谷物类醇溶蛋白微球和制备方法
专利名称：谷物类醇溶蛋白微球和制备方法
技术领域：
本发明涉及一种谷物类醇溶蛋微球，其粒径分布在100-1500nm。系采用相分离法以谷物类醇溶蛋白为膜材制备微球的方法。
另外，微球的粒径对药物的被动靶向起关键性作用，静脉注射时，直径为15-30μm的微球通过心脏后，99％靶向于肺毛细血管床；直径为1-3μm的微球，通过网状内皮系统，90％靶向于肝脏；而直径小于1μm的微球将混合分布于肝、脾、骨髓；0.1μm米以下粒径的粒子在体内能避免被网内系捕捉，延长血液中的滞留时间。对于身体特殊部位的疾病，可用一定粒径的微球给药，使药物被动靶向于患病部位，从而提高药物的疗效。因此需要开发出使粒径分布在特定范围的微球，以满足医疗的需要。
谷物类醇溶蛋白无毒、低免疫原性、抗菌、可降解、易成膜、抗氧化、价格便宜、来源丰富，是很好的制备微球的材料[Shukla，R，；Munir C.Ind.Crop.Prod.2001，13，171-192.]。
微型成球技术是从上个世纪五十年代开始发展起来的。从上个世纪六十年代开始，特别是近年来，微球在医学领域的应用得到了广泛的研究。药物包封入微球后，有以下特点掩盖药物的不良气味及口味；提高药物的稳定性；防止药物在胃内失活或减少对胃的刺激性；减少配伍禁忌；降低毒副作用；缓释或控制释放药物；靶向给药，提高疗效等[Donbrow，M.Microcapsules and nanoparticles inmedicine and pharmacy.Ed.By Donbrow，M.CRC Press Inc.U.S.A.1992，2]。
微型成球的方法可归纳为物理化学法、化学法和物理机械法，物理机械方法需要较复杂的设备，投资较大，而化学方法和物理化学方法一般通过反应釜即可进行，因此应用较多。但用化学方法制备的微球中往往残留一些有毒的化学溶剂及试剂，很难除去，以二甲基亚砜(DMSO)为溶剂，加热和使用了有毒的架桥剂[Matsuda Y et al.Chem.Pharm.Bull.，37，757-759(1989)；Suzuki T et al.Chem.Pharm.Bull.，37，1051-1054(1989).]。相分离法可分为单凝聚法、复凝聚法、溶剂-非溶剂法，是一种很常用的制备微球的物理化学方法。相分离法制备微球，粒径50nm-100微米，用于体内生物活性剂的缓释(USP5679377)；相分离法制备微球，其粒径分布范围较寬，超过80％的粒子分布在500纳米到4微米之间(USP5271961)；用于包容血红蛋白，粒径分布在5微米以上(WO9325221)。
本发明的目的是提供一种谷物类醇溶蛋白微球。
本发明的目的还是提供一种上述谷物类醇溶蛋白微球的制备方法。
本发明提供一种谷物类醇溶蛋白微球。该谷物类醇溶蛋白微球的粒径分布比较均匀，粒径控制在100-1500nm，最好是粒径分布在500-1200nm之间的谷物类醇溶蛋白微球。
本发明中所述的谷物类醇溶蛋白是包括玉米、大米、小麦、大麦、裸麦、燕麦等在内的谷物蛋白，推荐采用玉米醇溶蛋白。
本发明所用的溶剂是无毒的乙醇和水。
本发明所述的谷物类醇溶蛋白微球的制备方法，是由所述的谷物类醇溶蛋白用一定浓度的乙醇和水的混合溶液溶解，并进一步在较低浓度的乙醇的水溶液中形成微球，然后干燥。
本发明的制备蛋白微球的方法是采用将谷物类醇溶蛋白先溶解在50-70％(V/V)的乙醇的水溶液中，醇溶蛋白的浓度是5-80mg/ml。最好是10-30mg/ml，然后在剧烈搅拌的情况下迅速加入一定量的水，所加入的水量最好使乙醇的最终浓度为35～45％(V/V)，形成微球的粒径分布在500-1200 nm之间。
本发明中所述的干燥，可以是真空干燥、冷冻干燥或粉末喷雾干燥。
可以利用该蛋白质的高度疏水性制备用于药物特别是难溶于水的药物缓释用载体，提高药物在血液中的滞留时间，减少药物副作用，提高药物的利用效率。得到的蛋白质微粒子粒径分布比较均匀。本发明与已有专利相比，有以下特点制得的微球粒径分布均匀，控制在500-1200纳米；对脂溶性物质有较好的包容效率；不用加热，过滤等操作；不使用有毒的架桥剂和有机溶剂。
本发明有望提供一种可用于人和动物的药物载体，用来解决因某些药物局部浓度过高造成的生物体内不良反应的问题，通过载体在体内降解，药物逐渐扩散达到缓释效果，从而减少用药频率，降低血浓峰谷现象，提高药效和安全性。该载体由生物可降解高分子，更具体地说的是蛋白质高分子，更具体地说是疏水性谷物蛋白质，特别是玉米醇溶蛋白(zein)制成。可用作口服或注射针剂。
具本实施方式通过下述实施例将有助于理解本发明，但并不限制本发明的内容。
实施例11.8ml无水乙醇和4ml水混匀，然后加入400mg玉米或小麦醇溶蛋白，旋涡混合，使物质全溶(醇溶蛋白含量33.3mg/ml)。
2.在上述混合液剧烈震荡的情况下，迅速加入8ml水，使溶液迅速混匀，形成含谷物类醇溶蛋白含药微球混悬液(乙醇含量40％，醇溶蛋白20mg/ml)。
3.将混悬液真空干燥或冷冻干燥，得谷物类醇溶蛋白微球。
实施例2将实施例1制备的20mg/ml谷物类醇溶蛋白的混悬液稀释10倍后，经光散射粒径分布测定结果如
图1所示。其中，纵座标为谷物类醇溶蛋白微球的粒径分布，横座标为谷物类醇溶蛋白微球的粒径(nm)。表明所制备的谷物类醇溶蛋白微球粒径分布在500-1200nm之间。
权利要求
1.一种谷物类醇溶蛋白微球，其粒径分布在100-1500nm。
2.如权利要求1所述的一种谷物类醇溶蛋白微球，其特征是所述的谷物类醇溶蛋白微球粒径为500-1200nm。
3.如权利要求1所述的一种谷物类醇溶蛋白微球，其特征是所述的谷物类醇溶蛋白是玉米、大米、小米、大麦、小麦、裸麦或燕麦的醇溶性蛋白。
4.一种如权利要求1所述的谷物类醇溶蛋白微球的制备方法，其特征是将谷物类醇溶蛋白溶于乙醇和水的混合溶剂中，然后干燥。
5.如权利要求4所述的一种谷物类醇溶蛋白微球的制备方法，其特征是所述的溶剂中谷物类醇溶蛋白的浓度是5-80mg/ml。
6.如权利要求4所述的一种谷物类醇溶蛋白微球的制备方法，其特征是所述的溶剂中谷物类醇溶蛋白的浓度是10-30mg/ml。
7.如权利要求4所述的制备方法，其特征是将谷物类醇溶蛋白溶解在50-70％(V/V)的乙醇的水溶液中，然后用水稀释至含有谷物类醇溶蛋白的35-45％(V/V)的乙醇的水溶液。
8.如权利要求4所述的制备方法，其特征是所述的干燥是真空干燥、冷冻干燥或粉末喷雾干燥。
全文摘要
本发明涉及一种谷物类醇溶蛋白微球，其粒径分布在100－1500nm。系利用相分离法以谷物类醇溶蛋白为膜材制备微球的方法。该方法操作简单，无需特殊设备，且利用的溶剂无毒，方法简便，适于工业化生产的方法。所制备的微球可做为被动靶向制剂的基材使用。
文档编号A61K9/50GK1476825SQ03129639
公开日2004年2月25日 申请日期2003年7月4日 优先权日2003年7月4日
发明者王瑾晔, 刘新铭 申请人:中国科学院上海有机化学研究所
技术领域：
本发明涉及一种谷物类醇溶蛋微球，其粒径分布在100-1500nm。系采用相分离法以谷物类醇溶蛋白为膜材制备微球的方法。
另外，微球的粒径对药物的被动靶向起关键性作用，静脉注射时，直径为15-30μm的微球通过心脏后，99％靶向于肺毛细血管床；直径为1-3μm的微球，通过网状内皮系统，90％靶向于肝脏；而直径小于1μm的微球将混合分布于肝、脾、骨髓；0.1μm米以下粒径的粒子在体内能避免被网内系捕捉，延长血液中的滞留时间。对于身体特殊部位的疾病，可用一定粒径的微球给药，使药物被动靶向于患病部位，从而提高药物的疗效。因此需要开发出使粒径分布在特定范围的微球，以满足医疗的需要。
谷物类醇溶蛋白无毒、低免疫原性、抗菌、可降解、易成膜、抗氧化、价格便宜、来源丰富，是很好的制备微球的材料[Shukla，R，；Munir C.Ind.Crop.Prod.2001，13，171-192.]。
微型成球技术是从上个世纪五十年代开始发展起来的。从上个世纪六十年代开始，特别是近年来，微球在医学领域的应用得到了广泛的研究。药物包封入微球后，有以下特点掩盖药物的不良气味及口味；提高药物的稳定性；防止药物在胃内失活或减少对胃的刺激性；减少配伍禁忌；降低毒副作用；缓释或控制释放药物；靶向给药，提高疗效等[Donbrow，M.Microcapsules and nanoparticles inmedicine and pharmacy.Ed.By Donbrow，M.CRC Press Inc.U.S.A.1992，2]。
微型成球的方法可归纳为物理化学法、化学法和物理机械法，物理机械方法需要较复杂的设备，投资较大，而化学方法和物理化学方法一般通过反应釜即可进行，因此应用较多。但用化学方法制备的微球中往往残留一些有毒的化学溶剂及试剂，很难除去，以二甲基亚砜(DMSO)为溶剂，加热和使用了有毒的架桥剂[Matsuda Y et al.Chem.Pharm.Bull.，37，757-759(1989)；Suzuki T et al.Chem.Pharm.Bull.，37，1051-1054(1989).]。相分离法可分为单凝聚法、复凝聚法、溶剂-非溶剂法，是一种很常用的制备微球的物理化学方法。相分离法制备微球，粒径50nm-100微米，用于体内生物活性剂的缓释(USP5679377)；相分离法制备微球，其粒径分布范围较寬，超过80％的粒子分布在500纳米到4微米之间(USP5271961)；用于包容血红蛋白，粒径分布在5微米以上(WO9325221)。
本发明的目的是提供一种谷物类醇溶蛋白微球。
本发明的目的还是提供一种上述谷物类醇溶蛋白微球的制备方法。
本发明提供一种谷物类醇溶蛋白微球。该谷物类醇溶蛋白微球的粒径分布比较均匀，粒径控制在100-1500nm，最好是粒径分布在500-1200nm之间的谷物类醇溶蛋白微球。
本发明中所述的谷物类醇溶蛋白是包括玉米、大米、小麦、大麦、裸麦、燕麦等在内的谷物蛋白，推荐采用玉米醇溶蛋白。
本发明所用的溶剂是无毒的乙醇和水。
本发明所述的谷物类醇溶蛋白微球的制备方法，是由所述的谷物类醇溶蛋白用一定浓度的乙醇和水的混合溶液溶解，并进一步在较低浓度的乙醇的水溶液中形成微球，然后干燥。
本发明的制备蛋白微球的方法是采用将谷物类醇溶蛋白先溶解在50-70％(V/V)的乙醇的水溶液中，醇溶蛋白的浓度是5-80mg/ml。最好是10-30mg/ml，然后在剧烈搅拌的情况下迅速加入一定量的水，所加入的水量最好使乙醇的最终浓度为35～45％(V/V)，形成微球的粒径分布在500-1200 nm之间。
本发明中所述的干燥，可以是真空干燥、冷冻干燥或粉末喷雾干燥。
可以利用该蛋白质的高度疏水性制备用于药物特别是难溶于水的药物缓释用载体，提高药物在血液中的滞留时间，减少药物副作用，提高药物的利用效率。得到的蛋白质微粒子粒径分布比较均匀。本发明与已有专利相比，有以下特点制得的微球粒径分布均匀，控制在500-1200纳米；对脂溶性物质有较好的包容效率；不用加热，过滤等操作；不使用有毒的架桥剂和有机溶剂。
本发明有望提供一种可用于人和动物的药物载体，用来解决因某些药物局部浓度过高造成的生物体内不良反应的问题，通过载体在体内降解，药物逐渐扩散达到缓释效果，从而减少用药频率，降低血浓峰谷现象，提高药效和安全性。该载体由生物可降解高分子，更具体地说的是蛋白质高分子，更具体地说是疏水性谷物蛋白质，特别是玉米醇溶蛋白(zein)制成。可用作口服或注射针剂。
具本实施方式通过下述实施例将有助于理解本发明，但并不限制本发明的内容。
实施例11.8ml无水乙醇和4ml水混匀，然后加入400mg玉米或小麦醇溶蛋白，旋涡混合，使物质全溶(醇溶蛋白含量33.3mg/ml)。
2.在上述混合液剧烈震荡的情况下，迅速加入8ml水，使溶液迅速混匀，形成含谷物类醇溶蛋白含药微球混悬液(乙醇含量40％，醇溶蛋白20mg/ml)。
3.将混悬液真空干燥或冷冻干燥，得谷物类醇溶蛋白微球。
实施例2将实施例1制备的20mg/ml谷物类醇溶蛋白的混悬液稀释10倍后，经光散射粒径分布测定结果如
图1所示。其中，纵座标为谷物类醇溶蛋白微球的粒径分布，横座标为谷物类醇溶蛋白微球的粒径(nm)。表明所制备的谷物类醇溶蛋白微球粒径分布在500-1200nm之间。
权利要求
1.一种谷物类醇溶蛋白微球，其粒径分布在100-1500nm。
2.如权利要求1所述的一种谷物类醇溶蛋白微球，其特征是所述的谷物类醇溶蛋白微球粒径为500-1200nm。
3.如权利要求1所述的一种谷物类醇溶蛋白微球，其特征是所述的谷物类醇溶蛋白是玉米、大米、小米、大麦、小麦、裸麦或燕麦的醇溶性蛋白。
4.一种如权利要求1所述的谷物类醇溶蛋白微球的制备方法，其特征是将谷物类醇溶蛋白溶于乙醇和水的混合溶剂中，然后干燥。
5.如权利要求4所述的一种谷物类醇溶蛋白微球的制备方法，其特征是所述的溶剂中谷物类醇溶蛋白的浓度是5-80mg/ml。
6.如权利要求4所述的一种谷物类醇溶蛋白微球的制备方法，其特征是所述的溶剂中谷物类醇溶蛋白的浓度是10-30mg/ml。
7.如权利要求4所述的制备方法，其特征是将谷物类醇溶蛋白溶解在50-70％(V/V)的乙醇的水溶液中，然后用水稀释至含有谷物类醇溶蛋白的35-45％(V/V)的乙醇的水溶液。
8.如权利要求4所述的制备方法，其特征是所述的干燥是真空干燥、冷冻干燥或粉末喷雾干燥。
全文摘要
本发明涉及一种谷物类醇溶蛋白微球，其粒径分布在100－1500nm。系利用相分离法以谷物类醇溶蛋白为膜材制备微球的方法。该方法操作简单，无需特殊设备，且利用的溶剂无毒，方法简便，适于工业化生产的方法。所制备的微球可做为被动靶向制剂的基材使用。
文档编号A61K9/50GK1476825SQ03129639
公开日2004年2月25日 申请日期2003年7月4日 优先权日2003年7月4日
发明者王瑾晔, 刘新铭 申请人:中国科学院上海有机化学研究所
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