甲醛固定同种异体骨移植材料的制备的制作方法
专利名称：甲醛固定同种异体骨移植材料的制备的制作方法
技术领域：
本发明是利用甲醛固定骨加工处理为同种异体骨移植材料，涉及组织工程学、生物材料学和骨科学领域。
背景技术：
骨缺损的修复几个世纪以来一直是外科工作者不断研究的重要课题。自体骨移植虽然得到普遍的认同，但是大范围的骨缺损仍然没有很好的替代物用于修复和治疗。目前的研究结果皆表明天然骨衍生材料具有较好的骨传导和骨诱导活性，而异种骨衍生材料显然较同种异体衍生材料具有较强烈的排斥反应，且同种异体骨衍生材料和自体骨更相近，具有人骨的三维孔隙结构，并且有更好的生物力学性质和生物相容性，并在骨传导和骨诱导能力上更强。但是目前所用的同种异体衍生材料都是取自新鲜人骨组织进行处理，这样材料的来源主要是死亡的尸体、意外截除的肢体。但是来源相对较少，且不能保证骨组织的质量，有传播疾病的风险。
甲醛是一种廉价的、有效的组织防腐固定剂，且能够彻底的杀灭病原体和具有去抗原性的作用。
发明内容
本发明利用甲醛固定后的骨加工处理适宜临床修复骨缺损的同种异体骨移植材料。
本材料的制备主要有取材、脱甲醛、去脂去蛋白及干燥与消毒几个步骤，可以表示如下取经10％福尔马林溶液固定超过6个月的成人尸体骨标本——→剔除软组织——→用清水冲洗骨组织表面——→切成骨粒或的骨条——→去离子水中浸泡24小时——→SS溶液(5～15％的亚硫酸氢钠和1～3％氢氧化钠的混和液)中浸泡48小时——→去离子水冲洗并浸泡24小时——→20％过氧化氢溶液浸泡38℃水浴24小时——→离心去除过滤物——→超声去脂处理12小时——→0.5％胰蛋白酶37℃消化12小时——→离心——→20％过氧化氢溶液再浸泡38℃水浴24小时——→离心——→超声再去脂12小时——→0.5％胰蛋白酶37℃再消化12小时——→离心——→真空干燥——→辐照灭菌——→成品。
具体实施例方式
〔实施例1〕取骨标本并剔除软组织，用清水将骨组织表面冲洗干净，将骨组织切成5×5×5mm的骨粒，放入去离子水中浸泡后将骨粒放入SS溶液(5％的亚硫酸氢钠和1％氢氧化钠的混和液)中浸泡48小时后取出，用去离子水冲洗并浸泡，用20％过氧化氢溶液浸泡骨粒，水浴后离心去除过滤物，超声去脂，胰蛋白酶消化骨粒后离心，再用20％过氧化氢溶液浸泡，水浴后离心，超声去脂，胰蛋白酶消化再离心，真空干燥后辐照灭菌，从而得到陈旧骨来源的同种异体衍生骨移植骨粒。通过对残余福尔马林的检测实验结果的分析显示材料的浸提液没有使2，4-二硝基苯肼检测液出现阳性反应，而含有2.2μg甲醛的对照液在12小时后使得检测液出现阳性反应。以蒸馏水为空白对照液，而材料浸提液显色后经过分光光度计测定吸光度三次均为0，说明该材料所含甲醛含量和空白对照蒸馏水没有显著性区别，该试验结果可以说明本新型骨移植材料基本不含甲醛。
〔实施例2〕取骨标本，剔除软组织，用清水将骨组织表面冲洗干净，将骨组织切成5×5×40mm的骨条，放入去离子水中浸泡后将放入SS溶液(15％的亚硫酸氢钠和3％氢氧化钠的混和液)中浸泡48小时后取出，用去离子水冲洗并浸泡，用20％过氧化氢溶液浸泡骨粒，水浴后离心去除过滤物，超声去脂处理，胰蛋白酶消化骨粒后离心，再用20％过氧化氢溶液浸泡，水浴后离心，超声去脂，胰蛋白酶消化后再离心，真空干燥，辐照灭菌，得到陈旧骨来源的同种异体衍生骨移植骨粒。通过对残余福尔马林的检测实验结果的分析显示材料的浸提液没有使2，4-二硝基苯肼检测液出现阳性反应，而含有2.2μg甲醛的对照液在12小时后使得检测液出现阳性反应。以蒸馏水为空白对照液，而材料浸提液显色后经过分光光度计测定吸光度三次均为0，说明该材料所含甲醛含量和空白对照蒸馏水没有显著性区别，该试验结果可以说明本新型骨移植材料基本不含甲醛。
权利要求
1.一种新型骨缺损修复移植材料，由经福尔马林防腐过的人同种异体骨制成，经脱甲醛、脱脂、脱蛋白及辐照消毒后包装成品。
2.制备专利权利要求1所述的新型骨缺损修复用同种异体骨移植材料的方法和工艺流程。
3.根据专利要求1、2进行实验和检测所得到的相关数据资料。
全文摘要
本发明是利用甲醛固定同种异体骨加工处理为同种异体骨移植材料，涉及组织工程学、生物材料学和骨科学领域。本发明利用甲醛固定后的同种异体骨加工处理适宜临床修复骨缺损的骨移植材料。本材料的制备主要有取材、脱甲醛、去脂去蛋白及干燥与消毒几个步骤,可以表示如下取经10％福尔马林溶液固定超过6个月的成人尸体骨标本→剔除软组织→用清水冲洗骨组织表面→切成骨粒或骨条→去离子水中浸泡24小时→SS溶液(5～15％的亚硫酸氢钠和1～3％氢氧化钠的混和液)中浸泡48小时→去离子水冲洗并浸泡24小时→20％过氧化氢溶液浸泡38℃水浴24小时→离心去除过滤物→超声去脂处理12小时→0.5％胰蛋白酶37℃消化12小时→离心→20％过氧化氢溶液再浸泡38℃水浴24小时→离心→超声再去脂12小时→0.5％胰蛋白酶37℃再消化12小时→离心→真空干燥→辐照灭菌→成品。
文档编号A61L27/00GK1569249SQ03139790
公开日2005年1月26日 申请日期2003年7月11日 优先权日2003年7月11日
发明者陆云涛, 戴景兴, 原林 申请人:中国人民解放军第一军医大学基础部
技术领域：
本发明是利用甲醛固定骨加工处理为同种异体骨移植材料，涉及组织工程学、生物材料学和骨科学领域。
背景技术：
骨缺损的修复几个世纪以来一直是外科工作者不断研究的重要课题。自体骨移植虽然得到普遍的认同，但是大范围的骨缺损仍然没有很好的替代物用于修复和治疗。目前的研究结果皆表明天然骨衍生材料具有较好的骨传导和骨诱导活性，而异种骨衍生材料显然较同种异体衍生材料具有较强烈的排斥反应，且同种异体骨衍生材料和自体骨更相近，具有人骨的三维孔隙结构，并且有更好的生物力学性质和生物相容性，并在骨传导和骨诱导能力上更强。但是目前所用的同种异体衍生材料都是取自新鲜人骨组织进行处理，这样材料的来源主要是死亡的尸体、意外截除的肢体。但是来源相对较少，且不能保证骨组织的质量，有传播疾病的风险。
甲醛是一种廉价的、有效的组织防腐固定剂，且能够彻底的杀灭病原体和具有去抗原性的作用。
发明内容
本发明利用甲醛固定后的骨加工处理适宜临床修复骨缺损的同种异体骨移植材料。
本材料的制备主要有取材、脱甲醛、去脂去蛋白及干燥与消毒几个步骤，可以表示如下取经10％福尔马林溶液固定超过6个月的成人尸体骨标本——→剔除软组织——→用清水冲洗骨组织表面——→切成骨粒或的骨条——→去离子水中浸泡24小时——→SS溶液(5～15％的亚硫酸氢钠和1～3％氢氧化钠的混和液)中浸泡48小时——→去离子水冲洗并浸泡24小时——→20％过氧化氢溶液浸泡38℃水浴24小时——→离心去除过滤物——→超声去脂处理12小时——→0.5％胰蛋白酶37℃消化12小时——→离心——→20％过氧化氢溶液再浸泡38℃水浴24小时——→离心——→超声再去脂12小时——→0.5％胰蛋白酶37℃再消化12小时——→离心——→真空干燥——→辐照灭菌——→成品。
具体实施例方式
〔实施例1〕取骨标本并剔除软组织，用清水将骨组织表面冲洗干净，将骨组织切成5×5×5mm的骨粒，放入去离子水中浸泡后将骨粒放入SS溶液(5％的亚硫酸氢钠和1％氢氧化钠的混和液)中浸泡48小时后取出，用去离子水冲洗并浸泡，用20％过氧化氢溶液浸泡骨粒，水浴后离心去除过滤物，超声去脂，胰蛋白酶消化骨粒后离心，再用20％过氧化氢溶液浸泡，水浴后离心，超声去脂，胰蛋白酶消化再离心，真空干燥后辐照灭菌，从而得到陈旧骨来源的同种异体衍生骨移植骨粒。通过对残余福尔马林的检测实验结果的分析显示材料的浸提液没有使2，4-二硝基苯肼检测液出现阳性反应，而含有2.2μg甲醛的对照液在12小时后使得检测液出现阳性反应。以蒸馏水为空白对照液，而材料浸提液显色后经过分光光度计测定吸光度三次均为0，说明该材料所含甲醛含量和空白对照蒸馏水没有显著性区别，该试验结果可以说明本新型骨移植材料基本不含甲醛。
〔实施例2〕取骨标本，剔除软组织，用清水将骨组织表面冲洗干净，将骨组织切成5×5×40mm的骨条，放入去离子水中浸泡后将放入SS溶液(15％的亚硫酸氢钠和3％氢氧化钠的混和液)中浸泡48小时后取出，用去离子水冲洗并浸泡，用20％过氧化氢溶液浸泡骨粒，水浴后离心去除过滤物，超声去脂处理，胰蛋白酶消化骨粒后离心，再用20％过氧化氢溶液浸泡，水浴后离心，超声去脂，胰蛋白酶消化后再离心，真空干燥，辐照灭菌，得到陈旧骨来源的同种异体衍生骨移植骨粒。通过对残余福尔马林的检测实验结果的分析显示材料的浸提液没有使2，4-二硝基苯肼检测液出现阳性反应，而含有2.2μg甲醛的对照液在12小时后使得检测液出现阳性反应。以蒸馏水为空白对照液，而材料浸提液显色后经过分光光度计测定吸光度三次均为0，说明该材料所含甲醛含量和空白对照蒸馏水没有显著性区别，该试验结果可以说明本新型骨移植材料基本不含甲醛。
权利要求
1.一种新型骨缺损修复移植材料，由经福尔马林防腐过的人同种异体骨制成，经脱甲醛、脱脂、脱蛋白及辐照消毒后包装成品。
2.制备专利权利要求1所述的新型骨缺损修复用同种异体骨移植材料的方法和工艺流程。
3.根据专利要求1、2进行实验和检测所得到的相关数据资料。
全文摘要
本发明是利用甲醛固定同种异体骨加工处理为同种异体骨移植材料，涉及组织工程学、生物材料学和骨科学领域。本发明利用甲醛固定后的同种异体骨加工处理适宜临床修复骨缺损的骨移植材料。本材料的制备主要有取材、脱甲醛、去脂去蛋白及干燥与消毒几个步骤,可以表示如下取经10％福尔马林溶液固定超过6个月的成人尸体骨标本→剔除软组织→用清水冲洗骨组织表面→切成骨粒或骨条→去离子水中浸泡24小时→SS溶液(5～15％的亚硫酸氢钠和1～3％氢氧化钠的混和液)中浸泡48小时→去离子水冲洗并浸泡24小时→20％过氧化氢溶液浸泡38℃水浴24小时→离心去除过滤物→超声去脂处理12小时→0.5％胰蛋白酶37℃消化12小时→离心→20％过氧化氢溶液再浸泡38℃水浴24小时→离心→超声再去脂12小时→0.5％胰蛋白酶37℃再消化12小时→离心→真空干燥→辐照灭菌→成品。
文档编号A61L27/00GK1569249SQ03139790
公开日2005年1月26日 申请日期2003年7月11日 优先权日2003年7月11日
发明者陆云涛, 戴景兴, 原林 申请人:中国人民解放军第一军医大学基础部
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