一种治疗糖尿病的中药组合物及其制备方法
专利名称：一种治疗糖尿病的中药组合物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种治疗糖尿病的中药组合物，具体地说是以中药材为原料，制备而成的中成药，同时涉及该药物的制备方法。
背景技术：
糖尿病是一种复合病因的综合病症，是由于体内胰岛素缺乏或拮抗胰岛素的激素增加，或胰岛素在靶细胞内不能发挥正常生理作用而引起的葡萄糖、蛋白质及脂质代谢紊乱的一种综合病症。其特征为血循环中葡萄糖浓度异常升高及尿糖、血糖过高时出现典型的“三多一少”症状，即多次、多尿、多食及体重减轻，且伴有疲乏无力。严重者可发生酮症酸中毒、高渗性糖尿病昏迷，且易合并多种感染。随着病程的延长，其代谢紊乱可导致眼、肾、神经、血管及心脏等组织器官的慢性病变。若得不到及时、恰当的治疗，则发生心脏病变、脑血管病变、肾功能衰竭、双目失明、下肢坏死等情况，成为致残、致死的主要原因。且糖尿病发病率高，1995-1996年的全国抽样调查，20岁以上自然人群患病率为高达3.21％，1980年全国30万人口调查结果，60岁以上患病率4.21％，单江苏老年人群糖尿病、糖耐量低减患病率则分别为14.49％和10.21％，而且无论是发达国家或发展中国家，糖尿病的发病率都在逐年上升。
目前临床治疗2型的药物除胰岛素外，多是化学药物，应用广泛的大致可分为磺脲类、双胍类、其他降糖药及辅助用药。磺脲类降糖药物是最主要的糖尿病治疗药物。能使肝糖原合成增多，再通过对细胞受体或受体后的作用，使周围组织对胰岛素的敏感性增强，对葡萄糖的摄取增多，从而达到降低血糖的作用。但较易引发低血糖、粒细胞减少及心血管疾病等不良反应。双胍类降糖药大剂量可引起消化道反应，在肺、肝、肾有病变的患者易致乳酸性酸中毒。给广大患者用药安全带来隐患，为改变这种状况，长期以来，临床上一直尝试用植物中草约进行治疗。中医对糖尿病的病因看法较一致，认为主要是过食肥甘、五志过极、房室不节、热病火燥及先天禀赋不足几个因素。《吉林中医药》2003，23(8)14报道刘广庆用固本降糖胶囊(由黄芪、人参、山茱萸、熟地黄、山药、枸杞子、五味子、生龙骨、生牡蛎、生地黄、天花粉、丹参、山楂制成)治疗139例糖尿病患者，结果显效48例，有效71例，无效20例，总有效率86％。
发明内容
本发明的目的是是提供一种有效治疗糖尿病的中药组合物，本发明的另一个目的提供该中药组合物的制备方法。
为达到上述目的，我们采用了以下的技术方案本发明中药组合物是由下述重量比的原料制成的人参皂苷4-8重量份黄芪80-150重量份地黄150-250重量份麦冬45-80重量份 天花粉40-80重量份 枸杞80-160重量份五味子40-80重量份山药40-80重量份 覆盆子20-50重量份茯苓40-80重量份 泽泻40-80重量份。
本发明中药组合物的原料的重量比优选为人参(茎叶)皂苷6重量份 黄芪124重量份 地黄186重量份麦冬62重量份天花粉62重量份枸杞124重量份五味子62重量份 山药62重量份 覆盆子31重量份茯苓62重量份泽泻62重量份。
本发明中药组合物，可以通过常规的制剂工艺制备成为临床可接受的各种剂型如颗粒剂、片剂、丸剂、胶囊剂、注射剂或口服液、酊剂、栓剂、合剂、散剂、洗剂、膜剂、滴丸等。
本发明中药组合物的剂型优选为颗粒剂。
本发明颗粒剂每克颗粒含人参皂苷Re0.1-10mg，每克颗粒含黄芪甲苷0.02-0.5mg。
本发明颗粒剂的测定方法为(1)人参皂苷Re的测定方法为对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml中含人参皂苷Re0.4mg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约1克，加氯仿20ml，水浴回流1小时，滤过，弃去氯仿，残渣挥干溶剂，残渣连同滤纸置于同一具赛锥形瓶中，加正丁醇饱和的水2ml润湿，精密加入用水饱和正丁醇50ml超声提取30min，精密量取上清液25ml，加氨试液三倍量，摇匀，放置，分取上层溶液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定量移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为99400的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相；检测波长203nm；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定；(2)黄芪甲苷的测定方法为色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；蒸发光散射检测器；流动相比例为33∶67∶4的乙腈-水-四氢呋喃；对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约10克，加水50ml溶解，滤过，滤液用石油醚脱脂2次，水饱和的正丁醇振摇提取4次(每次50ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次40ml，弃去氨试液，用正丁醇饱和的水40ml洗，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内经1.5cm，长18cm)，以水100mL洗脱，弃去水液，再用40％乙醇50ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪测定；本发明组合物的制备方法为将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸提1-3次，每次0.5-3小时，合并浸提液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.03-1.40的稠膏，五味子用40-70％乙醇渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度约为1.10-1.40稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮1-4次，每次0.5-3小时，合并煎煮液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为40％-80％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.1-1.40，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并或干燥，加药用辅料按常规制剂工艺制成临床所需剂型。
为了防止药粉在液体制剂或颗粒中分层或沉淀常在制剂中加入助悬剂如乙基羟乙基纤维素、甲壳素、甲基纤维素、西黄芪胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、海藻酸钾、海藻酸钙、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、糊精等。
如上所述的制备方法可用下法代替
麦冬用温水浸提1-3次，每次0.5-3小时，合并浸提液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.03-1.40的稠膏，五味子用40-70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮1-4次，每次0.5-3小时，合并煎煮液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为40％-80％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩，将上述麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药等浸膏人参皂甙合并或干燥后再与人参皂甙，加药用辅料按常规制剂工艺制成临床所需剂型。
本发明药物治疗糖尿病具有很好的疗效。为表明本发明药物对糖尿病的治疗作用，我们做了大量的实验研究，下面实验例用于进一步说明本发明。
一、本发明对造成大鼠肾上腺素高血糖模型的影响II型糖尿病是老年人的常见病、多发病。经临床疗效及实验证实，本发明具有一定的降血糖作用。本实验是用肾上腺来加速大鼠体内糖元及脂肪分解，使大鼠血中葡萄糖浓度增高。肾上腺素还能抑制大鼠体内的胰岛素释放。同时再给大鼠灌一定剂量葡萄糖加速造成高血糖模型。从实验结果来看，给药组与对照组比较，本发明有很明显的降血糖作用，同时我们与固本降糖胶囊作为阳性对照组。
材料动物Wistar大鼠，雌雄各半，体重为230±30g药物1、本发明原粉，为浅棕色至棕褐色，味甘，微涩。药效剂量分别为临床用药量的50倍、37.5倍、25倍)。
2、固本降糖胶囊，本制药厂实验室生产。
方法与结果取大鼠50只，随机分为5组，每组10只。第一组为阴性对照组，给予蒸馏水。第二组为阳性对照组，给固本降糖胶囊。第三、四、五组分别为本发明的高、中、低三个剂量组，剂量分别为临床用药量的50倍、37.5倍、25倍，动物灌胃给药，药程一个月，末次给药后1小时，按500μg/kg的剂量注射肾上腺素，造成肾上腺高血糖模型，同时与葡萄糖1g/kg的剂量灌胃，加速模型的建立，采用葡萄糖氧化酶法分别测定空腹、半小时、1小时、2小时、3小时的血糖变化，其结果见表1。
表1本发明对肾上腺素造型大鼠血糖含量的影响血糖含量(mg％)X±SD空腹 半小时 1小时2小时 3小时82.8±18.3 233.5±65.3 247.6±57.1 144.0±67.695.9±10.3对照组(n＝12) (n＝10) (n＝10) (n＝10)(n＝11)94.1±31.8 195.6±39.1 220.0±39.3 150.4±57.790.7±21.0阳性对照组(n＝10) (n＝11) (n＝10) (n＝11)(n＝10)本发明高剂97.9±23.4 244.6±44.3 154.6±35.4 101.9±33.3100.1±14.3量组 (n＝10) (n＝12) (n＝13)***(n＝13)(n＝12)本发明中剂95.9±22.9 236.8±42.7 185.0±42.1 109.2±32.699.1±10.1量组 (n＝10) (n＝10) (n＝10)***(n＝9) (n＝9)本发明低剂95.4±22.5 224.1±41.7 156.5±48.0 113.8±47.598.4±10.4量组 (n＝10) (n＝10) (n＝8)***(n＝9) (n＝10)***P＜0.001结果及讨论肾上腺素所致动物高血糖模型是用模拟应激性血糖增高的一种方法，相当于成人II型糖尿病患者的精神应激性刺激后的发病状态，因此具有一定的临床意义。
固本降糖胶囊能明显降低肾上腺素性高血糖已为过去的研究所证实。因此选用于本实验作为中药的阳性对照，实验结果表明，固本降糖胶囊组的血糖反应曲线较阴性对照组为低，说明本实验结果是可信的。本发明三个剂量组所呈现的血糖反应曲线也较阴性对照组为低，尤以1小时差异非常显著(P＜0.01)。
本实验结果表明，本发明可以较好地抑制由肾上腺素所致的大鼠血糖增高反应。
二、本发明对小鼠四氧嘧啶糖尿病模型的影响材料与方法1、药品四氧嘧啶造型用药剂量100mg/kg(由日本和光制药工业株式会社出品)，其余试剂均为国家市场销售产品。
2、药物本发明粉为浅棕色，味甘、微涩。药物剂量分别相当于临床成人用量的50倍、37.5倍、25倍。
“固本降糖胶囊”本制药厂实验室生产。
3、动物远交系昆明种小鼠50只，体重20±2g。
4、分组测定空腹血糖后配对均分五组。第一组本发明成人用量的50倍，第二组本发明成人用量的37.5倍，第三组本发明成人用量的25倍，第四组固本降糖胶囊，第五组对照组给予蒸馏水(按大剂量给药剂量算)。
5、病理造型及给药方法动物ig给药，1次/日，连续7天，七天给药后ihr由尾静脉注射四氧嘧啶，剂量100mg/kg造成糖尿病模型，并于第9、10、14、18、22、24天分别自小鼠眼眶后静脉采血测定血糖含量，同时，记录动物死亡数。
6、观察指标按前述采血日测定血糖含量，在第24天处死动物后即刻检胰腺，用Bovw氏固定后进行A、B、细胞组织化学染色、计数。
结果1、各组动物存活情况注射四氧嘧啶后第二天，各组血糖明显升高，死亡情况见表1。在注射四氧嘧啶第4天(即全疗程的第11天)，阴性对照组和固本降糖胶囊组开始出现死亡，疗程结束时阴性对照组总死亡率为70％，固本降糖胶囊组总死亡率为50％，本发明高剂量组(成人用量的50倍)及中剂量组(成人用量的37.5倍)总死亡率为20％，低剂量组(成人用量的25倍)，无1例死亡。
2、各组动物血糖情况各组在造型后血糖都有明显升高，但总的趋势本发明及固本降糖胶囊组均低于对照组，由于对照组发病严重的小鼠在观察期间死亡，因此血糖均值在对照组中并不显著升高。即使如此，在造型后第11天，本发明低剂量组、中剂量组及固本降糖胶囊组血糖与对照组比较，仍有显著差异(P＜0.01)，说明本发明对四氧嘧啶造型小鼠糖病具有一定的保护作用及降血糖作用。
3、胰岛A、B细胞病理检查结果对照组，胰岛数目减少，形态不规则，HE片中尚可见胰岛中少量坏死细胞核碎片，淋巴细胞及组织细胞浸润，A细胞增多，B细胞减少，大部分胰岛中B细胞减少。
本发明低剂量组，大部分标本胰岛数目基本正常，部分胰岛中(3例)A细胞与B细胞比例正常，其他切片属于中度损伤，B细胞稍有减少，A细胞增多。
本发明中剂量组，属于轻度损伤，部分胰岛中出现B细胞减少，A细胞增多。
本发明高剂量组，属于轻度损伤，与阳性对照组比较，病变损伤明显减轻。
固本降糖胶囊组1例为轻度病变，其余为中度病变。
以上结果表明本发明及固本降糖胶囊组对四氧嘧啶造型小鼠胰岛B细胞具有一定保护作用，并能降低胰腺损伤程度和小鼠死亡率，其中用药组低剂量最为明显。
三、本发明对过氧化脂质、单胺氧化酶、超氧化物歧化酶的影响过氧化脂质(LPO)是化合物中或游离的不饱和脂肪酸受自由基作用生成的过氧化物，成人糖尿病由于代谢障碍(糖和肪质)致使过氧化脂质增加，并可促进糖尿病合并症的发展。因此，测定过氧化脂质对观察本发明的疗效是一项重要的指标。
单胺氧化酶(Monoamine oxdase MAO)是一类广泛存在于生物体不同组织中的单胺氧化酶类，它具有催化不同类型单胺的氧化脱氧作用。有人发现人脑血和血小板中单胺氧化酶(WAO、EC、1、4、1、3)的活性随着年龄的增长而明显增多，特别是70年代以来，由于发现衰老过程和某些老年性疾病与单胺氧化酶B(MAO-B)的活性有密切关系。人们一直寻求应用适当的单胺氧化酶抑制剂(MAOI)来选择地抑制MAO--B以达到治疗某些老年性疾病之目的。
超氧化物歧化酶(SOD)是具有消除自由基作用的主要酶类之一，从而降低过氧化脂质的水平。在某些病理的情况下，例如辐射损伤和衰老，自由基增高时可引起过氧化脂质的增高。因此测定血清或组织中的LPO和SOD可以了解自由基的代谢情况。糖尿病患者的血管损伤性合并症与LPO及SOD相关，本实验之目的即在于了解本发明在此方面的作用。
材料与方法用LCR纯系小鼠，体重25-30g，配对分组，设正常对照组和阳性对照组(固本降糖胶囊)，本发明设高、中、低三个剂量组。高剂量(成人用量的50倍)，中剂量(成人用量的37.5倍)，低剂量(成人用量的25倍)。给药途径灌胃，每天一次，给药二周后放血处死。分别采集血、脑、肝做MAO-B、LPO、SOD测定。
一、LPO的测定，鼠肝或脑作10％组织匀浆，取0.1ml→加8.1％SDS0.2ml；PH3.5，20％HACbufferl？1.5ml；0.8％TBA 1.5ml；蒸馏水0.5ml→搅拌后95℃水浴1小时→水冲试管冷却→加正丁醇吡啶(15∶1)3ml振荡后离心(3000转/分)15分钟→在532nm波长下测定光密度值(O、D)二、MAO-B的测定，取→组织称重→加10倍体积的予冷的PH7.4，0.2MP.B缓冲液研磨成匀浆→1000g4℃离心10分钟→除沉淀取上清4℃下17000g离心30分钟→取沉淀用0.3ml0.2MP.B缓冲液悬浮即得粗酶，在带有磨口盖的试管中加入0.3ml80mM苄胺；2.4ml0.2MPH7.4P.B→37℃水浴振荡3小时→加60％PCAO0.3ml终止反应，再加环己烷3ml振荡3分钟→3000转/分离心10分钟→取上清在242nm波长上下测光密度(O.D值)。
三、SOD的测定参照丁克祥微量指血超氧化物歧化酶快速测定方法进行。
结果与讨论本发明对小鼠脑LPO的影响组别(n＝8)X±SD(0.D值)LP正常对照 0.55±0.046阳性对照(固本降糖胶囊)0.220±0.06411.84 ＜0.01低剂量组 0.424±0.0346.23＜0.0 1中剂量组 0.315±0.0737.70＜0.01高剂量组 0.250±0.06111.10 ＜0.01本发明对小鼠肝LPB的影响组别(n＝8)X±SD(0.D值) LP正常对照 0.54±0.035阳性对照(固本降糖胶囊)0.370±0.0646.59＜0.01低剂量组 0.460±0.0832.51＜0.05中剂量组 0.430±0.0753.76＜0.01高剂量组 0.355±0.0855.69＜0.01
本发明对小鼠脑MAOB的影响组别(n＝8) X±SD(0.D值) L P正常对照 0.466±0.07阳性对照(固本降糖胶囊) 0.213±0.0786.28 ＜0.01低剂量组 0.332±0.0234.38 ＜0.01中剂量组 0.315±0.0464.42 ＜0.01高剂量组 0.217±0.0557.23 ＜0.01本发明对小鼠SOD的影响组别(n＝8)X±SD(0.D值) L P正常对照 0.147±0.013阳性对照(固本降糖胶囊)0.171±0.011 3.99 ＜0.01低剂量组 0.165±0.014 2.66 ＜0.05中剂量组 0.169±0.010 3.79 ＜0.01高剂量组 0.170±0.015 3.28 ＜0.01上述实验结果表明，本发明具有明显降低小鼠脑、肝过氧化脂质的作用，为阻止糖尿病合并症的发展提供实验依据，同时对小鼠脑单胺氧化酶B有明显的降低作用，起到了单胺氧化酶抑制剂的作用，对超氧化物歧化酶有明显的增强作用。本发明的这些作用可能为临床防治糖尿病及其并发症提供实验依据。
四、本发明对小鼠骨髓细胞胰岛素受体及肾上腺皮质激素受体的影响材料与方法动物(1)取纯系ICL小鼠，6月龄，体重(18±2)g，雄性10只，均分4组，I组为阴性对照，II组为已知药物阳性对照(固本降糖胶囊)，III组为本发明低剂量组(成人用量的12.5倍)，IV组为本发明高剂量组(成人用量的25倍)。
(2)取纯系ICL小鼠，18月龄，体重(35±2)g，雄性40只，均分4组，每组用药情况同(1)，以上各组均为测定胰岛素受体用。
(3)Weistar大鼠20只，雄性，体重(200±10)g，均分4组，各组给药情况同(1)，用于测定肾上腺皮质激素受体。
1、试剂(1)1-14-A-单碘原子胰岛素，由四川华西医科大学同位素室提供。放射强度223μci/mg，非标记胰岛素为Sigma产品。
(2)6、7-[A]Atdosterone放射强度为72ci/nnik(New England Nucleor Comp)非标记Atdosterone(Slgma CO)出品。
3、测定方法(1)胰岛素受体测定取小鼠骨髓细胞按常规方法制成细胞悬液使成5-7×107/ml反应管总液量为1ml，其中I胰岛素为0.1ml，CPM值为按需要量调整，并加1000倍的非标记物，22℃孵育2小时，0℃冰水浴中止反应，置49型纤维滤膜抽滤，清洗后置Fi2003型免疫计数器，测定CPM值并计算。
CV 2.44并绘制Scatchard Plot，以[I]胰岛素20nM至20nM问取7个点，结果有明显饱和现象，Scatchard Plot计算结果见表1。分别测定6月龄及18月龄小鼠的骨髓细胞胰岛素受体数目(取一点法10nM)结果见表II。
(2)肾上腺皮质激素受体测定大鼠麻醉后以冷缓冲液A(20nM Na-Phosphate PH7.4 1mM disodium EDTA 2mM 2-hydroxyethymercaptane and10％giycerol(Wt/Vol)心脏灌注，除血。0℃冷室内操作，取脑，称重，加2ml缓冲液A，用玻璃匀浆器匀浆，离心85000×9×45min，取上清匀浆用Lowryis法测定蛋白含量，Dexamethasone取6个点(0.5nM-10nM)100倍非标记物竞争，以羟基磷灰石为分离剂，离心10000×g 10min取上清加入闪烁液内测定CPM，并作Schathard Plot，结果见表III。
结果与讨论1、本发明可使18月龄小鼠骨髓细胞胰岛素受体数目上升，但对6月龄无作用，老龄鼠胰岛素受体数目有随龄增而下降之势，故本发明起到恢复作用。
2、本发明可以干扰肾上腺皮质激素受体，使之结合力下降，Bamx降低，这对于防治糖尿病也是有利的。
以上结果表明本发明用于胰岛素受体功能低下状态的老年鼠可以使之受体结合能力上调，因此，本发明可作为胰岛素受体调节剂而应试于临床。
表II本发明对不同龄小鼠骨髓细胞胰岛素的作用分组 受点数目(一点法10nM) P阴性对照 693±392阳性对照 839±198 ＞0.056月龄本发明(低)910±466 ＞0.05本发明(高)899±446 ＞0.05阴性对照 383±230阳性对照 1027±441 ＜0.0118月龄本发明(低)1130±430 ＜0.01本发明(高)1240±340 ＜0.01表III本发明对肾上腺皮脂激素受体的作用组别r kd(m)Bmax fmol mg protI III III II1.1×阴性对照0.89 0.95 12×1028911010阳性对照0.87 0.85 1.13.1130102本发明(低) 0.88 0.87 1.02.9120100本发明(高) 0.87 0.86 0.92.111096I糖皮质激素受体II盐皮质激素受体五、本发明对人体胚肺二倍体成纤维细胞生长及PAS反应的影响材料与方法一、细胞培养人胚肺成纤维细胞(2BS细胞)由北京生物制品研究所提供，传代寿命为55±10代。从液氮中复苏人胚肺成纤维细胞40代龄，用含10％小牛血清的EagleMEM培养液，10％NaHCO3，调PH为7.2-7.4，加2ml-谷氨酰胺，37℃温箱孵育，待细胞生长汇合成单层后，用0.25％胰蛋白酶消化2分钟，弃胰酶加培养液吹打制成细胞悬液，以1∶2的比率传代培养备实验用。
二、药品的配制本发明取10g溶于200ml重蒸水中，经磁力搅拌24小时，滤除不溶解颗粒，滤过液加MEM培养基干粉，溶解后G6滤器抽滤灭菌，调成含10％小牛血清，PH＝7.2，滤过液为本发明水溶性部分，原液浓度为50mg/ml。
三、方法与分组(一)急性毒性实验 取生长状态良好的40代龄2BS细胞数瓶，经0.25％胰蛋白酶消化，弃胰酶加10ml培养液吹打，制备成细胞悬液，经细胞计数，稀释成细胞浓度为20万/ml悬液，取30瓶底面积为13.8cm2接种瓶，每瓶接种1ml细胞悬液，3ml含药品培养基，对照组3瓶，加药组每个浓度3瓶共33瓶，加药组以37.5mg/ml为起始浓度，以下各浓度均按1∶0∶7比率稀释，经37℃温箱孵育4小时，细胞计数，所得结果经计算机处理，求出药物对细胞帖壁率影响的半数有效量(EDx)。
(二)本发明对2BS细胞生长抑制实验、细胞培养、细胞悬液的制备均同急性毒性实验，本实验以毒性实验中不影响细胞帖壁率的浓度为本发明对2BS细胞生长抑制实验的第一个剂量，浓度为1050μg/ml，以下浓度按1∶0.5比率稀释，取24瓶底面积为13.8cm2的小方瓶，3瓶为一组，一组对照，实验各组均加1ml细胞，细胞内PAS反应下降，说明了细胞内合成多糖能力降低或者分解代谢增强，从本实验的结果来看，本发明可以显著增加晚代细胞内多糖类的含量，此点在调节糖代谢方面对机体是有益的本实验也表明，本发明可以在细胞水平直接对糖代谢发生影响。此点结合前文本发明在整体水平对胰岛素受体的作用可以相互印证。
下述实施例为进一步公开本发明，需要说明的是这些实施例仅为本发明的优选方式，并不限制本发明要求保护的范围。
实施例1人参皂苷6重量份 黄芪124重量份 地黄186重量份麦冬62重量份 天花粉62重量份枸杞124重量份五味子62重量份山药62重量份 覆盆子31重量份茯苓62重量份 泽泻62重量份。
山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清二次，每次2小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.30(55-60℃)的稠膏，五味子用50％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮二次，每次2小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为60％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀或干燥，混匀，加入羧基纤维素钠适量，制粒，干燥整粒，分装即得。
测定方法为(1)人参皂苷Re的测定方法为对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml中含人参皂苷Re0.4mg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约1克，加氯仿20ml，水浴回流1小时，滤过，弃去氯仿，残渣挥干溶剂，残渣连同滤纸置于同一具赛锥形瓶中，加正丁醇饱和的水2ml润湿，精密加入用水饱和正丁醇50ml超声提取30min，精密量取上清液25ml，加氨试液三倍量，摇匀，放置，分取上层溶液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定量移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为99∶400的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相；检测波长203nm；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含人参皂苷Re0.1mg。
(2)黄芪甲苷的测定方法为色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；蒸发光散射检测器；流动相比例为33∶67∶4的乙腈-水-四氢呋喃；对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约10克，加水50ml溶解，滤过，滤液用石油醚脱脂2次，水饱和的正丁醇振摇提取4次(每次50ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次40ml，弃去氨试液，用正丁醇饱和的水40ml洗，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内经1.5cm，长18cm)，以水100mL洗脱，弃去水液，再用40％乙醇50ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含黄芪甲苷0.02mg。
实施例2人参皂苷4重量份 黄芪150重量份 地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份枸杞160重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份 泽泻80重量份将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清1次，每次3小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.30(55-60℃)的稠膏，五味子用70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次2小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为60％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并或干燥，加药用乳糖、蛋白糖适量干法制粒，包装，既得。
测定方法为(1)人参皂苷Re的测定方法为对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml中含人参皂苷Re0.4mg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约1克，加氯仿20ml，水浴回流1小时，滤过，弃去氯仿，残渣挥干溶剂，残渣连同滤纸置于同一具赛锥形瓶中，加正丁醇饱和的水2ml润湿，精密加入用水饱和正丁醇50ml超声提取30min，精密量取上清液25ml，加氨试液三倍量，摇匀，放置，分取上层溶液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定量移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为99∶400的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相；检测波长203nm；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含人参皂苷Re1.0mg。
(2)黄芪甲苷的测定方法为色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；蒸发光散射检测器；流动相比例为33∶67∶4的乙腈-水-四氢呋喃；
对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约10克，加水50ml溶解，滤过，滤液用石油醚脱脂2次，水饱和的正丁醇振摇提取4次(每次50ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次40ml，弃去氨试液，用正丁醇饱和的水40ml洗，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内经1.5cm，长18cm)，以水100mL洗脱，弃去水液，再用40％乙醇50ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含黄芪甲苷0.1mg。
实施例3人参皂苷8重量份 黄芪80重量份 地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份枸杞160重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份 泽泻80重量份将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清1次，每次2小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10(55-60℃)的稠膏，五味子用50％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次2小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为70％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀或干燥，加药用焦糖适量，混匀制粒，装胶囊，包装，即得。
实施例4人参皂苷8重量份 黄芪150重量份 地黄150重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份枸杞160重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份泽泻80重量份将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次2小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，五味子用60％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮3次，每次1小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为75％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并或干燥，加适量淀粉，泛制成丸，即得丸剂。
实施例5人参皂苷8重量份 黄芪150重量份 地黄250重量份麦冬45重量份 天花粉80重量份枸杞160重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份 泽泻80重量份麦冬用温水浸清1次，每次3小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10(55-60℃)的稠膏，五味子用50％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮2次，每次2小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为70％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，人参茎叶皂甙用乙醇溶解，加入规定浓度的乙醇，搅拌，过滤，即得酊剂。
实施例6人参皂苷8重量份 黄芪150重量份地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉40重量份 枸杞160重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份 泽泻80重量份将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清3次，每次1小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，五味子用50％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮3次，每次1小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为70％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，干燥，将基质加热熔融，加入干燥药粉，混匀，倾入涂有脱模剂的栓模中，冷却，取出，即得栓剂。
实施例7人参皂苷8重量份 黄芪150重量份 地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份枸杞80重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份 泽泻80重量份麦冬用温水浸清2次，每次1小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10(55-60℃)的稠膏，五味子用60％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮2次，每次2小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为80％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙与麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，另取蔗糖制成糖浆，与上述浸膏合并，加水制全量，过滤，灌装，灭菌，即得合剂。
实施例8人参皂苷8重量份 黄芪150重量份地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份 枸杞160重量份五味子40重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份 泽泻80重量份将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次1.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.25(55-60℃)的稠膏，五味子用50％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮3次，每次1小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为75％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀，干燥成细粉，过筛，即得散剂。
实施例9人参皂苷8重量份 黄芪150重量份 地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份枸杞160重量份五味子80重量份山药40重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份 泽泻80重量份将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清1次，每次2小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，五味子用55％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为80％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，干燥，制颗粒，干燥，压片，即得片剂。
实施例10人参皂苷8重量份 黄芪150重量份 地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份枸杞160重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子20重量份茯苓80重量份 泽泻80重量份将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次1.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10(55-60℃)的稠膏，五味子用50％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮3次，每次1小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为75％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，干燥，取PVA加蒸馏水浸泡，加热溶解，再加入干浸膏粉，搅拌溶解，再加入甘油、吐温-80，搅匀，静置除去气泡，涂布在玻板上制膜，80℃脱膜，剪成适当大小，密封，即得膜剂。
实施例11人参皂苷8重量份 黄芪150重量份 地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份枸杞160重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓40重量份 泽泻80重量份山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次0.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，五味子用45％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮4次，每次0.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为65％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，干燥，取聚乙二醇加热熔融，加入干粉，滴制成丸，包装，即得滴丸剂。
实施例12人参皂苷8重量份 黄芪150重量份 地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份枸杞160重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份 泽泻40重量份。
麦冬用温水浸清1次，每次3小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.30(55-60℃)的稠膏，五味子用70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮1次，3小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为80％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓等浸膏合并，加10倍量水，加入人参茎叶皂甙，冷沉48小时，滤过，滤液浓缩，至调节PH至8，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，加注射用水至全量，过滤，精滤，灌封灭菌，检验，即得注射液。
实施例13人参皂苷2重量份黄芪250重量份 地黄300重量份麦冬120重量份 天花粉120重量份枸杞250重量份五味子120重量份山药120重量份 覆盆子100重量份茯苓150重量份 泽泻120重量份。
麦冬用温水浸清2次，每次2小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10-1.20的稠膏，五味子用40％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮4次，每次0.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为70％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30，将上述麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药等浸膏合并，取人参茎叶皂甙加水溶解与浸膏合并，加10倍量水，冷沉48小时，滤过，滤液浓缩，至调节PH至7.5，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，加注射用水至全量，过滤，精滤，冷冻干燥无菌分装，检验，即得粉针。
实施例14人参皂苷15重量份 黄芪40重量份 地黄300重量份麦冬120重量份天花粉120重量份 枸杞250重量份五味子120重量份 山药120重量份覆盆子100重量份茯苓150重量份泽泻120重量份。
麦冬用温水浸清3次，每次0.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.20-1.30的稠膏，五味子用50％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为75％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30，将上述麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药等浸膏合并，取人参茎叶皂甙加水溶解与浸膏合并，加10倍量水，冷沉48小时，滤过，滤液浓缩，至调节PH至7，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，加注射用水至全量，过滤，精滤，灌封灭菌检验，即得输液。
实施例15人参皂苷15重量份 黄芪250重量份 地黄80重量份麦冬120重量份天花粉120重量份枸杞250重量份五味子120重量份 山药120重量份 覆盆子100重量份茯苓150重量份泽泻120重量份。
麦冬用温水浸清2次，每次2.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.15的稠膏，五味子用60％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮3次，每次1小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为60％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30，将上述麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药等浸膏合并，人参茎叶皂甙乙醇溶解，合并，加入规定浓度的乙醇，搅拌，过滤，即得酊剂。
实施例16人参皂苷15重量份 黄芪250重量份 地黄300重量份麦冬20重量份 天花粉120重量份枸杞250重量份五味子120重量份山药120重量份 覆盆子100重量份茯苓150重量份 泽泻120重量份。
麦冬用温水浸清2次，每次2小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.18的稠膏，五味子用50％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为50％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30，将上述人参茎叶皂甙与麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药等浸膏合并，另取蔗糖加水适量加热煮沸，溶解，过滤，浓缩制成糖浆，与上述浓缩液混匀，煮沸，放冷，加入防腐剂和香精，加水稀释，即得糖浆剂。
实施例17人参皂苷15重量份 黄芪250重量份 地黄300重量份麦冬120重量份 天花粉20重量份枸杞250重量份五味子120重量份山药120重量份覆盆子100重量份茯苓150重量份 泽泻120重量份。
麦冬用温水浸清2次，每次1小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.1的稠膏，五味子用55％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮3次，每次0.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为40％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.10，将上述人参茎叶皂甙与麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药等浸膏合并，另取蔗糖制成糖浆，与上述药液合并，加水制全量，过滤，灌装，灭菌，即得合剂。
实施例18人参皂苷15重量份 黄芪250重量份地黄300重量份麦冬120重量份 天花粉120重量份 枸杞40重量份五味子120重量份山药120重量份覆盆子100重量份茯苓150重量份 泽泻120重量份。
将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次1.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10的稠膏，五味子用40-70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次2.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为55％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.10，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀，加入PVC适量，制粒，干燥整粒，分装即得。
测定方法为(1)人参皂苷Re的测定方法为对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml中含人参皂苷Re0.4mg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约1克，加氯仿20ml，水浴回流1小时，滤过，弃去氯仿，残渣挥干溶剂，残渣连同滤纸置于同一具赛锥形瓶中，加正丁醇饱和的水2ml润湿，精密加入用水饱和正丁醇50ml超声提取30min，精密量取上清液25ml，加氨试液三倍量，摇匀，放置，分取上层溶液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定量移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为99∶400的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相；检测波长203nm；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含人参皂苷Re 5.0mg。
(2)黄芪甲苷的测定方法为色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；蒸发光散射检测器；流动相比例为33∶67∶4的乙腈-水-四氢呋喃；对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约10克，加水50ml溶解，滤过，滤液用石油醚脱脂2次，水饱和的正丁醇振摇提取4次(每次50ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次40ml，弃去氨试液，用正丁醇饱和的水40ml洗，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内经1.5cm，长18cm)，以水100mL洗脱，弃去水液，再用40％乙醇50ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含黄芪甲苷0.08mg。
实施例19人参皂苷15重量份 黄芪250重量份 地黄300重量份麦冬120重量份天花粉120重量份枸杞250重量份五味子20重量份 山药120重量份 覆盆子100重量份茯苓150重量份泽泻120重量份。
将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次1.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10的稠膏，五味子用40-70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次2.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为55％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.10，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀，加入甲基纤维素适量，制粒，干燥整粒，分装即得。
测定方法为(1)人参皂苷Re的测定方法为对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml中含人参皂苷Re0.4mg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约1克，加氯仿20ml，水浴回流1小时，滤过，弃去氯仿，残渣挥干溶剂，残渣连同滤纸置于同一具赛锥形瓶中，加正丁醇饱和的水2ml润湿，精密加入用水饱和正丁醇50ml超声提取30min，精密量取上清液25ml，加氨试液三倍量，摇匀，放置，分取上层溶液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定量移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为99∶400的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相；检测波长203nm；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含人参皂苷Re 0.5mg。
(2)黄芪甲苷的测定方法为色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；蒸发光散射检测器；流动相比例为33∶67∶4的乙腈-水-四氢呋喃；对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约10克，，加水50ml溶解，滤过，滤液用石油醚脱脂2次，水饱和的正丁醇振摇提取4次(每次50ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次40ml，弃去氨试液，用正丁醇饱和的水40ml洗，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内经1.5cm，长18cm)，以水100mL洗脱，弃去水液，再用40％乙醇50ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含黄芪甲苷0.04mg。
实施例20人参皂苷15重量份 黄芪250重量份 地黄300重量份麦冬120重量份 天花粉120重量份枸杞250重量份五味子120重量份山药20重量份 覆盆子100重量份茯苓150重量份 泽泻120重量份。
将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次1.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10的稠膏，五味子用40-70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次2.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为55％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.10，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀，加入阿拉伯胶适量，制粒，干燥整粒，分装即得。
实施例21人参皂苷15重量份 黄芪250重量份地黄300重量份麦冬120重量份天花粉120重量份 枸杞250重量份五味子120重量份 山药120重量份覆盆子15重量份茯苓150重量份泽泻120重量份。
将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次1.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10的稠膏，五味子用40-70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次2.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为55％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.10，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀，加入西黄芪胶适量，制粒，干燥整粒，分装即得。
实施例22人参皂苷15重量份 黄芪250重量份 地黄300重量份麦冬120重量份 天花粉120重量份 枸杞250重量份五味子120重量份山药120重量份 覆盆子100重量份茯苓20重量份 泽泻120重量份。
将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次1.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10的稠膏，五味子用40-70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次2.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为55％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.10，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀，加入海藻酸钠或海藻酸钾适量，制粒，干燥整粒，分装即得。
实施例23人参皂苷15重量份 黄芪250重量份 地黄300重量份麦冬120重量份 天花粉120重量份枸杞250重量份五味子120重量份山药120重量份 覆盆子100重量份茯苓150重量份 泽泻20重量份。
将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次1.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10的稠膏，五味子用40-70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次2.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为55％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.10，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀，加入糊精适量，制粒，干燥整粒，分装即得。
测定方法为(1)人参皂苷Re的测定方法为对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml中含人参皂苷Re0.4mg的溶液，作为对照品溶液；
供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约1克，加氯仿20ml，水浴回流1小时，滤过，弃去氯仿，残渣挥干溶剂，残渣连同滤纸置于同一具赛锥形瓶中，加正丁醇饱和的水2ml润湿，精密加入用水饱和正丁醇50ml超声提取30min，精密量取上清液25ml，加氨试液三倍量，摇匀，放置，分取上层溶液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定量移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为99∶400的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相；检测波长203nm；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含人参皂苷Re10mg。
(2)黄芪甲苷的测定方法为色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；蒸发光散射检测器；流动相比例为33∶67∶4的乙腈-水-四氢呋喃；对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约10克，加水50ml溶解，滤过，滤液用石油醚脱脂2次，水饱和的正丁醇振摇提取4次(每次50ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次40ml，弃去氨试液，用正丁醇饱和的水40ml洗，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内经1.5cm，长18cm)，以水100mL洗脱，弃去水液，再用40％乙醇50ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含黄芪甲苷0.5mg。
权利要求
1.一种治疗糖尿病的中药组合物，其特征在于它是由下述原料制备而成的人参皂苷4-8重量份黄芪80-150重量份地黄150-250重量份麦冬45-80重量份 天花粉40-80重量份 枸杞80-160重量份五味子40-80重量份山药40-80重量份 覆盆子20-50重量份茯苓40-80重量份 泽泻40-80重量份。
2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于各原料的配比为人参皂苷6重量份 黄芪124重量份 地黄186重量份麦冬62重量份 天花粉62重量份 枸杞124重量份五味子62重量份 山药62重量份覆盆子31重量份茯苓62重量份 泽泻62重量份。
3.如述权利要求1或2所述组合物，其特征在于该药物组合物加入赋形剂制成临床可接受的各种剂型。
4.如权利要求3所述的中药组合物，其特征在于其剂型优选为颗粒剂。
5.如权利要求4所述的制剂，其特征在于每克颗粒含人参皂苷Re0.1-10mg。
6.如权利要求4所述的制剂，其特征在于每克颗粒含黄芪甲苷0.02-0.5mg。
7.如权利要求5或6所述的有效成分，其特征在于测定方法为(1)人参皂苷Re的测定方法为对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml中含人参皂苷Re0.4mg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约1克，加氯仿20ml，水浴回流1小时，滤过，弃去氯仿，残渣挥干溶剂，残渣连同滤纸置于同一具赛锥形瓶中，加正丁醇饱和的水2ml润湿，精密加入用水饱和正丁醇50ml超声提取30min，精密量取上清液25ml，加氨试液三倍量，摇匀，放置，分取上层溶液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定量移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为99∶400的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相；检测波长203nm；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定；(2)黄芪甲苷的测定方法为色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；蒸发光散射检测器；流动相比例为33∶67∶4的乙腈—水—四氢呋喃；对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约10克，加水50ml溶解，滤过，滤液用石油醚脱脂2次，水饱和的正丁醇振摇提取4次(每次50ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次40ml，弃去氨试液，用正丁醇饱和的水40ml洗，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内经1.5cm，长18cm)，以水100mL洗脱，弃去水液，再用40％乙醇50ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，即得。
8.如权利要求5所述的中药组合物，其特征在于其制备方法为将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸提1-3次，每次0.5-3小时，合并浸提液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.03-1.40的稠膏，五味子用40-70％乙醇渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度约为1.10-1.40稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮1-4次，每次0.5-3小时，合并煎煮液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为40％-80％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.1-1.40，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并或干燥，加药用辅料按常规制剂工艺制成临床所需剂型。
9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于之中还加入助悬剂如乙基羟乙基纤维素、甲壳素、甲基纤维素、西黄芪胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、海藻酸钾、海藻酸钙、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、糊精。
10.如权利要求9所述的制备方法可用下法代替麦冬用温水浸提1-3次，每次0.5-3小时，合并浸提液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.03-1.40的稠膏，五味子用40-70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮1-4次，每次0.5-3小时，合并煎煮液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为40％-80％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩，将上述麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药等浸膏人参皂甙合并或干燥后再与人参皂甙，加药用辅料按常规制剂工艺制成临床所需剂型。
全文摘要
本发明公开了一种治疗糖尿病的中药组合物，是由人参(茎叶)皂苷、黄芪、地黄、麦冬、天花粉、枸杞、五味子、山药、覆盆子、茯苓、泽泻十一味药为原料，根据每味中药效应成分的不同理化性质，分别以不同的物理或化学方法处理后制备而成的有效制剂。本发明配方独特，临床上用于治疗糖尿病效果显著。
文档编号A61P3/00GK1616014SQ200410073959
公开日2005年5月18日 申请日期2004年9月17日 优先权日2004年9月17日
发明者赵志全 申请人:鲁南制药股份有限公司
技术领域：
本发明涉及一种治疗糖尿病的中药组合物，具体地说是以中药材为原料，制备而成的中成药，同时涉及该药物的制备方法。
背景技术：
糖尿病是一种复合病因的综合病症，是由于体内胰岛素缺乏或拮抗胰岛素的激素增加，或胰岛素在靶细胞内不能发挥正常生理作用而引起的葡萄糖、蛋白质及脂质代谢紊乱的一种综合病症。其特征为血循环中葡萄糖浓度异常升高及尿糖、血糖过高时出现典型的“三多一少”症状，即多次、多尿、多食及体重减轻，且伴有疲乏无力。严重者可发生酮症酸中毒、高渗性糖尿病昏迷，且易合并多种感染。随着病程的延长，其代谢紊乱可导致眼、肾、神经、血管及心脏等组织器官的慢性病变。若得不到及时、恰当的治疗，则发生心脏病变、脑血管病变、肾功能衰竭、双目失明、下肢坏死等情况，成为致残、致死的主要原因。且糖尿病发病率高，1995-1996年的全国抽样调查，20岁以上自然人群患病率为高达3.21％，1980年全国30万人口调查结果，60岁以上患病率4.21％，单江苏老年人群糖尿病、糖耐量低减患病率则分别为14.49％和10.21％，而且无论是发达国家或发展中国家，糖尿病的发病率都在逐年上升。
目前临床治疗2型的药物除胰岛素外，多是化学药物，应用广泛的大致可分为磺脲类、双胍类、其他降糖药及辅助用药。磺脲类降糖药物是最主要的糖尿病治疗药物。能使肝糖原合成增多，再通过对细胞受体或受体后的作用，使周围组织对胰岛素的敏感性增强，对葡萄糖的摄取增多，从而达到降低血糖的作用。但较易引发低血糖、粒细胞减少及心血管疾病等不良反应。双胍类降糖药大剂量可引起消化道反应，在肺、肝、肾有病变的患者易致乳酸性酸中毒。给广大患者用药安全带来隐患，为改变这种状况，长期以来，临床上一直尝试用植物中草约进行治疗。中医对糖尿病的病因看法较一致，认为主要是过食肥甘、五志过极、房室不节、热病火燥及先天禀赋不足几个因素。《吉林中医药》2003，23(8)14报道刘广庆用固本降糖胶囊(由黄芪、人参、山茱萸、熟地黄、山药、枸杞子、五味子、生龙骨、生牡蛎、生地黄、天花粉、丹参、山楂制成)治疗139例糖尿病患者，结果显效48例，有效71例，无效20例，总有效率86％。
发明内容
本发明的目的是是提供一种有效治疗糖尿病的中药组合物，本发明的另一个目的提供该中药组合物的制备方法。
为达到上述目的，我们采用了以下的技术方案本发明中药组合物是由下述重量比的原料制成的人参皂苷4-8重量份黄芪80-150重量份地黄150-250重量份麦冬45-80重量份 天花粉40-80重量份 枸杞80-160重量份五味子40-80重量份山药40-80重量份 覆盆子20-50重量份茯苓40-80重量份 泽泻40-80重量份。
本发明中药组合物的原料的重量比优选为人参(茎叶)皂苷6重量份 黄芪124重量份 地黄186重量份麦冬62重量份天花粉62重量份枸杞124重量份五味子62重量份 山药62重量份 覆盆子31重量份茯苓62重量份泽泻62重量份。
本发明中药组合物，可以通过常规的制剂工艺制备成为临床可接受的各种剂型如颗粒剂、片剂、丸剂、胶囊剂、注射剂或口服液、酊剂、栓剂、合剂、散剂、洗剂、膜剂、滴丸等。
本发明中药组合物的剂型优选为颗粒剂。
本发明颗粒剂每克颗粒含人参皂苷Re0.1-10mg，每克颗粒含黄芪甲苷0.02-0.5mg。
本发明颗粒剂的测定方法为(1)人参皂苷Re的测定方法为对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml中含人参皂苷Re0.4mg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约1克，加氯仿20ml，水浴回流1小时，滤过，弃去氯仿，残渣挥干溶剂，残渣连同滤纸置于同一具赛锥形瓶中，加正丁醇饱和的水2ml润湿，精密加入用水饱和正丁醇50ml超声提取30min，精密量取上清液25ml，加氨试液三倍量，摇匀，放置，分取上层溶液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定量移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为99400的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相；检测波长203nm；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定；(2)黄芪甲苷的测定方法为色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；蒸发光散射检测器；流动相比例为33∶67∶4的乙腈-水-四氢呋喃；对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约10克，加水50ml溶解，滤过，滤液用石油醚脱脂2次，水饱和的正丁醇振摇提取4次(每次50ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次40ml，弃去氨试液，用正丁醇饱和的水40ml洗，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内经1.5cm，长18cm)，以水100mL洗脱，弃去水液，再用40％乙醇50ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪测定；本发明组合物的制备方法为将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸提1-3次，每次0.5-3小时，合并浸提液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.03-1.40的稠膏，五味子用40-70％乙醇渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度约为1.10-1.40稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮1-4次，每次0.5-3小时，合并煎煮液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为40％-80％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.1-1.40，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并或干燥，加药用辅料按常规制剂工艺制成临床所需剂型。
为了防止药粉在液体制剂或颗粒中分层或沉淀常在制剂中加入助悬剂如乙基羟乙基纤维素、甲壳素、甲基纤维素、西黄芪胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、海藻酸钾、海藻酸钙、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、糊精等。
如上所述的制备方法可用下法代替
麦冬用温水浸提1-3次，每次0.5-3小时，合并浸提液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.03-1.40的稠膏，五味子用40-70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮1-4次，每次0.5-3小时，合并煎煮液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为40％-80％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩，将上述麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药等浸膏人参皂甙合并或干燥后再与人参皂甙，加药用辅料按常规制剂工艺制成临床所需剂型。
本发明药物治疗糖尿病具有很好的疗效。为表明本发明药物对糖尿病的治疗作用，我们做了大量的实验研究，下面实验例用于进一步说明本发明。
一、本发明对造成大鼠肾上腺素高血糖模型的影响II型糖尿病是老年人的常见病、多发病。经临床疗效及实验证实，本发明具有一定的降血糖作用。本实验是用肾上腺来加速大鼠体内糖元及脂肪分解，使大鼠血中葡萄糖浓度增高。肾上腺素还能抑制大鼠体内的胰岛素释放。同时再给大鼠灌一定剂量葡萄糖加速造成高血糖模型。从实验结果来看，给药组与对照组比较，本发明有很明显的降血糖作用，同时我们与固本降糖胶囊作为阳性对照组。
材料动物Wistar大鼠，雌雄各半，体重为230±30g药物1、本发明原粉，为浅棕色至棕褐色，味甘，微涩。药效剂量分别为临床用药量的50倍、37.5倍、25倍)。
2、固本降糖胶囊，本制药厂实验室生产。
方法与结果取大鼠50只，随机分为5组，每组10只。第一组为阴性对照组，给予蒸馏水。第二组为阳性对照组，给固本降糖胶囊。第三、四、五组分别为本发明的高、中、低三个剂量组，剂量分别为临床用药量的50倍、37.5倍、25倍，动物灌胃给药，药程一个月，末次给药后1小时，按500μg/kg的剂量注射肾上腺素，造成肾上腺高血糖模型，同时与葡萄糖1g/kg的剂量灌胃，加速模型的建立，采用葡萄糖氧化酶法分别测定空腹、半小时、1小时、2小时、3小时的血糖变化，其结果见表1。
表1本发明对肾上腺素造型大鼠血糖含量的影响血糖含量(mg％)X±SD空腹 半小时 1小时2小时 3小时82.8±18.3 233.5±65.3 247.6±57.1 144.0±67.695.9±10.3对照组(n＝12) (n＝10) (n＝10) (n＝10)(n＝11)94.1±31.8 195.6±39.1 220.0±39.3 150.4±57.790.7±21.0阳性对照组(n＝10) (n＝11) (n＝10) (n＝11)(n＝10)本发明高剂97.9±23.4 244.6±44.3 154.6±35.4 101.9±33.3100.1±14.3量组 (n＝10) (n＝12) (n＝13)***(n＝13)(n＝12)本发明中剂95.9±22.9 236.8±42.7 185.0±42.1 109.2±32.699.1±10.1量组 (n＝10) (n＝10) (n＝10)***(n＝9) (n＝9)本发明低剂95.4±22.5 224.1±41.7 156.5±48.0 113.8±47.598.4±10.4量组 (n＝10) (n＝10) (n＝8)***(n＝9) (n＝10)***P＜0.001结果及讨论肾上腺素所致动物高血糖模型是用模拟应激性血糖增高的一种方法，相当于成人II型糖尿病患者的精神应激性刺激后的发病状态，因此具有一定的临床意义。
固本降糖胶囊能明显降低肾上腺素性高血糖已为过去的研究所证实。因此选用于本实验作为中药的阳性对照，实验结果表明，固本降糖胶囊组的血糖反应曲线较阴性对照组为低，说明本实验结果是可信的。本发明三个剂量组所呈现的血糖反应曲线也较阴性对照组为低，尤以1小时差异非常显著(P＜0.01)。
本实验结果表明，本发明可以较好地抑制由肾上腺素所致的大鼠血糖增高反应。
二、本发明对小鼠四氧嘧啶糖尿病模型的影响材料与方法1、药品四氧嘧啶造型用药剂量100mg/kg(由日本和光制药工业株式会社出品)，其余试剂均为国家市场销售产品。
2、药物本发明粉为浅棕色，味甘、微涩。药物剂量分别相当于临床成人用量的50倍、37.5倍、25倍。
“固本降糖胶囊”本制药厂实验室生产。
3、动物远交系昆明种小鼠50只，体重20±2g。
4、分组测定空腹血糖后配对均分五组。第一组本发明成人用量的50倍，第二组本发明成人用量的37.5倍，第三组本发明成人用量的25倍，第四组固本降糖胶囊，第五组对照组给予蒸馏水(按大剂量给药剂量算)。
5、病理造型及给药方法动物ig给药，1次/日，连续7天，七天给药后ihr由尾静脉注射四氧嘧啶，剂量100mg/kg造成糖尿病模型，并于第9、10、14、18、22、24天分别自小鼠眼眶后静脉采血测定血糖含量，同时，记录动物死亡数。
6、观察指标按前述采血日测定血糖含量，在第24天处死动物后即刻检胰腺，用Bovw氏固定后进行A、B、细胞组织化学染色、计数。
结果1、各组动物存活情况注射四氧嘧啶后第二天，各组血糖明显升高，死亡情况见表1。在注射四氧嘧啶第4天(即全疗程的第11天)，阴性对照组和固本降糖胶囊组开始出现死亡，疗程结束时阴性对照组总死亡率为70％，固本降糖胶囊组总死亡率为50％，本发明高剂量组(成人用量的50倍)及中剂量组(成人用量的37.5倍)总死亡率为20％，低剂量组(成人用量的25倍)，无1例死亡。
2、各组动物血糖情况各组在造型后血糖都有明显升高，但总的趋势本发明及固本降糖胶囊组均低于对照组，由于对照组发病严重的小鼠在观察期间死亡，因此血糖均值在对照组中并不显著升高。即使如此，在造型后第11天，本发明低剂量组、中剂量组及固本降糖胶囊组血糖与对照组比较，仍有显著差异(P＜0.01)，说明本发明对四氧嘧啶造型小鼠糖病具有一定的保护作用及降血糖作用。
3、胰岛A、B细胞病理检查结果对照组，胰岛数目减少，形态不规则，HE片中尚可见胰岛中少量坏死细胞核碎片，淋巴细胞及组织细胞浸润，A细胞增多，B细胞减少，大部分胰岛中B细胞减少。
本发明低剂量组，大部分标本胰岛数目基本正常，部分胰岛中(3例)A细胞与B细胞比例正常，其他切片属于中度损伤，B细胞稍有减少，A细胞增多。
本发明中剂量组，属于轻度损伤，部分胰岛中出现B细胞减少，A细胞增多。
本发明高剂量组，属于轻度损伤，与阳性对照组比较，病变损伤明显减轻。
固本降糖胶囊组1例为轻度病变，其余为中度病变。
以上结果表明本发明及固本降糖胶囊组对四氧嘧啶造型小鼠胰岛B细胞具有一定保护作用，并能降低胰腺损伤程度和小鼠死亡率，其中用药组低剂量最为明显。
三、本发明对过氧化脂质、单胺氧化酶、超氧化物歧化酶的影响过氧化脂质(LPO)是化合物中或游离的不饱和脂肪酸受自由基作用生成的过氧化物，成人糖尿病由于代谢障碍(糖和肪质)致使过氧化脂质增加，并可促进糖尿病合并症的发展。因此，测定过氧化脂质对观察本发明的疗效是一项重要的指标。
单胺氧化酶(Monoamine oxdase MAO)是一类广泛存在于生物体不同组织中的单胺氧化酶类，它具有催化不同类型单胺的氧化脱氧作用。有人发现人脑血和血小板中单胺氧化酶(WAO、EC、1、4、1、3)的活性随着年龄的增长而明显增多，特别是70年代以来，由于发现衰老过程和某些老年性疾病与单胺氧化酶B(MAO-B)的活性有密切关系。人们一直寻求应用适当的单胺氧化酶抑制剂(MAOI)来选择地抑制MAO--B以达到治疗某些老年性疾病之目的。
超氧化物歧化酶(SOD)是具有消除自由基作用的主要酶类之一，从而降低过氧化脂质的水平。在某些病理的情况下，例如辐射损伤和衰老，自由基增高时可引起过氧化脂质的增高。因此测定血清或组织中的LPO和SOD可以了解自由基的代谢情况。糖尿病患者的血管损伤性合并症与LPO及SOD相关，本实验之目的即在于了解本发明在此方面的作用。
材料与方法用LCR纯系小鼠，体重25-30g，配对分组，设正常对照组和阳性对照组(固本降糖胶囊)，本发明设高、中、低三个剂量组。高剂量(成人用量的50倍)，中剂量(成人用量的37.5倍)，低剂量(成人用量的25倍)。给药途径灌胃，每天一次，给药二周后放血处死。分别采集血、脑、肝做MAO-B、LPO、SOD测定。
一、LPO的测定，鼠肝或脑作10％组织匀浆，取0.1ml→加8.1％SDS0.2ml；PH3.5，20％HACbufferl？1.5ml；0.8％TBA 1.5ml；蒸馏水0.5ml→搅拌后95℃水浴1小时→水冲试管冷却→加正丁醇吡啶(15∶1)3ml振荡后离心(3000转/分)15分钟→在532nm波长下测定光密度值(O、D)二、MAO-B的测定，取→组织称重→加10倍体积的予冷的PH7.4，0.2MP.B缓冲液研磨成匀浆→1000g4℃离心10分钟→除沉淀取上清4℃下17000g离心30分钟→取沉淀用0.3ml0.2MP.B缓冲液悬浮即得粗酶，在带有磨口盖的试管中加入0.3ml80mM苄胺；2.4ml0.2MPH7.4P.B→37℃水浴振荡3小时→加60％PCAO0.3ml终止反应，再加环己烷3ml振荡3分钟→3000转/分离心10分钟→取上清在242nm波长上下测光密度(O.D值)。
三、SOD的测定参照丁克祥微量指血超氧化物歧化酶快速测定方法进行。
结果与讨论本发明对小鼠脑LPO的影响组别(n＝8)X±SD(0.D值)LP正常对照 0.55±0.046阳性对照(固本降糖胶囊)0.220±0.06411.84 ＜0.01低剂量组 0.424±0.0346.23＜0.0 1中剂量组 0.315±0.0737.70＜0.01高剂量组 0.250±0.06111.10 ＜0.01本发明对小鼠肝LPB的影响组别(n＝8)X±SD(0.D值) LP正常对照 0.54±0.035阳性对照(固本降糖胶囊)0.370±0.0646.59＜0.01低剂量组 0.460±0.0832.51＜0.05中剂量组 0.430±0.0753.76＜0.01高剂量组 0.355±0.0855.69＜0.01
本发明对小鼠脑MAOB的影响组别(n＝8) X±SD(0.D值) L P正常对照 0.466±0.07阳性对照(固本降糖胶囊) 0.213±0.0786.28 ＜0.01低剂量组 0.332±0.0234.38 ＜0.01中剂量组 0.315±0.0464.42 ＜0.01高剂量组 0.217±0.0557.23 ＜0.01本发明对小鼠SOD的影响组别(n＝8)X±SD(0.D值) L P正常对照 0.147±0.013阳性对照(固本降糖胶囊)0.171±0.011 3.99 ＜0.01低剂量组 0.165±0.014 2.66 ＜0.05中剂量组 0.169±0.010 3.79 ＜0.01高剂量组 0.170±0.015 3.28 ＜0.01上述实验结果表明，本发明具有明显降低小鼠脑、肝过氧化脂质的作用，为阻止糖尿病合并症的发展提供实验依据，同时对小鼠脑单胺氧化酶B有明显的降低作用，起到了单胺氧化酶抑制剂的作用，对超氧化物歧化酶有明显的增强作用。本发明的这些作用可能为临床防治糖尿病及其并发症提供实验依据。
四、本发明对小鼠骨髓细胞胰岛素受体及肾上腺皮质激素受体的影响材料与方法动物(1)取纯系ICL小鼠，6月龄，体重(18±2)g，雄性10只，均分4组，I组为阴性对照，II组为已知药物阳性对照(固本降糖胶囊)，III组为本发明低剂量组(成人用量的12.5倍)，IV组为本发明高剂量组(成人用量的25倍)。
(2)取纯系ICL小鼠，18月龄，体重(35±2)g，雄性40只，均分4组，每组用药情况同(1)，以上各组均为测定胰岛素受体用。
(3)Weistar大鼠20只，雄性，体重(200±10)g，均分4组，各组给药情况同(1)，用于测定肾上腺皮质激素受体。
1、试剂(1)1-14-A-单碘原子胰岛素，由四川华西医科大学同位素室提供。放射强度223μci/mg，非标记胰岛素为Sigma产品。
(2)6、7-[A]Atdosterone放射强度为72ci/nnik(New England Nucleor Comp)非标记Atdosterone(Slgma CO)出品。
3、测定方法(1)胰岛素受体测定取小鼠骨髓细胞按常规方法制成细胞悬液使成5-7×107/ml反应管总液量为1ml，其中I胰岛素为0.1ml，CPM值为按需要量调整，并加1000倍的非标记物，22℃孵育2小时，0℃冰水浴中止反应，置49型纤维滤膜抽滤，清洗后置Fi2003型免疫计数器，测定CPM值并计算。
CV 2.44并绘制Scatchard Plot，以[I]胰岛素20nM至20nM问取7个点，结果有明显饱和现象，Scatchard Plot计算结果见表1。分别测定6月龄及18月龄小鼠的骨髓细胞胰岛素受体数目(取一点法10nM)结果见表II。
(2)肾上腺皮质激素受体测定大鼠麻醉后以冷缓冲液A(20nM Na-Phosphate PH7.4 1mM disodium EDTA 2mM 2-hydroxyethymercaptane and10％giycerol(Wt/Vol)心脏灌注，除血。0℃冷室内操作，取脑，称重，加2ml缓冲液A，用玻璃匀浆器匀浆，离心85000×9×45min，取上清匀浆用Lowryis法测定蛋白含量，Dexamethasone取6个点(0.5nM-10nM)100倍非标记物竞争，以羟基磷灰石为分离剂，离心10000×g 10min取上清加入闪烁液内测定CPM，并作Schathard Plot，结果见表III。
结果与讨论1、本发明可使18月龄小鼠骨髓细胞胰岛素受体数目上升，但对6月龄无作用，老龄鼠胰岛素受体数目有随龄增而下降之势，故本发明起到恢复作用。
2、本发明可以干扰肾上腺皮质激素受体，使之结合力下降，Bamx降低，这对于防治糖尿病也是有利的。
以上结果表明本发明用于胰岛素受体功能低下状态的老年鼠可以使之受体结合能力上调，因此，本发明可作为胰岛素受体调节剂而应试于临床。
表II本发明对不同龄小鼠骨髓细胞胰岛素的作用分组 受点数目(一点法10nM) P阴性对照 693±392阳性对照 839±198 ＞0.056月龄本发明(低)910±466 ＞0.05本发明(高)899±446 ＞0.05阴性对照 383±230阳性对照 1027±441 ＜0.0118月龄本发明(低)1130±430 ＜0.01本发明(高)1240±340 ＜0.01表III本发明对肾上腺皮脂激素受体的作用组别r kd(m)Bmax fmol mg protI III III II1.1×阴性对照0.89 0.95 12×1028911010阳性对照0.87 0.85 1.13.1130102本发明(低) 0.88 0.87 1.02.9120100本发明(高) 0.87 0.86 0.92.111096I糖皮质激素受体II盐皮质激素受体五、本发明对人体胚肺二倍体成纤维细胞生长及PAS反应的影响材料与方法一、细胞培养人胚肺成纤维细胞(2BS细胞)由北京生物制品研究所提供，传代寿命为55±10代。从液氮中复苏人胚肺成纤维细胞40代龄，用含10％小牛血清的EagleMEM培养液，10％NaHCO3，调PH为7.2-7.4，加2ml-谷氨酰胺，37℃温箱孵育，待细胞生长汇合成单层后，用0.25％胰蛋白酶消化2分钟，弃胰酶加培养液吹打制成细胞悬液，以1∶2的比率传代培养备实验用。
二、药品的配制本发明取10g溶于200ml重蒸水中，经磁力搅拌24小时，滤除不溶解颗粒，滤过液加MEM培养基干粉，溶解后G6滤器抽滤灭菌，调成含10％小牛血清，PH＝7.2，滤过液为本发明水溶性部分，原液浓度为50mg/ml。
三、方法与分组(一)急性毒性实验 取生长状态良好的40代龄2BS细胞数瓶，经0.25％胰蛋白酶消化，弃胰酶加10ml培养液吹打，制备成细胞悬液，经细胞计数，稀释成细胞浓度为20万/ml悬液，取30瓶底面积为13.8cm2接种瓶，每瓶接种1ml细胞悬液，3ml含药品培养基，对照组3瓶，加药组每个浓度3瓶共33瓶，加药组以37.5mg/ml为起始浓度，以下各浓度均按1∶0∶7比率稀释，经37℃温箱孵育4小时，细胞计数，所得结果经计算机处理，求出药物对细胞帖壁率影响的半数有效量(EDx)。
(二)本发明对2BS细胞生长抑制实验、细胞培养、细胞悬液的制备均同急性毒性实验，本实验以毒性实验中不影响细胞帖壁率的浓度为本发明对2BS细胞生长抑制实验的第一个剂量，浓度为1050μg/ml，以下浓度按1∶0.5比率稀释，取24瓶底面积为13.8cm2的小方瓶，3瓶为一组，一组对照，实验各组均加1ml细胞，细胞内PAS反应下降，说明了细胞内合成多糖能力降低或者分解代谢增强，从本实验的结果来看，本发明可以显著增加晚代细胞内多糖类的含量，此点在调节糖代谢方面对机体是有益的本实验也表明，本发明可以在细胞水平直接对糖代谢发生影响。此点结合前文本发明在整体水平对胰岛素受体的作用可以相互印证。
下述实施例为进一步公开本发明，需要说明的是这些实施例仅为本发明的优选方式，并不限制本发明要求保护的范围。
实施例1人参皂苷6重量份 黄芪124重量份 地黄186重量份麦冬62重量份 天花粉62重量份枸杞124重量份五味子62重量份山药62重量份 覆盆子31重量份茯苓62重量份 泽泻62重量份。
山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清二次，每次2小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.30(55-60℃)的稠膏，五味子用50％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮二次，每次2小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为60％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀或干燥，混匀，加入羧基纤维素钠适量，制粒，干燥整粒，分装即得。
测定方法为(1)人参皂苷Re的测定方法为对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml中含人参皂苷Re0.4mg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约1克，加氯仿20ml，水浴回流1小时，滤过，弃去氯仿，残渣挥干溶剂，残渣连同滤纸置于同一具赛锥形瓶中，加正丁醇饱和的水2ml润湿，精密加入用水饱和正丁醇50ml超声提取30min，精密量取上清液25ml，加氨试液三倍量，摇匀，放置，分取上层溶液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定量移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为99∶400的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相；检测波长203nm；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含人参皂苷Re0.1mg。
(2)黄芪甲苷的测定方法为色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；蒸发光散射检测器；流动相比例为33∶67∶4的乙腈-水-四氢呋喃；对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约10克，加水50ml溶解，滤过，滤液用石油醚脱脂2次，水饱和的正丁醇振摇提取4次(每次50ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次40ml，弃去氨试液，用正丁醇饱和的水40ml洗，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内经1.5cm，长18cm)，以水100mL洗脱，弃去水液，再用40％乙醇50ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含黄芪甲苷0.02mg。
实施例2人参皂苷4重量份 黄芪150重量份 地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份枸杞160重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份 泽泻80重量份将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清1次，每次3小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.30(55-60℃)的稠膏，五味子用70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次2小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为60％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并或干燥，加药用乳糖、蛋白糖适量干法制粒，包装，既得。
测定方法为(1)人参皂苷Re的测定方法为对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml中含人参皂苷Re0.4mg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约1克，加氯仿20ml，水浴回流1小时，滤过，弃去氯仿，残渣挥干溶剂，残渣连同滤纸置于同一具赛锥形瓶中，加正丁醇饱和的水2ml润湿，精密加入用水饱和正丁醇50ml超声提取30min，精密量取上清液25ml，加氨试液三倍量，摇匀，放置，分取上层溶液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定量移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为99∶400的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相；检测波长203nm；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含人参皂苷Re1.0mg。
(2)黄芪甲苷的测定方法为色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；蒸发光散射检测器；流动相比例为33∶67∶4的乙腈-水-四氢呋喃；
对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约10克，加水50ml溶解，滤过，滤液用石油醚脱脂2次，水饱和的正丁醇振摇提取4次(每次50ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次40ml，弃去氨试液，用正丁醇饱和的水40ml洗，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内经1.5cm，长18cm)，以水100mL洗脱，弃去水液，再用40％乙醇50ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含黄芪甲苷0.1mg。
实施例3人参皂苷8重量份 黄芪80重量份 地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份枸杞160重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份 泽泻80重量份将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清1次，每次2小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10(55-60℃)的稠膏，五味子用50％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次2小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为70％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀或干燥，加药用焦糖适量，混匀制粒，装胶囊，包装，即得。
实施例4人参皂苷8重量份 黄芪150重量份 地黄150重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份枸杞160重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份泽泻80重量份将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次2小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，五味子用60％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮3次，每次1小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为75％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并或干燥，加适量淀粉，泛制成丸，即得丸剂。
实施例5人参皂苷8重量份 黄芪150重量份 地黄250重量份麦冬45重量份 天花粉80重量份枸杞160重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份 泽泻80重量份麦冬用温水浸清1次，每次3小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10(55-60℃)的稠膏，五味子用50％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮2次，每次2小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为70％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，人参茎叶皂甙用乙醇溶解，加入规定浓度的乙醇，搅拌，过滤，即得酊剂。
实施例6人参皂苷8重量份 黄芪150重量份地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉40重量份 枸杞160重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份 泽泻80重量份将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清3次，每次1小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，五味子用50％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮3次，每次1小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为70％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，干燥，将基质加热熔融，加入干燥药粉，混匀，倾入涂有脱模剂的栓模中，冷却，取出，即得栓剂。
实施例7人参皂苷8重量份 黄芪150重量份 地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份枸杞80重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份 泽泻80重量份麦冬用温水浸清2次，每次1小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10(55-60℃)的稠膏，五味子用60％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮2次，每次2小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为80％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙与麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，另取蔗糖制成糖浆，与上述浸膏合并，加水制全量，过滤，灌装，灭菌，即得合剂。
实施例8人参皂苷8重量份 黄芪150重量份地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份 枸杞160重量份五味子40重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份 泽泻80重量份将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次1.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.25(55-60℃)的稠膏，五味子用50％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮3次，每次1小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为75％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀，干燥成细粉，过筛，即得散剂。
实施例9人参皂苷8重量份 黄芪150重量份 地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份枸杞160重量份五味子80重量份山药40重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份 泽泻80重量份将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清1次，每次2小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，五味子用55％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为80％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，干燥，制颗粒，干燥，压片，即得片剂。
实施例10人参皂苷8重量份 黄芪150重量份 地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份枸杞160重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子20重量份茯苓80重量份 泽泻80重量份将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次1.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10(55-60℃)的稠膏，五味子用50％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮3次，每次1小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为75％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，干燥，取PVA加蒸馏水浸泡，加热溶解，再加入干浸膏粉，搅拌溶解，再加入甘油、吐温-80，搅匀，静置除去气泡，涂布在玻板上制膜，80℃脱膜，剪成适当大小，密封，即得膜剂。
实施例11人参皂苷8重量份 黄芪150重量份 地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份枸杞160重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓40重量份 泽泻80重量份山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次0.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，五味子用45％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮4次，每次0.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为65％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，干燥，取聚乙二醇加热熔融，加入干粉，滴制成丸，包装，即得滴丸剂。
实施例12人参皂苷8重量份 黄芪150重量份 地黄250重量份麦冬80重量份 天花粉80重量份枸杞160重量份五味子80重量份山药80重量份 覆盆子50重量份茯苓80重量份 泽泻40重量份。
麦冬用温水浸清1次，每次3小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.30(55-60℃)的稠膏，五味子用70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30(55-60℃)稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮1次，3小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20(55-60℃)的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为80％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30(55-60℃)，将上述麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓等浸膏合并，加10倍量水，加入人参茎叶皂甙，冷沉48小时，滤过，滤液浓缩，至调节PH至8，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，加注射用水至全量，过滤，精滤，灌封灭菌，检验，即得注射液。
实施例13人参皂苷2重量份黄芪250重量份 地黄300重量份麦冬120重量份 天花粉120重量份枸杞250重量份五味子120重量份山药120重量份 覆盆子100重量份茯苓150重量份 泽泻120重量份。
麦冬用温水浸清2次，每次2小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10-1.20的稠膏，五味子用40％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮4次，每次0.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为70％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30，将上述麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药等浸膏合并，取人参茎叶皂甙加水溶解与浸膏合并，加10倍量水，冷沉48小时，滤过，滤液浓缩，至调节PH至7.5，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，加注射用水至全量，过滤，精滤，冷冻干燥无菌分装，检验，即得粉针。
实施例14人参皂苷15重量份 黄芪40重量份 地黄300重量份麦冬120重量份天花粉120重量份 枸杞250重量份五味子120重量份 山药120重量份覆盆子100重量份茯苓150重量份泽泻120重量份。
麦冬用温水浸清3次，每次0.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.20-1.30的稠膏，五味子用50％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为75％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30，将上述麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药等浸膏合并，取人参茎叶皂甙加水溶解与浸膏合并，加10倍量水，冷沉48小时，滤过，滤液浓缩，至调节PH至7，加0.1％活性炭，加热煮沸30分钟，过滤，加注射用水至全量，过滤，精滤，灌封灭菌检验，即得输液。
实施例15人参皂苷15重量份 黄芪250重量份 地黄80重量份麦冬120重量份天花粉120重量份枸杞250重量份五味子120重量份 山药120重量份 覆盆子100重量份茯苓150重量份泽泻120重量份。
麦冬用温水浸清2次，每次2.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.15的稠膏，五味子用60％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮3次，每次1小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为60％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30，将上述麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药等浸膏合并，人参茎叶皂甙乙醇溶解，合并，加入规定浓度的乙醇，搅拌，过滤，即得酊剂。
实施例16人参皂苷15重量份 黄芪250重量份 地黄300重量份麦冬20重量份 天花粉120重量份枸杞250重量份五味子120重量份山药120重量份 覆盆子100重量份茯苓150重量份 泽泻120重量份。
麦冬用温水浸清2次，每次2小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.18的稠膏，五味子用50％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮2次，每次1.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为50％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.30，将上述人参茎叶皂甙与麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药等浸膏合并，另取蔗糖加水适量加热煮沸，溶解，过滤，浓缩制成糖浆，与上述浓缩液混匀，煮沸，放冷，加入防腐剂和香精，加水稀释，即得糖浆剂。
实施例17人参皂苷15重量份 黄芪250重量份 地黄300重量份麦冬120重量份 天花粉20重量份枸杞250重量份五味子120重量份山药120重量份覆盆子100重量份茯苓150重量份 泽泻120重量份。
麦冬用温水浸清2次，每次1小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.1的稠膏，五味子用55％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮3次，每次0.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为40％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.10，将上述人参茎叶皂甙与麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药等浸膏合并，另取蔗糖制成糖浆，与上述药液合并，加水制全量，过滤，灌装，灭菌，即得合剂。
实施例18人参皂苷15重量份 黄芪250重量份地黄300重量份麦冬120重量份 天花粉120重量份 枸杞40重量份五味子120重量份山药120重量份覆盆子100重量份茯苓150重量份 泽泻120重量份。
将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次1.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10的稠膏，五味子用40-70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次2.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为55％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.10，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀，加入PVC适量，制粒，干燥整粒，分装即得。
测定方法为(1)人参皂苷Re的测定方法为对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml中含人参皂苷Re0.4mg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约1克，加氯仿20ml，水浴回流1小时，滤过，弃去氯仿，残渣挥干溶剂，残渣连同滤纸置于同一具赛锥形瓶中，加正丁醇饱和的水2ml润湿，精密加入用水饱和正丁醇50ml超声提取30min，精密量取上清液25ml，加氨试液三倍量，摇匀，放置，分取上层溶液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定量移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为99∶400的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相；检测波长203nm；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含人参皂苷Re 5.0mg。
(2)黄芪甲苷的测定方法为色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；蒸发光散射检测器；流动相比例为33∶67∶4的乙腈-水-四氢呋喃；对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约10克，加水50ml溶解，滤过，滤液用石油醚脱脂2次，水饱和的正丁醇振摇提取4次(每次50ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次40ml，弃去氨试液，用正丁醇饱和的水40ml洗，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内经1.5cm，长18cm)，以水100mL洗脱，弃去水液，再用40％乙醇50ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含黄芪甲苷0.08mg。
实施例19人参皂苷15重量份 黄芪250重量份 地黄300重量份麦冬120重量份天花粉120重量份枸杞250重量份五味子20重量份 山药120重量份 覆盆子100重量份茯苓150重量份泽泻120重量份。
将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次1.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10的稠膏，五味子用40-70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次2.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为55％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.10，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀，加入甲基纤维素适量，制粒，干燥整粒，分装即得。
测定方法为(1)人参皂苷Re的测定方法为对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml中含人参皂苷Re0.4mg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约1克，加氯仿20ml，水浴回流1小时，滤过，弃去氯仿，残渣挥干溶剂，残渣连同滤纸置于同一具赛锥形瓶中，加正丁醇饱和的水2ml润湿，精密加入用水饱和正丁醇50ml超声提取30min，精密量取上清液25ml，加氨试液三倍量，摇匀，放置，分取上层溶液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定量移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为99∶400的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相；检测波长203nm；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含人参皂苷Re 0.5mg。
(2)黄芪甲苷的测定方法为色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；蒸发光散射检测器；流动相比例为33∶67∶4的乙腈-水-四氢呋喃；对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约10克，，加水50ml溶解，滤过，滤液用石油醚脱脂2次，水饱和的正丁醇振摇提取4次(每次50ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次40ml，弃去氨试液，用正丁醇饱和的水40ml洗，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内经1.5cm，长18cm)，以水100mL洗脱，弃去水液，再用40％乙醇50ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含黄芪甲苷0.04mg。
实施例20人参皂苷15重量份 黄芪250重量份 地黄300重量份麦冬120重量份 天花粉120重量份枸杞250重量份五味子120重量份山药20重量份 覆盆子100重量份茯苓150重量份 泽泻120重量份。
将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次1.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10的稠膏，五味子用40-70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次2.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为55％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.10，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀，加入阿拉伯胶适量，制粒，干燥整粒，分装即得。
实施例21人参皂苷15重量份 黄芪250重量份地黄300重量份麦冬120重量份天花粉120重量份 枸杞250重量份五味子120重量份 山药120重量份覆盆子15重量份茯苓150重量份泽泻120重量份。
将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次1.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10的稠膏，五味子用40-70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次2.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为55％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.10，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀，加入西黄芪胶适量，制粒，干燥整粒，分装即得。
实施例22人参皂苷15重量份 黄芪250重量份 地黄300重量份麦冬120重量份 天花粉120重量份 枸杞250重量份五味子120重量份山药120重量份 覆盆子100重量份茯苓20重量份 泽泻120重量份。
将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次1.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10的稠膏，五味子用40-70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次2.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为55％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.10，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀，加入海藻酸钠或海藻酸钾适量，制粒，干燥整粒，分装即得。
实施例23人参皂苷15重量份 黄芪250重量份 地黄300重量份麦冬120重量份 天花粉120重量份枸杞250重量份五味子120重量份山药120重量份 覆盆子100重量份茯苓150重量份 泽泻20重量份。
将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸清2次，每次1.5小时，合并浸滤过，滤液浓缩后相对密度为1.10的稠膏，五味子用40-70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度为1.10稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮2次，每次2.5小时，合并煎液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为55％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.10，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并，混匀，加入糊精适量，制粒，干燥整粒，分装即得。
测定方法为(1)人参皂苷Re的测定方法为对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml中含人参皂苷Re0.4mg的溶液，作为对照品溶液；
供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约1克，加氯仿20ml，水浴回流1小时，滤过，弃去氯仿，残渣挥干溶剂，残渣连同滤纸置于同一具赛锥形瓶中，加正丁醇饱和的水2ml润湿，精密加入用水饱和正丁醇50ml超声提取30min，精密量取上清液25ml，加氨试液三倍量，摇匀，放置，分取上层溶液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定量移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为99∶400的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相；检测波长203nm；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含人参皂苷Re10mg。
(2)黄芪甲苷的测定方法为色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；蒸发光散射检测器；流动相比例为33∶67∶4的乙腈-水-四氢呋喃；对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约10克，加水50ml溶解，滤过，滤液用石油醚脱脂2次，水饱和的正丁醇振摇提取4次(每次50ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次40ml，弃去氨试液，用正丁醇饱和的水40ml洗，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内经1.5cm，长18cm)，以水100mL洗脱，弃去水液，再用40％乙醇50ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液5μl、10μl，供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪测定每克颗粒含黄芪甲苷0.5mg。
权利要求
1.一种治疗糖尿病的中药组合物，其特征在于它是由下述原料制备而成的人参皂苷4-8重量份黄芪80-150重量份地黄150-250重量份麦冬45-80重量份 天花粉40-80重量份 枸杞80-160重量份五味子40-80重量份山药40-80重量份 覆盆子20-50重量份茯苓40-80重量份 泽泻40-80重量份。
2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于各原料的配比为人参皂苷6重量份 黄芪124重量份 地黄186重量份麦冬62重量份 天花粉62重量份 枸杞124重量份五味子62重量份 山药62重量份覆盆子31重量份茯苓62重量份 泽泻62重量份。
3.如述权利要求1或2所述组合物，其特征在于该药物组合物加入赋形剂制成临床可接受的各种剂型。
4.如权利要求3所述的中药组合物，其特征在于其剂型优选为颗粒剂。
5.如权利要求4所述的制剂，其特征在于每克颗粒含人参皂苷Re0.1-10mg。
6.如权利要求4所述的制剂，其特征在于每克颗粒含黄芪甲苷0.02-0.5mg。
7.如权利要求5或6所述的有效成分，其特征在于测定方法为(1)人参皂苷Re的测定方法为对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Re对照品适量，加甲醇分别制成每1ml中含人参皂苷Re0.4mg的溶液，作为对照品溶液；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约1克，加氯仿20ml，水浴回流1小时，滤过，弃去氯仿，残渣挥干溶剂，残渣连同滤纸置于同一具赛锥形瓶中，加正丁醇饱和的水2ml润湿，精密加入用水饱和正丁醇50ml超声提取30min，精密量取上清液25ml，加氨试液三倍量，摇匀，放置，分取上层溶液，蒸干，残渣加甲醇使溶解，定量移至2ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得；色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为99∶400的乙腈-0.05％磷酸溶液为流动相；检测波长203nm；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪测定；(2)黄芪甲苷的测定方法为色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；蒸发光散射检测器；流动相比例为33∶67∶4的乙腈—水—四氢呋喃；对照品溶液的制备取黄芪甲苷对照品加甲醇制成每1ml含0.6mg的溶液，摇匀，即得；供试品溶液的制备取本品，研匀，精密称取约10克，加水50ml溶解，滤过，滤液用石油醚脱脂2次，水饱和的正丁醇振摇提取4次(每次50ml)，合并正丁醇提取液，用氨试液提取2次，每次40ml，弃去氨试液，用正丁醇饱和的水40ml洗，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加水10mL使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱(内经1.5cm，长18cm)，以水100mL洗脱，弃去水液，再用40％乙醇50ml洗脱，弃去40％乙醇洗脱液，继用70％乙醇100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，用甲醇溶解并转移至2ml量瓶内，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，即得。
8.如权利要求5所述的中药组合物，其特征在于其制备方法为将山药、天花粉、覆盆子、茯苓四味粉碎成细粉，麦冬用温水浸提1-3次，每次0.5-3小时，合并浸提液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.03-1.40的稠膏，五味子用40-70％乙醇渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至相对密度约为1.10-1.40稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻用水煎煮1-4次，每次0.5-3小时，合并煎煮液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为40％-80％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩至相对密度1.1-1.40，将上述人参茎叶皂甙、山药等到四味细粉、麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻等浸膏合并或干燥，加药用辅料按常规制剂工艺制成临床所需剂型。
9.如权利要求8所述的制备方法，其特征在于之中还加入助悬剂如乙基羟乙基纤维素、甲壳素、甲基纤维素、西黄芪胶、阿拉伯胶、海藻酸钠、海藻酸钾、海藻酸钙、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素、糊精。
10.如权利要求9所述的制备方法可用下法代替麦冬用温水浸提1-3次，每次0.5-3小时，合并浸提液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.03-1.40的稠膏，五味子用40-70％乙醇，渗漉、渗漉液回收乙醇，浓缩至稠膏，枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药、天花粉、覆盆子、茯苓用水煎煮1-4次，每次0.5-3小时，合并煎煮液、滤过、滤液浓缩至相对密度为1.20的稠膏，放冷，加入乙醇使含醇量为40％-80％，静置、滤取上清液，回收乙醇，浓缩，将上述麦冬、五味子、枸杞子、黄芪、地黄、泽泻、山药等浸膏人参皂甙合并或干燥后再与人参皂甙，加药用辅料按常规制剂工艺制成临床所需剂型。
全文摘要
本发明公开了一种治疗糖尿病的中药组合物，是由人参(茎叶)皂苷、黄芪、地黄、麦冬、天花粉、枸杞、五味子、山药、覆盆子、茯苓、泽泻十一味药为原料，根据每味中药效应成分的不同理化性质，分别以不同的物理或化学方法处理后制备而成的有效制剂。本发明配方独特，临床上用于治疗糖尿病效果显著。
文档编号A61P3/00GK1616014SQ200410073959
公开日2005年5月18日 申请日期2004年9月17日 优先权日2004年9月17日
发明者赵志全 申请人:鲁南制药股份有限公司
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