一种对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效的生物制剂的生产方法
专利名称：一种对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效的生物制剂的生产方法
技术领域：
本发明涉及生物制剂技术领域，特别涉及从金黄色葡萄球菌分泌物中提取活性物质的相关技术。
背景技术：
青春痘，学名“痤疮”，是一种常发于青春期青少年男女的毛囊皮脂腺疾病，。常于面部、前胸、后背等部位出现黑头粉刺、白头粉刺、红丘疹、脓疱、囊肿及疥、痛、蜂窝织织等。其形成与成脂分泌旺盛，内分泌激素刺激及毛囊内细菌寄生繁殖等多种因素有关。其治疗时间由数月至数年不等，因此，加强日常皮肤护理，辅以药物治疗是消除青春痘的极为有效的办法。但目前市场上的许多专用药物及专用化妆品对其治疗效果不佳，仅起护肤美容的作用居多。因此开发对青春痘有特殊疗效的消痘生物活性剂，是有市场优势的。
相关方面的发明创造，如申请号为“9110606.7”，名称为“从金黄色葡萄球菌代谢产物中提取治疗恶性肿瘤用药的方法”中，提出了用金黄色葡萄球菌代谢产物提取活性物质的方法，但其菌株和发明的目的及方法与本发明不同。
技术内容本发明的目的是针对现有技术的不足，为社会提供一种对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效，制作简单、生产效率高的生物制剂的生产方法。
本发明目的可以通过以下技术方案实现一种对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效的生物制剂的生产方法。
包括以下步骤a、培养基的制备按重量百分比称取以下原料蛋白胨0.8-1.1％ 牛肉膏或营养肉汤培养基0.3-0.5％氯化钠5-7％葡萄糖0.5-0.8％ 蒸馏水91-93％以上除葡萄糖外，其余组份先用少量蒸馏水充分混合溶解，再将蒸馏水加至标准，用2m氢氧化钠或2m盐酸调节pH为7.3-7.6，然后高压蒸气15磅、121.3℃灭菌15分钟得液体培养基；b、菌种制备开启冻干菌种管、用上述灭菌过的液体培养基或用pH值为7.4的PBS适量(约0.5m)稀释，溶解后移种到增菌培养基，在35-37℃培养18-25小时，得备用菌种，置于冰箱备用；c、活性剂的制备①扩大培养将备用菌种，按培养基总体积的1-1.5％移种到液体培养基中，经37℃培养18-24小时，在培养14-16小时时，加入05％葡萄糖再继续培养4-8小时得扩大培养菌液。
②分泌物的提取；
③用0.45um滤膜将扩大培养液中的菌体分离弃之，滤液再用0.22um滤膜过滤，滤液加入0.1％甲醛，在37℃下置12小时，转4℃置7天后得半成品活性剂。
D、配制将半成品活性剂加入20％的灭菌甘油，充分混合后用氢氧化钠或盐酸调pH值7.0-7.2，得成品，置冰箱贮存。做毒性、安全等芥定实验，合格转分包装。芥定①活性5mg/ml以上，②毒性、安全等药试验，按生物制品规程执行。
对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效的生物制剂的生产方法，其最佳配方在于所述培养基的制备中各原料的重量百分比为蛋白胨1％市售牛肉膏或市售营养肉汤(固体)0.4％，氯化钠5％，葡萄糖0.5％，蒸馏水93.1％或加至所需总量本发明的技术进步在于，生产生物制剂的方法简单适用，所得产品对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效。
具体实施方法一种对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效的生物制剂的生产方法，所述生物制剂的生产方法包括以下步骤a、培养基的制备按重量百分比称取以下原料蛋白胶0.8-1.1％ 牛肉膏或市售营养肉汤0.3-0.5％，也可按厂家说明配制 氯化钠5-7％ 葡萄糖0.5-0.8％ 蒸馏水93.1％或加至所需总量以上除葡萄糖外，其余组份充分混合溶解，用氢氧化钠或盐酸调节PH为7.3-7.5，然后高压蒸气15磅、121.3℃灭菌15分钟得液体培养基；b、菌种制备开启冻干菌种管、用上述液体培养基或用pH值7.4的PBS适量(约0.5ml)稀释，溶解后移种到增菌培养基在35-37℃培养18-25小时，得备用菌种置于冰箱备用；c、活性剂的制备①扩大培养将备用菌种，按培养基体积的1-1.5％移种到pH值7.2-7.4液体培养基中，经35-37℃培养18-24小时，在培养14-18小时时，加入0.5％葡萄糖得扩大培养液。
②分泌物的提取；③用0.45um滤膜将扩大培养液中的菌体分离弃之，滤液再用0.22um滤膜过滤，滤液加入0.1％甲醛，在37℃下置12小时，转4℃置7天后得半成品制剂。
D、配制将半成品制剂加入20％的灭菌甘油，充分混合后调pH值为7.0-7.2，置冰箱贮，备分包装。
对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效的生物制剂的生产方法，最佳方法所述培养基的制备中各原料的重量百分比为蛋白胨1％ 市售牛肉膏0.4％或市售营养肉汤培养基按厂家提供的说明配制，氯化钠5％，葡萄糖0.5％，蒸馏水加至所配总量。
例如配1000ml液体培养基蛋白胨10克，氯化钠50克，葡萄糖5克(培养14小时时加入)，市售固体营养肉汤培养基17克，(培养基制造厂瓶签说明提供)，以上除葡萄糖外，其余成份先用600ml蒸馏水稀释，使其溶解后，再补加到1000ml，搅拌均匀，用的氢氧化钠或盐酸调pH7.4-7.6高压蒸气灭菌；15磅121.3℃，15分钟后，自然冷却至37℃以下备用。
本发明临床实验实例1用药人数33人，采用擦涂方法，洗净患处后，直接将活性剂涂于患处，此次试验只用药一次，试验结果，次日见效13人，第二日见效9人，第三日见效6人，无效5人，按百分比统计有效率84.9％。
实例2中学生23人，用药一次，有效率达82％。
实例3零散青年至壮年43人，次日见效17人，占39.5％，5日内有效19人，占44.2％，无效7人占16.3％，有效率为83.7％，无效为16.3％。
用“痘立消”和生物活性剂作同时同人不同部位对比试验人数为8人，痘立消2天内全不见效，第4天见效2人，占25％。活性剂次日见效4人占50％，4日内见效3人，占37.5％无效1人，占12.5％，还有一例膏剂，一工人用80元买来，用药一月余无任何好转，后并用活性剂3天见效。
权利要求
1.一种对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效的生物制剂的生产方法，其特征在于所述生物制剂的生产方法包括以下步骤a、培养基的制备按重量百分比称取以下原料蛋白胨0.8-1.1％，牛肉膏或营养肉汤培养基，氯化钠5-7％，葡萄糖0.5-0.8％，蒸馏水91-93％；以上除葡萄糖外，其余组份先用少量蒸馏水使其充分溶解，然后加蒸馏水并用氢氧化钠调节pH值7.3-7.5，然后高压蒸气15磅、121.3℃灭菌15分钟得液体培养基；b、菌种制备开启冻干菌种管、用上述灭菌过的液体培养基或用0.5ml、pH值为7.4的PBS稀释，溶解后移种到增菌培养基，在35-37℃培养18-25小时，得备用菌种，置于冰箱备用；c、活性剂的制备①扩大培养将备用菌种，按培养基总体积的1-1.5％移种到液体培养基中，经37℃培养18-24小时，在培养14-16小时时，加入0.5％葡萄糖再继续培养4-8小时，得扩大培养菌液。②分泌物的提取；③用0.45um滤膜将扩大培养液中的菌体分离弃之，滤液再用0.22um滤膜过滤，滤液加入0.1％甲醛，在37℃下置12小时，转4℃置7天后得半成品活性剂。D、配制将半成品活性剂加入20％的灭菌甘油，充分混合后用氢氧化钠或盐酸调pH值为7.0-7.2得成品，置冰箱贮存。
2.根据权利要求1所述的一种对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效的生物制剂的生产方法，其特征在于所述培养基的制备中各原料的重量百分比为蛋白胨1％ 牛肉膏0.4％ 氯化钠5％葡萄糖0.5％ 蒸馏水93.1％
全文摘要
一种对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效的生物制剂的生产方法，涉及从金黄色葡萄球菌分泌物中提取活性物质相关技术，具体技术包括①用蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、葡萄糖、蒸馏水制备培养基；②用得到的液体培养基制菌种；③用制得的菌种扩大培养活性物，分泌物并过滤，得成品。本发明制备工艺简单，生效效率高，对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效。
文档编号A61K35/74GK1401333SQ02108868
公开日2003年3月12日 申请日期2002年4月16日 优先权日2002年4月16日
发明者袁文潭 申请人:袁文潭
技术领域：
本发明涉及生物制剂技术领域，特别涉及从金黄色葡萄球菌分泌物中提取活性物质的相关技术。
背景技术：
青春痘，学名“痤疮”，是一种常发于青春期青少年男女的毛囊皮脂腺疾病，。常于面部、前胸、后背等部位出现黑头粉刺、白头粉刺、红丘疹、脓疱、囊肿及疥、痛、蜂窝织织等。其形成与成脂分泌旺盛，内分泌激素刺激及毛囊内细菌寄生繁殖等多种因素有关。其治疗时间由数月至数年不等，因此，加强日常皮肤护理，辅以药物治疗是消除青春痘的极为有效的办法。但目前市场上的许多专用药物及专用化妆品对其治疗效果不佳，仅起护肤美容的作用居多。因此开发对青春痘有特殊疗效的消痘生物活性剂，是有市场优势的。
相关方面的发明创造，如申请号为“9110606.7”，名称为“从金黄色葡萄球菌代谢产物中提取治疗恶性肿瘤用药的方法”中，提出了用金黄色葡萄球菌代谢产物提取活性物质的方法，但其菌株和发明的目的及方法与本发明不同。
技术内容本发明的目的是针对现有技术的不足，为社会提供一种对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效，制作简单、生产效率高的生物制剂的生产方法。
本发明目的可以通过以下技术方案实现一种对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效的生物制剂的生产方法。
包括以下步骤a、培养基的制备按重量百分比称取以下原料蛋白胨0.8-1.1％ 牛肉膏或营养肉汤培养基0.3-0.5％氯化钠5-7％葡萄糖0.5-0.8％ 蒸馏水91-93％以上除葡萄糖外，其余组份先用少量蒸馏水充分混合溶解，再将蒸馏水加至标准，用2m氢氧化钠或2m盐酸调节pH为7.3-7.6，然后高压蒸气15磅、121.3℃灭菌15分钟得液体培养基；b、菌种制备开启冻干菌种管、用上述灭菌过的液体培养基或用pH值为7.4的PBS适量(约0.5m)稀释，溶解后移种到增菌培养基，在35-37℃培养18-25小时，得备用菌种，置于冰箱备用；c、活性剂的制备①扩大培养将备用菌种，按培养基总体积的1-1.5％移种到液体培养基中，经37℃培养18-24小时，在培养14-16小时时，加入05％葡萄糖再继续培养4-8小时得扩大培养菌液。
②分泌物的提取；
③用0.45um滤膜将扩大培养液中的菌体分离弃之，滤液再用0.22um滤膜过滤，滤液加入0.1％甲醛，在37℃下置12小时，转4℃置7天后得半成品活性剂。
D、配制将半成品活性剂加入20％的灭菌甘油，充分混合后用氢氧化钠或盐酸调pH值7.0-7.2，得成品，置冰箱贮存。做毒性、安全等芥定实验，合格转分包装。芥定①活性5mg/ml以上，②毒性、安全等药试验，按生物制品规程执行。
对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效的生物制剂的生产方法，其最佳配方在于所述培养基的制备中各原料的重量百分比为蛋白胨1％市售牛肉膏或市售营养肉汤(固体)0.4％，氯化钠5％，葡萄糖0.5％，蒸馏水93.1％或加至所需总量本发明的技术进步在于，生产生物制剂的方法简单适用，所得产品对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效。
具体实施方法一种对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效的生物制剂的生产方法，所述生物制剂的生产方法包括以下步骤a、培养基的制备按重量百分比称取以下原料蛋白胶0.8-1.1％ 牛肉膏或市售营养肉汤0.3-0.5％，也可按厂家说明配制 氯化钠5-7％ 葡萄糖0.5-0.8％ 蒸馏水93.1％或加至所需总量以上除葡萄糖外，其余组份充分混合溶解，用氢氧化钠或盐酸调节PH为7.3-7.5，然后高压蒸气15磅、121.3℃灭菌15分钟得液体培养基；b、菌种制备开启冻干菌种管、用上述液体培养基或用pH值7.4的PBS适量(约0.5ml)稀释，溶解后移种到增菌培养基在35-37℃培养18-25小时，得备用菌种置于冰箱备用；c、活性剂的制备①扩大培养将备用菌种，按培养基体积的1-1.5％移种到pH值7.2-7.4液体培养基中，经35-37℃培养18-24小时，在培养14-18小时时，加入0.5％葡萄糖得扩大培养液。
②分泌物的提取；③用0.45um滤膜将扩大培养液中的菌体分离弃之，滤液再用0.22um滤膜过滤，滤液加入0.1％甲醛，在37℃下置12小时，转4℃置7天后得半成品制剂。
D、配制将半成品制剂加入20％的灭菌甘油，充分混合后调pH值为7.0-7.2，置冰箱贮，备分包装。
对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效的生物制剂的生产方法，最佳方法所述培养基的制备中各原料的重量百分比为蛋白胨1％ 市售牛肉膏0.4％或市售营养肉汤培养基按厂家提供的说明配制，氯化钠5％，葡萄糖0.5％，蒸馏水加至所配总量。
例如配1000ml液体培养基蛋白胨10克，氯化钠50克，葡萄糖5克(培养14小时时加入)，市售固体营养肉汤培养基17克，(培养基制造厂瓶签说明提供)，以上除葡萄糖外，其余成份先用600ml蒸馏水稀释，使其溶解后，再补加到1000ml，搅拌均匀，用的氢氧化钠或盐酸调pH7.4-7.6高压蒸气灭菌；15磅121.3℃，15分钟后，自然冷却至37℃以下备用。
本发明临床实验实例1用药人数33人，采用擦涂方法，洗净患处后，直接将活性剂涂于患处，此次试验只用药一次，试验结果，次日见效13人，第二日见效9人，第三日见效6人，无效5人，按百分比统计有效率84.9％。
实例2中学生23人，用药一次，有效率达82％。
实例3零散青年至壮年43人，次日见效17人，占39.5％，5日内有效19人，占44.2％，无效7人占16.3％，有效率为83.7％，无效为16.3％。
用“痘立消”和生物活性剂作同时同人不同部位对比试验人数为8人，痘立消2天内全不见效，第4天见效2人，占25％。活性剂次日见效4人占50％，4日内见效3人，占37.5％无效1人，占12.5％，还有一例膏剂，一工人用80元买来，用药一月余无任何好转，后并用活性剂3天见效。
权利要求
1.一种对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效的生物制剂的生产方法，其特征在于所述生物制剂的生产方法包括以下步骤a、培养基的制备按重量百分比称取以下原料蛋白胨0.8-1.1％，牛肉膏或营养肉汤培养基，氯化钠5-7％，葡萄糖0.5-0.8％，蒸馏水91-93％；以上除葡萄糖外，其余组份先用少量蒸馏水使其充分溶解，然后加蒸馏水并用氢氧化钠调节pH值7.3-7.5，然后高压蒸气15磅、121.3℃灭菌15分钟得液体培养基；b、菌种制备开启冻干菌种管、用上述灭菌过的液体培养基或用0.5ml、pH值为7.4的PBS稀释，溶解后移种到增菌培养基，在35-37℃培养18-25小时，得备用菌种，置于冰箱备用；c、活性剂的制备①扩大培养将备用菌种，按培养基总体积的1-1.5％移种到液体培养基中，经37℃培养18-24小时，在培养14-16小时时，加入0.5％葡萄糖再继续培养4-8小时，得扩大培养菌液。②分泌物的提取；③用0.45um滤膜将扩大培养液中的菌体分离弃之，滤液再用0.22um滤膜过滤，滤液加入0.1％甲醛，在37℃下置12小时，转4℃置7天后得半成品活性剂。D、配制将半成品活性剂加入20％的灭菌甘油，充分混合后用氢氧化钠或盐酸调pH值为7.0-7.2得成品，置冰箱贮存。
2.根据权利要求1所述的一种对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效的生物制剂的生产方法，其特征在于所述培养基的制备中各原料的重量百分比为蛋白胨1％ 牛肉膏0.4％ 氯化钠5％葡萄糖0.5％ 蒸馏水93.1％
全文摘要
一种对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效的生物制剂的生产方法，涉及从金黄色葡萄球菌分泌物中提取活性物质相关技术，具体技术包括①用蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、葡萄糖、蒸馏水制备培养基；②用得到的液体培养基制菌种；③用制得的菌种扩大培养活性物，分泌物并过滤，得成品。本发明制备工艺简单，生效效率高，对痤疮、粉刺、毛囊炎有特殊疗效。
文档编号A61K35/74GK1401333SQ02108868
公开日2003年3月12日 申请日期2002年4月16日 优先权日2002年4月16日
发明者袁文潭 申请人:袁文潭
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