一种神衰果素脂质体的制备方法
专利名称：一种神衰果素脂质体的制备方法
技术领域：
本发明涉及一种神衰果素脂质体的制备方法。属医药技术领域。
背景技术：
神衰果素，又名豆腐果苷，化学名为对甲醛苯-O-β -D-阿洛吡喃糖苷，是从植物 深绿山龙眼中提取的有效成分，具有催眠镇静、抗惊厥、镇痛抗炎、抗抑郁的作用。目前，有 关神衰果素制剂的报道有软胶囊、片剂等，如“豆腐果苷软胶囊及其制备方法”(中国发明专 利申请号=03117667. 4，公开号CN1535690)，“一种神衰果素速释片剂及其制备方法”(中 国发明专利申请号03140524.X，公开号CN1454600)和“一种豆腐果苷口腔崩解片”(中国 发明专利申请号CN200410062280. 5，公开号CN1586494)。由于神衰果素的水溶性相对较 差，因此，这些神衰果素制剂中大多存在生物利用度不高、细胞相似性以及组织相容性差等 缺点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种神衰果素脂质体的制备方法。用本发明制备的神衰果 素脂质体适合经口给药，对机体无毒或毒副作用小，细胞亲和性和组织相容性好，可以增加 药物在体内吸收，改善药物释放性质，提高药物生物利用度。为了达到上述目的，本发明对脂质体进行认真研究发现脂质体是磷脂分散在水 中形成的一个类球状的、包封一部分水相的封闭囊泡，这些磷脂中含有两条疏水性脂肪酸 和一个亲水性头基，当与水面接触时，磷脂形成双分子层结构。这种双分子层结构中既有亲 水基团又有疏水基团，因此，脂质体的亲水基团夹层可以包封水溶性药物，而疏水基团的夹 层可以包封脂溶性药物。脂质体不仅易于体内降解、无毒性和无免疫原性，而且具有细胞亲 和性和组织相容性，作为药物载体时可以增加药物在体内吸收，改善药物释放性质，提高了 药物生物利用度。为此，本发明通过实验找到了神衰果素脂质体的制备工艺，具体工艺如 下先按神衰果素pH值为6 8的磷酸缓冲溶液=1 300 20000质量比称取， 混合均勻后得到神衰果素的磷酸缓冲溶液。再按胆固醇蛋黄卵磷脂大豆卵磷脂无水 乙醇=1 0.2 2. 5 0. 1 1 100 800质量比量取，混合均勻，于旋转蒸发器上蒸 馏除去乙醇，制得脂质干膜；用乙醚溶解脂质干膜，然后加入神衰果素的磷酸缓冲溶液，其 中乙醚与胆固醇的质量比为300 3000 1，神衰果素的磷酸缓冲溶液与胆固醇的质量比 为100 1500 1，超声5 60min，10 20°C旋转蒸发除去乙醚，最后在20 50°C水浴 中继续旋转1 2h，制得神衰果素脂质体。上述的pH值为6 8的磷酸缓冲溶液的配置是，先称取市售 的31. 2g分析纯 NaH2PO4 · 2H20，用蒸馏水定容至1L，搅拌，得到摩尔浓度为0. 2mol/L NaH2PO4溶液；再称取 71. 6g市售的分析纯Na2HPO4 · 12H20，用蒸馏水定容至1L，搅拌，得到摩尔浓度为0. 2mol/L Na2HPO4溶液；接着，称取5. 3 87. 7mL的上述配置好的0. 2mol/L NaH2PO4溶液和12. 3 94. 7mL的上述配置好的0. 2mol/L Na2HPO4溶液混合均勻而成。本发明具有以下优点1.本发明制备的神衰果素脂质体，具有良好的细胞亲和性和生物相容性，与神衰 果素软胶囊等相比，可以增加药物在体内吸收，改善药物释放性质，提高药物生物利用度。2.由于本发明所用主要原料为蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂，因此，制得的神衰果素脂 质体易于体内降解，对机体无毒或毒副作用小，无免疫原性。3.由于本发明在制备脂质体过程中加入大豆卵磷脂，大豆卵磷脂具有较高的氧化 指数，避免了蛋黄卵磷脂在体内外的过氧化而产生毒副作用，提高了神衰果素脂质体的稳 定性。4.本发明制备工艺简单，药物损失较少，具有良好的应用前景。
具体实施例方式实施例1称取市售的神衰果素(纯度大于99% )0. 04g，溶于80g的pH = 7. 4的磷酸缓冲 溶液中得到神衰果素的磷酸缓冲溶液。pH = 7. 4的磷酸缓冲溶液的制备是先称取市售的 31. 2g分析纯NaH2PO4 ·2Η20，再用蒸馏水定容至1L，搅拌，得到摩尔浓度为0. 2mol/LNaH2PO4。 再称取71. 6g市售的分析纯Na2HPO4 · 12H20，用蒸馏水定容至1L，搅拌，得到摩尔浓度为 0. 2mol/L的Na2HPO4溶液，然后，称取19. OmL上述配置好的0. 2mol/L NaH2PO4和81. OmL上 述配置的0. 2mol/L Na2HPO4,两者混合。称取分析纯的胆固醇0.02g，生物纯的蛋黄卵磷脂0.02g，梯希爱(上海)化成工 业发展有限公司生产的大豆卵磷脂0. 005g，溶于4g市售的无水乙醇中，于旋转蒸发器上蒸 馏除去乙醇，制得脂质干膜。用35g分析纯乙醚溶解脂质干膜，然后加入5g上述已经配制 的神衰果素的磷酸缓冲溶液，超声5min，15°C旋转蒸发除去乙醚，最后在20°C水浴中继续 旋转孵化2h，制得神衰果素脂质体。实施例2称取神衰果素0. 25g，溶于75g的pH = 8的磷酸缓冲溶液中。称取胆固醇0. 09g, 蛋黄卵磷脂0. 03g,大豆卵磷脂0. 03g,溶于9g无水乙醇中，于旋转蒸发器上蒸馏除去乙醇， 制得脂质干膜。用27g乙醚溶解脂质干膜，然后加入9g预先配制的神衰果素的磷酸缓冲溶 液，超声30min，2(TC旋转蒸发除去乙醚，最后在30°C水浴中继续旋转孵化2h，制得神衰果 素脂质体。pH = 8的磷酸缓冲溶液的制备是称取实施例1配置得到的5. 3mL的0. 2mol/ LNaH2PO4 溶液和 94. 7mL 的 0. 2mol/L Na2HPO4 溶液，两者混合。实施例3称取神衰果素0. 05g，溶于80g的pH = 6的磷酸缓冲溶液中。称取胆固醇0.04g, 蛋黄卵磷脂0. 08g,大豆卵磷脂0. Olg,溶于12g无水乙醇中，于旋转蒸发器上蒸馏除去乙 醇，制得脂质干膜。用35g乙醚溶解脂质干膜，然后加入50g预先配制的神衰果素的磷酸缓 冲溶液，超声45min，10°C旋转蒸发除去乙醚，最后在25°C水浴中继续旋转孵化2h，制得神 衰果素脂质体。pH = 6的磷酸缓冲溶液的制备是称取实施例1配置得到的87. 7mL的0. 2mol/LNaH2PO4 溶液和 12. 3mL 的 0. 2mol/L Na2HPO4 溶液，两者混合。实施例4
称取神衰果素0. Olg，溶于80g的pH= 7. 6的磷酸缓冲溶液中。称取胆固醇0. 25g， 蛋黄卵磷脂0. 25g，大豆卵磷脂0. 025g,溶于25g无水乙醇中，于旋转蒸发器上蒸馏除去乙 醇，制得脂质干膜。用105g乙醚溶解脂质干膜，然后加入50g预先配制的神衰果素的磷酸 缓冲溶液，超声40min，15°C旋转蒸发除去乙醚，最后在40°C水浴中继续旋转孵化1. 5h，制 得神衰果素脂质体。pH = 7. 6的磷酸缓冲溶液的制备是称取实施例1配置得到的13. OmL的0. 2mol/ LNaH2PO4溶液和87. OmL的0. 2moVLNa2HPO4溶液，两者混合。实施例5称取神衰果素0. Olg，溶于80g的pH = 6. 8的磷酸缓冲溶液中。称取胆固醇0. 02g, 蛋黄卵磷脂0. 05g,大豆卵磷脂0. 02g,溶于16无水乙醇中，于旋转蒸发器上蒸馏除去乙醇， 制得脂质干膜。用60g乙醚溶解干膜，然后加入30g预先配制的神衰果素的磷酸缓冲溶液， 超声10min，2(TC旋转蒸发除去乙醚，最后在40°C水浴中继续旋转孵化1. 5h，制得神衰果素 脂质体。pH = 6. 8的磷酸缓冲溶液的制备是称取实施例1配置得到的51. OmL的0. 2mol/ L NaH2PO4 溶液和 49. OmL 的 0. 2mol/L Na2HPO4 溶液，两者混合。实施例6称取神衰果素0.004g，溶于80g的pH= 7.2的磷酸缓冲溶液中。称取胆固醇 0. 05g，蛋黄卵磷脂0. Olg,大豆卵磷脂0. 005g,溶于8g无水乙醇中，于旋转蒸发器上蒸馏除 去乙醇，制得脂质干膜。用21g乙醚溶解干膜，然后加入IOg预先配制的神衰果素的磷酸缓 冲溶液，超声60min，15°C旋转蒸发除去乙醚，最后在50°C水浴中继续旋转孵化lh，制得神 衰果素脂质体。pH = 7. 2的磷酸缓冲溶液的制备是称取实施例1配置得到的28. OmL的0. 2mol/ L NaH2PO4 溶液和 72. OmL 的 0. 2mol/L Na2HPO4 溶液，两者混合。
权利要求
一种神衰果素脂质体的制备方法，其特征在于先按神衰果素∶pH值为6～8的磷酸缓冲溶液＝1∶300～20000质量比称取，然后混合均匀，得到神衰果素的磷酸缓冲溶液，待用；量取胆固醇∶蛋黄卵磷脂∶大豆卵磷脂∶无水乙醇＝1∶0.2～2.5∶0.1～1∶100～800质量比，混合均匀，然后在旋转蒸发器上蒸馏，除去乙醇，制得脂质干膜；接着在脂质干膜中加入乙醚，乙醚的加入量为胆固醇质量的300～3000倍，将脂质干膜溶解，然后加入神衰果素的磷酸缓冲溶液，神衰果素的磷酸缓冲溶液的加入量为胆固醇质量的100～1500倍，再超声5～60min，10～20℃旋转蒸发除去乙醚，最后在20～50℃水浴中继续旋转1～2h，制得神衰果素脂质体。
全文摘要
本发明涉及一种神衰果素脂质体的制备方法。先按神衰果素∶pH值为6～8的磷酸缓冲溶液＝1∶300～20000质量比称取，混合均匀后得到神衰果素的磷酸缓冲溶液。按胆固醇∶蛋黄卵磷脂∶大豆卵磷脂∶乙醇＝1∶0.2～2.5∶0.1～1∶100～800质量比量取，混合均匀，于旋转蒸发器上蒸馏除去乙醇，制得脂质干膜；用乙醚溶解脂质干膜，然后加入神衰果素的磷酸缓冲溶液，其中乙醚与胆固醇的质量比为300～3000∶1，神衰果素的磷酸缓冲溶液与胆固醇的质量比为100～1500∶1，超声5～60min，10～20℃旋转蒸发除去乙醚，最后在20～50℃水浴中继续旋转孵化1～2h，制得神衰果素脂质体。所得神衰果素脂质体具有较好的靶向性、缓释性、低毒性、生物相容性，有助于药物吸收和提高药物生物利用度。
文档编号A61K9/127GK101829058SQ201010176308
公开日2010年9月15日 申请日期2010年5月14日 优先权日2010年5月14日
发明者刘明贤, 樊荣, 甘礼华, 陈柳华, 陈龙武 申请人:同济大学
技术领域：
本发明涉及一种神衰果素脂质体的制备方法。属医药技术领域。
背景技术：
神衰果素，又名豆腐果苷，化学名为对甲醛苯-O-β -D-阿洛吡喃糖苷，是从植物 深绿山龙眼中提取的有效成分，具有催眠镇静、抗惊厥、镇痛抗炎、抗抑郁的作用。目前，有 关神衰果素制剂的报道有软胶囊、片剂等，如“豆腐果苷软胶囊及其制备方法”(中国发明专 利申请号=03117667. 4，公开号CN1535690)，“一种神衰果素速释片剂及其制备方法”(中 国发明专利申请号03140524.X，公开号CN1454600)和“一种豆腐果苷口腔崩解片”(中国 发明专利申请号CN200410062280. 5，公开号CN1586494)。由于神衰果素的水溶性相对较 差，因此，这些神衰果素制剂中大多存在生物利用度不高、细胞相似性以及组织相容性差等 缺点。
发明内容
本发明的目的在于提供一种神衰果素脂质体的制备方法。用本发明制备的神衰果 素脂质体适合经口给药，对机体无毒或毒副作用小，细胞亲和性和组织相容性好，可以增加 药物在体内吸收，改善药物释放性质，提高药物生物利用度。为了达到上述目的，本发明对脂质体进行认真研究发现脂质体是磷脂分散在水 中形成的一个类球状的、包封一部分水相的封闭囊泡，这些磷脂中含有两条疏水性脂肪酸 和一个亲水性头基，当与水面接触时，磷脂形成双分子层结构。这种双分子层结构中既有亲 水基团又有疏水基团，因此，脂质体的亲水基团夹层可以包封水溶性药物，而疏水基团的夹 层可以包封脂溶性药物。脂质体不仅易于体内降解、无毒性和无免疫原性，而且具有细胞亲 和性和组织相容性，作为药物载体时可以增加药物在体内吸收，改善药物释放性质，提高了 药物生物利用度。为此，本发明通过实验找到了神衰果素脂质体的制备工艺，具体工艺如 下先按神衰果素pH值为6 8的磷酸缓冲溶液=1 300 20000质量比称取， 混合均勻后得到神衰果素的磷酸缓冲溶液。再按胆固醇蛋黄卵磷脂大豆卵磷脂无水 乙醇=1 0.2 2. 5 0. 1 1 100 800质量比量取，混合均勻，于旋转蒸发器上蒸 馏除去乙醇，制得脂质干膜；用乙醚溶解脂质干膜，然后加入神衰果素的磷酸缓冲溶液，其 中乙醚与胆固醇的质量比为300 3000 1，神衰果素的磷酸缓冲溶液与胆固醇的质量比 为100 1500 1，超声5 60min，10 20°C旋转蒸发除去乙醚，最后在20 50°C水浴 中继续旋转1 2h，制得神衰果素脂质体。上述的pH值为6 8的磷酸缓冲溶液的配置是，先称取市售 的31. 2g分析纯 NaH2PO4 · 2H20，用蒸馏水定容至1L，搅拌，得到摩尔浓度为0. 2mol/L NaH2PO4溶液；再称取 71. 6g市售的分析纯Na2HPO4 · 12H20，用蒸馏水定容至1L，搅拌，得到摩尔浓度为0. 2mol/L Na2HPO4溶液；接着，称取5. 3 87. 7mL的上述配置好的0. 2mol/L NaH2PO4溶液和12. 3 94. 7mL的上述配置好的0. 2mol/L Na2HPO4溶液混合均勻而成。本发明具有以下优点1.本发明制备的神衰果素脂质体，具有良好的细胞亲和性和生物相容性，与神衰 果素软胶囊等相比，可以增加药物在体内吸收，改善药物释放性质，提高药物生物利用度。2.由于本发明所用主要原料为蛋黄卵磷脂、大豆卵磷脂，因此，制得的神衰果素脂 质体易于体内降解，对机体无毒或毒副作用小，无免疫原性。3.由于本发明在制备脂质体过程中加入大豆卵磷脂，大豆卵磷脂具有较高的氧化 指数，避免了蛋黄卵磷脂在体内外的过氧化而产生毒副作用，提高了神衰果素脂质体的稳 定性。4.本发明制备工艺简单，药物损失较少，具有良好的应用前景。
具体实施例方式实施例1称取市售的神衰果素(纯度大于99% )0. 04g，溶于80g的pH = 7. 4的磷酸缓冲 溶液中得到神衰果素的磷酸缓冲溶液。pH = 7. 4的磷酸缓冲溶液的制备是先称取市售的 31. 2g分析纯NaH2PO4 ·2Η20，再用蒸馏水定容至1L，搅拌，得到摩尔浓度为0. 2mol/LNaH2PO4。 再称取71. 6g市售的分析纯Na2HPO4 · 12H20，用蒸馏水定容至1L，搅拌，得到摩尔浓度为 0. 2mol/L的Na2HPO4溶液，然后，称取19. OmL上述配置好的0. 2mol/L NaH2PO4和81. OmL上 述配置的0. 2mol/L Na2HPO4,两者混合。称取分析纯的胆固醇0.02g，生物纯的蛋黄卵磷脂0.02g，梯希爱(上海)化成工 业发展有限公司生产的大豆卵磷脂0. 005g，溶于4g市售的无水乙醇中，于旋转蒸发器上蒸 馏除去乙醇，制得脂质干膜。用35g分析纯乙醚溶解脂质干膜，然后加入5g上述已经配制 的神衰果素的磷酸缓冲溶液，超声5min，15°C旋转蒸发除去乙醚，最后在20°C水浴中继续 旋转孵化2h，制得神衰果素脂质体。实施例2称取神衰果素0. 25g，溶于75g的pH = 8的磷酸缓冲溶液中。称取胆固醇0. 09g, 蛋黄卵磷脂0. 03g,大豆卵磷脂0. 03g,溶于9g无水乙醇中，于旋转蒸发器上蒸馏除去乙醇， 制得脂质干膜。用27g乙醚溶解脂质干膜，然后加入9g预先配制的神衰果素的磷酸缓冲溶 液，超声30min，2(TC旋转蒸发除去乙醚，最后在30°C水浴中继续旋转孵化2h，制得神衰果 素脂质体。pH = 8的磷酸缓冲溶液的制备是称取实施例1配置得到的5. 3mL的0. 2mol/ LNaH2PO4 溶液和 94. 7mL 的 0. 2mol/L Na2HPO4 溶液，两者混合。实施例3称取神衰果素0. 05g，溶于80g的pH = 6的磷酸缓冲溶液中。称取胆固醇0.04g, 蛋黄卵磷脂0. 08g,大豆卵磷脂0. Olg,溶于12g无水乙醇中，于旋转蒸发器上蒸馏除去乙 醇，制得脂质干膜。用35g乙醚溶解脂质干膜，然后加入50g预先配制的神衰果素的磷酸缓 冲溶液，超声45min，10°C旋转蒸发除去乙醚，最后在25°C水浴中继续旋转孵化2h，制得神 衰果素脂质体。pH = 6的磷酸缓冲溶液的制备是称取实施例1配置得到的87. 7mL的0. 2mol/LNaH2PO4 溶液和 12. 3mL 的 0. 2mol/L Na2HPO4 溶液，两者混合。实施例4
称取神衰果素0. Olg，溶于80g的pH= 7. 6的磷酸缓冲溶液中。称取胆固醇0. 25g， 蛋黄卵磷脂0. 25g，大豆卵磷脂0. 025g,溶于25g无水乙醇中，于旋转蒸发器上蒸馏除去乙 醇，制得脂质干膜。用105g乙醚溶解脂质干膜，然后加入50g预先配制的神衰果素的磷酸 缓冲溶液，超声40min，15°C旋转蒸发除去乙醚，最后在40°C水浴中继续旋转孵化1. 5h，制 得神衰果素脂质体。pH = 7. 6的磷酸缓冲溶液的制备是称取实施例1配置得到的13. OmL的0. 2mol/ LNaH2PO4溶液和87. OmL的0. 2moVLNa2HPO4溶液，两者混合。实施例5称取神衰果素0. Olg，溶于80g的pH = 6. 8的磷酸缓冲溶液中。称取胆固醇0. 02g, 蛋黄卵磷脂0. 05g,大豆卵磷脂0. 02g,溶于16无水乙醇中，于旋转蒸发器上蒸馏除去乙醇， 制得脂质干膜。用60g乙醚溶解干膜，然后加入30g预先配制的神衰果素的磷酸缓冲溶液， 超声10min，2(TC旋转蒸发除去乙醚，最后在40°C水浴中继续旋转孵化1. 5h，制得神衰果素 脂质体。pH = 6. 8的磷酸缓冲溶液的制备是称取实施例1配置得到的51. OmL的0. 2mol/ L NaH2PO4 溶液和 49. OmL 的 0. 2mol/L Na2HPO4 溶液，两者混合。实施例6称取神衰果素0.004g，溶于80g的pH= 7.2的磷酸缓冲溶液中。称取胆固醇 0. 05g，蛋黄卵磷脂0. Olg,大豆卵磷脂0. 005g,溶于8g无水乙醇中，于旋转蒸发器上蒸馏除 去乙醇，制得脂质干膜。用21g乙醚溶解干膜，然后加入IOg预先配制的神衰果素的磷酸缓 冲溶液，超声60min，15°C旋转蒸发除去乙醚，最后在50°C水浴中继续旋转孵化lh，制得神 衰果素脂质体。pH = 7. 2的磷酸缓冲溶液的制备是称取实施例1配置得到的28. OmL的0. 2mol/ L NaH2PO4 溶液和 72. OmL 的 0. 2mol/L Na2HPO4 溶液，两者混合。
权利要求
一种神衰果素脂质体的制备方法，其特征在于先按神衰果素∶pH值为6～8的磷酸缓冲溶液＝1∶300～20000质量比称取，然后混合均匀，得到神衰果素的磷酸缓冲溶液，待用；量取胆固醇∶蛋黄卵磷脂∶大豆卵磷脂∶无水乙醇＝1∶0.2～2.5∶0.1～1∶100～800质量比，混合均匀，然后在旋转蒸发器上蒸馏，除去乙醇，制得脂质干膜；接着在脂质干膜中加入乙醚，乙醚的加入量为胆固醇质量的300～3000倍，将脂质干膜溶解，然后加入神衰果素的磷酸缓冲溶液，神衰果素的磷酸缓冲溶液的加入量为胆固醇质量的100～1500倍，再超声5～60min，10～20℃旋转蒸发除去乙醚，最后在20～50℃水浴中继续旋转1～2h，制得神衰果素脂质体。
全文摘要
本发明涉及一种神衰果素脂质体的制备方法。先按神衰果素∶pH值为6～8的磷酸缓冲溶液＝1∶300～20000质量比称取，混合均匀后得到神衰果素的磷酸缓冲溶液。按胆固醇∶蛋黄卵磷脂∶大豆卵磷脂∶乙醇＝1∶0.2～2.5∶0.1～1∶100～800质量比量取，混合均匀，于旋转蒸发器上蒸馏除去乙醇，制得脂质干膜；用乙醚溶解脂质干膜，然后加入神衰果素的磷酸缓冲溶液，其中乙醚与胆固醇的质量比为300～3000∶1，神衰果素的磷酸缓冲溶液与胆固醇的质量比为100～1500∶1，超声5～60min，10～20℃旋转蒸发除去乙醚，最后在20～50℃水浴中继续旋转孵化1～2h，制得神衰果素脂质体。所得神衰果素脂质体具有较好的靶向性、缓释性、低毒性、生物相容性，有助于药物吸收和提高药物生物利用度。
文档编号A61K9/127GK101829058SQ201010176308
公开日2010年9月15日 申请日期2010年5月14日 优先权日2010年5月14日
发明者刘明贤, 樊荣, 甘礼华, 陈柳华, 陈龙武 申请人:同济大学
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