含哌嗪的噻吩并吡啶酮类衍生物、其制备方法和用途的制作方法
专利名称：含哌嗪的噻吩并吡啶酮类衍生物、其制备方法和用途的制作方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，更确切地说，是涉及一类具有抗恶性肿瘤作用的化合物及其制备方法。
背景技术：
肿瘤是威胁人类生命的常见疾病，据统计，每年全球肿瘤死亡总数达700万人，我 国每年死于肿瘤者100多万人，并逐渐增加，已成为城市人口的第一位死因。传统的化疗药 物临床上治疗效果明显，缺点在于特异性低，选择性差，导致明显的毒副作用，容易产生严 重的肿瘤多药耐药现象，限制了临床的应用，寻找安全和有效的抗肿瘤药物一直是医药界 的追求目标。
发明内容
本发明的一个目的在于，公开一类含哌嗪的噻吩并吡啶酮类衍生物及其药用盐。本发明的另一个目的在于，公开了以一类含哌嗪的噻吩并吡啶酮衍生物及其药用 盐为主要活性成分的药物组合物。本发明的再一个目的在于，公开了一类含哌嗪的噻吩并吡啶酮衍生物及其药用盐 的制备方法。本发明还有一个目的在于，公开了一类含哌嗪的噻吩并吡啶酮衍生物及其药用 盐，作为抗恶性肿瘤药物方面的应用，特别是在用于制备治疗肝癌、白血病、结肠癌、口腔癌 药物方面的用途。本发明具体涉及通式I结构的化合物及其药学上可接受的盐
(I )其中η = 1,2 ；RSR2为氢，C1-C3烷基，卤素，卤代甲基。本发明所述的C1-C3烷基及卤素、卤代甲基具体代表甲基，乙基，丙基，异丙基，氟，
氯，三氟甲基等。本发明涉及的具有式I结构的化合物，其中部分化合物为I-I 5-(2-(4-苯基哌嗪-1-基)乙酰基)_ (5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2(4H)_ 酮；1-2 5-(2-(4_对甲基苯基哌嗪-1-基)乙酰基)-(5，6，7，7a_四氢噻吩并[3， 2-c]吡啶-2(4H)_ 酮；
1-3 5-(2-(4-邻氟苯基哌嗪-1-基)乙酰基)_ (5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c] 吡啶-2 (4H)-酮；1-4 5-(2-(4-(2，3_ 二氯苯基)哌嗪-1-基)乙酰基)-(5，6，7，7a_四氢噻吩并 [3,2-c]吡啶-2(4H)_ 酮；1-5 5-(2-(4-(3-三氟甲基苯基)哌嗪-1-基)乙酰基)_ (5，6，7，7a_四氢噻吩 并[3，2-c]吡啶-2(4H)_ 酮；1-6 5-(3-(4-(2，3_ 二氯苯基)哌嗪-1-基)丙酰基)-(5，6，7，7a_四氢噻吩并 [3,2-c]吡啶-2(4H)_ 酮；1-7 5-(3-(4-(2-氟苯基)哌嗪基)丙酰基)_ (5，6，7，7a_四氢噻吩并[3， 2-c]吡啶-2(4H)_ 酮。本发明中的具有式I结构的化合物或其药学上可接受的盐系指本发明化合物与 无机酸、有机酸所成的盐。其中特别优选的盐是盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸 氢盐、磷酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、马来酸盐、苯甲酸 盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、牛磺酸盐等等。式I化合物的制备路线 其中X为卤素。5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c]吡啶_2 (4H)-酮与卤代酰卤，在二氯甲烷、三氯甲 烷或甲苯等溶剂中，在三乙胺、吡啶、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钾、氢氧 化钠等缚酸剂存在下，_30°C 35°C反应制得关键中间体。中间体再与哌嗪类化合物在二氯 甲烷、三氯甲烷或甲苯中，在三乙胺、吡啶、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钾、 氢氧化钠等缚酸剂存在下，0°C 90°C反应制得化合物I。将反应制得各种中间体或所得产物溶于乙醚、DMF、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或 DMSO中的一种，滴加无机酸或有机酸的溶液，制成药学上可接受的盐。具体是将各种化合物溶于乙醚、DMF、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或DMSO中的一 种，于冰水浴下滴加盐酸乙醚溶液至pH = 2，制成盐酸盐；或将各种化合物溶于乙醚、DMF、 丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或DMSO中的一种，加入等摩尔牛磺酸，加热搅拌得其牛磺酸盐； 抑或将各种化合物溶于乙醚、DMF、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或DMSO中的一种，于冰水浴 下滴加浓硫酸溶液至PH = 3，制成硫酸盐，等等。此类化合物对于治疗人类恶性肿瘤是有效的。尽管本发明的化合物可以不经任何 配制直接给药，但所述的各种化合物优选以药物制剂的形式使用，给药途径可以是非肠道 途径(如静脉、肌肉给药)及口服给药。本发明化合物的药物组合物制备方法如下使用标准和常规的技术，使本发明化 合物与制剂学上可接受的固体或液体载体结合，以及使之任意地与制剂学上可接受的辅助 剂和赋形剂结合制备成微粒或微球。固体剂型包括片剂、分散颗粒、胶囊、缓释片、缓释微丸 等等。固体载体可以是至少一种物质，其可以充当稀释剂、香味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、崩解剂以及包裹剂。惰性固体载体包括磷酸镁、硬脂酸镁、滑粉糖、乳糖、果胶、丙 二醇、聚山梨酯80、糊精、淀粉、明胶、纤维素类物质例如甲基纤维素、微晶纤维素、低熔点石 蜡、聚乙二醇、甘露醇、可可脂等。液体剂型包括溶剂、悬浮液例如注射剂、粉剂等等。药物组合物以及单元剂型中含有的活性成份(本发明化合物)的量可以根据患 者的病情、医生诊断的情况特定地加以应用，所用的化合物的量或浓度在一个较宽的范围 内调节。通常，活性化合物的量范围为组合物的0.5% 90% (重量)，另一优选的范围为 0. 5% -70%。本发明的具有式I结构的化合物或其药学上可接受的盐，在体外、体内对肿瘤有 明显的抑制作用。体外的抗肿瘤作用(1)实验方法采用经典的细胞毒活性体外检测法MTT法，检测含哌嗪的噻吩并吡啶酮类衍生物 对体外培养的人肿瘤细胞的细胞增殖毒性。(2)实验材料实验样品含哌嗪的噻吩并吡啶酮类衍生物由发明人自制提供。实验时样品以 DMS0助溶，无血清DMEM培养基稀释到所需浓度，部分样品溶液呈悬浮状。主要试剂MTT，Amresco公司分装，批号04M0904 ；完全DMEM培养基，Gibco公司 产品，批号1290007 ；小牛血清，兰州民海生物，批号20060509 ；胰蛋白酶，Amresco公司分 装，批号016B0604 ；氟尿嘧啶注射液，0. 25g/10ml (支)，批号0512022，天津金耀氨基酸有 限公司。实验仪器超净工作台，苏州净化设备厂；C02培养箱，Thermo公司，型号HERA Celll50 ；倒置显微镜，Carl Zeiss公司，型号:Axiovert 200 ；酶联免疫检测仪，TECAN公 司，型号Sunrise ；离心机，Kerdro公司，型号Heraeus。细胞株肝癌SMMC-7721细胞、早幼粒细胞白血病HL-60细胞、结肠癌SW-480细 胞、口腔癌KB细胞，均购自中国科学院上海细胞研究所。(3)实验步骤细胞培养肿瘤细胞接种在含10%小牛血清，100IU/ml青霉素G钠盐及100ug/ml 硫酸链霉素的DMEM培养液中，置于37°C、100%相对湿度、含5% C02的培养箱中，传代3次 后备用。MTT法测定取对数生长期的细胞，经0. 25%胰蛋白酶消化后(悬浮细胞无须消 化)，悬浮于含10%小牛血清的DMEM培养液中，用玻璃滴管轻轻吹打成单细胞悬液，显微 镜下用血细胞记数板记数活细胞。96孔培养板每孔接种细胞悬液90 yl (细胞浓度调整为 6 10X104个/ml)，在37°C、100%相对湿度、含5% C02、95%空气的培养箱培养24h后， 每孔加 10 u 1 药液(终浓度设为40 u g/ml、20 u g/mlU0 u g/ml、5 ii g/ml 和 2. 5 y g/ml 五 个浓度)。另外，每个浓度设阴性对照(等浓度DMS0)及空白本底(不加细胞)，各组均设 6个复孔。再连续培养24h，然后每孔加入5mg/ml的MTT溶液10 u L，继续培养4h后，仔细 吸去上清液(悬浮细胞，需要先离心，再吸去上清)。每孔加入100 PL DMS0，置微量振荡器 震荡5min以使结晶完全溶解，酶标仪492nm单波长比色，测定0D值。以下述方法计算细胞 生长抑制率作为评价指标。
抑制率(％ ) = [ 1-(实验组0D均值-空白组0D均值)/ (对照组0D均值-空白 组0D均值)]X 100%。根据细胞生长抑制率，以直线回归方法计算IC5(I值。(4)实验结果见表1。表1.对体外培养的肿瘤细胞的IC5Q ( U g/ml)
组别 HL-60细胞
SW-480 细 胞
KB细胞
SMMC-7721 细 胞 (5)结论根据上述体外试验结果，我们可以看出具有通式(I)结构的化合物对上述4种人 类肿瘤细胞具有较强的抑制作用，尤其对结肠癌SW-480细胞的抑制作用较突出，1-3对4种 肿瘤细胞的抑制作用较突出。体内的抗肿瘤作用(1)实验材料样品1-3由发明人自制提供。细胞株肝癌H22细胞，购白中国科学院上海细胞研究所。阳性对照药环磷酰胺，批号07020121，江苏恒瑞医药股份有限公司。仪器PB303_N型千分之一电子天平，梅特勒-托利多公司生产。动物昆明种小鼠，SPF级，雌雄各半，体重18_22g，购于中国医学科学院放射医学 研究所，合格证号SCXK (津)2005-0001。(2)实验方法取腹腔接种瘤株9天，肿瘤生长良好，腹部膨隆明显的荷瘤小鼠，无菌操作下吸 取腹水，按1 3生理盐水稀释配成癌细胞混悬液，于所有实验小鼠右前肢腋部皮下接种 (0. 2ml/鼠)，所有操作在30min内完成。次日将接种瘤液小鼠按体重随机分组，即荷瘤对 照组，环磷酰胺组(25mg/kg)，1-3组(100mg/kg、50mg/kg)。各给药组均腹腔注射给药，每日一次，对照组给予同体积生理盐水。小鼠连续给药10天，末次给药24h后，脱颈椎处死， 剥离肿瘤，称取瘤重，计算各组小鼠瘤重平均值及抑制率。抑制率=[(对照组平均瘤重_实验组平均瘤重)/对照组平均瘤重]X 100 %(3)结果表2.对H22荷瘤小鼠瘤重及抑制率的影响(7 士 sd)
(4)结论从上述动物体内试验结果可以看出，1-3对Η22荷瘤小鼠的肿瘤生长具有一定的 抑制作用。其中100mg/kg剂量组腹腔注射给药时，肿瘤生长抑制率均强于阳性对照。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明做进一步地说明，实施例仅为解释性的，决不意味着它 以任何方式限制本发明的范围。所述的化合物经高效液相色谱(HPLC)，薄层色谱(TLC)进 行检测。随后可以采用诸如红外光谱(IR)，核磁共振谱(1H NMRj13C NMR)，质谱(MS)等更 进一步确证其结构。实施例1 中间体丄的制备 在装有搅拌、冷凝器、温度计的反应瓶中加入5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2 (4H)-酮15. 5g，用IOOmL 二氯甲烷将其溶解，搅拌下冷却至_30°C，加入碳酸钾41. 5g。 将氯乙酰氯11. 3g溶于50mL 二氯甲烷中，缓慢滴加入反应体系，滴加完毕，于-10°C下继续 反应1.5h (板层显示反应完全)。用3X 200mL水洗涤反应液，分取二氯甲烷层，用无水硫 酸钠充分干燥，过滤，减压蒸尽二氯甲烷，即得浅黄色油状产物20. 3g(HPLC 99.6% )。Rf =0.35 [单点，展开剂V (石油醚)V (乙酸乙酯)=ι ZLiHNMR(CDCI3JoomHz)S 2. 693 2. 699(m，2H)，2. 905 2. 911 (m，2H)，3. 798 3. 804(s，2H)，4. 258 4. 261 (s， 2H)，4. 365 4. 371 (m, 1H)，6. 245 (s, 1H)。
实施例2 中间体之的制备 在装有搅拌、冷凝器、温度计的反应瓶中加入5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2 (4H)-酮15. 5g，用100mL三氯甲烷将其溶解，搅拌下冷却至_20°C，加入三乙胺30. 6g。 将溴乙酰溴20. 2g溶于50mL三氯甲烷中，缓慢滴加入反应体系，滴加完毕，于-10°C下继 续反应2h (板层显示反应完全)。用3 XlOOmL水洗涤反应液，分取三氯甲烷层，用无水硫 酸钠充分干燥，过滤，减压蒸尽三氯甲烷，即得黄色油状产物22. 4g(HPLC 99.0% )。Rf = 0.32[单点，展开剂v(石油醚)v(乙酸乙酯)=1 2]。实施例3 中间体2的制备 在装有搅拌、冷凝器、温度计的反应瓶中加入5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2(4H)_酮15. 5g，用150mL甲苯将其溶解，搅拌下冷却至_25°C，加入氢氧化钾16. 8g。 将氯丙酰氯12. 7g溶于50mL甲苯中，缓慢滴加入反应体系，滴加完毕，于_5°C下继续反应 3h (板层显示反应完全)。用3 X 150mL水洗涤反应液，分取甲苯层，用无水硫酸钠充分干燥， 过滤，减压蒸尽甲苯，即得淡黄色油状产物20. 7g(HPLC 99. 4%)0 Rf = 0. 28[单点，展开 剂v(石油醚)v(乙酸乙酯)=1:2]。实施例4 中间体產的制备 在装有搅拌、冷凝器、温度计的反应瓶中加入5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2 (4H)-酮15. 5g，用lOOmL 二氯甲烷将其溶解，搅拌下冷却至_15°C，加入碳酸钠31. 8g。 将溴丙酰溴21. 6g溶于50mL 二氯甲烷中，缓慢滴加入反应体系，滴加完毕，于0°C下继续 反应2. 5h (板层显示反应完全)。用3X 150mL水洗涤反应液，分取二氯甲烷层，用无水硫 酸钠充分干燥，过滤，减压蒸尽二氯甲烷，即得黄色油状产物23. 5g(HPLC 98.9% )。Rf = 0.30[单点，展开剂v(石油醚)v(乙酸乙酯)=1 2]。实施例5 5-(2-(4-苯基哌嗪-1-基)乙酰基)-(5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2(4H)_酮(化合物1-1)
9
在装有搅拌、冷凝器、温度计的反应瓶中加入2. 3g中间体1，用IOmL二氯甲烷将其 溶解，搅拌下加入无水碳酸钾4. lg。将1.62g甲基哌嗪分批加入反应体系。加完，于35°C 下继续反应5h (板层显示反应完全)。用3X 15mL水洗涤反应液，分取二氯甲烷层，用无水 硫酸钠充分干燥，过滤，减压蒸尽二氯甲烷，即得浅黄色固体产物(HPLC:99.2%)。Rf = 0.53 [单点，展开剂ν (二氯甲烷)ν (甲醇)=1 1]。1H NMR(DMS0-d6，400MHz) δ 2. 285 2. 289 (m, 1H)，2. 291 2. 295 (m, 1H)，2. 864 2. 871 (m, 4H)，3. 421 3. 426 (m, 2H) ,3. 543 3. 545 (s，2H)，3. 646 3. 651 (m，4H)，4. 025 4. 028 (m，2H)，4. 386 4. 390 (m, 1H), 6. 247 (s, 1H), 6. 799 6. 802 (m，1H)，7. 658 7. 662 (m，2H)，7. 865 7. 869 (m, 2H)。MS, m/Z 357. 2 (M)。实施例6 5-(2-(4-对甲基苯基哌嗪-1-基)乙酰基)_ (5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c] 口比 啶-2(4H)_酮(化合物1-2) 参照实施例5的方法，用对甲苯基哌嗪代替苯基哌嗪，与中间体1反应，得白色固 体产物(昍^:99.1%)。1^ = 0.49[单点，展开剂7(二氯甲烷)ν(甲醇)=1 1]。实施例7 5-(2-(4_邻氟苯基哌嗪-1-基)乙酰基)-(5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2(4H)_酮(化合物1-3) 在装有搅拌、冷凝器、温度计的反应瓶中加入2. Sg中间体2，用15mL三氯甲烷将 其溶解，搅拌下加入三乙胺3. Og。将1.8g邻氟苯基哌嗪分批加入反应体系。加完，于回流 下继续反应4h (板层显示反应完全)。用3 X 15mL水洗涤反应液，分取三氯甲烷层，用无水 硫酸钠充分干燥，过滤，减压蒸尽三氯甲烷，即得浅黄色固体产物(HPLC:99.5%)。Rf = 0.43[单点，展开剂ν(二氯甲烷)ν(甲醇)=1 1]。实施例8 5-(2-(4-(2，3_ 二氯苯基)哌嗪基)乙酰基)_(5，6，7，7a_四氢噻吩并[3， 2-c]吡啶-2 (4H)-酮(化合物1-4) 参照实施例7的方法，用2，3- 二氯苯基哌嗪代替邻氟苯基哌嗪，与中间体2反应， 得白色固体产物(HPLC:99.7%)。Rf = 0.47[单点，展开剂v(二氯甲烷)v(甲醇)= 1:1]。实施例9 5-(2-(4-(3-三氟甲基苯基)哌嗪基)乙酰基)_ (5，6，7，7a_四氢噻吩并[3， 2-c]吡啶-2 (4H)-酮(化合物1-5) 参照实施例7的方法，用间-三氟甲基苯基哌嗪代替邻氟苯基哌嗪，与中间体2反 应，得淡黄色固体产物(HPLC:98. 1%)。Rf = 0.50[单点，展开剂v(二氯甲烷)v(甲 醇)=1 1]。实施例10 5-(3-(4-(2，3_ 二氯苯基)哌嗪基)丙酰基)_(5，6，7，7a_四氢噻吩并[3， 2-c]吡啶-2 (4H)-酮(化合物1-6) 在装有搅拌、冷凝器、温度计的反应瓶中加入2. 5g中间体3，用20mL甲苯将其溶 解，搅拌下加入氢氧化钠1.2g。将2. 3g2，3-二氯苯基哌嗪分批加入反应体系。加完，于 90°C下继续反应1. 5h (板层显示反应完全)。用3 X 15mL水洗涤反应液，分取甲苯层，用无水 硫酸钠充分干燥，过滤，减压蒸尽甲苯，即得白色固体产物(HPLC 98. 6% )。Rf = 0. 45[单 点，展开剂v(二氯甲烷)v(甲醇)=1:1]。力 NMR(DMS0-d6,400MHz) 8 :2. 246
2.250 (m, 1H) ,2. 254 2. 258 (m, 1H) ,2. 668 2. 671 (t，2H)，3. 356 3. 361 (m, 2H),
3.468 3. 470 (s, 2H)，3. 594 3. 598 (m, 4H)，3. 652 3. 655 (t, 2H)，4. 064 4. 069 (m, 4H)，4. 355 4. 358 (m, 1H) ,6. 261 (s, 1H)，6. 625 6. 627 (m, 1H)，7. 327 7. 331 (m, 2H)。 MS, m/Z 439. 1 (M)。实施例11 5-(3-(4-(2-氟苯基)哌嗪-1-基)丙酰基)_ (5，6，7，7a_四氢噻吩并[3, 2-c]吡 啶-2(4H)_酮(化合物1-7) 参照实施例10的方法，用2-氟苯基哌嗪代替2，3- 二氯苯基哌嗪，与中间体4反 应，得白色固体产物(HPLC:98. 8%)。Rf = 0.55 [单点，展开剂ν (二氯甲烷)ν (甲醇) =1 1]。实施例12 化合物1-2成盐酸盐取1-2固体产物2. Og,溶于IOmL无水乙醚。冰水浴冷却至 0°C，滴加25%盐酸乙醚溶液至PH为2，继续于冰水浴下搅拌约lh。过滤，得白色固体。实施例13 化合物1-4成牛磺酸盐取1-4固体产物2. 0g，溶于15mL无水乙醇。加热至回流 后加入等摩尔牛磺酸，继续于回流下搅拌反应约4h。反应完毕，于室温下静置24h。过滤， 得白色固体。实施例14 化合物1-6成硫酸盐取1-6固体产物2. 5g，溶于20mL无水甲醇。冰水浴冷却至 5°C，滴加浓硫酸溶液至pH为3，继续于冰水浴下搅拌约lh。过滤，得浅黄色固体。为了更充分地说明本发明的含哌嗪的噻吩并吡啶酮类衍生物的药物组合物，下面 提供下列制剂实施例，所述实施例仅用于说明，而不是用于限制本发明的范围。所述制剂可 以使用本发明化合物中的任何活性化合物及其盐，优选使用实施例5 14中所描述的化合 物。实施例15 用下述成分制备硬明胶胶囊用量/囊化合物1-375mg预胶化淀粉IOOmg泊洛沙姆4mg羧甲基淀粉钠IOmg硬脂酸镁20mg10%聚维酮乙醇溶液 适量制备工艺将原辅料预先干燥，过100目筛备用。按处方量将上述成分混勻，过60目筛三次，加适量10%聚维酮乙醇(95%)溶液制软材，过18目筛制粒，40°C干燥，过16目 筛整粒，填充入硬明胶胶囊中。实施例16 用下述成分制备片剂用量/片化合物1-4的牛磺酸盐75mg淀粉45mg微晶纤维素40mg羧甲基淀粉钠盐4.5mg硬脂酸镁Img滑石粉Img泊洛沙姆3mg
制备工艺将原辅料预先干燥，过100目筛备用。先将处方量的辅料充分混勻。将 原料药以递增稀释法加到辅料中，每次加时充分混勻2-3次，保证药与辅料充分混勻，过20 目筛，在55°C通风烘箱中干燥2h，干颗粒过16目筛整粒，测定中间体含量，混合均勻，在压 片机上压片。实施例17 注射液的制备化合物1-2的盐酸盐45mg丙二醇IOOmg
聚山梨酯80适量蒸馏水300mL制备方法取活性成分加入到已溶解山梨醇和丙二醇的注射用水中，加入药用碱 调节pH值至4 8使其溶解。加入活性炭，搅拌吸附30min，除炭、精滤、灌封、灭菌。实施例18 注射用冻干粉的制备化合物1-6的硫酸盐50mg药用碱0.1-7.0%甘露醇55-80%制备方法取活性成分加入注射用水，用药用碱调节pH值至4 8使其溶解。再 加入甘露醇，按注射剂的要求进行高压灭菌，加入活性炭，采用微孔滤膜过滤，滤液进行分 装，采用冷冻干燥法，制得疏松块状物，封口，即得。
权利要求
具有式I结构的化合物及其药学上可接受的盐其中n＝1，2；R1，R2为氢，C1-C3烷基，卤素，卤代甲基。FDA0000021743640000011.tif
2.如权利要求1中所述的通式I化合物，优选以下化合物 n = 1 ；R1，R2为氢，甲基，氟，氯，三氟甲基。
3.如权利要求2中所述的通式I化合物，代表以下化合物1-1 5-(2-(4-苯基哌嗪-1-基)乙酰基)-(5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2-c]吡 啶-2(4H)_ 酮；1-2 5-(2-(4-对甲基苯基哌嗪-1-基)乙酰基)_ (5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2(4H)_ 酮；1-3 5-(2-(4_邻氟苯基哌嗪-1-基)乙酰基)-(5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2(4H)_ 酮；1-4 5-(2-(4-(2，3-二氯苯基)哌嗪-1-基)乙酰基)_ (5，6，7，7a-四氢噻吩并[3， 2-c]吡啶 _2(4H)_ 酮；1-5 5-(2-(4-(3-三氟甲基苯基)哌嗪-1-基)乙酰基)_ (5，6，7，7a-四氢噻吩并[3， 2-c]吡啶 _2(4H)_ 酮；1-6 5-(3-(4-(2，3-二氯苯基)哌嗪-1-基)丙酰基)_ (5，6，7，7a-四氢噻吩并[3， 2-c]吡啶 _2(4H)_ 酮；1-7 5-(3-(4-(2-氟苯基)哌嗪-1-基)丙酰基)_ (5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2 (4H)-酮。
4.如权利要求1所述的化合物，其药学上可接受的盐指化合物与无机酸、有机酸成盐。
5.如权利要求4所述的通式I化合物药学上可接受的盐优选盐酸盐、氢溴酸盐、氢 碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸 盐、马来酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、牛磺酸盐。
6.权利要求1中式I化合物的制备方法，其特征在于5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2_c] 吡啶-2 (4H)_酮与卤代酰商，在二氯甲烷、三氯甲烷或甲苯中，在三乙胺、吡啶、碳酸钾、碳 酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钾、氢氧化钠缚酸剂存在下，-30°C 35°C反应制得关键 中间体。中间体再与哌嗪类化合物在二氯甲烷、三氯甲烷或甲苯中，在三乙胺、吡啶、碳酸 钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钾、氢氧化钠缚酸剂存在下，0°C 90°C反应制得化合物I。 其中X为卤素
7.—种抗恶性肿瘤的药物组合物，它包含治疗有效量的式I化合物或其盐及一种或多 种药用赋形剂。
8.权利要求1 5中式I化合物及其盐在用于制备抗恶性肿瘤药物方面的应用。
9.如权利要求8所述的应用，在用于制备治疗肝癌、白血病、结肠癌、口腔癌药物方面 的用途。
全文摘要
本发明属于抗恶性肿瘤药物技术领域，提供具有通式I结构的含哌嗪的噻吩并吡啶酮类衍生物及其药学上可接受的盐，其中n，R1，R2的定义同说明书中所述。本发明还涉及上述化合物的制备方法，并同时公开了以该化合物或其药学上可接受的盐作为活性有效成分的药物组合物，以及它们在作为抗恶性肿瘤药物方面的应用。
文档编号A61K31/496GK101863898SQ201010183160
公开日2010年10月20日 申请日期2010年5月26日 优先权日2010年5月26日
发明者刘冰妮, 刘登科, 刘颖, 刘默, 周云松, 王景阳, 白玫 申请人:天津药物研究院
技术领域：
本发明属于医药技术领域，更确切地说，是涉及一类具有抗恶性肿瘤作用的化合物及其制备方法。
背景技术：
肿瘤是威胁人类生命的常见疾病，据统计，每年全球肿瘤死亡总数达700万人，我 国每年死于肿瘤者100多万人，并逐渐增加，已成为城市人口的第一位死因。传统的化疗药 物临床上治疗效果明显，缺点在于特异性低，选择性差，导致明显的毒副作用，容易产生严 重的肿瘤多药耐药现象，限制了临床的应用，寻找安全和有效的抗肿瘤药物一直是医药界 的追求目标。
发明内容
本发明的一个目的在于，公开一类含哌嗪的噻吩并吡啶酮类衍生物及其药用盐。本发明的另一个目的在于，公开了以一类含哌嗪的噻吩并吡啶酮衍生物及其药用 盐为主要活性成分的药物组合物。本发明的再一个目的在于，公开了一类含哌嗪的噻吩并吡啶酮衍生物及其药用盐 的制备方法。本发明还有一个目的在于，公开了一类含哌嗪的噻吩并吡啶酮衍生物及其药用 盐，作为抗恶性肿瘤药物方面的应用，特别是在用于制备治疗肝癌、白血病、结肠癌、口腔癌 药物方面的用途。本发明具体涉及通式I结构的化合物及其药学上可接受的盐
(I )其中η = 1,2 ；RSR2为氢，C1-C3烷基，卤素，卤代甲基。本发明所述的C1-C3烷基及卤素、卤代甲基具体代表甲基，乙基，丙基，异丙基，氟，
氯，三氟甲基等。本发明涉及的具有式I结构的化合物，其中部分化合物为I-I 5-(2-(4-苯基哌嗪-1-基)乙酰基)_ (5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2(4H)_ 酮；1-2 5-(2-(4_对甲基苯基哌嗪-1-基)乙酰基)-(5，6，7，7a_四氢噻吩并[3， 2-c]吡啶-2(4H)_ 酮；
1-3 5-(2-(4-邻氟苯基哌嗪-1-基)乙酰基)_ (5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c] 吡啶-2 (4H)-酮；1-4 5-(2-(4-(2，3_ 二氯苯基)哌嗪-1-基)乙酰基)-(5，6，7，7a_四氢噻吩并 [3,2-c]吡啶-2(4H)_ 酮；1-5 5-(2-(4-(3-三氟甲基苯基)哌嗪-1-基)乙酰基)_ (5，6，7，7a_四氢噻吩 并[3，2-c]吡啶-2(4H)_ 酮；1-6 5-(3-(4-(2，3_ 二氯苯基)哌嗪-1-基)丙酰基)-(5，6，7，7a_四氢噻吩并 [3,2-c]吡啶-2(4H)_ 酮；1-7 5-(3-(4-(2-氟苯基)哌嗪基)丙酰基)_ (5，6，7，7a_四氢噻吩并[3， 2-c]吡啶-2(4H)_ 酮。本发明中的具有式I结构的化合物或其药学上可接受的盐系指本发明化合物与 无机酸、有机酸所成的盐。其中特别优选的盐是盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硫酸盐、硫酸 氢盐、磷酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、马来酸盐、苯甲酸 盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、牛磺酸盐等等。式I化合物的制备路线 其中X为卤素。5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c]吡啶_2 (4H)-酮与卤代酰卤，在二氯甲烷、三氯甲 烷或甲苯等溶剂中，在三乙胺、吡啶、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钾、氢氧 化钠等缚酸剂存在下，_30°C 35°C反应制得关键中间体。中间体再与哌嗪类化合物在二氯 甲烷、三氯甲烷或甲苯中，在三乙胺、吡啶、碳酸钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钾、 氢氧化钠等缚酸剂存在下，0°C 90°C反应制得化合物I。将反应制得各种中间体或所得产物溶于乙醚、DMF、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或 DMSO中的一种，滴加无机酸或有机酸的溶液，制成药学上可接受的盐。具体是将各种化合物溶于乙醚、DMF、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或DMSO中的一 种，于冰水浴下滴加盐酸乙醚溶液至pH = 2，制成盐酸盐；或将各种化合物溶于乙醚、DMF、 丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或DMSO中的一种，加入等摩尔牛磺酸，加热搅拌得其牛磺酸盐； 抑或将各种化合物溶于乙醚、DMF、丙酮、甲醇、乙醇、乙酸乙酯或DMSO中的一种，于冰水浴 下滴加浓硫酸溶液至PH = 3，制成硫酸盐，等等。此类化合物对于治疗人类恶性肿瘤是有效的。尽管本发明的化合物可以不经任何 配制直接给药，但所述的各种化合物优选以药物制剂的形式使用，给药途径可以是非肠道 途径(如静脉、肌肉给药)及口服给药。本发明化合物的药物组合物制备方法如下使用标准和常规的技术，使本发明化 合物与制剂学上可接受的固体或液体载体结合，以及使之任意地与制剂学上可接受的辅助 剂和赋形剂结合制备成微粒或微球。固体剂型包括片剂、分散颗粒、胶囊、缓释片、缓释微丸 等等。固体载体可以是至少一种物质，其可以充当稀释剂、香味剂、增溶剂、润滑剂、悬浮剂、粘合剂、崩解剂以及包裹剂。惰性固体载体包括磷酸镁、硬脂酸镁、滑粉糖、乳糖、果胶、丙 二醇、聚山梨酯80、糊精、淀粉、明胶、纤维素类物质例如甲基纤维素、微晶纤维素、低熔点石 蜡、聚乙二醇、甘露醇、可可脂等。液体剂型包括溶剂、悬浮液例如注射剂、粉剂等等。药物组合物以及单元剂型中含有的活性成份(本发明化合物)的量可以根据患 者的病情、医生诊断的情况特定地加以应用，所用的化合物的量或浓度在一个较宽的范围 内调节。通常，活性化合物的量范围为组合物的0.5% 90% (重量)，另一优选的范围为 0. 5% -70%。本发明的具有式I结构的化合物或其药学上可接受的盐，在体外、体内对肿瘤有 明显的抑制作用。体外的抗肿瘤作用(1)实验方法采用经典的细胞毒活性体外检测法MTT法，检测含哌嗪的噻吩并吡啶酮类衍生物 对体外培养的人肿瘤细胞的细胞增殖毒性。(2)实验材料实验样品含哌嗪的噻吩并吡啶酮类衍生物由发明人自制提供。实验时样品以 DMS0助溶，无血清DMEM培养基稀释到所需浓度，部分样品溶液呈悬浮状。主要试剂MTT，Amresco公司分装，批号04M0904 ；完全DMEM培养基，Gibco公司 产品，批号1290007 ；小牛血清，兰州民海生物，批号20060509 ；胰蛋白酶，Amresco公司分 装，批号016B0604 ；氟尿嘧啶注射液，0. 25g/10ml (支)，批号0512022，天津金耀氨基酸有 限公司。实验仪器超净工作台，苏州净化设备厂；C02培养箱，Thermo公司，型号HERA Celll50 ；倒置显微镜，Carl Zeiss公司，型号:Axiovert 200 ；酶联免疫检测仪，TECAN公 司，型号Sunrise ；离心机，Kerdro公司，型号Heraeus。细胞株肝癌SMMC-7721细胞、早幼粒细胞白血病HL-60细胞、结肠癌SW-480细 胞、口腔癌KB细胞，均购自中国科学院上海细胞研究所。(3)实验步骤细胞培养肿瘤细胞接种在含10%小牛血清，100IU/ml青霉素G钠盐及100ug/ml 硫酸链霉素的DMEM培养液中，置于37°C、100%相对湿度、含5% C02的培养箱中，传代3次 后备用。MTT法测定取对数生长期的细胞，经0. 25%胰蛋白酶消化后(悬浮细胞无须消 化)，悬浮于含10%小牛血清的DMEM培养液中，用玻璃滴管轻轻吹打成单细胞悬液，显微 镜下用血细胞记数板记数活细胞。96孔培养板每孔接种细胞悬液90 yl (细胞浓度调整为 6 10X104个/ml)，在37°C、100%相对湿度、含5% C02、95%空气的培养箱培养24h后， 每孔加 10 u 1 药液(终浓度设为40 u g/ml、20 u g/mlU0 u g/ml、5 ii g/ml 和 2. 5 y g/ml 五 个浓度)。另外，每个浓度设阴性对照(等浓度DMS0)及空白本底(不加细胞)，各组均设 6个复孔。再连续培养24h，然后每孔加入5mg/ml的MTT溶液10 u L，继续培养4h后，仔细 吸去上清液(悬浮细胞，需要先离心，再吸去上清)。每孔加入100 PL DMS0，置微量振荡器 震荡5min以使结晶完全溶解，酶标仪492nm单波长比色，测定0D值。以下述方法计算细胞 生长抑制率作为评价指标。
抑制率(％ ) = [ 1-(实验组0D均值-空白组0D均值)/ (对照组0D均值-空白 组0D均值)]X 100%。根据细胞生长抑制率，以直线回归方法计算IC5(I值。(4)实验结果见表1。表1.对体外培养的肿瘤细胞的IC5Q ( U g/ml)
组别 HL-60细胞
SW-480 细 胞
KB细胞
SMMC-7721 细 胞 (5)结论根据上述体外试验结果，我们可以看出具有通式(I)结构的化合物对上述4种人 类肿瘤细胞具有较强的抑制作用，尤其对结肠癌SW-480细胞的抑制作用较突出，1-3对4种 肿瘤细胞的抑制作用较突出。体内的抗肿瘤作用(1)实验材料样品1-3由发明人自制提供。细胞株肝癌H22细胞，购白中国科学院上海细胞研究所。阳性对照药环磷酰胺，批号07020121，江苏恒瑞医药股份有限公司。仪器PB303_N型千分之一电子天平，梅特勒-托利多公司生产。动物昆明种小鼠，SPF级，雌雄各半，体重18_22g，购于中国医学科学院放射医学 研究所，合格证号SCXK (津)2005-0001。(2)实验方法取腹腔接种瘤株9天，肿瘤生长良好，腹部膨隆明显的荷瘤小鼠，无菌操作下吸 取腹水，按1 3生理盐水稀释配成癌细胞混悬液，于所有实验小鼠右前肢腋部皮下接种 (0. 2ml/鼠)，所有操作在30min内完成。次日将接种瘤液小鼠按体重随机分组，即荷瘤对 照组，环磷酰胺组(25mg/kg)，1-3组(100mg/kg、50mg/kg)。各给药组均腹腔注射给药，每日一次，对照组给予同体积生理盐水。小鼠连续给药10天，末次给药24h后，脱颈椎处死， 剥离肿瘤，称取瘤重，计算各组小鼠瘤重平均值及抑制率。抑制率=[(对照组平均瘤重_实验组平均瘤重)/对照组平均瘤重]X 100 %(3)结果表2.对H22荷瘤小鼠瘤重及抑制率的影响(7 士 sd)
(4)结论从上述动物体内试验结果可以看出，1-3对Η22荷瘤小鼠的肿瘤生长具有一定的 抑制作用。其中100mg/kg剂量组腹腔注射给药时，肿瘤生长抑制率均强于阳性对照。
具体实施例方式下面结合实施例对本发明做进一步地说明，实施例仅为解释性的，决不意味着它 以任何方式限制本发明的范围。所述的化合物经高效液相色谱(HPLC)，薄层色谱(TLC)进 行检测。随后可以采用诸如红外光谱(IR)，核磁共振谱(1H NMRj13C NMR)，质谱(MS)等更 进一步确证其结构。实施例1 中间体丄的制备 在装有搅拌、冷凝器、温度计的反应瓶中加入5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2 (4H)-酮15. 5g，用IOOmL 二氯甲烷将其溶解，搅拌下冷却至_30°C，加入碳酸钾41. 5g。 将氯乙酰氯11. 3g溶于50mL 二氯甲烷中，缓慢滴加入反应体系，滴加完毕，于-10°C下继续 反应1.5h (板层显示反应完全)。用3X 200mL水洗涤反应液，分取二氯甲烷层，用无水硫 酸钠充分干燥，过滤，减压蒸尽二氯甲烷，即得浅黄色油状产物20. 3g(HPLC 99.6% )。Rf =0.35 [单点，展开剂V (石油醚)V (乙酸乙酯)=ι ZLiHNMR(CDCI3JoomHz)S 2. 693 2. 699(m，2H)，2. 905 2. 911 (m，2H)，3. 798 3. 804(s，2H)，4. 258 4. 261 (s， 2H)，4. 365 4. 371 (m, 1H)，6. 245 (s, 1H)。
实施例2 中间体之的制备 在装有搅拌、冷凝器、温度计的反应瓶中加入5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2 (4H)-酮15. 5g，用100mL三氯甲烷将其溶解，搅拌下冷却至_20°C，加入三乙胺30. 6g。 将溴乙酰溴20. 2g溶于50mL三氯甲烷中，缓慢滴加入反应体系，滴加完毕，于-10°C下继 续反应2h (板层显示反应完全)。用3 XlOOmL水洗涤反应液，分取三氯甲烷层，用无水硫 酸钠充分干燥，过滤，减压蒸尽三氯甲烷，即得黄色油状产物22. 4g(HPLC 99.0% )。Rf = 0.32[单点，展开剂v(石油醚)v(乙酸乙酯)=1 2]。实施例3 中间体2的制备 在装有搅拌、冷凝器、温度计的反应瓶中加入5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2(4H)_酮15. 5g，用150mL甲苯将其溶解，搅拌下冷却至_25°C，加入氢氧化钾16. 8g。 将氯丙酰氯12. 7g溶于50mL甲苯中，缓慢滴加入反应体系，滴加完毕，于_5°C下继续反应 3h (板层显示反应完全)。用3 X 150mL水洗涤反应液，分取甲苯层，用无水硫酸钠充分干燥， 过滤，减压蒸尽甲苯，即得淡黄色油状产物20. 7g(HPLC 99. 4%)0 Rf = 0. 28[单点，展开 剂v(石油醚)v(乙酸乙酯)=1:2]。实施例4 中间体產的制备 在装有搅拌、冷凝器、温度计的反应瓶中加入5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2 (4H)-酮15. 5g，用lOOmL 二氯甲烷将其溶解，搅拌下冷却至_15°C，加入碳酸钠31. 8g。 将溴丙酰溴21. 6g溶于50mL 二氯甲烷中，缓慢滴加入反应体系，滴加完毕，于0°C下继续 反应2. 5h (板层显示反应完全)。用3X 150mL水洗涤反应液，分取二氯甲烷层，用无水硫 酸钠充分干燥，过滤，减压蒸尽二氯甲烷，即得黄色油状产物23. 5g(HPLC 98.9% )。Rf = 0.30[单点，展开剂v(石油醚)v(乙酸乙酯)=1 2]。实施例5 5-(2-(4-苯基哌嗪-1-基)乙酰基)-(5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2(4H)_酮(化合物1-1)
9
在装有搅拌、冷凝器、温度计的反应瓶中加入2. 3g中间体1，用IOmL二氯甲烷将其 溶解，搅拌下加入无水碳酸钾4. lg。将1.62g甲基哌嗪分批加入反应体系。加完，于35°C 下继续反应5h (板层显示反应完全)。用3X 15mL水洗涤反应液，分取二氯甲烷层，用无水 硫酸钠充分干燥，过滤，减压蒸尽二氯甲烷，即得浅黄色固体产物(HPLC:99.2%)。Rf = 0.53 [单点，展开剂ν (二氯甲烷)ν (甲醇)=1 1]。1H NMR(DMS0-d6，400MHz) δ 2. 285 2. 289 (m, 1H)，2. 291 2. 295 (m, 1H)，2. 864 2. 871 (m, 4H)，3. 421 3. 426 (m, 2H) ,3. 543 3. 545 (s，2H)，3. 646 3. 651 (m，4H)，4. 025 4. 028 (m，2H)，4. 386 4. 390 (m, 1H), 6. 247 (s, 1H), 6. 799 6. 802 (m，1H)，7. 658 7. 662 (m，2H)，7. 865 7. 869 (m, 2H)。MS, m/Z 357. 2 (M)。实施例6 5-(2-(4-对甲基苯基哌嗪-1-基)乙酰基)_ (5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c] 口比 啶-2(4H)_酮(化合物1-2) 参照实施例5的方法，用对甲苯基哌嗪代替苯基哌嗪，与中间体1反应，得白色固 体产物(昍^:99.1%)。1^ = 0.49[单点，展开剂7(二氯甲烷)ν(甲醇)=1 1]。实施例7 5-(2-(4_邻氟苯基哌嗪-1-基)乙酰基)-(5，6，7，7a_四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2(4H)_酮(化合物1-3) 在装有搅拌、冷凝器、温度计的反应瓶中加入2. Sg中间体2，用15mL三氯甲烷将 其溶解，搅拌下加入三乙胺3. Og。将1.8g邻氟苯基哌嗪分批加入反应体系。加完，于回流 下继续反应4h (板层显示反应完全)。用3 X 15mL水洗涤反应液，分取三氯甲烷层，用无水 硫酸钠充分干燥，过滤，减压蒸尽三氯甲烷，即得浅黄色固体产物(HPLC:99.5%)。Rf = 0.43[单点，展开剂ν(二氯甲烷)ν(甲醇)=1 1]。实施例8 5-(2-(4-(2，3_ 二氯苯基)哌嗪基)乙酰基)_(5，6，7，7a_四氢噻吩并[3， 2-c]吡啶-2 (4H)-酮(化合物1-4) 参照实施例7的方法，用2，3- 二氯苯基哌嗪代替邻氟苯基哌嗪，与中间体2反应， 得白色固体产物(HPLC:99.7%)。Rf = 0.47[单点，展开剂v(二氯甲烷)v(甲醇)= 1:1]。实施例9 5-(2-(4-(3-三氟甲基苯基)哌嗪基)乙酰基)_ (5，6，7，7a_四氢噻吩并[3， 2-c]吡啶-2 (4H)-酮(化合物1-5) 参照实施例7的方法，用间-三氟甲基苯基哌嗪代替邻氟苯基哌嗪，与中间体2反 应，得淡黄色固体产物(HPLC:98. 1%)。Rf = 0.50[单点，展开剂v(二氯甲烷)v(甲 醇)=1 1]。实施例10 5-(3-(4-(2，3_ 二氯苯基)哌嗪基)丙酰基)_(5，6，7，7a_四氢噻吩并[3， 2-c]吡啶-2 (4H)-酮(化合物1-6) 在装有搅拌、冷凝器、温度计的反应瓶中加入2. 5g中间体3，用20mL甲苯将其溶 解，搅拌下加入氢氧化钠1.2g。将2. 3g2，3-二氯苯基哌嗪分批加入反应体系。加完，于 90°C下继续反应1. 5h (板层显示反应完全)。用3 X 15mL水洗涤反应液，分取甲苯层，用无水 硫酸钠充分干燥，过滤，减压蒸尽甲苯，即得白色固体产物(HPLC 98. 6% )。Rf = 0. 45[单 点，展开剂v(二氯甲烷)v(甲醇)=1:1]。力 NMR(DMS0-d6,400MHz) 8 :2. 246
2.250 (m, 1H) ,2. 254 2. 258 (m, 1H) ,2. 668 2. 671 (t，2H)，3. 356 3. 361 (m, 2H),
3.468 3. 470 (s, 2H)，3. 594 3. 598 (m, 4H)，3. 652 3. 655 (t, 2H)，4. 064 4. 069 (m, 4H)，4. 355 4. 358 (m, 1H) ,6. 261 (s, 1H)，6. 625 6. 627 (m, 1H)，7. 327 7. 331 (m, 2H)。 MS, m/Z 439. 1 (M)。实施例11 5-(3-(4-(2-氟苯基)哌嗪-1-基)丙酰基)_ (5，6，7，7a_四氢噻吩并[3, 2-c]吡 啶-2(4H)_酮(化合物1-7) 参照实施例10的方法，用2-氟苯基哌嗪代替2，3- 二氯苯基哌嗪，与中间体4反 应，得白色固体产物(HPLC:98. 8%)。Rf = 0.55 [单点，展开剂ν (二氯甲烷)ν (甲醇) =1 1]。实施例12 化合物1-2成盐酸盐取1-2固体产物2. Og,溶于IOmL无水乙醚。冰水浴冷却至 0°C，滴加25%盐酸乙醚溶液至PH为2，继续于冰水浴下搅拌约lh。过滤，得白色固体。实施例13 化合物1-4成牛磺酸盐取1-4固体产物2. 0g，溶于15mL无水乙醇。加热至回流 后加入等摩尔牛磺酸，继续于回流下搅拌反应约4h。反应完毕，于室温下静置24h。过滤， 得白色固体。实施例14 化合物1-6成硫酸盐取1-6固体产物2. 5g，溶于20mL无水甲醇。冰水浴冷却至 5°C，滴加浓硫酸溶液至pH为3，继续于冰水浴下搅拌约lh。过滤，得浅黄色固体。为了更充分地说明本发明的含哌嗪的噻吩并吡啶酮类衍生物的药物组合物，下面 提供下列制剂实施例，所述实施例仅用于说明，而不是用于限制本发明的范围。所述制剂可 以使用本发明化合物中的任何活性化合物及其盐，优选使用实施例5 14中所描述的化合 物。实施例15 用下述成分制备硬明胶胶囊用量/囊化合物1-375mg预胶化淀粉IOOmg泊洛沙姆4mg羧甲基淀粉钠IOmg硬脂酸镁20mg10%聚维酮乙醇溶液 适量制备工艺将原辅料预先干燥，过100目筛备用。按处方量将上述成分混勻，过60目筛三次，加适量10%聚维酮乙醇(95%)溶液制软材，过18目筛制粒，40°C干燥，过16目 筛整粒，填充入硬明胶胶囊中。实施例16 用下述成分制备片剂用量/片化合物1-4的牛磺酸盐75mg淀粉45mg微晶纤维素40mg羧甲基淀粉钠盐4.5mg硬脂酸镁Img滑石粉Img泊洛沙姆3mg
制备工艺将原辅料预先干燥，过100目筛备用。先将处方量的辅料充分混勻。将 原料药以递增稀释法加到辅料中，每次加时充分混勻2-3次，保证药与辅料充分混勻，过20 目筛，在55°C通风烘箱中干燥2h，干颗粒过16目筛整粒，测定中间体含量，混合均勻，在压 片机上压片。实施例17 注射液的制备化合物1-2的盐酸盐45mg丙二醇IOOmg
聚山梨酯80适量蒸馏水300mL制备方法取活性成分加入到已溶解山梨醇和丙二醇的注射用水中，加入药用碱 调节pH值至4 8使其溶解。加入活性炭，搅拌吸附30min，除炭、精滤、灌封、灭菌。实施例18 注射用冻干粉的制备化合物1-6的硫酸盐50mg药用碱0.1-7.0%甘露醇55-80%制备方法取活性成分加入注射用水，用药用碱调节pH值至4 8使其溶解。再 加入甘露醇，按注射剂的要求进行高压灭菌，加入活性炭，采用微孔滤膜过滤，滤液进行分 装，采用冷冻干燥法，制得疏松块状物，封口，即得。
权利要求
具有式I结构的化合物及其药学上可接受的盐其中n＝1，2；R1，R2为氢，C1-C3烷基，卤素，卤代甲基。FDA0000021743640000011.tif
2.如权利要求1中所述的通式I化合物，优选以下化合物 n = 1 ；R1，R2为氢，甲基，氟，氯，三氟甲基。
3.如权利要求2中所述的通式I化合物，代表以下化合物1-1 5-(2-(4-苯基哌嗪-1-基)乙酰基)-(5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2-c]吡 啶-2(4H)_ 酮；1-2 5-(2-(4-对甲基苯基哌嗪-1-基)乙酰基)_ (5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2(4H)_ 酮；1-3 5-(2-(4_邻氟苯基哌嗪-1-基)乙酰基)-(5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2(4H)_ 酮；1-4 5-(2-(4-(2，3-二氯苯基)哌嗪-1-基)乙酰基)_ (5，6，7，7a-四氢噻吩并[3， 2-c]吡啶 _2(4H)_ 酮；1-5 5-(2-(4-(3-三氟甲基苯基)哌嗪-1-基)乙酰基)_ (5，6，7，7a-四氢噻吩并[3， 2-c]吡啶 _2(4H)_ 酮；1-6 5-(3-(4-(2，3-二氯苯基)哌嗪-1-基)丙酰基)_ (5，6，7，7a-四氢噻吩并[3， 2-c]吡啶 _2(4H)_ 酮；1-7 5-(3-(4-(2-氟苯基)哌嗪-1-基)丙酰基)_ (5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2_c]吡 啶-2 (4H)-酮。
4.如权利要求1所述的化合物，其药学上可接受的盐指化合物与无机酸、有机酸成盐。
5.如权利要求4所述的通式I化合物药学上可接受的盐优选盐酸盐、氢溴酸盐、氢 碘酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、乙酸盐、丙酸盐、丁酸盐、乳酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸 盐、马来酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、牛磺酸盐。
6.权利要求1中式I化合物的制备方法，其特征在于5，6，7，7a-四氢噻吩并[3，2_c] 吡啶-2 (4H)_酮与卤代酰商，在二氯甲烷、三氯甲烷或甲苯中，在三乙胺、吡啶、碳酸钾、碳 酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钾、氢氧化钠缚酸剂存在下，-30°C 35°C反应制得关键 中间体。中间体再与哌嗪类化合物在二氯甲烷、三氯甲烷或甲苯中，在三乙胺、吡啶、碳酸 钾、碳酸钠、碳酸氢钠、碳酸氢钾、氢氧化钾、氢氧化钠缚酸剂存在下，0°C 90°C反应制得化合物I。 其中X为卤素
7.—种抗恶性肿瘤的药物组合物，它包含治疗有效量的式I化合物或其盐及一种或多 种药用赋形剂。
8.权利要求1 5中式I化合物及其盐在用于制备抗恶性肿瘤药物方面的应用。
9.如权利要求8所述的应用，在用于制备治疗肝癌、白血病、结肠癌、口腔癌药物方面 的用途。
全文摘要
本发明属于抗恶性肿瘤药物技术领域，提供具有通式I结构的含哌嗪的噻吩并吡啶酮类衍生物及其药学上可接受的盐，其中n，R1，R2的定义同说明书中所述。本发明还涉及上述化合物的制备方法，并同时公开了以该化合物或其药学上可接受的盐作为活性有效成分的药物组合物，以及它们在作为抗恶性肿瘤药物方面的应用。
文档编号A61K31/496GK101863898SQ201010183160
公开日2010年10月20日 申请日期2010年5月26日 优先权日2010年5月26日
发明者刘冰妮, 刘登科, 刘颖, 刘默, 周云松, 王景阳, 白玫 申请人:天津药物研究院
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