酰基氨基噻唑衍生物及其作为β－淀粉状蛋白抑制剂的用途的制作方法
专利名称：酰基氨基噻唑衍生物及其作为β－淀粉状蛋白抑制剂的用途的制作方法
技术领域：
本发明的主题是酰基氨基噻唑衍生物、其制备和其治疗用途。
已知酰基氨基噻唑衍生物化合物(在文献WO03/014095 A和WO2004/033439 A中有所描述)，其抑制β-淀粉状蛋白肽(β-A4)的形成。
总是存在一种试图发现和发展抑制β-淀粉状蛋白肽(β-A4)形成的产品的需求。本发明化合物符合此目的。
本发明第一个主题是通式(I)化合物 其中，R1或者代表任选被1-3个取代基取代的C1-6烷基，取代基选自卤素、三氟代甲基，羟基，C1-6烷氧基，C1-6硫代烷基，噻吩或苯基；或者代表C3-7环烷基，噻吩，苯并噻吩，吡啶基，呋喃基或苯基；所述苯基任选被1-3个取代基取代，所述取代基选自卤原子，C1-6烷基，C1-6烷氧基，羟基，亚甲基二氧基，苯氧基，苄氧基或三氟代甲基；R2和R′2彼此独立地代表彼此独立地代表氢原子，卤原子，羟基，C1-3烷氧基，C1-3烷基，C3-7环烷基，O-C(O)-C1-6烷基，或R2和R′2一起形成氧代基团；R3或者代表氢原子，或者代表C1-6烷基，其任选被羟基，C1-6环烷基或C1-3烷氧基取代；R4和R5彼此独立地代表氢原子，C1-7烷基，三氟代甲基，基团L或基团Z；
G代表C1-7烷基或简单键；M代表C3-7环烷基，苯基，萘基或吡啶基，任选被一种或多种取代基取代的基团M，其取代基选自卤原子，羟基，C1-3烷基，C1-3烷氧基，三氟代甲基，三氟代甲氧基，-O-CHF2；J代表氢原子或基团-Y-K；Y代表简单键，氧原子，硫原子，基团-C1-4亚烷基-，-O-C1-4亚烷基-，-C1-4亚烷基-O-或-N(W)-，任选被羟基或C1-3烷氧基取代的-C1-4亚烷基；W或者代表氢原子，或者代表任选被苯基取代的C1-3烷基，或者代表苯基；K代表基团苯基或吡啶基，任选被一种或多种下述基团取代的基团K卤原子，羟基，C1-3烷基，C1-3烷氧基，三氟代甲基，三氟代甲氧基，-O-CHF2；条件是至少一个基团R4或R5代表基团Z；Z代表基团CN，SO2NR6R7，或杂芳基团杂芳基；所述杂芳基任选被基团R8取代；R8或者代表任选被CN、苯基或苯氧基取代的C1-4烷基；或者代表苯基；所述苯基和苯氧基任选被1-3个选自卤原子，C1-3烷基，C1-3烷氧基，三氟代甲基的基团取代；R6和R7彼此独立地代表，或者氢原子，或者任选被C3-7环烷基，C3-7环链烯基，C1-3烷氧基，苯基，萘基，吗啉基或吡啶基取代的C1-6烷基；或者代表C3-7环烷基，C1-6烷氧基，苯基或二氢茚基；所述基团C3-7环烷基，C3-7环链烯基，苯基，萘基，吗啉基，吡啶基和二氢茚基任选被1-2个选自C1-3烷基，羟基，C1-3烷氧基，苯基或卤原子的基团取代；或R6和R7与其所带氮原子形成氮丙啶环，氮杂环丁烷环，吡咯烷环，哌啶环，吗啉环或苯并哌啶环。
在通式(I)化合物中，所述化合物的第一亚组(sous-groupe)由下述化合物构成，其中R1代表任选被1-3个卤素原子取代的C1-6烷基或苯基；和/或R2和R′2彼此独立地代表氢原子或羟基；和/或
R3代表C1-6烷基；和/或R4和R5彼此独立地代表氢原子，C1-7烷基，三氟代甲基，基团L或基团Z； G代表C1-7烷基或简单键；和/或M代表任选地被一个或多个卤素原子取代的苯基；和/或J代表氢原子或基团-Y-K；和/或Y代表简单键，氧原子，-O-C1-4亚烷基-；和/或K代表任选地被一种或多种基团取代的苯基，该取代基团选自卤原子，C1-3烷基，三氟代甲基；条件是至少一个基团R4或R5代表基团Z；和/或Z代表基团CN，SO2NR6R7，或杂芳基；所述杂芳基任选被基团R8取代；R8或者代表C1-4烷基，任选被苯基取代；或者代表苯基；和/或R6和R7彼此独立地代表氢原子，或者任选被苯基或萘基取代的C1-6烷基；或者代表苯基或二氢茚基；所述苯基任选被一种或两种选自C1-3烷氧基，苯基或卤原子取代；或者R6和R7，与其所带氮原子形成苯并哌啶环。
其中R1、R2、R’2、R3、R4、R5、G、M、J、Y、K、Z、R6、R7和R8同时如上述第一亚组化合物的定义的化合物形成第二亚组。
在通式(I)化合物和上述亚组中，第三亚组化合物由下述化合物构成R1代表C1-4烷基，优选异丙基或叔丁基，或被两个氟原子取代的苯基；和/或R2和R’2彼此独立地代表氢原子和羟基；和/或R3代表C1-4烷基，优选甲基、乙基或丙基。
在本发明范围内，应当理解-Ct-z，其中t和z可以为1-7，是指具有t-z个碳原子的碳链，例如具有1-3个碳原子C1-3碳链，具有3-6个碳原子C3-6碳链，等；-烷基，是指直链或支链的饱和脂族基团例如C1-6烷基代表直链或支链的具有1-6个碳原子的碳链，更特别地甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基等，优选甲基、乙基、丙基或1-甲基乙基；-亚烷基是指直链或支链的饱和二价烷基例如C1-3-亚烷基基团代表直链或支链的1-3个碳原子二价碳链，更特别地亚甲基、亚乙基、亚异丙基，亚丙基；-环烷基，是指环状烷基基团，例如，C3-7环烷基代表3-7个碳原子的环状碳链，更特别地环丙基、环丁基、环戊基或环己基，环庚基，优选环戊基或环己基；-环链烯基，是指单-或多-不饱和环状烷基，例如C3-7环链烯基代表3-7个碳原子单-或多-不饱和环状碳链，更特别地环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基，优选环戊烯基或环己烯基；-硫代烷基，是指具有直链或支链的饱和脂族链的S-烷基；-烷氧基，是指具有直链或支链的饱和脂族链的O-烷基；-卤原子，是指氟、氯、溴或碘；-R2和R2’一起形成氧代基，是指所述基团如 -杂芳基团是指包含1-10个碳原子和1-4杂原子的环状芳族基团，其中杂原子如氮、氧或硫。可以例举的杂芳基的例子包括唑基、二唑基、四唑基、苯并唑基等。
通式(I)化合物可以包含一个或多个不对称碳原子。因此，它们可以以对映体或非对映异构体形式存在。这些对映体或非对映异构体以及它们的混合物，这里包括外消旋混合物形成本发明的一部分。
当带有R2和R’2的碳和/或带有R3的碳是非对称的，优选带有R2和R’2的碳为(S)构型和/或带有R3的碳为(S)构型的通式(I)化合物。
通式(I)化合物可以以碱或与酸的加成盐的形式存在。这样的加成盐是本发明的一部分。
这些盐有利地是与药物可接受的酸制备得到，但是其它有用的酸的盐也是本发明的一部分，其中其它有用的酸例如用于纯化或分离通式(I)化合物的酸。
通式(I)化合物可以是水合物或溶剂化物的形式，即与一个或多个分子水或与溶剂以缔合或组合的形式存在。这样一些水合物和溶剂化物也是本发明的一部分。
本发明还提供制备通式(I)化合物的方法。
此外，这些化合物可以通过下述流程所示制备得到，其中操作条件对于本领域技术人员而言是普通的操作条件。
注意的是保护基团，当化学反应发生时，可以阻断官能团或位点的反应性并根据本领域技术人员已知方法裂解后恢复该分子的基团。关于保护基团和保护方法以及去保护的例子在Greene等人的Protective groups in Organic Synthesis，Greene和coll.，(第二版)(JohnWiley& Sons，Inc.，NewYork)中有所描述。
在下述通式(II)至(XXI)中化合物中的R1、R2、R’2、R3、R4、R5、G、M、J、Y、K、Z、R6、R7和R8如通式(I)化合物中的定义，除非确切限定其它定义。
根据下述流程1，采用通式(III)2-氨基噻唑与通式(II)酰基氨基酸根据本领域技术人员已知条件通过肽偶合得到通式(I)化合物，例如在六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷)磷盐(PyBOP)或六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷盐(BOP)和N-乙基吗啉或N-甲基吗啉存在下在0℃至室温下在惰性溶剂如N，N-二甲基甲酰胺、乙腈或二氯甲烷中进行。
采用通式(IV)化合物与通式(V)保护酸根据如上述本领域技术人员已知方法通过肽偶合得到通式(II)化合物，其中Pg代表保护基团，例如苄基。
然后将如此得到的化合物去保护。在保护基为苄基的情况下，该化合物于室温下在氢气氛压力下在碳上钯存在下在无水乙醇中预先氢化该化合物，得到通式(II)化合物。
流程1 或者，该通式(I)化合物可以根据下述流程2制备得到。
根据流程2，采用通式(IV)化合物与通式(VI)胺根据本领域技术人员已知方法通过肽偶合得到通式(I)化合物，例如在羟基苯并三唑水合物(HOBt)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(EDAC，HCl)存在下进行。
流程2 可以采用通式(III)2-氨基噻唑与通式(VII)保护胺(其中，Pg代表保护基团，例如N-叔丁氧基羰基(Boc))根据如上所述本领域技术人员已知方法通过肽偶合得到通式(VI)化合物。然后将由此得到的该化合物去保护。在保护基为Boc的情况下，在溶解于无水溶剂或三氟乙酸中的氢氯酸气体存在下，通过酸解去保护，得到通式通式(VI)化合物。
可以通过氧化通式(I)化合物(其中，R2或R’2代表羟基)的羟基得到该通式(I)化合物(其中，R2和R’2形成氧代基)。该反应可以根据本领域技术人员已知的条件实现，例如以Dess Martin反应。这些化合物还可以通过通式(IV)酮酸(cétoacide)(其中R2或R’2一起形成氧代基)与通式(VI)胺根据如上所述本领域技术人员已知方法直接偶合得到。所述酮酸的制备方法是本领域技术人员已知的。
可以以下述流程3-6制备通式(III)化合物，其中R4或R5＝Z，这里Z代表CN基团或杂芳族型基团。
通式(IIIa)和(IIIb)化合物，即其中R4或R5代表二唑基团的通式(III)化合物可以根据下述流程3和4所示方法得到。
流程3 根据上述流程3，采用通式(VIII)化合物(其中R代表C1-6烷氧基，Pg代表保护基团，如叔丁氧基羰基(Boc))与式H2NC(＝NOH)R8偕胺肟在氢化钠和分子筛4粉末存在下在无水四氢呋喃中回流反应得到通式(IIIa)化合物。然后根据本领域技术人员已知的条件将该化合物去保护。
根据上述流程4，采用通式(IX)化合物(其中Pg代表保护基团，如Boc)与氨水(ammoniaque)在例如HOBt和(EDAC，HCl)存在下通过肽偶合得到通式(X)化合物。然后，该通式(X)化合物可以在碱如三乙胺存在下与三氟乙酸酐(TFAA)反应，得到通式(XI)化合物。
流程4 根据Moloney和coll.所述方法(J.Chem.Soc.Perkin Trans I，1999，p.2725)，在碱如甲醇钠存在下，在通式(XI)化合物上加成羟基胺HCl得到通式(XII)化合物。通式(XII)化合物可以接着在碱如氢化钠和通式R8CO2CH3或R8CO2C2H5的酯的存在下被环化。然后根据本领域技术人员已知的条件将因此得到的化合物进行去保护，从而得到通式(IIIb)化合物。
在流程4中所述的制备方法还可以制备通式(IIIc)化合物，即通过根据本领域技术人员已知的条件去保护通式(XI)化合物制备通式(III)化合物(其中，R4或R5代表-CN基团)。
可以根据下述流程5所示方法得到通式(IIId)化合物，即通式(III)化合物，其中R4或R5代表苯并唑基团。
流程5 根据流程5，采用如上定义的通式(IX)化合物与通式(XIII)化合物根据本领域技术人员已知条件通过肽偶合得到通式(IIId)化合物，例如在六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷)磷盐(PyBOP)或六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷盐(BOP)和N-乙基吗啉或N-甲基吗啉存在下在0℃至室温下在惰性溶剂如N，N-二甲基甲酰胺中进行。
然后，由此得到的化合物可以根据Wang和coll.所述方法(Tetrahedron Letters，1997，p.6529)通过Mitsunobu反应被环化，然后根据本领域技术人员已知的方法去保护，以得到通式(IIId)化合物。
流程6 根据流程6中所示方法可以得到通式(IIIe)化合物，即通式(III)化合物(其中，R4或R5代表四唑基团)。根据流程6，采用如上定义的通式(IX)与式R8NH2伯胺根据本领域技术人员已知方法通过肽偶合得到通式(XIV)化合物，例如在HOBt和(EDAC，HCl)存在下进行。然后，由此得到的化合物(XIV)根据本领域技术人员已知的条件(例如，在三苯基膦、二异丙基偶氮二羧酸盐(DIAD)和叠氮三甲基硅烷(TMSN3)存在下)根据De Lombaert和coll.在J.Med.Chem.2000，p.488中所述方法(Tetrahedron Letters，1997，p.6529)通过经受Mitsunobu反应。然后根据本领域技术人员已知的条件将因此得到的化合物进行去保护，从而得到通式(IIIe)化合物。
通式(III)化合物(其中，R4或R5代表唑基团)可以由通式(VIII)酯制备得到的相应醛根据本领域技术人员已知方法得到，例如在碱如碳酸钾或甲醇钠存在下根据van Leusen和coll.所述方法(Tetrahedron Letters，1972，p.2369)与异氰酸对-甲苯磺酰甲酯得到。
如上定义的通式(VIII)化合物可以通过保护式(IIIo)化合物得到 例如当Pg代表Boc基团时，在二甲基氨基吡啶存在下在室温下通过在无水四氢呋喃中作用二-叔丁基二碳酸盐得到。
如上定义的通式(IX)化合物可以根据本领域技术人员已知条件通过水解相应式(VIII)化合物的酯功能团得到，例如在60℃下与在四氢呋喃/水7∶3(v/v)混合物中的氢氧化锂作用。
通式(IIIo)化合物可以通过下述流程7和8所示方法制备得到。
通式(IIIo)化合物(其中，R4＝-C(O)R，R代表C1-6烷氧基)可以通过下述流程7制备得到。
流程7 根据流程7，通式(IIIo)化合物可以由式(XV)醛与式Cl2CHCOR乙酸二氯甲基酯(其中，R代表C1-6烷氧基)反应制备得到，例如在0℃下根据Takeda所述方法(Bull.Chem.Soc.JP，1970，p.2997)，例如甲醇钠或乙醇钠下进行。在例如甲醇或乙醇存在下回流4-8小时由硫脲处理产物(XVI)和(XVII)混合物，以得到式(IIIo)化合物。
通式(IIIo)化合物(其中，R5＝-C(O)R，R代表C1-6烷氧基)可以通过下述流程8所示方法制备得到。
流程8 根据流程8，可以通过溴化式(XX)β-酮-酯(其中，R代表C1-6烷氧基)，然后根据A.Barton和coll.所述方法(J.C.S Perkin I，1982，p.159)使由此得到的式(XXI)化合物与硫脲反应，从而得到式(IIIo)化合物。
式(XX)β-酮-酯可以通过式(XVIII)酮与式CO(R)2二烷基碳酸酯(其中，R代表C1-6烷氧基)根据L.Crombie和coll.所述方法(J.C.S Perkin Trans I，1987，p.323)得到。该式(XX)β-酮-酯还可以通过羰基二咪唑(CDI)活化的式(XIX)酸与式RCOCH2CO2K丙二酸酯(其中，R代表C1-6烷氧基)根据D.W.Brooks和coll.所述方法(Angew.Chem.Int.Ed.，1979，p.72)得到。
在R4代表氢原子的情况下，根据R.Zhao和coll.在TetrahedronLetters，2001，p.2101中所述方法制备式(XX)化合物。
式(III)化合物(其中，R4或R5＝Z，这里Z代表SO2NR6R7)可以由商购磺酰氯或由文献(例如，R.P.Fatheree和coll.的WO99/26932A1，I.T.Barnish和coll.的J.Med.Chem.，1980，p.117和R.Fischer和coll.的WO01/047904A1)中所述化合物制备得到，或可以通过已公开的方法或本领域技术人员已知的方法制备得到。
在流程1-8中，制备方法没有描述的起始化合物和反应化合物，尤其是式(III)、式(IV)、式(V)、式(VII)、式(VIII)、式(IX)、式(XIII)、式(XV)、式(XVIII)、式(XIX)、CO(R)2、RC(O)CH2CO2K、Cl2CHCOR、R8NH2、R8CO2CH3、R8CO2C2H5、H2NC(＝NOH)R8，是商购或文献中有所描述，或可以通过已公开的方法或本领域技术人员已知的方法制备得到。
例如，式(IV)化合物(其中，R2或R2’代表羟基)可以根据D.A.Evans和coll.(J.C.S.，Chem.Comm.1973，p.55)所述方法加成三甲基甲硅烷基氰化物和醛制备得到，或根据I.Shinn和coll.(J.Org.Chem.，2000，p.7667)所述方法通过亚硝酸钠与α-氨基酸作用制备得到。
例如，式H2NC(＝NOH)R8偕胺肟(amidoxime)可以根据本领域技术人员已知的方法制备得到，例如根据Moloney和coll.在J.Chem.Soc.Perkin Trans I，1999，p.2725中所述方法。
当化合物官能团是反应性的，例如当R1包含羟基，该官能团可能需要在反应前进行预先保护。本领域技术人员可以结合预先保护的需要来决定。
下述实施例描述本发明一些化合物的制备。这些实施例不应视为对本发明的限制，仅用于说明本发明。
示例化合物的编号已在下面的表中给出。微型元素分析仪、RMN、IR或LC-MS(质谱-液相色谱联用)用于确认所得化合物的结构。
实施例12-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3-甲基)丁酰基氨基]戊酰基}氨基-5-(1-甲基乙基-4-(3-苯基-1，2，4-二唑-5-基)噻唑(化合物n°8)
实施例1.12-氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-羧酸甲酯 于0℃，向14.4g异丁醛在400ml二乙醚的溶液中加入24.6g二氯乙酸甲酯，然后滴加400ml甲醇钠在甲醇中的溶液(0.5M)。于0℃，1小时后加入100ml氯化钠饱和水溶液，用醚萃取。使用无水硫酸钠干燥有机相。仅蒸发醚保留甲醇，加入8g硫脲并加热至回流6小时。蒸干反应介质，取入乙酸乙酯，用10％氢氧化铵水溶液洗涤，然后使用氯化钠饱和水溶液洗涤。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。取残留物于100ml醚中，并过滤。得到18.6g白色固体。
RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,25(d，6H)；3,35(s，3H)；4,10(m，1H)；5,50(s，2H)。
实施例1.22-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-羧酸甲酯 将6.96g二-叔丁基二碳酸盐和0.177g二甲基氨基吡啶加入5.81g由步骤1.1得到的2-氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-羧酸甲酯在300ml四氢呋喃溶液中。在室温下搅拌该混合物16小时。蒸发反应介质。取残留物至乙酸乙酯中，使用0.5N盐酸水溶液洗涤2次，使用水洗涤1次，然后使用饱和氯化钠水溶液洗涤1次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。得到8.35g固体形式的被保护的氨基噻唑衍生物，其是可以如此使用的而无需纯化。
LC/MSMH+＝401(M-Boc)+＝301。
实施例1.32-氨基-5-(1-甲基乙基)-4-(3-苯基-1，2，4-二唑-5-基)噻唑 在室温下缓慢将0.96g氢化钠和2g分子筛4加入2.9g苄胺肟在150ml四氢呋喃溶液中。于60℃加热化合物1.5小时。在室温下放置该混合物，然后加入3.6g步骤1.2得到的2-叔丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-羧酸甲酯于30ml四氢呋喃中。于60℃加热该反应混合物12小时。用水停止反应。过滤分子筛然后浓缩。将该产物取入乙酸乙酯中。然后，蒸发干燥，得到3.4g白色固体。
于室温将3.4g上述得到的产物在60ml三氟乙酸溶液中搅拌30分钟，然后蒸发。将其取入乙酸乙酯中，使用饱和碳酸钠水溶液洗涤2次，然后使用饱和氯化钠水溶液洗涤2次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后蒸发得到1.8g白色固体。
RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,38(d，6H)；4,21(m，1H)；5,23(s，2H)；7,50(m，3H)；8,20(m，2H)。
实施例1.42-[2-(S)-戊酰基氨基]氨基-5-(1-甲基乙基)4-(3-苯基-1，2，4二唑-5-基)噻唑
于0℃，将0.75ml N-甲基吗啉、3.5g PyBOP和1.5g(S)-Bocnorvaline加入至1.77g由步骤1.3得到的2-氨基-5-(1-甲基乙基)-4-(3-苯基-1，2，4-二唑-5-基)噻唑在50ml二甲基甲酰胺溶液中。放置反应介质至室温，然后搅拌16小时。蒸发后，将残留物取入乙酸乙酯，并使用碳酸氢钠饱和水溶液洗涤2次，使用水洗涤2次，然后使用1H硫酸氢钾水溶液洗涤1次，然后使用饱和氯化钠水溶液洗涤1次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。将该残留物通过硅胶柱色谱，使用二氯甲烷和乙酸乙酯95∶5(v/v)混合物进行提取。得到1.4g白色固体。
于室温下，将1.4g上述得到产物的60ml三氟乙酸溶液搅拌30分钟，然后蒸发。将残留物取入乙酸乙酯，然后使用碳酸钠饱和水溶液洗涤2次，使用饱和氯化钠水溶液洗涤2次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后蒸发得到1g白色固体。
RMN 300MHz(CDCl3)δppm0,98(t，3H)；1,45(d，6H)；1,62(m，2H)；1,92(m，2H)；3,64(m，1H)；4,25(m，1H)；7,50(m，3H)；8,20(m，2H)。
实施例1.52-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3-甲基)丁酰基氨基]戊酰基}氨基-5-(1-甲基乙基-4-(3-苯基-1，2，4-二唑-5-基)噻唑于0℃，将0.06ml N-甲基吗啉、0.30g PyBOP和0.06gα-羟基氢戊酸(l’acid hydroxyhydrovalerique)加入至0.2g在步骤1.4中得到的2-[2-(S)-戊酰基氨基]氨基-5-(1-甲基乙基)-4-(3-苯基-1，2，4-二唑-5-基)噻唑。放置反应介质于室温并搅拌18小时。蒸发反应介质。将残留物取入乙酸乙酯，并使用碳酸氢钠饱和水溶液洗涤2次，使用水洗涤2次，然后使用1M硫酸氢钾水溶液洗涤1次，然后使用饱和氯化钠水溶液洗涤1次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。将该残留物通过硅胶柱色谱，使用二氯甲烷和乙酸乙酯95∶5(v/v)混合物进行提取。得到0.15g白色固体。
LC/MSMH+＝486。
RMN描述于下述表中(化合物n°8)。
实施例22-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3，3-二甲基)丁酰基氨基]戊酰基}氨基5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-腈(化合物n°22) 实施例2.12-氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-羧酸甲酯 以与实施例1步骤1.1相同的方式进行，仅以2-苄基氧基苯甲醛(42.25g)在400ml二乙醚中的溶液代替异丁醛，于0℃加入25.7g二氯乙酸甲基酯，然后滴加400ml甲醇钠于甲醇中的溶液(0.5M)。于0℃1小时后，加入100ml氯化钠饱和水溶液，并用醚萃取。使用硫脲(10.66g)处理后，得到19g黄色固体。
LC/MSMH+＝341。
实施例2.22-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-羧酸甲酯
将11.5g二叔丁基二碳酸盐和0.4g二甲基氨基吡啶加入至15.7g由步骤2.1得到的2-氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-羧酸甲酯在300ml四氢呋喃的溶液中。在室温下搅拌该混合物16小时。蒸发反应介质。将残留物取入乙酸乙酯，并使用0.5N盐酸水溶液洗涤2次，使用水洗涤1次，然后使用饱和氯化钠水溶液洗涤1次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。得到20.5g固体形式的被保护的氨基噻唑衍生物，其是可以如此使用的而无需纯化。
LC/MSMH+＝441(M-Boc)+＝341。
实施例2.32-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-羧酸 于室温下，将在80ml蒸馏水中的1.35g氢氧化锂溶液加入至5.6g由步骤2.2得到的2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-羧酸甲酯在150ml四氢呋喃的溶液中。加热该反应介质至四氢呋喃回流16小时，然后浓缩。将残留物取入水中，并使用乙酸乙酯洗2次。使用盐酸酸化水相直至pH～4，使用氯化钠饱和，并使用乙酸乙酯萃取2次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。
LC/MSMH+＝427。
实施例2.42-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-酰胺 于0℃，将1.3g N-甲基吗啉、1.7g异丁基氯甲酸盐和8g 25％氢氧化铵溶液加入至4.2g在步骤2.3中得到的2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-羧酸。于室温搅拌反应并搅拌18小时，然后浓缩。将残留物取入乙酸乙酯。使用1M硫酸氢钾水溶液洗2次，使用水洗涤1次，然后使用饱和氯化钠水溶液洗涤1次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。将该残留物通过硅胶柱色谱，使用二氯甲烷/乙酸乙酯80/20(v/v)混合物进行提取，得到3.3g白色固体。
LC/MSMH+＝426。
实施例2.52-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-腈 于0℃，将2.6ml三乙胺和1.7ml三氟乙酸酐加入至3.3g在步骤2.4中得到的2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-酰胺。于0℃搅拌该混合物1小时，然后在室温下搅拌12小时，然后浓缩。将残留物中二氯甲烷中萃取，然后使用1M硫酸氢钾水溶液洗2次，然后使用饱和氯化钠水溶液洗涤2次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。得到1.1g黄色固体。
LC/MSMH+＝408RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,55(s，9H)；5,22(s，2H)；7,00-7,80(m，9H)。
实施例2.62-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3，3-二甲基)丁酰基氨基]戊酰基}氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-腈接着，如实施例1步骤1.3中所述，使用三氟乙酸将步骤2.5得到的化合物去保护，然后根据实施例1步骤1.4和1.5羧酸方法实现后续的2个偶合反应。
得到0.1g最终产物。
RMN描述于下述表中(化合物n°22)。
实施例32-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3，3-二甲基)丁酰基氨基]戊酰基}氨基-5-(2-苄基氧基)苯基-4-(5-甲基-1，2，4-二唑-3-基)噻唑(化合物n°13) 实施例3.12-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-偕胺肟 在4ml 0.5M甲醇钠于甲醇的溶液中，滴加0.136g甲醇中的羟基胺。其呈白色沉淀，于室温下搅拌反应介质1小时，然后加入实施例2步骤2.5中得到的0.8g 2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-腈。加热该混合物15小时，然后蒸发甲醇。将残留物于乙酸乙酯中萃取，然后使用饱和氯化钠水溶液洗2次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。得到0.67g固体。
LC/MSMH+＝441。
实施例3.22-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基-4-(5-甲基-1，2，4-二唑-3-基)噻唑 在室温下缓慢将0.75g氢化钠和0.5g分子筛4加入0.66g步骤3.1得到的2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-偕胺肟于30ml四氢呋喃溶液中。于60℃加热化合物1.5小时，然后加入220μl乙酸乙酯，继续加热至60℃ 12小时。用水停止反应。过滤分子筛然后浓缩溶液。将该产物取入乙酸乙酯中。然后，蒸发干燥，得到0.58g白色固体。
RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,53(s，9H)；2,48(s，3H)；5,04(s，2H)；6,90-7,42(m，9H)；8,00(s，1H)。
实施例3.32-氨基-5-(2-苄基氧基)苯基4-(5-甲基-1，2，4-二唑-3-基)噻唑
于室温下，将步骤3.2中得到的0.58g 2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基-4-(5-甲基-1，2，4-二唑-3-基)噻唑于30ml三氟乙酸的溶液搅拌30分钟，然后蒸发。将残留物取入乙酸乙酯，然后使用碳酸钠饱和水溶液洗涤2次，使用饱和氯化钠水溶液洗涤2次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后蒸发得到0.46g白色固体。
RMN 300MHz(CDCl3)δppm2,54(s，3H)；5,07(s，2H)；6,98-7,48(m，9H)。
实施例3.42-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3，3-二甲基)丁酰基氨基]戊酰基}氨基-5-(2-苄基氧基)苯基-4-(5-甲基-1，2，4-二唑-3-基)噻唑根据实施例1步骤1.4和1.5中所述方法实现两个后续偶合反应。
得到0.270g最终产物。
RMN描述于下述表中(化合物n°13)LC/MSMH+＝578。
实施例42-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3，3-二甲基)丁酰基氨基]戊酰基}氨基-5-(1-甲基乙基)-4-(1，3-苯并唑-2-基)噻唑(化合物n 34) 实施例4.12-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-羧酸
根据实施例2步骤2.3中所述的方法使用实施例1步骤1.2得到的2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-羧酸甲酯制备相应的酸(3g)。
LC/MSMH+＝287RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,20(d，6H)；1,50(s，9H)；4,40(m，1H)。
实施例4.22-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-(2-羟基)苯基酰胺(carboxamide) 于0℃，将1.2g N-甲基吗啉、6.11g PyBOP和1.3g 2-氨基苯酚加入至3g在步骤4.1得到的2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-羧酸于75ml二甲基甲酰胺的溶液中。放置反应介质于室温并搅拌18小时，然后浓缩。将残留物取入乙酸乙酯，并使用碳酸氢钠饱和水溶液洗涤2次，使用水洗涤2次，然后使用1M硫酸氢钾水溶液洗涤1次，然后使用饱和氯化钠水溶液洗涤1次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。将该残留物通过硅胶柱色谱，使用石油醚和乙酸乙酯9∶1(7∶3)(v/v)混合物进行提取。得到2.7g橙色粉末。
LC/MSMH+＝378。
RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,35(d，6H)；1,36(s，9H)；4,33(m，1H)；6,80-7,20(m，4H)；7,78(s，1H)；9,30(s，1H)；9,52(s，1H)。
实施例4.32-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)-4-(1，3-苯并唑-2-基)噻唑 于0℃，在步骤4.2得到的2.72g 2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-(2-羟基)苯基酰胺于80ml四氢呋喃的溶液中加入2.1g三苯膦，然后滴加1.86g DIAD于30ml四氢呋喃的溶液中。缓慢恢复该反应介质于室温，搅拌16小时然后浓缩。将该残留物通过硅胶柱色谱，使用石油醚和乙酸乙酯9∶1(7∶3)(v/v)混合物进行提取。得到1.2g橙色粉末。
LC/MSMH+＝360。
RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,42(d，6H)；1,50(s，9H)；4,40(m，1H)；7,30-7,80(m，4H)；8,45(s，1H)。
实施例4.42-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3，3-二甲基)丁酰基氨基]-戊酰基}氨基-5-(1-甲基乙基)-4-(1，3-苯并唑-2-基)噻唑接着如实施例1步骤1.3所述方法，使用三氟乙酸将2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)-4-(1，3-苯并唑-2-基)噻唑去保护，然后根据实施例1步骤1.4和1.5所述方法实现后续的2个偶合反应。
得到0.2g最终产物。
RMN描述于下述表中(化合物n°34)LC/MSNH+＝473。
实施例52-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3，3-二甲基)丁酰基氨基]戊酰基}氨基-5-(1-苄基-1H-四唑-5-基)噻唑(化合物n°51)
实施例5.12-叔-丁氧基羰基氨基噻唑5-羧酸甲酯 将17.42g 3-甲氧基丙烯酸甲酯溶于200ml 1/1 1，4-二烷/水混合物中，在加入29.37g N-溴代琥珀酰亚胺前冷却溶液至0℃。0℃ 1小时后，加入11.42g硫脲，然后加热至80℃ 2小时。然后蒸发该反应混合物，取入乙酸乙酯中，使用10％氢氧化钠水溶液洗2次，然后使用饱和氯化钠溶液洗2次。使用无水硫酸钠干燥有机相，并浓缩。得到19.17g淡灰褐色固体。
LC/MS+NH+＝159。
然后通过Boc基团根据实施例步骤1.2所述方法保护该中间体胺。所得到的产物质量为30.7g。
LC/MSMH+＝259RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,50(s，9H)；3,80(s，3H)；8,06(s，1H)。
实施例5.22-叔-丁氧基羰基氨基噻唑5-苄基酰胺 根据实施例2步骤2.3所述方法制备步骤5.1中所得到的2-叔-丁氧基羰基氨基噻唑5-羧酸甲酯的相应的酸。根据实施例2.4所描述的方法，由2-叔-丁氧基羰基氨基噻唑5-羧酸制备其酰胺(4.35g)。
LC/MSMH+＝334。
实施例5.32-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-苄基-1H-四唑-5-基)噻唑
于0℃，在4.35g步骤5.2所得化合物于200ml四氢呋喃的溶液中加入10.3g三苯基膦，然后滴加7.92gDIAD于30ml四氢呋喃的溶液。15分钟后，加入稀释于20ml四氢呋喃中的4.5g叠氮三甲基硅烷。恢复该反应介质于室温，搅拌24小时然后浓缩。将该残留物取入乙酸乙酯中，过滤形成的沉淀，然后将其通过硅胶柱色谱，使用石油醚和乙酸乙酯5∶5(v/v)混合物进行提取。得到4g橙色油状物，将混合物再通过硅胶柱色谱，使用二氯甲烷和乙酸乙酯10∶0(8∶2)(v/v)混合物进行提取。
LC/MSMH+＝359。
RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,50(s，9H)；5,92(s，2H)；7,18(m，2H)；7,37(m，3H)；7,98(s，1H)；8,86(s，1H)。
实施例5.42-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3，3-二甲基)丁酰基氨基]-戊酰基}氨基-5-(1-苄基-1H-四唑-5-基)噻唑接着如实施例1步骤1.3所述方法，使用三氟乙酸将2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-苄基-1H-四唑-5-基)噻唑去保护，然后根据实施例1步骤1.4和1.5所述方法实现后续的2个偶合反应。
得到0.090g最终产物。
RMN在下述表中描述(化合物n°51)LC/MSNH+＝472.6。
实施例62-{2-(S)-[2-(3，5-二氟苯基)乙酰基氨基]-戊酰基}氨基-4-甲基噻唑5-(N-2，3-二氯苄基)磺酰胺(化合物n°64)
实施例6.12-乙酰胺基-4-甲基噻唑5-(N-2，3-二氯苄基)磺酰胺 于0℃，在商购的2-乙酰胺基-4-甲基噻唑5-磺酰氯于60ml无水二氯甲烷溶液中加入2当量(3.5g)2，3-二氯苄胺。恢复该反应介质于室温，搅拌约5小时后，使用二氯甲烷萃取，使用1M硫酸氢钠溶液洗2次，然后使用碳酸氢钠饱和溶液洗2次。使用饱和氯化钠溶液洗有机相，然后用无水硫酸镁干燥。过滤后蒸发并中二氯甲烷/戊烷混合物中浓缩，得到2.9g(95％)白色粉末。
RMN 300MHz(DMSO)δppm2,16(s，3H)；2,40(s，3H)；4,21(s，2H)；7,28-7,56(m，3H)。
实施例6.22-氨基-4-甲基噻唑5-(N-2，3-二氯苄基)磺酰胺 于0℃，将步骤6.1得到的2.4g 2-乙酰氨基-4-甲基噻唑5-(N-2，3-二氯苄基)磺酰胺于100ml 2N HCl的溶液加热至100℃6小时。蒸发瓶中物质，然后将残留物取入二氯甲烷中。使用20％碳酸钠溶液洗3次，使用无水硫酸镁干燥有机相。过滤和蒸发后，得到2g白色粉末。
RMN 300MHz(DMSO)δppm2,24(s，3H)；4,02(d，2H)；7,31-7,60(m，3H)；7,69(s，2H)；8,28(t，1H)。
实施例6.32-{2-(S)-[2-(3，5-二氟苯基)乙酰氨基]-戊酰基}氨基-4-甲基噻唑5-(N-2，3-二氯苄基)磺酰胺接着，如实施例1步骤1.4和1.5中所述，由步骤6.2得到的2-氨基-4-甲基噻唑5-(N-2，3-二氯苄基)磺酰胺实现后续的2个偶合反应。
得到0.42g最终产物。
RMN描述于下述表中(化合物n°64)。
LC/MSNH+＝605。
下面的表中示出了一些本发明化合物实施例的化学结构和物理性质。
表1
在表中-在式(I)中，“R3”和“R2，R2’”中的(S)或(R)代表带有R3或R2的不对称碳原子的立体化学结构。对于带有R2的情况下，(S)或(R)不涉及R2、R2’一起形成氧代基团的情况；-MH+使用氢原子质子化化合物的质量数值(化合物质量+1)，由LC-MS测定。
本发明化合物进行了药理学测试，这些测试证明了它们作为治疗活性物质的价值。
特别测试了本发明化合物抑制β-淀粉状肽(β-A4)产生的作用。
β-淀粉状肽(β-A4)是较大前体蛋白质的片断，称为APP(淀粉状前体蛋白质)。该APP产生和存在于各种人类或动物组织细胞中。其在脑组织中的由蛋白酶型酶的裂解导致β-A4肽的形成，该β-A4肽以淀粉状蛋白斑形式聚积。负责产生淀粉状肽的两种蛋白酶是已知的名为β-和γ-分泌酶(Wolfe MS，Secretase targets for Alzheimer’s diseaseidentification and therapeutic potential，J.Med.Chem.2001，44(13)2039-60)。
已证实β-A4肽的渐进沉积是神经毒性的，而且在阿耳茨海默氏病中起到重要的作用。
因此，本发明化合物通过γ-分泌酶的抑制作用作为抑制β-淀粉状肽(β-A4)产生的抑制剂，可以被用于治疗下述病理学老年性痴呆，阿耳茨海默氏病，唐氏综合症，帕金森氏症，淀粉状蛋白血管病和/或脑血管障碍，额颞痴呆(démences fronto-temporales)和皮克病，后创伤性痴呆(démences post-traumatique)，与神经炎性过程相关联的病理学(les pathologies liées àdes processus de neuro-inflammation)，亨延顿氏舞蹈病和科尔萨科夫综合症。
试验是根据下述试验方式进行的。
对于β-淀粉状细胞试验，使用CHO-K1系(lignée)共表达APP的CT100和PS1 M146L纯系30-12。该系靶抑制γ-分泌酶。早老(Preseniline)与γ-分泌酶活性(Wolfe MS，Haass C.，The Role ofpresenilins in gamma-secretase activity，J.Biol.Chem.2001，276(8)5413-6)相关，其与淀粉状蛋白的共表达或其N-端片断导致肽A1-42(β-A4)分泌的增加，从而产生了一种病理学工具，该工具可以评估β-A4肽的产生的式(I)化合物的抑制作用。在150μl培养介质中，96-孔培养板被每孔接种1×105细胞。血清最小存在量(最终1.3％)允许细胞在5％ CO2存在下于37℃培养2-3小时后粘附于塑料。在10μMDMSO最终1％的条件下测试该产物(15μl)，并于37℃在5％ CO2存在和100％湿度下培养24-25小时。培养24-25小时后，该细胞上清液(100μl)被转移至ELISA板，使用捕获抗体6E10(6E10，抗原决定基aa1-17，INTERCHIM/SENETEK 320/10)处理，以测定在本发明化合物存在下细胞分泌的淀粉状肽的量。使用一系列合成对照肽，“肽1-40”以5和10ng/ml进行平行处理。该ELISA板于4℃被培养整夜。
在对应于截断肽、偶合于生物素的肽1-28的竞争剂存在下间接测定固定肽的量，该生物素接着被偶合至碱性磷酸酶的抗生物素蛋白链菌素检测。该底物、对-硝基苯基磷酸盐(pNPP FAST p-NitrophenylPhosphate，Sigma N2770)给出黄色可溶性反应产物，其可以在405nm处读到。使用0.1M EDTA溶液停止该反应。为此，随后在ELISA板中固定淀粉状肽，将50μl生物素化肽1-28加入在100μl细胞上清液中，并在室温下培养30分钟。然后，洗涤该ELISA板3次。在吸收剂纸上干燥后，每孔被加入100μl抗生物素蛋白链菌素-碱性磷酸酶(Interchim/Jackson ImmunoResearch Laboratories 016-050-084)，并在室温下培养1小时。该板再次被洗涤，然后以每孔100μl的量加入碱性磷酸酶底物(pNPP1mg/ml)。在室温下培养30分钟后，通过加入每孔100μl 0.1M EDTA停止该反应，并在405nm处读。
本发明式(I)化合物最大活性(表示为EC50，50％作用浓度)为小于500nM，更特别地小于100nM。
表2给出了本发明一些化合物的EC50值。
表2
该生物试验结果表明该化合物是β-淀粉状肽(β-A4)形成的抑制剂。
因此，这些化合物可以用于其中β-淀粉状肽(β-A4)形成抑制剂提供治疗益处的病理学的治疗中。特别地，这样的病理学是老年性痴呆，阿耳茨海默氏病，唐氏综合症，帕金森氏症，淀粉状蛋白血管病，脑血管障碍，额颞痴呆(démences fronto-temporales)和皮克病，后创伤性痴呆，与神经炎性过程相关联的病理学，亨延顿氏舞蹈病和科尔萨科夫综合症。
本发明化合物在制备用于治疗上述病理学的药物中的用途构成本发明整体的一部分。
本发明还提供包含式(I)化合物或其与药学可接受的酸加成盐或式(I)化合物的水合物或溶剂化物的药物。这些药物具有其治疗用途，特别地在治疗上述病理学中的用途。
本发明另一方面涉及包含至少一种本发明化合物作为活性成分的药物组合物。这些药物组合物包含有效剂量的本发明化合物，或者所述化合物的药物可接受的盐，或其水合物或溶剂化物，和任选一种或多种药物可接受的赋形剂。
根据药物形式和所需施用方式，所述赋形剂选自本领域技术人员公知的有用赋形剂。
在本发明用于口服、舌下、皮下、肌内、静脉、外用、局部、气管内、鼻内、经皮、或直肠施用的药物组合物中，以上式(I)的活性成分或其盐、溶剂化物或水合物，如果需要，可以以单位施用(unitaired’administration)形式、作为与常规药物赋形剂的混合物而施用于预防或治疗上述疾病或障碍的人和动物。
合适的单位施用形式包括口服形式例如片剂、软或硬胶囊、粉末、颗粒、咀嚼胶和口服溶液或悬浮液，舌下，含服，气管内，眼内或鼻内施用形式，以及通过吸入、皮下、肌内或静脉施用形式，直肠施用形式、和植入。对于外用而言，根据本发明的化合物可以采用膏状物、软膏剂或洗剂。
通过实施例，以片剂形式的根据本发明的化合物的单位施用形式可包括以下组分根据本发明的化合物 50.0mg甘露醇 223.75mg交联甲羧纤维素钠(Sodium croscaramellose)6.0mg玉米淀粉15.0mg羟基丙基甲基纤维素 2.25mg硬脂酸镁3.0mg为了得到所需治疗或预防效果，活性成分的剂量可以每天每kg体重为0.1mg-200mg。尽管这些剂量是平均状态的例子，它们可根据具体情况，其中更高或更低剂量是合适的这些剂量并未脱离本发明的范围。根据通常实践，对每个病人合适的剂量是由医师根据施用模式和所述病人重量与反应而决定。
每单位剂量可以饱和0.1-1000mg，优选0.1-500mg活性成分与一种或多种药物赋形剂结合。该单位剂量可以每天施用1-5次，以每天施用剂量0.5-5000mg优选0.5-2500mg。
根据其另一方面，本发明也涉及用于治疗或预防上述病理学的方法，其包括给施用本发明式(I)化合物，或所述化合物的药物可接受盐或水合物。
权利要求
1.通式(I)化合物 其中，R1代表任选被1-3个选自卤素、三氟甲基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6硫代烷基、噻吩或苯基的取代基取代的C1-6烷基；或代表C3-7环烷基、噻吩、苯并噻吩、吡啶基、呋喃基、或苯基；所述苯基任选被1-3个选自卤素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、亚甲基二氧基、苯氧基、苄基氧基或三氟甲基的取代基取代；R2和R’2彼此独立地代表氢原子、卤素原子、羟基、C1-3烷氧基、C1-3烷基、C3-7环烷基或O-C(O)-C1-6烷基，或R2和R’2一起形成氧代基；R3代表氢原子或任选被羟基、C1-6环烷基或C1-3烷氧基取代的C1-6烷基；R4和R5彼此独立地代表氢原子、C1-7烷基、三氟甲基、基团L或基团Z； G代表C1-7烷基或简单键；M代表C3-7环烷基，苯基，萘基或吡啶基，任选被一种或多种取代基取代的基团M，其取代基选自卤原子，羟基，C1-3烷基，C1-3烷氧基，三氟代甲基，三氟代甲氧基，-O-CHF2；J代表氢原子或基团-Y-K；Y代表简单键，氧原子，硫原子，基团-C1-4亚烷基-，-O-C1-4亚烷基-，-C1-4亚烷基-O-或-N(W)-，任选被羟基或C1-3烷氧基取代的-C1-4亚烷基；W或者代表氢原子，或者代表任选被苯基取代的C1-3烷基，或者代表苯基；K代表基团苯基或吡啶基，任选被一种或多种下述基团取代的基团K卤原子，基团羟基，C1-3烷基，C1-3烷氧基，三氟代甲基，三氟代甲氧基，-O-CHF2；条件是至少一个基团R4或R5代表基团Z；Z代表基团CN，SO2NR6R7，或杂芳族基团；所述杂芳基任选被基团R8取代；R8或者代表任选被CN、苯基或苯氧基取代的C1-4烷基；或者代表苯基；所述苯基和苯氧基任选被1-3个选自卤原子，C1-3烷基，C1-3烷氧基，三氟代甲基的基团取代；R6和R7彼此独立地代表，或者氢原子，或者任选被C3-7环烷基，C3-7环链烯基，C1-3烷氧基，苯基，萘基，吗啉基或吡啶基取代的C1-6烷基；或者代表C3-7环烷基，C1-6烷氧基，苯基或二氢茚基；所述基团C3-7环烷基，C3-7环链烯基，苯基，萘基，吗啉基，吡啶基和二氢茚基任选被1-2个选自C1-3烷基，羟基，C1-3烷氧基，苯基或卤原子的基团取代；或R6和R7与其所带氮原子形成氮丙啶环，氮杂环丁烷环，吡咯烷环，哌啶环，吗啉环或苯并哌啶环。该化合物呈碱或与酸的加成盐、水合物或溶剂化物的形式。
2.根据权利要求1的化合物，特征在于R1代表任选被1-3个卤素原子取代的C1-6烷基或苯基；R2和R′2彼此独立地代表氢原子或羟基；R3代表C1-6烷基；R4和R5彼此独立地代表氢原子，C1-7烷基，三氟代甲基，基团L或基团Z； G代表C1-7烷基或简单键；M代表任选地被一个或多个卤素原子取代的苯基；J代表氢原子或基团-Y-K；Y代表简单键，氧原子，-O-C1-4亚烷基-；K代表任选地被一种或多种基团取代的苯基，该取代基团选自卤原子，C1-3烷基，三氟代甲基；条件是至少一个基团R4或R5代表基团Z；Z代表基团CN，SO2NR6R7，或杂芳基；所述杂芳基任选被基团R8取代；R8或者代表C1-4烷基，任选被苯基取代；或者代表苯基；R6和R7彼此独立地代表氢原子，或者任选被苯基或萘基取代的C1-6烷基；或者代表苯基或二氢茚基；所述苯基任选被一种或两种选自C1-3烷氧基，苯基或卤原子取代；或者R6和R7，与其所带氮原子形成苯并哌啶环；该化合物呈碱或与酸的加成盐、水合物或溶剂化物的形式。
3.根据权利要求1或权利要求2的式(I)的化合物，特征在于R1代表C1-4烷基，优选异丙基或叔丁基，或被两个氟原子取代的苯基；R2和R’2彼此独立地代表氢原子或羟基；R3代表C1-4烷基，优选甲基、乙基或丙基；该化合物呈碱或与酸的加成盐、水合物或溶剂化物的形式。
4.制备在前权利要求1-3任一项的式(I)的化合物的方法，包含下述步骤采用通式(III)2-氨基噻唑 与通式(II)酰基氨基酸 实现肽偶合，其中R1，R2，R’2，R3，R4和R5如权利要求1-3任一项式(I)化合物中的定义。
5.制备在前权利要求1-3任一项的式(I)的化合物的方法，包含下述步骤采用通式(IV)化合物 与通式(VI)胺 实现肽偶合，其中R1，R2，R’2，R3，R4和R5如权利要求1-3任一项式(I)化合物中的定义。
6.药物，其特征在于它包含权利要求1-3任一项式(I)化合物，该化合物呈药物可接受的碱、盐、水合物或溶剂化物的形式。
7.药物组合物，其特征在于它包括至少一种根据权利要求1-3任一项的式(I)的化合物，该化合物呈药物可接受的碱、盐、水合物或溶剂化物的形式，以及任选一种或多种药物可接受赋形剂。
8.根据权利要求1-3任一项的式(I)的化合物在制备用于治疗其中β-淀粉状肽β-A4形成抑制剂提供治疗益处的病理学的药物中的用途，其中该化合物呈药物可接受的碱、盐、水合物或溶剂化物的形式。
9.权利要求1-3任一项的式(I)化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗老年性痴呆，阿耳茨海默氏病，唐氏综合症，帕金森氏症，淀粉状蛋白血管病、脑血管障碍，额颞痴呆和皮克病，后创伤性痴呆，与神经炎性过程相关联的病理学，亨延顿氏舞蹈病和/或科尔萨科夫综合症，其中该化合物呈药物可接受的碱、盐、水合物或溶剂化物的形式。
全文摘要
本发明涉及通式(I)化合物，其中，R
文档编号A61P25/28GK1910165SQ200580002588
公开日2007年2月7日 申请日期2005年1月7日 优先权日2004年1月16日
发明者S·巴尔策尔, M·帕斯卡尔, V·范多斯莱尔 申请人:赛诺菲-安万特
技术领域：
本发明的主题是酰基氨基噻唑衍生物、其制备和其治疗用途。
已知酰基氨基噻唑衍生物化合物(在文献WO03/014095 A和WO2004/033439 A中有所描述)，其抑制β-淀粉状蛋白肽(β-A4)的形成。
总是存在一种试图发现和发展抑制β-淀粉状蛋白肽(β-A4)形成的产品的需求。本发明化合物符合此目的。
本发明第一个主题是通式(I)化合物 其中，R1或者代表任选被1-3个取代基取代的C1-6烷基，取代基选自卤素、三氟代甲基，羟基，C1-6烷氧基，C1-6硫代烷基，噻吩或苯基；或者代表C3-7环烷基，噻吩，苯并噻吩，吡啶基，呋喃基或苯基；所述苯基任选被1-3个取代基取代，所述取代基选自卤原子，C1-6烷基，C1-6烷氧基，羟基，亚甲基二氧基，苯氧基，苄氧基或三氟代甲基；R2和R′2彼此独立地代表彼此独立地代表氢原子，卤原子，羟基，C1-3烷氧基，C1-3烷基，C3-7环烷基，O-C(O)-C1-6烷基，或R2和R′2一起形成氧代基团；R3或者代表氢原子，或者代表C1-6烷基，其任选被羟基，C1-6环烷基或C1-3烷氧基取代；R4和R5彼此独立地代表氢原子，C1-7烷基，三氟代甲基，基团L或基团Z；
G代表C1-7烷基或简单键；M代表C3-7环烷基，苯基，萘基或吡啶基，任选被一种或多种取代基取代的基团M，其取代基选自卤原子，羟基，C1-3烷基，C1-3烷氧基，三氟代甲基，三氟代甲氧基，-O-CHF2；J代表氢原子或基团-Y-K；Y代表简单键，氧原子，硫原子，基团-C1-4亚烷基-，-O-C1-4亚烷基-，-C1-4亚烷基-O-或-N(W)-，任选被羟基或C1-3烷氧基取代的-C1-4亚烷基；W或者代表氢原子，或者代表任选被苯基取代的C1-3烷基，或者代表苯基；K代表基团苯基或吡啶基，任选被一种或多种下述基团取代的基团K卤原子，羟基，C1-3烷基，C1-3烷氧基，三氟代甲基，三氟代甲氧基，-O-CHF2；条件是至少一个基团R4或R5代表基团Z；Z代表基团CN，SO2NR6R7，或杂芳基团杂芳基；所述杂芳基任选被基团R8取代；R8或者代表任选被CN、苯基或苯氧基取代的C1-4烷基；或者代表苯基；所述苯基和苯氧基任选被1-3个选自卤原子，C1-3烷基，C1-3烷氧基，三氟代甲基的基团取代；R6和R7彼此独立地代表，或者氢原子，或者任选被C3-7环烷基，C3-7环链烯基，C1-3烷氧基，苯基，萘基，吗啉基或吡啶基取代的C1-6烷基；或者代表C3-7环烷基，C1-6烷氧基，苯基或二氢茚基；所述基团C3-7环烷基，C3-7环链烯基，苯基，萘基，吗啉基，吡啶基和二氢茚基任选被1-2个选自C1-3烷基，羟基，C1-3烷氧基，苯基或卤原子的基团取代；或R6和R7与其所带氮原子形成氮丙啶环，氮杂环丁烷环，吡咯烷环，哌啶环，吗啉环或苯并哌啶环。
在通式(I)化合物中，所述化合物的第一亚组(sous-groupe)由下述化合物构成，其中R1代表任选被1-3个卤素原子取代的C1-6烷基或苯基；和/或R2和R′2彼此独立地代表氢原子或羟基；和/或
R3代表C1-6烷基；和/或R4和R5彼此独立地代表氢原子，C1-7烷基，三氟代甲基，基团L或基团Z； G代表C1-7烷基或简单键；和/或M代表任选地被一个或多个卤素原子取代的苯基；和/或J代表氢原子或基团-Y-K；和/或Y代表简单键，氧原子，-O-C1-4亚烷基-；和/或K代表任选地被一种或多种基团取代的苯基，该取代基团选自卤原子，C1-3烷基，三氟代甲基；条件是至少一个基团R4或R5代表基团Z；和/或Z代表基团CN，SO2NR6R7，或杂芳基；所述杂芳基任选被基团R8取代；R8或者代表C1-4烷基，任选被苯基取代；或者代表苯基；和/或R6和R7彼此独立地代表氢原子，或者任选被苯基或萘基取代的C1-6烷基；或者代表苯基或二氢茚基；所述苯基任选被一种或两种选自C1-3烷氧基，苯基或卤原子取代；或者R6和R7，与其所带氮原子形成苯并哌啶环。
其中R1、R2、R’2、R3、R4、R5、G、M、J、Y、K、Z、R6、R7和R8同时如上述第一亚组化合物的定义的化合物形成第二亚组。
在通式(I)化合物和上述亚组中，第三亚组化合物由下述化合物构成R1代表C1-4烷基，优选异丙基或叔丁基，或被两个氟原子取代的苯基；和/或R2和R’2彼此独立地代表氢原子和羟基；和/或R3代表C1-4烷基，优选甲基、乙基或丙基。
在本发明范围内，应当理解-Ct-z，其中t和z可以为1-7，是指具有t-z个碳原子的碳链，例如具有1-3个碳原子C1-3碳链，具有3-6个碳原子C3-6碳链，等；-烷基，是指直链或支链的饱和脂族基团例如C1-6烷基代表直链或支链的具有1-6个碳原子的碳链，更特别地甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基等，优选甲基、乙基、丙基或1-甲基乙基；-亚烷基是指直链或支链的饱和二价烷基例如C1-3-亚烷基基团代表直链或支链的1-3个碳原子二价碳链，更特别地亚甲基、亚乙基、亚异丙基，亚丙基；-环烷基，是指环状烷基基团，例如，C3-7环烷基代表3-7个碳原子的环状碳链，更特别地环丙基、环丁基、环戊基或环己基，环庚基，优选环戊基或环己基；-环链烯基，是指单-或多-不饱和环状烷基，例如C3-7环链烯基代表3-7个碳原子单-或多-不饱和环状碳链，更特别地环丙烯基、环丁烯基、环戊烯基、环己烯基、环庚烯基，优选环戊烯基或环己烯基；-硫代烷基，是指具有直链或支链的饱和脂族链的S-烷基；-烷氧基，是指具有直链或支链的饱和脂族链的O-烷基；-卤原子，是指氟、氯、溴或碘；-R2和R2’一起形成氧代基，是指所述基团如 -杂芳基团是指包含1-10个碳原子和1-4杂原子的环状芳族基团，其中杂原子如氮、氧或硫。可以例举的杂芳基的例子包括唑基、二唑基、四唑基、苯并唑基等。
通式(I)化合物可以包含一个或多个不对称碳原子。因此，它们可以以对映体或非对映异构体形式存在。这些对映体或非对映异构体以及它们的混合物，这里包括外消旋混合物形成本发明的一部分。
当带有R2和R’2的碳和/或带有R3的碳是非对称的，优选带有R2和R’2的碳为(S)构型和/或带有R3的碳为(S)构型的通式(I)化合物。
通式(I)化合物可以以碱或与酸的加成盐的形式存在。这样的加成盐是本发明的一部分。
这些盐有利地是与药物可接受的酸制备得到，但是其它有用的酸的盐也是本发明的一部分，其中其它有用的酸例如用于纯化或分离通式(I)化合物的酸。
通式(I)化合物可以是水合物或溶剂化物的形式，即与一个或多个分子水或与溶剂以缔合或组合的形式存在。这样一些水合物和溶剂化物也是本发明的一部分。
本发明还提供制备通式(I)化合物的方法。
此外，这些化合物可以通过下述流程所示制备得到，其中操作条件对于本领域技术人员而言是普通的操作条件。
注意的是保护基团，当化学反应发生时，可以阻断官能团或位点的反应性并根据本领域技术人员已知方法裂解后恢复该分子的基团。关于保护基团和保护方法以及去保护的例子在Greene等人的Protective groups in Organic Synthesis，Greene和coll.，(第二版)(JohnWiley& Sons，Inc.，NewYork)中有所描述。
在下述通式(II)至(XXI)中化合物中的R1、R2、R’2、R3、R4、R5、G、M、J、Y、K、Z、R6、R7和R8如通式(I)化合物中的定义，除非确切限定其它定义。
根据下述流程1，采用通式(III)2-氨基噻唑与通式(II)酰基氨基酸根据本领域技术人员已知条件通过肽偶合得到通式(I)化合物，例如在六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷)磷盐(PyBOP)或六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷盐(BOP)和N-乙基吗啉或N-甲基吗啉存在下在0℃至室温下在惰性溶剂如N，N-二甲基甲酰胺、乙腈或二氯甲烷中进行。
采用通式(IV)化合物与通式(V)保护酸根据如上述本领域技术人员已知方法通过肽偶合得到通式(II)化合物，其中Pg代表保护基团，例如苄基。
然后将如此得到的化合物去保护。在保护基为苄基的情况下，该化合物于室温下在氢气氛压力下在碳上钯存在下在无水乙醇中预先氢化该化合物，得到通式(II)化合物。
流程1 或者，该通式(I)化合物可以根据下述流程2制备得到。
根据流程2，采用通式(IV)化合物与通式(VI)胺根据本领域技术人员已知方法通过肽偶合得到通式(I)化合物，例如在羟基苯并三唑水合物(HOBt)和1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(EDAC，HCl)存在下进行。
流程2 可以采用通式(III)2-氨基噻唑与通式(VII)保护胺(其中，Pg代表保护基团，例如N-叔丁氧基羰基(Boc))根据如上所述本领域技术人员已知方法通过肽偶合得到通式(VI)化合物。然后将由此得到的该化合物去保护。在保护基为Boc的情况下，在溶解于无水溶剂或三氟乙酸中的氢氯酸气体存在下，通过酸解去保护，得到通式通式(VI)化合物。
可以通过氧化通式(I)化合物(其中，R2或R’2代表羟基)的羟基得到该通式(I)化合物(其中，R2和R’2形成氧代基)。该反应可以根据本领域技术人员已知的条件实现，例如以Dess Martin反应。这些化合物还可以通过通式(IV)酮酸(cétoacide)(其中R2或R’2一起形成氧代基)与通式(VI)胺根据如上所述本领域技术人员已知方法直接偶合得到。所述酮酸的制备方法是本领域技术人员已知的。
可以以下述流程3-6制备通式(III)化合物，其中R4或R5＝Z，这里Z代表CN基团或杂芳族型基团。
通式(IIIa)和(IIIb)化合物，即其中R4或R5代表二唑基团的通式(III)化合物可以根据下述流程3和4所示方法得到。
流程3 根据上述流程3，采用通式(VIII)化合物(其中R代表C1-6烷氧基，Pg代表保护基团，如叔丁氧基羰基(Boc))与式H2NC(＝NOH)R8偕胺肟在氢化钠和分子筛4粉末存在下在无水四氢呋喃中回流反应得到通式(IIIa)化合物。然后根据本领域技术人员已知的条件将该化合物去保护。
根据上述流程4，采用通式(IX)化合物(其中Pg代表保护基团，如Boc)与氨水(ammoniaque)在例如HOBt和(EDAC，HCl)存在下通过肽偶合得到通式(X)化合物。然后，该通式(X)化合物可以在碱如三乙胺存在下与三氟乙酸酐(TFAA)反应，得到通式(XI)化合物。
流程4 根据Moloney和coll.所述方法(J.Chem.Soc.Perkin Trans I，1999，p.2725)，在碱如甲醇钠存在下，在通式(XI)化合物上加成羟基胺HCl得到通式(XII)化合物。通式(XII)化合物可以接着在碱如氢化钠和通式R8CO2CH3或R8CO2C2H5的酯的存在下被环化。然后根据本领域技术人员已知的条件将因此得到的化合物进行去保护，从而得到通式(IIIb)化合物。
在流程4中所述的制备方法还可以制备通式(IIIc)化合物，即通过根据本领域技术人员已知的条件去保护通式(XI)化合物制备通式(III)化合物(其中，R4或R5代表-CN基团)。
可以根据下述流程5所示方法得到通式(IIId)化合物，即通式(III)化合物，其中R4或R5代表苯并唑基团。
流程5 根据流程5，采用如上定义的通式(IX)化合物与通式(XIII)化合物根据本领域技术人员已知条件通过肽偶合得到通式(IIId)化合物，例如在六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷)磷盐(PyBOP)或六氟磷酸苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)磷盐(BOP)和N-乙基吗啉或N-甲基吗啉存在下在0℃至室温下在惰性溶剂如N，N-二甲基甲酰胺中进行。
然后，由此得到的化合物可以根据Wang和coll.所述方法(Tetrahedron Letters，1997，p.6529)通过Mitsunobu反应被环化，然后根据本领域技术人员已知的方法去保护，以得到通式(IIId)化合物。
流程6 根据流程6中所示方法可以得到通式(IIIe)化合物，即通式(III)化合物(其中，R4或R5代表四唑基团)。根据流程6，采用如上定义的通式(IX)与式R8NH2伯胺根据本领域技术人员已知方法通过肽偶合得到通式(XIV)化合物，例如在HOBt和(EDAC，HCl)存在下进行。然后，由此得到的化合物(XIV)根据本领域技术人员已知的条件(例如，在三苯基膦、二异丙基偶氮二羧酸盐(DIAD)和叠氮三甲基硅烷(TMSN3)存在下)根据De Lombaert和coll.在J.Med.Chem.2000，p.488中所述方法(Tetrahedron Letters，1997，p.6529)通过经受Mitsunobu反应。然后根据本领域技术人员已知的条件将因此得到的化合物进行去保护，从而得到通式(IIIe)化合物。
通式(III)化合物(其中，R4或R5代表唑基团)可以由通式(VIII)酯制备得到的相应醛根据本领域技术人员已知方法得到，例如在碱如碳酸钾或甲醇钠存在下根据van Leusen和coll.所述方法(Tetrahedron Letters，1972，p.2369)与异氰酸对-甲苯磺酰甲酯得到。
如上定义的通式(VIII)化合物可以通过保护式(IIIo)化合物得到 例如当Pg代表Boc基团时，在二甲基氨基吡啶存在下在室温下通过在无水四氢呋喃中作用二-叔丁基二碳酸盐得到。
如上定义的通式(IX)化合物可以根据本领域技术人员已知条件通过水解相应式(VIII)化合物的酯功能团得到，例如在60℃下与在四氢呋喃/水7∶3(v/v)混合物中的氢氧化锂作用。
通式(IIIo)化合物可以通过下述流程7和8所示方法制备得到。
通式(IIIo)化合物(其中，R4＝-C(O)R，R代表C1-6烷氧基)可以通过下述流程7制备得到。
流程7 根据流程7，通式(IIIo)化合物可以由式(XV)醛与式Cl2CHCOR乙酸二氯甲基酯(其中，R代表C1-6烷氧基)反应制备得到，例如在0℃下根据Takeda所述方法(Bull.Chem.Soc.JP，1970，p.2997)，例如甲醇钠或乙醇钠下进行。在例如甲醇或乙醇存在下回流4-8小时由硫脲处理产物(XVI)和(XVII)混合物，以得到式(IIIo)化合物。
通式(IIIo)化合物(其中，R5＝-C(O)R，R代表C1-6烷氧基)可以通过下述流程8所示方法制备得到。
流程8 根据流程8，可以通过溴化式(XX)β-酮-酯(其中，R代表C1-6烷氧基)，然后根据A.Barton和coll.所述方法(J.C.S Perkin I，1982，p.159)使由此得到的式(XXI)化合物与硫脲反应，从而得到式(IIIo)化合物。
式(XX)β-酮-酯可以通过式(XVIII)酮与式CO(R)2二烷基碳酸酯(其中，R代表C1-6烷氧基)根据L.Crombie和coll.所述方法(J.C.S Perkin Trans I，1987，p.323)得到。该式(XX)β-酮-酯还可以通过羰基二咪唑(CDI)活化的式(XIX)酸与式RCOCH2CO2K丙二酸酯(其中，R代表C1-6烷氧基)根据D.W.Brooks和coll.所述方法(Angew.Chem.Int.Ed.，1979，p.72)得到。
在R4代表氢原子的情况下，根据R.Zhao和coll.在TetrahedronLetters，2001，p.2101中所述方法制备式(XX)化合物。
式(III)化合物(其中，R4或R5＝Z，这里Z代表SO2NR6R7)可以由商购磺酰氯或由文献(例如，R.P.Fatheree和coll.的WO99/26932A1，I.T.Barnish和coll.的J.Med.Chem.，1980，p.117和R.Fischer和coll.的WO01/047904A1)中所述化合物制备得到，或可以通过已公开的方法或本领域技术人员已知的方法制备得到。
在流程1-8中，制备方法没有描述的起始化合物和反应化合物，尤其是式(III)、式(IV)、式(V)、式(VII)、式(VIII)、式(IX)、式(XIII)、式(XV)、式(XVIII)、式(XIX)、CO(R)2、RC(O)CH2CO2K、Cl2CHCOR、R8NH2、R8CO2CH3、R8CO2C2H5、H2NC(＝NOH)R8，是商购或文献中有所描述，或可以通过已公开的方法或本领域技术人员已知的方法制备得到。
例如，式(IV)化合物(其中，R2或R2’代表羟基)可以根据D.A.Evans和coll.(J.C.S.，Chem.Comm.1973，p.55)所述方法加成三甲基甲硅烷基氰化物和醛制备得到，或根据I.Shinn和coll.(J.Org.Chem.，2000，p.7667)所述方法通过亚硝酸钠与α-氨基酸作用制备得到。
例如，式H2NC(＝NOH)R8偕胺肟(amidoxime)可以根据本领域技术人员已知的方法制备得到，例如根据Moloney和coll.在J.Chem.Soc.Perkin Trans I，1999，p.2725中所述方法。
当化合物官能团是反应性的，例如当R1包含羟基，该官能团可能需要在反应前进行预先保护。本领域技术人员可以结合预先保护的需要来决定。
下述实施例描述本发明一些化合物的制备。这些实施例不应视为对本发明的限制，仅用于说明本发明。
示例化合物的编号已在下面的表中给出。微型元素分析仪、RMN、IR或LC-MS(质谱-液相色谱联用)用于确认所得化合物的结构。
实施例12-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3-甲基)丁酰基氨基]戊酰基}氨基-5-(1-甲基乙基-4-(3-苯基-1，2，4-二唑-5-基)噻唑(化合物n°8)
实施例1.12-氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-羧酸甲酯 于0℃，向14.4g异丁醛在400ml二乙醚的溶液中加入24.6g二氯乙酸甲酯，然后滴加400ml甲醇钠在甲醇中的溶液(0.5M)。于0℃，1小时后加入100ml氯化钠饱和水溶液，用醚萃取。使用无水硫酸钠干燥有机相。仅蒸发醚保留甲醇，加入8g硫脲并加热至回流6小时。蒸干反应介质，取入乙酸乙酯，用10％氢氧化铵水溶液洗涤，然后使用氯化钠饱和水溶液洗涤。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。取残留物于100ml醚中，并过滤。得到18.6g白色固体。
RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,25(d，6H)；3,35(s，3H)；4,10(m，1H)；5,50(s，2H)。
实施例1.22-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-羧酸甲酯 将6.96g二-叔丁基二碳酸盐和0.177g二甲基氨基吡啶加入5.81g由步骤1.1得到的2-氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-羧酸甲酯在300ml四氢呋喃溶液中。在室温下搅拌该混合物16小时。蒸发反应介质。取残留物至乙酸乙酯中，使用0.5N盐酸水溶液洗涤2次，使用水洗涤1次，然后使用饱和氯化钠水溶液洗涤1次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。得到8.35g固体形式的被保护的氨基噻唑衍生物，其是可以如此使用的而无需纯化。
LC/MSMH+＝401(M-Boc)+＝301。
实施例1.32-氨基-5-(1-甲基乙基)-4-(3-苯基-1，2，4-二唑-5-基)噻唑 在室温下缓慢将0.96g氢化钠和2g分子筛4加入2.9g苄胺肟在150ml四氢呋喃溶液中。于60℃加热化合物1.5小时。在室温下放置该混合物，然后加入3.6g步骤1.2得到的2-叔丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-羧酸甲酯于30ml四氢呋喃中。于60℃加热该反应混合物12小时。用水停止反应。过滤分子筛然后浓缩。将该产物取入乙酸乙酯中。然后，蒸发干燥，得到3.4g白色固体。
于室温将3.4g上述得到的产物在60ml三氟乙酸溶液中搅拌30分钟，然后蒸发。将其取入乙酸乙酯中，使用饱和碳酸钠水溶液洗涤2次，然后使用饱和氯化钠水溶液洗涤2次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后蒸发得到1.8g白色固体。
RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,38(d，6H)；4,21(m，1H)；5,23(s，2H)；7,50(m，3H)；8,20(m，2H)。
实施例1.42-[2-(S)-戊酰基氨基]氨基-5-(1-甲基乙基)4-(3-苯基-1，2，4二唑-5-基)噻唑
于0℃，将0.75ml N-甲基吗啉、3.5g PyBOP和1.5g(S)-Bocnorvaline加入至1.77g由步骤1.3得到的2-氨基-5-(1-甲基乙基)-4-(3-苯基-1，2，4-二唑-5-基)噻唑在50ml二甲基甲酰胺溶液中。放置反应介质至室温，然后搅拌16小时。蒸发后，将残留物取入乙酸乙酯，并使用碳酸氢钠饱和水溶液洗涤2次，使用水洗涤2次，然后使用1H硫酸氢钾水溶液洗涤1次，然后使用饱和氯化钠水溶液洗涤1次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。将该残留物通过硅胶柱色谱，使用二氯甲烷和乙酸乙酯95∶5(v/v)混合物进行提取。得到1.4g白色固体。
于室温下，将1.4g上述得到产物的60ml三氟乙酸溶液搅拌30分钟，然后蒸发。将残留物取入乙酸乙酯，然后使用碳酸钠饱和水溶液洗涤2次，使用饱和氯化钠水溶液洗涤2次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后蒸发得到1g白色固体。
RMN 300MHz(CDCl3)δppm0,98(t，3H)；1,45(d，6H)；1,62(m，2H)；1,92(m，2H)；3,64(m，1H)；4,25(m，1H)；7,50(m，3H)；8,20(m，2H)。
实施例1.52-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3-甲基)丁酰基氨基]戊酰基}氨基-5-(1-甲基乙基-4-(3-苯基-1，2，4-二唑-5-基)噻唑于0℃，将0.06ml N-甲基吗啉、0.30g PyBOP和0.06gα-羟基氢戊酸(l’acid hydroxyhydrovalerique)加入至0.2g在步骤1.4中得到的2-[2-(S)-戊酰基氨基]氨基-5-(1-甲基乙基)-4-(3-苯基-1，2，4-二唑-5-基)噻唑。放置反应介质于室温并搅拌18小时。蒸发反应介质。将残留物取入乙酸乙酯，并使用碳酸氢钠饱和水溶液洗涤2次，使用水洗涤2次，然后使用1M硫酸氢钾水溶液洗涤1次，然后使用饱和氯化钠水溶液洗涤1次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。将该残留物通过硅胶柱色谱，使用二氯甲烷和乙酸乙酯95∶5(v/v)混合物进行提取。得到0.15g白色固体。
LC/MSMH+＝486。
RMN描述于下述表中(化合物n°8)。
实施例22-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3，3-二甲基)丁酰基氨基]戊酰基}氨基5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-腈(化合物n°22) 实施例2.12-氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-羧酸甲酯 以与实施例1步骤1.1相同的方式进行，仅以2-苄基氧基苯甲醛(42.25g)在400ml二乙醚中的溶液代替异丁醛，于0℃加入25.7g二氯乙酸甲基酯，然后滴加400ml甲醇钠于甲醇中的溶液(0.5M)。于0℃1小时后，加入100ml氯化钠饱和水溶液，并用醚萃取。使用硫脲(10.66g)处理后，得到19g黄色固体。
LC/MSMH+＝341。
实施例2.22-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-羧酸甲酯
将11.5g二叔丁基二碳酸盐和0.4g二甲基氨基吡啶加入至15.7g由步骤2.1得到的2-氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-羧酸甲酯在300ml四氢呋喃的溶液中。在室温下搅拌该混合物16小时。蒸发反应介质。将残留物取入乙酸乙酯，并使用0.5N盐酸水溶液洗涤2次，使用水洗涤1次，然后使用饱和氯化钠水溶液洗涤1次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。得到20.5g固体形式的被保护的氨基噻唑衍生物，其是可以如此使用的而无需纯化。
LC/MSMH+＝441(M-Boc)+＝341。
实施例2.32-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-羧酸 于室温下，将在80ml蒸馏水中的1.35g氢氧化锂溶液加入至5.6g由步骤2.2得到的2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-羧酸甲酯在150ml四氢呋喃的溶液中。加热该反应介质至四氢呋喃回流16小时，然后浓缩。将残留物取入水中，并使用乙酸乙酯洗2次。使用盐酸酸化水相直至pH～4，使用氯化钠饱和，并使用乙酸乙酯萃取2次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。
LC/MSMH+＝427。
实施例2.42-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-酰胺 于0℃，将1.3g N-甲基吗啉、1.7g异丁基氯甲酸盐和8g 25％氢氧化铵溶液加入至4.2g在步骤2.3中得到的2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-羧酸。于室温搅拌反应并搅拌18小时，然后浓缩。将残留物取入乙酸乙酯。使用1M硫酸氢钾水溶液洗2次，使用水洗涤1次，然后使用饱和氯化钠水溶液洗涤1次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。将该残留物通过硅胶柱色谱，使用二氯甲烷/乙酸乙酯80/20(v/v)混合物进行提取，得到3.3g白色固体。
LC/MSMH+＝426。
实施例2.52-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-腈 于0℃，将2.6ml三乙胺和1.7ml三氟乙酸酐加入至3.3g在步骤2.4中得到的2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-酰胺。于0℃搅拌该混合物1小时，然后在室温下搅拌12小时，然后浓缩。将残留物中二氯甲烷中萃取，然后使用1M硫酸氢钾水溶液洗2次，然后使用饱和氯化钠水溶液洗涤2次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。得到1.1g黄色固体。
LC/MSMH+＝408RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,55(s，9H)；5,22(s，2H)；7,00-7,80(m，9H)。
实施例2.62-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3，3-二甲基)丁酰基氨基]戊酰基}氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-腈接着，如实施例1步骤1.3中所述，使用三氟乙酸将步骤2.5得到的化合物去保护，然后根据实施例1步骤1.4和1.5羧酸方法实现后续的2个偶合反应。
得到0.1g最终产物。
RMN描述于下述表中(化合物n°22)。
实施例32-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3，3-二甲基)丁酰基氨基]戊酰基}氨基-5-(2-苄基氧基)苯基-4-(5-甲基-1，2，4-二唑-3-基)噻唑(化合物n°13) 实施例3.12-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-偕胺肟 在4ml 0.5M甲醇钠于甲醇的溶液中，滴加0.136g甲醇中的羟基胺。其呈白色沉淀，于室温下搅拌反应介质1小时，然后加入实施例2步骤2.5中得到的0.8g 2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-腈。加热该混合物15小时，然后蒸发甲醇。将残留物于乙酸乙酯中萃取，然后使用饱和氯化钠水溶液洗2次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。得到0.67g固体。
LC/MSMH+＝441。
实施例3.22-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基-4-(5-甲基-1，2，4-二唑-3-基)噻唑 在室温下缓慢将0.75g氢化钠和0.5g分子筛4加入0.66g步骤3.1得到的2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基噻唑4-偕胺肟于30ml四氢呋喃溶液中。于60℃加热化合物1.5小时，然后加入220μl乙酸乙酯，继续加热至60℃ 12小时。用水停止反应。过滤分子筛然后浓缩溶液。将该产物取入乙酸乙酯中。然后，蒸发干燥，得到0.58g白色固体。
RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,53(s，9H)；2,48(s，3H)；5,04(s，2H)；6,90-7,42(m，9H)；8,00(s，1H)。
实施例3.32-氨基-5-(2-苄基氧基)苯基4-(5-甲基-1，2，4-二唑-3-基)噻唑
于室温下，将步骤3.2中得到的0.58g 2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(2-苄基氧基)苯基-4-(5-甲基-1，2，4-二唑-3-基)噻唑于30ml三氟乙酸的溶液搅拌30分钟，然后蒸发。将残留物取入乙酸乙酯，然后使用碳酸钠饱和水溶液洗涤2次，使用饱和氯化钠水溶液洗涤2次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后蒸发得到0.46g白色固体。
RMN 300MHz(CDCl3)δppm2,54(s，3H)；5,07(s，2H)；6,98-7,48(m，9H)。
实施例3.42-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3，3-二甲基)丁酰基氨基]戊酰基}氨基-5-(2-苄基氧基)苯基-4-(5-甲基-1，2，4-二唑-3-基)噻唑根据实施例1步骤1.4和1.5中所述方法实现两个后续偶合反应。
得到0.270g最终产物。
RMN描述于下述表中(化合物n°13)LC/MSMH+＝578。
实施例42-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3，3-二甲基)丁酰基氨基]戊酰基}氨基-5-(1-甲基乙基)-4-(1，3-苯并唑-2-基)噻唑(化合物n 34) 实施例4.12-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-羧酸
根据实施例2步骤2.3中所述的方法使用实施例1步骤1.2得到的2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-羧酸甲酯制备相应的酸(3g)。
LC/MSMH+＝287RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,20(d，6H)；1,50(s，9H)；4,40(m，1H)。
实施例4.22-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-(2-羟基)苯基酰胺(carboxamide) 于0℃，将1.2g N-甲基吗啉、6.11g PyBOP和1.3g 2-氨基苯酚加入至3g在步骤4.1得到的2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-羧酸于75ml二甲基甲酰胺的溶液中。放置反应介质于室温并搅拌18小时，然后浓缩。将残留物取入乙酸乙酯，并使用碳酸氢钠饱和水溶液洗涤2次，使用水洗涤2次，然后使用1M硫酸氢钾水溶液洗涤1次，然后使用饱和氯化钠水溶液洗涤1次。使用无水硫酸钠干燥有机相，然后浓缩。将该残留物通过硅胶柱色谱，使用石油醚和乙酸乙酯9∶1(7∶3)(v/v)混合物进行提取。得到2.7g橙色粉末。
LC/MSMH+＝378。
RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,35(d，6H)；1,36(s，9H)；4,33(m，1H)；6,80-7,20(m，4H)；7,78(s，1H)；9,30(s，1H)；9,52(s，1H)。
实施例4.32-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)-4-(1，3-苯并唑-2-基)噻唑 于0℃，在步骤4.2得到的2.72g 2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)噻唑4-(2-羟基)苯基酰胺于80ml四氢呋喃的溶液中加入2.1g三苯膦，然后滴加1.86g DIAD于30ml四氢呋喃的溶液中。缓慢恢复该反应介质于室温，搅拌16小时然后浓缩。将该残留物通过硅胶柱色谱，使用石油醚和乙酸乙酯9∶1(7∶3)(v/v)混合物进行提取。得到1.2g橙色粉末。
LC/MSMH+＝360。
RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,42(d，6H)；1,50(s，9H)；4,40(m，1H)；7,30-7,80(m，4H)；8,45(s，1H)。
实施例4.42-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3，3-二甲基)丁酰基氨基]-戊酰基}氨基-5-(1-甲基乙基)-4-(1，3-苯并唑-2-基)噻唑接着如实施例1步骤1.3所述方法，使用三氟乙酸将2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-甲基乙基)-4-(1，3-苯并唑-2-基)噻唑去保护，然后根据实施例1步骤1.4和1.5所述方法实现后续的2个偶合反应。
得到0.2g最终产物。
RMN描述于下述表中(化合物n°34)LC/MSNH+＝473。
实施例52-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3，3-二甲基)丁酰基氨基]戊酰基}氨基-5-(1-苄基-1H-四唑-5-基)噻唑(化合物n°51)
实施例5.12-叔-丁氧基羰基氨基噻唑5-羧酸甲酯 将17.42g 3-甲氧基丙烯酸甲酯溶于200ml 1/1 1，4-二烷/水混合物中，在加入29.37g N-溴代琥珀酰亚胺前冷却溶液至0℃。0℃ 1小时后，加入11.42g硫脲，然后加热至80℃ 2小时。然后蒸发该反应混合物，取入乙酸乙酯中，使用10％氢氧化钠水溶液洗2次，然后使用饱和氯化钠溶液洗2次。使用无水硫酸钠干燥有机相，并浓缩。得到19.17g淡灰褐色固体。
LC/MS+NH+＝159。
然后通过Boc基团根据实施例步骤1.2所述方法保护该中间体胺。所得到的产物质量为30.7g。
LC/MSMH+＝259RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,50(s，9H)；3,80(s，3H)；8,06(s，1H)。
实施例5.22-叔-丁氧基羰基氨基噻唑5-苄基酰胺 根据实施例2步骤2.3所述方法制备步骤5.1中所得到的2-叔-丁氧基羰基氨基噻唑5-羧酸甲酯的相应的酸。根据实施例2.4所描述的方法，由2-叔-丁氧基羰基氨基噻唑5-羧酸制备其酰胺(4.35g)。
LC/MSMH+＝334。
实施例5.32-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-苄基-1H-四唑-5-基)噻唑
于0℃，在4.35g步骤5.2所得化合物于200ml四氢呋喃的溶液中加入10.3g三苯基膦，然后滴加7.92gDIAD于30ml四氢呋喃的溶液。15分钟后，加入稀释于20ml四氢呋喃中的4.5g叠氮三甲基硅烷。恢复该反应介质于室温，搅拌24小时然后浓缩。将该残留物取入乙酸乙酯中，过滤形成的沉淀，然后将其通过硅胶柱色谱，使用石油醚和乙酸乙酯5∶5(v/v)混合物进行提取。得到4g橙色油状物，将混合物再通过硅胶柱色谱，使用二氯甲烷和乙酸乙酯10∶0(8∶2)(v/v)混合物进行提取。
LC/MSMH+＝359。
RMN 300MHz(CDCl3)δppm1,50(s，9H)；5,92(s，2H)；7,18(m，2H)；7,37(m，3H)；7,98(s，1H)；8,86(s，1H)。
实施例5.42-{2-(S)-[2-(S)-羟基-(3，3-二甲基)丁酰基氨基]-戊酰基}氨基-5-(1-苄基-1H-四唑-5-基)噻唑接着如实施例1步骤1.3所述方法，使用三氟乙酸将2-叔-丁氧基羰基氨基-5-(1-苄基-1H-四唑-5-基)噻唑去保护，然后根据实施例1步骤1.4和1.5所述方法实现后续的2个偶合反应。
得到0.090g最终产物。
RMN在下述表中描述(化合物n°51)LC/MSNH+＝472.6。
实施例62-{2-(S)-[2-(3，5-二氟苯基)乙酰基氨基]-戊酰基}氨基-4-甲基噻唑5-(N-2，3-二氯苄基)磺酰胺(化合物n°64)
实施例6.12-乙酰胺基-4-甲基噻唑5-(N-2，3-二氯苄基)磺酰胺 于0℃，在商购的2-乙酰胺基-4-甲基噻唑5-磺酰氯于60ml无水二氯甲烷溶液中加入2当量(3.5g)2，3-二氯苄胺。恢复该反应介质于室温，搅拌约5小时后，使用二氯甲烷萃取，使用1M硫酸氢钠溶液洗2次，然后使用碳酸氢钠饱和溶液洗2次。使用饱和氯化钠溶液洗有机相，然后用无水硫酸镁干燥。过滤后蒸发并中二氯甲烷/戊烷混合物中浓缩，得到2.9g(95％)白色粉末。
RMN 300MHz(DMSO)δppm2,16(s，3H)；2,40(s，3H)；4,21(s，2H)；7,28-7,56(m，3H)。
实施例6.22-氨基-4-甲基噻唑5-(N-2，3-二氯苄基)磺酰胺 于0℃，将步骤6.1得到的2.4g 2-乙酰氨基-4-甲基噻唑5-(N-2，3-二氯苄基)磺酰胺于100ml 2N HCl的溶液加热至100℃6小时。蒸发瓶中物质，然后将残留物取入二氯甲烷中。使用20％碳酸钠溶液洗3次，使用无水硫酸镁干燥有机相。过滤和蒸发后，得到2g白色粉末。
RMN 300MHz(DMSO)δppm2,24(s，3H)；4,02(d，2H)；7,31-7,60(m，3H)；7,69(s，2H)；8,28(t，1H)。
实施例6.32-{2-(S)-[2-(3，5-二氟苯基)乙酰氨基]-戊酰基}氨基-4-甲基噻唑5-(N-2，3-二氯苄基)磺酰胺接着，如实施例1步骤1.4和1.5中所述，由步骤6.2得到的2-氨基-4-甲基噻唑5-(N-2，3-二氯苄基)磺酰胺实现后续的2个偶合反应。
得到0.42g最终产物。
RMN描述于下述表中(化合物n°64)。
LC/MSNH+＝605。
下面的表中示出了一些本发明化合物实施例的化学结构和物理性质。
表1
在表中-在式(I)中，“R3”和“R2，R2’”中的(S)或(R)代表带有R3或R2的不对称碳原子的立体化学结构。对于带有R2的情况下，(S)或(R)不涉及R2、R2’一起形成氧代基团的情况；-MH+使用氢原子质子化化合物的质量数值(化合物质量+1)，由LC-MS测定。
本发明化合物进行了药理学测试，这些测试证明了它们作为治疗活性物质的价值。
特别测试了本发明化合物抑制β-淀粉状肽(β-A4)产生的作用。
β-淀粉状肽(β-A4)是较大前体蛋白质的片断，称为APP(淀粉状前体蛋白质)。该APP产生和存在于各种人类或动物组织细胞中。其在脑组织中的由蛋白酶型酶的裂解导致β-A4肽的形成，该β-A4肽以淀粉状蛋白斑形式聚积。负责产生淀粉状肽的两种蛋白酶是已知的名为β-和γ-分泌酶(Wolfe MS，Secretase targets for Alzheimer’s diseaseidentification and therapeutic potential，J.Med.Chem.2001，44(13)2039-60)。
已证实β-A4肽的渐进沉积是神经毒性的，而且在阿耳茨海默氏病中起到重要的作用。
因此，本发明化合物通过γ-分泌酶的抑制作用作为抑制β-淀粉状肽(β-A4)产生的抑制剂，可以被用于治疗下述病理学老年性痴呆，阿耳茨海默氏病，唐氏综合症，帕金森氏症，淀粉状蛋白血管病和/或脑血管障碍，额颞痴呆(démences fronto-temporales)和皮克病，后创伤性痴呆(démences post-traumatique)，与神经炎性过程相关联的病理学(les pathologies liées àdes processus de neuro-inflammation)，亨延顿氏舞蹈病和科尔萨科夫综合症。
试验是根据下述试验方式进行的。
对于β-淀粉状细胞试验，使用CHO-K1系(lignée)共表达APP的CT100和PS1 M146L纯系30-12。该系靶抑制γ-分泌酶。早老(Preseniline)与γ-分泌酶活性(Wolfe MS，Haass C.，The Role ofpresenilins in gamma-secretase activity，J.Biol.Chem.2001，276(8)5413-6)相关，其与淀粉状蛋白的共表达或其N-端片断导致肽A1-42(β-A4)分泌的增加，从而产生了一种病理学工具，该工具可以评估β-A4肽的产生的式(I)化合物的抑制作用。在150μl培养介质中，96-孔培养板被每孔接种1×105细胞。血清最小存在量(最终1.3％)允许细胞在5％ CO2存在下于37℃培养2-3小时后粘附于塑料。在10μMDMSO最终1％的条件下测试该产物(15μl)，并于37℃在5％ CO2存在和100％湿度下培养24-25小时。培养24-25小时后，该细胞上清液(100μl)被转移至ELISA板，使用捕获抗体6E10(6E10，抗原决定基aa1-17，INTERCHIM/SENETEK 320/10)处理，以测定在本发明化合物存在下细胞分泌的淀粉状肽的量。使用一系列合成对照肽，“肽1-40”以5和10ng/ml进行平行处理。该ELISA板于4℃被培养整夜。
在对应于截断肽、偶合于生物素的肽1-28的竞争剂存在下间接测定固定肽的量，该生物素接着被偶合至碱性磷酸酶的抗生物素蛋白链菌素检测。该底物、对-硝基苯基磷酸盐(pNPP FAST p-NitrophenylPhosphate，Sigma N2770)给出黄色可溶性反应产物，其可以在405nm处读到。使用0.1M EDTA溶液停止该反应。为此，随后在ELISA板中固定淀粉状肽，将50μl生物素化肽1-28加入在100μl细胞上清液中，并在室温下培养30分钟。然后，洗涤该ELISA板3次。在吸收剂纸上干燥后，每孔被加入100μl抗生物素蛋白链菌素-碱性磷酸酶(Interchim/Jackson ImmunoResearch Laboratories 016-050-084)，并在室温下培养1小时。该板再次被洗涤，然后以每孔100μl的量加入碱性磷酸酶底物(pNPP1mg/ml)。在室温下培养30分钟后，通过加入每孔100μl 0.1M EDTA停止该反应，并在405nm处读。
本发明式(I)化合物最大活性(表示为EC50，50％作用浓度)为小于500nM，更特别地小于100nM。
表2给出了本发明一些化合物的EC50值。
表2
该生物试验结果表明该化合物是β-淀粉状肽(β-A4)形成的抑制剂。
因此，这些化合物可以用于其中β-淀粉状肽(β-A4)形成抑制剂提供治疗益处的病理学的治疗中。特别地，这样的病理学是老年性痴呆，阿耳茨海默氏病，唐氏综合症，帕金森氏症，淀粉状蛋白血管病，脑血管障碍，额颞痴呆(démences fronto-temporales)和皮克病，后创伤性痴呆，与神经炎性过程相关联的病理学，亨延顿氏舞蹈病和科尔萨科夫综合症。
本发明化合物在制备用于治疗上述病理学的药物中的用途构成本发明整体的一部分。
本发明还提供包含式(I)化合物或其与药学可接受的酸加成盐或式(I)化合物的水合物或溶剂化物的药物。这些药物具有其治疗用途，特别地在治疗上述病理学中的用途。
本发明另一方面涉及包含至少一种本发明化合物作为活性成分的药物组合物。这些药物组合物包含有效剂量的本发明化合物，或者所述化合物的药物可接受的盐，或其水合物或溶剂化物，和任选一种或多种药物可接受的赋形剂。
根据药物形式和所需施用方式，所述赋形剂选自本领域技术人员公知的有用赋形剂。
在本发明用于口服、舌下、皮下、肌内、静脉、外用、局部、气管内、鼻内、经皮、或直肠施用的药物组合物中，以上式(I)的活性成分或其盐、溶剂化物或水合物，如果需要，可以以单位施用(unitaired’administration)形式、作为与常规药物赋形剂的混合物而施用于预防或治疗上述疾病或障碍的人和动物。
合适的单位施用形式包括口服形式例如片剂、软或硬胶囊、粉末、颗粒、咀嚼胶和口服溶液或悬浮液，舌下，含服，气管内，眼内或鼻内施用形式，以及通过吸入、皮下、肌内或静脉施用形式，直肠施用形式、和植入。对于外用而言，根据本发明的化合物可以采用膏状物、软膏剂或洗剂。
通过实施例，以片剂形式的根据本发明的化合物的单位施用形式可包括以下组分根据本发明的化合物 50.0mg甘露醇 223.75mg交联甲羧纤维素钠(Sodium croscaramellose)6.0mg玉米淀粉15.0mg羟基丙基甲基纤维素 2.25mg硬脂酸镁3.0mg为了得到所需治疗或预防效果，活性成分的剂量可以每天每kg体重为0.1mg-200mg。尽管这些剂量是平均状态的例子，它们可根据具体情况，其中更高或更低剂量是合适的这些剂量并未脱离本发明的范围。根据通常实践，对每个病人合适的剂量是由医师根据施用模式和所述病人重量与反应而决定。
每单位剂量可以饱和0.1-1000mg，优选0.1-500mg活性成分与一种或多种药物赋形剂结合。该单位剂量可以每天施用1-5次，以每天施用剂量0.5-5000mg优选0.5-2500mg。
根据其另一方面，本发明也涉及用于治疗或预防上述病理学的方法，其包括给施用本发明式(I)化合物，或所述化合物的药物可接受盐或水合物。
权利要求
1.通式(I)化合物 其中，R1代表任选被1-3个选自卤素、三氟甲基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6硫代烷基、噻吩或苯基的取代基取代的C1-6烷基；或代表C3-7环烷基、噻吩、苯并噻吩、吡啶基、呋喃基、或苯基；所述苯基任选被1-3个选自卤素原子、C1-6烷基、C1-6烷氧基、羟基、亚甲基二氧基、苯氧基、苄基氧基或三氟甲基的取代基取代；R2和R’2彼此独立地代表氢原子、卤素原子、羟基、C1-3烷氧基、C1-3烷基、C3-7环烷基或O-C(O)-C1-6烷基，或R2和R’2一起形成氧代基；R3代表氢原子或任选被羟基、C1-6环烷基或C1-3烷氧基取代的C1-6烷基；R4和R5彼此独立地代表氢原子、C1-7烷基、三氟甲基、基团L或基团Z； G代表C1-7烷基或简单键；M代表C3-7环烷基，苯基，萘基或吡啶基，任选被一种或多种取代基取代的基团M，其取代基选自卤原子，羟基，C1-3烷基，C1-3烷氧基，三氟代甲基，三氟代甲氧基，-O-CHF2；J代表氢原子或基团-Y-K；Y代表简单键，氧原子，硫原子，基团-C1-4亚烷基-，-O-C1-4亚烷基-，-C1-4亚烷基-O-或-N(W)-，任选被羟基或C1-3烷氧基取代的-C1-4亚烷基；W或者代表氢原子，或者代表任选被苯基取代的C1-3烷基，或者代表苯基；K代表基团苯基或吡啶基，任选被一种或多种下述基团取代的基团K卤原子，基团羟基，C1-3烷基，C1-3烷氧基，三氟代甲基，三氟代甲氧基，-O-CHF2；条件是至少一个基团R4或R5代表基团Z；Z代表基团CN，SO2NR6R7，或杂芳族基团；所述杂芳基任选被基团R8取代；R8或者代表任选被CN、苯基或苯氧基取代的C1-4烷基；或者代表苯基；所述苯基和苯氧基任选被1-3个选自卤原子，C1-3烷基，C1-3烷氧基，三氟代甲基的基团取代；R6和R7彼此独立地代表，或者氢原子，或者任选被C3-7环烷基，C3-7环链烯基，C1-3烷氧基，苯基，萘基，吗啉基或吡啶基取代的C1-6烷基；或者代表C3-7环烷基，C1-6烷氧基，苯基或二氢茚基；所述基团C3-7环烷基，C3-7环链烯基，苯基，萘基，吗啉基，吡啶基和二氢茚基任选被1-2个选自C1-3烷基，羟基，C1-3烷氧基，苯基或卤原子的基团取代；或R6和R7与其所带氮原子形成氮丙啶环，氮杂环丁烷环，吡咯烷环，哌啶环，吗啉环或苯并哌啶环。该化合物呈碱或与酸的加成盐、水合物或溶剂化物的形式。
2.根据权利要求1的化合物，特征在于R1代表任选被1-3个卤素原子取代的C1-6烷基或苯基；R2和R′2彼此独立地代表氢原子或羟基；R3代表C1-6烷基；R4和R5彼此独立地代表氢原子，C1-7烷基，三氟代甲基，基团L或基团Z； G代表C1-7烷基或简单键；M代表任选地被一个或多个卤素原子取代的苯基；J代表氢原子或基团-Y-K；Y代表简单键，氧原子，-O-C1-4亚烷基-；K代表任选地被一种或多种基团取代的苯基，该取代基团选自卤原子，C1-3烷基，三氟代甲基；条件是至少一个基团R4或R5代表基团Z；Z代表基团CN，SO2NR6R7，或杂芳基；所述杂芳基任选被基团R8取代；R8或者代表C1-4烷基，任选被苯基取代；或者代表苯基；R6和R7彼此独立地代表氢原子，或者任选被苯基或萘基取代的C1-6烷基；或者代表苯基或二氢茚基；所述苯基任选被一种或两种选自C1-3烷氧基，苯基或卤原子取代；或者R6和R7，与其所带氮原子形成苯并哌啶环；该化合物呈碱或与酸的加成盐、水合物或溶剂化物的形式。
3.根据权利要求1或权利要求2的式(I)的化合物，特征在于R1代表C1-4烷基，优选异丙基或叔丁基，或被两个氟原子取代的苯基；R2和R’2彼此独立地代表氢原子或羟基；R3代表C1-4烷基，优选甲基、乙基或丙基；该化合物呈碱或与酸的加成盐、水合物或溶剂化物的形式。
4.制备在前权利要求1-3任一项的式(I)的化合物的方法，包含下述步骤采用通式(III)2-氨基噻唑 与通式(II)酰基氨基酸 实现肽偶合，其中R1，R2，R’2，R3，R4和R5如权利要求1-3任一项式(I)化合物中的定义。
5.制备在前权利要求1-3任一项的式(I)的化合物的方法，包含下述步骤采用通式(IV)化合物 与通式(VI)胺 实现肽偶合，其中R1，R2，R’2，R3，R4和R5如权利要求1-3任一项式(I)化合物中的定义。
6.药物，其特征在于它包含权利要求1-3任一项式(I)化合物，该化合物呈药物可接受的碱、盐、水合物或溶剂化物的形式。
7.药物组合物，其特征在于它包括至少一种根据权利要求1-3任一项的式(I)的化合物，该化合物呈药物可接受的碱、盐、水合物或溶剂化物的形式，以及任选一种或多种药物可接受赋形剂。
8.根据权利要求1-3任一项的式(I)的化合物在制备用于治疗其中β-淀粉状肽β-A4形成抑制剂提供治疗益处的病理学的药物中的用途，其中该化合物呈药物可接受的碱、盐、水合物或溶剂化物的形式。
9.权利要求1-3任一项的式(I)化合物用于制备药物的用途，所述药物用于治疗老年性痴呆，阿耳茨海默氏病，唐氏综合症，帕金森氏症，淀粉状蛋白血管病、脑血管障碍，额颞痴呆和皮克病，后创伤性痴呆，与神经炎性过程相关联的病理学，亨延顿氏舞蹈病和/或科尔萨科夫综合症，其中该化合物呈药物可接受的碱、盐、水合物或溶剂化物的形式。
全文摘要
本发明涉及通式(I)化合物，其中，R
文档编号A61P25/28GK1910165SQ200580002588
公开日2007年2月7日 申请日期2005年1月7日 优先权日2004年1月16日
发明者S·巴尔策尔, M·帕斯卡尔, V·范多斯莱尔 申请人:赛诺菲-安万特
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