20(R)－人参皂苷－Rg的制作方法
专利名称：20(R)－人参皂苷－Rg的制作方法
技术领域：
本发明涉及20(R)-人参皂苷-Rg3在制备治疗或预防心脑血管疾病的药物中的应用。
背景技术：
随着人口老龄化进程的加速以及生活方式的改变，心脑血管病已成为一个全球性的健康问题，冠心病、卒中的死亡率在世界范围分别居第1、3位，高血压一直被认为是卒中的主要危险因素。新型有效的防治心脑血管病药物的开发已刻不容缓。
20(R)-人参皂苷-Rg3是从人参中分离提取的四环三萜类人参二醇型皂苷单体。
20(R)-人参皂苷-Rg3结构式(R-glu-o-glu；R1-CH3；R2-OH)据报道，Rg3具有抗肿瘤、抑制新生血管生成、抗炎等作用，但关于20(R)-人参皂苷-Rg3具有预防或治疗心脑血管疾病的作用未见报道；鉴于此，本发明人通过大量的实验研究，惊奇地发现20(R)-人参皂苷-Rg3具有预防或治疗心脑血管疾病的医药用途。
发明内容
本发明提供了20(R)-人参皂苷-Rg3在制备治疗或预防心脑血管疾病的药物中的应用。
本发明提供了20(R)-人参皂苷-Rg3在制备治疗或预防脑损伤的药物中的应用。
本发明提供了20(R)-人参皂苷-Rg3在制备治疗或预防心肌缺血的药物中的应用。
本发明提供了20(R)-人参皂苷-Rg3在制备治疗或预防充血性心力衰竭药物中的应用。
本发明提供了含有20(R)-人参皂苷-Rg3的治疗心脑血管疾病的药物组合物。
本发明所述的20(R)-人参皂苷-Rg3在用于上述任一用途时，其使用剂量范围为10mg～400mg，优选剂量范围为30mg～200mg。
本发明中使用的20(R)-人参皂苷-Rg3可以单独使用或以药物组合物形式使用。药物组合物包括作为活性成分的20(R)-人参皂苷-Rg3及药用载体。该药物组合物可以通过口服、舌下、经皮、经肌肉或皮下、皮肤粘膜、尿道、阴道或静脉途径给药。药物组合物可以以片剂、丸剂、颗粒剂、胶囊、悬浮液、溶液、糖浆、注射剂的形式存在。本发明所提供的各种药物剂型均可以以药学常规方法制备而成。
本发明人通过下列试验证实了20(R)-人参皂苷-Rg3具有治疗或预防心脑血管疾病症的作用，但并不限于此试验。试验所用的20(R)-人参皂苷-Rg3由山东省天然药物工程技术研究中心药物化学研究室提供，经HPLC检测含量□90％，对照品由山东省天然药物工程技术研究中心分析研究室提供。
本发明人进行了下列试验来证实20(R)-人参皂苷-Rg3在制备治疗或预防心脑血管疾病的药物作用(下面的实施例用来更详细的说明本发明，但并不意味着本发明仅限于此)。
具体实施例方式制备实施例1注射用制剂制备实施例称取1.00g 20(R)-人参皂苷-Rg3，加入20ml正丁醇和30ml的丙二醇使皂苷完全融解，将0.15g盐酸丁卡因、0.02g的枸橼酸加入到40ml注射用水中，使完全溶解，并将上述水溶液加入到药物溶液中，混合均匀；以硼砂和硼酸调节pH值为5.5±1.0；加入0.1％的针用活性炭85℃保温30分钟，G3垂熔玻璃漏斗过滤，0.22um的微孔滤膜过滤；滤液分装于7ml西林瓶中，每支装量2ml(分装好的注射剂可以直接压塞、压铝盖成针剂；或经冻干机冻干制成冻干粉针。)。
试验例120(R)-人参皂苷-Rg3对大鼠局部脑缺血损伤的影响(1)材料20(R)-人参皂苷-Rg3由山东省天然药物工程技术研究中心药物化学研究室提供。
红四氮唑美国Sigma公司产品，临用前用生理盐水配成4％溶液。
实验动物普通级Wistar大鼠，雄性，体重280g-350g，山东省天然药物工程技术研究中心动物实验中心提供。合格证号鲁动质字200106005号。
(2)方法与结果动物随机分为假手术组，模型对照组(等容量溶剂)，尼莫地平组(Nim，1.5mg/kg)，20(R)-人参皂苷-Rg3小剂量组(1mg/kg)，20(R)-人参皂苷-Rg3中剂量组(4mg/kg)，20(R)-人参皂苷-Rg3大剂量组(40mg/kg)，每组10只。禁食12小时后，水合氯醛(350mg/kg，i.p.)麻醉，分离左侧颈总动脉，夹闭颈内、颈总动脉，颈外动脉近心端及远心端结扎，中间剪断。将颈外动脉游离端拉至与颈内动脉成一条直线，将栓线(选用直径0.24mm尼龙线，长度5.0cm)由颈外动脉插入至颅内，遇轻微阻力时停止，插入深度约为2cm。结扎颈外动脉开口，并打开颈总动脉动脉夹，消毒缝合伤口，造成左侧大脑中动脉缺血模型；假手术组仅进行左侧颈总动脉、颈内动脉、颈外动脉的分离(以上实验均在23□～25□进行)。术后各组动物静脉滴注(用输液泵注射)相应药物(给药体积3ml，30min滴完)。24小时后按文献刘小光，徐理纳，一种能评价溶栓和抗溶栓的大鼠脑中动脉模型，药学学报，1995，30662所述方法及标准观察并记录大鼠的行为障碍(A)提鼠尾观察前肢屈曲情况，如双前肢对称伸向地面，计为0分，如手术对侧前肢出现腕屈曲计为1分，肘屈曲计为2分，肩内旋计为3分，既有腕屈曲和/或肘屈曲，又有肩内旋者，计为4分。(B)将动物置于平地面上，分别推双肩向对侧移动，检查阻力。如双侧阻力对等且有力，计为0分，如向手术对侧推动时阻力下降者，根据下降程度不同分为轻、中、重三度，分别计为1，2和3分。(C)将动物双前肢置一金属网上，观察双前肢的肌张力。双前肢肌张力对等且有力者计为0分。同样根据手术对侧肌张力下降程度不同计为1，2和3分。(D)动物有不停地向一侧转圈者，计为1分。根据标准评分，满分为11分，分数越高，表示动物行为障碍越严重。
行为评分后处死大鼠，取脑，去掉嗅球、小脑和低位脑干，冠状切成5片，脑片用红四氮唑(TTC)染色，正常组织经染色后呈红色，梗塞组织呈白色，染色后照相，用中国航空航天大学病理图像分析软件求梗塞面积比。数据用X士S表示，以组间t检验进行统计学处理。
结果如表1所示，缺血24小时后，大鼠表现出明显的行为障碍，大鼠脑组织也出现明显的灶状缺血区，达到全脑的25％左右；给予不同剂量的20(R)-人参皂苷-Rg3，动物行为障碍有不同程度的减轻，大鼠脑缺血区也有明显好转，且呈剂量依赖性。
表1 20(R)-人参皂苷-Rg3对大鼠局部脑缺血损伤的影响(n＝10，X±s)组别行为障碍缺血面积(％)假手术组0 0模型对照组 10.50±1.31 24.41±4.22Nim组 6.97±2.35**13.34±7.56**20(R)-人参皂苷-Rg3大剂量组 6.24±1.88**12.37±4.45**20(R)-人参皂苷-Rg3中剂量组 7.61±3.01*16.27±2.76*20(R)-人参皂苷-Rg3小剂量组 7.66±2.65*18.57±3.65*与模型对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01试验例220(R)-人参皂苷-Rg3对大鼠心肌缺血的影响这个试验(1)材料20(R)-人参皂苷-Rg3由山东省天然药物工程技术研究中心药物化学研究室提供。
氯化硝基四氮唑蓝(N-BT)，由军事医学科学院药材供应站提供。
实验动物普通级Wistar大鼠，雄性，体重280g-350g，山东省天然药物工程技术研究中心动物实验中心提供。合格证号鲁动质字200106005号。
(2)方法与结果将大鼠随机分为假手术组，模型对照组(等容量溶剂)，20(R)-人参皂苷-Rg3小剂量组(1mg/kg)，20(R)-人参皂苷-Rg3中剂量组(4mg/kg)，20(R)-人参皂苷-Rg3大剂量组(40mg/kg)，每组10只。禁食12小时后，ip乌拉坦(1.2g/kg)麻醉，测肢体导联心电图。剪去左胸前皮毛，碘酒及酒精消毒，沿胸骨左缘1cm处，剪开胸壁肌肉及二条肋骨，迅速打开胸腔，暴露心脏，在动脉圆锥与左心耳之间结扎左冠状动脉，立即将心脏放回，排挤出胸腔空气，用止血钳闭合胸腔，造成大鼠急性心肌缺血模型。术后各组动物静脉滴注(用输液泵注射)相应药物(给药体积3ml，30min滴完)。记录术后0，2，6h心电图，随后取出心脏，以冷生理盐水洗净后，-20□冰箱冷冻过夜。次日，将冷冻的心脏由结扎处至心尖部等厚切成5片，浸入新鲜配制的0.5％N-BT磷酸缓冲液(pH 7.4)中。37□水浴振摇10～15min。用滤纸吸干切片表面的染色液，分离染色部分和未染色部分，称重，记算梗死面积。梗死面积(％)＝梗死部分重量/(非梗死部分重量+梗死部分重量)×100％。
结果如表2所示，不同剂量的20(R)-人参皂苷-Rg3明显减少结扎冠状动脉所致大鼠急性心肌缺血引起的心肌梗死面积，并可降低由心肌缺血造成的肢体导联心电图J点的升高。
表2 20(R)-人参皂苷-Rg3对大鼠心肌缺血损伤的影响(n＝10，X±s)梗死面 J点升高(mV)分组积(％) 正常 0h 2h 6h模型对照组 24±4 0.8±0.6 6.7±2.3 5.8±2.0 5.1±1.4丹参注射液组17±6 0.8±0.6 6.0±1.5*5.1±1.8*4.1±1.3*20(R)-人参皂苷-Rg3大剂量组 13±7 0.7±0.6 4.3±1.3**3.4±1.1**3.2±1.2**20(R)-人参皂苷-Rg3中剂量组 16±5 0.7±0.4 5.4±1.6*4.3±1.3**3.4±1.3**20(R)-人参皂苷-Rg3小剂量组 17±6 0.7±0.5 5.8±1.7*4.9±1.4*4.2±1.3*与模型对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01试验例320(R)-人参皂苷-Rg3对猫实验性心力衰竭的治疗作用(1)材料20(R)-人参皂苷-Rg3由山东省天然药物工程技术研究中心药物化学研究室提供。
Powerlab/8sp生理记录仪澳大利亚InStruments公司生产。
电磁流量计(MFV-3200型)日本光电公司生产。
实验动物健康成年猫体重2.5～3.5kg，山东省天然药物工程技术研究中心动物实验中心提供。
(2)方法将猫随机分为模型对照组(等容量溶剂)，20(R)-人参皂苷-Rg3小剂量组(0.5mg/kg)，20(R)-人参皂苷-Rg3中剂量组(2mg/kg)，20(R)-人参皂苷-Rg3大剂量组(20mg/kg)，每组6只。禁食12小时后，静脉注射戊巴比妥钠40mg/kg麻醉，气管插管，人工呼吸，监测主动脉压(AP)与心电图。左侧开胸，从心尖插导管至左心室，测左室压及其压力变化速度(±dp/dtmax)。将Waltan-Brodie应变弓植入左心室前壁，测定心肌收缩力。用电磁流量计测定升主动脉血流量。以升主动脉流量作为心输出量(CO)，计算心脏指数(CI)，每搏指数(SI)，每搏作功(SW)，左心作功(LVW)及总外周血管阻力(SVR)。各项参数记录于Powerlab/8sp生理记录仪。术后半小时，各项参数达到稳定。从股静脉恒速输注戊巴比妥钠(0.5ml/kg·min)，以±dp/dtmax下降到约1000mmHg/s为主要指标形成急性心力衰竭。待心衰模型稳定后，各组动物静脉滴注(用输液泵注射)相应药物(给药体积10ml，30min滴完)。
(3)结果A、20(R)-人参皂苷-Rg3对心力衰竭猫心率与血压的影响结果如表3所示，滴注不同剂量20(R)-人参皂苷-Rg3可不同程度降低心力衰竭猫血压，而且对舒张压的作用尤为明显。
表3 20(R)-人参皂苷-Rg3对心力衰竭猫血压的影响(n＝6，X±s)剂量 平均动脉压(mmHg) 收缩压(mmHg) 舒张压(mmHg)分组(mg/kg) 给药前 给药后给药前 给药后给药前 给药后模型对照组 57±453±671±11 69±1045±8 44±620(R)-人参皂苷2056±539±5**##73±13 64±7*#47±7 28±3**##-Rg3大剂量组20(R)-人参皂苷2 58±5 44±8*#70±8 67±9 42±6 31±5**##-Rg3中剂量组20(R)-人参皂苷0.5 63±4 46±7*73±13 67±8 42±7 36±5*#-Rg3小剂量组与给药前比较*P＜0.05，**P＜0.01；与模型对照组比较#P＜0.05，##P＜0.01B、20(R)-人参皂苷-Rg3对心力衰竭猫心脏作功的影响结果如表4所示，滴注不同剂量20(R)-人参皂苷-Rg3可增加心衰猫的SW与LVW，与给药前、模型对照组比较有显著性差异。
表4 20(R)-人参皂苷-Rg3对心力衰竭猫心脏作功的影响(n＝6，X±s)剂量 每搏作功(g·m/beat) 左心作功(kg·m/min)分组(mg/kg) 给药前给药后 给药前 给药后模型对照组0.98±0.340.87±0.57 0.064±0.035 0.059±0.03520(R)-人参皂苷20 0.86±0.421.23±0.58**##0.066±0.035 0.088±0.044**##-Rg3大剂量组20(R)-人参皂苷2 0.89±0.331.08±0.43*#0.059±0.037 0.078±0.034*#-Rg3中剂量组20(R)-人参皂苷0.5 0.93±0.361.01±0.55#0.061±0.033 0.071±0.027#-Rg3小剂量组与给药前比较*P＜0.05，**P＜0.01；与模型对照组比较#P＜0.05，##P＜0.01C、20(R)-人参皂苷-Rg3对心力衰竭猫总外周血管阻力的影响结果如表5所示，滴注不同剂量20(R)-人参皂苷-Rg3可降低心力衰竭猫总外血管阻力，与给药前、模型对照组比较有显著性差异。
表5 20(R)-人参皂苷-Rg3对心力衰竭猫总外周血管阻力的影响(n＝6，X±s)剂量总外周血管阻力(mmHg/min/kg)分组(mg/kg) 给药前给药后模型对照组 79±2882±3220(R)-人参皂苷-Rg3大剂量组 20 81±3151±21**##20(R)-人参皂苷-Rg3中剂量组 2 83±2764±31**##20(R)-人参皂苷-Rg3小剂量组 0.582±3171±34*#与给药前比较*P＜0.05，**P＜0.01；与模型对照组比较#P＜0.05，##P＜0.01D、20(R)-人参皂苷-Rg3对心力衰竭猫心输出量的影响结果如表6所示，滴注不同剂量20(R)-人参皂苷-Rg3可增加心衰猫的心输出量，与给药前、模型对照组比较有显著性差异。
表6 20(R)-人参皂苷-Rg3对心力衰竭猫心输出量的影响(n＝6，X±s)剂量每搏输出量指数(ml/beat·m2)心脏输出量指数(L/min·m2)分组(mg/kg) 给药前给药后 给药前 给药后模型对照组 4.5±0.8 4.1±1.1 0.65±0.16 0.59±0.1720(R)-人参皂苷20 4.4±1.1 8.1±3.6**##0.67±0.21 0.88±0.24**##-Rg3大剂量组20(R)-人参皂苷25.1±1.7 7.2±3.2**##0.66±0.16 0.79±0.17*#-Rg3中剂量组20(R)-人参皂苷0.5 4.8±0.8 5.9±1.2*#0.67±0.22 0.73±0.17#-Rg3小剂量组与给药前比较*P＜0.05，**P＜0.01；与模型对照组比较#P＜0.05，＃＃＜0.0权利要求
1. 20(R)-人参皂苷-Rg3在制备治疗或预防心脑血管疾病的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征为制备治疗或预防脑损伤的药物中的应用。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征为制备治疗或预防心肌缺血的药物中的应用。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征为制备治疗或预防充血性心力衰竭的药物中的应用。
5.根据权利要求1-4任一所述的应用，其特征在于20(R)-人参皂苷-Rg3的使用剂量范围为10mg～400mg。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于20(R)-人参皂苷-Rg3的使用剂量优选为30mg～200mg。
7.含有20(R)-人参皂苷-Rg3的用于治疗或预防心脑血管疾病的药物组合物。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，该组合物可以通过口服、舌下、经皮、经肌肉或皮下、皮肤粘膜、尿道、阴道或静脉途径给药。
9.根据权利要求7或8所述的药物组合物，其特征在于该组合物可以以片剂、丸剂、颗粒剂、胶囊、悬浮液、溶液、糖浆、注射剂、霜剂、软膏、喷雾剂、口嚼剂或贴剂等形式存在。
全文摘要
本发明涉及20(R)－人参皂苷－Rg
文档编号A61P9/00GK1569011SQ03132958
公开日2005年1月26日 申请日期2003年7月24日 优先权日2003年7月24日
发明者田京伟, 傅风华, 蒋王林, 王超云 申请人:山东绿叶天然药物研究开发有限公司
技术领域：
本发明涉及20(R)-人参皂苷-Rg3在制备治疗或预防心脑血管疾病的药物中的应用。
背景技术：
随着人口老龄化进程的加速以及生活方式的改变，心脑血管病已成为一个全球性的健康问题，冠心病、卒中的死亡率在世界范围分别居第1、3位，高血压一直被认为是卒中的主要危险因素。新型有效的防治心脑血管病药物的开发已刻不容缓。
20(R)-人参皂苷-Rg3是从人参中分离提取的四环三萜类人参二醇型皂苷单体。
20(R)-人参皂苷-Rg3结构式(R-glu-o-glu；R1-CH3；R2-OH)据报道，Rg3具有抗肿瘤、抑制新生血管生成、抗炎等作用，但关于20(R)-人参皂苷-Rg3具有预防或治疗心脑血管疾病的作用未见报道；鉴于此，本发明人通过大量的实验研究，惊奇地发现20(R)-人参皂苷-Rg3具有预防或治疗心脑血管疾病的医药用途。
发明内容
本发明提供了20(R)-人参皂苷-Rg3在制备治疗或预防心脑血管疾病的药物中的应用。
本发明提供了20(R)-人参皂苷-Rg3在制备治疗或预防脑损伤的药物中的应用。
本发明提供了20(R)-人参皂苷-Rg3在制备治疗或预防心肌缺血的药物中的应用。
本发明提供了20(R)-人参皂苷-Rg3在制备治疗或预防充血性心力衰竭药物中的应用。
本发明提供了含有20(R)-人参皂苷-Rg3的治疗心脑血管疾病的药物组合物。
本发明所述的20(R)-人参皂苷-Rg3在用于上述任一用途时，其使用剂量范围为10mg～400mg，优选剂量范围为30mg～200mg。
本发明中使用的20(R)-人参皂苷-Rg3可以单独使用或以药物组合物形式使用。药物组合物包括作为活性成分的20(R)-人参皂苷-Rg3及药用载体。该药物组合物可以通过口服、舌下、经皮、经肌肉或皮下、皮肤粘膜、尿道、阴道或静脉途径给药。药物组合物可以以片剂、丸剂、颗粒剂、胶囊、悬浮液、溶液、糖浆、注射剂的形式存在。本发明所提供的各种药物剂型均可以以药学常规方法制备而成。
本发明人通过下列试验证实了20(R)-人参皂苷-Rg3具有治疗或预防心脑血管疾病症的作用，但并不限于此试验。试验所用的20(R)-人参皂苷-Rg3由山东省天然药物工程技术研究中心药物化学研究室提供，经HPLC检测含量□90％，对照品由山东省天然药物工程技术研究中心分析研究室提供。
本发明人进行了下列试验来证实20(R)-人参皂苷-Rg3在制备治疗或预防心脑血管疾病的药物作用(下面的实施例用来更详细的说明本发明，但并不意味着本发明仅限于此)。
具体实施例方式制备实施例1注射用制剂制备实施例称取1.00g 20(R)-人参皂苷-Rg3，加入20ml正丁醇和30ml的丙二醇使皂苷完全融解，将0.15g盐酸丁卡因、0.02g的枸橼酸加入到40ml注射用水中，使完全溶解，并将上述水溶液加入到药物溶液中，混合均匀；以硼砂和硼酸调节pH值为5.5±1.0；加入0.1％的针用活性炭85℃保温30分钟，G3垂熔玻璃漏斗过滤，0.22um的微孔滤膜过滤；滤液分装于7ml西林瓶中，每支装量2ml(分装好的注射剂可以直接压塞、压铝盖成针剂；或经冻干机冻干制成冻干粉针。)。
试验例120(R)-人参皂苷-Rg3对大鼠局部脑缺血损伤的影响(1)材料20(R)-人参皂苷-Rg3由山东省天然药物工程技术研究中心药物化学研究室提供。
红四氮唑美国Sigma公司产品，临用前用生理盐水配成4％溶液。
实验动物普通级Wistar大鼠，雄性，体重280g-350g，山东省天然药物工程技术研究中心动物实验中心提供。合格证号鲁动质字200106005号。
(2)方法与结果动物随机分为假手术组，模型对照组(等容量溶剂)，尼莫地平组(Nim，1.5mg/kg)，20(R)-人参皂苷-Rg3小剂量组(1mg/kg)，20(R)-人参皂苷-Rg3中剂量组(4mg/kg)，20(R)-人参皂苷-Rg3大剂量组(40mg/kg)，每组10只。禁食12小时后，水合氯醛(350mg/kg，i.p.)麻醉，分离左侧颈总动脉，夹闭颈内、颈总动脉，颈外动脉近心端及远心端结扎，中间剪断。将颈外动脉游离端拉至与颈内动脉成一条直线，将栓线(选用直径0.24mm尼龙线，长度5.0cm)由颈外动脉插入至颅内，遇轻微阻力时停止，插入深度约为2cm。结扎颈外动脉开口，并打开颈总动脉动脉夹，消毒缝合伤口，造成左侧大脑中动脉缺血模型；假手术组仅进行左侧颈总动脉、颈内动脉、颈外动脉的分离(以上实验均在23□～25□进行)。术后各组动物静脉滴注(用输液泵注射)相应药物(给药体积3ml，30min滴完)。24小时后按文献刘小光，徐理纳，一种能评价溶栓和抗溶栓的大鼠脑中动脉模型，药学学报，1995，30662所述方法及标准观察并记录大鼠的行为障碍(A)提鼠尾观察前肢屈曲情况，如双前肢对称伸向地面，计为0分，如手术对侧前肢出现腕屈曲计为1分，肘屈曲计为2分，肩内旋计为3分，既有腕屈曲和/或肘屈曲，又有肩内旋者，计为4分。(B)将动物置于平地面上，分别推双肩向对侧移动，检查阻力。如双侧阻力对等且有力，计为0分，如向手术对侧推动时阻力下降者，根据下降程度不同分为轻、中、重三度，分别计为1，2和3分。(C)将动物双前肢置一金属网上，观察双前肢的肌张力。双前肢肌张力对等且有力者计为0分。同样根据手术对侧肌张力下降程度不同计为1，2和3分。(D)动物有不停地向一侧转圈者，计为1分。根据标准评分，满分为11分，分数越高，表示动物行为障碍越严重。
行为评分后处死大鼠，取脑，去掉嗅球、小脑和低位脑干，冠状切成5片，脑片用红四氮唑(TTC)染色，正常组织经染色后呈红色，梗塞组织呈白色，染色后照相，用中国航空航天大学病理图像分析软件求梗塞面积比。数据用X士S表示，以组间t检验进行统计学处理。
结果如表1所示，缺血24小时后，大鼠表现出明显的行为障碍，大鼠脑组织也出现明显的灶状缺血区，达到全脑的25％左右；给予不同剂量的20(R)-人参皂苷-Rg3，动物行为障碍有不同程度的减轻，大鼠脑缺血区也有明显好转，且呈剂量依赖性。
表1 20(R)-人参皂苷-Rg3对大鼠局部脑缺血损伤的影响(n＝10，X±s)组别行为障碍缺血面积(％)假手术组0 0模型对照组 10.50±1.31 24.41±4.22Nim组 6.97±2.35**13.34±7.56**20(R)-人参皂苷-Rg3大剂量组 6.24±1.88**12.37±4.45**20(R)-人参皂苷-Rg3中剂量组 7.61±3.01*16.27±2.76*20(R)-人参皂苷-Rg3小剂量组 7.66±2.65*18.57±3.65*与模型对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01试验例220(R)-人参皂苷-Rg3对大鼠心肌缺血的影响这个试验(1)材料20(R)-人参皂苷-Rg3由山东省天然药物工程技术研究中心药物化学研究室提供。
氯化硝基四氮唑蓝(N-BT)，由军事医学科学院药材供应站提供。
实验动物普通级Wistar大鼠，雄性，体重280g-350g，山东省天然药物工程技术研究中心动物实验中心提供。合格证号鲁动质字200106005号。
(2)方法与结果将大鼠随机分为假手术组，模型对照组(等容量溶剂)，20(R)-人参皂苷-Rg3小剂量组(1mg/kg)，20(R)-人参皂苷-Rg3中剂量组(4mg/kg)，20(R)-人参皂苷-Rg3大剂量组(40mg/kg)，每组10只。禁食12小时后，ip乌拉坦(1.2g/kg)麻醉，测肢体导联心电图。剪去左胸前皮毛，碘酒及酒精消毒，沿胸骨左缘1cm处，剪开胸壁肌肉及二条肋骨，迅速打开胸腔，暴露心脏，在动脉圆锥与左心耳之间结扎左冠状动脉，立即将心脏放回，排挤出胸腔空气，用止血钳闭合胸腔，造成大鼠急性心肌缺血模型。术后各组动物静脉滴注(用输液泵注射)相应药物(给药体积3ml，30min滴完)。记录术后0，2，6h心电图，随后取出心脏，以冷生理盐水洗净后，-20□冰箱冷冻过夜。次日，将冷冻的心脏由结扎处至心尖部等厚切成5片，浸入新鲜配制的0.5％N-BT磷酸缓冲液(pH 7.4)中。37□水浴振摇10～15min。用滤纸吸干切片表面的染色液，分离染色部分和未染色部分，称重，记算梗死面积。梗死面积(％)＝梗死部分重量/(非梗死部分重量+梗死部分重量)×100％。
结果如表2所示，不同剂量的20(R)-人参皂苷-Rg3明显减少结扎冠状动脉所致大鼠急性心肌缺血引起的心肌梗死面积，并可降低由心肌缺血造成的肢体导联心电图J点的升高。
表2 20(R)-人参皂苷-Rg3对大鼠心肌缺血损伤的影响(n＝10，X±s)梗死面 J点升高(mV)分组积(％) 正常 0h 2h 6h模型对照组 24±4 0.8±0.6 6.7±2.3 5.8±2.0 5.1±1.4丹参注射液组17±6 0.8±0.6 6.0±1.5*5.1±1.8*4.1±1.3*20(R)-人参皂苷-Rg3大剂量组 13±7 0.7±0.6 4.3±1.3**3.4±1.1**3.2±1.2**20(R)-人参皂苷-Rg3中剂量组 16±5 0.7±0.4 5.4±1.6*4.3±1.3**3.4±1.3**20(R)-人参皂苷-Rg3小剂量组 17±6 0.7±0.5 5.8±1.7*4.9±1.4*4.2±1.3*与模型对照组比较*P＜0.05，**P＜0.01试验例320(R)-人参皂苷-Rg3对猫实验性心力衰竭的治疗作用(1)材料20(R)-人参皂苷-Rg3由山东省天然药物工程技术研究中心药物化学研究室提供。
Powerlab/8sp生理记录仪澳大利亚InStruments公司生产。
电磁流量计(MFV-3200型)日本光电公司生产。
实验动物健康成年猫体重2.5～3.5kg，山东省天然药物工程技术研究中心动物实验中心提供。
(2)方法将猫随机分为模型对照组(等容量溶剂)，20(R)-人参皂苷-Rg3小剂量组(0.5mg/kg)，20(R)-人参皂苷-Rg3中剂量组(2mg/kg)，20(R)-人参皂苷-Rg3大剂量组(20mg/kg)，每组6只。禁食12小时后，静脉注射戊巴比妥钠40mg/kg麻醉，气管插管，人工呼吸，监测主动脉压(AP)与心电图。左侧开胸，从心尖插导管至左心室，测左室压及其压力变化速度(±dp/dtmax)。将Waltan-Brodie应变弓植入左心室前壁，测定心肌收缩力。用电磁流量计测定升主动脉血流量。以升主动脉流量作为心输出量(CO)，计算心脏指数(CI)，每搏指数(SI)，每搏作功(SW)，左心作功(LVW)及总外周血管阻力(SVR)。各项参数记录于Powerlab/8sp生理记录仪。术后半小时，各项参数达到稳定。从股静脉恒速输注戊巴比妥钠(0.5ml/kg·min)，以±dp/dtmax下降到约1000mmHg/s为主要指标形成急性心力衰竭。待心衰模型稳定后，各组动物静脉滴注(用输液泵注射)相应药物(给药体积10ml，30min滴完)。
(3)结果A、20(R)-人参皂苷-Rg3对心力衰竭猫心率与血压的影响结果如表3所示，滴注不同剂量20(R)-人参皂苷-Rg3可不同程度降低心力衰竭猫血压，而且对舒张压的作用尤为明显。
表3 20(R)-人参皂苷-Rg3对心力衰竭猫血压的影响(n＝6，X±s)剂量 平均动脉压(mmHg) 收缩压(mmHg) 舒张压(mmHg)分组(mg/kg) 给药前 给药后给药前 给药后给药前 给药后模型对照组 57±453±671±11 69±1045±8 44±620(R)-人参皂苷2056±539±5**##73±13 64±7*#47±7 28±3**##-Rg3大剂量组20(R)-人参皂苷2 58±5 44±8*#70±8 67±9 42±6 31±5**##-Rg3中剂量组20(R)-人参皂苷0.5 63±4 46±7*73±13 67±8 42±7 36±5*#-Rg3小剂量组与给药前比较*P＜0.05，**P＜0.01；与模型对照组比较#P＜0.05，##P＜0.01B、20(R)-人参皂苷-Rg3对心力衰竭猫心脏作功的影响结果如表4所示，滴注不同剂量20(R)-人参皂苷-Rg3可增加心衰猫的SW与LVW，与给药前、模型对照组比较有显著性差异。
表4 20(R)-人参皂苷-Rg3对心力衰竭猫心脏作功的影响(n＝6，X±s)剂量 每搏作功(g·m/beat) 左心作功(kg·m/min)分组(mg/kg) 给药前给药后 给药前 给药后模型对照组0.98±0.340.87±0.57 0.064±0.035 0.059±0.03520(R)-人参皂苷20 0.86±0.421.23±0.58**##0.066±0.035 0.088±0.044**##-Rg3大剂量组20(R)-人参皂苷2 0.89±0.331.08±0.43*#0.059±0.037 0.078±0.034*#-Rg3中剂量组20(R)-人参皂苷0.5 0.93±0.361.01±0.55#0.061±0.033 0.071±0.027#-Rg3小剂量组与给药前比较*P＜0.05，**P＜0.01；与模型对照组比较#P＜0.05，##P＜0.01C、20(R)-人参皂苷-Rg3对心力衰竭猫总外周血管阻力的影响结果如表5所示，滴注不同剂量20(R)-人参皂苷-Rg3可降低心力衰竭猫总外血管阻力，与给药前、模型对照组比较有显著性差异。
表5 20(R)-人参皂苷-Rg3对心力衰竭猫总外周血管阻力的影响(n＝6，X±s)剂量总外周血管阻力(mmHg/min/kg)分组(mg/kg) 给药前给药后模型对照组 79±2882±3220(R)-人参皂苷-Rg3大剂量组 20 81±3151±21**##20(R)-人参皂苷-Rg3中剂量组 2 83±2764±31**##20(R)-人参皂苷-Rg3小剂量组 0.582±3171±34*#与给药前比较*P＜0.05，**P＜0.01；与模型对照组比较#P＜0.05，##P＜0.01D、20(R)-人参皂苷-Rg3对心力衰竭猫心输出量的影响结果如表6所示，滴注不同剂量20(R)-人参皂苷-Rg3可增加心衰猫的心输出量，与给药前、模型对照组比较有显著性差异。
表6 20(R)-人参皂苷-Rg3对心力衰竭猫心输出量的影响(n＝6，X±s)剂量每搏输出量指数(ml/beat·m2)心脏输出量指数(L/min·m2)分组(mg/kg) 给药前给药后 给药前 给药后模型对照组 4.5±0.8 4.1±1.1 0.65±0.16 0.59±0.1720(R)-人参皂苷20 4.4±1.1 8.1±3.6**##0.67±0.21 0.88±0.24**##-Rg3大剂量组20(R)-人参皂苷25.1±1.7 7.2±3.2**##0.66±0.16 0.79±0.17*#-Rg3中剂量组20(R)-人参皂苷0.5 4.8±0.8 5.9±1.2*#0.67±0.22 0.73±0.17#-Rg3小剂量组与给药前比较*P＜0.05，**P＜0.01；与模型对照组比较#P＜0.05，＃＃＜0.0权利要求
1. 20(R)-人参皂苷-Rg3在制备治疗或预防心脑血管疾病的药物中的应用。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征为制备治疗或预防脑损伤的药物中的应用。
3.根据权利要求1所述的应用，其特征为制备治疗或预防心肌缺血的药物中的应用。
4.根据权利要求1所述的应用，其特征为制备治疗或预防充血性心力衰竭的药物中的应用。
5.根据权利要求1-4任一所述的应用，其特征在于20(R)-人参皂苷-Rg3的使用剂量范围为10mg～400mg。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于20(R)-人参皂苷-Rg3的使用剂量优选为30mg～200mg。
7.含有20(R)-人参皂苷-Rg3的用于治疗或预防心脑血管疾病的药物组合物。
8.根据权利要求7所述的药物组合物，该组合物可以通过口服、舌下、经皮、经肌肉或皮下、皮肤粘膜、尿道、阴道或静脉途径给药。
9.根据权利要求7或8所述的药物组合物，其特征在于该组合物可以以片剂、丸剂、颗粒剂、胶囊、悬浮液、溶液、糖浆、注射剂、霜剂、软膏、喷雾剂、口嚼剂或贴剂等形式存在。
全文摘要
本发明涉及20(R)－人参皂苷－Rg
文档编号A61P9/00GK1569011SQ03132958
公开日2005年1月26日 申请日期2003年7月24日 优先权日2003年7月24日
发明者田京伟, 傅风华, 蒋王林, 王超云 申请人:山东绿叶天然药物研究开发有限公司
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