刺激毛发生长的方法
专利名称：刺激毛发生长的方法
技术领域：
本发明涉及一种化合物用于促进毛发生长、缓解脱发的用途，以及含有该化合物的药物制剂。
背景技术：
脱发(alopecia)、或者秃头(balding)是目前医学界尚未治愈的常见问题。尽管雄激素与秃头有关，但是引起毛发脱落的生理机制目前尚不清楚。然而已知在罹患脱发的个体中毛发生长的情况是各不相同的。
毛发并不是持续生长的，而是大致经历包括生长期、静止期、和脱落期在内的多个活动周期。人的头皮通常含有100,000-350,000根毛纤维或毛干(shaft)，其在三个不同时间段历经变态(a)在生长期(毛发生长初期)，毛囊(即毛根)深度渗入真皮中，同时在合成毛发主要组分一角蛋白的过程中，毛囊细胞快速分解和分化。在非秃头人群中，上述生长期持续1-5年；(b)过渡期(毛发生长中期)，其标志为有丝分裂停止，持续2-3周；以及(c)静止期(毛发生长终期)，在该期间毛发保留在头皮中长达12周，直到其被由头皮下方生长出来的新毛囊所替代。
在人类中，上述生长周期不是同步的。在这三个时间段的每一段中，每个个体可能具有上千个毛囊。然而，大多数毛囊出现在毛发生长初期。在健康的青年成人中，毛发生长初期与毛发生长终期的比例可以高达9∶1。在患有脱发的个体中，上述比例降至2∶1。
雄激素性脱发是由于对循环雄激素的遗传敏感性被激活而引起的。它是最常见类型的脱发。其对男性(50％)和女性(30％)、又主要是高加索起源人群均具有影响。随着时间的流逝和年龄的增长，在某种程度上过早地，毛干的宽度和长度逐渐发生变化。终毛逐渐变成又短又稀的无色毫毛。因此，男性在二十来岁、女性在三十至四十岁间开始注意到他们的毛发变得越来越短。在男性人群中，大部分毛发脱落出现在头顶。女性是整个头皮开始逐渐变得稀疏。如上所述，毛发生长初期与毛发生长终期的比例明显降低，导致毛发生长减少。
米诺地尔是一种促进毛发生长的钾通道开放剂。米诺地尔在美国可以商标Regaine商购得到。尽管米诺地尔准确的作用机理尚不清楚，但是很多文献都记载了其对毛发生长周期的影响。米诺地尔促进了毛囊的生长，延长了毛囊处于毛发生长初期的时间(也就是提高了毛发生长初期与毛发生长终期的比例)。
尽管米诺地尔促进了毛发生长，但是这种生长的美容效果差异很大。例如，Roenigk报道了83名男性局部施用3％的米诺地尔溶液剂持续19个月进行临床试验的结果。结果发现55％的受试者出现毛发生长。然而，只有20％的受试者认为上述生长与美容相关(Clin.Res.，33，No.4，914A，1985)。Tosti报道指出，在他的受试者中有18.1％有在美容上可以接受的再生作用(Dermatologica，173，No.3，136-138，1986)。因此，本领域仍然需要这样的化合物，其在脱发患者中能够以更高的比例诱导美容上可接受的毛发生长。
发明内容
本发明发现了一种促进毛发生长的新方法。所述方法包括向患有脱发的哺乳动物施用下式的化合物 其盐、溶剂化物、或者它们的混合物。通常，所述哺乳动物应当是罹患脱发、特别是雄激素性脱发的人。然而，本发明化合物也可以向通过刺激其毛发生长而受益的任何哺乳动物给药。
本发明另一实施方案涉及一种局部制剂，其中含有有效量的、与皮肤病学上可接受的载体相混合的上述化合物。这种制剂可以施用至人头皮持续足以促进毛发生长的时间。
本发明再一实施方案涉及一种被包装用于零售的含有上述化合物的药物制剂，其同时含有建议消费者如何使用该产品刺激毛发生长的说明。
发明详述A)定义除非另有说明，本申请(包括权利要求书)中通篇使用的下述术语具有下面的含义。除了用数字表示之外，复数和单数应当可以替换对待。
a.“哺乳动物”包括人，灵长类例如短尾猴(stump-tailedmacaques)，伴侣动物例如狗、猫、沙鼠等，以及家畜类例如牛、猪、马、骆马、和羊。
b.“促进毛发生长”包括刺激总的毛发质量和/或长度提高。这种提高包括毛干(即毛囊)的长度和/或生长比例提高、毛发数目增多、和/或毛发密度提高。通过延长或激活毛发生长初期、毛发周期的生长期、或者通过缩短或延迟毛发生长中期和毛发生长终期可以实现部分或全部上述最终结果。“促进毛发生长”还应该考虑到包括预防、停止、减少、延迟和/或逆转毛发脱落。
c.本文所使用的“脱发”是指部分或完全秃顶、毛发脱落、和/或毛发变疏。
d.“治疗或缓解脱发”是指促进已经经历过脱发或者可能将有脱发危险的哺乳动物的毛发生长。
e.“可药用的”是指适合用于哺乳动物。
f.除非另有描述，凡是涉及式I化合物都应该被理解为包括该化合物的所有活性形式，包括例如其游离形式，如游离酸或碱形式，还包括全部前药、多晶型物、水合物、溶剂化物、互变异构体、立体异构体，例如非对映异构体和对映异构体等、以及所有可药用盐、和上述物理形式的混合物。上述所有形式描述在美国专利号5,912,244中，在此将其内容引入作为参考。还应该理解的是，任何适宜形式的这类化合物的适宜活性代谢物也被包括在本发明中。
g.“溶剂化物”是指含有一个或多个结晶溶剂分子的化合物或其盐的结晶形式，也就是含有以分子形式合并的溶剂的式I化合物或其盐。“水合物”是指其中所述溶剂是水的溶剂化物。
h.“多晶型物”是指以至少一种结晶形式出现的化合物或其盐，例如式I化合物或其盐。
i.“可药用盐”是指“可药用酸加成盐”或“可药用碱加成盐”。“盐”是指“可药用盐”或者适合用于工业方法但不一定在药学上可接受的盐。
j.“可药用酸加成盐”是指式I所述碱性化合物或其任意中间体的任何无毒性有机或无机酸加成盐。形成适宜盐的示例性无机酸包括盐酸、氢溴酸、硫酸、和磷酸以及酸式金属盐例如正磷酸一氢钠和硫酸氢钾。形成适宜盐的示例性有机酸包括单-、二-、和三元羧酸。这类酸的示例是例如乙酸、乙醇酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、马来酸、羟基马来酸、苯甲酸、羟基苯甲酸、苯乙酸、肉桂酸、水杨酸、2-苯氧基苯甲酸、对甲苯磺酸、以及磺酸如甲磺酸和2-羟基乙磺酸。这类盐可以以水合或基本上无水的形式存在。通常，这些化合物的酸加成盐可溶于水和各种亲水性有机溶剂中。
k.“可药用碱加成盐”是指式I所示化合物或其任意中间体的无毒性有机或无机碱加成盐。形成适宜盐的示例性碱包括碱金属或碱土金属氢氧化物，例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化镁、或氢氧化钡；氨水、以及脂肪族、脂环族、或芳族有机胺例如甲胺、二甲胺、三甲胺、和甲基吡啶。
I.“前药”是指可迅速体内转化(例如通过血液水解)得到上式母体化合物的化合物。详细的讨论参见T.Higuchi和V.Stella，″Pro-drugs as Novel Delivery Systems，″Vol.14，A.C.S.Symposium Series，以及Bioreversible Carriers in Drug Design，Edward B.Roche著，American Pharmaceutical Association andPergamon Press，1987，在此将这两篇文献均引入作为参考。
m.“式I化合物”、“本发明化合物”、和“化合物”在本申请中可通篇替代使用，因而可当作同义词对待。
B)化合物可用于本发明中的化合物是(3S，4R)-3，4-二氢-4-(2，3-二氢-2-甲基-3-氧代哒嗪-6-基)氧基-3-羟基-6-(3-羟苯基)磺酰基-2，2，3-三甲基-2H-苯并[b]吡喃(在下文中称作“化合物”)。其如下式所示 该化合物及其制备方法描述在美国专利号5,912,244中，在此将其内容引入作为参考。‘244专利的实施例7举例说明了制备该化合物的一种方法。
除了上述式I化合物之外，‘244专利还公开了一类苯并吡喃衍生物。‘244专利指出这些化合物是具有平滑肌松弛活性的钾通道开放剂。该‘244专利还指出这些化合物可用于治疗与平滑肌紧张性或运动性改变相关的疾病。这类症状的实例包括慢性阻塞性气道疾病、哮喘、尿失禁、高血压、心肌缺血、脑缺血、青光眼、和男性秃发。
用于评价上述化合物作为钾通道开放剂的效能的测试描述在该‘244申请的第9栏笫3-41行。所选化合物的相关数据描述在表格第30-31栏。实施例7也就是式I化合物的结果中没有列出相关数据。
C)药理学和医学用途如上所述，式I化合物是一种钾通道开放剂。业已发现，在与其它钾通道开放剂相比较时，该化合物在促进毛发生长方面具有出人意料的活性。该化合物可以刺激毛囊的生长，提高毛发生长初期毛囊的数量以及延长毛囊处于毛发生长初期的时间(也就是提高毛发生长初期与毛发生长终期的比值)。
该化合物可用于促进人的毛发生长。因此，其可用于缓解脱发。为了缓解受试者脱发，需要以足以促进毛发生长的用量施用该化合物。所述用量取决于待治疗脱发的类型、患者脱发的严重程度、脱发持续时间、给药途径、以及患者是否存在其它隐性疾病等。如果全身性给药的话，所述化合物通常在为大约0.1mg/kg/天至大约100mg/kg/天的剂量范围显示出活性。可能需要反复地每天进行给药，当然这取决于前面所罗列的情况。
所述化合物可以通过各种途径给药。可以口服给药。也可以非肠道(即皮下、静脉内、肌内、腹膜内、或鞘内)、直肠、或局部给药。
在典型实施方案中，局部施用所述化合物以促进毛发生长。通常可以将所述化合物直接施用至头皮，特别是没有毛发或者毛发稀疏的区域。剂量可以不同，但是作为总的原则，所述化合物可以以0.01-10w/w％的含量存在于皮肤病学上可接受的载体中，同时这种皮肤病制剂每天向被感染区域施用1-4次。更为普遍的是，所述化合物可以以1-3w/w％的含量存在，同时每天施用一次或两次。“皮肤病学上可接受的”是指可施用至皮肤或毛发且能实现向作用部位扩散药物的载体。
在另一实施方案中，所述化合物还可以用于尚未经历头发脱落、但据信将有脱发危险的患者中。这类患者的实例包括那些接受已知可能诱导脱发的药物方案进行癌症化疗的患者。那些一想起秃头就精神郁闷的年轻人，特别是有秃顶家族史的年轻人也可以受益于上述预防性治疗。这种预防性治疗包括在术语“促进毛发生长”范围之内。
脱发的最常见类型是雄激素性脱发。这种症状通常也被称作男性型秃发和女性型秃发。本发明化合物可用于促进患有这类型脱发的个体中的毛发生长。
毛发生长初期脱发是由各种化学药品或放射(例如用于治疗癌症的化疗或放射治疗)而引起的脱发。其通常也被称作“药物诱导的”或“放射诱导的”脱发。本发明化合物可用于上述症状。
局限性脱发(斑秃)是一种脱发最初出现在头皮圆形区域的自身免疫性疾病。它可以演变成全部头皮的毛发掉落(被称作全部脱发)甚至全部头皮和身体的毛发掉落(被称作全身脱毛)。本发明化合物可用于上述类型的脱发。
损伤性脱发是毛囊受损的结果。其通常也被称作“瘢痕性脱发”。精神性脱发是由于急性情绪紧张而出现的。通过诱导毛发生长初期，本发明化合物也可以使该类型的脱发受益。因此，本发明不应当被理解为局限于治疗雄激素性脱发。本发明化合物可用于缓解任何类型的脱发。
所述化合物可用于促进除了人之外的其它哺乳动物的毛发生长。例如，所述化合物可用于其毛皮(毛发)生长具有经济效益的农场动物(例如羊)。所述化合物还可用于刺激伴侣动物例如狗、猫、沙鼠等的毛发生长。获得上述效果所需的剂量应当满足上述原则。类似地，考虑到待治疗动物的类型，所述化合物可以利用通常用于兽医学应用的制剂进行给药。根据本申请所公开的内容，所述化合物用于促进毛发生长的其它应用对于本领域技术人员而言将是显而易见的，因而应当被认为包含在权利要求范围之内。
D)制剂如果需要的话，所述化合物可以不用载体直接给药。然而，为了方便给药，通常将其与至少一种药学或美容上可接受的载体(在本文中统称为“载体”)一起配制。本文中使用的术语“载体”是指一种或多种适合向哺乳动物给药的可配伍固体或液体填充剂、稀释剂、溶媒或者包囊物质。本文中使用的术语“可配伍的”是指组合物中的组分能够与本文所述的化合物按照一定方式彼此进行混合，这种混合方式应当能够保证在常规使用情形中不发生可能实质性降低组合物效能的相互作用。载体当然也必须具有足够高的纯度和足够低的毒性，从而适合向待治疗的哺乳动物(优选人)给药。载体本身可以具有惰性，也可以具有其自身所拥有的各种药物和/或化妆品作用。
可以将所述化合物配制成任何适合的(例如口服、局部或非肠道给药)形式。可以使用常规的药物制剂技术，例如公开在Remington′sPharmaceutical Sciences，Mack Publishing Company，Easton，PA.(1990)中的技术。
根据具体的给药途径，可以使用本领域熟知的各种载体。这些载体包括固体或液体填充剂、稀释剂、助水溶剂、表面活性剂和包囊物质。可以含有任选的具有药学活性和美容活性的物质，只要这些物质不会实质性地影响本发明方法中所用化合物的活性。与本发明方法中所用化合物联合使用的载体的用量应当足以保证按照可操作的用量施用单位剂量的化合物。用于配制可用于本发明方法中的剂型的方法和组合物描述在下述参考文献中Modern Pharmaceutics，第9-10章，Banker & Rhodes，著(1979)；Lieberman等人，PharmaceuticalDosage FormsTablets(1981)；以及Ansel，Introduction toPharmaceutical Dosage Forms，第2版，(1976)。
所述化合物通常是用于局部给药。局部组合物中的载体可以有助于使化合物渗透入皮肤中到达毛囊环境。这类局部组合物可以为任意形式，包括例如溶液剂、油剂、乳剂、软膏剂、凝胶剂、洗剂、糊剂、洗发剂、保留(leave-on)和清洗毛发调理剂、乳状物、清洁剂、增湿剂、喷雾剂、气雾剂、皮肤贴剂等。
为了制备上述制剂，可以使用本领域已知的用于局部应用的各种载体材料，例如水、醇类、芦荟油(aloe vera gel)、尿囊素、甘油、维生素A和E油、矿物油、丙二醇等。前述参考文献中公开了很多可用于制备这类局部剂型的赋型剂。
所述化合物还可以以脂质体递送系统进行局部给药，例如小型单层泡囊、单层大泡囊和多层泡囊。脂质体可以由各种磷脂(例如胆固醇、硬脂酰胺或磷酸卵磷脂)形成。可用于局部递送本发明方法中所用化合物的可能的制剂中可以使用各种脂质体，例如描述在下述文献中的那些Dowton等人，″Influence of Liposomal Composition onTopical Delivery of Encapsulated Cyclosporin AI.Anin vitroStudy Using Hairless Mouse Skin″，S.T.P.Pharma Sciences，Vol.3，pp.404-407(1993)；Wallach和Philippot，″New Type of LipidVesicleNovasome″，Liposome Technology，Vol.1，pp.141-156(1993)；美国专利号4,911,928；以及美国专利号5,834,014。
用于全身性给药的载体包括例如糖类、淀粉、纤维素及其衍生物、麦芽糖、凝胶、滑石、硫酸钙、植物油、合成油、多元醇、海藻酸、磷酸盐缓冲溶液、乳化剂、等渗盐水和无热原水。适合非肠道给药的载体包括例如丙二醇、油酸乙酯、吡咯烷酮、乙醇和芝麻油。
可以使用各种口服剂型，包括诸如片剂、胶囊剂、颗粒剂、和整装散剂的固体形式。这些口服形式含有有效量(通常为至少大约5％)的化合物。可以将含有适宜的粘合剂、润滑剂、稀释剂、崩解剂、着色剂、调味剂、流动诱导剂和熔化剂的片剂进行压片、模印片、肠包衣、糖包衣、薄膜包衣、或者多次压片。液体口服剂型包括含水溶液剂、乳剂、混悬剂、溶液剂和/或由非泡腾颗粒剂重制的混悬剂、以及由泡腾颗粒剂重制的泡腾制剂，其中含有适宜的溶剂、防腐剂、乳化剂、助悬剂、稀释剂、甜味剂、熔化剂、着色剂和调味剂。
口服给药组合物还包括液体溶液剂、乳剂、混悬剂、散剂、颗粒剂、酏剂、酊剂、糖浆剂等。适合制备上述组合物的载体是本领域众所周知的。糖浆剂、酏剂、乳剂和混悬剂载体中的典型组分包括乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇、液体蔗糖、山梨醇和水。对于混悬剂而言，典型的助悬剂包括甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、Avicel RC-591、黄蓍胶和海藻酸钠；典型的湿润剂包括卵磷脂和聚山梨酯80；典型的防腐剂包括对羟基苯甲酸甲酯和苯甲酸钠。口服液体组合物还可以含有一种或多种诸如上述甜味剂、调味剂或着色剂的组分。
可用于实现全身性递送本发明方法所用化合物的其它组合物包括舌下、口腔和鼻内剂型。这类组合物通常含有一种或多种可溶性填充物质例如蔗糖、山梨糖醇和甘露醇；粘合剂例如阿拉伯胶、微晶纤维素、羧甲基纤维素和羟丙基甲基纤维素。还可以含有如上所述的助流剂、润滑剂、甜味剂、着色剂、抗氧化剂和调味剂。
可以将上述剂型包装用于直接向消费者零售(即制品或试剂盒形式)。这类制品可以按照向患者建议如何应用该产品促进毛发生长的方式贴上标签并进行包装。所述说明应当包括治疗的持续时间、给药方案、注意事项等。所述说明可以为图片、书面说明、或者两者的联合形式。它们可以被印刷在包装的一侧、或是插页形式、或者是任意的适合零售市场传播的其它形式。
如本领域已知的那样，式I化合物还可以与任意的惰性载体混和，以及用于实验室测定中，从而测量所述化合物在患者血浆、尿等中的浓度。所述化合物可用作研究工具。
尽管已经结合各种具体实施方案对本发明进行了说明，但是应该理解可以对其进行进一步的变型，本申请意味着覆盖了根据本发明主旨所进行的任意变型、用途、或修饰，同时还包括落入本领域已知或常规实践范畴的对本发明内容所进行的变型。下面的实施例和生物学数据是为了进一步对本发明进行示例性说明。这些内容不应该被理解为以任何方式构成对本发明的限制。
E)实施例A)毛发生长终期转化测定毛发生长终期转化测定测量了化合物(在下文中称作“测试化合物”)将小鼠毛发生长周期中的静止期(“毛发生长终期”)转化为毛发生长周期中的活动期(“毛发生长初期”)的潜能。该测定利用了处于毛发生长终期中40天大C3H/HeN小鼠的毛皮(即毛发)。该期间一般持续直到大约75天大，此时这些动物中自然出现毛发生长初期。在该测定中，将40天大的小鼠(大约)的选定区域刮毛，然后与测试剂、或对照剂接触，测量毛发生长速率的差异(也就是诱导毛发生长初期)。毛发生长初期的第一标志在于皮肤颜色变暗，这是因为毛囊中的黑素细胞已经在获得有色毛发的过程中开始合成黑色素。
测试化合物作为研究计划的一部分，在毛发生长终期转化测定中对选定的钾通道开放剂进行了评价。所有化合物先前均被作为钾通道开放剂描述在相关文献中，并且它们具有共同的苯并吡喃核(参见美国专利号5,912,244和5,677,324)。测试化合物如下表A所示。
表A
这些化合物因具有钾通道开放剂的体外活性而被选择用于毛发生长终期转化测定。各化合物所具有的活性足以使得本领域技术人员预期认为，这些化合物在相关动物模型中具有显著的抑制活性。
试验步骤使用7周大的雌性C3H/HeN小鼠(Charles River Laboratories，Raleigh，NC)进行研究。在研究开始之前，除去小鼠背部区域的毛皮。本研究仅选择具有粉红色皮肤的小鼠(该颜色为处于毛发生长终期的可视性标志)。
将测试化合物(来自表A)溶解于由丙二醇(30％)和乙醇(70％)组成的溶媒中。将溶于溶媒、或对照溶媒(30/70的丙二醇/乙醇，除非另有限定)中的测试化合物以20μl/cm2的体积局部施用至各测试组(7-10只小鼠)小鼠中被修剪的背部区域。药物的浓度按照下表1-15变化。治疗每天一次，持续5天。
观察治疗区域，并对毛发生长的迹象打分。通过记录每只动物在治疗区域最早出现毛发生长迹象的那一天来量化毛发生长的响应情况。毛发生长初期的第一标志在于皮肤颜色变暗，这是因为毛囊中的黑素细胞开始合成黑色素。从治疗开始到指定组中50％的小鼠出现毛发生长之间的天数被测量为响应时间。观察小鼠长达35天或者更长时间。
结果将结果表示为从治疗开始到指定组中50％的小鼠出现毛发生长之间的天数。表1-15报道了这些试验的结果。
根据观察到溶媒对照组中50％的动物处于毛发生长初期的日子，发现在由这些试验获得的结果中存在较大偏差。例如在试验2中，在第25天观察到溶媒对照组中50％的动物处于毛发生长初期。在试验11中，发现对照组经过56天才到达第50个百分点。
根据上述偏差，发明人推断认为大部分试验都被过早结束，也就是在大部分试验在50％的测试动物出现毛发生长那天之前就被过早结束了。那些被过早结束的试验不应当按照与能够达到第50个百分点的对照组相同的方式评价。
在那些被过早结束的试验中，并不能仅仅因为化合物在试验结束之前没有诱导毛发生长初期(即毛发生长)，就推断认为其没有活性。如果试验可以进行彻底的话，这是可能的，也就是说在对照组达到第50个百分点的那天，化合物可能会比对照组更早地诱导毛发生长初期。
在不论是否过早结束、使用某测试化合物观察到毛发生长初期的试验中，可以推断认为这样的化合物是具有活性的。根据化合物何时诱导50％的动物出现毛发生长初期，还可以潜在地检测两种不同化合物效能之间的差异。因此，被过早结束的试验1、3、5、6、8、9、10和15可以根据上述观点进行评价。
试验1在本试验中，在毛发生长终期转化测定中测试了化合物#1。观察到下述结果表1
考虑到上述结果，为了得出结论，很快就结束了本试验。
试验2在本试验中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1和6。观察到下述结果
表2
使用化合物#1治疗的小鼠比服用化合物#6的小鼠更早出现毛发生长初期迹象。
试验3在本试验方案中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1和2。观察到下述结果表3
本试验被过早结束，使得根据这些化合物的相对效力不能得出任何结论。
试验4在本试验方案中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1。观察到下述结果表4
尽管本试验被过早结束，但是化合物#1在每个测试浓度下都诱导了毛发生长初期。
试验5在本试验方案中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1和6。观察到下述结果表5
尽管本试验被过早结束，但是化合物#6在最高测试浓度(0.3％)下诱导了毛发生长初期。
试验6在本试验方案中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1和6。观察到下述结果表6
尽管本试验被过早结束，但是化合物#1还是诱导了毛发生长初期，而化合物#6直到第35天还没有观察到影响。
试验7在本试验方案中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1和6。观察到下述结果
表7
可以将本试验进行彻底。化合物#1在所有测试浓度下都诱导了毛发生长初期。化合物#6没有在对照组之前诱导毛发生长初期，因此被推断认为在本试验中没有活性。
试验8在本试验方案中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1、3、4、5、和7。观察到下述结果
表8
1溶剂体系中含有聚乙二醇30v/v％、乙醇30v/v％、和transcutanol 40v/v％。
本试验中使用了两种不同溶媒。一种试验使用含有transcutanol(一种渗透促进剂)、乙醇和聚乙二醇的溶剂。另一种溶剂是含有丙二醇和乙醇的30∶70混合物。将所有化合物制备在transcutol、乙醇、聚丙二醇溶媒中，然后与使用相同溶媒治疗的对照组进行对照。
本试验进行足以使transcutol、乙醇、聚丙二醇对照组达到50％分数的时间。化合物#1在该溶媒的所有测试剂量下均具有活性。化合物#3、4、和5在试验中没有活性。化合物#7在本试验中显示出活性。
试验9在本试验中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1和#7。得到下述结果表3
本试验结束太早，使得根据结果不能得出任何结论。
试验10在本试验中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1和7。得到下述结果表10
1溶剂体系中含有聚乙二醇30v/v％、乙醇30v/v％、和transcutanol 40v/v％。
本试验结束太早，使得根据结果不能得出任何结论。
试验11在本试验中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1。得到下述结果表11
本试验进行足以使对照组达到第50个百分点的时间。化合物#1诱导了毛发生长初期。
试验12在本试验中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1。得到下述结果表12
本试验进行足以使对照组达到第50个百分点的时间。化合物#1在本试验中没有诱导毛发生长初期。
试验13在本试验中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1。得到下述结果
表13
本试验进行足以使对照组达到第50个百分点的时间。化合物#1诱导了毛发生长初期。
试验14在本试验中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1。得到下述结果表14
本试验进行足以使得对照组达到第50个百分点的时间。化合物#1诱导了毛发生长初期。
试验15在本试验中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1、6、和7。得到下述结果
表15
本试验被过早结束。尽管被过早结束，但是化合物#1在两个测试浓度下仍然都诱导了毛发生长初期。化合物#7在结束时没有显示出活性。化合物#6当以0.3w/v％的浓度施用时，诱导了毛发生长初期。
概述在15种不同情形下按照每天一次、持续5天的剂量，在毛发生长终期转化测定中对(3S，4R)-3，4-二氢-4-(2，3-二氢-2-甲基-3-氧代哒嗪-6-基)氧基-3-羟基-6-(3-羟苯基)磺酰基-2，2，3-三甲基-2H-苯并[b]吡喃(即化合物#1)进行了测试。其中八组试验被过早结束，使得难以评价这些结果。在与表A中所列的其它钾通道开放剂相对照时，化合物#1在模型中显示出最高的相对效力。该结果是出人意料的。根据其作为钾通道开放剂的体内活性，没有理由可以预期到该化合物在毛发生长终期转化测定中可能具有如此出色的活性。
权利要求
1.下式化合物 或者其可药用盐、或其溶剂化物在制备用于脱发的药物中的用途。
2.权利要求1的用途，其中所述脱发选自斑秃、再生期脱发、自身诱导性毛发脱落、静止期脱发、瘢痕性脱发和雄激素性脱发。
3.权利要求1的用途，其中所述脱发是雄激素性脱发。
4.权利要求1-3中任意一项的用途，其中所述药物为局部用药物。
5.下式化合物 或者其可药用盐、或其溶剂化物在制备用于促进毛发生长的药物中的用途。
6.根据权利要求5的用途，其中所述药物为局部用药物。
7.一种局部药物制剂，其中含有与至少一种可药用局部载体相混合的下式化合物 或者其可药用盐、或其溶剂化物。
8.一种制品，其中含有被包装用于零售的根据权利要求7的药物制剂以及解释如何使用所述制剂治疗脱发的说明书。
9.一种制品，其中含有被包装用于零售的根据权利要求7的药物制剂以及解释如何使用所述制剂促进毛发生长的说明书。
10.下式化合物 或者其可药用盐、或其溶剂化物在制备用于雄激素性脱发的局部用药物中的用途。
11.下式化合物 或者其可药用盐、或其溶剂化物在制备用于诱导毛发生长初期的局部用药物中的用途。
全文摘要
本发明涉及发现(3S，4R)－3，4－二氢－4－(2，3－二氢－2－甲基－3－氧代哒嗪－6－基)氧基－3－羟基－6－(3－羟苯基)磺酰基－2，2，3－三甲基－2H－苯并[b]吡喃可用于促进毛发生长和缓解脱发。
文档编号A61P17/14GK1917878SQ200580004647
公开日2007年2月21日 申请日期2005年2月1日 优先权日2004年2月12日
发明者N·S·多尔蒂, D·A·史密斯 申请人:沃尼尔·朗伯有限责任公司
技术领域：
本发明涉及一种化合物用于促进毛发生长、缓解脱发的用途，以及含有该化合物的药物制剂。
背景技术：
脱发(alopecia)、或者秃头(balding)是目前医学界尚未治愈的常见问题。尽管雄激素与秃头有关，但是引起毛发脱落的生理机制目前尚不清楚。然而已知在罹患脱发的个体中毛发生长的情况是各不相同的。
毛发并不是持续生长的，而是大致经历包括生长期、静止期、和脱落期在内的多个活动周期。人的头皮通常含有100,000-350,000根毛纤维或毛干(shaft)，其在三个不同时间段历经变态(a)在生长期(毛发生长初期)，毛囊(即毛根)深度渗入真皮中，同时在合成毛发主要组分一角蛋白的过程中，毛囊细胞快速分解和分化。在非秃头人群中，上述生长期持续1-5年；(b)过渡期(毛发生长中期)，其标志为有丝分裂停止，持续2-3周；以及(c)静止期(毛发生长终期)，在该期间毛发保留在头皮中长达12周，直到其被由头皮下方生长出来的新毛囊所替代。
在人类中，上述生长周期不是同步的。在这三个时间段的每一段中，每个个体可能具有上千个毛囊。然而，大多数毛囊出现在毛发生长初期。在健康的青年成人中，毛发生长初期与毛发生长终期的比例可以高达9∶1。在患有脱发的个体中，上述比例降至2∶1。
雄激素性脱发是由于对循环雄激素的遗传敏感性被激活而引起的。它是最常见类型的脱发。其对男性(50％)和女性(30％)、又主要是高加索起源人群均具有影响。随着时间的流逝和年龄的增长，在某种程度上过早地，毛干的宽度和长度逐渐发生变化。终毛逐渐变成又短又稀的无色毫毛。因此，男性在二十来岁、女性在三十至四十岁间开始注意到他们的毛发变得越来越短。在男性人群中，大部分毛发脱落出现在头顶。女性是整个头皮开始逐渐变得稀疏。如上所述，毛发生长初期与毛发生长终期的比例明显降低，导致毛发生长减少。
米诺地尔是一种促进毛发生长的钾通道开放剂。米诺地尔在美国可以商标Regaine商购得到。尽管米诺地尔准确的作用机理尚不清楚，但是很多文献都记载了其对毛发生长周期的影响。米诺地尔促进了毛囊的生长，延长了毛囊处于毛发生长初期的时间(也就是提高了毛发生长初期与毛发生长终期的比例)。
尽管米诺地尔促进了毛发生长，但是这种生长的美容效果差异很大。例如，Roenigk报道了83名男性局部施用3％的米诺地尔溶液剂持续19个月进行临床试验的结果。结果发现55％的受试者出现毛发生长。然而，只有20％的受试者认为上述生长与美容相关(Clin.Res.，33，No.4，914A，1985)。Tosti报道指出，在他的受试者中有18.1％有在美容上可以接受的再生作用(Dermatologica，173，No.3，136-138，1986)。因此，本领域仍然需要这样的化合物，其在脱发患者中能够以更高的比例诱导美容上可接受的毛发生长。
发明内容
本发明发现了一种促进毛发生长的新方法。所述方法包括向患有脱发的哺乳动物施用下式的化合物 其盐、溶剂化物、或者它们的混合物。通常，所述哺乳动物应当是罹患脱发、特别是雄激素性脱发的人。然而，本发明化合物也可以向通过刺激其毛发生长而受益的任何哺乳动物给药。
本发明另一实施方案涉及一种局部制剂，其中含有有效量的、与皮肤病学上可接受的载体相混合的上述化合物。这种制剂可以施用至人头皮持续足以促进毛发生长的时间。
本发明再一实施方案涉及一种被包装用于零售的含有上述化合物的药物制剂，其同时含有建议消费者如何使用该产品刺激毛发生长的说明。
发明详述A)定义除非另有说明，本申请(包括权利要求书)中通篇使用的下述术语具有下面的含义。除了用数字表示之外，复数和单数应当可以替换对待。
a.“哺乳动物”包括人，灵长类例如短尾猴(stump-tailedmacaques)，伴侣动物例如狗、猫、沙鼠等，以及家畜类例如牛、猪、马、骆马、和羊。
b.“促进毛发生长”包括刺激总的毛发质量和/或长度提高。这种提高包括毛干(即毛囊)的长度和/或生长比例提高、毛发数目增多、和/或毛发密度提高。通过延长或激活毛发生长初期、毛发周期的生长期、或者通过缩短或延迟毛发生长中期和毛发生长终期可以实现部分或全部上述最终结果。“促进毛发生长”还应该考虑到包括预防、停止、减少、延迟和/或逆转毛发脱落。
c.本文所使用的“脱发”是指部分或完全秃顶、毛发脱落、和/或毛发变疏。
d.“治疗或缓解脱发”是指促进已经经历过脱发或者可能将有脱发危险的哺乳动物的毛发生长。
e.“可药用的”是指适合用于哺乳动物。
f.除非另有描述，凡是涉及式I化合物都应该被理解为包括该化合物的所有活性形式，包括例如其游离形式，如游离酸或碱形式，还包括全部前药、多晶型物、水合物、溶剂化物、互变异构体、立体异构体，例如非对映异构体和对映异构体等、以及所有可药用盐、和上述物理形式的混合物。上述所有形式描述在美国专利号5,912,244中，在此将其内容引入作为参考。还应该理解的是，任何适宜形式的这类化合物的适宜活性代谢物也被包括在本发明中。
g.“溶剂化物”是指含有一个或多个结晶溶剂分子的化合物或其盐的结晶形式，也就是含有以分子形式合并的溶剂的式I化合物或其盐。“水合物”是指其中所述溶剂是水的溶剂化物。
h.“多晶型物”是指以至少一种结晶形式出现的化合物或其盐，例如式I化合物或其盐。
i.“可药用盐”是指“可药用酸加成盐”或“可药用碱加成盐”。“盐”是指“可药用盐”或者适合用于工业方法但不一定在药学上可接受的盐。
j.“可药用酸加成盐”是指式I所述碱性化合物或其任意中间体的任何无毒性有机或无机酸加成盐。形成适宜盐的示例性无机酸包括盐酸、氢溴酸、硫酸、和磷酸以及酸式金属盐例如正磷酸一氢钠和硫酸氢钾。形成适宜盐的示例性有机酸包括单-、二-、和三元羧酸。这类酸的示例是例如乙酸、乙醇酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富马酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、马来酸、羟基马来酸、苯甲酸、羟基苯甲酸、苯乙酸、肉桂酸、水杨酸、2-苯氧基苯甲酸、对甲苯磺酸、以及磺酸如甲磺酸和2-羟基乙磺酸。这类盐可以以水合或基本上无水的形式存在。通常，这些化合物的酸加成盐可溶于水和各种亲水性有机溶剂中。
k.“可药用碱加成盐”是指式I所示化合物或其任意中间体的无毒性有机或无机碱加成盐。形成适宜盐的示例性碱包括碱金属或碱土金属氢氧化物，例如氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、氢氧化镁、或氢氧化钡；氨水、以及脂肪族、脂环族、或芳族有机胺例如甲胺、二甲胺、三甲胺、和甲基吡啶。
I.“前药”是指可迅速体内转化(例如通过血液水解)得到上式母体化合物的化合物。详细的讨论参见T.Higuchi和V.Stella，″Pro-drugs as Novel Delivery Systems，″Vol.14，A.C.S.Symposium Series，以及Bioreversible Carriers in Drug Design，Edward B.Roche著，American Pharmaceutical Association andPergamon Press，1987，在此将这两篇文献均引入作为参考。
m.“式I化合物”、“本发明化合物”、和“化合物”在本申请中可通篇替代使用，因而可当作同义词对待。
B)化合物可用于本发明中的化合物是(3S，4R)-3，4-二氢-4-(2，3-二氢-2-甲基-3-氧代哒嗪-6-基)氧基-3-羟基-6-(3-羟苯基)磺酰基-2，2，3-三甲基-2H-苯并[b]吡喃(在下文中称作“化合物”)。其如下式所示 该化合物及其制备方法描述在美国专利号5,912,244中，在此将其内容引入作为参考。‘244专利的实施例7举例说明了制备该化合物的一种方法。
除了上述式I化合物之外，‘244专利还公开了一类苯并吡喃衍生物。‘244专利指出这些化合物是具有平滑肌松弛活性的钾通道开放剂。该‘244专利还指出这些化合物可用于治疗与平滑肌紧张性或运动性改变相关的疾病。这类症状的实例包括慢性阻塞性气道疾病、哮喘、尿失禁、高血压、心肌缺血、脑缺血、青光眼、和男性秃发。
用于评价上述化合物作为钾通道开放剂的效能的测试描述在该‘244申请的第9栏笫3-41行。所选化合物的相关数据描述在表格第30-31栏。实施例7也就是式I化合物的结果中没有列出相关数据。
C)药理学和医学用途如上所述，式I化合物是一种钾通道开放剂。业已发现，在与其它钾通道开放剂相比较时，该化合物在促进毛发生长方面具有出人意料的活性。该化合物可以刺激毛囊的生长，提高毛发生长初期毛囊的数量以及延长毛囊处于毛发生长初期的时间(也就是提高毛发生长初期与毛发生长终期的比值)。
该化合物可用于促进人的毛发生长。因此，其可用于缓解脱发。为了缓解受试者脱发，需要以足以促进毛发生长的用量施用该化合物。所述用量取决于待治疗脱发的类型、患者脱发的严重程度、脱发持续时间、给药途径、以及患者是否存在其它隐性疾病等。如果全身性给药的话，所述化合物通常在为大约0.1mg/kg/天至大约100mg/kg/天的剂量范围显示出活性。可能需要反复地每天进行给药，当然这取决于前面所罗列的情况。
所述化合物可以通过各种途径给药。可以口服给药。也可以非肠道(即皮下、静脉内、肌内、腹膜内、或鞘内)、直肠、或局部给药。
在典型实施方案中，局部施用所述化合物以促进毛发生长。通常可以将所述化合物直接施用至头皮，特别是没有毛发或者毛发稀疏的区域。剂量可以不同，但是作为总的原则，所述化合物可以以0.01-10w/w％的含量存在于皮肤病学上可接受的载体中，同时这种皮肤病制剂每天向被感染区域施用1-4次。更为普遍的是，所述化合物可以以1-3w/w％的含量存在，同时每天施用一次或两次。“皮肤病学上可接受的”是指可施用至皮肤或毛发且能实现向作用部位扩散药物的载体。
在另一实施方案中，所述化合物还可以用于尚未经历头发脱落、但据信将有脱发危险的患者中。这类患者的实例包括那些接受已知可能诱导脱发的药物方案进行癌症化疗的患者。那些一想起秃头就精神郁闷的年轻人，特别是有秃顶家族史的年轻人也可以受益于上述预防性治疗。这种预防性治疗包括在术语“促进毛发生长”范围之内。
脱发的最常见类型是雄激素性脱发。这种症状通常也被称作男性型秃发和女性型秃发。本发明化合物可用于促进患有这类型脱发的个体中的毛发生长。
毛发生长初期脱发是由各种化学药品或放射(例如用于治疗癌症的化疗或放射治疗)而引起的脱发。其通常也被称作“药物诱导的”或“放射诱导的”脱发。本发明化合物可用于上述症状。
局限性脱发(斑秃)是一种脱发最初出现在头皮圆形区域的自身免疫性疾病。它可以演变成全部头皮的毛发掉落(被称作全部脱发)甚至全部头皮和身体的毛发掉落(被称作全身脱毛)。本发明化合物可用于上述类型的脱发。
损伤性脱发是毛囊受损的结果。其通常也被称作“瘢痕性脱发”。精神性脱发是由于急性情绪紧张而出现的。通过诱导毛发生长初期，本发明化合物也可以使该类型的脱发受益。因此，本发明不应当被理解为局限于治疗雄激素性脱发。本发明化合物可用于缓解任何类型的脱发。
所述化合物可用于促进除了人之外的其它哺乳动物的毛发生长。例如，所述化合物可用于其毛皮(毛发)生长具有经济效益的农场动物(例如羊)。所述化合物还可用于刺激伴侣动物例如狗、猫、沙鼠等的毛发生长。获得上述效果所需的剂量应当满足上述原则。类似地，考虑到待治疗动物的类型，所述化合物可以利用通常用于兽医学应用的制剂进行给药。根据本申请所公开的内容，所述化合物用于促进毛发生长的其它应用对于本领域技术人员而言将是显而易见的，因而应当被认为包含在权利要求范围之内。
D)制剂如果需要的话，所述化合物可以不用载体直接给药。然而，为了方便给药，通常将其与至少一种药学或美容上可接受的载体(在本文中统称为“载体”)一起配制。本文中使用的术语“载体”是指一种或多种适合向哺乳动物给药的可配伍固体或液体填充剂、稀释剂、溶媒或者包囊物质。本文中使用的术语“可配伍的”是指组合物中的组分能够与本文所述的化合物按照一定方式彼此进行混合，这种混合方式应当能够保证在常规使用情形中不发生可能实质性降低组合物效能的相互作用。载体当然也必须具有足够高的纯度和足够低的毒性，从而适合向待治疗的哺乳动物(优选人)给药。载体本身可以具有惰性，也可以具有其自身所拥有的各种药物和/或化妆品作用。
可以将所述化合物配制成任何适合的(例如口服、局部或非肠道给药)形式。可以使用常规的药物制剂技术，例如公开在Remington′sPharmaceutical Sciences，Mack Publishing Company，Easton，PA.(1990)中的技术。
根据具体的给药途径，可以使用本领域熟知的各种载体。这些载体包括固体或液体填充剂、稀释剂、助水溶剂、表面活性剂和包囊物质。可以含有任选的具有药学活性和美容活性的物质，只要这些物质不会实质性地影响本发明方法中所用化合物的活性。与本发明方法中所用化合物联合使用的载体的用量应当足以保证按照可操作的用量施用单位剂量的化合物。用于配制可用于本发明方法中的剂型的方法和组合物描述在下述参考文献中Modern Pharmaceutics，第9-10章，Banker & Rhodes，著(1979)；Lieberman等人，PharmaceuticalDosage FormsTablets(1981)；以及Ansel，Introduction toPharmaceutical Dosage Forms，第2版，(1976)。
所述化合物通常是用于局部给药。局部组合物中的载体可以有助于使化合物渗透入皮肤中到达毛囊环境。这类局部组合物可以为任意形式，包括例如溶液剂、油剂、乳剂、软膏剂、凝胶剂、洗剂、糊剂、洗发剂、保留(leave-on)和清洗毛发调理剂、乳状物、清洁剂、增湿剂、喷雾剂、气雾剂、皮肤贴剂等。
为了制备上述制剂，可以使用本领域已知的用于局部应用的各种载体材料，例如水、醇类、芦荟油(aloe vera gel)、尿囊素、甘油、维生素A和E油、矿物油、丙二醇等。前述参考文献中公开了很多可用于制备这类局部剂型的赋型剂。
所述化合物还可以以脂质体递送系统进行局部给药，例如小型单层泡囊、单层大泡囊和多层泡囊。脂质体可以由各种磷脂(例如胆固醇、硬脂酰胺或磷酸卵磷脂)形成。可用于局部递送本发明方法中所用化合物的可能的制剂中可以使用各种脂质体，例如描述在下述文献中的那些Dowton等人，″Influence of Liposomal Composition onTopical Delivery of Encapsulated Cyclosporin AI.Anin vitroStudy Using Hairless Mouse Skin″，S.T.P.Pharma Sciences，Vol.3，pp.404-407(1993)；Wallach和Philippot，″New Type of LipidVesicleNovasome″，Liposome Technology，Vol.1，pp.141-156(1993)；美国专利号4,911,928；以及美国专利号5,834,014。
用于全身性给药的载体包括例如糖类、淀粉、纤维素及其衍生物、麦芽糖、凝胶、滑石、硫酸钙、植物油、合成油、多元醇、海藻酸、磷酸盐缓冲溶液、乳化剂、等渗盐水和无热原水。适合非肠道给药的载体包括例如丙二醇、油酸乙酯、吡咯烷酮、乙醇和芝麻油。
可以使用各种口服剂型，包括诸如片剂、胶囊剂、颗粒剂、和整装散剂的固体形式。这些口服形式含有有效量(通常为至少大约5％)的化合物。可以将含有适宜的粘合剂、润滑剂、稀释剂、崩解剂、着色剂、调味剂、流动诱导剂和熔化剂的片剂进行压片、模印片、肠包衣、糖包衣、薄膜包衣、或者多次压片。液体口服剂型包括含水溶液剂、乳剂、混悬剂、溶液剂和/或由非泡腾颗粒剂重制的混悬剂、以及由泡腾颗粒剂重制的泡腾制剂，其中含有适宜的溶剂、防腐剂、乳化剂、助悬剂、稀释剂、甜味剂、熔化剂、着色剂和调味剂。
口服给药组合物还包括液体溶液剂、乳剂、混悬剂、散剂、颗粒剂、酏剂、酊剂、糖浆剂等。适合制备上述组合物的载体是本领域众所周知的。糖浆剂、酏剂、乳剂和混悬剂载体中的典型组分包括乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇、液体蔗糖、山梨醇和水。对于混悬剂而言，典型的助悬剂包括甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、Avicel RC-591、黄蓍胶和海藻酸钠；典型的湿润剂包括卵磷脂和聚山梨酯80；典型的防腐剂包括对羟基苯甲酸甲酯和苯甲酸钠。口服液体组合物还可以含有一种或多种诸如上述甜味剂、调味剂或着色剂的组分。
可用于实现全身性递送本发明方法所用化合物的其它组合物包括舌下、口腔和鼻内剂型。这类组合物通常含有一种或多种可溶性填充物质例如蔗糖、山梨糖醇和甘露醇；粘合剂例如阿拉伯胶、微晶纤维素、羧甲基纤维素和羟丙基甲基纤维素。还可以含有如上所述的助流剂、润滑剂、甜味剂、着色剂、抗氧化剂和调味剂。
可以将上述剂型包装用于直接向消费者零售(即制品或试剂盒形式)。这类制品可以按照向患者建议如何应用该产品促进毛发生长的方式贴上标签并进行包装。所述说明应当包括治疗的持续时间、给药方案、注意事项等。所述说明可以为图片、书面说明、或者两者的联合形式。它们可以被印刷在包装的一侧、或是插页形式、或者是任意的适合零售市场传播的其它形式。
如本领域已知的那样，式I化合物还可以与任意的惰性载体混和，以及用于实验室测定中，从而测量所述化合物在患者血浆、尿等中的浓度。所述化合物可用作研究工具。
尽管已经结合各种具体实施方案对本发明进行了说明，但是应该理解可以对其进行进一步的变型，本申请意味着覆盖了根据本发明主旨所进行的任意变型、用途、或修饰，同时还包括落入本领域已知或常规实践范畴的对本发明内容所进行的变型。下面的实施例和生物学数据是为了进一步对本发明进行示例性说明。这些内容不应该被理解为以任何方式构成对本发明的限制。
E)实施例A)毛发生长终期转化测定毛发生长终期转化测定测量了化合物(在下文中称作“测试化合物”)将小鼠毛发生长周期中的静止期(“毛发生长终期”)转化为毛发生长周期中的活动期(“毛发生长初期”)的潜能。该测定利用了处于毛发生长终期中40天大C3H/HeN小鼠的毛皮(即毛发)。该期间一般持续直到大约75天大，此时这些动物中自然出现毛发生长初期。在该测定中，将40天大的小鼠(大约)的选定区域刮毛，然后与测试剂、或对照剂接触，测量毛发生长速率的差异(也就是诱导毛发生长初期)。毛发生长初期的第一标志在于皮肤颜色变暗，这是因为毛囊中的黑素细胞已经在获得有色毛发的过程中开始合成黑色素。
测试化合物作为研究计划的一部分，在毛发生长终期转化测定中对选定的钾通道开放剂进行了评价。所有化合物先前均被作为钾通道开放剂描述在相关文献中，并且它们具有共同的苯并吡喃核(参见美国专利号5,912,244和5,677,324)。测试化合物如下表A所示。
表A
这些化合物因具有钾通道开放剂的体外活性而被选择用于毛发生长终期转化测定。各化合物所具有的活性足以使得本领域技术人员预期认为，这些化合物在相关动物模型中具有显著的抑制活性。
试验步骤使用7周大的雌性C3H/HeN小鼠(Charles River Laboratories，Raleigh，NC)进行研究。在研究开始之前，除去小鼠背部区域的毛皮。本研究仅选择具有粉红色皮肤的小鼠(该颜色为处于毛发生长终期的可视性标志)。
将测试化合物(来自表A)溶解于由丙二醇(30％)和乙醇(70％)组成的溶媒中。将溶于溶媒、或对照溶媒(30/70的丙二醇/乙醇，除非另有限定)中的测试化合物以20μl/cm2的体积局部施用至各测试组(7-10只小鼠)小鼠中被修剪的背部区域。药物的浓度按照下表1-15变化。治疗每天一次，持续5天。
观察治疗区域，并对毛发生长的迹象打分。通过记录每只动物在治疗区域最早出现毛发生长迹象的那一天来量化毛发生长的响应情况。毛发生长初期的第一标志在于皮肤颜色变暗，这是因为毛囊中的黑素细胞开始合成黑色素。从治疗开始到指定组中50％的小鼠出现毛发生长之间的天数被测量为响应时间。观察小鼠长达35天或者更长时间。
结果将结果表示为从治疗开始到指定组中50％的小鼠出现毛发生长之间的天数。表1-15报道了这些试验的结果。
根据观察到溶媒对照组中50％的动物处于毛发生长初期的日子，发现在由这些试验获得的结果中存在较大偏差。例如在试验2中，在第25天观察到溶媒对照组中50％的动物处于毛发生长初期。在试验11中，发现对照组经过56天才到达第50个百分点。
根据上述偏差，发明人推断认为大部分试验都被过早结束，也就是在大部分试验在50％的测试动物出现毛发生长那天之前就被过早结束了。那些被过早结束的试验不应当按照与能够达到第50个百分点的对照组相同的方式评价。
在那些被过早结束的试验中，并不能仅仅因为化合物在试验结束之前没有诱导毛发生长初期(即毛发生长)，就推断认为其没有活性。如果试验可以进行彻底的话，这是可能的，也就是说在对照组达到第50个百分点的那天，化合物可能会比对照组更早地诱导毛发生长初期。
在不论是否过早结束、使用某测试化合物观察到毛发生长初期的试验中，可以推断认为这样的化合物是具有活性的。根据化合物何时诱导50％的动物出现毛发生长初期，还可以潜在地检测两种不同化合物效能之间的差异。因此，被过早结束的试验1、3、5、6、8、9、10和15可以根据上述观点进行评价。
试验1在本试验中，在毛发生长终期转化测定中测试了化合物#1。观察到下述结果表1
考虑到上述结果，为了得出结论，很快就结束了本试验。
试验2在本试验中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1和6。观察到下述结果
表2
使用化合物#1治疗的小鼠比服用化合物#6的小鼠更早出现毛发生长初期迹象。
试验3在本试验方案中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1和2。观察到下述结果表3
本试验被过早结束，使得根据这些化合物的相对效力不能得出任何结论。
试验4在本试验方案中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1。观察到下述结果表4
尽管本试验被过早结束，但是化合物#1在每个测试浓度下都诱导了毛发生长初期。
试验5在本试验方案中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1和6。观察到下述结果表5
尽管本试验被过早结束，但是化合物#6在最高测试浓度(0.3％)下诱导了毛发生长初期。
试验6在本试验方案中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1和6。观察到下述结果表6
尽管本试验被过早结束，但是化合物#1还是诱导了毛发生长初期，而化合物#6直到第35天还没有观察到影响。
试验7在本试验方案中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1和6。观察到下述结果
表7
可以将本试验进行彻底。化合物#1在所有测试浓度下都诱导了毛发生长初期。化合物#6没有在对照组之前诱导毛发生长初期，因此被推断认为在本试验中没有活性。
试验8在本试验方案中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1、3、4、5、和7。观察到下述结果
表8
1溶剂体系中含有聚乙二醇30v/v％、乙醇30v/v％、和transcutanol 40v/v％。
本试验中使用了两种不同溶媒。一种试验使用含有transcutanol(一种渗透促进剂)、乙醇和聚乙二醇的溶剂。另一种溶剂是含有丙二醇和乙醇的30∶70混合物。将所有化合物制备在transcutol、乙醇、聚丙二醇溶媒中，然后与使用相同溶媒治疗的对照组进行对照。
本试验进行足以使transcutol、乙醇、聚丙二醇对照组达到50％分数的时间。化合物#1在该溶媒的所有测试剂量下均具有活性。化合物#3、4、和5在试验中没有活性。化合物#7在本试验中显示出活性。
试验9在本试验中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1和#7。得到下述结果表3
本试验结束太早，使得根据结果不能得出任何结论。
试验10在本试验中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1和7。得到下述结果表10
1溶剂体系中含有聚乙二醇30v/v％、乙醇30v/v％、和transcutanol 40v/v％。
本试验结束太早，使得根据结果不能得出任何结论。
试验11在本试验中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1。得到下述结果表11
本试验进行足以使对照组达到第50个百分点的时间。化合物#1诱导了毛发生长初期。
试验12在本试验中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1。得到下述结果表12
本试验进行足以使对照组达到第50个百分点的时间。化合物#1在本试验中没有诱导毛发生长初期。
试验13在本试验中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1。得到下述结果
表13
本试验进行足以使对照组达到第50个百分点的时间。化合物#1诱导了毛发生长初期。
试验14在本试验中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1。得到下述结果表14
本试验进行足以使得对照组达到第50个百分点的时间。化合物#1诱导了毛发生长初期。
试验15在本试验中，在毛发生长终期转化测定中评价了化合物#1、6、和7。得到下述结果
表15
本试验被过早结束。尽管被过早结束，但是化合物#1在两个测试浓度下仍然都诱导了毛发生长初期。化合物#7在结束时没有显示出活性。化合物#6当以0.3w/v％的浓度施用时，诱导了毛发生长初期。
概述在15种不同情形下按照每天一次、持续5天的剂量，在毛发生长终期转化测定中对(3S，4R)-3，4-二氢-4-(2，3-二氢-2-甲基-3-氧代哒嗪-6-基)氧基-3-羟基-6-(3-羟苯基)磺酰基-2，2，3-三甲基-2H-苯并[b]吡喃(即化合物#1)进行了测试。其中八组试验被过早结束，使得难以评价这些结果。在与表A中所列的其它钾通道开放剂相对照时，化合物#1在模型中显示出最高的相对效力。该结果是出人意料的。根据其作为钾通道开放剂的体内活性，没有理由可以预期到该化合物在毛发生长终期转化测定中可能具有如此出色的活性。
权利要求
1.下式化合物 或者其可药用盐、或其溶剂化物在制备用于脱发的药物中的用途。
2.权利要求1的用途，其中所述脱发选自斑秃、再生期脱发、自身诱导性毛发脱落、静止期脱发、瘢痕性脱发和雄激素性脱发。
3.权利要求1的用途，其中所述脱发是雄激素性脱发。
4.权利要求1-3中任意一项的用途，其中所述药物为局部用药物。
5.下式化合物 或者其可药用盐、或其溶剂化物在制备用于促进毛发生长的药物中的用途。
6.根据权利要求5的用途，其中所述药物为局部用药物。
7.一种局部药物制剂，其中含有与至少一种可药用局部载体相混合的下式化合物 或者其可药用盐、或其溶剂化物。
8.一种制品，其中含有被包装用于零售的根据权利要求7的药物制剂以及解释如何使用所述制剂治疗脱发的说明书。
9.一种制品，其中含有被包装用于零售的根据权利要求7的药物制剂以及解释如何使用所述制剂促进毛发生长的说明书。
10.下式化合物 或者其可药用盐、或其溶剂化物在制备用于雄激素性脱发的局部用药物中的用途。
11.下式化合物 或者其可药用盐、或其溶剂化物在制备用于诱导毛发生长初期的局部用药物中的用途。
全文摘要
本发明涉及发现(3S，4R)－3，4－二氢－4－(2，3－二氢－2－甲基－3－氧代哒嗪－6－基)氧基－3－羟基－6－(3－羟苯基)磺酰基－2，2，3－三甲基－2H－苯并[b]吡喃可用于促进毛发生长和缓解脱发。
文档编号A61P17/14GK1917878SQ200580004647
公开日2007年2月21日 申请日期2005年2月1日 优先权日2004年2月12日
发明者N·S·多尔蒂, D·A·史密斯 申请人:沃尼尔·朗伯有限责任公司
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