗪基，苯并三唑基或苯并咪唑基。更优选Ar1和Ar2是苯基，吡啶基，或嘧啶基。优选Ar1是吡啶基或嘧啶基和Ar2是苯基。这些实施方案分别可视需要被用基团如烷基，链烯基，炔基，芳基，-O-芳基，-O-烷基芳基，-O-芳酰基，-NR-芳基，-N-烷基芳基，-NR-芳酰基，卤代，-OR，-NR2，-SR，-OOCR，-NROCR，-RCO，-COOR，-CONR2，和/或SO2NR2取代，其中每一R独立地是H或烷基(1-8C)，和/或通过-CN，-CF3，和/或NO2。这些实施方案分别可视需要用一个或两个基团如烷基，链烯基，炔基，芳基，-O-芳基，-O-烷基芳基，-O-芳酰基，-NR-芳基，-N-烷基芳基，-NR-芳酰基，卤代，-OR，-NR2，-SR，-OOCR，-OCOR，-NROCR，-NRCOR，-RCO，-COR，-COOR，-CONR2，和/或SO2NR2取代，其中每一R独立地是H或烷基(1-8C)，和/或通过-CN，-CF3，和/或NO2。烷基，链烯基，炔基和这些基团的芳基部分可进一步被类似取代基取代。Ar1或Ar2上的优选的取代基包括烷基，链烯基，炔基，卤代，-OR，-SR，-NR2其中R是H或烷基(1-4C)；和/或芳基氨基，芳基烷基氨基，包括被一个以上芳基取代的烷基氨基。如上所述，包括在取代基内的任何芳基或烷基基团可自身被类似地取代。这些取代基可占据该环的所有的可得位置，优选1-2位，或更多优选仅一个位。
任何芳基部分，包括结构式(1)，(2)，和(3)中描绘的那些，尤其苯基部分，也可包含两个在预期形成5-7元碳环或杂环脂族环的取代基。嘧啶环的5和6位之间的桥形成稠环体系，其中，如果稠环包含6个环原子，那么它不是芳族的。但该桥可包含pi键和可包含一个或多个选自N，O，和S的杂原子。优选的实施方案包括，其中该桥得到视需要包含一个或多个氮，氮和氧，氧，其它的双键，饱和桥，或6-元环(由饱和的桥形成)的5-元环。在一个实施方案中，6-元饱和的生成桥的环包含一个或两个氮。由桥形成的环本身可被取代。以上针对Ar1和Ar2所述的取代基也可作为稠环体系而存在。
以下无论何时使用术语″具有结构式(1)的化合物″，″具有结构式(2)的化合物″，″具有结构式(3)的化合物″，或″本化合物″或类似术语，它意味着包括具有结构式(1)，(2)，和(3)的化合物，其前药，N-氧化物，加成盐，季胺，金属配合物，和立体化学异构体形式。一个实施方案包括具有结构式(1)的化合物或本文规定的具有结构式(1)的化合物的任何子组，包括具有结构式(2)和(3)的化合物，以及N-氧化物，盐，作为其可能立体异构体形式。另一实施方案包括具有结构式(1)的化合物或本文规定的具有结构式(1)的化合物的任何子组，盐以及其可能立体异构体形式。
对于治疗用途，具有结构式(1)的化合物的盐是其中抗衡离子是药物可接受的那些。但非药物可接受的酸和碱的盐也可例如用于制备或纯化药物可接受化合物。所有的盐(无论是否药物可接受)被包括在本发明的范围内。
以上提及的药物可接受酸和碱加成盐意味着包括具有结构式(1)的化合物所能够形成的治疗活性非毒性酸和碱加成盐形式。药物可接受酸加成盐可适宜地通过将碱形式用这些合适的酸处理而得到。合适的酸包括，例如，无机酸如氢卤酸，如氢氯酸或氢溴酸，硫酸，硝酸，磷酸和类似物酸；或有机酸如，例如，乙酸，丙酸，羟基乙酸，乳酸，丙酮酸，草酸(即乙二酸)，丙二酸，琥珀酸(即丁二酸)，苯甲酸，马来酸，富马酸，苹果酸(即羟基丁二酸)，酒石酸，柠檬酸，甲烷磺酸，乙磺酸，苯磺酸，p-甲苯磺酸，环己氨磺酸，水杨酸，p-氨基水杨酸，扑酸和类似酸。
相反，所述盐形式可通过用合适的碱处理而被转化成游离碱形式。
包含酸性质子的具有结构式(1)的化合物也可通过用合适的有机和无机碱处理而被转化成其非毒性金属或胺加成盐形式。因此，如果羧基部分存在于具有结构式(1)的化合物上，该化合物也可作为与药物可接受阳离子的盐而供给。合适的碱盐形式包括，例如，铵盐，碱和碱土金属盐，如锂，钠，钾，镁，钙盐和类似物，与有机碱的盐，如benzathine，N-甲基-D-葡糖胺，卡巴胺盐，和与氨基酸如，例如，精氨酸，赖氨酸和类似物的盐。
本文所用的术语加成盐还包括具有结构式(1)的化合物以及其盐所能够形成的盐。这些溶剂合物是例如水合物，醇盐和类似物。
具有结构式(1)的化合物也可以被设计成在向患者给药时释放具有结构式(1)的化合物的″前药″。这里所用的术语″前药″是指药理可接受衍生物如酯，酰胺和磷酸盐，使得该衍生物的所得体内生物转化产物是在具有结构式(I)的化合物中所定义的活性药物。Goodman和Gilman的参考文件(治疗药理基础，第8版，McGraw-Hill，Int.Ed.1992，″药物的生物转化″，p13-15)在此并入本发明，其中一般地描述了前药。前药优选具有优异的含水溶解度，增加的生物可利用率和容易体内被代谢成活性抑制剂。本发明化合物的前药可通过将存在于该化合物中的官能团改性使得改性物通过常规处理或体内被分裂成母化合物而制备。
前药形式设计是本领域熟知的，和取决于包含在具有结构式(1)的化合物中的取代基。例如，包含巯基的取代基可被偶联至载体上，使得该化合物生物惰性直至被内原性酶或，例如，被靶向患者特定受体或位置的酶去除。
优选的是可体内水解和衍生自具有羟基或羧基基团的具有结构式(1)的那些化合物的药物可接受酯前药。体内可水解酯是在人或动物体内水解得到母酸或醇的酯。适用于羧基的药物可接受酯包括烷氧基甲基酯例如甲氧基甲基，烷酰基氧基甲基酯例如戊叔酰氧基甲基，2-苯并[c]呋喃酮基酯，环烷氧基羰基氧基烷基酯例如1-环己基羰基氧基乙基；1，3-二氧戊烯-2-酮基甲基酯例如5-甲基-1，3-二氧戊烯-2-酮基甲基；和烷氧基羰基氧基乙基酯例如在本发明化合物的任何羧基基团上形成的1-甲氧基羰基氧基乙基。
包含羟基基团的具有结构式(1)的化合物的体内可水解酯包括无机酯如磷酸酯和α-酰基氧基烷基醚和该酯体内水解断裂得到母羟基基团的相关化合物。α-酰基氧基烷基醚的例子包括乙酰氧基甲氧基和2，2-二甲基丙酰基氧基-甲氧基。对用于羟基的体内可水解成酯基团的选择包括烷酰基，苯甲酰基，苯基乙酰基和取代的苯甲酰基和苯基乙酰基，烷氧基羰基(得到烷基碳酸酯)，二烷基氨基甲酰基和N-(二烷基氨基乙基)-N-烷基氨基甲酰基(以得到氨基甲酸酯)，二烷基氨基乙酰基和羧基乙酰基。苯甲酰基上的取代基的例子包括由环氮原子通过亚甲基基团键接至苯甲酰基环的3-或4-位上的吗啉代和哌嗪基。
本文所用的术语″季胺″定义具有结构式(1)的化合物通过具有结构式(1)的化合物的碱性氮和合适的季化剂，如，例如，视需要取代的烷基卤化物，芳基卤化物或芳基烷基卤化物，如甲基碘化物或苄基碘化物之间的反应而形成的季铵盐。也可使用具有良好的离去基团的其它反应物，如三氟甲烷磺酸烷基酯，甲烷磺酸烷基酯，和p-甲苯磺酸烷基酯。季胺具有带正电荷的氮。药物可接受抗衡离子包括氯，溴，碘，三氟乙酸根和乙酸根。所选的抗衡离子可使用离子交换树脂而引入。
本发明化合物的N-氧化物形式意味着包括其中一个或几个氮原子被氧化成所谓N-氧化物的具有结构式(1)的化合物。
可以理解，具有结构式(1)的化合物可具有金属结合，螯合，配合物形成性能和因此可作为金属配合物或金属螯合物而存在。具有结构式(1)的化合物的这些金属化衍生物意味着被包括在本发明范围内。
一些具有结构式(1)的化合物也可以其互变异构体形式存在。尽管在以上结构式中没有被特意表示，但这些形式意味着被包括在本发明范围内。
具有结构式(1)的化合物具有几个手性中心和作为立体化学异构体形式存在。本文所用的术语″立体化学异构体形式″定义由具有结构式(1)的化合物可具有的相同原子组成的所有的可能化合物，所述原子由相同顺序的键键接但具有不同的三维结构。
对于其中(R)或(S)用于表示取代基内的手性原子的绝对构型的情形，该名称考虑到整个化合物和而非孤立的取代基。
如果结构式(1)的任何取代基包含手性中心，有些确实如此，具有结构式(1)的化合物包括其所有的立体异构体形式，作为分离的立体异构体和这些立体异构体形式的混合物。所述混合物可包含所述化合物的碱性分子结构的所有的非对映体和/或对映异构体。纯形式或相互混合的本发明化合物的所有的立体化学异构体形式意味着被包括在本发明范围内。
本文所提及的化合物和中间体的纯立体异构体形式被定义为基本上没有具有所述化合物或中间体的相同的碱性分子结构的其它对映异构体或非对映体形式的异构体。尤其是，术语″立体异构体纯″涉及具有至少80％立体异构体过量(即最低90％的一种异构体和最大10％的其它可能异构体)至最高100％立体异构体过量(即100％一种异构体和没有另一种)的化合物或中间体，更尤其是，具有90％至最高100％的立体异构体过量，甚至更尤其是具有94％至最高100％的立体异构体过量和最尤其是具有97％至最高100％的立体异构体过量的化合物或中间体。术语″对映异构体纯″和″非对映体纯″应该按照类似方式理解，不过分别看作所述混合物的对映异构体过量，和非对映体过量。
本发明化合物和中间体的纯立体异构体形式通过应用本领域已知的步骤而得到。例如，对映异构体可通过与光学活性酸或碱的其非对映体盐的选择性结晶而相互分离。其例子是酒石酸，二苯甲酰基酒石酸，二甲苯酰基酒石酸和樟脑磺酸。另外，对映异构体可通过使用手性固定相的色谱技术而分离。所述纯立体化学异构体形式也可衍生自合适的起始原料的相应纯立体化学异构体形式，前提是反应立体特异地出现。优选，如果特定立体异构体是所需的，所述化合物通过立体特异性制备方法而合成。这些方法有利地采用对映异构体纯起始原料。
具有结构式(1)的化合物的非对映体消旋体可通过常规方法而分开得到。可有利地采用的合适的物理分离方法是，例如，选择性结晶和色谱，如柱色谱。
对于一些具有结构式(1)的化合物，其前药，N-氧化物，盐，溶剂合物，季胺，或金属配合物，和用于其制备的中间体，绝对立体化学构型不实验确定。所属技术领域的专业人员能够使用本领域已知的方法如，例如，X-射线衍射而确定这些化合物的绝对构型。
本发明还意味着包括存在于本发明化合物上的原子的所有的同位素。同位素包括具有相同的原子数但不同的质量数的那些原子。作为一般性例子，但不限于，氢的同位素包括氚和氘。碳的同位素包括C-13和C-14。
本发明化合物的合成许多合成路径可用于产生本发明化合物。一般来说，它们可使用本领域已知的反应而合成。可采用任何本领域已知的用于合成的方法。但以下合成路径适用于制备本发明化合物。典型的发明化合物显示如下
方案A(化合物1和26的合成)该一般方案用于制备化合物1和16。
具有结构式(I)的化合物的制备2.53g 4-氨基-5-咪唑甲酰胺溶解在30mL氯仿和30mL二甲基甲酰胺中。在0摄氏度下向该溶液加入3.02mL 3-氯苯甲酰氯，随后加入5.4mL二异丙基乙基胺。反应混合物暖至室温和在室温下保持过夜。反应混合物用氯仿稀释和用水，10％含水碳酸钠溶液和盐水洗涤。有机层在无水硫酸钠上干燥和过滤。在浓缩之后得到的粗残余物被吸收在最低量的氯仿中并在硅胶上，使用乙酸乙酯，5％甲醇色谱处理，得到4.81g具有结构式(I)的化合物。
注为了合成化合物16，使用甲基-4-氨基-5-咪唑甲酰胺。
具有结构式(II)的化合物的制备2.74g具有结构式(I)的化合物悬浮在75mL乙醇中，将5mL 10N氢氧化钠加入反应混合物和反应混合物回流小时。在冷却至室温之后，将反应混合物浓缩以去除乙醇并随后用水稀释。溶液随后通过在0摄氏度下加入1N氢氯酸而酸化至pH6.5。将所形成的白色沉淀物通过过滤而收集，用水和醚洗涤和在高真空下干燥，得到0.84g具有结构式(II)的化合物。
具有结构式(III)的化合物的制备0.84g具有结构式(II)的化合物悬浮在60mL氯仿中，向该悬浮液中加入1.1mL亚硫酰氯和2mL二甲基甲酰胺。所得混合物在氮气下回流3小时。反应混合物冷却至室温和浓缩成黄色残余物。将该残余物在氯仿中吸收并将冰加入反应混合物。将冷溶液用5％碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机层在无水硫酸钠上干燥和过滤。在浓缩之后，将所得残余物用冷乙酸乙酯处理。分离白色固体。将该固体过滤和用乙酸乙酯洗涤，得到0.46g具有结构式(III)的化合物。
具有结构式(1)的化合物的制备0.46g具有结构式(III)的化合物溶解在10mL干二甲基甲酰胺中，向其中加入加入0.67ml二异丙基乙基胺。将反应混合物加热至60摄氏度，和向其中加入加入0.21g 4-氨基吡啶的溶液。反应混合物在回流下加热1小时。在冷却至室温反应混合物是浓缩至最小体积和产物通过制备反相HPLC，使用C18 Vydac柱，使用梯度水，乙腈(都包含0.1％三氟乙酸)而纯化。15mg具有结构式(1)的化合物在冻干包含所需产物的级分而得到。分析1H NMR d6DMSO，LCMS，M+323。
具有结构式(26)的化合物的制备化合物26根据在方案A中给出的步骤，使用N-1-苯基-2-氨基咪唑-3-甲酰胺和苯甲酰氯而制备。
方案B(化合物3，5-15和17的合成) 3-氨基-4-氰基-5-甲基异唑的制备羟基胺盐酸盐(12.78g，0.184毫摩尔)溶解在40ml水中，用氢氧化钠(7.36g，0.184毫摩尔)处理。加入60ml乙醇(无水)并在搅拌的同时小心加入(1-乙氧基乙叉基)丙二腈(25g，0.184毫摩尔)。将反应混合物在50摄氏度下加热30min，随后在室温下搅拌过夜。在真空下去除乙醇，将过滤的固体产物用水洗涤，在真空下干燥以得到21.93g(96.8％产率)。注为了合成7和11，使用相应乙基羟基胺，和为了合成9，使用相应苯基羟基胺。
N-(3-氯苯甲酰基)-4-氰基-3-甲基-5-甲酰胺的制备3-氨基-4-氰基-5-甲基异唑(6.0g，0.0487毫摩尔)悬浮在乙腈/四氢呋喃(30ml/10ml)中。加入二异丙基乙基胺(8.26ml，0.0487毫摩尔)，随后滴加3-氯苯甲酰氯。混合物在室温下搅拌过夜。将沉淀产物通过过滤而分离，用氯仿洗涤。得到1.31g产物(11％产率)。
注为了合成化合物3，5，6，8，10，12，13，14，15和17，使用相应酰氯。
3-甲基-6-(3-氯苯基)异唑[5，4d]嘧啶酮的制备N-(3-氯苯甲酰基)-4-氰基-3-甲基-5-甲酰胺(1.0g，15毫摩尔)悬浮在20ml 1M氢氧化钠中和用8ml 30％过氧化氢处理。混合物回流过夜。将冷却的反应混合物放在冰批料上和用1M氢氯酸处理至pH6。将产物过滤得到白色沉淀物和在真空下干燥，得到537mg(53％产率)。
3-甲基-4-氯-6-(3-氯苯基)异唑[5，4d]嘧啶的制备3-甲基-6-(3-氯苯基)异唑[5，4d]嘧啶酮(535mg，2.04毫摩尔)悬浮在磷酰氯(6ml)中和加热回流4小时。去除过量磷酰氯，加入冰和氯仿(10ml)，用饱和碳酸氢钠碱化，将产物提取到氯仿中并将提取物在硫酸钠(无水)上干燥。产物通过硅胶色谱用氯仿洗脱而纯化。得到200mg产物。
3-甲基-4-(4-氨基吡啶基)-6-(3-氯苯基)异唑[5，4d]嘧啶(17)的制备4-氨基吡啶(80.6mg，0.859毫摩尔)溶解在N-甲基吡咯烷酮中，加入二异丙基乙基胺(149微升)，随后加入3-甲基-4-氯-6-(3-氯苯基)异唑[5，4d]嘧啶(120mg，0.428毫摩尔)。将混合物在50摄氏度下搅拌1小时。产物通过制备HPLC在C18柱上纯化。
方案C(化合物2和4所合成) 2-苯基-吡咯并[2，3d]嘧啶酮的制备苯扎明盐酸盐(4.0g，0.25mol)溶解在64ml乙醇中。向其中加入8.0ml 25wt％甲醇钠溶液。反应随后在室温下搅拌5小时，和过滤。将滤液随后加入2-氰基-4，4-二乙氧基丁酸乙基酯(4.80g，0.21mol)。该溶液回流5小时。
一半溶剂在减压下去除，随后加入80ml冰水，并将pH用乙酸调节至7。将材料随后冷却6小时并将产物通过真空过滤而分离。注为了合成化合物4，使用3-氯苯并眯。
4-氯-2-苯基-吡咯并[2，3d]嘧啶的制备2-苯基-吡咯并[2，3d]嘧啶酮(1.0g 4.73mmol)用氯氧化磷(7ml，27.7mmol)处理和回流5小时。过量氯氧化磷在减压下被去除并随后用氯仿提取，用碳酸氢钠洗涤。有机层在硫酸钠(无水)上干燥，随后浓缩至无水，得到产物。
4-(4-氨基吡啶基)-2-苯基-吡咯并[2，3d]嘧啶(2)的制备4-氯-2-苯基-吡咯并[2，3d]嘧啶(0.12g，1.27mmol)溶解在4ml NMP中。加入N，N′-二异丙基乙基胺(0.229ml)，随后加入4-氨基-吡啶(0.15g，0.635mmol)。反应混合物加热回流2小时，冷却和通过制备HPLC而纯化。
方案D(化合物18的合成) 乙酰基甲基-丙二酸二甲基酯的制备丙二酸二甲基酯(5g，0.189毫摩尔)用碳酸钾(34.78g，0.25毫摩尔)，碘化钠(1.00g，0.0067毫摩尔)处理并随后在迅速分批加入氯丙酮(23.1g，0.25毫摩尔)的同时加温。反应混合物在100摄氏度下加热20min。向冷却的反应混合物中加入50ml乙醇，并将过滤的固体材料用乙醇洗涤。乙醇在真空下从滤液中去除。产物通过真空蒸馏而分离。得到11.26g产物(32％产率)。
具有结构式(IV)的化合物的制备乙二醇(3.90g，0.0628毫摩尔)，丙二酸乙酰基甲基二甲基酯(11.26g，0.06毫摩尔)，和p-甲苯磺酸(0.21g，0.0011毫摩尔)在25ml苯中合并。将反应混合物加热回流在DeanStark汽水分离器中收集的水过夜。反应混合物用10％碳酸氢钠(2×10ml)洗涤并将苯在硫酸钠上干燥。去除溶剂以得到产物作为油，14.1g。
具有结构式(V)的化合物的制备保护的丙二酸二甲基酯衍生物(5.0g，0.0215毫摩尔)溶解在甲醇(20ml)中，加入3-氯苯并眯盐酸盐，随后加入25％甲醇钠(16ml，0.0646毫摩尔)。反应混合物在室温下搅拌3天。混合物用水(50ml)稀释并加入60ml1M HCl和在室温下搅拌1小时，随后加入4ml浓缩HCl和搅拌过夜，得到最终产物。甲醇在真空下去除，和产物通过过滤和真空干燥而得到。得到5g产物。
6-甲基-2-氯苯基-呋喃并[3，2d]嘧啶酮的制备
6-羟基-5-乙酰基甲基-2-(3-氯苯基)嘧啶酮(5.0g)用浓硫酸(80ml)处理。反应混合物在室温下搅拌4小时，随后用碳酸钠中和和用氯仿提取，将氯仿提取物用水洗涤，在硫酸钠(无水)上干燥并去除溶剂，得到产物(1.10g)。
6-甲基4-氯-2-氯苯基-呋喃并[3，2d]嘧啶的制备6-甲基-2-氯苯基-呋喃并[3，2-d]嘧啶酮(480mg，1.84毫摩尔)悬浮在二氯甲烷(4ml)中。加入亚硫酰氯(1.6ml，22.5毫摩尔)和二甲基甲酰胺(0.5ml)并加热回流3小时。去除过量溶剂，并将残余物用冰处理，提取到氯仿中，用10％碳酸氢钠和水洗涤，在硫酸钠(无水)上干燥并去除溶剂，得到480mg产物。
6-甲基4-(4-氨基吡啶基)-2-氯苯基呋喃并[3，2d]嘧啶(18)的制备6-甲基4-氯-2-氯苯基-呋喃并[3，2d]嘧啶(480mg，1.72毫摩尔，1eq)，BINAP(8mg，0.013毫摩尔，0.0075eq)，Pd2(dba)3(3.9mg，0.0043毫摩尔，0.0025eq)，叔丁醇钠(231mg，2.4毫摩尔，1.4eq)，4-氨基吡啶(194mg，2.06毫摩尔，1.2eq)在5ml二烷中合并和在50摄氏度下加热5小时。产物通过在C18柱上的制备HPLC而分离。
方案E(化合物19的合成) 2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羧酸乙基酯的制备乙酰氨基丙二酸二乙基酯(15.0g，69.1mmol)溶解在60ml氯仿中，随后用60g五氧化二磷处理。反应混合物回流6小时，随后冷却至室温。该溶液用氢氧化钠(1M)处理以中和反应混合物。有机层用水洗涤和在硫酸钠(无水)上干燥。将粗品真空蒸馏以分离产物。得到8.26g产物(60％产率)。
2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羧酸的制备2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羧酸乙基酯(8.26g，41.5mmol)用74ml15％KOH溶液处理。回流15分钟，随后冷却和使用10％HCl溶液酸化。产物通过真空过滤而收集。
2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羰基氯的制备2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羧酸(2.56g，14.9mmol)溶解在二氯甲烷中。加入2滴二甲基甲酰胺并将反应在冰浴中冷却。滴加草酰氯(12ml，22.3mmol)。去除冰浴并将反应体系在室温下搅拌2小时。溶剂通过减压而去除。
4-(3-氯苄脒酰胺)-2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羰基氯的制备3-氯苯并眯(2.29g，14.8mmol)溶解在40ml DCM中和达到0摄氏度.随后加入15ml 2.0M氢氧化钠溶液。将溶解在30ml DCM中的2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羰基氯(2.8g，14.8mmol)滴加至反应混合物和在室温下搅拌3小时。有机溶剂随后用水洗涤，随后碳酸氢钠洗涤，随后用硫酸钠干燥和浓缩。
具有结构式(VI)的化合物的制备4-(3-氯苄脒酰胺)-2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羰基氯(2.0g，6.5mmol)溶解在30ml甲苯中和回流1.5小时。溶剂随后通过减压而去除。
7-甲基-2-(3-氯苯基)-唑并[2，3d]嘧啶酮的制备1.86g，5.93mmol，唑酯用在20升乙醇中的0.86g，15.4mmol KOH处理。在室温下搅拌过夜。有机溶剂在减压下蒸发并将该化合物溶解在水中和使用15％HCl溶液酸化。固体产物通过真空过滤而收集。
7-甲基-4-氯-2-(3-氯苯基)-唑并[2，3d]嘧啶的制备7-甲基-2-(3-氯苯基)-唑并[2，3d]嘧啶酮(1.32g，5.06mmol)用磷酰氯(13.2ml，141.7mmol)处理和回流3小时。将反应体系冷却，溶剂通过减压而去除并将残余物吸收在氯仿中。将冰加入有机溶剂，随后将有机溶剂用碳酸氢钠洗涤，在硫酸钠上干燥并随后浓缩。粗品通过闪蒸柱色谱而纯化。
7-甲基-4-(4-氨基吡啶基)-2-(3-氯苯基)唑并[2，3d]嘧啶(19)的制备将7-甲基-4-氯-2-(3-氯苯基)-唑并[2，3d]嘧啶(0.100g，0.358mmol)，4-氨基吡啶(0.040g，0.430mmol)，叔丁醇钠(0.048g，0.501mmol)，二(二苯基膦基)-1，1′-联萘(0.0009g，0.0014mmol)，和Pd2(dba)3(0.0004g，0.0043mmol)合并和溶解在2ml无水二烷中并回流3.5小时。将反应体系冷却，随后滤过Celite，并随后通过HPLC而纯化。
方案F 具有结构式(VI)的化合物的制备向2-氧代环戊烷羧酸甲基酯(4.10g，28.9mmol，1eq)在无水乙醇(20ml)中的溶液加入2-氟-5-氯苯并眯(5.0g，28.9mmol，1eq)在乙醇(20ml)中的溶液并将反应混合物在80摄氏度下加热过夜。将反应混合物冷却至室温(r.t.)并将白色沉淀物过滤和用冷却乙酸乙酯(2×20ml)洗涤。粗残余物在氯仿和水之间分配。将水层酸化至pH4并将产物用氯仿提取(3×50ml)提取。将有机层合并，用盐水洗涤，在MgSO4上干燥上干燥，过滤和在真空中浓缩，得到粗白色固体(VI)(4.5g，60％)，没有进一步纯化。
具有结构式(VII)的化合物的制备具有结构式(VI)的化合物(200mg，0.757mmol)在POCl3(5ml)中的悬浮液在回流下搅拌1小时。将溶液随后冷却至室温和在减压下浓缩，得到白色固体，溶解在无水二氯甲烷中。将溶液冷却至0摄氏度并加入冰，随后加入sat.NaHCO3。将有机层分离，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和在真空中蒸发以提供粗白色固体，不进一步纯化。
具有结构式(20)的化合物的制备(一般Buchwald反应步骤)具有结构式(VII)的粗亚氨基氯化合物(210mg，0.76mmol，1eq)溶解在二烷(5ml)中和向其中加入Pd(OAc)2(9mg，0.04mmol，0.05eq)，随后加入BINAP(35mg，0.056mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(82mg，0.760mmol，1eq)和Cs2CO3(370mg，1.13mmol，1.5eq)。反应混合物在80摄氏度下加热15小时。将反应混合物冷却至r.t.和滤过Celite并将粗品通过闪蒸柱色谱(3∶2/乙酸乙酯∶己烷)而纯化，得到具有结构式(20)的化合物(110mg，41％)。
具有结构式(IX)的化合物的制备向具有结构式(VIII)的化合物(100mg，0.25mmol，1eq)在MeOH(5ml)中的悬浮液加入1N NaOH(aq)溶液(500μl，0.50mmol，2eq)并将反应混合物回流2小时。将混合物冷却至r.t.和在真空中浓缩。将水(10ml)加入粗品并将水层酸化至pH4。将固体过滤，用水(2×5ml)洗涤和连夜干燥，得到具有结构式(IX)的化合物(50mg，52％)作为米色固体。
具有结构式(21)的化合物的制备向具有结构式(IX)的化合物(50mg，0.13mmol，1eq)在无水DMF(2ml)中的悬浮液加入1，1′-羰基二咪唑(42mg，0.26mmol，2eq)并将反应混合物在70摄氏度下加温2h。将混合物冷却至r.t.和NH3(g)鼓泡10min。反应混合物在r.t.下搅拌另外1小时。反应体系在真空中浓缩。将水(10ml)加入粗品并将固体过滤，用水(2×5ml)洗涤和连夜干燥，得到具有结构式(21)的化合物(30mg，60％)作为米色固体。
根据方案F制备的其它化合物具有结构式(32)的化合物根据在方案F中给出的用于制备具有结构式(VIII)的化合物的方案，使用4-氨基oyrdine-3-羧酸乙基酯而制备。具有结构式(36)的化合物通过用于合成具有结构式(20)的化合物所述的方法采用4-氨基-3-三氟甲基-甲基吡啶替代4-氨基-3-甲基吡啶而制备。具有结构式(35)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用甲基胺替代氨而制备。具有结构式(37)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用吡咯烷替代氨而制备。具有结构式(41)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用环丙基胺替代氨而制备。具有结构式(42)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用环丙基甲基胺替代氨而制备。具有结构式(51)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用2-氨基-乙醇替代氨而制备。具有结构式(52)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用1-氨基-丙烷-2-(S)-醇替代氨而制备。具有结构式(53)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用3-氨基-丙烷1，2(S)-二醇替代氨而制备。具有结构式(54)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用HO-NH2替代氨而制备。具有结构式(55)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用1-氨基-丙烷-2-(R)-醇替代氨而制备。具有结构式(56)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用N-甲基亚乙基二胺替代氨而制备。具有结构式(58)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用肼替代氨而制备。具有结构式(67)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用苯并眯而制备。具有结构式(68)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用甲基胺替代氨和苯并眯替代2-F，3-Cl-苯并眯而制备。具有结构式(69)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用N，N′-二甲基-1，3-丙烷二胺替代氨而制备。具有结构式(70)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用4-(3-氨基丙基)吗啉替代氨而制备。具有结构式(71)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用1-(3-氨基丙基)咪唑替代氨而制备。具有结构式(72)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用1-(3-氨基丙基)-2-吡咯烷酮替代氨而制备。具有结构式(73)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用2-(2-氨基乙基)-1-甲基吡咯烷替代氨而制备。具有结构式(74)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用1-(3-氨基丙基)-2-2-甲基哌啶替代氨而制备。具有结构式(75)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用1-(2-氨基乙基)吡咯烷替代氨而制备。具有结构式(78)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用1-(2-氨基乙基)哌啶替代氨而制备。具有结构式(79)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用N，N′-二乙基乙烯二胺替代氨而制备。
方案G(具有结构式(22)，(24)，(25)，和(30)的化合物的合成) 具有结构式(X)的化合物的制备向2-氟-5-氯苯并眯(1.79g，10.4mmol，1eq)在EtOH(10ml)中的溶液加入固体NaOEt(705mg，10.4mmol，1eq)，随后加入甲基-4-氧代-3-哌啶羧酸盐酸盐(2.0g，10.4mmol，1eq)。将反应混合物在70摄氏度下加热2h，随后冷却至r.t.。将沉淀物过滤和用乙酸乙酯(2×20ml)洗涤，得到白色固体(2.2g，76％)，不进一步纯化。
具有结构式(XI)的化合物的制备在r.t.下，向具有结构式(X)的化合物(300mg，1.08mmol，1eq)在无水THF(10ml)中的悬浮液加入BoC2O(258mg，1.18mmol，1.1eq)在无水THF(10ml)中的溶液。将反应混合物在r.t.下搅拌2小时并随后将溶液在真空中浓缩，得到粗残余物，然后通过闪蒸柱色谱而纯化，得到具有结构式(XI)的化合物(320mg，79％)作为白色固体。
具有结构式(XII)的化合物的制备向PPh3(813mg，3.03mmol，5eq)在无水二烷(20ml)中的溶液一次加入NBS(540mg，3.03mmol，5eq)并将悬浮液在r.t.下搅拌30min。加入具有结构式(XI)的化合物(230mg，0.61mmol，1eq)在无水二烷(5ml)中的溶液并将反应混合物在80摄氏度下加热45min。将反应混合物冷却至r.t.和加入Et3N(160μl，1.21mmol，2eq)。将混合物真空浓缩并将粗残余物通过闪蒸柱色谱(1∶9乙酸乙酯∶己烷)而纯化，得到具有结构式(XII)的化合物(72mg，30％)。
具有结构式(XIII)的化合物的制备向具有结构式(XII)的化合物(72mg，0.16mmol，1eq)在无水二烷(2ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(2mg，0.008mmol，0.05eq)，随后加入BINAP(8mg，0.001mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(18mg，0.16mmol，1eq)和Cs2CO3(80mg，0.24mmol，1.5eq)。反应混合物在80摄氏度下加热15小时。将反应混合物冷却至r.t.和滤过Celite并将粗品通过闪蒸柱色谱(7∶3/乙酸乙酯∶己烷)而纯化，得到具有结构式(XIII)的化合物(65mg，85％)。
具有结构式(22)的化合物的制备向具有结构式(XIII)的化合物(65mg，0.14mmol，1eq)在无水二烷(2ml)中的溶液加入在二烷中的4M HCl溶液(1ml)。所得悬浮液在r.t.下搅拌2小时。将沉淀物过滤并用氯仿(1×5ml)，乙酸乙酯(1×5ml)和冷甲醇(1×2ml)洗涤，得到具有结构式(22)的化合物(35mg，68％)作为白色固体。
具有结构式(24)的化合物的制备具有结构式(24)的化合物根据方案G中给出的步骤，使用1-苄基-4-氧代哌啶-3-羧酸乙基酯和苯并眯而制备。
具有结构式(25)的化合物的制备具有结构式(25)的化合物根据在方案G中给出的步骤，使用苯并眯而制备。
具有结构式(30)的化合物的制备具有结构式(30)的化合物根据在方案G中给出的步骤，使用1-苄基-4-氧代哌啶-3-羧酸乙基酯而制备。
方案H(具有结构式(23)的化合物的合成) 具有结构式(XIV)的化合物的制备向N-苄基-3-氧代-4-哌啶羧酸盐酸乙基酯(2g，6.73mmol，1eq)在乙醇(60ml)中的溶液加入10％Pd/C。将空气抽空并通过气球替换为氢。反应混合物在r.t.下搅拌4小时。反应混合物滤过Celite的短垫，得到具有结构式(XIV)的化合物，不进一步纯化。
具有结构式(XV)的化合物的制备向2-氟-5-氯苯并眯(1.16g，6.71mmol，1eq)在EtOH(10ml)中的溶液加入固体NaOEt(457mg，6.71mmol，1eq)，随后加入具有结构式(XIV)的化合物(1.39g，6.71mmol，1eq)。反应混合物在70摄氏度下加热2小时并随后冷却至r.t.。将沉淀物过滤和用乙酸乙酯(2×20ml)洗涤，得到具有结构式(XV)的化合物(1.12g，60％)作为白色固体，不进一步纯化。
具有结构式(XVI)的化合物的制备在r.t.下，向具有结构式(XV)的粗化合物(1.12mg，4.01mmol，1eq)在无水THF(10ml)中的悬浮液加入BoC2O(960mg，4.42mmol，1.1eq)在无水THF(10ml)中的溶液。将反应混合物在r.t.下搅拌2小时并随后将溶液在真空中浓缩，得到粗残余物，然后通过闪蒸柱色谱而纯化，得到具有结构式(XVI)的化合物(750mg，50％)作为白色固体。
具有结构式(XVII)的化合物的制备向PPh3(2.28g，8.70mmol，5eq)在无水二烷(20ml)中的溶液一次加入NBS(1.55mg，8.71mmol，5eq)并将悬浮液在r.t.下搅拌30min。加入具有结构式(XVI)的化合物(660mg，1.74mmol，1eq)在无水二烷(5ml)中的溶液并将反应混合物在80摄氏度下加热45min。将反应混合物冷却至r.t.和加入2eq Et3N。将混合物真空浓缩并将粗残余物通过闪蒸柱色谱(1∶9乙酸乙酯∶己烷)而纯化，得到具有结构式(XVII)的化合物(230mg，30％)。
具有结构式(XVIII)的化合物的制备向具有结构式(XVII)的化合物(230mg，0.52mmol，1eq)在无水二烷(5ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(6mg，0.03mmol，0.05eq)，随后加入BINAP(8mg，0.004mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(67mg，0.62mmol，1.2eq)和Cs2CO3(271mg，0.83mmol，1.5eq)。反应混合物在80摄氏度下加热15小时。将反应混合物冷却至r.t.和滤过Celite并将粗品通过闪蒸柱色谱(9∶1/乙酸乙酯∶己烷)而纯化，得到具有结构式(XVIII)的化合物(38mg，16％)。
具有结构式(23)的化合物的制备向具有结构式(XVIII)的化合物(38mg，0.08mmol，1eq)在无水二烷(2ml)中的溶液加入在二烷中的4M HCl溶液(1ml)。所得悬浮液在r.t.下搅拌2小时。将沉淀物过滤和用氯仿(1×3ml)，乙酸乙酯(1×3ml)和冷甲醇(1×1ml)洗涤，得到具有结构式(23)的化合物(32mg，95％)作为白色固体。
方案I(具有结构式(27)的化合物的合成) 2-氨基-噻吩-3-羧酸酰胺1，4-二噻烷-2，5-二醇(4.56g，30mmole)和2-氰基乙酰胺(2.52g，30毫摩尔)在乙醇(50ml)中合并。加入三乙基胺(6ml)并在70摄氏度下加热1小时。将溶剂体积在真空下减少，和产物通过过滤而分离。产物从乙醇中重结晶，得到2.71g产物(产率64％)。
2-(2-氟-苯甲酰基氨基)-噻吩-3-羧酸酰胺2-氨基-噻吩-3-羧酸酰胺(8.73g，61.4毫摩尔)溶解在吡啶(100ml)中，冷却至0摄氏度，和将2-氟苯甲酰氯在20min内滴加，随后将反应在搅拌下暖至室温过夜。吡啶在真空下去除，加入二氯甲烷和水。产物作为灰色固体而沉淀并用稀氢氯酸，水洗涤和风干。分离二氯甲烷层，用稀氢氯酸，和水洗涤，在硫酸钠(anh.)上干燥并去除溶剂，得到总共12.45g产物(77％产率)。
2-(2-氟-苯基)-3H-噻吩并[2，3-d]嘧啶-4-酮2-(2-氟-苯甲酰基氨基)-噻吩-3-羧酸酰胺(8.56g，32.4毫摩尔)溶解在20ml 1M氢氧化钠和60ml乙醇的混合物中。混合物回流4小时。将反应混合物冷却和倒到e上。将溶液用稀氢氯酸酸化并将产物通过过滤而分离。真空干燥得到5.42g产物(产率68％)。
4-氯-2-(2-氟-苯基)-噻吩并[2，3-d]嘧啶2-(2-氟-苯基)-3H-噻吩并[2，3-d]嘧啶-4-酮(900mg，3.65毫摩尔)溶解在氯仿中并将亚硫酰氯(0.532ml，7.30毫摩尔)加入混合物，随后加入1ml二甲基甲酰胺。将反应混合物加热回流2.5小时，将冷却的混合物用10％碳酸钠洗涤，将氯仿溶液在硫酸钠(无水)上干燥和去除溶剂。将粗品在硅胶上用氯仿洗脱而色谱处理。去除溶剂，得到438mg产物(产率45％)。嘧啶-4-基]-吡啶-4-基-胺将4-氯-2-(2-氟-苯基)-噻吩并[2，3-d]嘧啶(110mg，0.41毫摩尔)和4-氨基吡啶(78mg，0.830毫摩尔)在异丙醇(3毫升)中合并，随后加入4滴4MHCl/二烷并将反应混合物在80摄氏度下加热7小时。将反应混合物冷却并将产物通过过滤而分离，用最少的冷甲醇洗涤和在真空下干燥，得到116mg产物(产率86％)。
方案J(具有结构式(28)的化合物的合成) 5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-甲腈甲基肼(5g，108.5毫摩尔)滴加至(1-乙氧基-乙叉基)-丙二腈(14.7g，108.5毫摩尔)在250ml乙醇中的溶液。混合物随后加热回流2.5小时。将反应混合物冷却，体积减至约70ml并将产物通过过滤而分离，用冷乙醇洗涤和干燥以得到13.5g产物(产率91％)。
N-(4-氰基-2，5-二甲基-2H-吡唑-3-基)-2-氟-苯并酰胺5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-甲腈(10g，73.4毫摩尔)悬浮在吡啶(90ml)中并在将反应混合物在冰浴上冷却的同时滴加2-氟苯甲酰氯。反应混合物在室温下搅拌过夜。去除大多数吡啶并加入100ml冷水以使产物沉淀。将产物通过过滤而分离，用冷水被和少量冷乙醇洗涤，和在真空下干燥以得到9.15g产物(产率50％)。
6-(2-氟-苯基)-1，3-二甲基-1，5-二氢-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮N-(4-氰基-2，5-二甲基-2H-吡唑-3-基)-2-氟-苯并酰胺(5.0g，19.36毫摩尔)悬浮在38ml 1M氢氧化钠中和在90摄氏度下加热3小时，随后加入30％过氧化氢(10毫升)和进一步加热过夜。将反应混合物冷却至室温和用稀氢氯酸酸化。产物通过过滤而分离，用水洗涤，和在真空下连夜干燥以得到3.39g产物。(产率67％)。
4-氯-6-(2-氟-苯基)-1，3-二甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶6-(2-氟-苯基)-1，3-二甲基-1，5-二氢-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮(2.0g，7.74毫摩尔)用40ml氯氧化磷处理和加热回流过夜。过量氯氧化磷在真空下去除并将冰水加入残余物。产物用乙酸乙酯提取，用10％碳酸钠，水洗涤，在硫酸钠(无水)上干燥和去除溶剂，得到粗品。粗品在硅胶柱上用氯仿洗脱而色谱处理，得到1.10g纯产物(产率51％)。嘧啶-4-基]-吡啶-4-基-胺4-氯-6-(2-氟-苯基)-1，3-二甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(84mg，0.304毫摩尔)和4-氨基吡啶(57mg，0.608毫摩尔)在4毫升异丙醇中合并，加入3滴4M HCl/二烷并将反应混合物在80摄氏度下加热5小时。将反应混合物冷却并将产物过滤，在真空干燥之后得到83mg(产率81％)。
方案K(具有结构式(29)的化合物的合成) 5-氨基-1-丁基-3-甲基-1H-吡唑-4-甲腈丁基肼草酸盐(14.25g，80毫摩尔)和(1-乙氧基乙叉基)-丙二腈(10.82g，80毫摩尔)在乙醇(200ml)中合并，并将混合物用二异丙基乙基胺(10.39g，80毫摩尔)处理。将混合物回流2小时，随后在室温下搅拌过夜。大部分溶剂在真空下去除并用氯仿研磨，过滤一些固体，并保留氯仿滤液。氯仿滤液用水洗涤，在硫酸钠(无水)上干燥和去除溶剂，得到产物作为固体，13.13g(产率74％)。
N-(2-丁基-4-氰基-5-甲基-2H-吡唑-3-基)-2-氟-苯并酰胺5-氨基-1-丁基-5-甲基-1H-吡唑-4-甲腈(10.0g，56毫摩尔)溶解在二氯甲烷/吡啶(45毫升/15毫升)的混合物中和冷却至0摄氏度.滴加2-氟苯甲酰氯(8.87g，56毫摩尔)并将反应混合物在0摄氏度下搅拌1小时，和在室温下搅拌过夜。溶剂在真空下去除。将残余物吸收在乙酸乙酯中，用稀氢氯酸，0.1M氢氧化钠，和水洗涤，和在硫酸钠(无水)上干燥。去除溶剂并将固体在30％乙酸乙酯/己烷中研磨。过滤产物，以得到4.16g产物(产率24％)。
1-丁基-6-(2-氟-苯基)-3-甲基-1，5-二氢-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮N-(2-丁基-4-氰基-5-甲基-2H-吡唑-3-基)-2-氟-苯并酰胺(4.0g，13.3mmole)悬浮在26毫升IM氢氧化钠中，和加入30％过氧化氢(10毫升)和乙醇(5毫升)。将反应混合物加热回流4小时，随后进一步加入30％过氧化氢(10毫升)和加热回流过夜。将反应混合物冷却和用稀氢氯酸酸化至pH6.0。产物通过过滤而收集和在真空下干燥以得到1.29g产物(产率32％)。
1-丁基-4-氯-6-(2-氟-苯基)-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶1-丁基-6-(2-氟-苯基)-3-甲基-1，5-二氢-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮(1.23g，4.1毫摩尔)溶解在氯氧化磷(15ml)中和加热回流过夜。过量氯氧化磷在真空下去除，将残余物用冰水处理，将产物提取到乙酸乙酯中，用水，饱和氯化钠洗涤，随后在硫酸钠(anh.)上干燥和去除溶剂，得到粗品。产物在硅胶上用氯仿洗脱而色谱处理，得到723mg纯化产物(产率55％)。嘧啶-4-基]-吡啶-4-基-胺1-丁基-4-氯-6-(2-氟-苯基)-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(100mg，0.31毫摩尔)和4-氨基吡啶(58mg，0.626毫摩尔)在乙二醇二甲氧基醚中合并和加热回流4小时。将反应混合物冷却并将产物通过过滤而分离，用最少的冷溶剂洗涤和干燥，得到132mg产物。将50mg该材料在反相C18柱上使用水/乙腈/0.1％三氟乙酸的梯度洗脱而进行HPLC纯化。
方案L(具有结构式(9)的化合物的合成) 2-(乙氧基-苯基-亚甲基)-丙二腈邻苯甲酸三乙基酯(25g，0.112毫摩尔)，丙二腈(9.07g，0.137毫摩尔)和乙酸酐(50ml)回流过夜。过量乙酸酐在真空下去除和产物在硅胶上用30％乙酸乙酯/己烷洗脱而色谱处理，得到21.7g产物(产率97％)。
5-氨基-3-苯基-异唑-4-甲腈羟基胺盐酸盐悬浮在水(30ml)中和加入氢氧化钠(4.4g，0.11毫摩尔)并随后加入乙醇(40ml)，随后简写加入2-(乙氧基-苯基-亚甲基)-丙二腈(21.7g，0.11毫摩尔)。反应混合物在50摄氏度下加热2小时。乙醇在真空下去除并将沉淀物过滤。将沉淀物再溶解在50％乙酸乙酯/己烷中和在硅胶上色谱处理在去除溶剂之后得到8.2g产物(产率40％)。其余的顺序类似于苯基类似物的甲基替代。
方案M(具有结构式(80)的化合物的合成) 1H-吡咯-2-甲腈吡咯-2-甲醛(3.00g，0.0316毫摩尔)与羟基胺-O-磺酸(12.5g，0.11毫摩尔)在100ml水中合并和在室温下搅拌过夜。反应混合物冷却至0摄氏度并将氢氧化钾(12.06g，0.603毫摩尔)在80毫升水中的溶液在1小时时间内滴加。反应混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物用二氯甲烷(3×100ml)提取，将提取物在硫酸钠(anh.)上干燥。去除溶剂，得到3.36g产物作为液体(产率100％)。
1-氨基-1H-吡咯-2-甲腈1H-吡咯-2-甲腈(3.36g，36.5毫摩尔)溶解在100ml二甲基-甲酰胺中，向其中加入碳酸钾(7.51g，54.75毫摩尔)，随后加入O-(4-硝基-2-三氟甲基-苯基)-羟基胺(12.15g，54.73毫摩尔)。混合物在室温下搅拌过夜。加入80ml水并将沉淀物过滤。将滤液的pH调节至10，和用乙酸乙酯(3×100ml)提取。将提取物用水，饱和氯化钠洗涤和在硫酸钠上干燥。溶剂在真空下去除，得到6.31g包含残余二甲基甲酰胺的产物。产率通过NMR而估计为64％。
1-氨基-1H-吡咯-2-羧酸酰胺1-氨基-1H-吡咯-2-甲腈(2.52g，23.5毫摩尔)悬浮在75ml水中，用氢氧化钾(32g，0.57毫摩尔)，30％过氧化氢(2ml)处理和在室温下搅拌过夜。反应混合物在0摄氏度下冷却30min并将产物通过过滤而分离，用冷水洗涤和在真空下干燥，得到2.55g产物(产率87％)。
1-(5-氯-2-氟-苯甲酰基氨基)-1H-吡咯-2-羧酸酰胺1-氨基-1H-吡咯-2-羧酸酰胺(1.25g，10毫摩尔)部分溶解在45ml乙腈中，加入三乙基胺(1.39ml，10毫摩尔)，随后滴加在3ml氯仿中的5-氯-2-氟苯甲酰氯(1.93g，10毫摩尔)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，溶剂在真空下去除并将残余物吸收在氯仿中，用10％碳酸氢钠，水洗涤，和在硫酸钠(anh.)上干燥。通过放置，从溶液中结晶出固体。其它产物通过将滤液在硅胶上用3％甲醇/氯仿洗脱进行色谱处理而得到。得到600mg产物(产率21％)。
2-(5-氯-2-氟-苯基)-3H-吡咯并[2.1-f] [1.2.4]三嗪-4-酮1-(5-氯-2-氟-苯甲酰基氨基)-1H-吡咯-2-羧酸酰胺(200mg，0.71毫摩尔)在密封管中溶解在5ml 28％氢氧化铵中和在80摄氏度下加热过夜。将溶液用氮冲洗以去除过量氨，和用1M氢氯酸酸化至pH2。产物通过过滤而分离，用水洗涤和真空干燥，得到90mg产物(产率48％)。
4-氯-2-(5-氯-2-氟-苯基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪将2-(5-氯-2-氟-苯基)-3H-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-酮(60mg，0.228毫摩尔)加入氯氧化磷(1ml)中。加入57微升N，N-二甲基苯胺(催化剂)并在110摄氏度下加热过夜。过量氯氧化磷在真空下去除，并将残余物用冰处理，和产物用氯仿提取。氯仿提取物在硫酸钠(anh.)上干燥和去除溶剂，得到粗品。产物通过硅胶色谱用氯仿洗脱而色谱处理，得到36mg产物(产率56％)。[1.2.4]三嗪-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺4-氯-2-(5-氯-2-氟-苯基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪(30mg，0.106毫摩尔)，碳酸铯(48.5mg，0.149毫摩尔)，乙酸钯(II)(1.19mg，0.0053毫摩尔)，BINAP(4.96mg，0.0080毫摩尔)，和4-氨基-甲基吡啶(13.8mg，0.128毫摩尔)在4ml二烷(anh.)中合并和在90摄氏度下搅拌过夜。将反应混合物过滤以去除固体材料，将滤液蒸发至无水，将残余物溶解在氯仿(8毫升)中，用0.5M氢氧化钠(1ml)洗涤，在硫酸钠(anh.)上干燥，蒸发至无水，并随后将残余物再溶解在二甲基甲酰胺中和通过反相HPLC而纯化。分离产物。
方案N(具有结构式(81)和(82)的化合物的合成) 5-(2-氟-苯基)-4H-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-酮3-氨基-1，2，4-三唑(3.64g，43.25毫摩尔)和乙基2-氟苯甲酰基乙酸酯(10g，47.57毫摩尔)在乙酸(45ml)中合并和加热回流过夜。将反应混合物冷却并将产物过滤，用二乙基醚洗涤，得到3.47g(产率35％)。
7-氯-5-(2-氟-苯基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶
5-(2-氟-苯基)-4H-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-酮(840mg，3.64毫摩尔)悬浮在氯氧化磷(5ml)中和加热回流45min。过量氯氧化磷在真空下去除，将残余物用冰处理，将产物用氯仿提取，随后将氯仿用10％碳酸氢钠洗涤，在硫酸钠上干燥和溶剂在真空下去除，得到420mg产物(产率46％)。三唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-吡啶-4-基-胺7-氯-5-(2-氟-苯基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶(124mg，0.5毫摩尔)悬浮在二烷(5ml)，4-氨基吡啶(56.4mg，0.6毫摩尔)中，加入叔丁醇钠(67mg，0.7毫摩尔)，BINAP(2.3mg，0.00375毫摩尔)，和Pd2(dba)3(1.14mg，0.00125毫摩尔)并在90摄氏度下加热过夜。二烷在真空下去除，将残余物吸收在甲醇中，过滤和通过反相HPLC而纯化，和将级分冻干以得到产物作为三氟乙酸盐。
具有结构式(81)的化合物使用类似于上述的步骤类似，使用5-氯-2-氟苯甲酰基乙酸乙基酯而制备。具有结构式(83)的化合物使用类似于上述的步骤，使用4-氨基-嘧啶而制备。
方案O(具有结构式(60)和(61)的化合物的合成) 制备4，4-二甲基环己酮
参考四面体通讯，1992，33(35)，5009。
4，4-二甲基环己烯-2-酮(10g，78.11mmol)和三乙基胺(10.89mL，78.11mmol)在100％乙醇(30mL)中的溶液在30psi下在Parr装置中，在r.t.下进行氢化过夜。将内容物过滤通过Celite和蒸发滤液，得到清洁产物作为无色油(10.08g，99％产率)。
制备3，3-二甲基己烷二酸参考J.Med.Chem.1970，13(3)，531。
向4，4-二甲基环己酮(2g，15.85mmol)在冰AcOH(100mL)中的溶液加入CrO3(4.75g，47.54mmol)在冰AcOH(20mL)和水(20mL)中的溶液。混合物在60摄氏度下搅拌过夜，随后冷却和用40％aq.NaOH稀释至pH14。将混合物用二乙基醚(4×100mL)洗涤，并将水层用cone.HCl(aq.)再酸化至pH1。溶液用二乙基醚(4×100mL)提取；将有机提取物干燥(盐水和MgSO4)和蒸发，得到粗二酸，直捷酯化。
制备3，3-二甲基己烷二酸二甲基酯粗3，3-二甲基己烷二酸溶解在甲醇(50mL)中和加入亚硫酰氯(1mL)并将溶液在60摄氏度下加热6小时，随后将它冷却和蒸发，得到粗二酯，然后通过色谱(1∶1己烷/乙酸乙酯)而纯化，得到纯产物作为无色油(2.90g，91％产率在2步骤)。
制备4，4-二甲基-2-氧代-环戊烷羧酸甲基酯参考J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，1984，799。
向3，3-二甲基己烷二酸二甲基酯(2.90g，14.36mmol)和甲醇(100μL)在干甲苯(10mL)中的溶液加入钠金属(0.66g，28.72mmol)。混合物加热回流过夜，随后冷却和蒸发。
残余物通过色谱(1∶1己烷/乙酸乙酯)而纯化，得到所需环化产物作为无色油(2.08g，85％产率)。
制备2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-醇4，4-二甲基-2-氧代-环戊烷羧酸甲基酯(2.08g，12.21mmol)和5-氯-2-氟-苯并眯(2.32g，13.44mmol)在100％乙醇(40mL)中的溶液加热回流过夜，随后冷却和蒸发。将残余物溶解在(aq.)NaOH(50mL)中和用二氯甲烷(2×50mL)洗涤。将水层随后用冰乙酸酸化至pH4和用二氯甲烷(2×100mL)提取。将有机提取物干燥(盐水和MgSO4)和蒸发，得到粗品，然后通过色谱(CH2Cl2，0-10％MeOH)而纯化，得到所需产物作为膏固体(2.10g，59％产率)。
制备2-(5-氯-2-氟-苯基)-4-碘-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶将2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-醇(2.10g，7.16mmol)在磷酰氯(40mL)中的悬浮液加热回流2小时，随后冷却和蒸发。将残余物溶解在二氯甲烷中并将溶液滤过硅胶的短垫。将滤液蒸发，得到残基，然后悬浮在氢碘酸(10mL)中和在90摄氏度下与碘化钠(5.37g，35.82mmol)一起加热3小时。将混合物冷却和用水(50mL)稀释。加入硫代硫酸钠水溶液(50mL)并将混合物与二氯甲烷(3×100mL)振荡。有机提取物在MgSO4上干燥上干燥和蒸发，得到粗品，然后通过闪蒸色谱(CH2Cl2)而纯化，得到所需碘产物作为膏固体(1.75g，66％产率)。
制备[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺向2-(5-氯-2-氟-苯基)-4-碘-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶(100mg，0.25mmol)，3-甲基-吡啶-4-基胺(30mg，0.27mmol)，Pd(OAc)2(3mg，12.42μmol)和Rac-BINAP(12mg，18.63μmol)在无水二烷(3mL)中的溶液加入Cs2CO3(121mg，0.37mmol)。将混合物在85摄氏度下加热48小时，冷却和蒸发。HPLC纯化，在冻干之后得到具有结构式(60)的所需产物作为TFA盐，一种白色固体(6.4mg)。使用相同步骤制备具有结构式(61)的化合物。
方案P(具有结构式(62)至(66)的化合物的合成) 制备4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-烟酸甲基酯向2-(5-氯-2-氟-苯基)-4-碘-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶(500mg，1.24mmol)，4-氨基-烟酸甲基酯(208mg，1.37mmol)，Pd(OAc)2(14mg，62.09μmol)和Rac-BINAP(60mg，93.14μmol)在无水二烷(10mL)中的溶液加入Cs2CO3(607mg，1.86mmol)。混合物在85摄氏度下加热12h，冷却和蒸发。将残余物通过色谱(CH2Cl2，0-10％MeOH)而纯化，得到所需产物(178mg，34％产率)。
制备4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-烟酸向4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环-五嘧啶-4-基氨基]-烟酸甲基酯(178mg，0.42mmol)在二烷(10mL)中的溶液加入NaOH(aq.)(451μL，0.44mmol，0.97N溶液)。混合物在60摄氏度下加热1h，随后冷却，和加入HCl(aq.)(425μL，0.44mmol，1.03N溶液)。在加入时，酸从溶液中沉淀并过滤和在真空中干燥，得到137mg产物。
制备4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-烟酰胺
4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-烟酸(25mg，60.56μmol)和羰基-二咪唑(20mg，121.11μmol)在无水DMF(3mL)中的悬浮液在70摄氏度下加热1h并随后冷却至r.t.。将ONH3气流经过该溶液30min.，这样完全转化成酰胺产物。蒸发溶液，随后HPLC纯化，在冻干之后得到具有结构式(62)的纯酰胺作为TFA盐(20mg)。
具有结构式(63)至(66)的化合物使用相同的步骤制备。
方案Q(具有结构式(76)和(77)的化合物的合成) 4-[6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-异唑并[5，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸甲基酯4-氯-6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-异唑并[5，4-d]嘧啶(通过用于具有结构式(43)的化合物的方法而制备)(298mg，1毫摩尔)溶解在二烷(4ml)中，并将BINAP(4.67mg，0.0075毫摩尔)，4-氨基-烟酸甲基酯(182mg，1.2毫摩尔)，碳酸铯(456mg，1.4mmole)，和Pd2(dba)3(2.29mg，0.0025mmole)加入混合物和90摄氏度下加热过夜。
二烷在真空下去除并将将残余物用乙酸乙酯(5ml)研磨和产物通过过滤而分离。得到525mg固体，还包含碳酸铯作为副产物。
4-[6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-异唑并[5，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸4-[6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-异唑并[5，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸甲基酯(525mg)悬浮在甲醇(4ml)中，加入1M氢氧化钠溶液(4ml)，并随后在70摄氏度下加热30min。甲醇在真空下去除并将溶液用6M氢氯酸酸化至pH4。将固体过滤，用水洗涤和在炉中干燥，得到137mg产物。
4-[6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-异唑并[5，4-d]嘧啶-4-基氨基]-N-环丙基-烟酰胺4-[6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-异唑并[5，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸(130mg，0.325毫摩尔)与羰基二咪唑(105mg，0.650毫摩尔)在2ml二甲基甲酰胺中合并和在70摄氏度下加热1小时。将混合物冷却至室温，加入环丙基胺(74mg，1.3毫摩尔)和在室温下搅拌1小时。将溶液过滤和将滤液在反相HPLC上进行HPLC纯化。冻干包含纯产物的级分，得到13.7mg纯产物。
具有结构式(77)的化合物使用上述步骤，使用甲基胺而制备。
方案R(具有结构式(33)的化合物的合成) 2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-醇向4-氧代-四氢呋喃-3-羧酸甲基酯(根据Dowd，P.；Choi，S-C.四面体，1991，47，4847-4860制备；800mg，5.55mmol，leq)在乙醇(20ml)中的悬浮液加入2-氟-5-氯-苯并眯(961mg，5.55mmol，1eq)在EtOH(10ml)中的溶液。将反应混合物在80摄氏度下加热过夜。将反应混合物冷却至r.t.并将白色沉淀物过滤和用冷却乙酸乙酯(2×20ml)洗涤。粗将残余物在氯仿和水之间分配。将水层酸化至pH4并将产物用氯仿(3×50ml)提取。将有机层合并，用盐水洗涤，在MgSO4上干燥，过滤和真空浓缩，得到粗固体，然后通过闪蒸柱色谱(在EtOAc中的5％MeOH)而纯化，得到白色固体2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-醇(440mg，30％)。
4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]嘧啶将2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-醇(100mg，0.36mmol，1eq)在POCl3(5ml)中的悬浮液在回流下搅拌1h。将溶液随后冷却至室温和在减压下浓缩，得到白色固体，然后溶解在无水二氯甲烷中。将溶液冷却至0摄氏度和加入冰，随后加入sat.NaHCO3。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩以提供粗白色固体，然后通过闪蒸柱色谱(1∶9 EtOAc∶己烷)而纯化，得到4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]-嘧啶(78mg，73％)作为白色固体。
2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]嘧啶在r.t.下向4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]-嘧啶(78mg，0.275mmol，1eq)在57％HI(aq)(2ml)中的悬浮液中加入NaI(206mg，1.37mmol，5eq)。将反应混合物在r.t.下搅拌过夜并随后倒到冰上。产物用氯仿提取和水层用NaHCO3中和和用氯仿进一步提取。将有机层合并用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩以提供2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶的粗残余物，不进一步纯化。嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，具有结构式(33)的化合物向2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]嘧啶(80mg，0.21mmol，1eq)在无水二烷(5ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(2mg，0.01mmol，0.05eq)，随后加入BINAP(10mg，0.02mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(25mg，0.23mmol，1.2eq)和Cs2CO3(100mg，0.32mmol，1.5eq)。反应混合物在80摄氏度下加热15h。将反应混合物冷却至r.t.和滤过Celite并将粗品通过闪蒸柱色谱(9∶1/乙酸乙酯∶己烷)而纯化，得到[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，具有结构式(33)的化合物(20mg，26％)作为白色固体。
方案S(具有结构式(34)的化合物的合成) 4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯按照用于合成[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，即具有结构式(33)的化合物的一般反应步骤，4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯以73％产率分离。
4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸向4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯(60mg，0.14mmol，1eq)在MeOH(5ml)中的悬浮液加入1NNaOH(aq)溶液(300μl，0.30mmol，2eq)并将反应混合物加热回流2h。将溶液冷却至r.t.和真空浓缩。将水(20ml)加入粗品并将水层酸化至pH4。将固体过滤，用水(2×5ml)洗涤和连夜干燥，得到4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸(50mg，90％)。
4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟碱酰胺，具有结构式(34)的化合物向4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸(50mg，0.13mmol，1eq)在DMF(2ml)中的悬浮液加入1，1′-羰基二咪唑(50mg，0.31mmol，2.4eq)并将反应混合物在70摄氏度下加温2h。将混合物冷却至r.t.和NH3(g)鼓泡10min。反应混合物在r.t.用于下搅拌另外1h。反应真空浓缩和将残余物用水(2×5ml)研磨。向粗将残余物中加入1N NaOH(5ml)并将悬浮液在100摄氏度下加热2h。将反应混合物冷却至室温和用1N HCl中和并将固体过滤，得到4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟碱酰胺，具有结构式(34)的化合物(25mg，50％)作为白色固体。
方案T(具有结构式(38)的化合物的合成) 2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-醇向2-氧代环戊烷羧酸甲基酯(2g，11.8mmol，1eq)，在无水乙醇(20ml)中的溶液加入2-氟-5-氯苯并眯(2.04 g，11.8mmol，1eq)在乙醇(20ml)中的溶液并将反应混合物在80摄氏度下加热过夜。将反应混合物冷却至r.t.并将溶剂在真空中去除，得到粗残余物，然后通过从热乙酸乙酯中重结晶而纯化，得到2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-醇(2.56g，78％)作为白色固体。
4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉将2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-醇(500mg，1.89mmol)在POCl3(6ml)中的悬浮液在回流下搅拌1h。将溶液随后冷却至室温和在减压下浓缩，得到白色固体，然后溶解在二氯甲烷中。将溶液冷却至0摄氏度并加入冰，随后加入sat.NaHCO3。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩以提供粗白色固体4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉，不进一步纯化。
2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，6，7，8-四氢喹唑啉在r.t.下，向4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉(534mg，1.89mmol，1eq)在57％水(10ml)HI溶液中的悬浮液中加入NaI(1.42g，9.47mmol，5eq)。将反应混合物在r.t.下搅拌过夜并随后倒到冰上。产物用氯仿提取和水层用NaHCO3中和和用更多的氯仿进一步提取。将有机层合并，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩以提供粗白色固体2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，6，7，8-四氢喹唑啉，不进一步纯化。-(3-甲基吡啶-4-基)-胺，具有结构式(38)的化合物粗2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，6，7，8-四氢喹唑啉(130mg，0.35mmol，1eq)溶解在二烷(5ml)中并向其中加入Pd(OAc)2(4mg，0.02mmol，0.05eq)，随后加入BINAP(16mg，0.03mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(49mg，0.45mmol，1.3eq)和Cs2CO3(170mg，0.52mmol，1.5eq)。反应混合物在80摄氏度下加热15h。将反应混合物冷却至r.t.和滤过Celite并将粗品通过闪蒸柱色谱(1∶1/乙酸乙酯∶己烷)而纯化，得到[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基]-(3-甲基吡啶-4-基)-胺，具有结构式(38)的化合物(110mg，86％)。
方案U(具有结构式(50)，(40)，(45)，(57)，(59)的化合物的合成) 4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基氨基]-烟酸乙基酯按照用于合成[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基]-(3-甲基吡啶-4-基)-胺，即具有结构式(38)的化合物的一般反应步骤，4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢-喹唑啉-4-基氨基]-烟酸乙基酯以67％产率分离。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基氨基]-烟酸，50向4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基-氨基]-烟酸乙基酯(150mg，0.35mmol，1eq)在MeOH(5ml)中的悬浮液加入1N NaOH(aq)溶液(423μl，0.42mmol，1.2eq)并将反应混合物回流1h。将溶液冷却至r.t.和真空浓缩。将水(20ml)加入粗品并将水层酸化至pH4。将固体过滤，用水(2×5ml)洗涤和连夜干燥，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基氨基]-烟酸，具有结构式(50)的化合物(132mg，94％)，作为膏着色固体。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基氨基]-N-环丙基烟酰胺，具有结构式(45)的化合物向4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基-氨基]-烟酸(40mg，0.10mmol，1eq)在无水DMF(1ml)中的悬浮液加入三乙基胺(15μl，0.11mmol，1.1eq)，随后加入环丙基胺(70μl，0.10mmol，10eq)。向悬浮液中滴加PyBrOP(56mg，0.21mmol，1.2eq)在DMF(500μl)中的溶液。反应混合物在室温下搅拌16h。将反应体系真空浓缩和将残余物用醚(2×20ml)研磨。粗将残余物通过闪蒸柱色谱(在CHCl3中的0-5％MeOH)而纯化，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基氨基]-N-环丙基烟酰胺，具有结构式(45)的化合物，(15mg，34％)作为白色固体。
具有结构式(40)的化合物通过用于合成具有结构式(45)的化合物所述的方法，采用甲基胺替代环丙基胺而制备。
具有结构式(57)的化合物通过用于合成具有结构式(45)的化合物所述的方法，采用1-氨基-丙烷-2-(S)-醇替代环丙基胺而制备。具有结构式(59)的化合物通过用于合成具有结构式(45)的化合物所述的方法，采用N，N′-二乙基乙烯二胺替代环丙基胺而制备。
方案V(具有结构式(39)的化合物的合成) 2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-醇向2-氟-5-氯苯并眯(1.05g，6.08mmol，1.2eq)在EtOH(20ml)中的溶液加入在乙醇(5ml)中的3-氧代-四氢呋喃-2-羧酸乙基酯(根据Moyer，M.P；Feldman，P.L.；Rapoport，H.J.Org.Chem，1985，50，5223-5230制备；800mg，5.06mmol，1eq)。反应混合物在80摄氏度下加热过夜。将反应混合物冷却至r.t.和粗将残余物通过闪蒸柱色谱(在CHCl3中的5％MeOH)而纯化，得到白色固体2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-醇(650mg，53％)。
4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶将2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-醇(100mg，0.36mmol，1eq)在POCl3(5ml)中的悬浮液在回流下搅拌1h。溶液冷却至r.t.和在减压下浓缩，得到白色固体，然后溶解在二氯甲烷中。将溶液冷却至0摄氏度并加入冰，随后加入sat.NaHCO3。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩以提供粗白色固体，然后通过闪蒸柱色谱(1∶9EtOAc∶己烷)而纯化，得到4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶(78mg，73％)作为白色固体。
2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶在rt.下，向4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]-嘧啶(80mg，0.28mmol，1eq)在57％水(2ml)HI溶液中的悬浮液加入NaI(206mg，1.41mmol，5eq)。将反应混合物在r.t.下搅拌过夜并随后倒到冰上。产物用氯仿提取和水层用NaHCO3中和和用更多的氯仿进一步提取。将有机层合并用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩以提供粗残余物2-(5-氯-2-氟-苯基)-4-碘-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶，不进一步纯化。嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，具有结构式(39)的化合物向2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶(106mg，0.28mmol，1eq)在二烷(5ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(3mg，0.01mmol，0.05eq)，随后加入BINAP(13mg，0.02mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(40mg，0.37mmol，1.3eq)和Cs2CO3(138mg，0.42mmol，1.5eq)。反应混合物在80摄氏度下加热15h。将反应混合物冷却至r.t.和滤过Celite并将粗品通过闪蒸柱色谱(4∶1/乙酸乙酯∶己烷-100％乙酸乙酯)而纯化，得到[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，即具有结构式(39)的化合物(30mg，30％)作为白色固体。
方案W(具有结构式(44)的化合物的合成) 4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯向4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]-嘧啶(320mg，1.13mmol，1eq)在二烷(5ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(13mg，0.06mmol，0.05eq)，随后加入BINAP(53mg，0.08mmol，0.075eq)，4-氨基-烟酸乙基酯(206mg，1.24mmol，1.1eq)和Cs2CO3(478mg，1.46mmol，1.5eq)。反应混合物在80摄氏度下加热15h。将反应混合物冷却至r.t.和滤过Celite并将粗品通过闪蒸柱色谱(在CHCl3中的0-5％MeOH)而纯化，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯(100mg，21％)作为白色固体。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸向4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯(100mg，0.24mmol，1eq)在MeOH(5ml)中的悬浮液加入1NNaOH(aq)溶液(290μl，0.29mmol，1.2eq)并将反应混合物回流5h。将溶液冷却至r.t.和真空浓缩。将水(20ml)加入粗品并将水层酸化至pH4。将固体过滤，用水(2×5ml)洗涤和连夜干燥，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢iur并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸(88mg，94％)作为膏着色固体。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-N-甲基烟酰胺，具有结构式(44)的化合物向4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸(75mg，0.19mmol，1eq)在DMF(2ml)中的悬浮液加入三乙基-胺(30μl，0.21mmol，1.1eq)，随后加入甲基胺(1.17ml，3.89mmol，在THF中的2M溶液，20eq)。向o悬浮液中滴加PyBrOP(100mg，0.21mmol，1.2eq)在DMF(1ml)中的溶液。反应混合物在室温下搅拌16h。反应真空浓缩和将残余物用醚(2×20ml)研磨。粗将残余物通过闪蒸柱色谱(在CHCl3中的5％MeOH)而纯化，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-N-甲基烟酰胺，即具有结构式(44)的化合物(20mg，26％)作为白色固体。
方案X(具有结构式(43)的化合物的合成) 2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-醇向2-氟-5-氯苯并眯(1.95g，11.27mmol，1.1eq)在EtOH(20ml)中的溶液加入2-甲基-5-氧代环戊烷羧酸乙基酯(根据Wang，C；Gu，X.；Yu，M.S.；Curran，D.P.四面体，1998，29，8355-8370制备；1.60g，10.26mmol，1eq)在乙醇(5ml)中的溶液。反应混合物在80摄氏度下加热过夜。将反应混合物冷却至r.t.并将溶剂在真空中去除，得到粗残余物，然后通过从热乙酸乙酯中重结晶，得到2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-醇(1.0g，35％)作为白色结晶固体和滤液通过闪蒸柱色谱而进一步纯化，得到另外850mg 2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-醇。
2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶将2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊-嘧啶-4-醇(200mg，0.72mmol，1eq)在POCl3(5ml)中的悬浮液在回流下搅拌1h。将溶液随后冷却至室温和在减压下浓缩，得到白色固体。残余POCl3通过与氯仿共沸而去除。在r.t.下，向粗亚氨基氯在57％水(5ml)HI溶液中的悬浮液加入NaI(540mg，3.60mmol，5eq)。将反应混合物在r.t.下搅拌过夜并随后倒到冰上。产物用氯仿提取和水层用NaHCO3中和和用氯仿进一步提取。将有机层合并用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩以提供粗残余物2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶，不进一步纯化。-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，具有结构式(43)的化合物向2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5-甲基-6，7-二氢-5H-环-五嘧啶(275mg，0.71mmol，1eq)在二烷(5ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(8mg，0.04mmol，0.05eq)，随后加入BINAP(33mg，0.05mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(84mg，0.78mmol，1.1eq)和Cs2CO3(347mg，1.06mmol，1.5eq)。反应混合物在80摄氏度下加热15h。将反应混合物冷却至r.t.和滤过Celite并将粗品通过闪蒸柱色谱(1∶1/乙酸乙酯∶己烷-100％乙酸乙酯)而纯化，得到[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，具有结构式(43)的化合物(250mg，96％)。
方案Y(具有结构式(48)，(49)，(47)，(46)的化合物的合成) 4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯，化合物具有结构式(48)按照用于合成[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，即具有结构式(43)的化合物的一般反应步骤，4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯，具有结构式(48)的化合物，以68％产率分离。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-烟酸，具有结构式(49)的化合物向4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环-五嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯(180mg，0.42mmol，1eq)在MeOH(5ml)中的悬浮液加入1NNaOH(aq)溶液(634μl，0.63mmol，1.5eq)和反应混合物加热回流1h。将溶液冷却至r.t.和真空浓缩。将水(20ml)加入粗品和水层酸化至pH4。将固体过滤，用水(2×5ml)洗涤和连夜干燥，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-烟酸，具有结构式(49)的化合物(160mg，95％)作为白色固体。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-N-甲基-烟酰胺，具有结构式(47)的化合物向4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环-五嘧啶-4-基氨基]-烟酸(20mg，0.05mmol，1eq)在DMF(2ml)中的悬浮液加入三乙基胺(8μl，0.05mmol，1.1eq)，随后加入甲基胺(250μl，3.89mmol，在THF中的2M溶液，10eq)。向悬浮液中滴加PyBOP(40mg，0.08mmol，1.5eq)在DMF(1ml)中的溶液。反应混合物在室温下搅拌16h。反应真空浓缩和将残余物用醚(2×20ml)研磨。粗将残余物通过闪蒸柱色谱(100％乙酸乙酯)而纯化，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-N-甲基-烟酰胺，即具有结构式(47)的化合物，(12mg，58％)作为白色固体。
具有结构式(46)的化合物的化合物通过用于合成具有结构式(47)的化合物所述的方法采用氨替代甲基胺而制备。
具有结构式(1)的化合物可在本领域已知的功能基团转化反应(包括以下描述的那些)之后相互转化。用于制备具有结构式(1)的化合物的许多中间体是已知的化合物或是已知的化合物的类似物(可按照熟练人员可容易取得的本领域已知的方法改性而制备)。
具有结构式(1)的化合物可按照本领域已知的用于将三价氮转化成其N-氧化物形式的步骤而被转化成相应N-氧化物形式。所述N-氧化反应可一般通过将具有结构式(1)的起始原料与合适的有机或无机过氧化物反应而进行。合适的无机过氧化物包括，例如，过氧化氢，碱金属或碱土金属过氧化物，如过氧化钠，过氧化钾；合适的有机过氧化物可包括过氧酸如，例如，苯过氧酸或卤代取代的苯过氧酸，如3-氯苯过氧酸，过氧链烷酸，如过氧乙酸，氢过氧化烷基，如氢过氧化叔丁基。合适的溶剂是，例如，水，低级醇，如乙醇和类似物，烃，如甲苯，酮，如2-丁酮，卤化烃，如二氯甲烷，和这些溶剂的混合物。
具有结构式(1)的化合物的纯立体化学异构体形式可通过应用本领域已知的步骤而得到。非对映体可通过物理方法如选择性结晶和色谱技术，如，逆流分布，液体色谱和类似方法而分离。具有结构式(1)的化合物可作为对映异构体的外消旋混合物而得到，所述对映异构体可按照本领域已知的拆分步骤相互分离。充分碱性或酸性的具有结构式(1)的外消旋化合物可通过与合适的手性酸，相应手性碱反应而被转化成相应非对映体盐形式。所述非对映体盐形式随后，例如，通过选择性或分级结晶而分离和对映异构体通过碱或酸而从中释放。分离具有结构式(1)的化合物的对映异构体形式的一种替代方法包括液体色谱，尤其是使用手性固定相的液体色谱。所述纯立体化学异构体形式也可衍生自合适的起始原料的相应纯立体化学异构体形式，前提是反应立体特异地出现。优选，如果需要特定立体异构体，所述化合物可通过立体特异性制备方法而合成。这些方法可有利地采用对映异构体纯起始原料。
可用于本发明的化合物和其相关化合物的给药方式和配制取决于症状的性质，症状的严重性，所要治疗的特定患者，和医师的判断；配方取决于给药模式。本发明化合物或其任何子组可被转化成各种药物形式用于给药目的。作为合适的组合物，可提及常用于全身给药的所有的组合物。
为了制备本发明药物组合物，治疗有效量的特殊化合物，视需要加成盐形式或金属配合物，作为活性成分与药物可接受载体紧密混合，所述载体可以是各种各样的形式，取决于用于给药的制剂的形式。本文中的治疗有效量是针对感染患者或处于感染危险的患者足以预防性性地作用，稳定或减少病毒感染，和尤其是HCV病毒感染，或防止疾病发展成慢性肝炎，肝纤维化，肝硬化，晚期肝疾病，HCC(肝蜂窝癌)和类似疾病的量。
药物组合物最好是尤其适用于口服，直肠，经皮，或通过不经肠道注射给药的单元剂型。在制备口服剂量形式的组合物时，可以使用任何常规的药物介质如，例如，水，二醇，油，醇和类似物，在口服液体制剂如悬浮液，糖浆，酏剂，乳液和溶液的情况下；或固体载体如淀粉，糖，白陶土，润滑剂，粘结剂，崩解剂和类似物，在粉末，丸剂，胶囊，和片剂的情况下。由于其容易给药，片剂和胶囊代表最有利的口服剂量单元形式，其中显然采用固体药物载体。对于不经肠道组合物，载体通常包含至少占大部分的无菌水，但可以包括其它成分，例如，以帮助溶解。例如可制备可注射溶液，其中载体包含盐水溶液，葡萄糖溶液或盐水和葡萄糖溶液的混合物。也可制备可注射悬浮液，其中可以采用合适的液体载体，悬浮剂和类似物。还包括预期在使用之前不久转化成液体形式制剂的固体形式制剂。在适用于经皮给药的组合物中，载体视需要包含渗透增加剂和/或合适的润湿剂，视需要与较小比例的任何性质的合适的添加剂相结合，所述添加剂不带来对皮肤的明显有害影响。
因为本发明化合物是小分子，它们适宜地通过口服给药而给药，其中将它们与合适的药物赋形剂配混以提供片剂，胶囊，糖浆，和类似物。适用于口服给药的配方也可包括次要组分如缓冲剂，香味剂和类似物。通常，活性成分在配方中的量是总配方的5％-95％，但可根据载体而允许宽的偏差。合适的载体包括蔗糖，果胶，硬脂酸镁，乳糖，花生油，橄榄油，水，和类似物。
可用于本发明的化合物也可通过栓剂或其它透膜载体而给药。通常，这些配方包括有助于该化合物通过粘膜的赋形剂如药物可接受洗涤剂。
该化合物也可针对局部症状如牛皮癣，或在预期渗透皮肤的配方中局部地给药。这些包括可通过已知的方法而配制的洗剂，膏，软膏和类似物。该化合物也可通过注射而给药，包括静脉内，肌内，皮下或腹膜内注射。用于这些用途的典型的配方是在等渗载体如Hank′s溶液或Ringer′s溶液中的液体配方。
本发明化合物也可通过口服吸入或吸入利用本领域用于如此给药的方法和配方而给药。因此，一般来说本发明化合物可以溶液，悬浮液或干粉末的形式向肺给药，其中溶液是优选的。开发通过口服吸入或吸入用于传输溶液，悬浮液或干粉末的任何体系适用于本化合物的给药。
因此，本发明还提供了一种适用于通过口而吸入或吸入给药的药物组合物，包含具有结构式(1)的化合物和药物可接受载体。优选，本发明化合物通过吸入喷雾或烟雾化剂量的溶液而给药。
可选的配方包括鼻喷剂，脂质体配方，缓释配方，和类似物，这是本领域已知的。
可以使用任何合适的配方。对本领域已知的配方的概述在Remington′s药物科学(最新版，Mack出版公司，Easton，PA)中找到。对该手册的参考是本领域常规的。
尤其有利地配制单元剂型的前述药物组合物以便于给药和剂量均匀性。这里所用的单元剂型是指适用作单元剂量的物理上离散的单元，每一单元包含预定量的计算用于产生所需治疗作用的活性成分以及所需的药物载体。这些单元剂型的例子是片剂(包括核或涂覆片剂)，胶囊，丸剂，栓剂，粉末小包，晶片，可注射溶液或悬浮液和类似物，和其分开的多倍形式。
本发明化合物的剂量取决于在许多对不同病人各异的因素。但据信，每日口服剂量一般采用0.001-100mg/kg总体重，优选0.01-50mg/kg和更优选约0.01mg/kg-10mg/kg。但剂量服法根据所要治疗的症状和医师的判断而变化。
一般预期，抗病毒有效的每日量是0.01mg/kg至500mg/kg体重，更优选0.1mg/kg至50mg/kg体重。可合适地将所需剂量作为两个，三个，四个或更多个子剂量在整天的合适间隔内给药。所述子剂量可被配制成单元剂型，例如，包含1至1000mg，和尤其是5至200mg活性成分/单元剂型。
给药的准确剂量和频率取决于所用的具有结构式(I)的特定化合物，所要治疗的特定症状，所要治疗的症状的严重性，特定病人的年龄，体重，性别，病症程度和全身性脉象以及该个人可能正在摄入的其它药物，这是本领域熟练技术人员熟知的。另外，所述有效的每日量显然可增减，这取决于所要治疗的患者的响应和/或取决于对本发明化合物开处方的医师的评估。以上提及的有效的每日量因此仅是指导性的。
从实施例显然看出，由于其有利的抗病毒性能，本发明化合物可用于治疗被HCV感染的个体和用于这些个体的预防。一般来说，本发明化合物可用于治疗被黄热病毒感染的恒温动物。可用本发明化合物治疗的症状，尤其与HCV和其它致病黄热病毒，如黄热病，登革热(1-4型)，St.Louis大脑炎，列性乙型脑炎，墨累山谷脑炎，West Nile病毒和库宁病毒有关的症状。与HCV有关的症状包括导致肝硬化，晚期肝疾病，和HCC的渐进性肝纤维化，炎症和坏死；和其它致病黄热病毒的症状，包括黄热病，登革热，出血发热和脑炎。
本发明化合物或其任何子组可因此用作针对上述症状的医学。所述作为医学的用途或治疗方法包括向HCV-感染的患者全身供给有效地抗击与HCV有关的症状和其它致病黄热病毒的量。因此，本发明化合物可用于制造可用于治疗与HCV和其它致病黄热病毒有关的症状的药物。
在实施方案，本发明涉及本文所定义的具有结构式(1)的化合物或其任何子组在制造药物中的用途，所述药物针对哺乳动物用于治疗或对抗与HCV感染有关的感染或疾病。本发明还涉及一种治疗黄热病毒感染，或与黄热病毒感染有关的疾病的方法，包括向所需的哺乳动物供给有效量的本文所定义的具有结构式(1)的化合物或其子组。
在另一实施方案中，本发明涉及本文所定义的具有结构式(1)的化合物或其任何子组用于制造药物的用途，所述药物可用于抑制被黄热病毒，尤其是HCV感染的哺乳动物的HCV活性。
在另一实施方案中，本发明涉及本文所定义的具有结构式(1)的化合物或其任何子组用于制造药物的用途，所述药物可用于抑制被黄热病毒，尤其是HCV感染的哺乳动物的HCV活性，其中所述HCV在其复制中被抑制。
应该注意，具有结构式(1)的化合物可作为单个活性成分，或作为具有该结构式的几种实施方案的混合物而给药。本发明化合物可作为单个治疗剂或与其它治疗剂结合使用。
因此，以前已知的抗HCV化合物，如，例如，干扰素-α(IFN-α)，聚乙二醇化干扰素-α和/或利巴韦林，和本发明化合物的组合可作为医学用于组合治疗。术语″组合治疗″涉及一种包含必须有的(a)a本发明化合物，和(b)视需要另一抗HCV化合物的产品，作为同时，分开或顺序用于治疗HCV感染，尤其是，用于治疗1型HCV感染的组合制剂。因此，为了对抗或治疗HCV感染，本发明化合物可与例如，干扰素-α(IFN-α)，聚乙二醇化干扰素-α和/或利巴韦林，以及基于靶向HCV表位的抗体，小干扰性RNA(SiRNA)，核糖酶，DNA酶，反义RNA，例如NS3蛋白酶的小分子拮抗剂，NS3解螺旋酶和NS5B聚合酶的治疗剂相结合而共给药。
因此，本发明涉及以上定义的具有结构式(1)的化合物或其任何子组用于制造药物的用途，所述药物可用于抑制被HCV病毒感染的哺乳动物的HCV活性，其中所述药物用于组合治疗，所述组合治疗优选包含具有结构式(1)的化合物和(聚乙二醇化)IFN-α和/或利巴韦林，和可能抗HIV化合物。
所属技术领域的专业人员可以理解，具有结构式(1)的化合物可在基于Lohmann等人(1999)Science 285110-113的细胞HCV复制子体系中测试，其中包括由Krieger等人(2001)病毒学杂志754614-4624(在此作为参考并入本发明)所述的进一步改进，这进一步在实施例部分例证。尽管不是用于HCV的完全感染型号，该型号被广泛接受为目前可得到的最可靠和有效的自主HCV RNA复制模型。在该细胞型号中具有抗HCV活性的化合物被认为是用于进一步开发对哺乳动物HCV感染的治疗的代表。可以理解，重要的是将具体地影响HCV功能的化合物区别于在HCV复制子型号中产生细胞毒性或细胞静电作用，和因此造成HCVRNA或键接通讯酶浓度下降的那些。本领域已知用于评估细胞细胞毒性的试验，例如基于线粒体酶的活性使用荧光氧化还原染料如刃天青。另外，细胞反筛可用于评估键接报道基因活性，如荧光虫荧光素酶的非选择性抑制。合适的细胞类型可通过稳定的转染而配有其表达取决于基本活性基因启动基因的萤花素酶报道基因，和这些细胞可用作反筛以消除非选择性抑制剂。
以上和下提及的所有的专利，专利申请和文章在此引以参考。
实施例以下实施例用于说明本发明而非限定于此。
实施例1具有结构式(1)的化合物在HCV复制子分析中的活性稳定的复制子细胞通讯子分析在细胞分析中，研究本发明化合物在抑制HCV RNA复制中的活性。该分析表明，本化合物具有针对在细胞培养物中起作用的HCV复制子的活性。该蜂窝分析基于在多目标筛选技术中的双顺反子表达构造，例如描述于Lohmann等人(1999)Science vol.285 pp.110-113并进行改进Krieger等人(2001)病毒学杂志754614-4624.实质上，该方法如下。
该分析采用稳定地转染的细胞系Huh-7 luc/neo(以下称作Huh-Luc)。该细胞系隐藏一种编码双顺反子表达结构的RNA，包含由脑心肌炎病毒(EMCV)的内核多糖体进入部位(IRES)转译的Ib型HCV的野生型NS3-NS5B区域，其前方是通讯部分(FfL-萤花素酶)，和可选标示部分(neoR，新霉素磷转移酶)。该构造以来自Ib型HCV的5′和3′NTRs(非翻译区域)为边界。复制子细胞在G418(neoR)存在下的连续培养取决于HCVRNA的复制。自动复制至高水平，编码尤其萤虫素酶的表达HCV RNA的稳定地转染的复制子细胞用于筛选抗病毒化合物。
细胞分析实验方法将复制子细胞在以各种浓度加入的试验和对比化合物的存在下置于384井板中。在培养3天之后，HCV复制通过分析萤虫素酶活性(使用标准萤虫素酶分析底物和试剂和Perkin Elmer ViewLuxTMultraHTS微板成像仪)而测定。对比培养物中的复制子细胞在不存在任何抑制剂的情况下具有高萤虫素酶表达。该化合物对萤虫素酶活性的抑制性活性在Huh-Luc细胞上监控，得到每一试验化合物的剂量-响应曲线。随后计算EC50值，该值表示该化合物降低所测萤虫素酶活性，或更多具体地，基因键接HCV复制子RNA的复制能力的50％水平所需的量。在下表中，栏1提供了标识号，栏2给出了在上述Huh7-Luc分析中的结果。
权利要求
1.下式化合物 或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6是视需要取代的饱和，不饱和或芳族环包含4-7个环原子，其中X是选自N，O，或S的原子；n是0，1，2，或3；每一Ar1和Ar2独立地是视需要取代的芳族部分或视需要取代的杂芳族部分，其中所述杂芳族部分包含一个或多个O，S，和/或N，和这些芳族或杂芳族部分包含5-12个环原子；R1是H，或视需要取代的烷基(1-10C)，链烯基(2-10C)，或炔基(2-10C)；前提是如果所述嘧啶环的稠环桥接位5和6包含6个环原子，那么它不是芳族环；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性。
2.下式化合物 或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6是包含5或6个环原子的视需要取代的饱和，不饱和或芳族环，其中X是选自N或O的原子；n是0，1，或2；R1是H，或视需要取代的烷基(1-6C)；每一R3独立地是氢，卤代，氰基，硝基，烷基(1-6C)，聚卤代烷基(1-6C)，-COR，-CONR2，-COOR，-OR，-OCOR，-NR2，或-NRCOR；每一R4独立地是氢，卤代，氰基，硝基，聚卤代烷基(1-6C)，或烷基(1-6C)；其中每一R独立地是氢，羟基，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，环烷基(3-7C)，Het，或烷基(1-6C)视需要用一个或两个选自羟基，环烷基(3-7C)，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，和Het的取代基取代；Het是包含1至2个分别独立地选自氮，氧和硫的杂原子的5或6元饱和，部分不饱和或完全不饱和杂环环，和其中基团Het总体上可视需要用一个，两个或三个分别独立地选自卤代，烷基(1-6C)，羟基，和氧代的取代基取代；前提是如果所述嘧啶环的稠环桥接位5和6包含6个环原子，那么它不是芳族环；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性，防止或治疗与HCV有关的症状。
3.下式化合物 或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6与嘧啶环一起形成选自以下的基团 其中任何这些基团可视需要用一个或两个选自烷基(1-6C)，苯基，和苄基的取代基取代；R3是氢，卤代，烷基(1-6C)，-CF3，-COR，-CONR2，或-COOR；每一R4aR4b独立地是氢或卤代；其中每一R独立地是氢，羟基，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，环烷基(3-7C)，Het，或烷基(1-6C)，视需要用一个或两个选自羟基，环烷基(3-7C)，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，和Het的取代基取代；Het是选自以下的基团 其中基团Het可视需要用一个或两个分别独立地选自烷基(1-6C)，和氧代的取代基取代；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性，防止或治疗与HCV有关的症状。
4.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中化合物是
5.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中化合物是
6.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中化合物是
7.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中化合物是
8.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中化合物是
9.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中化合物是
10.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中化合物是
11.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中化合物是
12.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中该药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于防止趋向慢性肝炎，肝纤维化，肝硬化，晚期肝疾病，HCC(肝蜂窝癌)和类似疾病的疾病发展。
13.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于治疗慢性肝炎，肝纤维化，肝硬化，晚期肝疾病，HCC(肝蜂窝癌)和类似疾病。
全文摘要
本发明涉及双环嘧啶作为HCV复制抑制剂的用途以及其在用于治疗或对抗HCV感染的药物组合物中的用途。另外，本发明涉及用于制备这些药物组合物的方法。本发明还涉及本发明双环嘧啶与其它抗HCV剂的组合。
文档编号A61P1/00GK101031304SQ200580033106
公开日2007年9月5日 申请日期2005年9月29日 优先权日2004年9月30日
发明者K·A·西门, T·-I·林, O·兰茨, D·L·N·G·苏勒罗克斯, P·J·-M·B·拉博伊森 申请人:泰博特克药品有限公司
技术领域：
本发明涉及双环嘧啶作为HCV复制抑制剂的用途以及其在用于治疗或对抗HCV感染的药物组合物中的用途。另外，本发明涉及用于制备这些药物组合物的方法。本发明还涉及本发明双环嘧啶与其它抗HCV剂的组合。
自从1989年被发现为涉及大多数病毒非A，非B肝炎的试剂(Choo等人，Science 244，359-362，1989)，肝炎C病毒(HCV)已成为许多医学研究的重点(Lauer，G.M和Walker，B.D.，New Eng.J Med.345，41-52，2001)。HCV是肝炎病毒类病毒的黄热病毒属，和与包括许多涉及人疾病的病毒，如登革病毒和黄热病毒的黄热病毒类，和与包括牛病毒腹泻病毒(BVDV)的动物pestivirus属密切相关。HCV是正向，单束RNA病毒，具有约9,600bp的基因组。基因组包含呈现RNA二级结构的5′和3′未翻译区域，和编码约3,010-3,030氨基酸的单个聚蛋白质的中心开放读取架构。聚蛋白质编码通过以宿主和病毒蛋白酶为媒介的或一系列被精心安排的同时和后翻译内蛋白水解裂解而由前体聚蛋白质生成的十个基因产物。病毒结构蛋白质包括核壳包核酸蛋白质，和两个被膜糖蛋白E1和E2。非结构(NS)蛋白质编码一些基本病毒酶功能(解螺旋酶，聚合酶，蛋白酶)，以及未知功能的蛋白质。病毒基因组的复制以RNA依赖性RNA聚合酶为媒介，后者由非结构蛋白质5b(NS5B)编码。除了聚合酶，都在双功能NS3蛋白质中编码的病毒解螺旋酶和蛋白酶功能已经表现出对于黑猩猩感染模型中HCV RNA复制的必要性(Kolykhalov，A.A.，Mihalik，K.，Feinstone，S.M.，和Rice，CM.J Virol.74，2046-2051，2000)。除了NS3丝氨酸蛋白酶，HCV还编码NS2区域中的金属蛋白质酶。
HCV优先在肝细胞中复制但不是直接细胞变性的，导致持续感染。尤其是，剧烈T-淋巴细胞响应的缺乏和高病毒变异倾向似乎促进高比率的慢性感染。有6种主要的HCV基因型和超过50种的子型，地理上各异地分布。1型HCV在美国和欧洲是主要的基因型。例如，1型HCV占美国所有HCV感染的70至75％。HCV的广泛遗传性蛋白异质性具有重要的诊断和临床意义，可解释疫苗发展的困难和对治疗响应的缺乏。世界上估计1.7亿人被肝炎C病毒(HCV)感染。在起始急性感染之后，大多数感染的个体产生慢性肝炎，可发展成肝纤维化，导致肝硬化，晚期肝疾病，和HCC(肝蜂窝癌)(National Institutesof Health ConsensusDevelopment Conference StatementManagement of HeptitisC.Heptology，36，5 Suppl.S3-S20，2002)。由于HCV感染的肝硬化是仅美国每年死亡约10,000人的原因，而且是肝移植的主要原因。HCV的传输可通过与污染的血液或血液制品接触而进行，例如在输血或静脉内药物使用之后。用于血液筛选的诊断试验的引入导致输血后HCV发病率的下降趋势。但如果缓慢发展成晚期肝疾病，现有感染数十年来仍表示一种严重的医学和经济负担(Kim，W.R.Heptology，36，5 Suppl.S30-S34，2002)。
对该慢性疾病的治疗是一种未满足的临床需要，因为目前的治疗仅部分有效且受不受欢迎的副作用的限制。
目前的HCV治疗基于与利巴韦林相结合的(聚乙二醇化)干扰素-α(IFN-α)。该组合治疗对于基因型1病毒所感染的40％以上的患者和基因型2和3所感染的约80％以上的病人产生持续的病毒响应。除了对HCV型1的局限效力，组合治疗具有明显副作用和对许多患者的耐受不好。例如，在聚乙二醇化干扰素和利巴韦林的登记试验中，明显副作用导致约10至14％患者的不连续治疗。组合治疗的主要副作用包括流感状症状，血液异常，和神经精神病症状。公共卫生的一个主要目标是开发更有效的，适宜的和耐受的治疗。因此，医学上非常需要能够抑制HCV复制的低分子量化合物。通过抑制HCV复制，可快速降低被肝炎C病毒感染的病人的病毒负荷。病毒负荷的下降证实了HCV抑制剂的临床抗病毒活性的原理。通过保持病人的低至未可检测水平的病毒负荷，疾病发展得到延迟或甚至停止，避免因此产生慢性肝炎，肝纤维化，肝硬化，晚期肝疾病，和HCC(肝蜂窝癌)。
病毒，和尤其是HCV病毒针对抑制剂的耐性也是治疗失败的一个原因。接受抗HCV治疗的许多患者不完全对该治疗作出反应，主要由于病毒对一种或多种所用药物的耐性。另外有人指出，耐性病毒被传送至新感染的个体，导致严重限制了这些新用药患者的治疗方案。因此本领域需要用于抗病毒治疗，更尤其用于肝炎治疗的新化合物。本领域尤其需要不仅对野生型HCV病毒，而且对越来越常见的耐性HCV病毒有活性的化合物。
用于本发明的化合物是嘧啶或三嗪的衍生物。PCT出版物WOO1/47921描述了嘧啶和三嗪化合物，它们是与各种炎症症状相关的激酶活性的抑制剂。另外，PCT出版物WO00/12497和WO02/076976描述了喹唑啉衍生物，它们是TGFβR受体激酶和TGF-β为媒介的信号传送的抑制剂。
WO04/087056涉及TGF-β的双环嘧啶抑制剂，其中嘧啶核在(5)和(6)位被桥接和进一步在位(2)和(4)上被包含芳族部分的取代基取代。这些化合物可通过抑制TGFβ活性以缓和症状而治疗被试者。
WO03/097615涉及治疗与TGF-β信号传送有关的增生病症的方法，其中将TGF-β的非肽小分子抑制剂具体地结合至型I TGF-β受体(TGFβ-R1)上。抑制剂是喹唑啉衍生物。
WO04/065392涉及缩合吡啶和嘧啶和其作为ALK-5受体配体的用途。这些化合物是治疗活性的，尤其用于治疗或预防特征通过转化生长因子β(TGF-β)的过度表达的病症。公开了用于这些治疗的药物组合物。
WO03/078426公开作为蛋白质激酶抑制剂的唑基氨基吖嗪，包含所述化合物的药物可接受组合物，和使用该组合物治疗各种疾病，症状，或病症的方法。
WO03/078427公开作为蛋白质激酶抑制剂的唑基氨基吖嗪，包含所述化合物的药物可接受组合物，和使用该组合物治疗各种疾病，症状，或病症的方法。
WO2003077921公开作为蛋白质激酶抑制剂的吖嗪基氨基吡咯，包含所述化合物的药物可接受组合物，和使用该组合物治疗各种疾病，症状，或病症的方法。
WO03/078423公开可用作蛋白质激酶抑制剂的化合物，包含所述化合物的药物可接受组合物，和使用该组合物治疗各种疾病，症状，或病症的方法。
WO02/22601描述了用于治疗疾病如癌，糖尿病和阿耳茨海默氏疾病的吡唑组合物，包含药物可接受载体和可用作蛋白质激酶抑制剂，尤其aurora-2和GSK-3的抑制剂的化合物。
发明公开本发明化合物是包含稠环桥接位5和6的嘧啶衍生物。该化合物具有结构式 或其药物可接受盐，其中嘧啶环稠环桥接位5和6是饱和，不饱和或芳族的。稠环是视需要取代的环和包含4-7个环原子，其中每一环原子独立地是C，N，O或S。但如果所述稠环包含6个环原子，它不是芳族的。每一Ar1和Ar2独立地是视需要取代的芳族部分或视需要取代的杂芳族部分，其中所述杂芳族部分包含一个或多个O，S，和/或N；通常这些部分包含5-12个环原子。
R1是H，或视需要取代的烷基(1-10C)，链烯基(2-10C)，或炔基(2-10C)。
可用于本发明的化合物是嘧啶的衍生物，包含在5-6位上的桥和在对应于嘧啶的2-和4-位的位置上的指定取代基。进一步，非干扰性取代基也可被包括。
本发明涉及下式化合物 或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6是包含4-7个环原子的视需要取代的饱和，不饱和或芳族环，其中X是选自N，O，或S的原子；n是0，1，2，或3；每一Ar1和Ar2独立地是视需要取代的芳族部分或视需要取代的杂芳族部分，其中所述杂芳族部分包含一个或多个O，S，和/或N，和这些芳族或杂芳族部分包含5-12个环原子；
R1是H，或视需要取代的烷基(1-10C)，链烯基(2-10C)，或炔基(2-10C)；前提是如果桥接嘧啶环的位5和6的所述稠环包含6个环原子，那么它不是芳族环；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性，防止或治疗与HCV有关的症状。
在本发明的一个实施方案中，提供了具有结构式(1)的化合物用于制造药物的用途，所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于防止趋向慢性肝炎，肝纤维化，肝硬化，晚期肝疾病，HCC(肝蜂窝癌)和类似疾病的疾病发展。
在本发明的一个实施方案中，提供了具有结构式(1)的化合物用于制造药物的用途，所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于治疗慢性肝炎，肝纤维化，肝硬化，晚期肝疾病，HCC(肝蜂窝癌)和类似疾病。
可用于本发明的化合物是嘧啶衍生物，包含在5-6位上的桥和在对应于嘧啶的2-和4-位的位置上的指定取代基。进一步，也可包括非干扰性取代基。
在本发明的一个实施方案中，Ar1和Ar2分别独立地是视需要取代的芳族部分或视需要取代的杂芳族部分，其中所述杂芳族部分包含一个或两个O，S，和/或N，和这些芳族或杂芳族部分包含5-12个环原子。
在一个实施方案中，本发明涉及下式化合物 或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6是包含5或6个环原子的视需要取代的饱和，不饱和或芳族环，其中X是选自N或O的原子；n是0，1，或2；每一Ar1和Ar2独立地是视需要取代的芳族部分或视需要取代的杂芳族部分，其中所述杂芳族部分包含一个或两个N，和这些芳族或杂芳族部分包含5-7个环原子；R1是H，或视需要取代的烷基(1-10C)；前提是如果所述嘧啶环的稠环桥接位5和6包含6个环原子，那么它不是芳族环；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性，防止或治疗与HCV有关的症状。
在一个实施方案中，本发明涉及下式化合物 或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6是包含5或6个环原子的视需要取代的饱和，不饱和或芳族环，其中X是选自N或O的原子；n是0，1，或2；每一Ar1和Ar2独立地是视需要取代的苯基或视需要取代的吡啶基；R1是H，或视需要取代的烷基(1-6C)；前提是如果所述嘧啶环的稠环桥接位5和6包含6个环原子，那么它不是芳族环；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性，防止或治疗与HCV有关的症状。
在一个实施方案中，本发明涉及下式化合物 或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6是包含5或6个环原子的视需要取代的饱和，不饱和或芳族环，其中X是选自N或O的原子；n是0，1，或2；R1是H，或视需要取代的烷基(1-6C)；每一R3独立地是氢，卤代，氰基，硝基，烷基(1-6C)，聚卤代烷基(1-6C)，-COR，-CONR2，-COOR，-OR，-OCOR，-NR2，或-NRCOR；每一R4独立地是氢，卤代，氰基，硝基，聚卤代烷基(1-6C)，或烷基(1-6C)；其中每一R独立地是氢，羟基，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，环烷基(3-7C)，Het，或烷基(1-6C)视需要用一个或两个选自羟基，环烷基(3-7C)，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，和Het的取代基取代；Het是包含1至2个分别独立地选自氮，氧和硫的杂原子的5或6元饱和，部分不饱和或完全不饱和杂环环，和其中基团Het总体上可视需要用一个，两个或三个分别独立地选自卤代，烷基(1-6C)，羟基，和氧代的取代基取代；前提是如果所述嘧啶环的稠环桥接位5和6包含6个环原子，那么它不是芳族环；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性，防止或治疗与HCV有关的症状。
在一个实施方案中，本发明涉及下式化合物 或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6与嘧啶环一起形成选自以下的基团
其中任何这些基团可视需要用一个或两个选自烷基(1-6C)，苯基，和苄基的取代基取代；R3是氢，卤代，烷基(1-6C)，-CF3，-COR，-CONR2，或-COOR；每一R4aR4b独立地是氢或卤代；其中每一R独立地是氢，羟基，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，环烷基(3-7C)，Het，或烷基(1-6C)，视需要用一个或两个选自羟基，环烷基(3-7C)，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，和Het的取代基取代；Het是选自以下的基团 其中基团Het可视需要用一个或两个分别独立地选自烷基(1-6C)，和氧代的取代基取代；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性，防止或治疗与HCV有关的症状。
在一个实施方案中，本发明涉及使用下式化合物
或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6与嘧啶环一起形成选自以下的基团 其中任何这些基团可视需要用一个或两个烷基(1-6C)取代；R3是氢，烷基(1-6C)，或-CONR2；每一R4aR4b独立地是氢或卤代；其中每一R独立地是氢，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，或烷基(1-6C)，视需要用一个羟基取代；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性，防止或治疗与HCV有关的症状。
本文所用的″非干扰性取代基″是定性上使具有结构式(1)的化合物抑制HCV活性的能力保持原样的取代基。因此，该取代基可改变抑制度，但只要具有结构式(1)的化合物保持抑制活性的能力，该取代基被划分为″非干扰性。″本文所用的术语″烷基，″″链烯基″和″炔基″包括直链，支化-链和环状单价取代基，当它们未被取代时，包含仅C+H。例子包括甲基，乙基，异丁基，环己基，环戊基乙基，2-丙烯基，3-丁炔基，和类似物。通常，烷基，链烯基和炔基取代基包含1-10C(烷基)或2-10C(链烯基或炔基)。优选它们包含1-6C(低级烷基)或2-6C(低级链烯基或低级炔基)。
杂烷基，杂链烯基和杂炔基被类似地定义但可在主链残基内包含1或多个O，S或N杂原子或其组合。
本文所用的″酰基″包括烷基，链烯基，炔基的定义，和杂酰基包括分别通过羰基基团被偶联至其它残基上的相关杂原子。
″芳族″部分或″芳基″部分是指单环或稠合双环部分如苯基或萘基；″杂芳族″还表示包含一个或多个选自O，S和N的杂原子的单环或稠合双环环体系。杂原子的夹杂允许5-元环以及6-元环的夹杂。因此，典型的芳族/杂芳族体系包括吡啶基，嘧啶基，吲哚基，苯并咪唑基，苯并三唑基，异喹啉基，喹啉基，苯并噻唑基，苯并呋喃基，噻吩基，呋喃基，吡咯基，噻唑基，唑基，咪唑基和类似物。因为互变异构体是理论可能的，邻苯二甲亚氨基也被认为是芳族的。在环体系的电子分布方面具有芳族性特性的任何单环或稠环双环体系被包括在该定义中。通常，环体系包含5-12环成员原子。
类似地，″芳基烷基″和″杂芳基烷基″是指通过碳链(包括取代的或未取代的，饱和或不饱和碳链，通常1-8C，或其杂形式)偶联至另一残基上的芳族和杂芳族体系。这些碳链也可包括羰基基团，因此使得它们能够提供取代基作为酰基或杂酰基部分。
作为基团或基团一部分的术语″聚卤代烷基(1-6C)″被定义为单-或多卤代取代的烷基(1-6C)，尤其是用最高1，2，3，4，5，6，或更多个卤代原子取代的烷基(1-6C)，如被一个或多个氟原子取代的甲基或乙基，例如，二氟甲基，三氟甲基，三氟乙基。优选的是三氟甲基。还包括全氟烷基(1-6C)基团，它是其中所有的氢原子被替换为氟原子的烷基(1-6C)基团，如五氟乙基。如果一个以上的卤素原子连接到在聚卤代烷基(1-6C)定义内的烷基基团上，卤素原子可相同或不同。
一般来说，包含在取代基中的任何烷基，链烯基，炔基，酰基，或芳基基团可自身视需要被其它的取代基取代。这些取代基的性质类似于对原取代基自身所述的那些。因此，如果取代基的实施方案是烷基，该烷基可视需要被作为使得化学上合理和不会损害烷基本身的尺寸限度的取代基列举的剩余取代基取代；如，用于这些实施方案，被烷基或通过链烯基取代的烷基简单地扩展碳原子的上限。但被芳基，氨基，烷氧基，和类似物取代的烷基被包括。本发明化合物的特点由结构式(1)，(2)，和(3)定义和取代基的性质不太重要，只要取代基不影响该碱性结构的所述生物活性。
术语卤代是氟，氯，溴和碘的通称。本文以前所用的术语氧代或(＝O)在连接到碳原子上时形成羰基部分。只要环或环体系用氧代基团取代，键接氧代的碳原子是饱和碳。
用于定义变量的基团包括所有的可能异构体，除非另有所指。例如吡啶基包括1-吡啶基，2-吡啶基，3-吡啶基和4-吡啶基；戊基包括1-戊基，2-戊基和3-戊基。
如果任何变量在任何成分中出现一次以上，每一定义是独立的。
Ar1或Ar2上的非干扰性取代基，包括，但不限于，烷基，链烯基，炔基，卤代，-OR，-NR2，-SR，-SOR，-SO2R，-OCOR，-NRCOR，-NRCONR2，-NRCOOR，-OCONR2，-RCO，-COOR，-NRSOR，-NRSO2R，-SO3R，-CONR2，SO2NR2，其中每一R独立地是H或烷基(1-8C)，-CN，-CF3，和NO2，和类似取代基。Ar1或Ar2上的非干扰性取代基，包括，但不限于，烷基，链烯基，炔基，卤代，-OR，-NR2，-SR，-SOR，-SO2R，-OCOR，-NRCOR，-NRCONR2，-NRCOOR，-OCONR2，-RCO，-COR，-COOR，-NRSOR，-NRSO2R，-SO3R，-CONR2，SO2NR2，其中每一R独立地是H或烷基(1-8C)，-CN，-CF3，和NO2，和类似取代基。R的优选实施方案是H，烷基(1-10C)或其含杂原子的形式，分别视需要取代，尤其(1-4C)烷基；烷氧基(1-8C)，酰基酰氨基，芳基氧基，芳基烷基氧基，尤其其中芳基基团是邻苯二甲亚氨基基团，和烷基或芳基烷基胺。
优选Ar1和Ar2是视需要取代的苯基，2-，3-或4-吡啶基，吲哚基，2-或4-嘧啶基，哒嗪基，苯并三唑基或苯并咪唑基。更优选Ar1和Ar2是苯基，吡啶基，或嘧啶基。优选Ar1是吡啶基或嘧啶基和Ar2是苯基。这些实施方案分别可视需要被用基团如烷基，链烯基，炔基，芳基，-O-芳基，-O-烷基芳基，-O-芳酰基，-NR-芳基，-N-烷基芳基，-NR-芳酰基，卤代，-OR，-NR2，-SR，-OOCR，-NROCR，-RCO，-COOR，-CONR2，和/或SO2NR2取代，其中每一R独立地是H或烷基(1-8C)，和/或通过-CN，-CF3，和/或NO2。这些实施方案分别可视需要用一个或两个基团如烷基，链烯基，炔基，芳基，-O-芳基，-O-烷基芳基，-O-芳酰基，-NR-芳基，-N-烷基芳基，-NR-芳酰基，卤代，-OR，-NR2，-SR，-OOCR，-OCOR，-NROCR，-NRCOR，-RCO，-COR，-COOR，-CONR2，和/或SO2NR2取代，其中每一R独立地是H或烷基(1-8C)，和/或通过-CN，-CF3，和/或NO2。烷基，链烯基，炔基和这些基团的芳基部分可进一步被类似取代基取代。Ar1或Ar2上的优选的取代基包括烷基，链烯基，炔基，卤代，-OR，-SR，-NR2其中R是H或烷基(1-4C)；和/或芳基氨基，芳基烷基氨基，包括被一个以上芳基取代的烷基氨基。如上所述，包括在取代基内的任何芳基或烷基基团可自身被类似地取代。这些取代基可占据该环的所有的可得位置，优选1-2位，或更多优选仅一个位。
任何芳基部分，包括结构式(1)，(2)，和(3)中描绘的那些，尤其苯基部分，也可包含两个在预期形成5-7元碳环或杂环脂族环的取代基。嘧啶环的5和6位之间的桥形成稠环体系，其中，如果稠环包含6个环原子，那么它不是芳族的。但该桥可包含pi键和可包含一个或多个选自N，O，和S的杂原子。优选的实施方案包括，其中该桥得到视需要包含一个或多个氮，氮和氧，氧，其它的双键，饱和桥，或6-元环(由饱和的桥形成)的5-元环。在一个实施方案中，6-元饱和的生成桥的环包含一个或两个氮。由桥形成的环本身可被取代。以上针对Ar1和Ar2所述的取代基也可作为稠环体系而存在。
以下无论何时使用术语″具有结构式(1)的化合物″，″具有结构式(2)的化合物″，″具有结构式(3)的化合物″，或″本化合物″或类似术语，它意味着包括具有结构式(1)，(2)，和(3)的化合物，其前药，N-氧化物，加成盐，季胺，金属配合物，和立体化学异构体形式。一个实施方案包括具有结构式(1)的化合物或本文规定的具有结构式(1)的化合物的任何子组，包括具有结构式(2)和(3)的化合物，以及N-氧化物，盐，作为其可能立体异构体形式。另一实施方案包括具有结构式(1)的化合物或本文规定的具有结构式(1)的化合物的任何子组，盐以及其可能立体异构体形式。
对于治疗用途，具有结构式(1)的化合物的盐是其中抗衡离子是药物可接受的那些。但非药物可接受的酸和碱的盐也可例如用于制备或纯化药物可接受化合物。所有的盐(无论是否药物可接受)被包括在本发明的范围内。
以上提及的药物可接受酸和碱加成盐意味着包括具有结构式(1)的化合物所能够形成的治疗活性非毒性酸和碱加成盐形式。药物可接受酸加成盐可适宜地通过将碱形式用这些合适的酸处理而得到。合适的酸包括，例如，无机酸如氢卤酸，如氢氯酸或氢溴酸，硫酸，硝酸，磷酸和类似物酸；或有机酸如，例如，乙酸，丙酸，羟基乙酸，乳酸，丙酮酸，草酸(即乙二酸)，丙二酸，琥珀酸(即丁二酸)，苯甲酸，马来酸，富马酸，苹果酸(即羟基丁二酸)，酒石酸，柠檬酸，甲烷磺酸，乙磺酸，苯磺酸，p-甲苯磺酸，环己氨磺酸，水杨酸，p-氨基水杨酸，扑酸和类似酸。
相反，所述盐形式可通过用合适的碱处理而被转化成游离碱形式。
包含酸性质子的具有结构式(1)的化合物也可通过用合适的有机和无机碱处理而被转化成其非毒性金属或胺加成盐形式。因此，如果羧基部分存在于具有结构式(1)的化合物上，该化合物也可作为与药物可接受阳离子的盐而供给。合适的碱盐形式包括，例如，铵盐，碱和碱土金属盐，如锂，钠，钾，镁，钙盐和类似物，与有机碱的盐，如benzathine，N-甲基-D-葡糖胺，卡巴胺盐，和与氨基酸如，例如，精氨酸，赖氨酸和类似物的盐。
本文所用的术语加成盐还包括具有结构式(1)的化合物以及其盐所能够形成的盐。这些溶剂合物是例如水合物，醇盐和类似物。
具有结构式(1)的化合物也可以被设计成在向患者给药时释放具有结构式(1)的化合物的″前药″。这里所用的术语″前药″是指药理可接受衍生物如酯，酰胺和磷酸盐，使得该衍生物的所得体内生物转化产物是在具有结构式(I)的化合物中所定义的活性药物。Goodman和Gilman的参考文件(治疗药理基础，第8版，McGraw-Hill，Int.Ed.1992，″药物的生物转化″，p13-15)在此并入本发明，其中一般地描述了前药。前药优选具有优异的含水溶解度，增加的生物可利用率和容易体内被代谢成活性抑制剂。本发明化合物的前药可通过将存在于该化合物中的官能团改性使得改性物通过常规处理或体内被分裂成母化合物而制备。
前药形式设计是本领域熟知的，和取决于包含在具有结构式(1)的化合物中的取代基。例如，包含巯基的取代基可被偶联至载体上，使得该化合物生物惰性直至被内原性酶或，例如，被靶向患者特定受体或位置的酶去除。
优选的是可体内水解和衍生自具有羟基或羧基基团的具有结构式(1)的那些化合物的药物可接受酯前药。体内可水解酯是在人或动物体内水解得到母酸或醇的酯。适用于羧基的药物可接受酯包括烷氧基甲基酯例如甲氧基甲基，烷酰基氧基甲基酯例如戊叔酰氧基甲基，2-苯并[c]呋喃酮基酯，环烷氧基羰基氧基烷基酯例如1-环己基羰基氧基乙基；1，3-二氧戊烯-2-酮基甲基酯例如5-甲基-1，3-二氧戊烯-2-酮基甲基；和烷氧基羰基氧基乙基酯例如在本发明化合物的任何羧基基团上形成的1-甲氧基羰基氧基乙基。
包含羟基基团的具有结构式(1)的化合物的体内可水解酯包括无机酯如磷酸酯和α-酰基氧基烷基醚和该酯体内水解断裂得到母羟基基团的相关化合物。α-酰基氧基烷基醚的例子包括乙酰氧基甲氧基和2，2-二甲基丙酰基氧基-甲氧基。对用于羟基的体内可水解成酯基团的选择包括烷酰基，苯甲酰基，苯基乙酰基和取代的苯甲酰基和苯基乙酰基，烷氧基羰基(得到烷基碳酸酯)，二烷基氨基甲酰基和N-(二烷基氨基乙基)-N-烷基氨基甲酰基(以得到氨基甲酸酯)，二烷基氨基乙酰基和羧基乙酰基。苯甲酰基上的取代基的例子包括由环氮原子通过亚甲基基团键接至苯甲酰基环的3-或4-位上的吗啉代和哌嗪基。
本文所用的术语″季胺″定义具有结构式(1)的化合物通过具有结构式(1)的化合物的碱性氮和合适的季化剂，如，例如，视需要取代的烷基卤化物，芳基卤化物或芳基烷基卤化物，如甲基碘化物或苄基碘化物之间的反应而形成的季铵盐。也可使用具有良好的离去基团的其它反应物，如三氟甲烷磺酸烷基酯，甲烷磺酸烷基酯，和p-甲苯磺酸烷基酯。季胺具有带正电荷的氮。药物可接受抗衡离子包括氯，溴，碘，三氟乙酸根和乙酸根。所选的抗衡离子可使用离子交换树脂而引入。
本发明化合物的N-氧化物形式意味着包括其中一个或几个氮原子被氧化成所谓N-氧化物的具有结构式(1)的化合物。
可以理解，具有结构式(1)的化合物可具有金属结合，螯合，配合物形成性能和因此可作为金属配合物或金属螯合物而存在。具有结构式(1)的化合物的这些金属化衍生物意味着被包括在本发明范围内。
一些具有结构式(1)的化合物也可以其互变异构体形式存在。尽管在以上结构式中没有被特意表示，但这些形式意味着被包括在本发明范围内。
具有结构式(1)的化合物具有几个手性中心和作为立体化学异构体形式存在。本文所用的术语″立体化学异构体形式″定义由具有结构式(1)的化合物可具有的相同原子组成的所有的可能化合物，所述原子由相同顺序的键键接但具有不同的三维结构。
对于其中(R)或(S)用于表示取代基内的手性原子的绝对构型的情形，该名称考虑到整个化合物和而非孤立的取代基。
如果结构式(1)的任何取代基包含手性中心，有些确实如此，具有结构式(1)的化合物包括其所有的立体异构体形式，作为分离的立体异构体和这些立体异构体形式的混合物。所述混合物可包含所述化合物的碱性分子结构的所有的非对映体和/或对映异构体。纯形式或相互混合的本发明化合物的所有的立体化学异构体形式意味着被包括在本发明范围内。
本文所提及的化合物和中间体的纯立体异构体形式被定义为基本上没有具有所述化合物或中间体的相同的碱性分子结构的其它对映异构体或非对映体形式的异构体。尤其是，术语″立体异构体纯″涉及具有至少80％立体异构体过量(即最低90％的一种异构体和最大10％的其它可能异构体)至最高100％立体异构体过量(即100％一种异构体和没有另一种)的化合物或中间体，更尤其是，具有90％至最高100％的立体异构体过量，甚至更尤其是具有94％至最高100％的立体异构体过量和最尤其是具有97％至最高100％的立体异构体过量的化合物或中间体。术语″对映异构体纯″和″非对映体纯″应该按照类似方式理解，不过分别看作所述混合物的对映异构体过量，和非对映体过量。
本发明化合物和中间体的纯立体异构体形式通过应用本领域已知的步骤而得到。例如，对映异构体可通过与光学活性酸或碱的其非对映体盐的选择性结晶而相互分离。其例子是酒石酸，二苯甲酰基酒石酸，二甲苯酰基酒石酸和樟脑磺酸。另外，对映异构体可通过使用手性固定相的色谱技术而分离。所述纯立体化学异构体形式也可衍生自合适的起始原料的相应纯立体化学异构体形式，前提是反应立体特异地出现。优选，如果特定立体异构体是所需的，所述化合物通过立体特异性制备方法而合成。这些方法有利地采用对映异构体纯起始原料。
具有结构式(1)的化合物的非对映体消旋体可通过常规方法而分开得到。可有利地采用的合适的物理分离方法是，例如，选择性结晶和色谱，如柱色谱。
对于一些具有结构式(1)的化合物，其前药，N-氧化物，盐，溶剂合物，季胺，或金属配合物，和用于其制备的中间体，绝对立体化学构型不实验确定。所属技术领域的专业人员能够使用本领域已知的方法如，例如，X-射线衍射而确定这些化合物的绝对构型。
本发明还意味着包括存在于本发明化合物上的原子的所有的同位素。同位素包括具有相同的原子数但不同的质量数的那些原子。作为一般性例子，但不限于，氢的同位素包括氚和氘。碳的同位素包括C-13和C-14。
本发明化合物的合成许多合成路径可用于产生本发明化合物。一般来说，它们可使用本领域已知的反应而合成。可采用任何本领域已知的用于合成的方法。但以下合成路径适用于制备本发明化合物。典型的发明化合物显示如下
方案A(化合物1和26的合成)该一般方案用于制备化合物1和16。
具有结构式(I)的化合物的制备2.53g 4-氨基-5-咪唑甲酰胺溶解在30mL氯仿和30mL二甲基甲酰胺中。在0摄氏度下向该溶液加入3.02mL 3-氯苯甲酰氯，随后加入5.4mL二异丙基乙基胺。反应混合物暖至室温和在室温下保持过夜。反应混合物用氯仿稀释和用水，10％含水碳酸钠溶液和盐水洗涤。有机层在无水硫酸钠上干燥和过滤。在浓缩之后得到的粗残余物被吸收在最低量的氯仿中并在硅胶上，使用乙酸乙酯，5％甲醇色谱处理，得到4.81g具有结构式(I)的化合物。
注为了合成化合物16，使用甲基-4-氨基-5-咪唑甲酰胺。
具有结构式(II)的化合物的制备2.74g具有结构式(I)的化合物悬浮在75mL乙醇中，将5mL 10N氢氧化钠加入反应混合物和反应混合物回流小时。在冷却至室温之后，将反应混合物浓缩以去除乙醇并随后用水稀释。溶液随后通过在0摄氏度下加入1N氢氯酸而酸化至pH6.5。将所形成的白色沉淀物通过过滤而收集，用水和醚洗涤和在高真空下干燥，得到0.84g具有结构式(II)的化合物。
具有结构式(III)的化合物的制备0.84g具有结构式(II)的化合物悬浮在60mL氯仿中，向该悬浮液中加入1.1mL亚硫酰氯和2mL二甲基甲酰胺。所得混合物在氮气下回流3小时。反应混合物冷却至室温和浓缩成黄色残余物。将该残余物在氯仿中吸收并将冰加入反应混合物。将冷溶液用5％碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤。有机层在无水硫酸钠上干燥和过滤。在浓缩之后，将所得残余物用冷乙酸乙酯处理。分离白色固体。将该固体过滤和用乙酸乙酯洗涤，得到0.46g具有结构式(III)的化合物。
具有结构式(1)的化合物的制备0.46g具有结构式(III)的化合物溶解在10mL干二甲基甲酰胺中，向其中加入加入0.67ml二异丙基乙基胺。将反应混合物加热至60摄氏度，和向其中加入加入0.21g 4-氨基吡啶的溶液。反应混合物在回流下加热1小时。在冷却至室温反应混合物是浓缩至最小体积和产物通过制备反相HPLC，使用C18 Vydac柱，使用梯度水，乙腈(都包含0.1％三氟乙酸)而纯化。15mg具有结构式(1)的化合物在冻干包含所需产物的级分而得到。分析1H NMR d6DMSO，LCMS，M+323。
具有结构式(26)的化合物的制备化合物26根据在方案A中给出的步骤，使用N-1-苯基-2-氨基咪唑-3-甲酰胺和苯甲酰氯而制备。
方案B(化合物3，5-15和17的合成) 3-氨基-4-氰基-5-甲基异唑的制备羟基胺盐酸盐(12.78g，0.184毫摩尔)溶解在40ml水中，用氢氧化钠(7.36g，0.184毫摩尔)处理。加入60ml乙醇(无水)并在搅拌的同时小心加入(1-乙氧基乙叉基)丙二腈(25g，0.184毫摩尔)。将反应混合物在50摄氏度下加热30min，随后在室温下搅拌过夜。在真空下去除乙醇，将过滤的固体产物用水洗涤，在真空下干燥以得到21.93g(96.8％产率)。注为了合成7和11，使用相应乙基羟基胺，和为了合成9，使用相应苯基羟基胺。
N-(3-氯苯甲酰基)-4-氰基-3-甲基-5-甲酰胺的制备3-氨基-4-氰基-5-甲基异唑(6.0g，0.0487毫摩尔)悬浮在乙腈/四氢呋喃(30ml/10ml)中。加入二异丙基乙基胺(8.26ml，0.0487毫摩尔)，随后滴加3-氯苯甲酰氯。混合物在室温下搅拌过夜。将沉淀产物通过过滤而分离，用氯仿洗涤。得到1.31g产物(11％产率)。
注为了合成化合物3，5，6，8，10，12，13，14，15和17，使用相应酰氯。
3-甲基-6-(3-氯苯基)异唑[5，4d]嘧啶酮的制备N-(3-氯苯甲酰基)-4-氰基-3-甲基-5-甲酰胺(1.0g，15毫摩尔)悬浮在20ml 1M氢氧化钠中和用8ml 30％过氧化氢处理。混合物回流过夜。将冷却的反应混合物放在冰批料上和用1M氢氯酸处理至pH6。将产物过滤得到白色沉淀物和在真空下干燥，得到537mg(53％产率)。
3-甲基-4-氯-6-(3-氯苯基)异唑[5，4d]嘧啶的制备3-甲基-6-(3-氯苯基)异唑[5，4d]嘧啶酮(535mg，2.04毫摩尔)悬浮在磷酰氯(6ml)中和加热回流4小时。去除过量磷酰氯，加入冰和氯仿(10ml)，用饱和碳酸氢钠碱化，将产物提取到氯仿中并将提取物在硫酸钠(无水)上干燥。产物通过硅胶色谱用氯仿洗脱而纯化。得到200mg产物。
3-甲基-4-(4-氨基吡啶基)-6-(3-氯苯基)异唑[5，4d]嘧啶(17)的制备4-氨基吡啶(80.6mg，0.859毫摩尔)溶解在N-甲基吡咯烷酮中，加入二异丙基乙基胺(149微升)，随后加入3-甲基-4-氯-6-(3-氯苯基)异唑[5，4d]嘧啶(120mg，0.428毫摩尔)。将混合物在50摄氏度下搅拌1小时。产物通过制备HPLC在C18柱上纯化。
方案C(化合物2和4所合成) 2-苯基-吡咯并[2，3d]嘧啶酮的制备苯扎明盐酸盐(4.0g，0.25mol)溶解在64ml乙醇中。向其中加入8.0ml 25wt％甲醇钠溶液。反应随后在室温下搅拌5小时，和过滤。将滤液随后加入2-氰基-4，4-二乙氧基丁酸乙基酯(4.80g，0.21mol)。该溶液回流5小时。
一半溶剂在减压下去除，随后加入80ml冰水，并将pH用乙酸调节至7。将材料随后冷却6小时并将产物通过真空过滤而分离。注为了合成化合物4，使用3-氯苯并眯。
4-氯-2-苯基-吡咯并[2，3d]嘧啶的制备2-苯基-吡咯并[2，3d]嘧啶酮(1.0g 4.73mmol)用氯氧化磷(7ml，27.7mmol)处理和回流5小时。过量氯氧化磷在减压下被去除并随后用氯仿提取，用碳酸氢钠洗涤。有机层在硫酸钠(无水)上干燥，随后浓缩至无水，得到产物。
4-(4-氨基吡啶基)-2-苯基-吡咯并[2，3d]嘧啶(2)的制备4-氯-2-苯基-吡咯并[2，3d]嘧啶(0.12g，1.27mmol)溶解在4ml NMP中。加入N，N′-二异丙基乙基胺(0.229ml)，随后加入4-氨基-吡啶(0.15g，0.635mmol)。反应混合物加热回流2小时，冷却和通过制备HPLC而纯化。
方案D(化合物18的合成) 乙酰基甲基-丙二酸二甲基酯的制备丙二酸二甲基酯(5g，0.189毫摩尔)用碳酸钾(34.78g，0.25毫摩尔)，碘化钠(1.00g，0.0067毫摩尔)处理并随后在迅速分批加入氯丙酮(23.1g，0.25毫摩尔)的同时加温。反应混合物在100摄氏度下加热20min。向冷却的反应混合物中加入50ml乙醇，并将过滤的固体材料用乙醇洗涤。乙醇在真空下从滤液中去除。产物通过真空蒸馏而分离。得到11.26g产物(32％产率)。
具有结构式(IV)的化合物的制备乙二醇(3.90g，0.0628毫摩尔)，丙二酸乙酰基甲基二甲基酯(11.26g，0.06毫摩尔)，和p-甲苯磺酸(0.21g，0.0011毫摩尔)在25ml苯中合并。将反应混合物加热回流在DeanStark汽水分离器中收集的水过夜。反应混合物用10％碳酸氢钠(2×10ml)洗涤并将苯在硫酸钠上干燥。去除溶剂以得到产物作为油，14.1g。
具有结构式(V)的化合物的制备保护的丙二酸二甲基酯衍生物(5.0g，0.0215毫摩尔)溶解在甲醇(20ml)中，加入3-氯苯并眯盐酸盐，随后加入25％甲醇钠(16ml，0.0646毫摩尔)。反应混合物在室温下搅拌3天。混合物用水(50ml)稀释并加入60ml1M HCl和在室温下搅拌1小时，随后加入4ml浓缩HCl和搅拌过夜，得到最终产物。甲醇在真空下去除，和产物通过过滤和真空干燥而得到。得到5g产物。
6-甲基-2-氯苯基-呋喃并[3，2d]嘧啶酮的制备
6-羟基-5-乙酰基甲基-2-(3-氯苯基)嘧啶酮(5.0g)用浓硫酸(80ml)处理。反应混合物在室温下搅拌4小时，随后用碳酸钠中和和用氯仿提取，将氯仿提取物用水洗涤，在硫酸钠(无水)上干燥并去除溶剂，得到产物(1.10g)。
6-甲基4-氯-2-氯苯基-呋喃并[3，2d]嘧啶的制备6-甲基-2-氯苯基-呋喃并[3，2-d]嘧啶酮(480mg，1.84毫摩尔)悬浮在二氯甲烷(4ml)中。加入亚硫酰氯(1.6ml，22.5毫摩尔)和二甲基甲酰胺(0.5ml)并加热回流3小时。去除过量溶剂，并将残余物用冰处理，提取到氯仿中，用10％碳酸氢钠和水洗涤，在硫酸钠(无水)上干燥并去除溶剂，得到480mg产物。
6-甲基4-(4-氨基吡啶基)-2-氯苯基呋喃并[3，2d]嘧啶(18)的制备6-甲基4-氯-2-氯苯基-呋喃并[3，2d]嘧啶(480mg，1.72毫摩尔，1eq)，BINAP(8mg，0.013毫摩尔，0.0075eq)，Pd2(dba)3(3.9mg，0.0043毫摩尔，0.0025eq)，叔丁醇钠(231mg，2.4毫摩尔，1.4eq)，4-氨基吡啶(194mg，2.06毫摩尔，1.2eq)在5ml二烷中合并和在50摄氏度下加热5小时。产物通过在C18柱上的制备HPLC而分离。
方案E(化合物19的合成) 2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羧酸乙基酯的制备乙酰氨基丙二酸二乙基酯(15.0g，69.1mmol)溶解在60ml氯仿中，随后用60g五氧化二磷处理。反应混合物回流6小时，随后冷却至室温。该溶液用氢氧化钠(1M)处理以中和反应混合物。有机层用水洗涤和在硫酸钠(无水)上干燥。将粗品真空蒸馏以分离产物。得到8.26g产物(60％产率)。
2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羧酸的制备2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羧酸乙基酯(8.26g，41.5mmol)用74ml15％KOH溶液处理。回流15分钟，随后冷却和使用10％HCl溶液酸化。产物通过真空过滤而收集。
2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羰基氯的制备2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羧酸(2.56g，14.9mmol)溶解在二氯甲烷中。加入2滴二甲基甲酰胺并将反应在冰浴中冷却。滴加草酰氯(12ml，22.3mmol)。去除冰浴并将反应体系在室温下搅拌2小时。溶剂通过减压而去除。
4-(3-氯苄脒酰胺)-2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羰基氯的制备3-氯苯并眯(2.29g，14.8mmol)溶解在40ml DCM中和达到0摄氏度.随后加入15ml 2.0M氢氧化钠溶液。将溶解在30ml DCM中的2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羰基氯(2.8g，14.8mmol)滴加至反应混合物和在室温下搅拌3小时。有机溶剂随后用水洗涤，随后碳酸氢钠洗涤，随后用硫酸钠干燥和浓缩。
具有结构式(VI)的化合物的制备4-(3-氯苄脒酰胺)-2-甲基-5-乙氧基-4-唑-4-羰基氯(2.0g，6.5mmol)溶解在30ml甲苯中和回流1.5小时。溶剂随后通过减压而去除。
7-甲基-2-(3-氯苯基)-唑并[2，3d]嘧啶酮的制备1.86g，5.93mmol，唑酯用在20升乙醇中的0.86g，15.4mmol KOH处理。在室温下搅拌过夜。有机溶剂在减压下蒸发并将该化合物溶解在水中和使用15％HCl溶液酸化。固体产物通过真空过滤而收集。
7-甲基-4-氯-2-(3-氯苯基)-唑并[2，3d]嘧啶的制备7-甲基-2-(3-氯苯基)-唑并[2，3d]嘧啶酮(1.32g，5.06mmol)用磷酰氯(13.2ml，141.7mmol)处理和回流3小时。将反应体系冷却，溶剂通过减压而去除并将残余物吸收在氯仿中。将冰加入有机溶剂，随后将有机溶剂用碳酸氢钠洗涤，在硫酸钠上干燥并随后浓缩。粗品通过闪蒸柱色谱而纯化。
7-甲基-4-(4-氨基吡啶基)-2-(3-氯苯基)唑并[2，3d]嘧啶(19)的制备将7-甲基-4-氯-2-(3-氯苯基)-唑并[2，3d]嘧啶(0.100g，0.358mmol)，4-氨基吡啶(0.040g，0.430mmol)，叔丁醇钠(0.048g，0.501mmol)，二(二苯基膦基)-1，1′-联萘(0.0009g，0.0014mmol)，和Pd2(dba)3(0.0004g，0.0043mmol)合并和溶解在2ml无水二烷中并回流3.5小时。将反应体系冷却，随后滤过Celite，并随后通过HPLC而纯化。
方案F 具有结构式(VI)的化合物的制备向2-氧代环戊烷羧酸甲基酯(4.10g，28.9mmol，1eq)在无水乙醇(20ml)中的溶液加入2-氟-5-氯苯并眯(5.0g，28.9mmol，1eq)在乙醇(20ml)中的溶液并将反应混合物在80摄氏度下加热过夜。将反应混合物冷却至室温(r.t.)并将白色沉淀物过滤和用冷却乙酸乙酯(2×20ml)洗涤。粗残余物在氯仿和水之间分配。将水层酸化至pH4并将产物用氯仿提取(3×50ml)提取。将有机层合并，用盐水洗涤，在MgSO4上干燥上干燥，过滤和在真空中浓缩，得到粗白色固体(VI)(4.5g，60％)，没有进一步纯化。
具有结构式(VII)的化合物的制备具有结构式(VI)的化合物(200mg，0.757mmol)在POCl3(5ml)中的悬浮液在回流下搅拌1小时。将溶液随后冷却至室温和在减压下浓缩，得到白色固体，溶解在无水二氯甲烷中。将溶液冷却至0摄氏度并加入冰，随后加入sat.NaHCO3。将有机层分离，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和在真空中蒸发以提供粗白色固体，不进一步纯化。
具有结构式(20)的化合物的制备(一般Buchwald反应步骤)具有结构式(VII)的粗亚氨基氯化合物(210mg，0.76mmol，1eq)溶解在二烷(5ml)中和向其中加入Pd(OAc)2(9mg，0.04mmol，0.05eq)，随后加入BINAP(35mg，0.056mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(82mg，0.760mmol，1eq)和Cs2CO3(370mg，1.13mmol，1.5eq)。反应混合物在80摄氏度下加热15小时。将反应混合物冷却至r.t.和滤过Celite并将粗品通过闪蒸柱色谱(3∶2/乙酸乙酯∶己烷)而纯化，得到具有结构式(20)的化合物(110mg，41％)。
具有结构式(IX)的化合物的制备向具有结构式(VIII)的化合物(100mg，0.25mmol，1eq)在MeOH(5ml)中的悬浮液加入1N NaOH(aq)溶液(500μl，0.50mmol，2eq)并将反应混合物回流2小时。将混合物冷却至r.t.和在真空中浓缩。将水(10ml)加入粗品并将水层酸化至pH4。将固体过滤，用水(2×5ml)洗涤和连夜干燥，得到具有结构式(IX)的化合物(50mg，52％)作为米色固体。
具有结构式(21)的化合物的制备向具有结构式(IX)的化合物(50mg，0.13mmol，1eq)在无水DMF(2ml)中的悬浮液加入1，1′-羰基二咪唑(42mg，0.26mmol，2eq)并将反应混合物在70摄氏度下加温2h。将混合物冷却至r.t.和NH3(g)鼓泡10min。反应混合物在r.t.下搅拌另外1小时。反应体系在真空中浓缩。将水(10ml)加入粗品并将固体过滤，用水(2×5ml)洗涤和连夜干燥，得到具有结构式(21)的化合物(30mg，60％)作为米色固体。
根据方案F制备的其它化合物具有结构式(32)的化合物根据在方案F中给出的用于制备具有结构式(VIII)的化合物的方案，使用4-氨基oyrdine-3-羧酸乙基酯而制备。具有结构式(36)的化合物通过用于合成具有结构式(20)的化合物所述的方法采用4-氨基-3-三氟甲基-甲基吡啶替代4-氨基-3-甲基吡啶而制备。具有结构式(35)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用甲基胺替代氨而制备。具有结构式(37)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用吡咯烷替代氨而制备。具有结构式(41)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用环丙基胺替代氨而制备。具有结构式(42)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用环丙基甲基胺替代氨而制备。具有结构式(51)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用2-氨基-乙醇替代氨而制备。具有结构式(52)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用1-氨基-丙烷-2-(S)-醇替代氨而制备。具有结构式(53)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用3-氨基-丙烷1，2(S)-二醇替代氨而制备。具有结构式(54)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用HO-NH2替代氨而制备。具有结构式(55)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用1-氨基-丙烷-2-(R)-醇替代氨而制备。具有结构式(56)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用N-甲基亚乙基二胺替代氨而制备。具有结构式(58)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用肼替代氨而制备。具有结构式(67)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用苯并眯而制备。具有结构式(68)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用甲基胺替代氨和苯并眯替代2-F，3-Cl-苯并眯而制备。具有结构式(69)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用N，N′-二甲基-1，3-丙烷二胺替代氨而制备。具有结构式(70)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用4-(3-氨基丙基)吗啉替代氨而制备。具有结构式(71)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用1-(3-氨基丙基)咪唑替代氨而制备。具有结构式(72)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用1-(3-氨基丙基)-2-吡咯烷酮替代氨而制备。具有结构式(73)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用2-(2-氨基乙基)-1-甲基吡咯烷替代氨而制备。具有结构式(74)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用1-(3-氨基丙基)-2-2-甲基哌啶替代氨而制备。具有结构式(75)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用1-(2-氨基乙基)吡咯烷替代氨而制备。具有结构式(78)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用1-(2-氨基乙基)哌啶替代氨而制备。具有结构式(79)的化合物通过用于合成具有结构式(21)的化合物所述的方法采用N，N′-二乙基乙烯二胺替代氨而制备。
方案G(具有结构式(22)，(24)，(25)，和(30)的化合物的合成) 具有结构式(X)的化合物的制备向2-氟-5-氯苯并眯(1.79g，10.4mmol，1eq)在EtOH(10ml)中的溶液加入固体NaOEt(705mg，10.4mmol，1eq)，随后加入甲基-4-氧代-3-哌啶羧酸盐酸盐(2.0g，10.4mmol，1eq)。将反应混合物在70摄氏度下加热2h，随后冷却至r.t.。将沉淀物过滤和用乙酸乙酯(2×20ml)洗涤，得到白色固体(2.2g，76％)，不进一步纯化。
具有结构式(XI)的化合物的制备在r.t.下，向具有结构式(X)的化合物(300mg，1.08mmol，1eq)在无水THF(10ml)中的悬浮液加入BoC2O(258mg，1.18mmol，1.1eq)在无水THF(10ml)中的溶液。将反应混合物在r.t.下搅拌2小时并随后将溶液在真空中浓缩，得到粗残余物，然后通过闪蒸柱色谱而纯化，得到具有结构式(XI)的化合物(320mg，79％)作为白色固体。
具有结构式(XII)的化合物的制备向PPh3(813mg，3.03mmol，5eq)在无水二烷(20ml)中的溶液一次加入NBS(540mg，3.03mmol，5eq)并将悬浮液在r.t.下搅拌30min。加入具有结构式(XI)的化合物(230mg，0.61mmol，1eq)在无水二烷(5ml)中的溶液并将反应混合物在80摄氏度下加热45min。将反应混合物冷却至r.t.和加入Et3N(160μl，1.21mmol，2eq)。将混合物真空浓缩并将粗残余物通过闪蒸柱色谱(1∶9乙酸乙酯∶己烷)而纯化，得到具有结构式(XII)的化合物(72mg，30％)。
具有结构式(XIII)的化合物的制备向具有结构式(XII)的化合物(72mg，0.16mmol，1eq)在无水二烷(2ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(2mg，0.008mmol，0.05eq)，随后加入BINAP(8mg，0.001mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(18mg，0.16mmol，1eq)和Cs2CO3(80mg，0.24mmol，1.5eq)。反应混合物在80摄氏度下加热15小时。将反应混合物冷却至r.t.和滤过Celite并将粗品通过闪蒸柱色谱(7∶3/乙酸乙酯∶己烷)而纯化，得到具有结构式(XIII)的化合物(65mg，85％)。
具有结构式(22)的化合物的制备向具有结构式(XIII)的化合物(65mg，0.14mmol，1eq)在无水二烷(2ml)中的溶液加入在二烷中的4M HCl溶液(1ml)。所得悬浮液在r.t.下搅拌2小时。将沉淀物过滤并用氯仿(1×5ml)，乙酸乙酯(1×5ml)和冷甲醇(1×2ml)洗涤，得到具有结构式(22)的化合物(35mg，68％)作为白色固体。
具有结构式(24)的化合物的制备具有结构式(24)的化合物根据方案G中给出的步骤，使用1-苄基-4-氧代哌啶-3-羧酸乙基酯和苯并眯而制备。
具有结构式(25)的化合物的制备具有结构式(25)的化合物根据在方案G中给出的步骤，使用苯并眯而制备。
具有结构式(30)的化合物的制备具有结构式(30)的化合物根据在方案G中给出的步骤，使用1-苄基-4-氧代哌啶-3-羧酸乙基酯而制备。
方案H(具有结构式(23)的化合物的合成) 具有结构式(XIV)的化合物的制备向N-苄基-3-氧代-4-哌啶羧酸盐酸乙基酯(2g，6.73mmol，1eq)在乙醇(60ml)中的溶液加入10％Pd/C。将空气抽空并通过气球替换为氢。反应混合物在r.t.下搅拌4小时。反应混合物滤过Celite的短垫，得到具有结构式(XIV)的化合物，不进一步纯化。
具有结构式(XV)的化合物的制备向2-氟-5-氯苯并眯(1.16g，6.71mmol，1eq)在EtOH(10ml)中的溶液加入固体NaOEt(457mg，6.71mmol，1eq)，随后加入具有结构式(XIV)的化合物(1.39g，6.71mmol，1eq)。反应混合物在70摄氏度下加热2小时并随后冷却至r.t.。将沉淀物过滤和用乙酸乙酯(2×20ml)洗涤，得到具有结构式(XV)的化合物(1.12g，60％)作为白色固体，不进一步纯化。
具有结构式(XVI)的化合物的制备在r.t.下，向具有结构式(XV)的粗化合物(1.12mg，4.01mmol，1eq)在无水THF(10ml)中的悬浮液加入BoC2O(960mg，4.42mmol，1.1eq)在无水THF(10ml)中的溶液。将反应混合物在r.t.下搅拌2小时并随后将溶液在真空中浓缩，得到粗残余物，然后通过闪蒸柱色谱而纯化，得到具有结构式(XVI)的化合物(750mg，50％)作为白色固体。
具有结构式(XVII)的化合物的制备向PPh3(2.28g，8.70mmol，5eq)在无水二烷(20ml)中的溶液一次加入NBS(1.55mg，8.71mmol，5eq)并将悬浮液在r.t.下搅拌30min。加入具有结构式(XVI)的化合物(660mg，1.74mmol，1eq)在无水二烷(5ml)中的溶液并将反应混合物在80摄氏度下加热45min。将反应混合物冷却至r.t.和加入2eq Et3N。将混合物真空浓缩并将粗残余物通过闪蒸柱色谱(1∶9乙酸乙酯∶己烷)而纯化，得到具有结构式(XVII)的化合物(230mg，30％)。
具有结构式(XVIII)的化合物的制备向具有结构式(XVII)的化合物(230mg，0.52mmol，1eq)在无水二烷(5ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(6mg，0.03mmol，0.05eq)，随后加入BINAP(8mg，0.004mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(67mg，0.62mmol，1.2eq)和Cs2CO3(271mg，0.83mmol，1.5eq)。反应混合物在80摄氏度下加热15小时。将反应混合物冷却至r.t.和滤过Celite并将粗品通过闪蒸柱色谱(9∶1/乙酸乙酯∶己烷)而纯化，得到具有结构式(XVIII)的化合物(38mg，16％)。
具有结构式(23)的化合物的制备向具有结构式(XVIII)的化合物(38mg，0.08mmol，1eq)在无水二烷(2ml)中的溶液加入在二烷中的4M HCl溶液(1ml)。所得悬浮液在r.t.下搅拌2小时。将沉淀物过滤和用氯仿(1×3ml)，乙酸乙酯(1×3ml)和冷甲醇(1×1ml)洗涤，得到具有结构式(23)的化合物(32mg，95％)作为白色固体。
方案I(具有结构式(27)的化合物的合成) 2-氨基-噻吩-3-羧酸酰胺1，4-二噻烷-2，5-二醇(4.56g，30mmole)和2-氰基乙酰胺(2.52g，30毫摩尔)在乙醇(50ml)中合并。加入三乙基胺(6ml)并在70摄氏度下加热1小时。将溶剂体积在真空下减少，和产物通过过滤而分离。产物从乙醇中重结晶，得到2.71g产物(产率64％)。
2-(2-氟-苯甲酰基氨基)-噻吩-3-羧酸酰胺2-氨基-噻吩-3-羧酸酰胺(8.73g，61.4毫摩尔)溶解在吡啶(100ml)中，冷却至0摄氏度，和将2-氟苯甲酰氯在20min内滴加，随后将反应在搅拌下暖至室温过夜。吡啶在真空下去除，加入二氯甲烷和水。产物作为灰色固体而沉淀并用稀氢氯酸，水洗涤和风干。分离二氯甲烷层，用稀氢氯酸，和水洗涤，在硫酸钠(anh.)上干燥并去除溶剂，得到总共12.45g产物(77％产率)。
2-(2-氟-苯基)-3H-噻吩并[2，3-d]嘧啶-4-酮2-(2-氟-苯甲酰基氨基)-噻吩-3-羧酸酰胺(8.56g，32.4毫摩尔)溶解在20ml 1M氢氧化钠和60ml乙醇的混合物中。混合物回流4小时。将反应混合物冷却和倒到e上。将溶液用稀氢氯酸酸化并将产物通过过滤而分离。真空干燥得到5.42g产物(产率68％)。
4-氯-2-(2-氟-苯基)-噻吩并[2，3-d]嘧啶2-(2-氟-苯基)-3H-噻吩并[2，3-d]嘧啶-4-酮(900mg，3.65毫摩尔)溶解在氯仿中并将亚硫酰氯(0.532ml，7.30毫摩尔)加入混合物，随后加入1ml二甲基甲酰胺。将反应混合物加热回流2.5小时，将冷却的混合物用10％碳酸钠洗涤，将氯仿溶液在硫酸钠(无水)上干燥和去除溶剂。将粗品在硅胶上用氯仿洗脱而色谱处理。去除溶剂，得到438mg产物(产率45％)。嘧啶-4-基]-吡啶-4-基-胺将4-氯-2-(2-氟-苯基)-噻吩并[2，3-d]嘧啶(110mg，0.41毫摩尔)和4-氨基吡啶(78mg，0.830毫摩尔)在异丙醇(3毫升)中合并，随后加入4滴4MHCl/二烷并将反应混合物在80摄氏度下加热7小时。将反应混合物冷却并将产物通过过滤而分离，用最少的冷甲醇洗涤和在真空下干燥，得到116mg产物(产率86％)。
方案J(具有结构式(28)的化合物的合成) 5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-甲腈甲基肼(5g，108.5毫摩尔)滴加至(1-乙氧基-乙叉基)-丙二腈(14.7g，108.5毫摩尔)在250ml乙醇中的溶液。混合物随后加热回流2.5小时。将反应混合物冷却，体积减至约70ml并将产物通过过滤而分离，用冷乙醇洗涤和干燥以得到13.5g产物(产率91％)。
N-(4-氰基-2，5-二甲基-2H-吡唑-3-基)-2-氟-苯并酰胺5-氨基-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-甲腈(10g，73.4毫摩尔)悬浮在吡啶(90ml)中并在将反应混合物在冰浴上冷却的同时滴加2-氟苯甲酰氯。反应混合物在室温下搅拌过夜。去除大多数吡啶并加入100ml冷水以使产物沉淀。将产物通过过滤而分离，用冷水被和少量冷乙醇洗涤，和在真空下干燥以得到9.15g产物(产率50％)。
6-(2-氟-苯基)-1，3-二甲基-1，5-二氢-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮N-(4-氰基-2，5-二甲基-2H-吡唑-3-基)-2-氟-苯并酰胺(5.0g，19.36毫摩尔)悬浮在38ml 1M氢氧化钠中和在90摄氏度下加热3小时，随后加入30％过氧化氢(10毫升)和进一步加热过夜。将反应混合物冷却至室温和用稀氢氯酸酸化。产物通过过滤而分离，用水洗涤，和在真空下连夜干燥以得到3.39g产物。(产率67％)。
4-氯-6-(2-氟-苯基)-1，3-二甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶6-(2-氟-苯基)-1，3-二甲基-1，5-二氢-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮(2.0g，7.74毫摩尔)用40ml氯氧化磷处理和加热回流过夜。过量氯氧化磷在真空下去除并将冰水加入残余物。产物用乙酸乙酯提取，用10％碳酸钠，水洗涤，在硫酸钠(无水)上干燥和去除溶剂，得到粗品。粗品在硅胶柱上用氯仿洗脱而色谱处理，得到1.10g纯产物(产率51％)。嘧啶-4-基]-吡啶-4-基-胺4-氯-6-(2-氟-苯基)-1，3-二甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(84mg，0.304毫摩尔)和4-氨基吡啶(57mg，0.608毫摩尔)在4毫升异丙醇中合并，加入3滴4M HCl/二烷并将反应混合物在80摄氏度下加热5小时。将反应混合物冷却并将产物过滤，在真空干燥之后得到83mg(产率81％)。
方案K(具有结构式(29)的化合物的合成) 5-氨基-1-丁基-3-甲基-1H-吡唑-4-甲腈丁基肼草酸盐(14.25g，80毫摩尔)和(1-乙氧基乙叉基)-丙二腈(10.82g，80毫摩尔)在乙醇(200ml)中合并，并将混合物用二异丙基乙基胺(10.39g，80毫摩尔)处理。将混合物回流2小时，随后在室温下搅拌过夜。大部分溶剂在真空下去除并用氯仿研磨，过滤一些固体，并保留氯仿滤液。氯仿滤液用水洗涤，在硫酸钠(无水)上干燥和去除溶剂，得到产物作为固体，13.13g(产率74％)。
N-(2-丁基-4-氰基-5-甲基-2H-吡唑-3-基)-2-氟-苯并酰胺5-氨基-1-丁基-5-甲基-1H-吡唑-4-甲腈(10.0g，56毫摩尔)溶解在二氯甲烷/吡啶(45毫升/15毫升)的混合物中和冷却至0摄氏度.滴加2-氟苯甲酰氯(8.87g，56毫摩尔)并将反应混合物在0摄氏度下搅拌1小时，和在室温下搅拌过夜。溶剂在真空下去除。将残余物吸收在乙酸乙酯中，用稀氢氯酸，0.1M氢氧化钠，和水洗涤，和在硫酸钠(无水)上干燥。去除溶剂并将固体在30％乙酸乙酯/己烷中研磨。过滤产物，以得到4.16g产物(产率24％)。
1-丁基-6-(2-氟-苯基)-3-甲基-1，5-二氢-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮N-(2-丁基-4-氰基-5-甲基-2H-吡唑-3-基)-2-氟-苯并酰胺(4.0g，13.3mmole)悬浮在26毫升IM氢氧化钠中，和加入30％过氧化氢(10毫升)和乙醇(5毫升)。将反应混合物加热回流4小时，随后进一步加入30％过氧化氢(10毫升)和加热回流过夜。将反应混合物冷却和用稀氢氯酸酸化至pH6.0。产物通过过滤而收集和在真空下干燥以得到1.29g产物(产率32％)。
1-丁基-4-氯-6-(2-氟-苯基)-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶1-丁基-6-(2-氟-苯基)-3-甲基-1，5-二氢-吡唑并[3，4-d]嘧啶-4-酮(1.23g，4.1毫摩尔)溶解在氯氧化磷(15ml)中和加热回流过夜。过量氯氧化磷在真空下去除，将残余物用冰水处理，将产物提取到乙酸乙酯中，用水，饱和氯化钠洗涤，随后在硫酸钠(anh.)上干燥和去除溶剂，得到粗品。产物在硅胶上用氯仿洗脱而色谱处理，得到723mg纯化产物(产率55％)。嘧啶-4-基]-吡啶-4-基-胺1-丁基-4-氯-6-(2-氟-苯基)-3-甲基-1H-吡唑并[3，4-d]嘧啶(100mg，0.31毫摩尔)和4-氨基吡啶(58mg，0.626毫摩尔)在乙二醇二甲氧基醚中合并和加热回流4小时。将反应混合物冷却并将产物通过过滤而分离，用最少的冷溶剂洗涤和干燥，得到132mg产物。将50mg该材料在反相C18柱上使用水/乙腈/0.1％三氟乙酸的梯度洗脱而进行HPLC纯化。
方案L(具有结构式(9)的化合物的合成) 2-(乙氧基-苯基-亚甲基)-丙二腈邻苯甲酸三乙基酯(25g，0.112毫摩尔)，丙二腈(9.07g，0.137毫摩尔)和乙酸酐(50ml)回流过夜。过量乙酸酐在真空下去除和产物在硅胶上用30％乙酸乙酯/己烷洗脱而色谱处理，得到21.7g产物(产率97％)。
5-氨基-3-苯基-异唑-4-甲腈羟基胺盐酸盐悬浮在水(30ml)中和加入氢氧化钠(4.4g，0.11毫摩尔)并随后加入乙醇(40ml)，随后简写加入2-(乙氧基-苯基-亚甲基)-丙二腈(21.7g，0.11毫摩尔)。反应混合物在50摄氏度下加热2小时。乙醇在真空下去除并将沉淀物过滤。将沉淀物再溶解在50％乙酸乙酯/己烷中和在硅胶上色谱处理在去除溶剂之后得到8.2g产物(产率40％)。其余的顺序类似于苯基类似物的甲基替代。
方案M(具有结构式(80)的化合物的合成) 1H-吡咯-2-甲腈吡咯-2-甲醛(3.00g，0.0316毫摩尔)与羟基胺-O-磺酸(12.5g，0.11毫摩尔)在100ml水中合并和在室温下搅拌过夜。反应混合物冷却至0摄氏度并将氢氧化钾(12.06g，0.603毫摩尔)在80毫升水中的溶液在1小时时间内滴加。反应混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物用二氯甲烷(3×100ml)提取，将提取物在硫酸钠(anh.)上干燥。去除溶剂，得到3.36g产物作为液体(产率100％)。
1-氨基-1H-吡咯-2-甲腈1H-吡咯-2-甲腈(3.36g，36.5毫摩尔)溶解在100ml二甲基-甲酰胺中，向其中加入碳酸钾(7.51g，54.75毫摩尔)，随后加入O-(4-硝基-2-三氟甲基-苯基)-羟基胺(12.15g，54.73毫摩尔)。混合物在室温下搅拌过夜。加入80ml水并将沉淀物过滤。将滤液的pH调节至10，和用乙酸乙酯(3×100ml)提取。将提取物用水，饱和氯化钠洗涤和在硫酸钠上干燥。溶剂在真空下去除，得到6.31g包含残余二甲基甲酰胺的产物。产率通过NMR而估计为64％。
1-氨基-1H-吡咯-2-羧酸酰胺1-氨基-1H-吡咯-2-甲腈(2.52g，23.5毫摩尔)悬浮在75ml水中，用氢氧化钾(32g，0.57毫摩尔)，30％过氧化氢(2ml)处理和在室温下搅拌过夜。反应混合物在0摄氏度下冷却30min并将产物通过过滤而分离，用冷水洗涤和在真空下干燥，得到2.55g产物(产率87％)。
1-(5-氯-2-氟-苯甲酰基氨基)-1H-吡咯-2-羧酸酰胺1-氨基-1H-吡咯-2-羧酸酰胺(1.25g，10毫摩尔)部分溶解在45ml乙腈中，加入三乙基胺(1.39ml，10毫摩尔)，随后滴加在3ml氯仿中的5-氯-2-氟苯甲酰氯(1.93g，10毫摩尔)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，溶剂在真空下去除并将残余物吸收在氯仿中，用10％碳酸氢钠，水洗涤，和在硫酸钠(anh.)上干燥。通过放置，从溶液中结晶出固体。其它产物通过将滤液在硅胶上用3％甲醇/氯仿洗脱进行色谱处理而得到。得到600mg产物(产率21％)。
2-(5-氯-2-氟-苯基)-3H-吡咯并[2.1-f] [1.2.4]三嗪-4-酮1-(5-氯-2-氟-苯甲酰基氨基)-1H-吡咯-2-羧酸酰胺(200mg，0.71毫摩尔)在密封管中溶解在5ml 28％氢氧化铵中和在80摄氏度下加热过夜。将溶液用氮冲洗以去除过量氨，和用1M氢氯酸酸化至pH2。产物通过过滤而分离，用水洗涤和真空干燥，得到90mg产物(产率48％)。
4-氯-2-(5-氯-2-氟-苯基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪将2-(5-氯-2-氟-苯基)-3H-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪-4-酮(60mg，0.228毫摩尔)加入氯氧化磷(1ml)中。加入57微升N，N-二甲基苯胺(催化剂)并在110摄氏度下加热过夜。过量氯氧化磷在真空下去除，并将残余物用冰处理，和产物用氯仿提取。氯仿提取物在硫酸钠(anh.)上干燥和去除溶剂，得到粗品。产物通过硅胶色谱用氯仿洗脱而色谱处理，得到36mg产物(产率56％)。[1.2.4]三嗪-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺4-氯-2-(5-氯-2-氟-苯基)-吡咯并[2，1-f][1，2，4]三嗪(30mg，0.106毫摩尔)，碳酸铯(48.5mg，0.149毫摩尔)，乙酸钯(II)(1.19mg，0.0053毫摩尔)，BINAP(4.96mg，0.0080毫摩尔)，和4-氨基-甲基吡啶(13.8mg，0.128毫摩尔)在4ml二烷(anh.)中合并和在90摄氏度下搅拌过夜。将反应混合物过滤以去除固体材料，将滤液蒸发至无水，将残余物溶解在氯仿(8毫升)中，用0.5M氢氧化钠(1ml)洗涤，在硫酸钠(anh.)上干燥，蒸发至无水，并随后将残余物再溶解在二甲基甲酰胺中和通过反相HPLC而纯化。分离产物。
方案N(具有结构式(81)和(82)的化合物的合成) 5-(2-氟-苯基)-4H-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-酮3-氨基-1，2，4-三唑(3.64g，43.25毫摩尔)和乙基2-氟苯甲酰基乙酸酯(10g，47.57毫摩尔)在乙酸(45ml)中合并和加热回流过夜。将反应混合物冷却并将产物过滤，用二乙基醚洗涤，得到3.47g(产率35％)。
7-氯-5-(2-氟-苯基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶
5-(2-氟-苯基)-4H-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶-7-酮(840mg，3.64毫摩尔)悬浮在氯氧化磷(5ml)中和加热回流45min。过量氯氧化磷在真空下去除，将残余物用冰处理，将产物用氯仿提取，随后将氯仿用10％碳酸氢钠洗涤，在硫酸钠上干燥和溶剂在真空下去除，得到420mg产物(产率46％)。三唑并[1，5-a]嘧啶-7-基]-吡啶-4-基-胺7-氯-5-(2-氟-苯基)-[1，2，4]三唑并[1，5-a]嘧啶(124mg，0.5毫摩尔)悬浮在二烷(5ml)，4-氨基吡啶(56.4mg，0.6毫摩尔)中，加入叔丁醇钠(67mg，0.7毫摩尔)，BINAP(2.3mg，0.00375毫摩尔)，和Pd2(dba)3(1.14mg，0.00125毫摩尔)并在90摄氏度下加热过夜。二烷在真空下去除，将残余物吸收在甲醇中，过滤和通过反相HPLC而纯化，和将级分冻干以得到产物作为三氟乙酸盐。
具有结构式(81)的化合物使用类似于上述的步骤类似，使用5-氯-2-氟苯甲酰基乙酸乙基酯而制备。具有结构式(83)的化合物使用类似于上述的步骤，使用4-氨基-嘧啶而制备。
方案O(具有结构式(60)和(61)的化合物的合成) 制备4，4-二甲基环己酮
参考四面体通讯，1992，33(35)，5009。
4，4-二甲基环己烯-2-酮(10g，78.11mmol)和三乙基胺(10.89mL，78.11mmol)在100％乙醇(30mL)中的溶液在30psi下在Parr装置中，在r.t.下进行氢化过夜。将内容物过滤通过Celite和蒸发滤液，得到清洁产物作为无色油(10.08g，99％产率)。
制备3，3-二甲基己烷二酸参考J.Med.Chem.1970，13(3)，531。
向4，4-二甲基环己酮(2g，15.85mmol)在冰AcOH(100mL)中的溶液加入CrO3(4.75g，47.54mmol)在冰AcOH(20mL)和水(20mL)中的溶液。混合物在60摄氏度下搅拌过夜，随后冷却和用40％aq.NaOH稀释至pH14。将混合物用二乙基醚(4×100mL)洗涤，并将水层用cone.HCl(aq.)再酸化至pH1。溶液用二乙基醚(4×100mL)提取；将有机提取物干燥(盐水和MgSO4)和蒸发，得到粗二酸，直捷酯化。
制备3，3-二甲基己烷二酸二甲基酯粗3，3-二甲基己烷二酸溶解在甲醇(50mL)中和加入亚硫酰氯(1mL)并将溶液在60摄氏度下加热6小时，随后将它冷却和蒸发，得到粗二酯，然后通过色谱(1∶1己烷/乙酸乙酯)而纯化，得到纯产物作为无色油(2.90g，91％产率在2步骤)。
制备4，4-二甲基-2-氧代-环戊烷羧酸甲基酯参考J.Chem.Soc.Perkin Trans.1，1984，799。
向3，3-二甲基己烷二酸二甲基酯(2.90g，14.36mmol)和甲醇(100μL)在干甲苯(10mL)中的溶液加入钠金属(0.66g，28.72mmol)。混合物加热回流过夜，随后冷却和蒸发。
残余物通过色谱(1∶1己烷/乙酸乙酯)而纯化，得到所需环化产物作为无色油(2.08g，85％产率)。
制备2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-醇4，4-二甲基-2-氧代-环戊烷羧酸甲基酯(2.08g，12.21mmol)和5-氯-2-氟-苯并眯(2.32g，13.44mmol)在100％乙醇(40mL)中的溶液加热回流过夜，随后冷却和蒸发。将残余物溶解在(aq.)NaOH(50mL)中和用二氯甲烷(2×50mL)洗涤。将水层随后用冰乙酸酸化至pH4和用二氯甲烷(2×100mL)提取。将有机提取物干燥(盐水和MgSO4)和蒸发，得到粗品，然后通过色谱(CH2Cl2，0-10％MeOH)而纯化，得到所需产物作为膏固体(2.10g，59％产率)。
制备2-(5-氯-2-氟-苯基)-4-碘-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶将2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-醇(2.10g，7.16mmol)在磷酰氯(40mL)中的悬浮液加热回流2小时，随后冷却和蒸发。将残余物溶解在二氯甲烷中并将溶液滤过硅胶的短垫。将滤液蒸发，得到残基，然后悬浮在氢碘酸(10mL)中和在90摄氏度下与碘化钠(5.37g，35.82mmol)一起加热3小时。将混合物冷却和用水(50mL)稀释。加入硫代硫酸钠水溶液(50mL)并将混合物与二氯甲烷(3×100mL)振荡。有机提取物在MgSO4上干燥上干燥和蒸发，得到粗品，然后通过闪蒸色谱(CH2Cl2)而纯化，得到所需碘产物作为膏固体(1.75g，66％产率)。
制备[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺向2-(5-氯-2-氟-苯基)-4-碘-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶(100mg，0.25mmol)，3-甲基-吡啶-4-基胺(30mg，0.27mmol)，Pd(OAc)2(3mg，12.42μmol)和Rac-BINAP(12mg，18.63μmol)在无水二烷(3mL)中的溶液加入Cs2CO3(121mg，0.37mmol)。将混合物在85摄氏度下加热48小时，冷却和蒸发。HPLC纯化，在冻干之后得到具有结构式(60)的所需产物作为TFA盐，一种白色固体(6.4mg)。使用相同步骤制备具有结构式(61)的化合物。
方案P(具有结构式(62)至(66)的化合物的合成) 制备4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-烟酸甲基酯向2-(5-氯-2-氟-苯基)-4-碘-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶(500mg，1.24mmol)，4-氨基-烟酸甲基酯(208mg，1.37mmol)，Pd(OAc)2(14mg，62.09μmol)和Rac-BINAP(60mg，93.14μmol)在无水二烷(10mL)中的溶液加入Cs2CO3(607mg，1.86mmol)。混合物在85摄氏度下加热12h，冷却和蒸发。将残余物通过色谱(CH2Cl2，0-10％MeOH)而纯化，得到所需产物(178mg，34％产率)。
制备4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-烟酸向4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环-五嘧啶-4-基氨基]-烟酸甲基酯(178mg，0.42mmol)在二烷(10mL)中的溶液加入NaOH(aq.)(451μL，0.44mmol，0.97N溶液)。混合物在60摄氏度下加热1h，随后冷却，和加入HCl(aq.)(425μL，0.44mmol，1.03N溶液)。在加入时，酸从溶液中沉淀并过滤和在真空中干燥，得到137mg产物。
制备4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-烟酰胺
4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-6，6-二甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-烟酸(25mg，60.56μmol)和羰基-二咪唑(20mg，121.11μmol)在无水DMF(3mL)中的悬浮液在70摄氏度下加热1h并随后冷却至r.t.。将ONH3气流经过该溶液30min.，这样完全转化成酰胺产物。蒸发溶液，随后HPLC纯化，在冻干之后得到具有结构式(62)的纯酰胺作为TFA盐(20mg)。
具有结构式(63)至(66)的化合物使用相同的步骤制备。
方案Q(具有结构式(76)和(77)的化合物的合成) 4-[6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-异唑并[5，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸甲基酯4-氯-6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-异唑并[5，4-d]嘧啶(通过用于具有结构式(43)的化合物的方法而制备)(298mg，1毫摩尔)溶解在二烷(4ml)中，并将BINAP(4.67mg，0.0075毫摩尔)，4-氨基-烟酸甲基酯(182mg，1.2毫摩尔)，碳酸铯(456mg，1.4mmole)，和Pd2(dba)3(2.29mg，0.0025mmole)加入混合物和90摄氏度下加热过夜。
二烷在真空下去除并将将残余物用乙酸乙酯(5ml)研磨和产物通过过滤而分离。得到525mg固体，还包含碳酸铯作为副产物。
4-[6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-异唑并[5，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸4-[6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-异唑并[5，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸甲基酯(525mg)悬浮在甲醇(4ml)中，加入1M氢氧化钠溶液(4ml)，并随后在70摄氏度下加热30min。甲醇在真空下去除并将溶液用6M氢氯酸酸化至pH4。将固体过滤，用水洗涤和在炉中干燥，得到137mg产物。
4-[6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-异唑并[5，4-d]嘧啶-4-基氨基]-N-环丙基-烟酰胺4-[6-(5-氯-2-氟-苯基)-3-甲基-异唑并[5，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸(130mg，0.325毫摩尔)与羰基二咪唑(105mg，0.650毫摩尔)在2ml二甲基甲酰胺中合并和在70摄氏度下加热1小时。将混合物冷却至室温，加入环丙基胺(74mg，1.3毫摩尔)和在室温下搅拌1小时。将溶液过滤和将滤液在反相HPLC上进行HPLC纯化。冻干包含纯产物的级分，得到13.7mg纯产物。
具有结构式(77)的化合物使用上述步骤，使用甲基胺而制备。
方案R(具有结构式(33)的化合物的合成) 2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-醇向4-氧代-四氢呋喃-3-羧酸甲基酯(根据Dowd，P.；Choi，S-C.四面体，1991，47，4847-4860制备；800mg，5.55mmol，leq)在乙醇(20ml)中的悬浮液加入2-氟-5-氯-苯并眯(961mg，5.55mmol，1eq)在EtOH(10ml)中的溶液。将反应混合物在80摄氏度下加热过夜。将反应混合物冷却至r.t.并将白色沉淀物过滤和用冷却乙酸乙酯(2×20ml)洗涤。粗将残余物在氯仿和水之间分配。将水层酸化至pH4并将产物用氯仿(3×50ml)提取。将有机层合并，用盐水洗涤，在MgSO4上干燥，过滤和真空浓缩，得到粗固体，然后通过闪蒸柱色谱(在EtOAc中的5％MeOH)而纯化，得到白色固体2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-醇(440mg，30％)。
4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]嘧啶将2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-醇(100mg，0.36mmol，1eq)在POCl3(5ml)中的悬浮液在回流下搅拌1h。将溶液随后冷却至室温和在减压下浓缩，得到白色固体，然后溶解在无水二氯甲烷中。将溶液冷却至0摄氏度和加入冰，随后加入sat.NaHCO3。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩以提供粗白色固体，然后通过闪蒸柱色谱(1∶9 EtOAc∶己烷)而纯化，得到4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]-嘧啶(78mg，73％)作为白色固体。
2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]嘧啶在r.t.下向4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]-嘧啶(78mg，0.275mmol，1eq)在57％HI(aq)(2ml)中的悬浮液中加入NaI(206mg，1.37mmol，5eq)。将反应混合物在r.t.下搅拌过夜并随后倒到冰上。产物用氯仿提取和水层用NaHCO3中和和用氯仿进一步提取。将有机层合并用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩以提供2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶的粗残余物，不进一步纯化。嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，具有结构式(33)的化合物向2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]嘧啶(80mg，0.21mmol，1eq)在无水二烷(5ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(2mg，0.01mmol，0.05eq)，随后加入BINAP(10mg，0.02mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(25mg，0.23mmol，1.2eq)和Cs2CO3(100mg，0.32mmol，1.5eq)。反应混合物在80摄氏度下加热15h。将反应混合物冷却至r.t.和滤过Celite并将粗品通过闪蒸柱色谱(9∶1/乙酸乙酯∶己烷)而纯化，得到[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，具有结构式(33)的化合物(20mg，26％)作为白色固体。
方案S(具有结构式(34)的化合物的合成) 4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯按照用于合成[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，7-二氢呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，即具有结构式(33)的化合物的一般反应步骤，4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯以73％产率分离。
4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸向4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯(60mg，0.14mmol，1eq)在MeOH(5ml)中的悬浮液加入1NNaOH(aq)溶液(300μl，0.30mmol，2eq)并将反应混合物加热回流2h。将溶液冷却至r.t.和真空浓缩。将水(20ml)加入粗品并将水层酸化至pH4。将固体过滤，用水(2×5ml)洗涤和连夜干燥，得到4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸(50mg，90％)。
4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟碱酰胺，具有结构式(34)的化合物向4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸(50mg，0.13mmol，1eq)在DMF(2ml)中的悬浮液加入1，1′-羰基二咪唑(50mg，0.31mmol，2.4eq)并将反应混合物在70摄氏度下加温2h。将混合物冷却至r.t.和NH3(g)鼓泡10min。反应混合物在r.t.用于下搅拌另外1h。反应真空浓缩和将残余物用水(2×5ml)研磨。向粗将残余物中加入1N NaOH(5ml)并将悬浮液在100摄氏度下加热2h。将反应混合物冷却至室温和用1N HCl中和并将固体过滤，得到4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，7-二氢-呋喃并[3，4-d]嘧啶-4-基氨基]-烟碱酰胺，具有结构式(34)的化合物(25mg，50％)作为白色固体。
方案T(具有结构式(38)的化合物的合成) 2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-醇向2-氧代环戊烷羧酸甲基酯(2g，11.8mmol，1eq)，在无水乙醇(20ml)中的溶液加入2-氟-5-氯苯并眯(2.04 g，11.8mmol，1eq)在乙醇(20ml)中的溶液并将反应混合物在80摄氏度下加热过夜。将反应混合物冷却至r.t.并将溶剂在真空中去除，得到粗残余物，然后通过从热乙酸乙酯中重结晶而纯化，得到2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-醇(2.56g，78％)作为白色固体。
4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉将2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-醇(500mg，1.89mmol)在POCl3(6ml)中的悬浮液在回流下搅拌1h。将溶液随后冷却至室温和在减压下浓缩，得到白色固体，然后溶解在二氯甲烷中。将溶液冷却至0摄氏度并加入冰，随后加入sat.NaHCO3。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩以提供粗白色固体4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉，不进一步纯化。
2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，6，7，8-四氢喹唑啉在r.t.下，向4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉(534mg，1.89mmol，1eq)在57％水(10ml)HI溶液中的悬浮液中加入NaI(1.42g，9.47mmol，5eq)。将反应混合物在r.t.下搅拌过夜并随后倒到冰上。产物用氯仿提取和水层用NaHCO3中和和用更多的氯仿进一步提取。将有机层合并，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩以提供粗白色固体2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，6，7，8-四氢喹唑啉，不进一步纯化。-(3-甲基吡啶-4-基)-胺，具有结构式(38)的化合物粗2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5，6，7，8-四氢喹唑啉(130mg，0.35mmol，1eq)溶解在二烷(5ml)中并向其中加入Pd(OAc)2(4mg，0.02mmol，0.05eq)，随后加入BINAP(16mg，0.03mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(49mg，0.45mmol，1.3eq)和Cs2CO3(170mg，0.52mmol，1.5eq)。反应混合物在80摄氏度下加热15h。将反应混合物冷却至r.t.和滤过Celite并将粗品通过闪蒸柱色谱(1∶1/乙酸乙酯∶己烷)而纯化，得到[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基]-(3-甲基吡啶-4-基)-胺，具有结构式(38)的化合物(110mg，86％)。
方案U(具有结构式(50)，(40)，(45)，(57)，(59)的化合物的合成) 4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基氨基]-烟酸乙基酯按照用于合成[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基]-(3-甲基吡啶-4-基)-胺，即具有结构式(38)的化合物的一般反应步骤，4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢-喹唑啉-4-基氨基]-烟酸乙基酯以67％产率分离。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基氨基]-烟酸，50向4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基-氨基]-烟酸乙基酯(150mg，0.35mmol，1eq)在MeOH(5ml)中的悬浮液加入1N NaOH(aq)溶液(423μl，0.42mmol，1.2eq)并将反应混合物回流1h。将溶液冷却至r.t.和真空浓缩。将水(20ml)加入粗品并将水层酸化至pH4。将固体过滤，用水(2×5ml)洗涤和连夜干燥，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基氨基]-烟酸，具有结构式(50)的化合物(132mg，94％)，作为膏着色固体。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基氨基]-N-环丙基烟酰胺，具有结构式(45)的化合物向4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基-氨基]-烟酸(40mg，0.10mmol，1eq)在无水DMF(1ml)中的悬浮液加入三乙基胺(15μl，0.11mmol，1.1eq)，随后加入环丙基胺(70μl，0.10mmol，10eq)。向悬浮液中滴加PyBrOP(56mg，0.21mmol，1.2eq)在DMF(500μl)中的溶液。反应混合物在室温下搅拌16h。将反应体系真空浓缩和将残余物用醚(2×20ml)研磨。粗将残余物通过闪蒸柱色谱(在CHCl3中的0-5％MeOH)而纯化，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5，6，7，8-四氢喹唑啉-4-基氨基]-N-环丙基烟酰胺，具有结构式(45)的化合物，(15mg，34％)作为白色固体。
具有结构式(40)的化合物通过用于合成具有结构式(45)的化合物所述的方法，采用甲基胺替代环丙基胺而制备。
具有结构式(57)的化合物通过用于合成具有结构式(45)的化合物所述的方法，采用1-氨基-丙烷-2-(S)-醇替代环丙基胺而制备。具有结构式(59)的化合物通过用于合成具有结构式(45)的化合物所述的方法，采用N，N′-二乙基乙烯二胺替代环丙基胺而制备。
方案V(具有结构式(39)的化合物的合成) 2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-醇向2-氟-5-氯苯并眯(1.05g，6.08mmol，1.2eq)在EtOH(20ml)中的溶液加入在乙醇(5ml)中的3-氧代-四氢呋喃-2-羧酸乙基酯(根据Moyer，M.P；Feldman，P.L.；Rapoport，H.J.Org.Chem，1985，50，5223-5230制备；800mg，5.06mmol，1eq)。反应混合物在80摄氏度下加热过夜。将反应混合物冷却至r.t.和粗将残余物通过闪蒸柱色谱(在CHCl3中的5％MeOH)而纯化，得到白色固体2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-醇(650mg，53％)。
4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶将2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-醇(100mg，0.36mmol，1eq)在POCl3(5ml)中的悬浮液在回流下搅拌1h。溶液冷却至r.t.和在减压下浓缩，得到白色固体，然后溶解在二氯甲烷中。将溶液冷却至0摄氏度并加入冰，随后加入sat.NaHCO3。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩以提供粗白色固体，然后通过闪蒸柱色谱(1∶9EtOAc∶己烷)而纯化，得到4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶(78mg，73％)作为白色固体。
2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶在rt.下，向4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]-嘧啶(80mg，0.28mmol，1eq)在57％水(2ml)HI溶液中的悬浮液加入NaI(206mg，1.41mmol，5eq)。将反应混合物在r.t.下搅拌过夜并随后倒到冰上。产物用氯仿提取和水层用NaHCO3中和和用更多的氯仿进一步提取。将有机层合并用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩以提供粗残余物2-(5-氯-2-氟-苯基)-4-碘-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶，不进一步纯化。嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，具有结构式(39)的化合物向2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶(106mg，0.28mmol，1eq)在二烷(5ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(3mg，0.01mmol，0.05eq)，随后加入BINAP(13mg，0.02mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(40mg，0.37mmol，1.3eq)和Cs2CO3(138mg，0.42mmol，1.5eq)。反应混合物在80摄氏度下加热15h。将反应混合物冷却至r.t.和滤过Celite并将粗品通过闪蒸柱色谱(4∶1/乙酸乙酯∶己烷-100％乙酸乙酯)而纯化，得到[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，即具有结构式(39)的化合物(30mg，30％)作为白色固体。
方案W(具有结构式(44)的化合物的合成) 4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯向4-氯-2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]-嘧啶(320mg，1.13mmol，1eq)在二烷(5ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(13mg，0.06mmol，0.05eq)，随后加入BINAP(53mg，0.08mmol，0.075eq)，4-氨基-烟酸乙基酯(206mg，1.24mmol，1.1eq)和Cs2CO3(478mg，1.46mmol，1.5eq)。反应混合物在80摄氏度下加热15h。将反应混合物冷却至r.t.和滤过Celite并将粗品通过闪蒸柱色谱(在CHCl3中的0-5％MeOH)而纯化，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯(100mg，21％)作为白色固体。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸向4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯(100mg，0.24mmol，1eq)在MeOH(5ml)中的悬浮液加入1NNaOH(aq)溶液(290μl，0.29mmol，1.2eq)并将反应混合物回流5h。将溶液冷却至r.t.和真空浓缩。将水(20ml)加入粗品并将水层酸化至pH4。将固体过滤，用水(2×5ml)洗涤和连夜干燥，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢iur并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸(88mg，94％)作为膏着色固体。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-N-甲基烟酰胺，具有结构式(44)的化合物向4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-烟酸(75mg，0.19mmol，1eq)在DMF(2ml)中的悬浮液加入三乙基-胺(30μl，0.21mmol，1.1eq)，随后加入甲基胺(1.17ml，3.89mmol，在THF中的2M溶液，20eq)。向o悬浮液中滴加PyBrOP(100mg，0.21mmol，1.2eq)在DMF(1ml)中的溶液。反应混合物在室温下搅拌16h。反应真空浓缩和将残余物用醚(2×20ml)研磨。粗将残余物通过闪蒸柱色谱(在CHCl3中的5％MeOH)而纯化，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-6，7-二氢呋喃并[3，2-d]嘧啶-4-基氨基]-N-甲基烟酰胺，即具有结构式(44)的化合物(20mg，26％)作为白色固体。
方案X(具有结构式(43)的化合物的合成) 2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-醇向2-氟-5-氯苯并眯(1.95g，11.27mmol，1.1eq)在EtOH(20ml)中的溶液加入2-甲基-5-氧代环戊烷羧酸乙基酯(根据Wang，C；Gu，X.；Yu，M.S.；Curran，D.P.四面体，1998，29，8355-8370制备；1.60g，10.26mmol，1eq)在乙醇(5ml)中的溶液。反应混合物在80摄氏度下加热过夜。将反应混合物冷却至r.t.并将溶剂在真空中去除，得到粗残余物，然后通过从热乙酸乙酯中重结晶，得到2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-醇(1.0g，35％)作为白色结晶固体和滤液通过闪蒸柱色谱而进一步纯化，得到另外850mg 2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-醇。
2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶将2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊-嘧啶-4-醇(200mg，0.72mmol，1eq)在POCl3(5ml)中的悬浮液在回流下搅拌1h。将溶液随后冷却至室温和在减压下浓缩，得到白色固体。残余POCl3通过与氯仿共沸而去除。在r.t.下，向粗亚氨基氯在57％水(5ml)HI溶液中的悬浮液加入NaI(540mg，3.60mmol，5eq)。将反应混合物在r.t.下搅拌过夜并随后倒到冰上。产物用氯仿提取和水层用NaHCO3中和和用氯仿进一步提取。将有机层合并用盐水洗涤，干燥(MgSO4)，过滤和真空浓缩以提供粗残余物2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶，不进一步纯化。-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，具有结构式(43)的化合物向2-(5-氯-2-氟苯基)-4-碘-5-甲基-6，7-二氢-5H-环-五嘧啶(275mg，0.71mmol，1eq)在二烷(5ml)中的溶液加入Pd(OAc)2(8mg，0.04mmol，0.05eq)，随后加入BINAP(33mg，0.05mmol，0.075eq)，4-氨基-3-甲基吡啶(84mg，0.78mmol，1.1eq)和Cs2CO3(347mg，1.06mmol，1.5eq)。反应混合物在80摄氏度下加热15h。将反应混合物冷却至r.t.和滤过Celite并将粗品通过闪蒸柱色谱(1∶1/乙酸乙酯∶己烷-100％乙酸乙酯)而纯化，得到[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，具有结构式(43)的化合物(250mg，96％)。
方案Y(具有结构式(48)，(49)，(47)，(46)的化合物的合成) 4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯，化合物具有结构式(48)按照用于合成[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基]-(3-甲基-吡啶-4-基)-胺，即具有结构式(43)的化合物的一般反应步骤，4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯，具有结构式(48)的化合物，以68％产率分离。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-烟酸，具有结构式(49)的化合物向4-[2-(5-氯-2-氟-苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环-五嘧啶-4-基氨基]-烟酸乙基酯(180mg，0.42mmol，1eq)在MeOH(5ml)中的悬浮液加入1NNaOH(aq)溶液(634μl，0.63mmol，1.5eq)和反应混合物加热回流1h。将溶液冷却至r.t.和真空浓缩。将水(20ml)加入粗品和水层酸化至pH4。将固体过滤，用水(2×5ml)洗涤和连夜干燥，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-烟酸，具有结构式(49)的化合物(160mg，95％)作为白色固体。
4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-N-甲基-烟酰胺，具有结构式(47)的化合物向4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环-五嘧啶-4-基氨基]-烟酸(20mg，0.05mmol，1eq)在DMF(2ml)中的悬浮液加入三乙基胺(8μl，0.05mmol，1.1eq)，随后加入甲基胺(250μl，3.89mmol，在THF中的2M溶液，10eq)。向悬浮液中滴加PyBOP(40mg，0.08mmol，1.5eq)在DMF(1ml)中的溶液。反应混合物在室温下搅拌16h。反应真空浓缩和将残余物用醚(2×20ml)研磨。粗将残余物通过闪蒸柱色谱(100％乙酸乙酯)而纯化，得到4-[2-(5-氯-2-氟苯基)-5-甲基-6，7-二氢-5H-环戊嘧啶-4-基氨基]-N-甲基-烟酰胺，即具有结构式(47)的化合物，(12mg，58％)作为白色固体。
具有结构式(46)的化合物的化合物通过用于合成具有结构式(47)的化合物所述的方法采用氨替代甲基胺而制备。
具有结构式(1)的化合物可在本领域已知的功能基团转化反应(包括以下描述的那些)之后相互转化。用于制备具有结构式(1)的化合物的许多中间体是已知的化合物或是已知的化合物的类似物(可按照熟练人员可容易取得的本领域已知的方法改性而制备)。
具有结构式(1)的化合物可按照本领域已知的用于将三价氮转化成其N-氧化物形式的步骤而被转化成相应N-氧化物形式。所述N-氧化反应可一般通过将具有结构式(1)的起始原料与合适的有机或无机过氧化物反应而进行。合适的无机过氧化物包括，例如，过氧化氢，碱金属或碱土金属过氧化物，如过氧化钠，过氧化钾；合适的有机过氧化物可包括过氧酸如，例如，苯过氧酸或卤代取代的苯过氧酸，如3-氯苯过氧酸，过氧链烷酸，如过氧乙酸，氢过氧化烷基，如氢过氧化叔丁基。合适的溶剂是，例如，水，低级醇，如乙醇和类似物，烃，如甲苯，酮，如2-丁酮，卤化烃，如二氯甲烷，和这些溶剂的混合物。
具有结构式(1)的化合物的纯立体化学异构体形式可通过应用本领域已知的步骤而得到。非对映体可通过物理方法如选择性结晶和色谱技术，如，逆流分布，液体色谱和类似方法而分离。具有结构式(1)的化合物可作为对映异构体的外消旋混合物而得到，所述对映异构体可按照本领域已知的拆分步骤相互分离。充分碱性或酸性的具有结构式(1)的外消旋化合物可通过与合适的手性酸，相应手性碱反应而被转化成相应非对映体盐形式。所述非对映体盐形式随后，例如，通过选择性或分级结晶而分离和对映异构体通过碱或酸而从中释放。分离具有结构式(1)的化合物的对映异构体形式的一种替代方法包括液体色谱，尤其是使用手性固定相的液体色谱。所述纯立体化学异构体形式也可衍生自合适的起始原料的相应纯立体化学异构体形式，前提是反应立体特异地出现。优选，如果需要特定立体异构体，所述化合物可通过立体特异性制备方法而合成。这些方法可有利地采用对映异构体纯起始原料。
可用于本发明的化合物和其相关化合物的给药方式和配制取决于症状的性质，症状的严重性，所要治疗的特定患者，和医师的判断；配方取决于给药模式。本发明化合物或其任何子组可被转化成各种药物形式用于给药目的。作为合适的组合物，可提及常用于全身给药的所有的组合物。
为了制备本发明药物组合物，治疗有效量的特殊化合物，视需要加成盐形式或金属配合物，作为活性成分与药物可接受载体紧密混合，所述载体可以是各种各样的形式，取决于用于给药的制剂的形式。本文中的治疗有效量是针对感染患者或处于感染危险的患者足以预防性性地作用，稳定或减少病毒感染，和尤其是HCV病毒感染，或防止疾病发展成慢性肝炎，肝纤维化，肝硬化，晚期肝疾病，HCC(肝蜂窝癌)和类似疾病的量。
药物组合物最好是尤其适用于口服，直肠，经皮，或通过不经肠道注射给药的单元剂型。在制备口服剂量形式的组合物时，可以使用任何常规的药物介质如，例如，水，二醇，油，醇和类似物，在口服液体制剂如悬浮液，糖浆，酏剂，乳液和溶液的情况下；或固体载体如淀粉，糖，白陶土，润滑剂，粘结剂，崩解剂和类似物，在粉末，丸剂，胶囊，和片剂的情况下。由于其容易给药，片剂和胶囊代表最有利的口服剂量单元形式，其中显然采用固体药物载体。对于不经肠道组合物，载体通常包含至少占大部分的无菌水，但可以包括其它成分，例如，以帮助溶解。例如可制备可注射溶液，其中载体包含盐水溶液，葡萄糖溶液或盐水和葡萄糖溶液的混合物。也可制备可注射悬浮液，其中可以采用合适的液体载体，悬浮剂和类似物。还包括预期在使用之前不久转化成液体形式制剂的固体形式制剂。在适用于经皮给药的组合物中，载体视需要包含渗透增加剂和/或合适的润湿剂，视需要与较小比例的任何性质的合适的添加剂相结合，所述添加剂不带来对皮肤的明显有害影响。
因为本发明化合物是小分子，它们适宜地通过口服给药而给药，其中将它们与合适的药物赋形剂配混以提供片剂，胶囊，糖浆，和类似物。适用于口服给药的配方也可包括次要组分如缓冲剂，香味剂和类似物。通常，活性成分在配方中的量是总配方的5％-95％，但可根据载体而允许宽的偏差。合适的载体包括蔗糖，果胶，硬脂酸镁，乳糖，花生油，橄榄油，水，和类似物。
可用于本发明的化合物也可通过栓剂或其它透膜载体而给药。通常，这些配方包括有助于该化合物通过粘膜的赋形剂如药物可接受洗涤剂。
该化合物也可针对局部症状如牛皮癣，或在预期渗透皮肤的配方中局部地给药。这些包括可通过已知的方法而配制的洗剂，膏，软膏和类似物。该化合物也可通过注射而给药，包括静脉内，肌内，皮下或腹膜内注射。用于这些用途的典型的配方是在等渗载体如Hank′s溶液或Ringer′s溶液中的液体配方。
本发明化合物也可通过口服吸入或吸入利用本领域用于如此给药的方法和配方而给药。因此，一般来说本发明化合物可以溶液，悬浮液或干粉末的形式向肺给药，其中溶液是优选的。开发通过口服吸入或吸入用于传输溶液，悬浮液或干粉末的任何体系适用于本化合物的给药。
因此，本发明还提供了一种适用于通过口而吸入或吸入给药的药物组合物，包含具有结构式(1)的化合物和药物可接受载体。优选，本发明化合物通过吸入喷雾或烟雾化剂量的溶液而给药。
可选的配方包括鼻喷剂，脂质体配方，缓释配方，和类似物，这是本领域已知的。
可以使用任何合适的配方。对本领域已知的配方的概述在Remington′s药物科学(最新版，Mack出版公司，Easton，PA)中找到。对该手册的参考是本领域常规的。
尤其有利地配制单元剂型的前述药物组合物以便于给药和剂量均匀性。这里所用的单元剂型是指适用作单元剂量的物理上离散的单元，每一单元包含预定量的计算用于产生所需治疗作用的活性成分以及所需的药物载体。这些单元剂型的例子是片剂(包括核或涂覆片剂)，胶囊，丸剂，栓剂，粉末小包，晶片，可注射溶液或悬浮液和类似物，和其分开的多倍形式。
本发明化合物的剂量取决于在许多对不同病人各异的因素。但据信，每日口服剂量一般采用0.001-100mg/kg总体重，优选0.01-50mg/kg和更优选约0.01mg/kg-10mg/kg。但剂量服法根据所要治疗的症状和医师的判断而变化。
一般预期，抗病毒有效的每日量是0.01mg/kg至500mg/kg体重，更优选0.1mg/kg至50mg/kg体重。可合适地将所需剂量作为两个，三个，四个或更多个子剂量在整天的合适间隔内给药。所述子剂量可被配制成单元剂型，例如，包含1至1000mg，和尤其是5至200mg活性成分/单元剂型。
给药的准确剂量和频率取决于所用的具有结构式(I)的特定化合物，所要治疗的特定症状，所要治疗的症状的严重性，特定病人的年龄，体重，性别，病症程度和全身性脉象以及该个人可能正在摄入的其它药物，这是本领域熟练技术人员熟知的。另外，所述有效的每日量显然可增减，这取决于所要治疗的患者的响应和/或取决于对本发明化合物开处方的医师的评估。以上提及的有效的每日量因此仅是指导性的。
从实施例显然看出，由于其有利的抗病毒性能，本发明化合物可用于治疗被HCV感染的个体和用于这些个体的预防。一般来说，本发明化合物可用于治疗被黄热病毒感染的恒温动物。可用本发明化合物治疗的症状，尤其与HCV和其它致病黄热病毒，如黄热病，登革热(1-4型)，St.Louis大脑炎，列性乙型脑炎，墨累山谷脑炎，West Nile病毒和库宁病毒有关的症状。与HCV有关的症状包括导致肝硬化，晚期肝疾病，和HCC的渐进性肝纤维化，炎症和坏死；和其它致病黄热病毒的症状，包括黄热病，登革热，出血发热和脑炎。
本发明化合物或其任何子组可因此用作针对上述症状的医学。所述作为医学的用途或治疗方法包括向HCV-感染的患者全身供给有效地抗击与HCV有关的症状和其它致病黄热病毒的量。因此，本发明化合物可用于制造可用于治疗与HCV和其它致病黄热病毒有关的症状的药物。
在实施方案，本发明涉及本文所定义的具有结构式(1)的化合物或其任何子组在制造药物中的用途，所述药物针对哺乳动物用于治疗或对抗与HCV感染有关的感染或疾病。本发明还涉及一种治疗黄热病毒感染，或与黄热病毒感染有关的疾病的方法，包括向所需的哺乳动物供给有效量的本文所定义的具有结构式(1)的化合物或其子组。
在另一实施方案中，本发明涉及本文所定义的具有结构式(1)的化合物或其任何子组用于制造药物的用途，所述药物可用于抑制被黄热病毒，尤其是HCV感染的哺乳动物的HCV活性。
在另一实施方案中，本发明涉及本文所定义的具有结构式(1)的化合物或其任何子组用于制造药物的用途，所述药物可用于抑制被黄热病毒，尤其是HCV感染的哺乳动物的HCV活性，其中所述HCV在其复制中被抑制。
应该注意，具有结构式(1)的化合物可作为单个活性成分，或作为具有该结构式的几种实施方案的混合物而给药。本发明化合物可作为单个治疗剂或与其它治疗剂结合使用。
因此，以前已知的抗HCV化合物，如，例如，干扰素-α(IFN-α)，聚乙二醇化干扰素-α和/或利巴韦林，和本发明化合物的组合可作为医学用于组合治疗。术语″组合治疗″涉及一种包含必须有的(a)a本发明化合物，和(b)视需要另一抗HCV化合物的产品，作为同时，分开或顺序用于治疗HCV感染，尤其是，用于治疗1型HCV感染的组合制剂。因此，为了对抗或治疗HCV感染，本发明化合物可与例如，干扰素-α(IFN-α)，聚乙二醇化干扰素-α和/或利巴韦林，以及基于靶向HCV表位的抗体，小干扰性RNA(SiRNA)，核糖酶，DNA酶，反义RNA，例如NS3蛋白酶的小分子拮抗剂，NS3解螺旋酶和NS5B聚合酶的治疗剂相结合而共给药。
因此，本发明涉及以上定义的具有结构式(1)的化合物或其任何子组用于制造药物的用途，所述药物可用于抑制被HCV病毒感染的哺乳动物的HCV活性，其中所述药物用于组合治疗，所述组合治疗优选包含具有结构式(1)的化合物和(聚乙二醇化)IFN-α和/或利巴韦林，和可能抗HIV化合物。
所属技术领域的专业人员可以理解，具有结构式(1)的化合物可在基于Lohmann等人(1999)Science 285110-113的细胞HCV复制子体系中测试，其中包括由Krieger等人(2001)病毒学杂志754614-4624(在此作为参考并入本发明)所述的进一步改进，这进一步在实施例部分例证。尽管不是用于HCV的完全感染型号，该型号被广泛接受为目前可得到的最可靠和有效的自主HCV RNA复制模型。在该细胞型号中具有抗HCV活性的化合物被认为是用于进一步开发对哺乳动物HCV感染的治疗的代表。可以理解，重要的是将具体地影响HCV功能的化合物区别于在HCV复制子型号中产生细胞毒性或细胞静电作用，和因此造成HCVRNA或键接通讯酶浓度下降的那些。本领域已知用于评估细胞细胞毒性的试验，例如基于线粒体酶的活性使用荧光氧化还原染料如刃天青。另外，细胞反筛可用于评估键接报道基因活性，如荧光虫荧光素酶的非选择性抑制。合适的细胞类型可通过稳定的转染而配有其表达取决于基本活性基因启动基因的萤花素酶报道基因，和这些细胞可用作反筛以消除非选择性抑制剂。
以上和下提及的所有的专利，专利申请和文章在此引以参考。
实施例以下实施例用于说明本发明而非限定于此。
实施例1具有结构式(1)的化合物在HCV复制子分析中的活性稳定的复制子细胞通讯子分析在细胞分析中，研究本发明化合物在抑制HCV RNA复制中的活性。该分析表明，本化合物具有针对在细胞培养物中起作用的HCV复制子的活性。该蜂窝分析基于在多目标筛选技术中的双顺反子表达构造，例如描述于Lohmann等人(1999)Science vol.285 pp.110-113并进行改进Krieger等人(2001)病毒学杂志754614-4624.实质上，该方法如下。
该分析采用稳定地转染的细胞系Huh-7 luc/neo(以下称作Huh-Luc)。该细胞系隐藏一种编码双顺反子表达结构的RNA，包含由脑心肌炎病毒(EMCV)的内核多糖体进入部位(IRES)转译的Ib型HCV的野生型NS3-NS5B区域，其前方是通讯部分(FfL-萤花素酶)，和可选标示部分(neoR，新霉素磷转移酶)。该构造以来自Ib型HCV的5′和3′NTRs(非翻译区域)为边界。复制子细胞在G418(neoR)存在下的连续培养取决于HCVRNA的复制。自动复制至高水平，编码尤其萤虫素酶的表达HCV RNA的稳定地转染的复制子细胞用于筛选抗病毒化合物。
细胞分析实验方法将复制子细胞在以各种浓度加入的试验和对比化合物的存在下置于384井板中。在培养3天之后，HCV复制通过分析萤虫素酶活性(使用标准萤虫素酶分析底物和试剂和Perkin Elmer ViewLuxTMultraHTS微板成像仪)而测定。对比培养物中的复制子细胞在不存在任何抑制剂的情况下具有高萤虫素酶表达。该化合物对萤虫素酶活性的抑制性活性在Huh-Luc细胞上监控，得到每一试验化合物的剂量-响应曲线。随后计算EC50值，该值表示该化合物降低所测萤虫素酶活性，或更多具体地，基因键接HCV复制子RNA的复制能力的50％水平所需的量。在下表中，栏1提供了标识号，栏2给出了在上述Huh7-Luc分析中的结果。
权利要求
1.下式化合物 或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6是视需要取代的饱和，不饱和或芳族环包含4-7个环原子，其中X是选自N，O，或S的原子；n是0，1，2，或3；每一Ar1和Ar2独立地是视需要取代的芳族部分或视需要取代的杂芳族部分，其中所述杂芳族部分包含一个或多个O，S，和/或N，和这些芳族或杂芳族部分包含5-12个环原子；R1是H，或视需要取代的烷基(1-10C)，链烯基(2-10C)，或炔基(2-10C)；前提是如果所述嘧啶环的稠环桥接位5和6包含6个环原子，那么它不是芳族环；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性。
2.下式化合物 或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6是包含5或6个环原子的视需要取代的饱和，不饱和或芳族环，其中X是选自N或O的原子；n是0，1，或2；R1是H，或视需要取代的烷基(1-6C)；每一R3独立地是氢，卤代，氰基，硝基，烷基(1-6C)，聚卤代烷基(1-6C)，-COR，-CONR2，-COOR，-OR，-OCOR，-NR2，或-NRCOR；每一R4独立地是氢，卤代，氰基，硝基，聚卤代烷基(1-6C)，或烷基(1-6C)；其中每一R独立地是氢，羟基，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，环烷基(3-7C)，Het，或烷基(1-6C)视需要用一个或两个选自羟基，环烷基(3-7C)，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，和Het的取代基取代；Het是包含1至2个分别独立地选自氮，氧和硫的杂原子的5或6元饱和，部分不饱和或完全不饱和杂环环，和其中基团Het总体上可视需要用一个，两个或三个分别独立地选自卤代，烷基(1-6C)，羟基，和氧代的取代基取代；前提是如果所述嘧啶环的稠环桥接位5和6包含6个环原子，那么它不是芳族环；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性，防止或治疗与HCV有关的症状。
3.下式化合物 或其药物可接受盐用于制造药物的用途；其中嘧啶环的稠环桥接位5和6与嘧啶环一起形成选自以下的基团 其中任何这些基团可视需要用一个或两个选自烷基(1-6C)，苯基，和苄基的取代基取代；R3是氢，卤代，烷基(1-6C)，-CF3，-COR，-CONR2，或-COOR；每一R4aR4b独立地是氢或卤代；其中每一R独立地是氢，羟基，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，环烷基(3-7C)，Het，或烷基(1-6C)，视需要用一个或两个选自羟基，环烷基(3-7C)，氨基，单-或二烷基(1-6C)氨基，和Het的取代基取代；Het是选自以下的基团 其中基团Het可视需要用一个或两个分别独立地选自烷基(1-6C)，和氧代的取代基取代；所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于抑制HCV活性，防止或治疗与HCV有关的症状。
4.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中化合物是
5.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中化合物是
6.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中化合物是
7.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中化合物是
8.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中化合物是
9.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中化合物是
10.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中化合物是
11.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中化合物是
12.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中该药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于防止趋向慢性肝炎，肝纤维化，肝硬化，晚期肝疾病，HCC(肝蜂窝癌)和类似疾病的疾病发展。
13.根据任何一项权利要求1至3的用途，其中所述药物针对被HCV感染的哺乳动物可用于治疗慢性肝炎，肝纤维化，肝硬化，晚期肝疾病，HCC(肝蜂窝癌)和类似疾病。
全文摘要
本发明涉及双环嘧啶作为HCV复制抑制剂的用途以及其在用于治疗或对抗HCV感染的药物组合物中的用途。另外，本发明涉及用于制备这些药物组合物的方法。本发明还涉及本发明双环嘧啶与其它抗HCV剂的组合。
文档编号A61P1/00GK101031304SQ200580033106
公开日2007年9月5日 申请日期2005年9月29日 优先权日2004年9月30日
发明者K·A·西门, T·-I·林, O·兰茨, D·L·N·G·苏勒罗克斯, P·J·-M·B·拉博伊森 申请人:泰博特克药品有限公司
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