一种从乌头药材中提取生物碱的方法

专利名称：：一种从乌头药材中提取生物碱的方法
技术领域：
：本发明涉及一种植物化学成分的提取方法，更具体的说涉及一种从乌头药材中提取生物碱的方法。
背景技术：
：在我国，毛茛科乌头属植物较多，重点分布在西南横断山区四川西部，西藏东部和云南省北部的高山地带，是我国极其重要的药用植物资源之一，因其具有较高药用价值而备受广泛关注。生物碱是一类碱性含氮化合物，在自然界中大多以盐的形式存在，现有对生物碱的常用提取方法主要是大孔树脂提取和离子交换提取方法。但是，离子交换脂用于川乌双酯型生物碱的交换率较低。可能因双酯型生物碱为弱极性生物碱，而交换树脂为强酸性阳离子交换树脂，对其吸附能力很弱，难以被阳离子交换树脂吸附。大孔吸附树脂虽对生物碱的吸附性较好，能起到一定除杂和富集作用，但大孔树脂吸附保留的成分复杂，性质也相似，对于进一步的分离纯化仍有较大困难，且大孔树脂的预处理和再生也较繁锁，不利于企业的大生产。
发明内容为了解决上述问题，本发明提供了一种从乌头药材中提取生物碱的方法，包括药材提取和精制，其特征在于精制包括以下步骤1)将从药材提取步骤中得到的生物碱提取溶液调pH^10，析出白色生物碱悬浮物，得到碱化液；2)用二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、苯、乙醚或乙酸乙酯中的至少一种作为溶剂萃取碱化液，得到有机相；3)用pH彡4.0的水萃取有机相，得到酸性水相；4)向酸性水相中加入碱性水溶液产生白色沉淀；5)过滤出白色沉淀，用二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、丙酮、苯、无水乙醇、乙醚或甲醇中的一种或一种以上混合的溶剂溶解，过滤出不溶物，回收有机溶剂至干得到白色物质；6)用二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、丙酮、苯、无水乙醇、乙醚或甲醇中的一种或一种以上混合的溶剂重结晶白色物质，得到乌头碱纯品。药材提取包括以下步骤1)将乌头药材碱化，游离出生物碱；2)用二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、苯、无水乙醇或乙醚中的一种或一种以上混合的溶剂浸泡提取、渗漉提取或回流提取；3)过滤并回收有机溶剂得到生物碱提取溶液；或者1)将乌头药材碱化，游离出生物碱；2)用乙醇或苯中的一种进行渗漉；3)接收溶媒，回收有机溶剂得到生物碱的提取溶液；或者1)将乌头药材加酸，使生物碱成盐；2)用pH彡4.0的水进行渗漉；3)接收溶媒，浓缩得到生物碱的提取溶液。本发明的有益技术效果是本发明工艺简单，生物碱转移率高；与大孔吸附树脂法提取和离子交换树脂法提取，具有使用酸碱性水溶液的量较小，减少了环境污染的优点。具体实施例方式实施例1称取Ig的川乌药材，精密称定三份，分别置于三个三角瓶中。用适量氨水碱化要放置过夜，再分别用三氯甲烷、乙醚、乙醇浸提24小时，过滤，用相应溶剂进行少量多次洗涤，与滤液合并，低温减压浓缩至适量，分别用无水乙醇溶解并定容于IOml量瓶中，用0.45μm微孔滤膜过滤，注入液色谱仪。测得中乌头碱含量结果见表1。表1川乌中乌头碱含量结果提取方法乌头碱(mg/g)「0071~乙醚提取6^20乙醇提取6.84三氯甲烷提取_6.50实施例2称取Ig的川乌药材四份，精密称定四份，分别置于四个三角瓶中。先用氨水碱化，放置过夜，加入浓度分别为60%、70%、80%和90%的乙醇50ml，称定重量，超声提取30min，冷却后再称定重量，用相应浓度的乙醇补足减失的重量。吸取澄清液用0.45μπι微孔滤膜过滤，注入液色谱仪。测定药材中乌头碱的含量，结果见表2。表2不同浓度乙醇提取多根乌头考察结果—乙醇浓度乌头碱(mg/g)~60%5Π\70%6.1080%6.6390%_410_实施例3根据双酯型生物碱易溶于三氯甲烷、苯、乙醇等的性质。选用高浓度乙醇作为提取溶媒回流提取。称取川乌粗粉500g，置于5000ml烧瓶中加入95%乙醇进行浸泡2小时，回流三次，加醇量分别为药材体积的8倍、6倍、6倍，回流时间分别为2小时、1小时、1小时，过滤，分别收集上述醇提液，减压回收乙醇得浸膏。此法浸膏得率较大，达15%以上，总碱提取率为85%左右。实施例4双酯型生物碱脂溶性较大，易溶于有机溶剂难溶于水，其与酸生成盐后，却易溶于水，根据此性质，设计了酸水渗滤、乙醇渗滤、苯渗滤提取方法。其结果见表3。表3各种渗漉法筛选结果<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>由上表可知，80%乙醇渗滤时双酯型生物碱的转移率较高。低浓度和高浓度乙醇提取转移率低，确定用80%乙醇作为溶媒。选用该浓度的乙醇进行提取时，双酯型生物的转移率较高，提取较完全，而且渗漉法提取杂质较少，更有利于下一步的精制、分离与纯化。实施例5称取IOOOg的川乌药材，采用实施例1-4所述方法得到生物碱水混合溶液，加入浓氨水，调10，产生白色悬浮物，用IOOOml苯萃取三次，合并苯层萃取液，减压回收苯，得苯萃取物。苯萃取物用IOOOml2%盐酸溶液萃取三次，用浓氨水碱化上述酸水溶液，产生白色沉淀。用丙酮溶解上述沉淀，并滤去不溶性物质，回收丙酮溶剂后，再用乙酸乙酯进行结晶，收集晶体。然后用95%乙醇进行重结晶，得到精制乌头碱结晶65g。权利要求一种从乌头药材中提取生物碱的方法，包括药材提取和精制，其特征在于精制包括以下步骤1)将从药材提取步骤中得到的生物碱提取溶液调pH≥10，析出白色生物碱悬浮物，得到碱化液；2)用二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、苯、乙醚或乙酸乙酯中的至少一种作为溶剂萃取碱化液，得到有机相；3)用pH≤4.0的水萃取有机相，得到酸性水相；4)向酸性水相中加入碱性水溶液产生白色沉淀；5)过滤出白色沉淀，用二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、丙酮、苯、无水乙醇、乙醚或甲醇中的一种或一种以上混合的溶剂溶解，过滤出不溶物，回收有机溶剂至干得到白色物质；6)用二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、丙酮、苯、无水乙醇、乙醚或甲醇中的一种或一种以上混合的溶剂重结晶白色物质，得到乌头碱纯品。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于药材提取包括以下步骤1)将乌头药材碱化，游离出生物碱；2)用二氯甲烷、三氯甲烷、四氯甲烷、苯、无水乙醇或乙醚中的一种或一种以上混合的溶剂浸泡提取、渗漉提取或回流提取；3)过滤并回收有机溶剂得到生物碱提取溶液；或者1)将乌头药材碱化，游离出生物碱；2)用乙醇或苯中的一种进行渗漉；3)接收溶媒，回收有机溶剂得到生物碱的提取溶液；或者1)将乌头药材加酸，使生物碱成盐；2)用pH≤4.0的水进行渗漉；3)接收溶媒，浓缩得到生物碱的提取溶液。全文摘要本发明公开一种从乌头药材中提取生物碱的方法，包括药材提取和精制；本发明工艺简单，生物碱转移率高；与大孔吸附树脂法提取和离子交换树脂法提取，具有使用酸碱性水溶液的量较小，减少了环境污染的优点。文档编号A61K36/714GK101829201SQ20101017610公开日2010年9月15日申请日期2010年5月19日优先权日2010年5月19日发明者张毅,罗维早,翁代群,覃瑶,阳勇申请人:重庆市中药研究院