芫根提取物用于制备减肥降血脂药物的用途的制作方法
专利名称：芫根提取物用于制备减肥降血脂药物的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及的芫根提取物是由以下方法制备的 方法A (1)将芫根原料用5～15倍体积的50～95％乙醇，于40～70℃水浴中，搅拌提取5～15h，过滤，将滤渣重复提取1～4次，合并滤液，减压浓缩至无醇味浸膏； (2)取浸膏溶于40～70℃的热水中，二者体积比为1∶1～2.5； (3)利用D101、AB-8、HPD100或者AS-3型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1～3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5～2ml/min的流速，用1～5倍柱体积的10～95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥，得到芫根提取物，得率为15～30重量％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为1.90～10.1重量％，1.85～3.2重量％，1.48～7.3重量％。
方法B (1)将芫根原料用5～15倍体积的50～95％乙醇，于40～70℃水浴中，以200～500w的超声功率，超声15～30min，反复提取2～5次； (2)将滤液40～70℃减压浓缩成无醇味的浸膏； (3)将浓缩所得的浸膏加少量水溶解，二者体积比为1∶2.5； (4)利用D101、AB-8、HPD100或者AS-3型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1～3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5～2ml/min的流速，用1～5倍柱体积的10～95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥，得到芫根提取物，得率为20～30重量％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为1.95～14.8重量％，1.95～3.16重量％，4.48～10.1重量％。
方法C (1)将芫根原料用10～30倍体积的50～95％乙醇浸泡1～3h； (2)在常压下，以微波功率500～900w，微波辐射20～60s，间歇辐射2～5次，进行微波辅助浸取； (3)过滤收集滤液，将滤液浓缩成无醇味的浸膏； (4)将浓缩所得的浸膏加少量水溶解，二者体积比为1∶2.5； (5)利用D101、AB-8、HPD100或者AS-3型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1～3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5～2ml/min的流速，用1～5倍柱体积的10～95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物，得率为18～30重量％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为1.95～14.5重量％，2.05～4.08重量％，1.51～9.1重量％。
所述制备方法中的芫根原料均为芫根的块根，经切片后自然风干，然后粉碎得到粉状物，粉碎细度达到40～200目； 所述干燥方法为减压真空干燥、冷冻干燥或喷雾干燥。
将芫根提取物制备成剂，该制剂是粉剂、片剂、胶囊、颗粒剂、缓释片、缓释胶囊、滴丸或液体制剂。制剂应用于临床治疗肥胖症、高血脂症及制成含芫根提取物减肥降脂保健品。
本发明用Liebermann反应检测所提的芫根提取物中的皂苷，反应中溶液呈黄→红→蓝→紫→绿色变化，可以确定其含有皂苷类化合物。提取物中皂苷含量的测定是利用苷元与香兰素的硫酸试剂发生的显色反应，产生有色物质，以齐墩果酸为标准品绘制标准曲线，利用紫外分光光度法测定芫根皂苷含量； 本发明用盐酸-镁粉反应检测所提的芫根提取物中的黄酮，泡沫处呈现紫红色；取样品的60％乙醇溶液滴在滤纸上后，与1％AlCl3乙醇溶液反应在可见光下呈现灰黄色，在紫外光下呈现黄色荧光斑点；取样品乙醇的60％溶液滴在滤纸上，用浓氨水熏过后，在紫外光下呈现黄褐色荧光斑点，说明提取物确实含有黄酮类化合物。芫根提取物中黄酮的定量测定是利用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法，以芦丁为标准品绘制标准曲线，利用紫外分光光度法测定芫根提取物含量； 本发明用滴定法测定芫根提取物中有机酸的含量将所提样品0.4g用无水乙醇定容到50ml。在配好溶液中加入2滴酚酞试剂，用0.0749mol/L的氢氧化钠溶液滴定，每1ml氢氧化钠溶液相当于9.916mg水杨酸，总有机酸以水杨酸计。测得芫根提取物中有机酸的含量。
四、具体实施方法 实施例1 采用方法A，将芫根原料用15倍体积的50％乙醇，于70℃水浴中，搅拌提取15h，过滤，将滤渣重复提取1次，合并滤液，减压浓缩至无醇味浸膏。取浸膏溶于70℃的热水中(体积比1∶1.5)。利用HPD100型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5ml/min的流速，用5倍柱体积的20％、60％、95％乙醇分别进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为15.2％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为4.4％，2.5％，5.3％。
实施例2 采用方法A，将芫根原料用10倍体积的80％乙醇，于40℃水浴中，搅拌提取15h，过滤，将滤渣重复提取2次，合并滤液，减压浓缩至无醇味浸膏。取浸膏溶于40℃的热水中(体积比1∶2.5)。利用AB-8、HPD100型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用2倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以2ml/min的流速，用3倍柱体积的10％、40％、70％、95％乙醇分别进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为18.3％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为9.1％，2.2％，6.3％。
实施例3 采用方法A，将芫根原料用5倍体积的95％乙醇，于60℃水浴中，搅拌提取12h，过滤，将滤渣重复提取4次，合并滤液，减压浓缩至无醇味浸膏。取浸膏溶于60℃的热水中(体积比1∶2)。利用D101型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以1ml/min的流速，用5倍柱体积的20％、40％、60％、80％、95％乙醇分别进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为26.8％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为10.1％，3.2％，7.3％。
实施例4 采用方法B，将芫根原料用15倍体积的50％乙醇于70℃，以500w的超声功率，超声15min，反复提取2次。将滤液70℃减压浓缩成无醇味的浸膏。将浓缩所得的浸膏加少量水溶解(体积比1∶2.5)。利用D101型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以2ml/min的流速，用3倍柱体积的20％、60％、95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为20.9％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为4.5％，3.06％，8.9％。
实施例5 采用方法B，将芫根原料用10倍体积的80％乙醇于40℃，以200w的超声功率，超声30min，反复提取3次。将滤液40℃减压浓缩成无醇味的浸膏。将浓缩所得的浸膏加少量水溶解(体积比1∶2.5)。利用HPD100型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5ml/min的流速，用5倍柱体积的10％、40％、70％、95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为22.1％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为14.8％，2.16％，9.9％。
实施例6 采用方法B，将芫根原料用5倍体积的95％乙醇于60℃，以300w的超声功率，超声20min，反复提取5次。将滤液60℃减压浓缩成无醇味的浸膏。将浓缩所得的浸膏加少量水溶解(体积比1∶2.5)。利用D101型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以1ml/min的流速，用5倍柱体积的20％、40％、60％、80％、95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为30％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为14.7％，1.95％，10.1％。
实施例7 将芫根原料用10倍体积的95％乙醇浸泡1h。在常压下，以微波功率700w，微波辐射40s，间歇辐射5次，进行微波辅助浸取。过滤收集滤液，将滤液浓缩成无醇味的浸膏。将浓缩所得的浸膏加少量水溶解(体积比1∶2.5)。利用D101型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5ml/min的流速，用5倍柱体积的20％、40％、60％、80％、95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为26.5％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为11.5％，3.08％，7.1％。
实施例8 将芫根原料用30倍体积的50％乙醇浸泡3h。在常压下，以微波功率500w，微波辐射60s，间歇辐射2次，进行微波辅助浸取。过滤收集滤液，将滤液浓缩成无醇味的浸膏。将浓缩所得的浸膏加少量水溶解(体积比1∶2.5)。利用AS-3型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用2倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以1ml/min的流速，用2倍柱体积的10％、40％、70％、95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为18.5％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为6.4％，4.08％，8.9％。
实施例9 将芫根原料用20倍体积的75％乙醇浸泡2h。在常压下，以微波功率900w，微波辐射20s，间歇辐射5次，进行微波辅助浸取。过滤收集滤液，将滤液浓缩成无醇味的浸膏。将浓缩所得的浸膏加少量水溶解(体积比1∶2.5)。利用D101型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5～2ml/min的流速，用4倍柱体积的10％、40％、70％、95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为18.1％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为11.5％，2.08％，9.1％。
实施例10 片剂取芫根提取物50g，加入50g可压淀粉和40g羧甲基淀粉钠，混合均匀，以70％的乙醇为润湿剂，制软材，18目筛制粒，烘干，16目筛整粒，加入3g硬脂酸镁为润滑剂，混合均匀，压片、包衣，制成1000片包衣片。
实施例11 胶囊取芫根提取物50g，加入80g可压淀粉和20g羧甲基纤维素钠，混合均匀，以70％的乙醇为湿润剂，制软材，24目筛制粒，烘干，20目筛整粒，加入3g硬脂酸镁，混合均匀，装胶囊，制成1000粒胶囊。
实施例12 颗粒剂取芫根提取物100g，加入450g蔗糖粉、100g羧甲基纤维素钠、100g微晶纤维素和50g柠檬酸，混合均匀，以3％PVP为润湿剂制软材，20目筛制粒，烘干，18目筛整粒，分装，制成粒径为830～880μm的1000袋颗粒剂。每袋重0.72～0.78g。
实施例13 粉针剂取芫根提取物12g，羟丙基-p-环糊精135g，加注射用水3L，搅成糊状，再加70℃～85℃的注射用水3L，溶解时温度控制在70℃～85℃，加甘露醇450g溶解，再用1mo L/L盐酸溶液调p H值至5.6，加入针用炭后室温搅拌，过滤脱炭，精滤.滤液按每只2ml进行分装，采用速冻法干燥，将制品取出，进行封口，即得到性状为白色疏松块状物或粉末，即得粉针剂。
实施例14 滴丸将150g聚乙二醇4000在水浴上加热得熔融液，趁热加入芫根提取物50g，搅拌均匀，65℃保温1小时，用滴丸机滴制，滴速120滴/分钟，滴制温度65～75℃，在15℃左右的液体石蜡中冷却，制得丸重约60mg，干燥，包衣，即得滴丸。
实施例15 口服液取蒸馏水适量，加入20g芫根提取物、180g蔗糖粉、20g柠檬酸，搅拌溶解，过滤，滤液补充蒸馏水至10000ml，加入香精适量，搅拌均匀，分装，每支10ml，压盖，100℃消毒1小时，检查合格，即得口服液。
实施例16 粉剂取芫根提取物30g，粉碎成粒径为20μm粉状物，加入500g蔗糖粉、100g羧甲基纤维素钠、100g微晶纤维素混合均匀，分装，制成1000袋粉剂。每袋重0.68～0.73g。添加量为食品或饲料的0.01～1％。
将上述制备实施例6所得的芫根提取物进行如下效果实验 1、营养性肥胖大鼠检测芫根提取物减肥降血脂活性实验 SD大鼠60只(80±20g)随机分为6组，除空白组喂食基础饲料以外，每组均给予等量高脂饲料，每只每天20g。4周以后测得体重高于空白组15％，开始灌胃。实验组每天分别灌胃400mg/kg·d、800mg/kg·d、1600mg/kg·d芫根提取物。空白组、高脂组灌以等量蒸馏水，阳性对照组灌以盐酸西布曲明2.5mg/kg·d。给药3周之后检测大鼠体重、身长，计算lee’s指数，眼眶静脉丛采血，用试剂盒测血清中总胆固醇TC、甘油三酯TG、高密度脂蛋白HDL-c、低密度脂蛋白LDL-c值。处死后解剖检测大鼠睾丸脂肪湿重。结果见表1、表2、表3、表4。
表1.芫根提取物对大鼠体重、身长和lee’s指数的影响
*表示与高脂组比较，0.01＜p＜0.05，**表示与高脂组比较p＜0.01 表2、芫根提取物对大鼠睾丸周围脂肪湿重及其脂肪系数的影响
*表示与高脂组比较，0.01＜p＜0.05，**表示与高脂组比较p＜0.01 表3、大鼠血清总胆固醇TC、甘油三酯TG TC mmol/l TG mmol/l 空白组 1.881±0.095**0.557±0.043** 高脂组 3.645±0.335 0.988±0.174 阳性对照2.335±0.112**0.976±0.202 400mg/kg·d 3.557±0.346 0.701±0.033* 800mg/kg·d 3.625±0.459 0.903±0.431 1600mg/kg·d2.225±0.072**0.667±0.094* *表示与高脂组比较，0.01＜p＜0.05，**表示与高脂组比较p＜0.01 表4.大鼠血清高密度脂蛋白HDL-c、低密度脂蛋白LDL-c HDL-C mmol/l LDL-C mmol/l 空白组 0.662±0.112**2.262±0.152* 高脂组 0.456±0.123 3.109±0.656 阳性对照 0.678±0.012**2.156±0.134* 400mg/kg·d0.712±0.092**2.112±0.092* 800mg/kg·d0.683±0.025**2.301±0.108* 1600mg/kg·d 0.669±0.013**2.171±0.097* *表示与高脂组比较，0.01＜p＜0.05，**表示与高脂组比较p＜0.01 上述实验结果表明，本发明的芫根提取物在高剂量显示出显著的减肥降血脂活性。可利用芫根提取物制备药物或者保健食品用于预防或者治疗肥胖症及高血脂症。
本发明的芫根提取物的制备方法和用途已经通过具体的实例进行了描述，本领域技术人员可借鉴本发明内容，适当改变原料、工艺条件等环节来实现相应的其它目的，其相关改变都没有脱离本发明的内容，所有类似的替换和改动对于本领域技术人员来说是显而易见的，都被视为包括在本发明的范围之内。
权利要求
1.按照如下方法经醇提取的芫根提取物用于制备减肥降血脂药物的用途
(1)将芫根原料用5～15倍体积的50～95％乙醇，于40～70℃水浴中，搅拌提取5～15h，过滤，将滤渣重复提取1～4次，合并滤液，减压浓缩至无醇味浸膏；
(2)取浸膏溶于40～70℃的热水中，二者体积比为1∶1～2.5；
(3)利用D101、AB-8、HPD100或者AS-3型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1～3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5～2ml/min的流速，用1～5倍柱体积的10～95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥，得到芫根提取物，得率为15～30重量％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为1.90～10.1重量％，1.85～3.2重量％，1.48～7.3重量％。
2.按照如下方法经醇提取的芫根提取物用于制备减肥降血脂药物的用途
(1)将芫根原料用5～15倍体积的50～95％乙醇，于40～70℃水浴中，以200～500w的超声功率，超声15～30min，反复提取2～5次；
(2)将滤液40～70℃减压浓缩成无醇味的浸膏；
(3)将浓缩所得的浸膏加少量水溶解，二者体积比为1∶2.5；
(4)利用D101、AB-8、HPD100或者AS-3型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1～3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5～2ml/min的流速，用1～5倍柱体积的10～95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥，得到芫根提取物，得率为20～30重量％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为1.95～14.8重量％，1.95～3.16重量％，4.48～10.1重量％。
3.按照如下方法经醇提取的芫根提取物用于制备减肥降血脂药物的用途
(1)将芫根原料用10～30倍体积的50～95％乙醇浸泡1～3h；
(2)在常压下，以微波功率500～900w，微波辐射20～60s，间歇辐射2～5次，进行微波辅助浸取；
(3)过滤收集滤液，将滤液浓缩成无醇味的浸膏；
(4)将浓缩所得的浸膏加少量水溶解，二者体积比为1∶2.5；
(5)利用D101、AB-8、HPD100或者AS-3型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1～3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5～2ml/min的流速，用1～5倍柱体积的10～95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物，得率为18～30重量％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为1.95～14.5重量％，2.05～4.08重量％，1.51～9.1重量％。
4.根据权利要求1至3任一所述的用途，其特征在于将所制得的芫根提取物用于制备降低血清中TC、TG和LDL-C含量并升高HDL-C含量的药物。
全文摘要
本发明涉及从芫根植株中提取得到的提取物制备减肥降血脂药物的用途，尤其是减少体重，达到减肥的目的，同时还能降低曲青中TC、TG和LDL-C含量并升高HDL-C水平含量。
文档编号A61P3/06GK101810663SQ20101017803
公开日2010年8月25日 申请日期2010年5月20日 优先权日2010年5月20日
发明者蒋思萍, 高平 申请人:西藏自治区高原生物研究所
技术领域：
本发明涉及的芫根提取物是由以下方法制备的 方法A (1)将芫根原料用5～15倍体积的50～95％乙醇，于40～70℃水浴中，搅拌提取5～15h，过滤，将滤渣重复提取1～4次，合并滤液，减压浓缩至无醇味浸膏； (2)取浸膏溶于40～70℃的热水中，二者体积比为1∶1～2.5； (3)利用D101、AB-8、HPD100或者AS-3型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1～3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5～2ml/min的流速，用1～5倍柱体积的10～95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥，得到芫根提取物，得率为15～30重量％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为1.90～10.1重量％，1.85～3.2重量％，1.48～7.3重量％。
方法B (1)将芫根原料用5～15倍体积的50～95％乙醇，于40～70℃水浴中，以200～500w的超声功率，超声15～30min，反复提取2～5次； (2)将滤液40～70℃减压浓缩成无醇味的浸膏； (3)将浓缩所得的浸膏加少量水溶解，二者体积比为1∶2.5； (4)利用D101、AB-8、HPD100或者AS-3型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1～3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5～2ml/min的流速，用1～5倍柱体积的10～95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥，得到芫根提取物，得率为20～30重量％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为1.95～14.8重量％，1.95～3.16重量％，4.48～10.1重量％。
方法C (1)将芫根原料用10～30倍体积的50～95％乙醇浸泡1～3h； (2)在常压下，以微波功率500～900w，微波辐射20～60s，间歇辐射2～5次，进行微波辅助浸取； (3)过滤收集滤液，将滤液浓缩成无醇味的浸膏； (4)将浓缩所得的浸膏加少量水溶解，二者体积比为1∶2.5； (5)利用D101、AB-8、HPD100或者AS-3型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1～3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5～2ml/min的流速，用1～5倍柱体积的10～95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物，得率为18～30重量％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为1.95～14.5重量％，2.05～4.08重量％，1.51～9.1重量％。
所述制备方法中的芫根原料均为芫根的块根，经切片后自然风干，然后粉碎得到粉状物，粉碎细度达到40～200目； 所述干燥方法为减压真空干燥、冷冻干燥或喷雾干燥。
将芫根提取物制备成剂，该制剂是粉剂、片剂、胶囊、颗粒剂、缓释片、缓释胶囊、滴丸或液体制剂。制剂应用于临床治疗肥胖症、高血脂症及制成含芫根提取物减肥降脂保健品。
本发明用Liebermann反应检测所提的芫根提取物中的皂苷，反应中溶液呈黄→红→蓝→紫→绿色变化，可以确定其含有皂苷类化合物。提取物中皂苷含量的测定是利用苷元与香兰素的硫酸试剂发生的显色反应，产生有色物质，以齐墩果酸为标准品绘制标准曲线，利用紫外分光光度法测定芫根皂苷含量； 本发明用盐酸-镁粉反应检测所提的芫根提取物中的黄酮，泡沫处呈现紫红色；取样品的60％乙醇溶液滴在滤纸上后，与1％AlCl3乙醇溶液反应在可见光下呈现灰黄色，在紫外光下呈现黄色荧光斑点；取样品乙醇的60％溶液滴在滤纸上，用浓氨水熏过后，在紫外光下呈现黄褐色荧光斑点，说明提取物确实含有黄酮类化合物。芫根提取物中黄酮的定量测定是利用亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠比色法，以芦丁为标准品绘制标准曲线，利用紫外分光光度法测定芫根提取物含量； 本发明用滴定法测定芫根提取物中有机酸的含量将所提样品0.4g用无水乙醇定容到50ml。在配好溶液中加入2滴酚酞试剂，用0.0749mol/L的氢氧化钠溶液滴定，每1ml氢氧化钠溶液相当于9.916mg水杨酸，总有机酸以水杨酸计。测得芫根提取物中有机酸的含量。
四、具体实施方法 实施例1 采用方法A，将芫根原料用15倍体积的50％乙醇，于70℃水浴中，搅拌提取15h，过滤，将滤渣重复提取1次，合并滤液，减压浓缩至无醇味浸膏。取浸膏溶于70℃的热水中(体积比1∶1.5)。利用HPD100型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5ml/min的流速，用5倍柱体积的20％、60％、95％乙醇分别进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为15.2％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为4.4％，2.5％，5.3％。
实施例2 采用方法A，将芫根原料用10倍体积的80％乙醇，于40℃水浴中，搅拌提取15h，过滤，将滤渣重复提取2次，合并滤液，减压浓缩至无醇味浸膏。取浸膏溶于40℃的热水中(体积比1∶2.5)。利用AB-8、HPD100型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用2倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以2ml/min的流速，用3倍柱体积的10％、40％、70％、95％乙醇分别进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为18.3％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为9.1％，2.2％，6.3％。
实施例3 采用方法A，将芫根原料用5倍体积的95％乙醇，于60℃水浴中，搅拌提取12h，过滤，将滤渣重复提取4次，合并滤液，减压浓缩至无醇味浸膏。取浸膏溶于60℃的热水中(体积比1∶2)。利用D101型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以1ml/min的流速，用5倍柱体积的20％、40％、60％、80％、95％乙醇分别进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为26.8％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为10.1％，3.2％，7.3％。
实施例4 采用方法B，将芫根原料用15倍体积的50％乙醇于70℃，以500w的超声功率，超声15min，反复提取2次。将滤液70℃减压浓缩成无醇味的浸膏。将浓缩所得的浸膏加少量水溶解(体积比1∶2.5)。利用D101型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以2ml/min的流速，用3倍柱体积的20％、60％、95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为20.9％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为4.5％，3.06％，8.9％。
实施例5 采用方法B，将芫根原料用10倍体积的80％乙醇于40℃，以200w的超声功率，超声30min，反复提取3次。将滤液40℃减压浓缩成无醇味的浸膏。将浓缩所得的浸膏加少量水溶解(体积比1∶2.5)。利用HPD100型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5ml/min的流速，用5倍柱体积的10％、40％、70％、95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为22.1％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为14.8％，2.16％，9.9％。
实施例6 采用方法B，将芫根原料用5倍体积的95％乙醇于60℃，以300w的超声功率，超声20min，反复提取5次。将滤液60℃减压浓缩成无醇味的浸膏。将浓缩所得的浸膏加少量水溶解(体积比1∶2.5)。利用D101型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以1ml/min的流速，用5倍柱体积的20％、40％、60％、80％、95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为30％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为14.7％，1.95％，10.1％。
实施例7 将芫根原料用10倍体积的95％乙醇浸泡1h。在常压下，以微波功率700w，微波辐射40s，间歇辐射5次，进行微波辅助浸取。过滤收集滤液，将滤液浓缩成无醇味的浸膏。将浓缩所得的浸膏加少量水溶解(体积比1∶2.5)。利用D101型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5ml/min的流速，用5倍柱体积的20％、40％、60％、80％、95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为26.5％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为11.5％，3.08％，7.1％。
实施例8 将芫根原料用30倍体积的50％乙醇浸泡3h。在常压下，以微波功率500w，微波辐射60s，间歇辐射2次，进行微波辅助浸取。过滤收集滤液，将滤液浓缩成无醇味的浸膏。将浓缩所得的浸膏加少量水溶解(体积比1∶2.5)。利用AS-3型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用2倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以1ml/min的流速，用2倍柱体积的10％、40％、70％、95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为18.5％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为6.4％，4.08％，8.9％。
实施例9 将芫根原料用20倍体积的75％乙醇浸泡2h。在常压下，以微波功率900w，微波辐射20s，间歇辐射5次，进行微波辅助浸取。过滤收集滤液，将滤液浓缩成无醇味的浸膏。将浓缩所得的浸膏加少量水溶解(体积比1∶2.5)。利用D101型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5～2ml/min的流速，用4倍柱体积的10％、40％、70％、95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物。得率为18.1％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为11.5％，2.08％，9.1％。
实施例10 片剂取芫根提取物50g，加入50g可压淀粉和40g羧甲基淀粉钠，混合均匀，以70％的乙醇为润湿剂，制软材，18目筛制粒，烘干，16目筛整粒，加入3g硬脂酸镁为润滑剂，混合均匀，压片、包衣，制成1000片包衣片。
实施例11 胶囊取芫根提取物50g，加入80g可压淀粉和20g羧甲基纤维素钠，混合均匀，以70％的乙醇为湿润剂，制软材，24目筛制粒，烘干，20目筛整粒，加入3g硬脂酸镁，混合均匀，装胶囊，制成1000粒胶囊。
实施例12 颗粒剂取芫根提取物100g，加入450g蔗糖粉、100g羧甲基纤维素钠、100g微晶纤维素和50g柠檬酸，混合均匀，以3％PVP为润湿剂制软材，20目筛制粒，烘干，18目筛整粒，分装，制成粒径为830～880μm的1000袋颗粒剂。每袋重0.72～0.78g。
实施例13 粉针剂取芫根提取物12g，羟丙基-p-环糊精135g，加注射用水3L，搅成糊状，再加70℃～85℃的注射用水3L，溶解时温度控制在70℃～85℃，加甘露醇450g溶解，再用1mo L/L盐酸溶液调p H值至5.6，加入针用炭后室温搅拌，过滤脱炭，精滤.滤液按每只2ml进行分装，采用速冻法干燥，将制品取出，进行封口，即得到性状为白色疏松块状物或粉末，即得粉针剂。
实施例14 滴丸将150g聚乙二醇4000在水浴上加热得熔融液，趁热加入芫根提取物50g，搅拌均匀，65℃保温1小时，用滴丸机滴制，滴速120滴/分钟，滴制温度65～75℃，在15℃左右的液体石蜡中冷却，制得丸重约60mg，干燥，包衣，即得滴丸。
实施例15 口服液取蒸馏水适量，加入20g芫根提取物、180g蔗糖粉、20g柠檬酸，搅拌溶解，过滤，滤液补充蒸馏水至10000ml，加入香精适量，搅拌均匀，分装，每支10ml，压盖，100℃消毒1小时，检查合格，即得口服液。
实施例16 粉剂取芫根提取物30g，粉碎成粒径为20μm粉状物，加入500g蔗糖粉、100g羧甲基纤维素钠、100g微晶纤维素混合均匀，分装，制成1000袋粉剂。每袋重0.68～0.73g。添加量为食品或饲料的0.01～1％。
将上述制备实施例6所得的芫根提取物进行如下效果实验 1、营养性肥胖大鼠检测芫根提取物减肥降血脂活性实验 SD大鼠60只(80±20g)随机分为6组，除空白组喂食基础饲料以外，每组均给予等量高脂饲料，每只每天20g。4周以后测得体重高于空白组15％，开始灌胃。实验组每天分别灌胃400mg/kg·d、800mg/kg·d、1600mg/kg·d芫根提取物。空白组、高脂组灌以等量蒸馏水，阳性对照组灌以盐酸西布曲明2.5mg/kg·d。给药3周之后检测大鼠体重、身长，计算lee’s指数，眼眶静脉丛采血，用试剂盒测血清中总胆固醇TC、甘油三酯TG、高密度脂蛋白HDL-c、低密度脂蛋白LDL-c值。处死后解剖检测大鼠睾丸脂肪湿重。结果见表1、表2、表3、表4。
表1.芫根提取物对大鼠体重、身长和lee’s指数的影响
*表示与高脂组比较，0.01＜p＜0.05，**表示与高脂组比较p＜0.01 表2、芫根提取物对大鼠睾丸周围脂肪湿重及其脂肪系数的影响
*表示与高脂组比较，0.01＜p＜0.05，**表示与高脂组比较p＜0.01 表3、大鼠血清总胆固醇TC、甘油三酯TG TC mmol/l TG mmol/l 空白组 1.881±0.095**0.557±0.043** 高脂组 3.645±0.335 0.988±0.174 阳性对照2.335±0.112**0.976±0.202 400mg/kg·d 3.557±0.346 0.701±0.033* 800mg/kg·d 3.625±0.459 0.903±0.431 1600mg/kg·d2.225±0.072**0.667±0.094* *表示与高脂组比较，0.01＜p＜0.05，**表示与高脂组比较p＜0.01 表4.大鼠血清高密度脂蛋白HDL-c、低密度脂蛋白LDL-c HDL-C mmol/l LDL-C mmol/l 空白组 0.662±0.112**2.262±0.152* 高脂组 0.456±0.123 3.109±0.656 阳性对照 0.678±0.012**2.156±0.134* 400mg/kg·d0.712±0.092**2.112±0.092* 800mg/kg·d0.683±0.025**2.301±0.108* 1600mg/kg·d 0.669±0.013**2.171±0.097* *表示与高脂组比较，0.01＜p＜0.05，**表示与高脂组比较p＜0.01 上述实验结果表明，本发明的芫根提取物在高剂量显示出显著的减肥降血脂活性。可利用芫根提取物制备药物或者保健食品用于预防或者治疗肥胖症及高血脂症。
本发明的芫根提取物的制备方法和用途已经通过具体的实例进行了描述，本领域技术人员可借鉴本发明内容，适当改变原料、工艺条件等环节来实现相应的其它目的，其相关改变都没有脱离本发明的内容，所有类似的替换和改动对于本领域技术人员来说是显而易见的，都被视为包括在本发明的范围之内。
权利要求
1.按照如下方法经醇提取的芫根提取物用于制备减肥降血脂药物的用途
(1)将芫根原料用5～15倍体积的50～95％乙醇，于40～70℃水浴中，搅拌提取5～15h，过滤，将滤渣重复提取1～4次，合并滤液，减压浓缩至无醇味浸膏；
(2)取浸膏溶于40～70℃的热水中，二者体积比为1∶1～2.5；
(3)利用D101、AB-8、HPD100或者AS-3型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1～3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5～2ml/min的流速，用1～5倍柱体积的10～95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥，得到芫根提取物，得率为15～30重量％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为1.90～10.1重量％，1.85～3.2重量％，1.48～7.3重量％。
2.按照如下方法经醇提取的芫根提取物用于制备减肥降血脂药物的用途
(1)将芫根原料用5～15倍体积的50～95％乙醇，于40～70℃水浴中，以200～500w的超声功率，超声15～30min，反复提取2～5次；
(2)将滤液40～70℃减压浓缩成无醇味的浸膏；
(3)将浓缩所得的浸膏加少量水溶解，二者体积比为1∶2.5；
(4)利用D101、AB-8、HPD100或者AS-3型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1～3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5～2ml/min的流速，用1～5倍柱体积的10～95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥，得到芫根提取物，得率为20～30重量％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为1.95～14.8重量％，1.95～3.16重量％，4.48～10.1重量％。
3.按照如下方法经醇提取的芫根提取物用于制备减肥降血脂药物的用途
(1)将芫根原料用10～30倍体积的50～95％乙醇浸泡1～3h；
(2)在常压下，以微波功率500～900w，微波辐射20～60s，间歇辐射2～5次，进行微波辅助浸取；
(3)过滤收集滤液，将滤液浓缩成无醇味的浸膏；
(4)将浓缩所得的浸膏加少量水溶解，二者体积比为1∶2.5；
(5)利用D101、AB-8、HPD100或者AS-3型大孔吸附树脂吸附浸膏水溶液，先用1～3倍柱体积的水洗去极性较大的杂质，再以0.5～2ml/min的流速，用1～5倍柱体积的10～95％乙醇进行梯度洗脱，收集、合并各段洗脱液，浓缩、干燥。得到芫根提取物，得率为18～30重量％，其中皂苷、黄酮、有机酸的含量分别为1.95～14.5重量％，2.05～4.08重量％，1.51～9.1重量％。
4.根据权利要求1至3任一所述的用途，其特征在于将所制得的芫根提取物用于制备降低血清中TC、TG和LDL-C含量并升高HDL-C含量的药物。
全文摘要
本发明涉及从芫根植株中提取得到的提取物制备减肥降血脂药物的用途，尤其是减少体重，达到减肥的目的，同时还能降低曲青中TC、TG和LDL-C含量并升高HDL-C水平含量。
文档编号A61P3/06GK101810663SQ20101017803
公开日2010年8月25日 申请日期2010年5月20日 优先权日2010年5月20日
发明者蒋思萍, 高平 申请人:西藏自治区高原生物研究所
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