一种安全高效的冻干纤维蛋白封闭剂及其制备方法
专利名称：一种安全高效的冻干纤维蛋白封闭剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，是一种能耐受高温灭活病毒处理的冻干纤维蛋白封闭剂。
背景技术：
纤维蛋白封闭剂由两个组分组成冻干纤维蛋白原及凝血酶。纤维蛋白原即凝血因子I，是血浆蛋白的主要成分之一，分子量约为34万，纤维蛋白原在凝血酶的作用下可形成纤维蛋白，进而与血小板一起形成稳固的纤维蛋白血栓，因而在临床上与凝血酶一起用于急救止血、创口粘合。纤维蛋白原和凝血酶在液态时易失活。故临床所用制剂均为冻干剂，使用时用注射用水复溶。纤维蛋白封闭剂的临床应用存在安全性问题。现有的纤维蛋白冻干制剂均为血制品，如果病毒灭活不彻底，就会造成病毒的传染。目前用于血液制品大规模生产的病毒灭活方法主要有S/D法、干热灭活法等。S/ D法能破坏脂包膜病毒的外膜结构，因而可有效灭活流行性乙型脑炎、猪伪狂犬病毒等脂包膜病毒。由于S/D法灭火病毒时条件较温和，对凝血酶的结构和活性几无破坏作用，因而已广泛用于凝血酶的大规模生产中。然而S/D法不能灭活非脂包膜病毒，因此，仅用S/D法处理的制品仍有传播甲肝等非脂包膜病毒的可能。干热处理能有效灭活脂包膜和非脂包膜病毒，干热灭活作为纤维蛋白原和凝血酶的纯化、分装、冻干、真空密封等生产程序的最后一步，可避免血液制品的再污染，且成本低、投资少、便于大规模生产，因此不失为一种理想的病毒灭活方法。但是，现有的干热灭活工艺应用到纤维蛋白原和凝血酶生产时仍存在很大问题， 如经100°C 30分钟处理后，纤维蛋白原往往会出现轻度萎缩、发黄、冻干制品复溶时间大大延长，复溶后出现絮状物、颗粒，且凝固活力超过60秒，凝血酶完全失活。若以80°C加热72 小时处理，纤维蛋白原则出现严重萎缩、发黄，制品甚至不能复溶，表明纤维蛋白原已严重变性；凝血酶完全失活。某些稳定剂可减少干热对纤维蛋白原及凝血酶的变性作用，但效果仍不理想，特别是高浓度下的纤维蛋白原干热后制品即使在37°C下复溶，时间常超过30分钟，且活性大大下降，而凝血酶的活性仍无法保障。因此现有的纤维蛋白原及凝血酶制剂配方不适用上述干热灭活病毒处理。
发明内容
本发明的目的是提供一种安全高效的冻干纤维蛋白封闭剂及其制备方法，以克服现有技术存在的上述缺陷。本发明所述的安全高效的冻干纤维蛋白封闭剂，由独立的如下重量份数的组分组成冻干纤维蛋白原粉12 15份冻干凝血酶粉3 5份；
所述“独立”，指的是，使用前不混合；所述冻干纤维蛋白原粉包括如下重量份数的组分纤维蛋白原10 14份稳定剂A0.8 1.2份所述纤维蛋白原粉来自灭活的血浆，如人血浆、猪血浆或羊血浆等，可采用商业化的产品，其相关的质量指标可参见2010版药典的记载；所述稳定剂A选自有机酸、氨基酸、多糖或无机盐中的一种以上；所述冻干凝血酶粉包括如下重量份数的组分凝血酶 3 5份稳定剂B 3 5份所述凝血酶来自灭活的血浆，如人血浆、猪血浆或羊血浆等，可采用商业化的产品，其相关的质量指标可参见2010版药典的记载；所述稳定剂B选自多元醇、多聚糖、多糖或单糖中的一种以上；本发明的安全高效的冻干纤维蛋白封闭剂的制备方法，包括如下步骤(1)冻干纤维蛋白原粉的制备将纤维蛋白原和稳定剂A加入水中，纤维蛋白原的重量含量为4 8%，混合溶解， 然后冻干，再在100°c灭活30分钟，即可获得冻干纤维蛋白原粉；(2)冻干凝血酶粉的制备将凝血酶和稳定剂B加入水中，凝血酶的重量含量为1 2%，混合溶解，然后冻干，再在100°C灭活30分钟，即可获得冻干凝血酶粉；本发明的安全高效的冻干纤维蛋白封闭剂，在临床上用于急救止血、创口粘合。使用方法如下将所述冻干纤维蛋白原粉与水混合，配制成为溶液A，溶液A中，所述冻干纤维蛋白原粉的重量百分比含量为5 9% ；将所述冻干凝血酶粉与水混合，配制成为溶液B，溶液B中，所述冻干凝血酶粉的重量百分比含量为1.5 3% ；然后将溶液A和溶液B混合，施加于需要治疗的患者。本发明通过采用有效的纤维蛋白原及凝血酶稳定剂和合理配方，从而提供一种可以耐热法处理的冻干纤维蛋白封闭剂。该制剂经加热处理，不仅可确保灭活脂包膜和非脂包膜病毒，而且可使制剂在室温下快速复溶，大大方便了临床使用，尤其对急救用的纤维蛋白胶具有极其重要的意义。
具体实施例方式实施例1配方冻干纤维蛋白原粉 13份，冻干凝血酶粉 3份所述冻干纤维蛋白原粉包括如下重量份数的组分纤维蛋白原12份，稳定剂A1份；所述纤维蛋白原粉来自灭活的猪血浆；
所述稳定剂A为甘氨酸、柠檬酸钠和氯化钠；所述冻干凝血酶粉包括如下重量份数的组分凝血酶1.5份，稳定剂B1.5份；所述凝血酶来自灭活的猪血浆；所述稳定剂B为葡萄糖和葡聚糖；制备方法(1)冻干纤维蛋白原粉的制备将纤维蛋白原和稳定剂A加入水中，其中，纤维蛋白原的重量含量为4%，混合溶解，然后冻干，再在100°c灭活30分钟，即可获得冻干纤维蛋白原粉；(2)冻干凝血酶粉的制备将凝血酶和稳定剂B加入水中，其中，凝血酶的重量浓度为1 %，混合溶解，然后冻干，再在100°C灭活30分钟，即可获得冻干凝血酶粉。(3)使用方法将所述冻干纤维蛋白原粉与水混合，配制成为溶液A，溶液A中，所述冻干纤维蛋白原粉的重量百分比含量为5% ；将所述冻干凝血酶粉与水混合，配制成为溶液B，溶液B中，所述冻干凝血酶粉的重量百分比含量为1.5% ；然后将溶液A和溶液B混合，施加于需要治疗的患者。实施例2配方冻干纤维蛋白原粉 15份，冻干凝血酶粉 5份所述冻干纤维蛋白原粉包括如下重量份数的组分纤维蛋白原13份，稳定剂A2份；所述纤维蛋白原粉来自灭活牛血浆；所述稳定剂A为盐酸精氨酸、柠檬酸钠和氯化钠。所述冻干凝血酶粉包括如下重量份数的组分凝血酶2. 5份，稳定剂B2. 5份；
所述凝血酶来自灭活牛血浆；所述稳定剂B为葡聚糖和蔗糖；制备方法(1)冻干纤维蛋白原粉的制备将纤维蛋白原和稳定剂A加入水中，其中，纤维蛋白原的重量含量为5%，混合溶解，然后冻干，再在100°c灭活30分钟，即可获得冻干纤维蛋白原粉；(2)冻干凝血酶粉的制备将凝血酶和稳定剂B加入水中，其中，凝血酶的重量浓度为1.5%，混合溶解，然后冻干，再在10(TC灭活30分钟，即可获得冻干凝血酶粉。(3)使用方法将所述冻干纤维蛋白原粉与水混合，配制成为溶液A，溶液A中，所述冻干纤维蛋白原粉的重量百分比含量为7% ；
将所述冻干凝血酶粉与水混合，配制成为溶液B，溶液B中，所述冻干纤维蛋白原粉的重量百分比含量为2% ；然后将溶液A和溶液B混合，施加于需要治疗的患者。
权利要求
1.一种安全高效的冻干纤维蛋白封闭剂，其特征在于，由独立的如下重量份数的组分组成冻干纤维蛋白原粉 12 15份冻干凝血酶粉3 5份。
2.根据权利要求1所述的冻干纤维蛋白封闭剂，其特征在于，所述冻干纤维蛋白原粉包括如下重量份数的组分纤维蛋白原10 14份稳定剂A0.8 1.2份。
3.根据权利要求2所述的冻干纤维蛋白封闭剂，其特征在于，所述纤维蛋白原粉来自灭活的动物的血清。
4.根据权利要求2所述的冻干纤维蛋白封闭剂，其特征在于，所述稳定剂A选自柠檬酸钠、甘氨酸、盐酸精氨酸或氯化钠中的一种以上。
5.根据权利要求1所述的冻干纤维蛋白封闭剂，其特征在于，所述冻干凝血酶粉包括如下重量份数的组分凝血酶 3 5份稳定剂B 3 5份。
6.根据权利要求5所述的冻干纤维蛋白封闭剂，其特征在于，所述凝血酶来自灭活的动物的血清。
7.根据权利要求5所述的冻干纤维蛋白封闭剂，其特征在于，所述稳定剂B选自葡聚糖、葡萄糖、蔗糖或甘露醇中的一种以上。
8.制备权利要求1 7任一项所述的安全高效的冻干纤维蛋白封闭剂的方法，包括如下步骤(1)冻干纤维蛋白原粉的制备将纤维蛋白原和稳定剂A加入水中，纤维蛋白原的重量含量为4 8%，混合溶解，然后冻干，再在100°C灭活30分钟，即可获得冻干纤维蛋白原粉；(2)冻干凝血酶粉的制备将凝血酶和稳定剂B加入水中，凝血酶的重量含量为1 2%，混合溶解，然后冻干，再在100°C灭活30分钟，即可获得冻干凝血酶粉。
全文摘要
本发明公开了一种安全高效的冻干纤维蛋白封闭剂及其制备方法，所述冻干纤维蛋白封闭剂由独立的如下重量份数的组分组成冻干纤维蛋白原粉12～15份，冻干凝血酶粉3～5份。本发明通过采用有效的纤维蛋白原及凝血酶稳定剂和合理配方，从而提供一种可以耐热法处理的冻干纤维蛋白封闭剂。该制剂经加热处理，不仅可确保灭活脂包膜和非脂包膜病毒，而且可使制剂在室温下快速复溶，大大方便了临床使用，尤其对急救用的纤维蛋白胶具有极其重要的意义。
文档编号A61L24/10GK102258770SQ201010182968
公开日2011年11月30日 申请日期2010年5月26日 优先权日2010年5月26日
发明者任彩霞, 冯洁, 刘光万, 戚平忠, 雷晓丽 申请人:上海利康瑞生物工程有限公司
技术领域：
本发明涉及医药技术领域，是一种能耐受高温灭活病毒处理的冻干纤维蛋白封闭剂。
背景技术：
纤维蛋白封闭剂由两个组分组成冻干纤维蛋白原及凝血酶。纤维蛋白原即凝血因子I，是血浆蛋白的主要成分之一，分子量约为34万，纤维蛋白原在凝血酶的作用下可形成纤维蛋白，进而与血小板一起形成稳固的纤维蛋白血栓，因而在临床上与凝血酶一起用于急救止血、创口粘合。纤维蛋白原和凝血酶在液态时易失活。故临床所用制剂均为冻干剂，使用时用注射用水复溶。纤维蛋白封闭剂的临床应用存在安全性问题。现有的纤维蛋白冻干制剂均为血制品，如果病毒灭活不彻底，就会造成病毒的传染。目前用于血液制品大规模生产的病毒灭活方法主要有S/D法、干热灭活法等。S/ D法能破坏脂包膜病毒的外膜结构，因而可有效灭活流行性乙型脑炎、猪伪狂犬病毒等脂包膜病毒。由于S/D法灭火病毒时条件较温和，对凝血酶的结构和活性几无破坏作用，因而已广泛用于凝血酶的大规模生产中。然而S/D法不能灭活非脂包膜病毒，因此，仅用S/D法处理的制品仍有传播甲肝等非脂包膜病毒的可能。干热处理能有效灭活脂包膜和非脂包膜病毒，干热灭活作为纤维蛋白原和凝血酶的纯化、分装、冻干、真空密封等生产程序的最后一步，可避免血液制品的再污染，且成本低、投资少、便于大规模生产，因此不失为一种理想的病毒灭活方法。但是，现有的干热灭活工艺应用到纤维蛋白原和凝血酶生产时仍存在很大问题， 如经100°C 30分钟处理后，纤维蛋白原往往会出现轻度萎缩、发黄、冻干制品复溶时间大大延长，复溶后出现絮状物、颗粒，且凝固活力超过60秒，凝血酶完全失活。若以80°C加热72 小时处理，纤维蛋白原则出现严重萎缩、发黄，制品甚至不能复溶，表明纤维蛋白原已严重变性；凝血酶完全失活。某些稳定剂可减少干热对纤维蛋白原及凝血酶的变性作用，但效果仍不理想，特别是高浓度下的纤维蛋白原干热后制品即使在37°C下复溶，时间常超过30分钟，且活性大大下降，而凝血酶的活性仍无法保障。因此现有的纤维蛋白原及凝血酶制剂配方不适用上述干热灭活病毒处理。
发明内容
本发明的目的是提供一种安全高效的冻干纤维蛋白封闭剂及其制备方法，以克服现有技术存在的上述缺陷。本发明所述的安全高效的冻干纤维蛋白封闭剂，由独立的如下重量份数的组分组成冻干纤维蛋白原粉12 15份冻干凝血酶粉3 5份；
所述“独立”，指的是，使用前不混合；所述冻干纤维蛋白原粉包括如下重量份数的组分纤维蛋白原10 14份稳定剂A0.8 1.2份所述纤维蛋白原粉来自灭活的血浆，如人血浆、猪血浆或羊血浆等，可采用商业化的产品，其相关的质量指标可参见2010版药典的记载；所述稳定剂A选自有机酸、氨基酸、多糖或无机盐中的一种以上；所述冻干凝血酶粉包括如下重量份数的组分凝血酶 3 5份稳定剂B 3 5份所述凝血酶来自灭活的血浆，如人血浆、猪血浆或羊血浆等，可采用商业化的产品，其相关的质量指标可参见2010版药典的记载；所述稳定剂B选自多元醇、多聚糖、多糖或单糖中的一种以上；本发明的安全高效的冻干纤维蛋白封闭剂的制备方法，包括如下步骤(1)冻干纤维蛋白原粉的制备将纤维蛋白原和稳定剂A加入水中，纤维蛋白原的重量含量为4 8%，混合溶解， 然后冻干，再在100°c灭活30分钟，即可获得冻干纤维蛋白原粉；(2)冻干凝血酶粉的制备将凝血酶和稳定剂B加入水中，凝血酶的重量含量为1 2%，混合溶解，然后冻干，再在100°C灭活30分钟，即可获得冻干凝血酶粉；本发明的安全高效的冻干纤维蛋白封闭剂，在临床上用于急救止血、创口粘合。使用方法如下将所述冻干纤维蛋白原粉与水混合，配制成为溶液A，溶液A中，所述冻干纤维蛋白原粉的重量百分比含量为5 9% ；将所述冻干凝血酶粉与水混合，配制成为溶液B，溶液B中，所述冻干凝血酶粉的重量百分比含量为1.5 3% ；然后将溶液A和溶液B混合，施加于需要治疗的患者。本发明通过采用有效的纤维蛋白原及凝血酶稳定剂和合理配方，从而提供一种可以耐热法处理的冻干纤维蛋白封闭剂。该制剂经加热处理，不仅可确保灭活脂包膜和非脂包膜病毒，而且可使制剂在室温下快速复溶，大大方便了临床使用，尤其对急救用的纤维蛋白胶具有极其重要的意义。
具体实施例方式实施例1配方冻干纤维蛋白原粉 13份，冻干凝血酶粉 3份所述冻干纤维蛋白原粉包括如下重量份数的组分纤维蛋白原12份，稳定剂A1份；所述纤维蛋白原粉来自灭活的猪血浆；
所述稳定剂A为甘氨酸、柠檬酸钠和氯化钠；所述冻干凝血酶粉包括如下重量份数的组分凝血酶1.5份，稳定剂B1.5份；所述凝血酶来自灭活的猪血浆；所述稳定剂B为葡萄糖和葡聚糖；制备方法(1)冻干纤维蛋白原粉的制备将纤维蛋白原和稳定剂A加入水中，其中，纤维蛋白原的重量含量为4%，混合溶解，然后冻干，再在100°c灭活30分钟，即可获得冻干纤维蛋白原粉；(2)冻干凝血酶粉的制备将凝血酶和稳定剂B加入水中，其中，凝血酶的重量浓度为1 %，混合溶解，然后冻干，再在100°C灭活30分钟，即可获得冻干凝血酶粉。(3)使用方法将所述冻干纤维蛋白原粉与水混合，配制成为溶液A，溶液A中，所述冻干纤维蛋白原粉的重量百分比含量为5% ；将所述冻干凝血酶粉与水混合，配制成为溶液B，溶液B中，所述冻干凝血酶粉的重量百分比含量为1.5% ；然后将溶液A和溶液B混合，施加于需要治疗的患者。实施例2配方冻干纤维蛋白原粉 15份，冻干凝血酶粉 5份所述冻干纤维蛋白原粉包括如下重量份数的组分纤维蛋白原13份，稳定剂A2份；所述纤维蛋白原粉来自灭活牛血浆；所述稳定剂A为盐酸精氨酸、柠檬酸钠和氯化钠。所述冻干凝血酶粉包括如下重量份数的组分凝血酶2. 5份，稳定剂B2. 5份；
所述凝血酶来自灭活牛血浆；所述稳定剂B为葡聚糖和蔗糖；制备方法(1)冻干纤维蛋白原粉的制备将纤维蛋白原和稳定剂A加入水中，其中，纤维蛋白原的重量含量为5%，混合溶解，然后冻干，再在100°c灭活30分钟，即可获得冻干纤维蛋白原粉；(2)冻干凝血酶粉的制备将凝血酶和稳定剂B加入水中，其中，凝血酶的重量浓度为1.5%，混合溶解，然后冻干，再在10(TC灭活30分钟，即可获得冻干凝血酶粉。(3)使用方法将所述冻干纤维蛋白原粉与水混合，配制成为溶液A，溶液A中，所述冻干纤维蛋白原粉的重量百分比含量为7% ；
将所述冻干凝血酶粉与水混合，配制成为溶液B，溶液B中，所述冻干纤维蛋白原粉的重量百分比含量为2% ；然后将溶液A和溶液B混合，施加于需要治疗的患者。
权利要求
1.一种安全高效的冻干纤维蛋白封闭剂，其特征在于，由独立的如下重量份数的组分组成冻干纤维蛋白原粉 12 15份冻干凝血酶粉3 5份。
2.根据权利要求1所述的冻干纤维蛋白封闭剂，其特征在于，所述冻干纤维蛋白原粉包括如下重量份数的组分纤维蛋白原10 14份稳定剂A0.8 1.2份。
3.根据权利要求2所述的冻干纤维蛋白封闭剂，其特征在于，所述纤维蛋白原粉来自灭活的动物的血清。
4.根据权利要求2所述的冻干纤维蛋白封闭剂，其特征在于，所述稳定剂A选自柠檬酸钠、甘氨酸、盐酸精氨酸或氯化钠中的一种以上。
5.根据权利要求1所述的冻干纤维蛋白封闭剂，其特征在于，所述冻干凝血酶粉包括如下重量份数的组分凝血酶 3 5份稳定剂B 3 5份。
6.根据权利要求5所述的冻干纤维蛋白封闭剂，其特征在于，所述凝血酶来自灭活的动物的血清。
7.根据权利要求5所述的冻干纤维蛋白封闭剂，其特征在于，所述稳定剂B选自葡聚糖、葡萄糖、蔗糖或甘露醇中的一种以上。
8.制备权利要求1 7任一项所述的安全高效的冻干纤维蛋白封闭剂的方法，包括如下步骤(1)冻干纤维蛋白原粉的制备将纤维蛋白原和稳定剂A加入水中，纤维蛋白原的重量含量为4 8%，混合溶解，然后冻干，再在100°C灭活30分钟，即可获得冻干纤维蛋白原粉；(2)冻干凝血酶粉的制备将凝血酶和稳定剂B加入水中，凝血酶的重量含量为1 2%，混合溶解，然后冻干，再在100°C灭活30分钟，即可获得冻干凝血酶粉。
全文摘要
本发明公开了一种安全高效的冻干纤维蛋白封闭剂及其制备方法，所述冻干纤维蛋白封闭剂由独立的如下重量份数的组分组成冻干纤维蛋白原粉12～15份，冻干凝血酶粉3～5份。本发明通过采用有效的纤维蛋白原及凝血酶稳定剂和合理配方，从而提供一种可以耐热法处理的冻干纤维蛋白封闭剂。该制剂经加热处理，不仅可确保灭活脂包膜和非脂包膜病毒，而且可使制剂在室温下快速复溶，大大方便了临床使用，尤其对急救用的纤维蛋白胶具有极其重要的意义。
文档编号A61L24/10GK102258770SQ201010182968
公开日2011年11月30日 申请日期2010年5月26日 优先权日2010年5月26日
发明者任彩霞, 冯洁, 刘光万, 戚平忠, 雷晓丽 申请人:上海利康瑞生物工程有限公司
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