藤黄酸及藤黄酸复合物的药物组合物制剂的制作方法
专利名称：藤黄酸及藤黄酸复合物的药物组合物制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及新颖的以藤黄酸类化合物与不同碱基或离子形成药用复合物的药物组合物制剂，以及该药物组合物制剂在治疗肝癌、肺癌及其他肿瘤中的应用。
背景技术：
现有技术中，公开号为1309125、申请号为01108049.3的中国专利公开了一种名称为“具抗癌活性的藤黄酸类化合物的复合物及其制备方法”的专利申请，该专利涉及新颖的以藤黄酸类化合物与不同碱基或离子形成复合物(通式I)，及其制备方法，其中B为C#-[1]-C#-[8]的含氮有机碱，优选碱性氨基酸，该复合物比藤黄酸类化合物治疗肝癌、肺癌及其他肿瘤疗效提高，且刺激性和毒性降低。但是，该申请中尚未体现出各种优选的藤黄酸及其复合物的药物组合物制剂及制剂的制备方法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提出一种新颖的以藤黄酸类化合物与不同碱基或离子形成药用复合物的药物组合物制剂，该药物制剂可用于肝癌、肺癌及其他肿瘤的治疗。
本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本发明是下述通式为(I)的藤黄酸及藤黄酸与不同碱基或离子形成药用复合物和药学上可以接受的药物载体混合形成的药物组合物制剂， B表示金属离子或C1-C8的含氮有机碱或氨基酸。所述的药学上可接受的载体是指药学领域的药物载体，例如稀释剂、赋形剂和水等，填充剂如淀粉、蔗糖、乳糖、微晶纤维素等；粘合剂如纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮；润湿剂如吐温、甘油；崩解剂如羧甲基淀粉钠、羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素、琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠；吸收促进剂如季铵化合物；表面活性剂如十六烷醇、十二烷基硫酸钠；吸附载体如高岭土和皂粘土；润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙和镁、微粉硅胶和聚乙二醇等。另外还可以在组合物中加入其它辅剂如香味剂、甜味剂等。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的药物组合物制剂，其特点是，其剂型是药剂学上所说的任何一种剂型，包括片剂、胶囊剂、软胶囊、喷雾剂、凝胶剂、凝胶吸入剂、口服剂、混悬剂、冲剂、贴剂、软膏、丸剂、散剂、注射剂、输液剂、冻干注射剂、脂质体注射剂，靶向给药注射剂、栓剂、缓释制剂或控释制剂。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的药物组合物制剂，其特点是，它是藤黄酸及藤黄酸与不同碱基或离子形成的药用复合物与填充剂、崩解剂组配的片剂或胶囊剂；或者是藤黄酸及藤黄酸与不同碱基或离子形成的药用复合物与填充剂、羟丙甲纤维素K4M组配的缓释片剂或胶囊剂；或者是藤黄酸分散于油相中得到藤黄酸软胶囊。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的药物组合物制剂，其特点是，其特征在于，所述的填充剂是蔗糖、乳糖、微晶纤维素、糊精、淀粉或磷酸钙；所述的崩解剂是羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚维酮或交联羧甲基纤维素钠；本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的药物组合物制剂，其特点是，其特征在于，它是藤黄酸与增溶剂或助溶剂形成的注射剂；或者是藤黄酸形成的冻干注射用粉针剂；或者是藤黄酸分散于油相中得到的注射用乳剂，或者是混悬型注射液，所述的混悬型注射液是将藤黄酸微粉和聚山梨酯80混研后，溶解到含磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、尼泊金酯和羧甲基纤维素钠的水溶液，经研磨制得。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的药物组合物制剂，其特点是，所述制剂中还设有粘合剂、润湿剂或润滑剂。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的药物组合物制剂，其特点是，所述的油相是大豆油、聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油或橄榄油；在所述的油相中还可加增溶剂或潜溶剂或抗氧剂。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的药物组合物制剂，其特点是，所述的增溶剂是聚氧乙烯醚蓖麻油，吐温、普流罗尼F-68；所述的助溶剂是精氨酸、葡甲胺、二乙胺、乙二胺、尿素、烟酰胺、脯氨酸、葡萄糖、枸橼酸及其钠盐。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的药物组合物制剂，其特点是，所述的药物组合物制剂可以用来治疗肝癌、肺癌及其他肿瘤。
本发明的药用组合物制剂可通过口服或肠胃外给药的方式施用于需要这种治疗的患者。用于口服时，可将其制成常规的固体制剂如片剂、胶囊、粉剂、颗粒剂等，制成液体制剂如水或油悬浮剂或其它液体制剂如糖浆、口服液、酏剂等；用于肠胃外给药时，可将其制成注射用的溶液、粉针、水或油性悬浮剂等。优选的形式是片剂、包衣片剂、胶囊、颗粒剂、口服液和注射剂。
本发明中的藤黄酸与不同碱基或离子形成药用复合物的制备方法包括以下步骤a.将藤黄(Garcinia hanburryi)分泌的干燥树脂用有机溶剂提取，层析分离得到藤黄酸；b.将藤黄酸溶解在合适溶剂中，与碱金属或碱土金属或其它金属的氢氧化物、或这些金属的有机酸盐，或含氮有机碱，或氨基酸反应。
c. 所制得的复合物可以分离出来，也可以直接用来配制制剂。
本发明药用组合物制剂的各种剂型的制备方法是，用藤黄酸或藤黄酸复合为为活性成分与以上所述的一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。
本发明的药用组合物优选含有重量比为0.1％-99.5％的藤黄酸或藤黄酸复合的活性成分，最优选含有重量比为0.5％-95％的藤黄酸或藤黄酸复合的活性成分。
本发明的药用组合物的施用量可根据用药途径、患者年龄、体重、体表面积、所治疗的疾病的类型和严重程度等变化，其日剂量可以是0.01-100mg/m2体表面积，优选10-100mg/m2体表面积。可以一次或多次施用。
具体实施例方式
下面的实施例可以使本专业技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1 藤黄酸胶囊剂的制备藤黄酸 10g微晶纤维素 30g乳糖 50g羧甲基淀粉钠 7g2％HPMCE5溶液(含5％吐温80) 适量硬脂酸镁 1g藤黄酸、微晶纤维素、乳糖、羧甲基淀粉钠分别过100目筛混合均匀，以含吐温80的HPMC溶液为粘合剂制软材，过20目筛制颗粒，湿颗粒于50--60℃烘箱鼓风干燥；干颗粒过20目筛整粒，与硬脂酸镁混匀，灌装于胶囊中。
实施例2 藤黄酸胶囊剂的制备藤黄酸复合物 20g微晶纤维素 30g乳糖 30g羧甲基淀粉钠 5g2％HPMCE5溶液(含5％吐温80) 适量硬脂酸镁 1g藤黄酸复合物、微晶纤维素、乳糖、羧甲基淀粉钠分别过100目筛混合均匀，以含吐温80的HPMC溶液为粘合剂制软材，过20目筛制颗粒，湿颗粒于50--60℃烘箱鼓风干燥；干颗粒过20目筛整粒，与硬脂酸镁混匀，灌装于胶囊中。
实施例3 藤黄酸片剂的制备藤黄酸 30g微晶纤维素 30g乳糖 50g羧甲基淀粉钠 7g2％HPMCE5溶液(含5％吐温80) 适量硬脂酸镁 1g
藤黄酸、微晶纤维素、乳糖、羧甲基淀粉钠分别过100目筛混合均匀，以含吐温80的HPMC溶液为粘合剂制软材，过20目筛制颗粒，湿颗粒于50--60℃烘箱鼓风干燥；干颗粒过20目筛整粒，与硬脂酸镁混匀，压片。
实施例4 藤黄酸片剂的制备藤黄酸复合物 20g微晶纤维素30g乳糖 30g羧甲基淀粉钠 5g2％HPMCE5溶液(含5％吐温80)适量硬脂酸镁 1g藤黄酸复合物、微晶纤维素、乳糖、羧甲基淀粉钠分别过100目筛混合均匀，以含吐温80的HPMC溶液为粘合剂制软材，过20目筛制颗粒，湿颗粒于50--60℃烘箱鼓风干燥；干颗粒过20目筛整粒，与硬脂酸镁混匀，压片。
实施例5 藤黄酸缓释胶囊剂的制备藤黄酸 100g聚维酮 100g微晶纤维素 30g羟丙甲纤维素K4M100g3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液适量滑石粉 4g将藤黄酸和聚维酮溶于少量乙醇中，减压政法以挥去乙醇，所得固体过100目筛；将上述固体与微晶纤维素、羟丙甲纤维素K4M过60目筛混均，加入3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液适量制软材，过20目筛制粒。40-50℃烘箱鼓风干燥。干颗粒过20目筛整粒，加入处方量的滑石粉，混合均匀。按处方量灌装于胶囊中。
实施例6 藤黄酸缓释胶囊剂的制备藤黄酸复合物 160g微晶纤维素 30g羟丙甲纤维素K4M 200g3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液 适量滑石粉 2g-5g将藤黄酸复合物、微晶纤维素、羟丙甲纤维素K4M过60目筛混均，加入3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液适量制软材，过20目筛制粒。40-50℃烘箱鼓风干燥。干颗粒过20目筛整粒，加入处方量的滑石粉，混合均匀。按处方量灌装于胶囊中。
实施例7 藤黄酸缓释片剂的制备藤黄酸100g聚维酮100g乳糖 30g
羟丙甲纤维素K4M 200g3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液 适量滑石粉 2g将藤黄酸和聚维酮溶于少量乙醇中，减压政法以挥去乙醇，所得固体过100目筛；将上述固体与乳糖、羟丙甲纤维素K4M过60目筛混均，加入3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液适量制软材，过20目筛制粒。40-50℃烘箱鼓风干燥。干颗粒过20目筛整粒，加入处方量的滑石粉，混合均匀，压片即得。
实施例8 藤黄酸缓释片剂的制备藤黄酸复合物160g乳糖30g羟丙甲纤维素K4M 200g3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液 适量滑石粉 2g将藤黄酸复合物、乳糖、羟丙甲纤维素K4M过60目筛混均，加入3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液适量制软材，过20目筛制粒。40-50℃烘箱鼓风干燥。干颗粒过20目筛整粒，加入处方量的滑石粉，混合均匀，压片即得。
上述实例还可选用其它辅料，崩解剂如羟丙基淀粉、羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠、羧甲基纤维素钙、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠等；填充剂如乳糖、蔗糖、甘露醇、微晶纤维素、糊精、淀粉、磷酸钙、磷酸氢钙、硫酸钙、碳酸钙、环糊精、微粉纤维素等；润湿剂和粘合剂如预胶化淀粉、聚维酮、羧甲基纤维素钠、羟丙甲纤维素；润滑剂如滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙、微粉硅胶、氢化植物油、聚乙二醇4000和6000；润湿剂如十二烷基硫酸钠、吐温80；骨架材料如羟丙甲纤维素、乙基纤维素等。
实施例9 藤黄酸软胶囊内容物 每粒含 胶壳藤黄酸 50mg明胶 46.00％大豆油 0.5ml 甘油 17.82％水 36.18％取藤黄酸溶于大豆油中，将此溶液制成软胶囊。每粒含藤黄酸50mg。
本实施例的软胶囊还可选用如下辅料溶剂如聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油、橄榄油等；增溶剂或潜溶剂如吐温80、聚氧乙烯醚蓖麻油、苯甲酸苄酯、乳酸乙酯、油酯乙酯、磷脂等；抗氧剂如没食子酸丙酯、特丁基苯酚(BHT)、维生素E等。胶壳中明胶、甘油与水的比例可适当调节，如明胶/甘油/水三者的比例在1∶0.3～0.4∶0.7～1.4为宜，胶壳中还可添加其他成分，如防腐剂对羟基苯甲酸甲、乙、丙、丁酯等；增塑剂如山梨醇等；稳定剂如阿拉伯胶等；遮光剂如二氧化钛、硫酸钡、沉降碳酸钙等。
实施例10 藤黄酸注射用乳剂的制备藤黄酸 20g大豆油 50g大豆磷脂12g甘油25g注射用水 加至 1000ml在氮气流下，将豆磷脂加入大豆油搅拌使其溶解，加入甘油和藤黄酸搅拌溶解，搅拌条件下慢慢加入注射用水，经二步高压乳匀机乳化；仍在氮气流下，用4号垂熔玻璃漏斗减压过滤，并在氮气流下装瓶轧盖，先经预热再于121℃灭菌15分钟，灭菌完毕后，冲热水逐渐冷却即得。
本例中还可选用以下辅料注射用油如油酸乙酯、聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油、橄榄油、肉豆蔻酸异丙酯等；抗氧剂如没食子酸丙酯、特丁基苯酚(BHT)、维生素E等；表面活性剂如吐温类、聚氧乙烯醚蓖麻油、磷脂类、普流罗尼等。
实施例11 藤黄酸注射剂藤黄酸20g聚氧乙烯醚蓖麻油 1.0g无水乙醇 0.5L注射用水 加至5.0L将藤黄酸溶于无水乙醇，加入20％聚氧乙烯醚蓖麻油(CremophorELP)，混匀，减压蒸发除去乙醇，加入适量注射用水混匀成澄清透明溶液，经0.22μm微孔滤膜过滤，分装封口，于100℃流通蒸汽灭菌30分钟即得，每支含藤黄酸20mg。
实施例12 藤黄酸注射剂藤黄酸20.0g精氨酸22.2g氯化钠适量注射用水 加至2000mL取藤黄酸与精氨酸置适宜容器中，加注射用水1800ml，搅拌均匀，超声至溶解，加入氯化钠搅拌使溶解，补加注射用水至2000ml，经0.22μm微孔滤膜过滤，分装封口，于100℃流通蒸汽灭菌30分钟即得，每支含藤黄酸20mg。
实施例13 注射用藤黄酸粉针剂的制备藤黄酸 20.0g精氨酸 22.2g甘露醇 32.0g注射用水 至2000ml取藤黄酸与精氨酸置适宜容器中，加注射用水1800ml，搅拌均匀，超声至溶解，加入甘露醇搅拌使溶解；按0.1％加入针用活性炭，搅拌30分钟，经钛砂芯脱炭抽滤到洁净的容器中，补加注射用水至2000ml，将溶液搅拌5分钟使均匀，再经0.22μm微孔滤膜过滤，滤液灌装在7ml西林瓶中，每瓶2ml，然后部分地塞上丁基橡胶塞，送至冻干箱内的板层上，插入温度探头，关闭箱门。按冻干曲线冷冻干燥，最后干燥温度为35℃以上并保持2小时。密塞，放气，出箱，轧盖。每支含藤黄酸20mg。
实施例14 藤黄酸混悬型注射剂藤黄酸 20g羧甲基纤维素钠 10g聚山梨酯80 0.1g尼泊金乙酯 0.5g尼泊金丙酯 0.5g磷酸二氢钾 16.7g磷酸氢二钾 1.7g注射用水 加至 2.0L将藤黄酸进行气流粉碎，得粒径10μm以下的微粉。将磷酸二氢钾和磷酸氢二钾溶于注射用水中，加入尼泊金乙酯和丙酯，再加入羧甲基纤维素钠，60℃条件下使全部溶解，过滤。将微粉化后的藤黄酸置于容器中，加聚山梨酯80研成细糊状，将上述溶液逐渐加入，搅拌均匀后，经胶体磨研磨5至10次。按常规测定方法测定含量合格后，分装在安瓿中，于100℃流通蒸汽灭菌30分钟即得，每支含藤黄酸20mg。
本实施例的注射剂还可选用如下辅料增溶剂如吐温类、普流罗尼F-68、聚氧乙烯醚蓖麻油等；助溶剂如氨基酸类化合物如组氨酸、赖氨酸、鸟氨酸酰胺类化合物如尿素、乙酰胺、硫脲、苯甲酰胺等，含羟基或羧基的化合物如蔗糖、枸橼酸及其钠盐、乳酸、水杨酸钠等；助悬剂如羧甲基纤维素钠、聚维酮、羟丙甲基纤维素等；防腐剂如尼泊金甲、乙、丙和丁酯；pH调节剂如枸橼酸及枸橼酸盐、磷酸盐等；溶剂如注射用水、注射用乙醇、丙二醇等。
实施例15 THS iV对小鼠移植瘤S180、EC、Heps的抑制作用实验方法实验用体重18-22g小鼠的昆明种小鼠，按移植性肿瘤研究法接种S180、EC、Heps实体瘤，每个瘤种各接种50只，接种后24小时称鼠重，并随机分为5组，空白对照组与羟基喜树碱组分别为阴、阳性对照组，THS组设高、中、低(8，4，2mg/kg)三个剂量组。于停药后第2天处死荷瘤小鼠称重，并分离瘤块称重，所得数据进行统计学处理(t检验)。结果见表1、2、3。
表1 THS iv对小鼠移植瘤Heps的抑制作用(X±SD)(n＝10)剂量 体重(g) 瘤重抑瘤率实验次数 组别(mg/kg)给药前 给药后 (g) (％)第一批 对照组 19.9±0.9926.2±2.302.00±0.56THS组 8 19.9±1.2025.7±2.210.76±0.30**62.004 20.2±1.4825.8±1.991.19±0.33**40.502 20.0±1.3326.0±2.451.43±0.39*28.50羟基喜树碱3 19.8±1.1425.7±2.210.98±0.26**51.00第二批 对照组 19.5±1.5126.5±2.372.11±0.57THS 8 19.8±1.0326.0±1.830.85±0.29**60.004 19.7±1.1627.1±2.511.28±0.28**39.302 19.6±1.2626.6±2.461.57±0.38*25.60羟基喜树碱3 19.5±1.2726.3±2.671.04±0.24**50.72第三批 对照组 19.90±1.20 27.2±1.932.06±0.37THS组 8 19.70±1.42 26.6±2.220.86±0.37**58.254 19.70±1.34 27.0±1.941.28±0.29**37.862 19.6±0.8426.9±2.511.54±0.52*25.24羟基喜树碱3 19.8±1.3226.6±2.321.04±0.28**49.51*P＜0.05**P＜0.01 与生理盐水对照组比较表2 THS iv对小鼠移植瘤EC的抑制作用(X±SD)(n＝10)*P＜0.05**P＜0.01 与生理盐水对照组比较剂量 体重(g) 瘤重 抑瘤率实验次数组别(mg/kg) 给药前给药后 (g) (％)第一批 对照组 20.2±1.40 27.2±1.23 2.21±0.53THS组 8 19.8±1.32 27.1±1.52 0.91±0.32**58.804 19.9±1.20 27.3±1.57 1.35±0.38**39.002 20.1±1.37 27.3±1.49 1.66±0.30*24.90羟基喜树碱 3 20.0±1.15 27.0±1.15 1.05±0.35**52.49第二批 对照组 19.9±1.20 27.2±1.75 2.165±0.48THS组 8 19.7±1.16 27.0±2.71 0.918±0.33**57.604 19.9±1.45 27.2±0.92 1.351±0.36**37.802 19.9±1.45 27.0±1.76 1.596±0.39**26.30羟基喜树碱 3 19.8±1.14 27.1±1.79 1.006±0.30**53.46第三批 对照组 20.10±1.3727.40±0.842.19±0.50THS组 8 20.00±1.4926.40±1.710.97±0.18**55.914 19.80±1.4826.80±0.791.30±0.38**40.952 19.90±1.3727.2±1.03 1.69±0.32*22.94羟基喜树碱 3 20.10±1.2027.0±1.41 1.09±0.23**50.16剂量 体重(g)瘤重抑瘤率实验次数组别(mg/kg) 给药前 给药后 (g) (％)第一批 对照组20.2±1.40 27.2±1.23 2.21±0.53THS组 8 19.8±1.32 27.1±1.52 0.91±0.32**58.804 19.9±1.20 27.3±1.57 1.35±0.38**39.002 20.1±1.37 27.3±1.49 1.66±0.30*24.90羟基喜树碱3 20.0±1.15 27.0±1.15 1.05±0.35**52.49第二批 对照组19.9±1.20 27.2±1.75 2.165±0.48THS组 8 19.7±1.16 27.0±2.71 0.918±0.33**57.604 19.9±1.45 27.2±0.92 1.351±0.36**37.802 19.9±1.45 27.0±1.76 1.596±0.39**26.30羟基喜树碱3 19.8±1.14 27.1±1.79 1.006±0.30**53.46第三批 对照组20.10±1.37 27.40±0.842.19±0.50THS组 8 20.00±1.49 26.40±1.710.97±0.18**55.914 19.80±1.48 26.80±0.791.30±0.38**40.952 19.90±1.37 27.2±1.03 1.69±0.32*22.94羟基喜树碱3 20.10±1.20 27.0±1.41 1.09±0.23**50.16
表3 THS iv对小鼠移植瘤S180的抑制作用(X±SD)(n＝10)剂量 体重(g)瘤重 抑瘤率实验次数组别(mg/kg) 给药前给药后 (g) (％)第一批 对照组 19.7±1.57 27.5±1.081.97±0.40THS组8 19.8±1.40 26.7±2.000.88±0.31**55.304 20.1±1.20 27.3±1.951.21±0.44**38.602 19.9±1.20 27.3±1.341.43±0.38**27.40羟基喜树碱 3 19.9±1.52 27.2±1.141.02±0.21**48.22第二批 对照组 19.8±1.32 27.4±0.972.045±0.41THS组8 19.8±1.32 26.8±1.810.898±0.34**56.004 19.8±1.23 27.1±2.771.292±0.34**37.002 19.6±1.26 27.6±2.501.583±0.31*23.00羟基喜树碱 3 19.6±1.07 27.3±1.701.038±0.25**49.27第三批 对照组 19.9±0.74 27.5±2.122.01±0.34THS组8 19.8±1.32 26.6±1.350.84±0.41**58.214 19.7±0.95 27.3±1.831.25±0.38**37.812 19.8±1.14 27.4±2.551.60±0.34*21.40羟基喜树碱 3 19.8±1.14 27.3±2.061.05±0.36**47.76*P＜0.05**P＜0.01 与生理盐水对照组比较结果表明，与生理盐水对照组相比，THS(8，4mg/kg)组及羟基喜树碱组皆有显著地抑制S180、EC、Heps的肿瘤生长作用(P＜0.01)，THS对小鼠体重增长无明显影响。实验重复3次结果相近。
实施例16 THS ip对小鼠移植性S180、EAC、Heps腹水瘤的生命延长作用实验方法按移植性肿瘤研究法接种S180、EAC、Heps腹水型小鼠，每个瘤种各接种50只，于接种后的第一天，称体重，随机分为5组，每组10只，雌雄各半，设THS(1.5，0.75，0.375mg/kg)三个剂量组，羟基喜树碱组(2mg/kg)及空白对照组。腹腔注射给药，每2天一次，共给药4次，在给药期间及停药后每天记录死亡鼠数并计算存活天数(存活超过60天的小鼠按60天计)及存活率(存活60天以上，且无症状小鼠)。所得数据进行统计学处理。实验结果见表4、5、6。
表4 THSip对Heps腹水型小鼠生命延长作用(X±SD)(n＝10)剂量 给药前体重 存活天数 生命延长率 存活率实验次数组别(mg/kg)(g)(天)(％) (％)第一批 对照组 19.9±1.52 11.4±2.32 0THS组 1.5 20.0±1.33 43.5±14.07**281.6 100.75 20.1±0.99 25.4±7.92**122.8 00.375 19.8±1.23 19.9±6.17**74.6 0羟基喜树碱 2 19.7±1.34 35.5±12.32**211.4 0第二批 对照组 19.9±1.20 11.1±1.73 0THS组 1.5 19.8±1.62 42.1±12.35**272.8 100.75 19.9±1.37 25.6±7.18**130.6 00.375 19.8±1.32 18.5±6.24**66.7 0羟基喜树碱 2 19.8±1.23 34.2±9.81**208.1 0第三批 对照组 19.8±0.92 10.9±2.02 0THS组 1.5 19.8±0.92 41.7±15.30**282.57 300.75 19.9±1.10 24.7±7.96**130.84 00.375 20.1±1.20 16.7±3.23**56.07 0羟基喜树碱 2 19.8±1.48 31.9±9.67**198.13 0**P＜0.01 与生理盐水对照组比较表5 THSip对EAC腹水型小鼠生命延长作用(X±SD)(n＝10)剂量给药前体重 存活天数 生命延长率 存活率实验次数组别(mg/kg) (g) (天) (％) (％)第一批 对照组 19.9±1.20 10.7±2.63 0THS组 1.5 19.8±1.55 34.3±10.34**203.5 00.75 19.9±0.88 24.8±7.22**119.5 00.37519.8±1.32 18.5±3.98**63.7 0羟基喜树碱 219.9±1.60 33.2±12.03**193.8 0
第二批对照组19.8±1.32 10.3±2.31 0THS组 1.5 19.9±1.20 34.3±10.25**233.01 00.7520.1±1.20 22.9±8.72**122.33 00.375 19.9±1.20 16.7±5.17**62.13 0羟基喜树碱2 19.8±1.32 31.1±10.33**201.94 0第三批对照组19.7±1.34 11.1±2.13 0THS组 1.5 19.8±1.23 35.9±11.84**223.42 00.7519.8±0.79 23.9±8.39**115.31 00.375 19.7±1.34 16.3±4.83**46.84 0羟基喜树碱2 20.1±1.20 32.8±8.92**195.49 0**P＜0.01 与生理盐水对照组比较表6 THSip对S180腹水型小鼠生命延长作用(X±SD)(n＝10)剂量给药前体重存活天数 生命延长率存活率实验次数组别(mg/kg) (g) (天) (％) (％)第一批 对照组 19.8±1.328.8±0.79 0THS组 1.5 19.7±1.2524.7±11.76**180.7 00.7519.7±1.1618.4±5.82**109.1 00.375 19.7±1.1613.7±4.42**55.7 0羟基喜树碱 2 19.9±1.3725.6±11.29**190.9 0第二批 对照组 19.7±1.3410.4±1.170THS组 1.5 20.0±1.1529.7±11.70**185.6 00.7519.8±0.9221.5±7.09**106.7 00.375 20.0±1.4915.8±4.02**51.9 0羟基喜树碱 2 19.7±1.4228.9±11.44**177.9 0第三批 对照组 19.7±1.3410.3±1.640THS组 1.5 19.8±1.1429.5±12.70**186.4100.7519.7±1.3421.9±7.40**112.620
0.375 19.9±1.37 14.9±4.01**44.660羟基喜树碱2 19.8±1.32 28.9±11.44**177.90**P＜0.01 与生理盐水对照组比较实验结果表明，与空白对照组相比，THS(1.5，0.75mg/kg)剂量组，羟基喜树碱组皆有非常显著延长S180、EAC、Heps腹水型小鼠的存活天数作用(P＜0.01)。实验重复3次结果相近。
实施例17 THS对人肝细胞性肝癌SMMC-7721和人肺癌A-549裸小鼠移植瘤的实验治疗作用实验方法取生长旺盛期的瘤组织剪切成1.5mm3左右，在无菌条件下，接种于裸小鼠右侧腋窝皮下。裸小鼠移植瘤用游标卡尺测量移植瘤直径，待肿瘤生长至100-300mm3后将动物随机分组。使用测量瘤径的方法，动态观察被试物抗肿瘤的效应。肿瘤直径的测量次数为每周2次，每次测量时同时称鼠重。实验组每周静脉给药3次，阳性对照组每周静脉给药3次，阴性对照组同时给等量生理盐水。肿瘤体积(tumor volume，TV)的计算公式为TV＝1/2×a×b2其中a、b分别表示长宽。根据测量的结果计算出相对肿瘤体积(relative tumor volume，RTV)，计算公式为RTV＝Vt/V0。其中V0为分笼给药时(即d0)测量所得肿瘤体积，Vt为每一次测量时的肿瘤体积。抗肿瘤活性的评价指标为相对肿瘤增殖率T/C(％)，计算公式如下T/C(%)=TRTVCRTV×100]]>
TRTV治疗组RTV；CRTV阴性对照组RTV。
THS对人肝癌裸小鼠移植瘤SMMC-7721的实验性治疗结果见表7和表8。THS对人肺癌裸小鼠移植瘤A-549实验性治疗结果见表9和表10。
表7.THS对人肝癌裸小鼠移植瘤SMMC-7721的实验治疗作用(1)组别 剂量 给药动物数 体重(克)TV(x±SD)RTVT/C P值mg/kg方式 开始最后 开始 最后 d0d14(x±SD) (％)NS 0.20ml/只 iv12 12 19.5 23.3 150±54 949±3846.5±1.9OPT3iv6618.7 22.8 172±69 891±4205.7±3.4 86.9＞0.05THS2iv6619.7 23.5 152±62 472±1273.7±1.9 56.8＜0.05THS4iv6519.2 23.5 150±45 485±2253.2±1.7 48.8＜0.05THS8iv6419.2 21.8 129±20 430±1063.4±0.4 52.7＜0.05d0分笼给药时间表8.THS对人肝癌裸小鼠移植瘤SMMC-7721的实验治疗作用(2)组别剂量给药动物数 体重(克)TV(x±SD)RTVT/C P值mg/kg 方式 开始最后 开始 最后 d0d7(x±SD)(％)NS 0.20ml/只 iv12 1219.2 21.3 240±119687±347 2.9±0.7OPT 3 iv66 19.7 20.7 257±99 508±227 1.9±0.3 66.6＞0.05THS 2 iv66 19.3 20.7 232±115395±224 1.8±0.6 62.0＞0.05THS 4 iv66 19.7 21.2 245±109398±269 1.5±0.4 51.7＜0.05THS 8 iv66 19.7 21.3 216±59 343±110 1.6±0.2 55.0＜0.05两批实验结果显示，在试验第7-14天THS静脉给药2mg/kg剂量时，对人肝细胞性肝癌SMMC-7721的最低T/C(％)为56.8-62.0；4mmg/kg剂量时，最低T/C(％)为48.8-51.7；8mg/kg剂量时，最低的T/C(％)为52.7-55.0。
表9.THS对人肺癌裸小鼠移植瘤A-549的实验治疗作用(1)组别 剂量 给药动物数 体重(克)TV(x±SD)RTVT/C P值
mg/kg方式 开始 最后 开始 最后 d0d10(x±SD) (％)NS 0.20ml/只 iv121218.2 22.3 117±49517±2954.5±1.2OPT3iv6 6 19.2 21.8 122±37423±1253.5±0.581.4＞0.05THS2iv6 6 18.5 22.5 104±36270±1042.9±0.664.5＞0.05THS4iv6 6 18.8 22.4 110±38297±1972.5±1.055.7＜0.05THS8iv6 5 18.8 21.8 104±55211±78 2.3±0.452.3＜0.05表10.THS对人肺癌裸小鼠移植瘤A-549的实验治疗作用(2)组别 剂量 给药动物数 体重(克)TV(x±SD)RTVT/C P值mg/kg 方式 开始 最后 开始 最后 d0d14(x±SD) (％)NS 0.20ml/只 iv 12 1221.1 22.5 267±128 5326±1655 21.5±5.6OPT3 iv 6 5 20.8 20.4 265±101 4880±88620.8±7.7 96.6＞0.05THS2 iv 6 6 20.2 21.2 280±854354±1045 17.4±6.9 81.1＞0.05THS4 iv 6 5 20.7 20.8 277±813537±85313.4±4.0 62.5＞0.05THS8 iv 6 5 20.2 21.2 245±125 2286±1342 12.1±5.5 56.2＜0.05两批实验结果显示，在试验第10-14天THS静脉给药2mg/kg剂量时，对人肺癌A-549的最低T/C(％)为64.5-81.1；4mg/kg剂量时，最低T/C(％)为55.6-62.5；8mg/kg剂量时，最低的T/C(％)为52.3-56.2，并呈良好的剂量效应关系。
THS静脉给药对人肝细胞性肝癌SMMC-7721和人肺癌A-549裸小鼠移植瘤有一定的生长抑制作用，对肝癌的作用稍强于对肺癌的作用。
实施例18 THS iv对荷瘤小鼠外周血中白细胞数的影响实验方法取上述规格小鼠50只，按移植性肿瘤研究法接种Heps实体瘤，接种后24小时称鼠重，并随机分为5组，每组10只，雌雄各半，生理盐水组与5-Fu组(30mg/kg)分别为阴、阳性对照组，THS设高、中、低三个剂量组。于接种后24hr iv给药，每2天一次，共给药4次，于停药后第2天处死解剖，处死前称重并由眼眶静脉取血，镜检白细胞总数，同时解剖分离瘤块，称瘤重并进行统计学处理(t检验)。结果见表11。
表11 THS iv对荷瘤小鼠外周血中白细胞数的影响(X±SD)(n＝10)小鼠体重(g)剂量 Wbc 抑制率(109/L)(％)瘤重(g)实验组别(mg/kg) 给药前给药后空白对照 19.6±1.5126.4±1.252.13±0.39 9.52±1.668 19.6±1.2925.4±1.120.96±0.21**9.26±1.37 54.93THS 4 19.5±0.9326.0±1.251.23±0.34**9.63±1.54 42.32 19.5±1.0826.1±1.341.63±0.29**9.46±1.60 23.55-Fu 30 19.8±1.4721.8±1.62**0.64±0.18*4.04±1.08**##70.0**P＜0.01 与空白组比较，**P＜0.01 与THS组比较结果表明，与生理盐水对照组相比，THS(8，4，2mg/kg)三个剂量组及5-Fu组皆有非常显著地抑制小鼠Heps肿瘤生长作用(P＜0.01)，5-Fu具有明显地抑制小鼠体重增长及明显地降低小鼠外周血中白细胞作用(P＜0.01)，但在有效剂量范围内THS对小鼠体重增长及小鼠外周血中白细胞数无明显影响。
实施例19 THS iv对正常大鼠的毒性研究实验方法取上述规格大鼠50只，雌雄各半，并随机分为5组，每组10只。生理盐水组与环磷酰胺组(30mg/kg)分别为阴、阳性对照组，THS组设高、中、低三个剂量组(6、3、1.5mg/kg)，隔天给药一次，共给药4次，于末次给药后第2天由眼眶静脉取血，镜检白细胞总数。根据参考文献，用20％乌拉坦(0.6ml/100g)麻醉后取一根股骨，用3％醋酸溶液10ml冲出所有骨髓细胞作骨髓有核细胞计数；并对胸腺、脾称重，进行统计学处理(t检验)。实验结果见表12和表13。
表12 THS iv对正常大鼠外周血中白细胞数及骨髓有核细胞的影响(X±SD)(n＝10)骨髓有核细胞数(×剂量 小鼠体重(g) Wbc 104)实验组别(mg/kg) 给药前 给药后(109/L)空白对照125.4±5.38 149.6±10.138.52±1.588528±2540.176 121.3±12.66145.3±11.966.84±1.517390±1830.08THS 3 121.0±9.67 145.0±12.317.28±1.437906±2129.041.5124.5±9.90 147.8±13.317.34±1.176930±2906.72Cy 30 123.0±9.78 131.0±8.75**1.62±0.42**##3314±839.31**##**P＜0.01 与空白组比较，**P＜0.01 与THS组比较结果表明，与生理盐水对照组相比，环磷酰胺组(Cy)具有明显地抑制大鼠体重增长及明显地降低大鼠外周血中白细胞作用(P＜0.01)，THS(6，3，1.5mg/kg)三个剂量组对大鼠体重增长及大鼠外周血中白细胞数无明显影响。
表13 THS iv对正常大鼠胸腺及脾脏脏器系数的影响(X±SD)(n＝10)剂量 胸腺 脾脏实验组别(mg/kg) 重量(g) 系数 重量(g) 系数空白对照 0.26±0.050.17±0.030.33±0.07 0.22±0.046 0.23±0.070.16±0.040.34±0.05 0.24±0.04THS3 0.22±0.060.15±0.030.31±0.04 0.22±0.031.5 0.26±0.050.17±0.030.37±0.04 0.25±0.03
Cy 30 0.19±0.05**0.14±0.03**0.24±0.03**##0.19±0.03**##**P＜0.01 与空白组比较，##P＜0.01 与THS组比较结果表明，与生理盐水对照组相比，环磷酰胺组(Cy)具有明显地抑制大鼠胸腺和脾脏增长的作用(P＜0.01)，THS(6，3，1.5mg/kg)三个剂量组对大鼠胸腺和脾脏增长无明显影响。
实施例20 THS对动物免疫功能的影响--THS对小鼠的血清溶血素的影响实验方法取体重18～22克小鼠，雌雄各半，随机分为5组，每组10只。生理盐水及环磷酰胺组(30mg/kg)分别为阴、阳性对照组，THS设高、中、低三个给药组，剂量分别为8、4、2mg/kg，均尾静脉给药。根据实验方法，小鼠腹腔注入绵羊红细胞0.5ml/只(2.5％)进行初次免疫，同时iv给药，隔日一次，共给药4次，末次给药1小时后测定并计算半数溶血值HC50，进行组间t检验，比较差异的显著性。实验结果见表14。
表14 THS对血清溶血素的影响(X±SD，n＝10)剂量 体重(g)实验组别(mg/kg) 给药前 给药后HC50空白对照 19±1.5725±4.10259.31±59.67THS8 20±1.6026±1.90212.35±47.004 20±1.2725±2.07231.78±43.982 19±1.0225±0.90229.35±47.78Cy3019±1.2825±2.00173.28±101.82**P＜0.05 与生理盐水对照组比较结果表明，THS对正常小鼠的血清半数溶血值无明显影响，与生理盐水组比较无显著性差异，说明THS对无明显作用。
实施例21 THS对动物免疫功能的影响--THS对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响实验方法取体重18～22克小鼠，雌雄各半，随机分为阴性对照组，环磷酰胺组(30mg/kg)及THS高、中、低三个给药组，剂量分别为8、4、2mg/kg，分别尾静脉给予药物和生理盐水。实验时每鼠尾静脉注射印度墨汁0.05ml/10g体重，于1(t1)和5(t2)分钟后，分别从眼眶静脉取血20ul，加到2ml、0.1％NaCO3溶液中摇匀，用722分光光度计在680nm下比色，测光密度(以下分别用OD1和OD5来表示1分钟和5分钟所取血样的光密度)，按下式计算廓清指数k值。经体重及肝脾重换算后，得吞噬指数α值，以X±SD来表示给药组与对照组的K值和α值，进行组间t检验，比较差异的显著性。结果见表15。
表15 THS对正常小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响(X±SD，n＝10)剂量组别 K值α值(mg/kg)生理盐水组 0.03391±0.016745.1147±0.9577THS组 8 0.03124±0.022115.2602±1.46424 0.02727±0.012414.9747±0.6603
2 0.03097±0.01166 5.2055±0.7942Cy组 30 0.008052±0.005354** 3.9055±1.4400*实验结果表明，THS对小鼠血清的吞噬指数α值无显著影响，与生理盐水组比较无明显差异，说明THS对小鼠的巨噬细胞吞噬功能无明显作用。
权利要求
1.下述通式为(I)的藤黄酸及藤黄酸与不同碱基或离子形成药用复合物和药学上可以接受的药物载体混合形成的药物组合物制剂， B表示金属离子或C1-C8的含氮有机碱或氨基酸。
2.根据权利要求1所述的药物组合物制剂，其特征在于，其剂型是药剂学上所说的任何一种剂型，包括片剂、胶囊剂、软胶囊、喷雾剂、凝胶剂、凝胶吸入剂、口服剂、混悬剂、冲剂、贴剂、软膏、丸剂、散剂、注射剂、输液剂、冻干注射剂、脂质体注射剂，靶向给药注射剂、栓剂、缓释制剂或控释制剂。
3.根据权利要求2所述的药物组合物制剂，其特征在于，它是藤黄酸及藤黄酸与不同碱基或离子形成的药用复合物与填充剂、崩解剂组配的片剂或胶囊剂；或者是藤黄酸及藤黄酸与不同碱基或离子形成的药用复合物与填充剂、羟丙甲纤维素K4M组配的缓释片剂或胶囊剂；或者是藤黄酸分散于油相中得到藤黄酸软胶囊。
4.根据权利要求3所述的药物组合物制剂，其特征在于，所述的填充剂是蔗糖、乳糖、微晶纤维素、糊精、淀粉或磷酸钙；所述的崩解剂是羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚维酮或交联羧甲基纤维素钠。
5.根据权利要求2所述的药物组合物制剂，其特征在于，它是藤黄酸与增溶剂或助溶剂形成的注射剂；或者是藤黄酸形成的冻干注射用粉针剂；或者是藤黄酸分散于油相中得到的注射用乳剂，或者是混悬型注射液，所述的混悬型注射液是将藤黄酸微粉和聚山梨酯80混研后，溶解到含磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、尼泊金酯和羧甲基纤维素钠的水溶液，经研磨制得。
6.根据权利要求3所述的药物组合物制剂，其特征在于，所述制剂中还设有粘合剂、润湿剂或润滑剂。
7.根据权利要求3或5所述的药物组合物制剂，其特征在于，所述的油相是大豆油、聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油或橄榄油；在所述的油相中还可加增溶剂或潜溶剂或抗氧剂。
8.根据权利要求5所述的药物组合物制剂，其特征在于，所述的增溶剂是聚氧乙烯醚蓖麻油，吐温、普流罗尼F-68；所述的助溶剂是精氨酸、葡甲胺、二乙胺、乙二胺、尿素、烟酰胺、脯氨酸、葡萄糖、枸橼酸及其钠盐。
9.权利要求1-8中任意一项中所述的药物组合物制剂在治疗肝癌、肺癌及其他肿瘤中的应用。
全文摘要
本发明是一种通式为(I)的藤黄酸及藤黄酸与不同碱基或离子形成药用复合物和药学上可以接受的药物载体混合形成的药物组合物制剂，B表示金属离子或C
文档编号A61K31/352GK1513448SQ0313238
公开日2004年7月21日 申请日期2003年8月16日 优先权日2003年8月16日
发明者尤启东, 郭青龙, 柯学, 肖伟, 戴翔翎, 凌娅 申请人:江苏康缘药业股份有限公司, 中国药科大学
技术领域：
本发明涉及新颖的以藤黄酸类化合物与不同碱基或离子形成药用复合物的药物组合物制剂，以及该药物组合物制剂在治疗肝癌、肺癌及其他肿瘤中的应用。
背景技术：
现有技术中，公开号为1309125、申请号为01108049.3的中国专利公开了一种名称为“具抗癌活性的藤黄酸类化合物的复合物及其制备方法”的专利申请，该专利涉及新颖的以藤黄酸类化合物与不同碱基或离子形成复合物(通式I)，及其制备方法，其中B为C#-[1]-C#-[8]的含氮有机碱，优选碱性氨基酸，该复合物比藤黄酸类化合物治疗肝癌、肺癌及其他肿瘤疗效提高，且刺激性和毒性降低。但是，该申请中尚未体现出各种优选的藤黄酸及其复合物的药物组合物制剂及制剂的制备方法。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提出一种新颖的以藤黄酸类化合物与不同碱基或离子形成药用复合物的药物组合物制剂，该药物制剂可用于肝癌、肺癌及其他肿瘤的治疗。
本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本发明是下述通式为(I)的藤黄酸及藤黄酸与不同碱基或离子形成药用复合物和药学上可以接受的药物载体混合形成的药物组合物制剂， B表示金属离子或C1-C8的含氮有机碱或氨基酸。所述的药学上可接受的载体是指药学领域的药物载体，例如稀释剂、赋形剂和水等，填充剂如淀粉、蔗糖、乳糖、微晶纤维素等；粘合剂如纤维素衍生物、藻酸盐、明胶和聚乙烯吡咯烷酮；润湿剂如吐温、甘油；崩解剂如羧甲基淀粉钠、羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素、琼脂、碳酸钙和碳酸氢钠；吸收促进剂如季铵化合物；表面活性剂如十六烷醇、十二烷基硫酸钠；吸附载体如高岭土和皂粘土；润滑剂如滑石粉、硬脂酸钙和镁、微粉硅胶和聚乙二醇等。另外还可以在组合物中加入其它辅剂如香味剂、甜味剂等。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的药物组合物制剂，其特点是，其剂型是药剂学上所说的任何一种剂型，包括片剂、胶囊剂、软胶囊、喷雾剂、凝胶剂、凝胶吸入剂、口服剂、混悬剂、冲剂、贴剂、软膏、丸剂、散剂、注射剂、输液剂、冻干注射剂、脂质体注射剂，靶向给药注射剂、栓剂、缓释制剂或控释制剂。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的药物组合物制剂，其特点是，它是藤黄酸及藤黄酸与不同碱基或离子形成的药用复合物与填充剂、崩解剂组配的片剂或胶囊剂；或者是藤黄酸及藤黄酸与不同碱基或离子形成的药用复合物与填充剂、羟丙甲纤维素K4M组配的缓释片剂或胶囊剂；或者是藤黄酸分散于油相中得到藤黄酸软胶囊。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的药物组合物制剂，其特点是，其特征在于，所述的填充剂是蔗糖、乳糖、微晶纤维素、糊精、淀粉或磷酸钙；所述的崩解剂是羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚维酮或交联羧甲基纤维素钠；本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的药物组合物制剂，其特点是，其特征在于，它是藤黄酸与增溶剂或助溶剂形成的注射剂；或者是藤黄酸形成的冻干注射用粉针剂；或者是藤黄酸分散于油相中得到的注射用乳剂，或者是混悬型注射液，所述的混悬型注射液是将藤黄酸微粉和聚山梨酯80混研后，溶解到含磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、尼泊金酯和羧甲基纤维素钠的水溶液，经研磨制得。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的药物组合物制剂，其特点是，所述制剂中还设有粘合剂、润湿剂或润滑剂。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的药物组合物制剂，其特点是，所述的油相是大豆油、聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油或橄榄油；在所述的油相中还可加增溶剂或潜溶剂或抗氧剂。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的药物组合物制剂，其特点是，所述的增溶剂是聚氧乙烯醚蓖麻油，吐温、普流罗尼F-68；所述的助溶剂是精氨酸、葡甲胺、二乙胺、乙二胺、尿素、烟酰胺、脯氨酸、葡萄糖、枸橼酸及其钠盐。
本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的药物组合物制剂，其特点是，所述的药物组合物制剂可以用来治疗肝癌、肺癌及其他肿瘤。
本发明的药用组合物制剂可通过口服或肠胃外给药的方式施用于需要这种治疗的患者。用于口服时，可将其制成常规的固体制剂如片剂、胶囊、粉剂、颗粒剂等，制成液体制剂如水或油悬浮剂或其它液体制剂如糖浆、口服液、酏剂等；用于肠胃外给药时，可将其制成注射用的溶液、粉针、水或油性悬浮剂等。优选的形式是片剂、包衣片剂、胶囊、颗粒剂、口服液和注射剂。
本发明中的藤黄酸与不同碱基或离子形成药用复合物的制备方法包括以下步骤a.将藤黄(Garcinia hanburryi)分泌的干燥树脂用有机溶剂提取，层析分离得到藤黄酸；b.将藤黄酸溶解在合适溶剂中，与碱金属或碱土金属或其它金属的氢氧化物、或这些金属的有机酸盐，或含氮有机碱，或氨基酸反应。
c. 所制得的复合物可以分离出来，也可以直接用来配制制剂。
本发明药用组合物制剂的各种剂型的制备方法是，用藤黄酸或藤黄酸复合为为活性成分与以上所述的一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型。
本发明的药用组合物优选含有重量比为0.1％-99.5％的藤黄酸或藤黄酸复合的活性成分，最优选含有重量比为0.5％-95％的藤黄酸或藤黄酸复合的活性成分。
本发明的药用组合物的施用量可根据用药途径、患者年龄、体重、体表面积、所治疗的疾病的类型和严重程度等变化，其日剂量可以是0.01-100mg/m2体表面积，优选10-100mg/m2体表面积。可以一次或多次施用。
具体实施例方式
下面的实施例可以使本专业技术人员更全面地理解本发明，但不以任何方式限制本发明。
实施例1 藤黄酸胶囊剂的制备藤黄酸 10g微晶纤维素 30g乳糖 50g羧甲基淀粉钠 7g2％HPMCE5溶液(含5％吐温80) 适量硬脂酸镁 1g藤黄酸、微晶纤维素、乳糖、羧甲基淀粉钠分别过100目筛混合均匀，以含吐温80的HPMC溶液为粘合剂制软材，过20目筛制颗粒，湿颗粒于50--60℃烘箱鼓风干燥；干颗粒过20目筛整粒，与硬脂酸镁混匀，灌装于胶囊中。
实施例2 藤黄酸胶囊剂的制备藤黄酸复合物 20g微晶纤维素 30g乳糖 30g羧甲基淀粉钠 5g2％HPMCE5溶液(含5％吐温80) 适量硬脂酸镁 1g藤黄酸复合物、微晶纤维素、乳糖、羧甲基淀粉钠分别过100目筛混合均匀，以含吐温80的HPMC溶液为粘合剂制软材，过20目筛制颗粒，湿颗粒于50--60℃烘箱鼓风干燥；干颗粒过20目筛整粒，与硬脂酸镁混匀，灌装于胶囊中。
实施例3 藤黄酸片剂的制备藤黄酸 30g微晶纤维素 30g乳糖 50g羧甲基淀粉钠 7g2％HPMCE5溶液(含5％吐温80) 适量硬脂酸镁 1g
藤黄酸、微晶纤维素、乳糖、羧甲基淀粉钠分别过100目筛混合均匀，以含吐温80的HPMC溶液为粘合剂制软材，过20目筛制颗粒，湿颗粒于50--60℃烘箱鼓风干燥；干颗粒过20目筛整粒，与硬脂酸镁混匀，压片。
实施例4 藤黄酸片剂的制备藤黄酸复合物 20g微晶纤维素30g乳糖 30g羧甲基淀粉钠 5g2％HPMCE5溶液(含5％吐温80)适量硬脂酸镁 1g藤黄酸复合物、微晶纤维素、乳糖、羧甲基淀粉钠分别过100目筛混合均匀，以含吐温80的HPMC溶液为粘合剂制软材，过20目筛制颗粒，湿颗粒于50--60℃烘箱鼓风干燥；干颗粒过20目筛整粒，与硬脂酸镁混匀，压片。
实施例5 藤黄酸缓释胶囊剂的制备藤黄酸 100g聚维酮 100g微晶纤维素 30g羟丙甲纤维素K4M100g3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液适量滑石粉 4g将藤黄酸和聚维酮溶于少量乙醇中，减压政法以挥去乙醇，所得固体过100目筛；将上述固体与微晶纤维素、羟丙甲纤维素K4M过60目筛混均，加入3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液适量制软材，过20目筛制粒。40-50℃烘箱鼓风干燥。干颗粒过20目筛整粒，加入处方量的滑石粉，混合均匀。按处方量灌装于胶囊中。
实施例6 藤黄酸缓释胶囊剂的制备藤黄酸复合物 160g微晶纤维素 30g羟丙甲纤维素K4M 200g3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液 适量滑石粉 2g-5g将藤黄酸复合物、微晶纤维素、羟丙甲纤维素K4M过60目筛混均，加入3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液适量制软材，过20目筛制粒。40-50℃烘箱鼓风干燥。干颗粒过20目筛整粒，加入处方量的滑石粉，混合均匀。按处方量灌装于胶囊中。
实施例7 藤黄酸缓释片剂的制备藤黄酸100g聚维酮100g乳糖 30g
羟丙甲纤维素K4M 200g3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液 适量滑石粉 2g将藤黄酸和聚维酮溶于少量乙醇中，减压政法以挥去乙醇，所得固体过100目筛；将上述固体与乳糖、羟丙甲纤维素K4M过60目筛混均，加入3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液适量制软材，过20目筛制粒。40-50℃烘箱鼓风干燥。干颗粒过20目筛整粒，加入处方量的滑石粉，混合均匀，压片即得。
实施例8 藤黄酸缓释片剂的制备藤黄酸复合物160g乳糖30g羟丙甲纤维素K4M 200g3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液 适量滑石粉 2g将藤黄酸复合物、乳糖、羟丙甲纤维素K4M过60目筛混均，加入3％羟丙甲基纤维素(E5)水溶液适量制软材，过20目筛制粒。40-50℃烘箱鼓风干燥。干颗粒过20目筛整粒，加入处方量的滑石粉，混合均匀，压片即得。
上述实例还可选用其它辅料，崩解剂如羟丙基淀粉、羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠、羧甲基纤维素钙、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠等；填充剂如乳糖、蔗糖、甘露醇、微晶纤维素、糊精、淀粉、磷酸钙、磷酸氢钙、硫酸钙、碳酸钙、环糊精、微粉纤维素等；润湿剂和粘合剂如预胶化淀粉、聚维酮、羧甲基纤维素钠、羟丙甲纤维素；润滑剂如滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁、硬脂酸钙、微粉硅胶、氢化植物油、聚乙二醇4000和6000；润湿剂如十二烷基硫酸钠、吐温80；骨架材料如羟丙甲纤维素、乙基纤维素等。
实施例9 藤黄酸软胶囊内容物 每粒含 胶壳藤黄酸 50mg明胶 46.00％大豆油 0.5ml 甘油 17.82％水 36.18％取藤黄酸溶于大豆油中，将此溶液制成软胶囊。每粒含藤黄酸50mg。
本实施例的软胶囊还可选用如下辅料溶剂如聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油、橄榄油等；增溶剂或潜溶剂如吐温80、聚氧乙烯醚蓖麻油、苯甲酸苄酯、乳酸乙酯、油酯乙酯、磷脂等；抗氧剂如没食子酸丙酯、特丁基苯酚(BHT)、维生素E等。胶壳中明胶、甘油与水的比例可适当调节，如明胶/甘油/水三者的比例在1∶0.3～0.4∶0.7～1.4为宜，胶壳中还可添加其他成分，如防腐剂对羟基苯甲酸甲、乙、丙、丁酯等；增塑剂如山梨醇等；稳定剂如阿拉伯胶等；遮光剂如二氧化钛、硫酸钡、沉降碳酸钙等。
实施例10 藤黄酸注射用乳剂的制备藤黄酸 20g大豆油 50g大豆磷脂12g甘油25g注射用水 加至 1000ml在氮气流下，将豆磷脂加入大豆油搅拌使其溶解，加入甘油和藤黄酸搅拌溶解，搅拌条件下慢慢加入注射用水，经二步高压乳匀机乳化；仍在氮气流下，用4号垂熔玻璃漏斗减压过滤，并在氮气流下装瓶轧盖，先经预热再于121℃灭菌15分钟，灭菌完毕后，冲热水逐渐冷却即得。
本例中还可选用以下辅料注射用油如油酸乙酯、聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油、橄榄油、肉豆蔻酸异丙酯等；抗氧剂如没食子酸丙酯、特丁基苯酚(BHT)、维生素E等；表面活性剂如吐温类、聚氧乙烯醚蓖麻油、磷脂类、普流罗尼等。
实施例11 藤黄酸注射剂藤黄酸20g聚氧乙烯醚蓖麻油 1.0g无水乙醇 0.5L注射用水 加至5.0L将藤黄酸溶于无水乙醇，加入20％聚氧乙烯醚蓖麻油(CremophorELP)，混匀，减压蒸发除去乙醇，加入适量注射用水混匀成澄清透明溶液，经0.22μm微孔滤膜过滤，分装封口，于100℃流通蒸汽灭菌30分钟即得，每支含藤黄酸20mg。
实施例12 藤黄酸注射剂藤黄酸20.0g精氨酸22.2g氯化钠适量注射用水 加至2000mL取藤黄酸与精氨酸置适宜容器中，加注射用水1800ml，搅拌均匀，超声至溶解，加入氯化钠搅拌使溶解，补加注射用水至2000ml，经0.22μm微孔滤膜过滤，分装封口，于100℃流通蒸汽灭菌30分钟即得，每支含藤黄酸20mg。
实施例13 注射用藤黄酸粉针剂的制备藤黄酸 20.0g精氨酸 22.2g甘露醇 32.0g注射用水 至2000ml取藤黄酸与精氨酸置适宜容器中，加注射用水1800ml，搅拌均匀，超声至溶解，加入甘露醇搅拌使溶解；按0.1％加入针用活性炭，搅拌30分钟，经钛砂芯脱炭抽滤到洁净的容器中，补加注射用水至2000ml，将溶液搅拌5分钟使均匀，再经0.22μm微孔滤膜过滤，滤液灌装在7ml西林瓶中，每瓶2ml，然后部分地塞上丁基橡胶塞，送至冻干箱内的板层上，插入温度探头，关闭箱门。按冻干曲线冷冻干燥，最后干燥温度为35℃以上并保持2小时。密塞，放气，出箱，轧盖。每支含藤黄酸20mg。
实施例14 藤黄酸混悬型注射剂藤黄酸 20g羧甲基纤维素钠 10g聚山梨酯80 0.1g尼泊金乙酯 0.5g尼泊金丙酯 0.5g磷酸二氢钾 16.7g磷酸氢二钾 1.7g注射用水 加至 2.0L将藤黄酸进行气流粉碎，得粒径10μm以下的微粉。将磷酸二氢钾和磷酸氢二钾溶于注射用水中，加入尼泊金乙酯和丙酯，再加入羧甲基纤维素钠，60℃条件下使全部溶解，过滤。将微粉化后的藤黄酸置于容器中，加聚山梨酯80研成细糊状，将上述溶液逐渐加入，搅拌均匀后，经胶体磨研磨5至10次。按常规测定方法测定含量合格后，分装在安瓿中，于100℃流通蒸汽灭菌30分钟即得，每支含藤黄酸20mg。
本实施例的注射剂还可选用如下辅料增溶剂如吐温类、普流罗尼F-68、聚氧乙烯醚蓖麻油等；助溶剂如氨基酸类化合物如组氨酸、赖氨酸、鸟氨酸酰胺类化合物如尿素、乙酰胺、硫脲、苯甲酰胺等，含羟基或羧基的化合物如蔗糖、枸橼酸及其钠盐、乳酸、水杨酸钠等；助悬剂如羧甲基纤维素钠、聚维酮、羟丙甲基纤维素等；防腐剂如尼泊金甲、乙、丙和丁酯；pH调节剂如枸橼酸及枸橼酸盐、磷酸盐等；溶剂如注射用水、注射用乙醇、丙二醇等。
实施例15 THS iV对小鼠移植瘤S180、EC、Heps的抑制作用实验方法实验用体重18-22g小鼠的昆明种小鼠，按移植性肿瘤研究法接种S180、EC、Heps实体瘤，每个瘤种各接种50只，接种后24小时称鼠重，并随机分为5组，空白对照组与羟基喜树碱组分别为阴、阳性对照组，THS组设高、中、低(8，4，2mg/kg)三个剂量组。于停药后第2天处死荷瘤小鼠称重，并分离瘤块称重，所得数据进行统计学处理(t检验)。结果见表1、2、3。
表1 THS iv对小鼠移植瘤Heps的抑制作用(X±SD)(n＝10)剂量 体重(g) 瘤重抑瘤率实验次数 组别(mg/kg)给药前 给药后 (g) (％)第一批 对照组 19.9±0.9926.2±2.302.00±0.56THS组 8 19.9±1.2025.7±2.210.76±0.30**62.004 20.2±1.4825.8±1.991.19±0.33**40.502 20.0±1.3326.0±2.451.43±0.39*28.50羟基喜树碱3 19.8±1.1425.7±2.210.98±0.26**51.00第二批 对照组 19.5±1.5126.5±2.372.11±0.57THS 8 19.8±1.0326.0±1.830.85±0.29**60.004 19.7±1.1627.1±2.511.28±0.28**39.302 19.6±1.2626.6±2.461.57±0.38*25.60羟基喜树碱3 19.5±1.2726.3±2.671.04±0.24**50.72第三批 对照组 19.90±1.20 27.2±1.932.06±0.37THS组 8 19.70±1.42 26.6±2.220.86±0.37**58.254 19.70±1.34 27.0±1.941.28±0.29**37.862 19.6±0.8426.9±2.511.54±0.52*25.24羟基喜树碱3 19.8±1.3226.6±2.321.04±0.28**49.51*P＜0.05**P＜0.01 与生理盐水对照组比较表2 THS iv对小鼠移植瘤EC的抑制作用(X±SD)(n＝10)*P＜0.05**P＜0.01 与生理盐水对照组比较剂量 体重(g) 瘤重 抑瘤率实验次数组别(mg/kg) 给药前给药后 (g) (％)第一批 对照组 20.2±1.40 27.2±1.23 2.21±0.53THS组 8 19.8±1.32 27.1±1.52 0.91±0.32**58.804 19.9±1.20 27.3±1.57 1.35±0.38**39.002 20.1±1.37 27.3±1.49 1.66±0.30*24.90羟基喜树碱 3 20.0±1.15 27.0±1.15 1.05±0.35**52.49第二批 对照组 19.9±1.20 27.2±1.75 2.165±0.48THS组 8 19.7±1.16 27.0±2.71 0.918±0.33**57.604 19.9±1.45 27.2±0.92 1.351±0.36**37.802 19.9±1.45 27.0±1.76 1.596±0.39**26.30羟基喜树碱 3 19.8±1.14 27.1±1.79 1.006±0.30**53.46第三批 对照组 20.10±1.3727.40±0.842.19±0.50THS组 8 20.00±1.4926.40±1.710.97±0.18**55.914 19.80±1.4826.80±0.791.30±0.38**40.952 19.90±1.3727.2±1.03 1.69±0.32*22.94羟基喜树碱 3 20.10±1.2027.0±1.41 1.09±0.23**50.16剂量 体重(g)瘤重抑瘤率实验次数组别(mg/kg) 给药前 给药后 (g) (％)第一批 对照组20.2±1.40 27.2±1.23 2.21±0.53THS组 8 19.8±1.32 27.1±1.52 0.91±0.32**58.804 19.9±1.20 27.3±1.57 1.35±0.38**39.002 20.1±1.37 27.3±1.49 1.66±0.30*24.90羟基喜树碱3 20.0±1.15 27.0±1.15 1.05±0.35**52.49第二批 对照组19.9±1.20 27.2±1.75 2.165±0.48THS组 8 19.7±1.16 27.0±2.71 0.918±0.33**57.604 19.9±1.45 27.2±0.92 1.351±0.36**37.802 19.9±1.45 27.0±1.76 1.596±0.39**26.30羟基喜树碱3 19.8±1.14 27.1±1.79 1.006±0.30**53.46第三批 对照组20.10±1.37 27.40±0.842.19±0.50THS组 8 20.00±1.49 26.40±1.710.97±0.18**55.914 19.80±1.48 26.80±0.791.30±0.38**40.952 19.90±1.37 27.2±1.03 1.69±0.32*22.94羟基喜树碱3 20.10±1.20 27.0±1.41 1.09±0.23**50.16
表3 THS iv对小鼠移植瘤S180的抑制作用(X±SD)(n＝10)剂量 体重(g)瘤重 抑瘤率实验次数组别(mg/kg) 给药前给药后 (g) (％)第一批 对照组 19.7±1.57 27.5±1.081.97±0.40THS组8 19.8±1.40 26.7±2.000.88±0.31**55.304 20.1±1.20 27.3±1.951.21±0.44**38.602 19.9±1.20 27.3±1.341.43±0.38**27.40羟基喜树碱 3 19.9±1.52 27.2±1.141.02±0.21**48.22第二批 对照组 19.8±1.32 27.4±0.972.045±0.41THS组8 19.8±1.32 26.8±1.810.898±0.34**56.004 19.8±1.23 27.1±2.771.292±0.34**37.002 19.6±1.26 27.6±2.501.583±0.31*23.00羟基喜树碱 3 19.6±1.07 27.3±1.701.038±0.25**49.27第三批 对照组 19.9±0.74 27.5±2.122.01±0.34THS组8 19.8±1.32 26.6±1.350.84±0.41**58.214 19.7±0.95 27.3±1.831.25±0.38**37.812 19.8±1.14 27.4±2.551.60±0.34*21.40羟基喜树碱 3 19.8±1.14 27.3±2.061.05±0.36**47.76*P＜0.05**P＜0.01 与生理盐水对照组比较结果表明，与生理盐水对照组相比，THS(8，4mg/kg)组及羟基喜树碱组皆有显著地抑制S180、EC、Heps的肿瘤生长作用(P＜0.01)，THS对小鼠体重增长无明显影响。实验重复3次结果相近。
实施例16 THS ip对小鼠移植性S180、EAC、Heps腹水瘤的生命延长作用实验方法按移植性肿瘤研究法接种S180、EAC、Heps腹水型小鼠，每个瘤种各接种50只，于接种后的第一天，称体重，随机分为5组，每组10只，雌雄各半，设THS(1.5，0.75，0.375mg/kg)三个剂量组，羟基喜树碱组(2mg/kg)及空白对照组。腹腔注射给药，每2天一次，共给药4次，在给药期间及停药后每天记录死亡鼠数并计算存活天数(存活超过60天的小鼠按60天计)及存活率(存活60天以上，且无症状小鼠)。所得数据进行统计学处理。实验结果见表4、5、6。
表4 THSip对Heps腹水型小鼠生命延长作用(X±SD)(n＝10)剂量 给药前体重 存活天数 生命延长率 存活率实验次数组别(mg/kg)(g)(天)(％) (％)第一批 对照组 19.9±1.52 11.4±2.32 0THS组 1.5 20.0±1.33 43.5±14.07**281.6 100.75 20.1±0.99 25.4±7.92**122.8 00.375 19.8±1.23 19.9±6.17**74.6 0羟基喜树碱 2 19.7±1.34 35.5±12.32**211.4 0第二批 对照组 19.9±1.20 11.1±1.73 0THS组 1.5 19.8±1.62 42.1±12.35**272.8 100.75 19.9±1.37 25.6±7.18**130.6 00.375 19.8±1.32 18.5±6.24**66.7 0羟基喜树碱 2 19.8±1.23 34.2±9.81**208.1 0第三批 对照组 19.8±0.92 10.9±2.02 0THS组 1.5 19.8±0.92 41.7±15.30**282.57 300.75 19.9±1.10 24.7±7.96**130.84 00.375 20.1±1.20 16.7±3.23**56.07 0羟基喜树碱 2 19.8±1.48 31.9±9.67**198.13 0**P＜0.01 与生理盐水对照组比较表5 THSip对EAC腹水型小鼠生命延长作用(X±SD)(n＝10)剂量给药前体重 存活天数 生命延长率 存活率实验次数组别(mg/kg) (g) (天) (％) (％)第一批 对照组 19.9±1.20 10.7±2.63 0THS组 1.5 19.8±1.55 34.3±10.34**203.5 00.75 19.9±0.88 24.8±7.22**119.5 00.37519.8±1.32 18.5±3.98**63.7 0羟基喜树碱 219.9±1.60 33.2±12.03**193.8 0
第二批对照组19.8±1.32 10.3±2.31 0THS组 1.5 19.9±1.20 34.3±10.25**233.01 00.7520.1±1.20 22.9±8.72**122.33 00.375 19.9±1.20 16.7±5.17**62.13 0羟基喜树碱2 19.8±1.32 31.1±10.33**201.94 0第三批对照组19.7±1.34 11.1±2.13 0THS组 1.5 19.8±1.23 35.9±11.84**223.42 00.7519.8±0.79 23.9±8.39**115.31 00.375 19.7±1.34 16.3±4.83**46.84 0羟基喜树碱2 20.1±1.20 32.8±8.92**195.49 0**P＜0.01 与生理盐水对照组比较表6 THSip对S180腹水型小鼠生命延长作用(X±SD)(n＝10)剂量给药前体重存活天数 生命延长率存活率实验次数组别(mg/kg) (g) (天) (％) (％)第一批 对照组 19.8±1.328.8±0.79 0THS组 1.5 19.7±1.2524.7±11.76**180.7 00.7519.7±1.1618.4±5.82**109.1 00.375 19.7±1.1613.7±4.42**55.7 0羟基喜树碱 2 19.9±1.3725.6±11.29**190.9 0第二批 对照组 19.7±1.3410.4±1.170THS组 1.5 20.0±1.1529.7±11.70**185.6 00.7519.8±0.9221.5±7.09**106.7 00.375 20.0±1.4915.8±4.02**51.9 0羟基喜树碱 2 19.7±1.4228.9±11.44**177.9 0第三批 对照组 19.7±1.3410.3±1.640THS组 1.5 19.8±1.1429.5±12.70**186.4100.7519.7±1.3421.9±7.40**112.620
0.375 19.9±1.37 14.9±4.01**44.660羟基喜树碱2 19.8±1.32 28.9±11.44**177.90**P＜0.01 与生理盐水对照组比较实验结果表明，与空白对照组相比，THS(1.5，0.75mg/kg)剂量组，羟基喜树碱组皆有非常显著延长S180、EAC、Heps腹水型小鼠的存活天数作用(P＜0.01)。实验重复3次结果相近。
实施例17 THS对人肝细胞性肝癌SMMC-7721和人肺癌A-549裸小鼠移植瘤的实验治疗作用实验方法取生长旺盛期的瘤组织剪切成1.5mm3左右，在无菌条件下，接种于裸小鼠右侧腋窝皮下。裸小鼠移植瘤用游标卡尺测量移植瘤直径，待肿瘤生长至100-300mm3后将动物随机分组。使用测量瘤径的方法，动态观察被试物抗肿瘤的效应。肿瘤直径的测量次数为每周2次，每次测量时同时称鼠重。实验组每周静脉给药3次，阳性对照组每周静脉给药3次，阴性对照组同时给等量生理盐水。肿瘤体积(tumor volume，TV)的计算公式为TV＝1/2×a×b2其中a、b分别表示长宽。根据测量的结果计算出相对肿瘤体积(relative tumor volume，RTV)，计算公式为RTV＝Vt/V0。其中V0为分笼给药时(即d0)测量所得肿瘤体积，Vt为每一次测量时的肿瘤体积。抗肿瘤活性的评价指标为相对肿瘤增殖率T/C(％)，计算公式如下T/C(%)=TRTVCRTV×100]]>
TRTV治疗组RTV；CRTV阴性对照组RTV。
THS对人肝癌裸小鼠移植瘤SMMC-7721的实验性治疗结果见表7和表8。THS对人肺癌裸小鼠移植瘤A-549实验性治疗结果见表9和表10。
表7.THS对人肝癌裸小鼠移植瘤SMMC-7721的实验治疗作用(1)组别 剂量 给药动物数 体重(克)TV(x±SD)RTVT/C P值mg/kg方式 开始最后 开始 最后 d0d14(x±SD) (％)NS 0.20ml/只 iv12 12 19.5 23.3 150±54 949±3846.5±1.9OPT3iv6618.7 22.8 172±69 891±4205.7±3.4 86.9＞0.05THS2iv6619.7 23.5 152±62 472±1273.7±1.9 56.8＜0.05THS4iv6519.2 23.5 150±45 485±2253.2±1.7 48.8＜0.05THS8iv6419.2 21.8 129±20 430±1063.4±0.4 52.7＜0.05d0分笼给药时间表8.THS对人肝癌裸小鼠移植瘤SMMC-7721的实验治疗作用(2)组别剂量给药动物数 体重(克)TV(x±SD)RTVT/C P值mg/kg 方式 开始最后 开始 最后 d0d7(x±SD)(％)NS 0.20ml/只 iv12 1219.2 21.3 240±119687±347 2.9±0.7OPT 3 iv66 19.7 20.7 257±99 508±227 1.9±0.3 66.6＞0.05THS 2 iv66 19.3 20.7 232±115395±224 1.8±0.6 62.0＞0.05THS 4 iv66 19.7 21.2 245±109398±269 1.5±0.4 51.7＜0.05THS 8 iv66 19.7 21.3 216±59 343±110 1.6±0.2 55.0＜0.05两批实验结果显示，在试验第7-14天THS静脉给药2mg/kg剂量时，对人肝细胞性肝癌SMMC-7721的最低T/C(％)为56.8-62.0；4mmg/kg剂量时，最低T/C(％)为48.8-51.7；8mg/kg剂量时，最低的T/C(％)为52.7-55.0。
表9.THS对人肺癌裸小鼠移植瘤A-549的实验治疗作用(1)组别 剂量 给药动物数 体重(克)TV(x±SD)RTVT/C P值
mg/kg方式 开始 最后 开始 最后 d0d10(x±SD) (％)NS 0.20ml/只 iv121218.2 22.3 117±49517±2954.5±1.2OPT3iv6 6 19.2 21.8 122±37423±1253.5±0.581.4＞0.05THS2iv6 6 18.5 22.5 104±36270±1042.9±0.664.5＞0.05THS4iv6 6 18.8 22.4 110±38297±1972.5±1.055.7＜0.05THS8iv6 5 18.8 21.8 104±55211±78 2.3±0.452.3＜0.05表10.THS对人肺癌裸小鼠移植瘤A-549的实验治疗作用(2)组别 剂量 给药动物数 体重(克)TV(x±SD)RTVT/C P值mg/kg 方式 开始 最后 开始 最后 d0d14(x±SD) (％)NS 0.20ml/只 iv 12 1221.1 22.5 267±128 5326±1655 21.5±5.6OPT3 iv 6 5 20.8 20.4 265±101 4880±88620.8±7.7 96.6＞0.05THS2 iv 6 6 20.2 21.2 280±854354±1045 17.4±6.9 81.1＞0.05THS4 iv 6 5 20.7 20.8 277±813537±85313.4±4.0 62.5＞0.05THS8 iv 6 5 20.2 21.2 245±125 2286±1342 12.1±5.5 56.2＜0.05两批实验结果显示，在试验第10-14天THS静脉给药2mg/kg剂量时，对人肺癌A-549的最低T/C(％)为64.5-81.1；4mg/kg剂量时，最低T/C(％)为55.6-62.5；8mg/kg剂量时，最低的T/C(％)为52.3-56.2，并呈良好的剂量效应关系。
THS静脉给药对人肝细胞性肝癌SMMC-7721和人肺癌A-549裸小鼠移植瘤有一定的生长抑制作用，对肝癌的作用稍强于对肺癌的作用。
实施例18 THS iv对荷瘤小鼠外周血中白细胞数的影响实验方法取上述规格小鼠50只，按移植性肿瘤研究法接种Heps实体瘤，接种后24小时称鼠重，并随机分为5组，每组10只，雌雄各半，生理盐水组与5-Fu组(30mg/kg)分别为阴、阳性对照组，THS设高、中、低三个剂量组。于接种后24hr iv给药，每2天一次，共给药4次，于停药后第2天处死解剖，处死前称重并由眼眶静脉取血，镜检白细胞总数，同时解剖分离瘤块，称瘤重并进行统计学处理(t检验)。结果见表11。
表11 THS iv对荷瘤小鼠外周血中白细胞数的影响(X±SD)(n＝10)小鼠体重(g)剂量 Wbc 抑制率(109/L)(％)瘤重(g)实验组别(mg/kg) 给药前给药后空白对照 19.6±1.5126.4±1.252.13±0.39 9.52±1.668 19.6±1.2925.4±1.120.96±0.21**9.26±1.37 54.93THS 4 19.5±0.9326.0±1.251.23±0.34**9.63±1.54 42.32 19.5±1.0826.1±1.341.63±0.29**9.46±1.60 23.55-Fu 30 19.8±1.4721.8±1.62**0.64±0.18*4.04±1.08**##70.0**P＜0.01 与空白组比较，**P＜0.01 与THS组比较结果表明，与生理盐水对照组相比，THS(8，4，2mg/kg)三个剂量组及5-Fu组皆有非常显著地抑制小鼠Heps肿瘤生长作用(P＜0.01)，5-Fu具有明显地抑制小鼠体重增长及明显地降低小鼠外周血中白细胞作用(P＜0.01)，但在有效剂量范围内THS对小鼠体重增长及小鼠外周血中白细胞数无明显影响。
实施例19 THS iv对正常大鼠的毒性研究实验方法取上述规格大鼠50只，雌雄各半，并随机分为5组，每组10只。生理盐水组与环磷酰胺组(30mg/kg)分别为阴、阳性对照组，THS组设高、中、低三个剂量组(6、3、1.5mg/kg)，隔天给药一次，共给药4次，于末次给药后第2天由眼眶静脉取血，镜检白细胞总数。根据参考文献，用20％乌拉坦(0.6ml/100g)麻醉后取一根股骨，用3％醋酸溶液10ml冲出所有骨髓细胞作骨髓有核细胞计数；并对胸腺、脾称重，进行统计学处理(t检验)。实验结果见表12和表13。
表12 THS iv对正常大鼠外周血中白细胞数及骨髓有核细胞的影响(X±SD)(n＝10)骨髓有核细胞数(×剂量 小鼠体重(g) Wbc 104)实验组别(mg/kg) 给药前 给药后(109/L)空白对照125.4±5.38 149.6±10.138.52±1.588528±2540.176 121.3±12.66145.3±11.966.84±1.517390±1830.08THS 3 121.0±9.67 145.0±12.317.28±1.437906±2129.041.5124.5±9.90 147.8±13.317.34±1.176930±2906.72Cy 30 123.0±9.78 131.0±8.75**1.62±0.42**##3314±839.31**##**P＜0.01 与空白组比较，**P＜0.01 与THS组比较结果表明，与生理盐水对照组相比，环磷酰胺组(Cy)具有明显地抑制大鼠体重增长及明显地降低大鼠外周血中白细胞作用(P＜0.01)，THS(6，3，1.5mg/kg)三个剂量组对大鼠体重增长及大鼠外周血中白细胞数无明显影响。
表13 THS iv对正常大鼠胸腺及脾脏脏器系数的影响(X±SD)(n＝10)剂量 胸腺 脾脏实验组别(mg/kg) 重量(g) 系数 重量(g) 系数空白对照 0.26±0.050.17±0.030.33±0.07 0.22±0.046 0.23±0.070.16±0.040.34±0.05 0.24±0.04THS3 0.22±0.060.15±0.030.31±0.04 0.22±0.031.5 0.26±0.050.17±0.030.37±0.04 0.25±0.03
Cy 30 0.19±0.05**0.14±0.03**0.24±0.03**##0.19±0.03**##**P＜0.01 与空白组比较，##P＜0.01 与THS组比较结果表明，与生理盐水对照组相比，环磷酰胺组(Cy)具有明显地抑制大鼠胸腺和脾脏增长的作用(P＜0.01)，THS(6，3，1.5mg/kg)三个剂量组对大鼠胸腺和脾脏增长无明显影响。
实施例20 THS对动物免疫功能的影响--THS对小鼠的血清溶血素的影响实验方法取体重18～22克小鼠，雌雄各半，随机分为5组，每组10只。生理盐水及环磷酰胺组(30mg/kg)分别为阴、阳性对照组，THS设高、中、低三个给药组，剂量分别为8、4、2mg/kg，均尾静脉给药。根据实验方法，小鼠腹腔注入绵羊红细胞0.5ml/只(2.5％)进行初次免疫，同时iv给药，隔日一次，共给药4次，末次给药1小时后测定并计算半数溶血值HC50，进行组间t检验，比较差异的显著性。实验结果见表14。
表14 THS对血清溶血素的影响(X±SD，n＝10)剂量 体重(g)实验组别(mg/kg) 给药前 给药后HC50空白对照 19±1.5725±4.10259.31±59.67THS8 20±1.6026±1.90212.35±47.004 20±1.2725±2.07231.78±43.982 19±1.0225±0.90229.35±47.78Cy3019±1.2825±2.00173.28±101.82**P＜0.05 与生理盐水对照组比较结果表明，THS对正常小鼠的血清半数溶血值无明显影响，与生理盐水组比较无显著性差异，说明THS对无明显作用。
实施例21 THS对动物免疫功能的影响--THS对小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响实验方法取体重18～22克小鼠，雌雄各半，随机分为阴性对照组，环磷酰胺组(30mg/kg)及THS高、中、低三个给药组，剂量分别为8、4、2mg/kg，分别尾静脉给予药物和生理盐水。实验时每鼠尾静脉注射印度墨汁0.05ml/10g体重，于1(t1)和5(t2)分钟后，分别从眼眶静脉取血20ul，加到2ml、0.1％NaCO3溶液中摇匀，用722分光光度计在680nm下比色，测光密度(以下分别用OD1和OD5来表示1分钟和5分钟所取血样的光密度)，按下式计算廓清指数k值。经体重及肝脾重换算后，得吞噬指数α值，以X±SD来表示给药组与对照组的K值和α值，进行组间t检验，比较差异的显著性。结果见表15。
表15 THS对正常小鼠巨噬细胞吞噬功能的影响(X±SD，n＝10)剂量组别 K值α值(mg/kg)生理盐水组 0.03391±0.016745.1147±0.9577THS组 8 0.03124±0.022115.2602±1.46424 0.02727±0.012414.9747±0.6603
2 0.03097±0.01166 5.2055±0.7942Cy组 30 0.008052±0.005354** 3.9055±1.4400*实验结果表明，THS对小鼠血清的吞噬指数α值无显著影响，与生理盐水组比较无明显差异，说明THS对小鼠的巨噬细胞吞噬功能无明显作用。
权利要求
1.下述通式为(I)的藤黄酸及藤黄酸与不同碱基或离子形成药用复合物和药学上可以接受的药物载体混合形成的药物组合物制剂， B表示金属离子或C1-C8的含氮有机碱或氨基酸。
2.根据权利要求1所述的药物组合物制剂，其特征在于，其剂型是药剂学上所说的任何一种剂型，包括片剂、胶囊剂、软胶囊、喷雾剂、凝胶剂、凝胶吸入剂、口服剂、混悬剂、冲剂、贴剂、软膏、丸剂、散剂、注射剂、输液剂、冻干注射剂、脂质体注射剂，靶向给药注射剂、栓剂、缓释制剂或控释制剂。
3.根据权利要求2所述的药物组合物制剂，其特征在于，它是藤黄酸及藤黄酸与不同碱基或离子形成的药用复合物与填充剂、崩解剂组配的片剂或胶囊剂；或者是藤黄酸及藤黄酸与不同碱基或离子形成的药用复合物与填充剂、羟丙甲纤维素K4M组配的缓释片剂或胶囊剂；或者是藤黄酸分散于油相中得到藤黄酸软胶囊。
4.根据权利要求3所述的药物组合物制剂，其特征在于，所述的填充剂是蔗糖、乳糖、微晶纤维素、糊精、淀粉或磷酸钙；所述的崩解剂是羟丙纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚维酮或交联羧甲基纤维素钠。
5.根据权利要求2所述的药物组合物制剂，其特征在于，它是藤黄酸与增溶剂或助溶剂形成的注射剂；或者是藤黄酸形成的冻干注射用粉针剂；或者是藤黄酸分散于油相中得到的注射用乳剂，或者是混悬型注射液，所述的混悬型注射液是将藤黄酸微粉和聚山梨酯80混研后，溶解到含磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、尼泊金酯和羧甲基纤维素钠的水溶液，经研磨制得。
6.根据权利要求3所述的药物组合物制剂，其特征在于，所述制剂中还设有粘合剂、润湿剂或润滑剂。
7.根据权利要求3或5所述的药物组合物制剂，其特征在于，所述的油相是大豆油、聚乙二醇400、棉籽油、花生油、麻油、玉米油或橄榄油；在所述的油相中还可加增溶剂或潜溶剂或抗氧剂。
8.根据权利要求5所述的药物组合物制剂，其特征在于，所述的增溶剂是聚氧乙烯醚蓖麻油，吐温、普流罗尼F-68；所述的助溶剂是精氨酸、葡甲胺、二乙胺、乙二胺、尿素、烟酰胺、脯氨酸、葡萄糖、枸橼酸及其钠盐。
9.权利要求1-8中任意一项中所述的药物组合物制剂在治疗肝癌、肺癌及其他肿瘤中的应用。
全文摘要
本发明是一种通式为(I)的藤黄酸及藤黄酸与不同碱基或离子形成药用复合物和药学上可以接受的药物载体混合形成的药物组合物制剂，B表示金属离子或C
文档编号A61K31/352GK1513448SQ0313238
公开日2004年7月21日 申请日期2003年8月16日 优先权日2003年8月16日
发明者尤启东, 郭青龙, 柯学, 肖伟, 戴翔翎, 凌娅 申请人:江苏康缘药业股份有限公司, 中国药科大学
最新回复(0)