索骨丹有效活性成分的提取方法及用途的制作方法
专利名称：索骨丹有效活性成分的提取方法及用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种索骨丹有效活性成分的提取方法及索骨丹有效活性成分在制备抗病毒和抑菌灭菌药物中的应用。
根据世界卫生组织全球病毒监测研究报告显示，柯萨奇病毒在人群中感染最为常见。在新生儿、儿童突发死亡病例中，20％为病毒性心肌炎所致。由于病毒感染后可在心肌中持续存在，目前尚缺乏有效抗病毒手段[1]。《健康报》2001，03，20，蒋明。
现已研究查明，咽峡疱疹(亦称疱疹性咽峡炎)，多为感染柯萨基病毒所致。起病初有头痛，小儿啼哭，身痛，发烧等类似感冒症状，继而发现腹痛，拒食，呕吐等胃肠症状，儿童因此病高烧不退，体质下降，甚至出现惊厥，并发腮腺炎及腮腺炎性脑膜炎，对生命构成威胁[2]。《福建卫生报》2000，09，24金若米。
本发明的另一目的在于提供索骨丹有效活性成分在制备抗病毒和抑菌灭菌药物中的用途。
本发明索骨丹有效活性成分的提取方法，该方法包括以下步骤a.以索骨丹的块根为原料，将其精选、切片、洗净、干燥、粉碎至20目、10目或3-5mm的粒度；b.用浓度为45-95％有机溶液总萃取，其中有机溶液可以是浓度为45～60％、70～75％、90～95％的医用乙醇的任何一种；然后分极性部位用有机溶液萃取，接着进行活性试验，有机溶液可以是氯仿(丙酮)、乙酸乙酯、正丁醇；配合药理筛选，弃去残渣；其中有机溶液用量为原料量的4-8倍，萃取方式可以为冷浸或热迥流。冷浸方式的冷浸时间为每次5-9天，萃取次数为3-5次，萃取温度为12-30℃。热迥流方式的迥流时间为每次1-4小时，优选2-4小时；迥流次数为2-5次，优选2-3次；c.减压回收溶剂后，提取液浓缩成浸膏；d.分部位用色谱柱进行色谱分离，柱层析用聚酰胺或用硅胶作填充剂，以氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸＝5∶4∶0.1或正丁醇∶氯仿∶甲酸＝8∶3∶1为洗脱剂，得活性部位的洗脱液，即得到有效活性成分。
索骨丹有效活性成分，包括1)鬼灯檠甲素；2)鬼灯檠乙素；3)槲皮素；4)熊果甙；5)紫丁香酸；6)没食子酸；7)3-O-没食子酰基-(-)-表儿茶素；8)(3-O-没食子酰基)-表儿茶素-(4β-8)-(3-O-没食子酰基)-表儿茶素；9)1，2，4，6-四-O-3-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖；10)没食子酸甲酯；11)芳樟醇；12)2，6-二羟基苯乙酸甲酯等。
纯中药索骨丹的有效活性成分对柯萨基病毒、疱疹病毒等引起的疑难病症有明显疗效，适宜治疗病毒性心肌炎、咽峡炎、腮腺炎、疱疹性口腔炎和恶性痢疾、乙型肝炎、流行性感冒等，该药疗效显著，服用安全，无毒副作用，增强免疫，克服了现有西药、中成药的缺点。本发明索骨丹的有效活性成分可单独使用，也可将索骨丹中提取的活性成分的流浸膏单独与辅料(如，医用淀粉、乙基纤维素、明胶等)混合均匀、干燥、粉碎、过筛、熟化和灭菌后制成所需的剂型，可治疗由柯萨基病毒、单纯疱疹病毒和乙型脑炎病毒所引起的疑难病症，如病毒性心肌炎、腮腺炎、咽峡炎、疱疹性口腔炎等。还可将其与助剂、辅料科学配伍后，干燥粉碎成100-120目的细粉，在100-110℃温度下进行熟化、灭菌处理10-30分钟，意即可制成胶囊、含片也可制成膏剂，既根据不同的助剂，制出相应的药剂。例如，加一种或数种助剂制成抗病毒、抑菌灭菌制剂，或治乙型肝炎、哮喘、流行性感冒等药剂。所制成的药物具有服用安全，疗效明显，无毒副作用，抗病毒、抑菌灭菌范围广，制备方法简便易行，无环境污染等优点。
索骨丹的有效活性成分药剂中含有丰富的营养成分。在索骨丹中，其总氨基酸的含量为2.01％。已鉴定出18种人体所需的氨基酸，其中有8种为人体所需而又不能自身合成的氨基酸。
索骨丹有效活性成分，还对金黄色葡萄球菌、李斯德杆菌、耶尔森氏菌、变形杆菌、绿浓杆菌、炭疽杆菌、伤寒杆菌、弗氏痢疾杆菌等10余种病菌有强的杀灭作用。此药不仅能杀灭和抑制DNA(HGV单纯疱疹)病毒，而且还能抑灭RNA(柯萨基)病毒，说明此药为广谱性抗病毒药物。此药安全量为192-96mg/Kg，而在含17-34mg/Kg时即能抑灭病毒，同时杀灭病毒后的细胞管的细胞仍能继续分裂传代，说明此药安全有效，毒性小。
用瑞士种小白鼠进行经口灌胃染毒试验，以蒸馏水对照，实验结果表明，索骨丹的有效活性成分经口等量灌胃(0.01ml/g)，其急性经口的半数致死大于12500mg/Kg。按口服毒性分极标准，属于微毒(实际无毒)。此外，试验还表明，对乙肝病毒和流感病毒有100％抑制作用。将索骨丹的有效活性成分制成药剂，对治疗由柯萨基病毒、单纯疱疹病毒和乙型脑炎病毒所引起的疑难病症，如病毒性心肌炎、腮腺炎、咽峡炎、疱疹性口腔炎等，有效率93.7％，优良率86％。
实施例1取索骨丹的块根200g，将其精选、切片、洗净、干燥、粉碎至10目的粒度；用1000g的浓度为45～60％的医用乙醇总萃取，萃取方式为冷浸方式，冷浸时间为每次7天，萃取次数为4次，萃取温度为25℃。然后分极性部位用有机溶液萃取，有机溶液可以是氯仿、乙酸乙酯、正丁醇；接着进行活性试验，配合药理筛选，弃去残渣；减压回收溶剂后，提取液浓缩成浸膏；分部位用色谱柱进行色谱分离，柱层析用硅胶作填充剂，以氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸＝12∶5∶0.1为洗脱剂，得活性部位的洗脱液，即得到有效活性成分。
实施例2取索骨丹的块根150g，将其精选、切片、洗净、干燥、粉碎至3-5mm的粒度；用750g量的浓度为70～75％的医用乙醇总萃取，萃取方式为热迥流方式，迥流时间为每次3小时；迥流次数为3次。然后分极性部位用有机溶液萃取，有机溶液可以是氯仿、乙酸乙酯、正丁醇；接着进行活性试验，配合药理筛选，弃去残渣；减压回收溶剂后，提取液浓缩成浸膏；分部位用色谱柱进行色谱分离，柱层析用聚酰胺作填充剂，以正丁醇∶氯仿∶甲酸＝8∶3∶1为洗脱剂，得活性部位的洗脱液，即得到有效活性成分。
权利要求
1.一种索骨丹有效活性成分的提取方法，该方法包括以下步骤a.以索骨丹的块根为原料，将其精选、切片、洗净、干燥、粉碎至20目、10目或3-5mm的粒度；b.用浓度为45-95％有机溶液总萃取，然后分极性部位用有机溶液萃取，接着进行活性试验，配合药理筛选，弃去残渣；其中有机溶液用量为原料量的4-8倍，萃取方式可以为冷浸或热迥流；c.减压回收溶剂后，提取液浓缩成浸膏；d.分部位用色谱柱进行色谱分离，柱层析用聚酰胺或用硅胶作填充剂，以氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸＝5∶4∶0.1或正丁醇∶氯仿∶甲酸＝8∶3∶1为洗脱剂，得活性部位的洗脱液，即得到有效活性成分。
2.根据权利要求1所述的索骨丹有效活性成分的提取方法，其中b步骤中总萃取用的有机溶液可以是浓度为45～60％、70～75％、90～95％的医用乙醇的任何一种；分极性部位萃取用的有机溶液可以是氯仿(丙酮)、乙酸乙酯、正丁醇。
3.根据权利要求1所述的索骨丹有效活性成分的提取方法，其中b步骤中的萃取方式为冷浸，冷浸时间为每次5-9天，萃取次数为3-5次，萃取温度为12-30℃。
4.根据权利要求1所述的索骨丹有效活性成分的提取方法，其中b步骤中的萃取方式为热迥流，迥流时间为每次1-4小时，迥流次数为2-5次。
5.根据权利要求1所述的索骨丹有效活性成分的提取方法，其中b步骤中的萃取方式为热迥流，迥流时间为每次2-4小时，迥流次数为2-3次。
6.索骨丹有效活性成分在制备抗病毒和抑菌灭菌药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种索骨丹有效活性成分的提取方法及索骨丹有效活性成分在制备抗病毒和抑菌灭菌药物中的应用。提取方法包括a.以索骨丹的块根为原料，将其精选、切片、洗净、干燥、粉碎；b.用浓度为45－95％有机溶液萃取，然后分极性部位用有机溶液萃取，进行活性试验，配合药理筛选，弃去残渣；萃取方式可以为冷浸或热迥流。c.减压回收溶剂后，提取液浓缩成浸膏；d.分部位用色谱柱进行色谱分离，柱层析用聚酰胺或用硅胶作填充剂，得活性部位的洗脱液，即得到有效活性成分。将索骨丹的有效活性成分制成药剂，对治疗由柯萨基病毒、单纯疱疹病毒和乙型脑炎病毒所引起的疑难病症，如病毒性心肌炎、腮腺炎、咽峡炎、疱疹性口腔炎等有良好疗效。
文档编号A61P31/04GK1433788SQ0210199
公开日2003年8月6日 申请日期2002年1月24日 优先权日2002年1月24日
发明者郑尚珍 申请人:西北师范大学
技术领域：
本发明涉及一种索骨丹有效活性成分的提取方法及索骨丹有效活性成分在制备抗病毒和抑菌灭菌药物中的应用。
根据世界卫生组织全球病毒监测研究报告显示，柯萨奇病毒在人群中感染最为常见。在新生儿、儿童突发死亡病例中，20％为病毒性心肌炎所致。由于病毒感染后可在心肌中持续存在，目前尚缺乏有效抗病毒手段[1]。《健康报》2001，03，20，蒋明。
现已研究查明，咽峡疱疹(亦称疱疹性咽峡炎)，多为感染柯萨基病毒所致。起病初有头痛，小儿啼哭，身痛，发烧等类似感冒症状，继而发现腹痛，拒食，呕吐等胃肠症状，儿童因此病高烧不退，体质下降，甚至出现惊厥，并发腮腺炎及腮腺炎性脑膜炎，对生命构成威胁[2]。《福建卫生报》2000，09，24金若米。
本发明的另一目的在于提供索骨丹有效活性成分在制备抗病毒和抑菌灭菌药物中的用途。
本发明索骨丹有效活性成分的提取方法，该方法包括以下步骤a.以索骨丹的块根为原料，将其精选、切片、洗净、干燥、粉碎至20目、10目或3-5mm的粒度；b.用浓度为45-95％有机溶液总萃取，其中有机溶液可以是浓度为45～60％、70～75％、90～95％的医用乙醇的任何一种；然后分极性部位用有机溶液萃取，接着进行活性试验，有机溶液可以是氯仿(丙酮)、乙酸乙酯、正丁醇；配合药理筛选，弃去残渣；其中有机溶液用量为原料量的4-8倍，萃取方式可以为冷浸或热迥流。冷浸方式的冷浸时间为每次5-9天，萃取次数为3-5次，萃取温度为12-30℃。热迥流方式的迥流时间为每次1-4小时，优选2-4小时；迥流次数为2-5次，优选2-3次；c.减压回收溶剂后，提取液浓缩成浸膏；d.分部位用色谱柱进行色谱分离，柱层析用聚酰胺或用硅胶作填充剂，以氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸＝5∶4∶0.1或正丁醇∶氯仿∶甲酸＝8∶3∶1为洗脱剂，得活性部位的洗脱液，即得到有效活性成分。
索骨丹有效活性成分，包括1)鬼灯檠甲素；2)鬼灯檠乙素；3)槲皮素；4)熊果甙；5)紫丁香酸；6)没食子酸；7)3-O-没食子酰基-(-)-表儿茶素；8)(3-O-没食子酰基)-表儿茶素-(4β-8)-(3-O-没食子酰基)-表儿茶素；9)1，2，4，6-四-O-3-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖；10)没食子酸甲酯；11)芳樟醇；12)2，6-二羟基苯乙酸甲酯等。
纯中药索骨丹的有效活性成分对柯萨基病毒、疱疹病毒等引起的疑难病症有明显疗效，适宜治疗病毒性心肌炎、咽峡炎、腮腺炎、疱疹性口腔炎和恶性痢疾、乙型肝炎、流行性感冒等，该药疗效显著，服用安全，无毒副作用，增强免疫，克服了现有西药、中成药的缺点。本发明索骨丹的有效活性成分可单独使用，也可将索骨丹中提取的活性成分的流浸膏单独与辅料(如，医用淀粉、乙基纤维素、明胶等)混合均匀、干燥、粉碎、过筛、熟化和灭菌后制成所需的剂型，可治疗由柯萨基病毒、单纯疱疹病毒和乙型脑炎病毒所引起的疑难病症，如病毒性心肌炎、腮腺炎、咽峡炎、疱疹性口腔炎等。还可将其与助剂、辅料科学配伍后，干燥粉碎成100-120目的细粉，在100-110℃温度下进行熟化、灭菌处理10-30分钟，意即可制成胶囊、含片也可制成膏剂，既根据不同的助剂，制出相应的药剂。例如，加一种或数种助剂制成抗病毒、抑菌灭菌制剂，或治乙型肝炎、哮喘、流行性感冒等药剂。所制成的药物具有服用安全，疗效明显，无毒副作用，抗病毒、抑菌灭菌范围广，制备方法简便易行，无环境污染等优点。
索骨丹的有效活性成分药剂中含有丰富的营养成分。在索骨丹中，其总氨基酸的含量为2.01％。已鉴定出18种人体所需的氨基酸，其中有8种为人体所需而又不能自身合成的氨基酸。
索骨丹有效活性成分，还对金黄色葡萄球菌、李斯德杆菌、耶尔森氏菌、变形杆菌、绿浓杆菌、炭疽杆菌、伤寒杆菌、弗氏痢疾杆菌等10余种病菌有强的杀灭作用。此药不仅能杀灭和抑制DNA(HGV单纯疱疹)病毒，而且还能抑灭RNA(柯萨基)病毒，说明此药为广谱性抗病毒药物。此药安全量为192-96mg/Kg，而在含17-34mg/Kg时即能抑灭病毒，同时杀灭病毒后的细胞管的细胞仍能继续分裂传代，说明此药安全有效，毒性小。
用瑞士种小白鼠进行经口灌胃染毒试验，以蒸馏水对照，实验结果表明，索骨丹的有效活性成分经口等量灌胃(0.01ml/g)，其急性经口的半数致死大于12500mg/Kg。按口服毒性分极标准，属于微毒(实际无毒)。此外，试验还表明，对乙肝病毒和流感病毒有100％抑制作用。将索骨丹的有效活性成分制成药剂，对治疗由柯萨基病毒、单纯疱疹病毒和乙型脑炎病毒所引起的疑难病症，如病毒性心肌炎、腮腺炎、咽峡炎、疱疹性口腔炎等，有效率93.7％，优良率86％。
实施例1取索骨丹的块根200g，将其精选、切片、洗净、干燥、粉碎至10目的粒度；用1000g的浓度为45～60％的医用乙醇总萃取，萃取方式为冷浸方式，冷浸时间为每次7天，萃取次数为4次，萃取温度为25℃。然后分极性部位用有机溶液萃取，有机溶液可以是氯仿、乙酸乙酯、正丁醇；接着进行活性试验，配合药理筛选，弃去残渣；减压回收溶剂后，提取液浓缩成浸膏；分部位用色谱柱进行色谱分离，柱层析用硅胶作填充剂，以氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸＝12∶5∶0.1为洗脱剂，得活性部位的洗脱液，即得到有效活性成分。
实施例2取索骨丹的块根150g，将其精选、切片、洗净、干燥、粉碎至3-5mm的粒度；用750g量的浓度为70～75％的医用乙醇总萃取，萃取方式为热迥流方式，迥流时间为每次3小时；迥流次数为3次。然后分极性部位用有机溶液萃取，有机溶液可以是氯仿、乙酸乙酯、正丁醇；接着进行活性试验，配合药理筛选，弃去残渣；减压回收溶剂后，提取液浓缩成浸膏；分部位用色谱柱进行色谱分离，柱层析用聚酰胺作填充剂，以正丁醇∶氯仿∶甲酸＝8∶3∶1为洗脱剂，得活性部位的洗脱液，即得到有效活性成分。
权利要求
1.一种索骨丹有效活性成分的提取方法，该方法包括以下步骤a.以索骨丹的块根为原料，将其精选、切片、洗净、干燥、粉碎至20目、10目或3-5mm的粒度；b.用浓度为45-95％有机溶液总萃取，然后分极性部位用有机溶液萃取，接着进行活性试验，配合药理筛选，弃去残渣；其中有机溶液用量为原料量的4-8倍，萃取方式可以为冷浸或热迥流；c.减压回收溶剂后，提取液浓缩成浸膏；d.分部位用色谱柱进行色谱分离，柱层析用聚酰胺或用硅胶作填充剂，以氯仿∶乙酸乙酯∶甲酸＝5∶4∶0.1或正丁醇∶氯仿∶甲酸＝8∶3∶1为洗脱剂，得活性部位的洗脱液，即得到有效活性成分。
2.根据权利要求1所述的索骨丹有效活性成分的提取方法，其中b步骤中总萃取用的有机溶液可以是浓度为45～60％、70～75％、90～95％的医用乙醇的任何一种；分极性部位萃取用的有机溶液可以是氯仿(丙酮)、乙酸乙酯、正丁醇。
3.根据权利要求1所述的索骨丹有效活性成分的提取方法，其中b步骤中的萃取方式为冷浸，冷浸时间为每次5-9天，萃取次数为3-5次，萃取温度为12-30℃。
4.根据权利要求1所述的索骨丹有效活性成分的提取方法，其中b步骤中的萃取方式为热迥流，迥流时间为每次1-4小时，迥流次数为2-5次。
5.根据权利要求1所述的索骨丹有效活性成分的提取方法，其中b步骤中的萃取方式为热迥流，迥流时间为每次2-4小时，迥流次数为2-3次。
6.索骨丹有效活性成分在制备抗病毒和抑菌灭菌药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种索骨丹有效活性成分的提取方法及索骨丹有效活性成分在制备抗病毒和抑菌灭菌药物中的应用。提取方法包括a.以索骨丹的块根为原料，将其精选、切片、洗净、干燥、粉碎；b.用浓度为45－95％有机溶液萃取，然后分极性部位用有机溶液萃取，进行活性试验，配合药理筛选，弃去残渣；萃取方式可以为冷浸或热迥流。c.减压回收溶剂后，提取液浓缩成浸膏；d.分部位用色谱柱进行色谱分离，柱层析用聚酰胺或用硅胶作填充剂，得活性部位的洗脱液，即得到有效活性成分。将索骨丹的有效活性成分制成药剂，对治疗由柯萨基病毒、单纯疱疹病毒和乙型脑炎病毒所引起的疑难病症，如病毒性心肌炎、腮腺炎、咽峡炎、疱疹性口腔炎等有良好疗效。
文档编号A61P31/04GK1433788SQ0210199
公开日2003年8月6日 申请日期2002年1月24日 优先权日2002年1月24日
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