专利名称:生殖间质细胞抗衰老技术的制作方法
技术领域:
本发明涉及一种生殖间质细胞抗衰老技术。
背景技术:
揭开衰老的奥秘,一直是人们梦寐以求的美好愿望,经研究证明,人类衰老与生殖间质细胞基数有关,也就是说,生殖间质细胞基数在体内的减少造成机体代谢势减弱,使机体代谢衰减,从而引起衰老与寿命缩短。这一结论与我国传统医学肾为先天之本的肾本学说相吻合。按照中国传统医学“以脏补脏”的原则补肾,经烹调或生食入胃后活性物质均被破坏,生殖间质细胞失去活性,所以达不到真正补肾的目的。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种通过生殖间质细胞移植进行补肾的生殖间质细胞抗衰老技术。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案本发明采用动物睾丸生殖间质细胞进行移植,其具体方法如下(1)、生殖间质细胞来源采集生殖间质细胞来源选用幼猪睾丸,采集的局部常规消毒小切口,将双侧睾丸取出,用生理盐水冲洗,然后放入装有70%酒精消毒大口瓶内,并将标本瓶放入冰壶内,冰壶内温度为0℃-4℃,在冷缺血2小时内送往实验室;(2)、生殖间质细胞培养标本送往实验室后,立即从瓶内取出标本,用生理盐水冲掉睾丸鞘膜外残留酒精,然后剪开并去掉鞘膜,并将睾丸内组织剪成小块研磨,去掉结缔组织,加入胶原消化酶进一步纯化过筛,随后,加入含有AB血清的1640培养液,每个培养瓶中加10ml的培养液,每毫升含细胞个数为103-105个,将培养瓶放入CO2培养箱中进行培养,温度为37℃恒温,并用Hank’s液冲洗,培养时间为6-7天,当细胞生长良好,无细菌生长,则收集备用;(3)、生殖间质细胞保存在培养液中加入1.4mol/L的二甲亚砜及PH为7.2的Hank’s液2ml后分装在试管中并密封,温度为0℃-4℃,4℃静置30-40分钟,以6-8分钟的速度降温至0℃,再按0.4-0.6℃/min速度降温至-80℃后,再放入-196℃氮液中;使用时,用40℃温水快速转动复温,然后放入CO2培养箱内37℃恒温培养48-72小时后,细胞复活良好,无细菌生长,才可使用;(4)、应用方法生殖间质细胞收集后,其数量达2×107时,注射在人体大腿内侧肌肉中,即告完成移植。
所述的幼猪选用英系大白与台系杜克猪杂交初生2-3个月公猪。
本发明的有益效果是初步解决了人们一直渴望解决的人类抗衰老问题,生殖间质细胞是产生雄性激的主要细胞,通过移植不但可以提高睾丸激素水平,促进生殖细胞生成,而且还增补了尚未发现的有效成份。生殖间质细胞的成功研发在临床应用上取得了明显效果。
具体实施例方式
实施例按上述发明内容部分中的技术方案进行具体操作即可。
利用本发明对30例志愿者进行临床试验,30例志愿者中有疲劳综合性、功能减退、心慌气短、肥胖、更年期综合症、动脉硬化。生殖间质细胞移植数量最少为9.8×106个,最多为3.6×107个。生殖间质细胞移植后3-8天开始起效,24例有明显效果,疲劳综合症明显改善,性功能明显提高,对少年肥胖者,不但减肥,而且身体还明显长高。有效率80%,无变化6例,占20%。本组志愿者移植后观察均在半年以上,未发现副反应。
移植前后血清中睾丸素变化情况移植前平均为633ng/dl,移植后平均为767ng/dl,平均增加15.6nf/dl,最高增加值达22.5%。移植效果与移植生殖间质细胞数量有明显关系,6例无变化者移植数量在9.8×106个。
本次临床试验的首例其移植生殖间质细胞数量为3.6×107个,五天后开始发生效应,精神焕发,疲劳消失,性功能明显增加,出现了意想不到的效果,初步达到补肾抗衰老目的。
权利要求
1.一种生殖间质细胞抗衰老技术,其特征在于采用动物睾丸生殖间质细胞进行移植,其具体方法如下(1)、生殖间质细胞来源采集生殖间质细胞来源选用幼猪睾丸,采集的局部常规消毒小切口,将双侧睾丸取出,用生理盐水冲洗,然后放入装有浓度为70%酒精的瓶内,并将标本瓶放入冰壶内,冰壶内温度为0℃-4℃,在冷缺血2小时内送往实验室;(2)、生殖间质细胞培养标本送往实验室后,立即从瓶内取出标本,用生理盐水冲掉睾丸鞘膜外残留酒精,然后剪开并去掉鞘膜,并将睾丸内组织剪成小块研磨,去掉结缔组织,加入胶原消化酶进一步纯化、过筛,随后,加入含有AB血清的1640培养液,每个培养瓶中加10ml的培养液,每毫升含细胞个数为103-105个,将培养瓶放入CO2培养箱中进行培养,温度为37℃恒温,并用Hank’s液定时冲洗,培养时间为6-7天,当细胞生长良好,无细菌生长,则收集备用;(3)、生殖间质细胞保存在具有生殖间质细胞的培养液中加入1.4mol/L的二甲亚砜及PH7.2的Hank’s液2ml后,装入试管中并密封,温度为0℃-4℃,4℃静置30-40分钟,以6-8分钟的速度降温至0℃,再按0.4-0.6℃/min速度降温至-80℃后,再放入-196℃氮液中;使用时,用40℃温水快速转动复温,然后放入CO2培养箱内37℃恒温培养48-72小时后,细胞复活良好,无细菌生长,才可使用;(4)、应用方法生殖间质细胞收集后,其数量达2×107时,注射在人体大腿内侧肌肉中,即告完成移植。
2.根据权利要求1所述的生殖间质细胞抗衰老技术,其特征在于所述的幼猪选用英系大白与台系杜克猪杂交初生2-3个月公猪。
全文摘要
本发明涉及一种生殖间质细胞抗衰老技术,其技术要点是采用动物睾丸生殖间质细胞进行移植,其具体方法如下(1)、将幼猪睾丸取出放入冰壶内,在冷缺血2小时内送行实验室;(2)、生殖间质细胞培养将睾丸内组织剪成小块研磨,加入胶原消化酶进一步纯化过筛,随后,加入含有AB血清的1640培养液,放入CO
文档编号A61L27/38GK1513564SQ0314325
公开日2004年7月21日 申请日期2003年8月20日 优先权日2003年8月20日
发明者李庆昌, 刘玉来, 崔天成 申请人:李庆昌