一种妇科炎症外用药物及其制备方法
专利名称：一种妇科炎症外用药物及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种妇科炎症外用药物及其制备方法，涉及来源植物材料的医用配制品及制备方法。
背景技术：
妇科炎症常见的有阴道炎、尿道炎、宫颈糜烂、外阴瘙痒、白带异常等，大多数是由于各种细菌或真菌感染引起的，目前常用的外用药物化学合成药以抗菌素类为主，这些药物作用虽快，但许多药物可通过阴道粘摸吸收而又对人体引起一定的毒副作用，有的药物经过动物实验还有一定的致癌作用。抗菌素类药物在用于阴道炎时，很容易使阴道菌群改变，导致菌群失调，进而诱发二重感染。
中药以天然植物为物质基础，毒副作用较小，是在中医理论指导下开发研究的产品，它既有抗菌消炎作用又可帮助维持阴道的正常微生态环境，利于炎症的消除。目前妇科中有关雪莲的中药剂也有开发，如雪莲胶囊，雪莲舒阴洁等，这些都是有许多味药材组成，采用水提或醇提或直接粉碎成粉末使用，这必造成药材的有效成分利用率低下，植物资源浪费，疗效也不能令人满意。
发明内容
人们对疗效更好的治疗妇科炎症的外用中药制剂仍存在需求。
本发明的目的是提供一种有效治疗妇科炎症的外用中药药剂。
本发明的另一个目的是提供该外用中药药剂的制备方法。
为实施本发明的目的所采取的技术方案是本发明的药物是由活性成分和/或药剂上可接受的辅料组成，其活性成分主要是由下列重量份的植物药的超临界二氧化碳流体萃取物或醇提物或水提物雪莲1～3份、苦参2～4份、蛇床子1～3份、地肤子0～3份。
在上述重量份范围内经大量的试验和摸索总结得出的，都具有较好的疗效。雪莲，清热解毒，消炎；苦参，清热燥湿；蛇床子，温外肾阳；地肤子，祛风杀虫止痒。初步的提取工艺研究发现用超临界CO2提取蛇床子、雪莲花等具有有效成分富集等优势。进一步的药效学证明这些提取物能保持或提高这些中药的药理活性，其中蛇床子和雪莲花在抗白念和滴虫方面具有互补性，在此基础上，增加了苦参和地肤子，本药物的组成以雪莲作君药，苦参作臣药，蛇床子、地肤子为佐药。
优选后的活性成分主要是由下列重量份的植物药的超临界二氧化碳流体萃取物雪莲2～2.5份、苦参2～3份、蛇床子1.5～2.5份、地肤子2～3；最佳的活性成分主要是由下列重量份的植物药的超临界二氧化碳流体萃取物雪莲2份、苦参3份、蛇床子2份、地肤子3份。
当活性成分采用醇提物时，由下列重量份的植物药的醇提物雪莲1～2份、苦参2～3份、蛇床子2～3份、地肤子1～2份。
当活性成分采用水提物时，由下列重量份的植物药的水提物雪莲1～1.5份、苦参3～4份、蛇床子1～3份、地肤子1～2份。
本发明的药物的制备方法，它包括下列步骤(1)是活性成分的制备；(2)是活性成分加药剂上可接受的辅料按常规外用药物制剂的工艺制成妇科能接受的外用剂型，其特征在于活性成分的制备方法a.是按所述重量配比的雪莲、苦参、蛇床子、地肤子置超临界二氧化碳萃取釜中萃取，条件为萃取温度为30-70℃，萃取压力为20-35Mpa；分离釜的温度为35-70℃，分离釜压力为6-18Mpa；以乙醇、氯仿、丙酮为夹带剂，用CO2循环萃取2-4小时，萃取结束后，在分离釜出料口出料，萃取液经浓缩后，得到浸膏，为超临界二氧化碳流体萃取物密度为0.90～1.05g/ml(25℃)，干燥失重为＜5％；或方法b.是按所述重量配比的雪莲、苦参、蛇床子、地肤子置中药提取锅中，加乙醇加热回流两次，每次加乙醇量以没过药面为宜，合并两次回流液，过滤，滤液浓缩成浸膏，为醇提物；或方法c.是按所述重量配比的雪莲、苦参、蛇床子、地肤子置中药提取锅中，加水煎煮两次，每次加水量以没过药面为宜，合并两次煎液，过滤，滤液浓缩成浸膏。
优选的活性成分的制备方法a.是按所述重量配比的雪莲、苦参、蛇床子、地肤子置超临界二氧化碳萃取釜中萃取，萃取条件为萃取温度为30～70℃，萃取压力为20～35Mpa；分离釜I温度为45～70℃，分离釜I压力为6～18Mpa；分离釜II温度为35～60℃，分离釜II压力为6～14Mpa；以乙醇、丙酮、氯仿为夹带剂，用CO2循环萃取2-4小时，萃取结束后，分别在分离釜I、分离釜II出料口出料，萃取液经浓缩后，得到浸膏为超临界二氧化碳流体萃取物，浸膏密度为0.90～1.05g/ml(25℃)，干燥失重为＜5％。
最佳的活性成分的制备方法a、超临界二氧化碳流体萃取的优选条件是萃取温度为55℃，萃取压力为30Mpa；分离釜I的温度为60℃，分离釜I压力为18Mpa；分离釜II温度为40℃，分离釜II压力为6Mpa；以95％乙醇为夹带剂，用CO2循环萃取3小时。收率为3.5％，浸膏密度为0.90～1.05g/ml(25℃)，干燥失重为＜5％。
本发明的活性组分可以加入制备不同剂型时所需的常规辅料，如常用甘油明胶，微晶纤维素等以常规的外用药物制剂的工艺制成妇科能接受的外用剂型，如栓剂、泡腾片、胶囊剂、喷雾剂等。
栓剂采用如下原料配比，活性成分的浸膏1份、甘油明胶4份。将甘油明胶在水浴中加热溶解，待完全溶解均匀后，加入浸膏，搅拌均匀，注模，冷却，包装即得栓剂。
泡腾片采用如下原料配比，活性成分的浸膏3～5份、柠檬酸0.5份、碳酸氢钠0.5份、其它赋形剂适量，其制备工艺是取约一半量的浸膏、柠檬酸、其它赋形剂，用浸膏作为润湿剂制成酸性颗粒A，干燥，颗粒水分＜3％，取剩余量浸膏，碳酸氢钠0.5份、其它赋形剂，用浸膏作为润湿剂制成碱性颗粒B，干燥，颗粒B水分＜3％。将A、B二种颗粒混匀，加入滑料、助流剂后压片，即得泡腾片。
胶囊剂采用如下原料配比，活性成分的浸膏4-5份、用微晶纤维素等赋形剂，用浸膏作润湿剂，制成颗粒，颗粒加入滑料混匀，装胶囊即得。
用本发明提供的制备方法得到的活性成分进行药效试验。
试验样品A、为超临界CO提取浸膏，1g浸膏相当于34.4g生药量。
B、为超临界CO提取浸膏，1g浸膏相当于30.9g生药量。
C、为超临界CO提取浸膏，1g浸膏相当于32.8g生药量。
D、为醇提取浸膏，1g浸膏相当于5.88g生药量。
E、为醇提取浸膏，1g浸膏相当于6.70g生药量。
F、为水提取浸膏，1g浸膏相当于4.10g生药量。
G、为水提取浸膏，1g浸膏相当于4.35g生药量。
表样品A、B、C、D、E、F、G中药材组成组 分样品雪莲(份)苦参(份)蛇床子(份)地肤子(份)A1 223B2 420C1.5 31.5 2D1 331E2 213F1 421G1.5 321.5一、对阴道滴虫的体外抑制作用试验滴虫培养基的制法(见“人体寄生虫学”第二版赵慰先主编人民卫生出版社1993)试验方法滴虫液的配制取显微镜观察有活动阴道滴虫的阴道分必物，加入上述培养液中，(每10ml培养液中加入青霉素、链霉素各1mg以抑制其他细菌生长)37℃增殖培养48小时，取培养液，用白细胞计数器于显微镜下计数，根据计数结果将其配成含活虫数为105个/ml的悬液。
药物体外抑制滴虫浓度的测定将药液0.2ml加入1.8ml培养基(含中药2560ug/ml，含甲硝唑128ug/ml)倍比稀。于药液中加入浓度为105个/ml滴虫液0.1ml并以2％的无水乙醇作空白对照及无药的滴虫阴性对照，37℃培养24小时，取培养液于显微镜下观察结果，以培养液中无活动滴虫的最小药物浓度为其抑制滴虫的浓度。
试验结果表抑制滴虫生长的最低药物浓度(ug/ml) 二、体外抑菌试验试验时按生药含量用融化的50℃的M-H琼脂培养基或沙氏培养基从1000mg/ml进行二倍稀释成1000mg/ml、500mg/ml、125mg/ml、62.5mg/ml、____2.0mg/ml的系列含药平皿待用。
试验菌株临床分离致病菌金黄色葡萄球菌18株，表皮葡萄球菌18株，大肠埃希菌5株，白色念珠菌30株，共计71株。
标准质控菌株 金葡球菌ATCC25923、金葡球菌29213、大肠埃希菌ATCC25922试验方法采用琼脂二倍稀释法测定A-D等样品的最小抑菌浓度(MIC值)。用多点接种仪将细菌接种子含不同药物浓度的琼脂平皿表面，每点含菌量约为105CFU/ml，37℃孵育18~20小时，以无细菌生长平皿培养基中所含药物的最低浓度为药物对该菌的最低抑菌浓度(MIC值)。
试验结果表A-G等7个中药7种(71株)菌株的体外抗菌作用(X±SD)(mg/ml)
三、抗炎试验试验试剂与动物致炎剂 巴豆油，系棕色油状物液体，药用级，批号000309，由江西吉水县华宝天然药用油厂生产，用前用乙醇∶水∶乙醚，25∶2∶70混合溶媒配制成1％浓度备用。
浸膏使用前用10％吐温80液稀释至浓度为80％的液体。
健康昆明种小鼠，雄性，体重25-30克，由四川抗菌素工业研究所动物中心提供，饲养环境温度21-22℃，湿度56-65％。
试验方法每次试验将同批小鼠随机分组，用1％巴豆油致炎造摸(30ul/右耳)，造摸后1小时于肿胀耳上涂抹用药，每耳涂抹20ul样液，造摸后2小时追加一次用药，造摸后4小时处死动物，取二耳，用37℃生理盐水漂洗净耳壳上残留药渣，滤纸吸干水分，再用直径8mm打孔器冲下二耳圆片，精密称重，左右二耳片重量之差为肿胀度(mg)，再用下公式计算肿胀百分率(％)和肿胀抑制率(％) 试验结果表A-G等7个中药的体外抗炎作用样品号动物数(只) 肿胀度(mg) 肿胀率(％) 肿胀抑制率(％)A 16 61.2±15.0 10.1±2.5**35.9B 16 51.5±15.6 9.1±2.8**42.0C 16 60.8±25.3 10.3±4.0**38.7D 16 77.7±21.6 12.6±2.819.7E 16 13.5±3.74 0.87±0.23 17.5F 16 14.6±4.97 0.93±0.32 9.1G 16 17.0±6.15 1.12±0.42 1.4药效试验结果复方雪莲样品A、B、C浸膏在抗菌、抗炎、抗滴虫方面均具有良好的作用；醇提样品D、E浸膏或水提样品F、G浸膏在抗菌方面具有良好的作用但作用弱于超临界提样品A、B、C。
本发明的有益效果从上述试验证明用本发明所提过的制备方法所得到的外用药物在抗菌、抗炎、抗滴虫方面均具有良好的作用，以活性成分是超临界CO2提取的样品效果最佳，醇提样品或水提样品在抗菌方面具有良好的作用但作用弱于超临界提样品。
以下通过实施例来进一步阐述本发明的技术方案。
实施例1称取雪莲1Kg、苦参4Kg、蛇床子2Kg、地肤子1Kg置5LHA-9805型超临界萃取釜中萃取，对萃取釜、分离釜I、分离釜II、储罐分别进行加热或冷却，当萃取釜达到温度为45℃，分离釜I温度为60℃，分离釜II温度为40℃时，开启CO2钢瓶，通过高压泵对系统进行加压，打入适量乙醇为夹带剂，萃取釜压力达到35Mpa，分离釜I压力为14Mpa；，分离釜II压力为6Mpa时，循环萃取2小时，萃取结束后，分别在分离釜I、分离釜II出料口出料，萃取液经减压真空干燥(真空度0.1MPa以下，温度70℃以下)浓缩得到复方雪莲浸膏240g，收率3.0％，干燥失重4.2％。
实施例2称取雪莲1.5Kg、苦参3Kg、蛇床子2Kg、地肤子1.5Kg置中药提取锅中，加10倍量水煎煮2小时，过滤，药渣再加5倍量水煎煮1小时，过滤，合并两次煎滤液，滤液减压真空干燥(真空度0.1MPa以下，温度70℃以下)浓缩成浸膏2.6Kg，浸膏干燥失重为45％。
实施例3、称取雪莲2Kg、苦参2Kg、蛇床子1Kg、地肤子3Kg，置中药提取锅中，加10倍量乙醇回流小时，过滤，药渣再加乙醇回流1小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压真空干燥(真空度0.1MPa以下，温度70℃以下)浓缩成浸膏，得1.7kg，浸膏干燥失重为46％。
实施例4、称取雪莲1.5Kg、苦参3Kg、蛇床子1.5Kg、地肤子2Kg置5LHA-9805型超临界萃取釜中萃取，对萃取釜、分离釜I、分离釜II、储罐分别进行加热或冷却，当萃取釜达到温度为45℃，分离釜I温度为60℃，分离釜II温度为40℃，时，开启CO2钢瓶，通过高压泵对系统进行加压，打入适量乙醇为夹带剂，萃取釜压力达到35Mpa，分离釜I压力为14Mpa；，分离釜II压力为6Mpa时，循环萃取2小时，萃取结束后，分别在分离釜I、分离釜II出料口出料，萃取液经减压真空干燥(真空度0.1MPa以下，温度70℃以下)浓缩得到复方雪莲浸膏233g，收率2.91％，干燥失重3.2％。
实施例5、称取雪莲2Kg、苦参4Kg、蛇床子2Kg置5LHA-9805型超临界萃取釜中萃取，对萃取釜、分离釜I、分离釜II、储罐分别进行加热或冷却，当萃取釜达到温度为45℃，分离釜I温度为60℃，分离釜II温度为40℃，时，开启CO2钢瓶，通过高压泵对系统进行加压，打入适量乙醇为夹带剂，萃取釜压力达到35Mpa，分离釜I压力为14Mpa；，分离釜II压力为6Mpa时，循环萃取2小时，萃取结束后，分别在分离釜I、分离釜II出料口出料，萃取液经减压真空干燥(真空度0.1MPa以下，温度70℃以下)浓缩得到复方雪莲浸膏237g，收率2.96％，干燥失重2.94％。
本发明药物的栓剂的制备将甘油明胶2Kg在水浴中加热溶解，待完全溶解均匀后，加入浸膏500g，搅拌均匀，注模，冷却，脱模，包装即得栓剂，制成1000粒，每粒含浸膏500mg。
本发明药物的泡腾片的制备取200g浸膏，柠檬酸180g 微晶纤维素100g 预胶化淀粉200g 用浸膏作为润湿剂制成颗粒A，于60℃干燥，颗粒A水分＜3％。
另取剩余300g浸膏，碳酸氢钠100g磷酸氢钠250g微晶纤维素50g预胶化淀粉100g用浸膏作为润湿剂制成颗粒B，于60℃干燥，颗粒B水分＜3％。
将A、B二种颗粒与气相硅胶混合均匀，再加入硬脂酸镁，混合5分钟，上机压片，即得泡腾片。压片条件为温度20℃以下，相对湿度50％以下。制成1000片，每片含浸膏500mg本发明药物的胶囊剂的制备取复方雪莲浸膏200g微晶纤维素50g乳糖100g预胶化淀粉139g，混合均匀，用乙醇作润湿剂，制成颗粒，在60℃下干燥，颗粒水分＜3％。20目整粒，加入适量硬脂酸镁、气相硅胶，混合均匀，上机装胶囊，制成1000粒，每粒含浸膏200mg。
权利要求
1.一种妇科炎症外用药物，它是由活性成分和/或药剂上可接受的辅料组成，其特征在于所述的活性成分主要是由下列重量份的植物药的超临界二氧化碳流体萃取物或醇提物或水提物雪莲1～3份、苦参2～4份、蛇床子1～3份、地肤子0～3份。
2.根据权利要求1所说的外用药物，其特征在于活性成分主要是由下列重量份的植物药的超临界二氧化碳流体萃取物雪莲2～2.5份、苦参2～3份、蛇床子1.5～2.5份、地肤子2～3。
3.根据权利要求2所说的外用药物，其特征在于活性成分主要是由下列重量份的植物药的超临界二氧化碳流体萃取物雪莲2份、苦参3份、蛇床子2份、地肤子3份。
4.根据权利要求1所说的外用药物，其特征在于活性成分主要是由下列重量份的植物药的醇提物雪莲1～2份、苦参2～3份、蛇床子2～3份、地肤子1～2份。
5.根据权利要求1所说的外用药物，其特征在于活性成分主要是由下列重量份的植物药的水提物雪莲1～1.5份、苦参3～4份、蛇床子1～3份、地肤子1～2份。
6.根据权利要求1所述的外用药物的制备方法，它包括下列步骤(1)是活性成分的制备；(2)是活性成分加药剂上可接受的辅料按常规外用药物制剂的工艺制成妇科能接受的外用剂型，其特征在于活性成分的制备方法a.是按所述重量配比的雪莲、苦参、蛇床子、地肤子置超临界二氧化碳萃取釜中萃取，条件为萃取温度为30-70℃，萃取压力为20-35Mpa；分离釜的温度为35-70℃，分离釜压力为6-18Mpa；以乙醇、氯仿、丙酮为夹带剂，用CO2循环萃取2-4小时，萃取结束后，在分离釜出料口出料，萃取液经浓缩后，得到浸膏，为超临界二氧化碳流体萃取物密度为0.90～1.05g/ml(25℃)，干燥失重为＜5％；或方法b.是按所述重量配比的雪莲、苦参、蛇床子、地肤子置中药提取锅中，加乙醇加热回流两次，每次加乙醇量以没过药面为宜，合并两次回流液，过滤，滤液浓缩成浸膏，为醇提物；或方法c.是按所述重量配比的雪莲、苦参、蛇床子、地肤子置中药提取锅中，加水煎煮两次，每次加水量以没过药面为宜，合并两次煎液，过滤，滤液浓缩成浸膏。
7.根据权利要求6所述的外用药物的制备方法，其特征在于活性成分的制备方法a.是按所述重量配比的雪莲、苦参、蛇床子、地肤子置超临界二氧化碳萃取釜中萃取，条件为萃取温度为30-70℃，萃取压力为20-35Mpa；分离釜I的温度为45-70℃，分离釜I压力为6-18Mpa；分离釜II温度为35-60℃，分离釜II压力为6-14Mpa，以乙醇、氯仿、丙酮为夹带剂，用CO2循环萃取2-4小时，萃取结束后，分别在分离釜I、分离釜II出料口出料，萃取液经浓缩后，得到浸膏，为超临界二氧化碳流体萃取物密度为0.90～1.05g/ml(25℃)，干燥失重为＜5％。
8.根据权利要求6所述的外用药物的制备方法，其特征在于活性成分的制备方法a、超临界二氧化碳流体萃取的萃取温度为55℃，萃取压力为30Mpa；分离釜I的温度为60℃，分离釜I压力为18Mpa；分离釜II温度为40℃，分离釜II压力为6Mpa；以95％乙醇为夹带剂，用CO2循环萃取3小时。
全文摘要
一种妇科炎症外用药物及其制备方法，涉及来源植物材料的医用配制品及制备方法。本发明的药物是由活性成分和/或药剂上可接受的辅料组成，其活性成分主要是由下列重量份的植物药的超临界二氧化碳流体萃取物或醇提物或水提物雪莲1～3份、苦参2～4份、蛇床子1～3份、地肤子0～3份。本发明所提供的制备方法所得到的外用药物在抗菌、抗炎、抗滴虫方面均具有良好的作用，以活性成分是超临界CO
文档编号A61P15/00GK1486727SQ03139610
公开日2004年4月7日 申请日期2003年6月27日 优先权日2003年6月27日
发明者葛发欢, 李菁, 刘菊妍, 杨敏, 黄晓芬, 史庆龙 申请人:广州汉方现代中药研究开发有限公司
技术领域：
本发明涉及一种妇科炎症外用药物及其制备方法，涉及来源植物材料的医用配制品及制备方法。
背景技术：
妇科炎症常见的有阴道炎、尿道炎、宫颈糜烂、外阴瘙痒、白带异常等，大多数是由于各种细菌或真菌感染引起的，目前常用的外用药物化学合成药以抗菌素类为主，这些药物作用虽快，但许多药物可通过阴道粘摸吸收而又对人体引起一定的毒副作用，有的药物经过动物实验还有一定的致癌作用。抗菌素类药物在用于阴道炎时，很容易使阴道菌群改变，导致菌群失调，进而诱发二重感染。
中药以天然植物为物质基础，毒副作用较小，是在中医理论指导下开发研究的产品，它既有抗菌消炎作用又可帮助维持阴道的正常微生态环境，利于炎症的消除。目前妇科中有关雪莲的中药剂也有开发，如雪莲胶囊，雪莲舒阴洁等，这些都是有许多味药材组成，采用水提或醇提或直接粉碎成粉末使用，这必造成药材的有效成分利用率低下，植物资源浪费，疗效也不能令人满意。
发明内容
人们对疗效更好的治疗妇科炎症的外用中药制剂仍存在需求。
本发明的目的是提供一种有效治疗妇科炎症的外用中药药剂。
本发明的另一个目的是提供该外用中药药剂的制备方法。
为实施本发明的目的所采取的技术方案是本发明的药物是由活性成分和/或药剂上可接受的辅料组成，其活性成分主要是由下列重量份的植物药的超临界二氧化碳流体萃取物或醇提物或水提物雪莲1～3份、苦参2～4份、蛇床子1～3份、地肤子0～3份。
在上述重量份范围内经大量的试验和摸索总结得出的，都具有较好的疗效。雪莲，清热解毒，消炎；苦参，清热燥湿；蛇床子，温外肾阳；地肤子，祛风杀虫止痒。初步的提取工艺研究发现用超临界CO2提取蛇床子、雪莲花等具有有效成分富集等优势。进一步的药效学证明这些提取物能保持或提高这些中药的药理活性，其中蛇床子和雪莲花在抗白念和滴虫方面具有互补性，在此基础上，增加了苦参和地肤子，本药物的组成以雪莲作君药，苦参作臣药，蛇床子、地肤子为佐药。
优选后的活性成分主要是由下列重量份的植物药的超临界二氧化碳流体萃取物雪莲2～2.5份、苦参2～3份、蛇床子1.5～2.5份、地肤子2～3；最佳的活性成分主要是由下列重量份的植物药的超临界二氧化碳流体萃取物雪莲2份、苦参3份、蛇床子2份、地肤子3份。
当活性成分采用醇提物时，由下列重量份的植物药的醇提物雪莲1～2份、苦参2～3份、蛇床子2～3份、地肤子1～2份。
当活性成分采用水提物时，由下列重量份的植物药的水提物雪莲1～1.5份、苦参3～4份、蛇床子1～3份、地肤子1～2份。
本发明的药物的制备方法，它包括下列步骤(1)是活性成分的制备；(2)是活性成分加药剂上可接受的辅料按常规外用药物制剂的工艺制成妇科能接受的外用剂型，其特征在于活性成分的制备方法a.是按所述重量配比的雪莲、苦参、蛇床子、地肤子置超临界二氧化碳萃取釜中萃取，条件为萃取温度为30-70℃，萃取压力为20-35Mpa；分离釜的温度为35-70℃，分离釜压力为6-18Mpa；以乙醇、氯仿、丙酮为夹带剂，用CO2循环萃取2-4小时，萃取结束后，在分离釜出料口出料，萃取液经浓缩后，得到浸膏，为超临界二氧化碳流体萃取物密度为0.90～1.05g/ml(25℃)，干燥失重为＜5％；或方法b.是按所述重量配比的雪莲、苦参、蛇床子、地肤子置中药提取锅中，加乙醇加热回流两次，每次加乙醇量以没过药面为宜，合并两次回流液，过滤，滤液浓缩成浸膏，为醇提物；或方法c.是按所述重量配比的雪莲、苦参、蛇床子、地肤子置中药提取锅中，加水煎煮两次，每次加水量以没过药面为宜，合并两次煎液，过滤，滤液浓缩成浸膏。
优选的活性成分的制备方法a.是按所述重量配比的雪莲、苦参、蛇床子、地肤子置超临界二氧化碳萃取釜中萃取，萃取条件为萃取温度为30～70℃，萃取压力为20～35Mpa；分离釜I温度为45～70℃，分离釜I压力为6～18Mpa；分离釜II温度为35～60℃，分离釜II压力为6～14Mpa；以乙醇、丙酮、氯仿为夹带剂，用CO2循环萃取2-4小时，萃取结束后，分别在分离釜I、分离釜II出料口出料，萃取液经浓缩后，得到浸膏为超临界二氧化碳流体萃取物，浸膏密度为0.90～1.05g/ml(25℃)，干燥失重为＜5％。
最佳的活性成分的制备方法a、超临界二氧化碳流体萃取的优选条件是萃取温度为55℃，萃取压力为30Mpa；分离釜I的温度为60℃，分离釜I压力为18Mpa；分离釜II温度为40℃，分离釜II压力为6Mpa；以95％乙醇为夹带剂，用CO2循环萃取3小时。收率为3.5％，浸膏密度为0.90～1.05g/ml(25℃)，干燥失重为＜5％。
本发明的活性组分可以加入制备不同剂型时所需的常规辅料，如常用甘油明胶，微晶纤维素等以常规的外用药物制剂的工艺制成妇科能接受的外用剂型，如栓剂、泡腾片、胶囊剂、喷雾剂等。
栓剂采用如下原料配比，活性成分的浸膏1份、甘油明胶4份。将甘油明胶在水浴中加热溶解，待完全溶解均匀后，加入浸膏，搅拌均匀，注模，冷却，包装即得栓剂。
泡腾片采用如下原料配比，活性成分的浸膏3～5份、柠檬酸0.5份、碳酸氢钠0.5份、其它赋形剂适量，其制备工艺是取约一半量的浸膏、柠檬酸、其它赋形剂，用浸膏作为润湿剂制成酸性颗粒A，干燥，颗粒水分＜3％，取剩余量浸膏，碳酸氢钠0.5份、其它赋形剂，用浸膏作为润湿剂制成碱性颗粒B，干燥，颗粒B水分＜3％。将A、B二种颗粒混匀，加入滑料、助流剂后压片，即得泡腾片。
胶囊剂采用如下原料配比，活性成分的浸膏4-5份、用微晶纤维素等赋形剂，用浸膏作润湿剂，制成颗粒，颗粒加入滑料混匀，装胶囊即得。
用本发明提供的制备方法得到的活性成分进行药效试验。
试验样品A、为超临界CO提取浸膏，1g浸膏相当于34.4g生药量。
B、为超临界CO提取浸膏，1g浸膏相当于30.9g生药量。
C、为超临界CO提取浸膏，1g浸膏相当于32.8g生药量。
D、为醇提取浸膏，1g浸膏相当于5.88g生药量。
E、为醇提取浸膏，1g浸膏相当于6.70g生药量。
F、为水提取浸膏，1g浸膏相当于4.10g生药量。
G、为水提取浸膏，1g浸膏相当于4.35g生药量。
表样品A、B、C、D、E、F、G中药材组成组 分样品雪莲(份)苦参(份)蛇床子(份)地肤子(份)A1 223B2 420C1.5 31.5 2D1 331E2 213F1 421G1.5 321.5一、对阴道滴虫的体外抑制作用试验滴虫培养基的制法(见“人体寄生虫学”第二版赵慰先主编人民卫生出版社1993)试验方法滴虫液的配制取显微镜观察有活动阴道滴虫的阴道分必物，加入上述培养液中，(每10ml培养液中加入青霉素、链霉素各1mg以抑制其他细菌生长)37℃增殖培养48小时，取培养液，用白细胞计数器于显微镜下计数，根据计数结果将其配成含活虫数为105个/ml的悬液。
药物体外抑制滴虫浓度的测定将药液0.2ml加入1.8ml培养基(含中药2560ug/ml，含甲硝唑128ug/ml)倍比稀。于药液中加入浓度为105个/ml滴虫液0.1ml并以2％的无水乙醇作空白对照及无药的滴虫阴性对照，37℃培养24小时，取培养液于显微镜下观察结果，以培养液中无活动滴虫的最小药物浓度为其抑制滴虫的浓度。
试验结果表抑制滴虫生长的最低药物浓度(ug/ml) 二、体外抑菌试验试验时按生药含量用融化的50℃的M-H琼脂培养基或沙氏培养基从1000mg/ml进行二倍稀释成1000mg/ml、500mg/ml、125mg/ml、62.5mg/ml、____2.0mg/ml的系列含药平皿待用。
试验菌株临床分离致病菌金黄色葡萄球菌18株，表皮葡萄球菌18株，大肠埃希菌5株，白色念珠菌30株，共计71株。
标准质控菌株 金葡球菌ATCC25923、金葡球菌29213、大肠埃希菌ATCC25922试验方法采用琼脂二倍稀释法测定A-D等样品的最小抑菌浓度(MIC值)。用多点接种仪将细菌接种子含不同药物浓度的琼脂平皿表面，每点含菌量约为105CFU/ml，37℃孵育18~20小时，以无细菌生长平皿培养基中所含药物的最低浓度为药物对该菌的最低抑菌浓度(MIC值)。
试验结果表A-G等7个中药7种(71株)菌株的体外抗菌作用(X±SD)(mg/ml)
三、抗炎试验试验试剂与动物致炎剂 巴豆油，系棕色油状物液体，药用级，批号000309，由江西吉水县华宝天然药用油厂生产，用前用乙醇∶水∶乙醚，25∶2∶70混合溶媒配制成1％浓度备用。
浸膏使用前用10％吐温80液稀释至浓度为80％的液体。
健康昆明种小鼠，雄性，体重25-30克，由四川抗菌素工业研究所动物中心提供，饲养环境温度21-22℃，湿度56-65％。
试验方法每次试验将同批小鼠随机分组，用1％巴豆油致炎造摸(30ul/右耳)，造摸后1小时于肿胀耳上涂抹用药，每耳涂抹20ul样液，造摸后2小时追加一次用药，造摸后4小时处死动物，取二耳，用37℃生理盐水漂洗净耳壳上残留药渣，滤纸吸干水分，再用直径8mm打孔器冲下二耳圆片，精密称重，左右二耳片重量之差为肿胀度(mg)，再用下公式计算肿胀百分率(％)和肿胀抑制率(％) 试验结果表A-G等7个中药的体外抗炎作用样品号动物数(只) 肿胀度(mg) 肿胀率(％) 肿胀抑制率(％)A 16 61.2±15.0 10.1±2.5**35.9B 16 51.5±15.6 9.1±2.8**42.0C 16 60.8±25.3 10.3±4.0**38.7D 16 77.7±21.6 12.6±2.819.7E 16 13.5±3.74 0.87±0.23 17.5F 16 14.6±4.97 0.93±0.32 9.1G 16 17.0±6.15 1.12±0.42 1.4药效试验结果复方雪莲样品A、B、C浸膏在抗菌、抗炎、抗滴虫方面均具有良好的作用；醇提样品D、E浸膏或水提样品F、G浸膏在抗菌方面具有良好的作用但作用弱于超临界提样品A、B、C。
本发明的有益效果从上述试验证明用本发明所提过的制备方法所得到的外用药物在抗菌、抗炎、抗滴虫方面均具有良好的作用，以活性成分是超临界CO2提取的样品效果最佳，醇提样品或水提样品在抗菌方面具有良好的作用但作用弱于超临界提样品。
以下通过实施例来进一步阐述本发明的技术方案。
实施例1称取雪莲1Kg、苦参4Kg、蛇床子2Kg、地肤子1Kg置5LHA-9805型超临界萃取釜中萃取，对萃取釜、分离釜I、分离釜II、储罐分别进行加热或冷却，当萃取釜达到温度为45℃，分离釜I温度为60℃，分离釜II温度为40℃时，开启CO2钢瓶，通过高压泵对系统进行加压，打入适量乙醇为夹带剂，萃取釜压力达到35Mpa，分离釜I压力为14Mpa；，分离釜II压力为6Mpa时，循环萃取2小时，萃取结束后，分别在分离釜I、分离釜II出料口出料，萃取液经减压真空干燥(真空度0.1MPa以下，温度70℃以下)浓缩得到复方雪莲浸膏240g，收率3.0％，干燥失重4.2％。
实施例2称取雪莲1.5Kg、苦参3Kg、蛇床子2Kg、地肤子1.5Kg置中药提取锅中，加10倍量水煎煮2小时，过滤，药渣再加5倍量水煎煮1小时，过滤，合并两次煎滤液，滤液减压真空干燥(真空度0.1MPa以下，温度70℃以下)浓缩成浸膏2.6Kg，浸膏干燥失重为45％。
实施例3、称取雪莲2Kg、苦参2Kg、蛇床子1Kg、地肤子3Kg，置中药提取锅中，加10倍量乙醇回流小时，过滤，药渣再加乙醇回流1小时，过滤，合并两次滤液，滤液减压真空干燥(真空度0.1MPa以下，温度70℃以下)浓缩成浸膏，得1.7kg，浸膏干燥失重为46％。
实施例4、称取雪莲1.5Kg、苦参3Kg、蛇床子1.5Kg、地肤子2Kg置5LHA-9805型超临界萃取釜中萃取，对萃取釜、分离釜I、分离釜II、储罐分别进行加热或冷却，当萃取釜达到温度为45℃，分离釜I温度为60℃，分离釜II温度为40℃，时，开启CO2钢瓶，通过高压泵对系统进行加压，打入适量乙醇为夹带剂，萃取釜压力达到35Mpa，分离釜I压力为14Mpa；，分离釜II压力为6Mpa时，循环萃取2小时，萃取结束后，分别在分离釜I、分离釜II出料口出料，萃取液经减压真空干燥(真空度0.1MPa以下，温度70℃以下)浓缩得到复方雪莲浸膏233g，收率2.91％，干燥失重3.2％。
实施例5、称取雪莲2Kg、苦参4Kg、蛇床子2Kg置5LHA-9805型超临界萃取釜中萃取，对萃取釜、分离釜I、分离釜II、储罐分别进行加热或冷却，当萃取釜达到温度为45℃，分离釜I温度为60℃，分离釜II温度为40℃，时，开启CO2钢瓶，通过高压泵对系统进行加压，打入适量乙醇为夹带剂，萃取釜压力达到35Mpa，分离釜I压力为14Mpa；，分离釜II压力为6Mpa时，循环萃取2小时，萃取结束后，分别在分离釜I、分离釜II出料口出料，萃取液经减压真空干燥(真空度0.1MPa以下，温度70℃以下)浓缩得到复方雪莲浸膏237g，收率2.96％，干燥失重2.94％。
本发明药物的栓剂的制备将甘油明胶2Kg在水浴中加热溶解，待完全溶解均匀后，加入浸膏500g，搅拌均匀，注模，冷却，脱模，包装即得栓剂，制成1000粒，每粒含浸膏500mg。
本发明药物的泡腾片的制备取200g浸膏，柠檬酸180g 微晶纤维素100g 预胶化淀粉200g 用浸膏作为润湿剂制成颗粒A，于60℃干燥，颗粒A水分＜3％。
另取剩余300g浸膏，碳酸氢钠100g磷酸氢钠250g微晶纤维素50g预胶化淀粉100g用浸膏作为润湿剂制成颗粒B，于60℃干燥，颗粒B水分＜3％。
将A、B二种颗粒与气相硅胶混合均匀，再加入硬脂酸镁，混合5分钟，上机压片，即得泡腾片。压片条件为温度20℃以下，相对湿度50％以下。制成1000片，每片含浸膏500mg本发明药物的胶囊剂的制备取复方雪莲浸膏200g微晶纤维素50g乳糖100g预胶化淀粉139g，混合均匀，用乙醇作润湿剂，制成颗粒，在60℃下干燥，颗粒水分＜3％。20目整粒，加入适量硬脂酸镁、气相硅胶，混合均匀，上机装胶囊，制成1000粒，每粒含浸膏200mg。
权利要求
1.一种妇科炎症外用药物，它是由活性成分和/或药剂上可接受的辅料组成，其特征在于所述的活性成分主要是由下列重量份的植物药的超临界二氧化碳流体萃取物或醇提物或水提物雪莲1～3份、苦参2～4份、蛇床子1～3份、地肤子0～3份。
2.根据权利要求1所说的外用药物，其特征在于活性成分主要是由下列重量份的植物药的超临界二氧化碳流体萃取物雪莲2～2.5份、苦参2～3份、蛇床子1.5～2.5份、地肤子2～3。
3.根据权利要求2所说的外用药物，其特征在于活性成分主要是由下列重量份的植物药的超临界二氧化碳流体萃取物雪莲2份、苦参3份、蛇床子2份、地肤子3份。
4.根据权利要求1所说的外用药物，其特征在于活性成分主要是由下列重量份的植物药的醇提物雪莲1～2份、苦参2～3份、蛇床子2～3份、地肤子1～2份。
5.根据权利要求1所说的外用药物，其特征在于活性成分主要是由下列重量份的植物药的水提物雪莲1～1.5份、苦参3～4份、蛇床子1～3份、地肤子1～2份。
6.根据权利要求1所述的外用药物的制备方法，它包括下列步骤(1)是活性成分的制备；(2)是活性成分加药剂上可接受的辅料按常规外用药物制剂的工艺制成妇科能接受的外用剂型，其特征在于活性成分的制备方法a.是按所述重量配比的雪莲、苦参、蛇床子、地肤子置超临界二氧化碳萃取釜中萃取，条件为萃取温度为30-70℃，萃取压力为20-35Mpa；分离釜的温度为35-70℃，分离釜压力为6-18Mpa；以乙醇、氯仿、丙酮为夹带剂，用CO2循环萃取2-4小时，萃取结束后，在分离釜出料口出料，萃取液经浓缩后，得到浸膏，为超临界二氧化碳流体萃取物密度为0.90～1.05g/ml(25℃)，干燥失重为＜5％；或方法b.是按所述重量配比的雪莲、苦参、蛇床子、地肤子置中药提取锅中，加乙醇加热回流两次，每次加乙醇量以没过药面为宜，合并两次回流液，过滤，滤液浓缩成浸膏，为醇提物；或方法c.是按所述重量配比的雪莲、苦参、蛇床子、地肤子置中药提取锅中，加水煎煮两次，每次加水量以没过药面为宜，合并两次煎液，过滤，滤液浓缩成浸膏。
7.根据权利要求6所述的外用药物的制备方法，其特征在于活性成分的制备方法a.是按所述重量配比的雪莲、苦参、蛇床子、地肤子置超临界二氧化碳萃取釜中萃取，条件为萃取温度为30-70℃，萃取压力为20-35Mpa；分离釜I的温度为45-70℃，分离釜I压力为6-18Mpa；分离釜II温度为35-60℃，分离釜II压力为6-14Mpa，以乙醇、氯仿、丙酮为夹带剂，用CO2循环萃取2-4小时，萃取结束后，分别在分离釜I、分离釜II出料口出料，萃取液经浓缩后，得到浸膏，为超临界二氧化碳流体萃取物密度为0.90～1.05g/ml(25℃)，干燥失重为＜5％。
8.根据权利要求6所述的外用药物的制备方法，其特征在于活性成分的制备方法a、超临界二氧化碳流体萃取的萃取温度为55℃，萃取压力为30Mpa；分离釜I的温度为60℃，分离釜I压力为18Mpa；分离釜II温度为40℃，分离釜II压力为6Mpa；以95％乙醇为夹带剂，用CO2循环萃取3小时。
全文摘要
一种妇科炎症外用药物及其制备方法，涉及来源植物材料的医用配制品及制备方法。本发明的药物是由活性成分和/或药剂上可接受的辅料组成，其活性成分主要是由下列重量份的植物药的超临界二氧化碳流体萃取物或醇提物或水提物雪莲1～3份、苦参2～4份、蛇床子1～3份、地肤子0～3份。本发明所提供的制备方法所得到的外用药物在抗菌、抗炎、抗滴虫方面均具有良好的作用，以活性成分是超临界CO
文档编号A61P15/00GK1486727SQ03139610
公开日2004年4月7日 申请日期2003年6月27日 优先权日2003年6月27日
发明者葛发欢, 李菁, 刘菊妍, 杨敏, 黄晓芬, 史庆龙 申请人:广州汉方现代中药研究开发有限公司
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