魁蚶中多肽蛋白类活性物质的用途及其提取方法
专利名称：魁蚶中多肽蛋白类活性物质的用途及其提取方法
技术领域：
本发明公开了一种魁蚶(Arca inflate Reeve；Scapharcabroughtonii)中多肽蛋白类活性物质的用途及其提取方法。
上述文献报道的方法中使用的(NH)2SO4沉淀步骤来提取蛋白，得到的只是粗总蛋白，其中含有多糖等多种杂质，是多种成分的混合物。所得提取物不能直接用于纯度要求高的用途中。
本发明是通过如下的技术方案来实现的。将魁蚶内容物清洗后，按一定质量比例加入蒸馏水，以5000r/min匀浆3min，离心去渣，取上清；对上清进行离子交换柱层析，分别收集各峰后，脱盐，再经凝胶柱层析分离，按分子量不同得到各种多肽蛋白类活性物质。
将该多肽蛋白类活性物质，配以适当的添加剂，制成一定的剂型的药物，可用于抑制肿瘤。
用本发明的多肽蛋白类活性物质制成的抗肿瘤药物，可有79.60％的抑瘤率，同时因为是天然生物提取物质，具有低毒的特点。本发明的魁蚶多肽蛋白类活性物质的提取方法，直接将魁蚶蛋白进行离子交换柱层析，脱盐后，再进行凝胶柱层析分离，可达到将多肽蛋白提取物在分离提取的同时得到纯化的效果，更好地适用于医药用途。
取上述蛋白提取物进行荷瘤小鼠的体内肿瘤实验，取雄性昆明种小鼠，体重19～21g，随机分组，每组10只。每只小鼠左腋下接种0.2mlS180艾氏腹水癌的瘤液。次日开始以生理盐水为阴性对照，5-氟尿嘧啶为阳性对照进行腹腔注射，注射8天后称重，解剖皮下瘤块，称重。实体瘤的疗效以瘤重抑制百分率表示，计算公式如下瘤重抑制率％＝(1-T/C)×100％T治疗组平均瘤重C阴性对照组平均瘤重药物对小鼠S180肿瘤的抑制作用组别给药剂量 给药途径 动物体重(g)平均瘤重(g) 抑瘤率 给药前后及天数药前 药后 (％) 体重变化生理盐水20ml/kg ip×8 20.74 23.65 1.61样品250mg/kg ip×8 20.23 17.47 0.33 79.60 -13.64％5-氟尿嘧啶 10ml/kg ip×8 19.96 15.30.37776.61 -23.35％实验结果表明，本发明提取的活性蛋白的抑瘤率高达79.60％，且其毒性低于阳性对照5-氟尿嘧啶组(样品组小鼠实验前后体重下降明显低于5-氟尿嘧啶组，说明其毒性较低)；同时，该制剂对体外肿瘤细胞的培养也有较高的抑制率。因此，本发明的提取物具有高效低毒，制作过程无污染等特点，有望为临床提供一种安全、有效、质量可控的新型抗肿瘤药物。
权利要求
1.一种魁蚶(Arca inflate Reeve；Scapharca broughtonii)中多肽蛋白类活性物质的用途其特征是，该多肽蛋白类活性物质用于制备抑制肿瘤的药物。
2.一种魁蚶(Arca inflate Reeve；Scapharca broughtonii)中多肽蛋白类活性物质的提取方法，其特征是将魁蚶内容物清洗后，按一定质量比例加入蒸馏水，以5000r/min匀浆3min，去渣，取上清；对上清进行离子交换柱层析；分别收集各峰后，脱盐；再经凝胶柱层析分离，得到多肽蛋白类活性物质。
3.按权利要求2所述的魁蚶中多肽蛋白类活性物质的提取方法，其特征是所述的魁蚶的内容物清洗步骤是先用4℃常水清洗3次后，再用4℃的蒸馏水清洗两遍；所述的蒸馏水加入的质量比例为1∶3。
全文摘要
本发明公开了一种魁蚶(Arca inflate Reeve；Scapharca broughtonii)中多肽蛋白类活性物质的用途及提取方法，提取方法直接将提取物进行离子交换柱层析、脱盐后，再经凝胶柱层析分离，可将多肽蛋白分离纯化；将上述活性蛋白制成抗肿瘤药物，可有79.60％的抑瘤率，且低毒低。
文档编号A61K38/17GK1478544SQ0313976
公开日2004年3月3日 申请日期2003年7月9日 优先权日2003年7月9日
发明者于荣敏, 严春艳 申请人:暨南大学
技术领域：
本发明公开了一种魁蚶(Arca inflate Reeve；Scapharcabroughtonii)中多肽蛋白类活性物质的用途及其提取方法。
上述文献报道的方法中使用的(NH)2SO4沉淀步骤来提取蛋白，得到的只是粗总蛋白，其中含有多糖等多种杂质，是多种成分的混合物。所得提取物不能直接用于纯度要求高的用途中。
本发明是通过如下的技术方案来实现的。将魁蚶内容物清洗后，按一定质量比例加入蒸馏水，以5000r/min匀浆3min，离心去渣，取上清；对上清进行离子交换柱层析，分别收集各峰后，脱盐，再经凝胶柱层析分离，按分子量不同得到各种多肽蛋白类活性物质。
将该多肽蛋白类活性物质，配以适当的添加剂，制成一定的剂型的药物，可用于抑制肿瘤。
用本发明的多肽蛋白类活性物质制成的抗肿瘤药物，可有79.60％的抑瘤率，同时因为是天然生物提取物质，具有低毒的特点。本发明的魁蚶多肽蛋白类活性物质的提取方法，直接将魁蚶蛋白进行离子交换柱层析，脱盐后，再进行凝胶柱层析分离，可达到将多肽蛋白提取物在分离提取的同时得到纯化的效果，更好地适用于医药用途。
取上述蛋白提取物进行荷瘤小鼠的体内肿瘤实验，取雄性昆明种小鼠，体重19～21g，随机分组，每组10只。每只小鼠左腋下接种0.2mlS180艾氏腹水癌的瘤液。次日开始以生理盐水为阴性对照，5-氟尿嘧啶为阳性对照进行腹腔注射，注射8天后称重，解剖皮下瘤块，称重。实体瘤的疗效以瘤重抑制百分率表示，计算公式如下瘤重抑制率％＝(1-T/C)×100％T治疗组平均瘤重C阴性对照组平均瘤重药物对小鼠S180肿瘤的抑制作用组别给药剂量 给药途径 动物体重(g)平均瘤重(g) 抑瘤率 给药前后及天数药前 药后 (％) 体重变化生理盐水20ml/kg ip×8 20.74 23.65 1.61样品250mg/kg ip×8 20.23 17.47 0.33 79.60 -13.64％5-氟尿嘧啶 10ml/kg ip×8 19.96 15.30.37776.61 -23.35％实验结果表明，本发明提取的活性蛋白的抑瘤率高达79.60％，且其毒性低于阳性对照5-氟尿嘧啶组(样品组小鼠实验前后体重下降明显低于5-氟尿嘧啶组，说明其毒性较低)；同时，该制剂对体外肿瘤细胞的培养也有较高的抑制率。因此，本发明的提取物具有高效低毒，制作过程无污染等特点，有望为临床提供一种安全、有效、质量可控的新型抗肿瘤药物。
权利要求
1.一种魁蚶(Arca inflate Reeve；Scapharca broughtonii)中多肽蛋白类活性物质的用途其特征是，该多肽蛋白类活性物质用于制备抑制肿瘤的药物。
2.一种魁蚶(Arca inflate Reeve；Scapharca broughtonii)中多肽蛋白类活性物质的提取方法，其特征是将魁蚶内容物清洗后，按一定质量比例加入蒸馏水，以5000r/min匀浆3min，去渣，取上清；对上清进行离子交换柱层析；分别收集各峰后，脱盐；再经凝胶柱层析分离，得到多肽蛋白类活性物质。
3.按权利要求2所述的魁蚶中多肽蛋白类活性物质的提取方法，其特征是所述的魁蚶的内容物清洗步骤是先用4℃常水清洗3次后，再用4℃的蒸馏水清洗两遍；所述的蒸馏水加入的质量比例为1∶3。
全文摘要
本发明公开了一种魁蚶(Arca inflate Reeve；Scapharca broughtonii)中多肽蛋白类活性物质的用途及提取方法，提取方法直接将提取物进行离子交换柱层析、脱盐后，再经凝胶柱层析分离，可将多肽蛋白分离纯化；将上述活性蛋白制成抗肿瘤药物，可有79.60％的抑瘤率，且低毒低。
文档编号A61K38/17GK1478544SQ0313976
公开日2004年3月3日 申请日期2003年7月9日 优先权日2003年7月9日
发明者于荣敏, 严春艳 申请人:暨南大学
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