由淫羊霍与雌激素组成的治疗绝经期后妇女骨质疏松症的复方制剂的制作方法
专利名称：由淫羊霍与雌激素组成的治疗绝经期后妇女骨质疏松症的复方制剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及绝经期妇女治疗骨质疏松症的由中药淫羊藿和雌激素组成的复方制剂及其制法。
目前研究的资料表明，妇女在绝经后99％均可出现骨质疏松症，这种绝经后妇女发生的骨质疏松症也称为原发性骨质疏松症，该症是一种以骨量减少、骨组织微细结构退化为特征的，致使骨的脆性增加以及易于发生骨折的全身性的骨骼疾病。随着世界人口趋于老龄化，骨质疏松症及骨质疏松性骨折的发病率呈迅速上升的趋势。根据我国2000年人口普查的结果，预测我国患原发性骨质疏松症的人数约为0.88亿，约占全国总人口的6.97％，预计到2010年将达到1.14亿，占总人口的百分数将上升到8.2％，每年因骨质疏松症而发生骨折的人数将以两位数的增长率而具高不下。骨质疏松性骨折已成为老年人致残、生活质量下降甚至死亡的主要原因，严重危害老年人的健康。骨质疏松症和骨质疏松性骨折，已使越来越多的人深受其害，并已成为世界性关注的严重社会问题，在我国也已将它列为三大重点攻关研究的老年性疾病之一。因此，抗骨质疏松药物研究就成为当代医药学研究的一个重要领域。
目前治疗骨质疏松症的药物主要分为三种类型，一类为抑制骨吸收的药物，如雌激素、降钙素、孕激素、二膦酸盐等；另一类是促进骨形成的药物，如氟化物、同化类固醇激素、依普拉芬等；第三类为作用骨矿化的药物，如钙剂、维生素D等。各类药物对防治骨质疏松症有一定的疗效，但仍带来了长远的不良反应。雌激素替代疗法是目前临床广泛应用于防治绝经后骨质疏松症的主要手段，有效地防止老年或绝经妇女骨量的快速丢失，保持骨量，减少骨折发生率。但是，雌激素有严重的不良反应，其最严重不良反应是刺激子宫内膜增生，增加子宫内膜癌的发病率，而且长期使用也会增加乳腺癌的发病率和引起子宫出血等。另外，雌激素属于抑制骨吸收类药物，其作用特点是同时抑制骨吸收和骨形成，长期抑制骨形成会造成骨的老化，骨质量下降。骨质疏松症是一种慢性的老年性退行性疾病，要求必须长期用药，如何改进药物和用药方案，减轻雌激素的不良反应，是一个有待于解决的问题。
在中医药研究中，发现一些中药复方对预防骨质疏松症有一定的疗效，但是许多中药，不论复方还是单方，其预防去卵巢大鼠骨质疏松的效果都不如雌激素。因此，本发明提出了中西药联合防治骨质疏松症的构思。淫羊藿是我国传统的补肾壮阳药，我们近年来证明了淫羊藿和淫羊藿组成的复方具有显著的防治骨质疏松症的作用，但是对去卵巢大鼠骨质疏松的预防作用不如雌激素。因为去卵巢大鼠骨质疏松模型属于高骨转换的骨快速丢失型，在骨吸收增加的同时因偶联作用骨形成也明显增高，骨吸收增加超过了骨形成的速度，故出现骨快速丢失。淫羊藿抑制骨转换较弱，并不抑制因骨吸收增加所致偶联骨形成增加。淫羊藿能促进骨髓细胞DNA合成，促进骨组织蛋白质合成及促进成骨细胞功能，在体外实验可以促进成骨细胞的增殖和分化。淫羊藿如果合用小剂量雌激素，既可以发挥较强的抑制骨转换作用，又可以促进骨形成，对增加骨量可能有协同作用；同时淫羊藿复方可以对抗炔雌醇对子宫及其内膜的刺激作用，而且淫羊藿具有雄激素样作用，如果淫羊藿合用小剂量雌激素，可以减轻雌激素的不良反应。淫羊藿总黄酮是淫羊藿的主要有效成分之一，能有效地预防维A酸诱导及低钙饲料结合去卵巢诱发的大鼠骨质疏松，而且可以促进体外成骨细胞增殖及分化成熟。
因此，本发明的任务是研制一种适合绝经期后妇女预防和治疗骨质疏松症的复方制剂，该复方制剂是由淫羊藿或淫羊藿总黄酮与雌激素组成复方，该复方制剂中淫羊藿可以提高雌激素抗骨质疏松作用而减少其不良反应的，因此，雌激素的用量可以减少1/5～1/2，达到同样的疗效而不良反应明显减少或者消失。研究表明该制剂既能阻止去卵巢大鼠骨质的进一步丢失，又能促进新骨的形成，对子宫没有明显的刺激作用。因此，可用于各种原因所致的骨质疏松症，特别适合于绝经期后妇女预防和治疗骨质疏松症。
解决这一任务的途径是这样实现的，取淫羊藿或淫羊藿总黄酮与雌激素组合起来，组成复方，通过下述工艺制作成片剂、冲剂或胶囊剂，供临床应用，研究表明，本制剂对去卵巢，去睾丸所致的实验性骨质疏松症，长期应用肾上腺皮质激素所致的骨质疏松症，对化疗药羟基脲所致的肾阳虚性骨质疏松症等均有良好的防治作用。本制剂能够阻止骨质的进一步丢失，促进钙磷代谢，促进新骨形成，使疏松的骨组织变得致密，并能消除骨质疏松症所致的各种不良反应。用本复方制剂治疗骨质疏松症国内外文献均未见报道。
本复方制剂可通过下述几个方法制备1、淫羊藿粉碎成粉末，加75～95％乙醇浸泡24小时，过滤，回收乙醇，得醇提物备用，药渣再加水煎煮3次，合并三次滤液，滤过，滤液浓缩至适量，加入前述的醇提物，低温干燥，粉碎，加适量辅料和雌激素，制成颗粒，压片，包糖衣或装胶囊，即得。
2、淫羊藿生药材以数倍水浸泡后煎煮，重复3次，合并滤液浓缩，加3倍乙醇沉淀，回收乙醇后，用乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯得到淫羊藿总黄酮。(以淫羊藿甙作标准品，测得提取物中淫羊藿总黄酮含量为32％)。淫羊藿总黄酮加适量辅料和雌激素，制成颗粒，压片，包糖衣或装胶囊，即得。
3、本复方制剂所用的雌激素可用戊酸雌二醇，炔雌醇，雌三醇，尼尔雌醇，结合型雌激素，己烯雌酚，氯烯雌酚，他莫昔芬。这些雌激素与淫羊藿组成复方时，每片或每粒的含量分别为戊酸雌二醇0.2～0.5mg/片，炔雌醇2.5～5μg/片，雌三醇0.2～0.5mg/片，尼尔雌醇5～15μg/片，结合型雌激素0.075～0.125mg/片，己烯雌酚0.075～0.125mg/片，氯烯雌酚1～2mg/粒，他莫昔芬2～5mg/片。
采用以上1～2方法制得的制品，经药理学、毒理学研究证明，本品对去卵巢所致的大鼠骨质疏松症有明显的预防和治疗作用，急性毒性试验及长期毒性试验(包括3个月至6个月)均证实本品毒性低，长期服用对心、肝、肾、肺、胃、肠、脾、胸腺、淋巴结等各重要器官均无损害作用。临床研究表明，本品对原发性骨质疏松症如绝经期妇女和老年性骨质疏松症有良好的防治作用。
实施例为观察由淫羊霍与雌激素组成的治疗骨质疏松症的复方制剂的药效学作用，进行了下述实验1材料与方法1.1材料1.1.1淫羊藿总黄酮的提取 淫羊藿生药材以数倍水浸泡后煎煮，重复3次，合并滤液浓缩，加3倍乙醇沉淀，回收乙醇后，用乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯得到淫羊藿总黄酮。以淫羊藿甙作标准品，测得提取物中淫羊藿总黄酮含量为32％。淫羊藿总黄酮加适量辅料和雌激素己烯雌酚，制成颗粒，压片，己烯雌酚的含量配成0.075mg/片。1.1.2药品与试剂 己烯雌酚购自广东彼迪药业有限公司，批号20010601；钙黄绿素(Calcein)、盐酸四环素、Goldner’s染料试剂均购自美国Sigma公司；甲基丙烯酸甲酯购自北京化工厂；邻苯二甲酸二丁酯购自天津市化学试剂一厂；过氧化苯甲酰购自广州化学试剂厂；雌二醇放免试剂盒购自天津德普公司；血清钙、磷、碱性磷酸酶、总胆固醇试剂盒由德国贝克曼公司提供。1.1.3仪器 低速锯(Buehler LTD.USA)；硬组织切片机(德国Leica 2155)；碳化钨刚刀(德国Leica公司产品)；自动化图像数字化分析仪包括光镜和荧光显微镜(Nikon，日本)；骨组织形态计量学测量软件(KSS ScientificConsultants，UT USA)；全自动生化分析仪(德国贝克曼公司)；γ计数器(芬兰LKB)；AE240电子天平(Mettler-Toledo instr.shanghai Ltd)；ASD-3D爱华电子计重秤(深圳市爱华衡器有限公司产品)。1.2材料1.2.1动物模型与分组 4月龄未交配的雌性SD大鼠(由中国科学院上海实验动物中心提供，合格证号为中科动管第003号)60只，清洁级，平均体重225±15g；适应性饲养15天，开始实验时平均体重240±12g。分笼饲养，饲养于室温23℃~25℃，相对湿度50％~70％的清洁环境中，自由摄食和摄水；使用标准饲料，其中钙含量1.33％，磷含量0.95％。随机分成6组，每组为10只。基础对照组(Basal)，实验开始时，将其处死取材。除假手术组大鼠外，其余行双侧卵巢切除术，然后接受不同药物治疗。(1)假手术组(Sham)和(2)去卵巢组(OVX)均用体积分数为0.056的乙醇(溶剂对照)；其余分别为(3)己烯雌酚DES 22.5μg·kg-1·d-1；(4)淫羊藿总黄酮EF300mg·kg-1·d-1；(5)淫羊藿总黄酮EF300mg·kg-1·d-1+己烯雌酚DES22.5μg·kg-1·d-1；均灌胃给药。所有动物给药时间为90天，每周称体重1次，并按体重变化调整给药量。在动物处死前第14、13天和第4、3天分别皮下注射盐酸四环素30mg·kg-1和钙黄绿素(Calcein)5mg·kg-1。1.2.2骨标本的制作 大鼠用戊巴比妥钠麻醉后心脏抽血处死，分离血清作生化指标的测定；取出内脏器官，分别称器官湿重，器官湿重除以体重并乘以1000得器官指数；取出左侧胫骨，用慢速锯在近端作矢状打开髓腔，于胫骨上段1/3处横行锯断，取胫骨上段进行固定、脱水、包埋和切片，用硬组织切片机分别切下5μm和8μm切片，5μm骨薄片采用Masson-Goldner Trichrome染色方法，染色后用以观察骨小梁表面破骨细胞数目。8μm骨厚片直接封片采用半自动图象数字化分析仪测量骨组织形态计量学静态参数和动态参数。1.2.3胫骨近端松质骨组织形态计量学测定用KSS Image图象分析系统，按国际骨形态计量学参数测量的定义和计算标准，测量胫骨近端的静态参数和动态参数。静态参数包括骨组织总面积(T.Ar，mm2)、骨小梁面积(Tb.Ar，mm2)、骨小梁周长(Tb.Pm，mm)及其计算参数[骨小梁面积百分数(％Tb.Ar，％)、骨小梁厚度(Tb.Th，μm)和骨小梁分离度(Tb.Sp，μm)]、总破骨细胞数目(Oc.No)及其指数(Oc.N/mm，#/mm)。动态参数包括单标记周长(sL.Pm，mm)、双标记周长(dL.Pm，mm)和双标记间距(Ir.L.Wi，μm)及其计算参数[标记周长百分数(％L.Pm，％)、骨矿化沉积率(MAR，μm/d)、骨形成率BER/BS(表示骨表面形成率，％yr)、骨形成率BER/BV(表示骨转换程度，％yr)、骨形成率BER/TV(表示骨组织形成率，％yr)]。1.2.4血清生化指标及雌二醇的测定 血清钙(Ca)、磷(P)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆固醇(Ch)、含量测定采用德国贝克曼全自动生化分析仪，试剂盒由德国贝克曼公司提供，由广东省农垦医院检验科完成。雌二醇(E2)含量测定采用包被-抗体-计数的放免方法，具体操作按试剂盒说明书进行，与本院同位素教研室老师共同完成。1.2.5子宫组织形态观察和子宫内膜厚度测定 取出子宫后，首先称重观察子宫大小，然后取三个部位切块进行石蜡包埋，并分别制成5μm切片，经HE染色，于10×40倍镜下观察，并用自动图像数字化分析仪测量内膜厚度。1.2.6 统计学方法 所有数据用x±s表示，用SPSS 10.0软件进行方差分析，两两比较用q检验，P＜0.05有统计学意义。2结果2.1淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠体重、血清生化指标和雌二醇的影响淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠体重、血清生化指标和雌二醇的影响见表1表1淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠体重、血清生化指标和雌二醇的影响(m＝10，x±s)组别 剂量体重开始 结束 血清Ca P ALP CHOL E2/(mg·kg-1) g g mmol·L-1mmol·L-1U·L-1mmol·L-1pg·mlSham Vehile240.1±6.6 265.3±6.9 2.49±0.06 2.35±0.4374.6±24.91.27±0.0934.5±12.6OVX Vehile236.8±11.1300.6±15.5#2.44±0.10 2.04±0.3384.3±16.21.75±0.45#12.3±2.1##DES 0.0225241.4±6.1 240.9±25.4**2.55±0.06 2.41±0.50130.1±38.9*0.98±0.35**15.4±6.3EF 300 23g.6±8.1 294.2±28.52.59±0.05*2.18±0.1598.7±38.41.88±0.2127.8±20.1E+D 300+0.0225244.4±10.6289.0±18.0*2.70±0.06*△2.16±0.33113.7±26.8 1.59±0.5026.0±11.9#P＜0.05；##P＜0.01 vs Sham；*P＜0.05；**P＜0.05vs OVX△P＜0.05；△△P＜0.05vs DF.S。
从Tab 1的结果可见.去卵巢组(OVX)大鼠体重明显增加，血清总胆固醇增加和雌二醇浓度明显降低(P＜0.05)。己烯雌酚能明显减轻去卵巢大鼠体重和血清总胆固醇(P＜0.05)，增加血清碱性磷酸酶(P＜0.05)；单用EF使血钙浓度增加，其余指标无明显改变；联合用药组比单用己烯雌酚组体重和血钙浓度增加(P＜0.05)。2.2淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠内脏器官指数和子宫内膜厚度的影响淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠内脏器官指数和子宫内膜厚度的影响见表2表2 淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠内脏器官指数和子宫内膜厚度的影响(n＝10，x±s)组别脚腺(g)肝(g) 脾(g) 肾(g) 肾上腺(g) 子富(g) 子宫内膜厚度(μm)Sham0.6±0.2 25.0±1.0 2.2±0.27.1±0.40.23±0.04 2.2±0.6 23.67±4.20OVX 0.9±0.2#25.4±2.4#2.3±0.16.4±0.5#0.19±0.04 0.4±0.2#9.51±1.06#DES 0.8±0.3 36.6±5.2*2.7±0.3*8.1±1.2*0.27±0.08*2.0±0.6**41.58±8.41**EF 1.0±0.2 24.5±2.7 2.4±0.26.5±0.80.22±0.04 0.64±0.3 12.26±2.73EF+DES 0.6±0.2 32.0±2.2*△2.8±0.3*7.1±0.40.25±0.03 1.6±0.2**△20.28±2.07**△△#P＜0.05；##P＜0.01 vs Sham*P＜0.05；**P＜0.05vs OVX△P＜0.05；△△P＜0.05 vs DES。
从Tab 2的结果可见，去卵巢后大鼠的子宫和肾指数明显减轻，子宫内膜厚度减少，而胸腺指数增加。己烯雌酚组的子宫、肝、脾、肾及肾上腺指数、子宫内膜厚度明显增加，而且高于Sham组(P＜0.05)；单用EF无影响；联合用药组使去卵巢大鼠的子宫和肝指数、子宫内膜厚度增加，但低于己烯雌酚组，与Sham组无差别。2.3 淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠胫骨近端松质骨形态计量学静态参数的影响表3 淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠胫骨近端松质骨静态参数的影晌(n＝10，x±s)GroupTb.Ar(％) Tb.Th(μm) Tb.N(#·mm-1) Tb.Sp(μm) Oc.N(n·mm-2)Basal23.4±5.2 57.0±5.84.1±0.6194.3±43.8 4.3±1.5Sham 22.9±6.4 57.3+13.14.0±0.2195.7±25.9 4.1±1.1OVX 4.5±1.6##46.5±6.61.0±0.3##1111.4±439.7##18.8±7.4##DES 11.4+5.4**44.7±6.62.5±0.9**426.1+208.3*9.2±5.7*EF 7.2+4.4 48.2±9.31.4±0.8908.5±669.2 15.7+12.8EF+DES 19.0±3.9**△△54.2±7.0*△3.5±0.4**△235.4±35.4**△3.3±1.0**△△
*P＜0.05；##P＜0.01 vs Sham*P＜0.05**P＜0.05 vs OVX△P＜0.05△△P＜0.05 vs DES。
从Tab 3的结果可见，去卵巢大鼠与对照大鼠相比，90天后骨量丢失80％(P＜0.01)、骨小梁数目降低75％(P＜0.01)、骨小梁分离度增加468％(P＜0.01)、破骨细胞数目增加358％(P＜0.01)。己烯雌酚使去卵巢大鼠的骨量及骨小梁数目分别增加153％和150％(P＜0.01)、骨小梁分离度及破骨细胞数目分别减少62％和51％(P＜0.05)。单用淫羊藿总黄酮使去卵巢大鼠的骨量有增加60％，但无统计学意义(P＞0.05)。己烯雌酚与淫羊藿总黄酮合用使去卵巢大鼠的骨量及骨小梁数目分别增加322％和250％(P＜0.01)、骨小梁分离度及破骨细胞数目分别减少79％和82％(P＜0.01)，联合用药组增加骨量和抑制破骨细胞的效应超过己烯雌酚组(P＜0.01)，与Sham组无差别。2.4 淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠胫骨近端松质骨形态计量学动态参数的影响淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠胫骨近端松质骨形态计量学动态参数的影响见表4表4 淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠胫骨近端松质动态参数的影响(n＝10，x±s)Group L.Pm(％) MAR(μm·d)BFR/TV(％/year) BFR/BV(％/year)BFR/BS(％/year)Basal 39.2±9.7 0.82±0.18 79.8±29.4 363.0±170.4 12.2±5.2Sham31.3±4.9 0.76±0.12 58.5±15.5 264.6±81.38.8±2.2OVX 35.5±9.5 1.10±0.21#21.9±8.3##548.3±188.9#14.5±5.7#DES 27.5±8.4 0.80±0.22 32.9±16.1 312.1±150.3*8.2±3.7bEF 28.7±8.5 0.95±0.26 20.8±9.2 370.0±205.8 10.1±4.1E+D 16.8±5.1**0.58±0.24*21.0±11.0 123.9±91.5**△3.8±2.3**△△#P＜0.05；##P＜0.01 vs Sham；*P＜0.05；**P＜0.05 vs OVX；△P＜0.05；△△P＜0.05 vs DES。
从Tab 4的结果可见，去卵巢组大鼠骨形成指标明显增加矿化沉积率增加45％(P＜0.05)、骨形成率BFR/BV增加107％(P＜0.05)。己烯雌酚能抑制去卵巢大鼠的骨形成率(BFR/BV降低43％，P＜0.05)。单用淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠骨形成指标无明显影响。己烯雌酚与淫羊藿总黄酮合用明显抑制去卵巢大鼠的骨形成矿化沉积率及骨形成率BFR/BV分别降低47％和77％(P＜0.01)，效应强于单用己烯雌酚(P＜0.05)。
3 讨论结果表明，Sham组与Basal组的各项动静态参数均无差别，提示大鼠在4.5~7.5月龄期间，随月龄增加，骨形成和骨吸收较稳定，骨形成和骨吸收变化不明显，骨量增加不明显。
去卵巢大鼠体重明显增加、血清总胆固醇降低、骨量减少、子宫指数明显减轻和内膜萎缩、肾指数减轻、而胸腺指数增加，可能与雌激素缺乏有关。提示4.5月龄的大鼠去卵巢90天后引起体内雌激素迅速降低而导致骨骼及其他器官的改变，与绝经期后妇女的改变相似，进一步说明本实验用去卵巢大鼠建立骨质疏松的动物模型是成功的。
己烯雌酚是合成雌激素，能抑制去卵巢大鼠的骨形成和骨吸收，由于未能完全抑制去卵巢后的骨高转换，故不能使去卵巢大鼠的骨量恢复到年龄组水平，说明己烯雌酚仅部分预防去卵巢大鼠骨小梁的丢失，同时明显抑制大鼠体重增长，刺激肝、脾、肾上腺增重和子宫增生。
淫羊藿是我国传统的补肾壮骨中药，大量研究发现淫羊藿具有雄激素样作用，能促进骨髓细胞DNA合成，促进骨组织蛋白质合成及促进成骨细胞增殖，直接抑制破骨细胞，能对抗各种骨质疏松动物模型。但是目前对淫羊藿总黄酮防治骨质疏松症的研究较少，本实验结果显示，淫羊藿总黄酮使去卵巢大鼠的骨量有增加的趋势，但是没有统计学意义，可能与淫羊藿总黄酮的剂量有关。体外研究发现，淫羊藿总黄酮对成骨细胞有显著的促进增殖作用，而且与浓度有关，低浓度时促进成骨细胞增殖，浓度过大时反而抑制成骨细胞增殖。淫羊藿总黄酮防治去卵巢大鼠骨质疏松作用的量效关系如何，有待于进一步的研究。
淫羊藿总黄酮与己烯雌酚联合用药能明显增加去卵巢大鼠的骨量和骨小梁数目，减少骨小梁分离度，其效应强于单独应用己烯雌酚；联合用药还明显抑制破骨细胞的活性，降低骨形成率和骨转换率，效应也强于单独应用己烯雌酚。此外，联合用药不抑制大鼠体重增长，对肝和子宫的刺激作用较小。本实验提示，淫羊藿总黄酮与己烯雌酚联合用药，可提高己烯雌酚抗骨质疏松作用并降低了其的毒副作用。
权利要求
1.一种治疗骨质疏松症的复方制剂，其特征是该复方制剂是由中药淫羊藿提取物和雌激素组成。
2.如权利要求1所述的一种治疗骨质疏松症的复方制剂，该复方制剂中的中药淫羊藿淫羊藿提取物是指淫羊藿总黄酮。
3.如权利要求1所述的一种治疗骨质疏松症的复方制剂，该复方制剂中的雌激素是指戊酸雌二醇，炔雌醇，雌三醇，尼尔雌醇，结合型雌激素，已烯雌酚，氯烯雌酚，他莫昔芬。
4.如权利要求1所述的一种治疗骨质疏松症的复方制剂，该复方制剂中的中药淫羊藿淫羊藿提取物是指按下述工艺制备的提取物A、淫羊藿粉碎成粉末，加75～95％乙醇浸泡24小时，过滤，回收乙醇，得醇提物备用，药渣再加水煎煮3次，合并三次滤液，滤过，滤液浓缩至适量，加入前述的醇提物，低温干燥，粉碎，加适量辅料和雌激素，制成颗粒，压片，包糖衣或装胶囊，即得。B、淫羊藿生药材以数倍水浸泡后煎煮，重复3次，合并滤液浓缩，加3倍乙醇沉淀，回收乙醇后，用乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯得到淫羊藿总黄酮。淫羊藿总黄酮加适量辅料和雌激素，制成颗粒，压片，包糖衣或装胶囊，即得。
5.如权利要求3所述的一种含有雌激素的治疗骨质疏松症的复方制剂，这些雌激素与淫羊藿组成复方时，每片或每粒的含量分别为戊酸雌二醇0.2～0.5mg/片，炔雌醇2.5～5μg/片，雌三醇0.2～0.5mg/片，尼尔雌醇5～15μg/片，结合型雌激素0.075～0.125mg/片，己烯雌酚0.075～0.125mg/片，氯烯雌酚1～2mg/粒，他莫昔芬2～5mg/片。
全文摘要
本发明公开了一种治疗绝经期后妇女骨质疏松症的复方制剂，该制剂由淫羊藿与雌激素所组成，该复方制剂中淫羊藿可以提高雌激素抗骨质疏松作用而减少其不良反应的，因此，雌激素的用量可以减少1/5～1/2，达到同样的疗效而不良反应明显减少或者消失。研究表明该制剂既能阻止去卵巢大鼠骨质的进一步丢失，又能促进新骨的形成，对子宫没有明显的刺激作用。因此，可用于各种原因所致的骨质疏松症，特别适合于绝经期后妇女预防和治疗骨质疏松症。
文档编号A61P19/10GK1480142SQ0314516
公开日2004年3月10日 申请日期2003年6月30日 优先权日2003年6月30日
发明者吴铁, 许碧莲, 崔燎, 刘钰瑜, 邹丽宜, 吴 铁 申请人:广东医学院
技术领域：
本发明涉及绝经期妇女治疗骨质疏松症的由中药淫羊藿和雌激素组成的复方制剂及其制法。
目前研究的资料表明，妇女在绝经后99％均可出现骨质疏松症，这种绝经后妇女发生的骨质疏松症也称为原发性骨质疏松症，该症是一种以骨量减少、骨组织微细结构退化为特征的，致使骨的脆性增加以及易于发生骨折的全身性的骨骼疾病。随着世界人口趋于老龄化，骨质疏松症及骨质疏松性骨折的发病率呈迅速上升的趋势。根据我国2000年人口普查的结果，预测我国患原发性骨质疏松症的人数约为0.88亿，约占全国总人口的6.97％，预计到2010年将达到1.14亿，占总人口的百分数将上升到8.2％，每年因骨质疏松症而发生骨折的人数将以两位数的增长率而具高不下。骨质疏松性骨折已成为老年人致残、生活质量下降甚至死亡的主要原因，严重危害老年人的健康。骨质疏松症和骨质疏松性骨折，已使越来越多的人深受其害，并已成为世界性关注的严重社会问题，在我国也已将它列为三大重点攻关研究的老年性疾病之一。因此，抗骨质疏松药物研究就成为当代医药学研究的一个重要领域。
目前治疗骨质疏松症的药物主要分为三种类型，一类为抑制骨吸收的药物，如雌激素、降钙素、孕激素、二膦酸盐等；另一类是促进骨形成的药物，如氟化物、同化类固醇激素、依普拉芬等；第三类为作用骨矿化的药物，如钙剂、维生素D等。各类药物对防治骨质疏松症有一定的疗效，但仍带来了长远的不良反应。雌激素替代疗法是目前临床广泛应用于防治绝经后骨质疏松症的主要手段，有效地防止老年或绝经妇女骨量的快速丢失，保持骨量，减少骨折发生率。但是，雌激素有严重的不良反应，其最严重不良反应是刺激子宫内膜增生，增加子宫内膜癌的发病率，而且长期使用也会增加乳腺癌的发病率和引起子宫出血等。另外，雌激素属于抑制骨吸收类药物，其作用特点是同时抑制骨吸收和骨形成，长期抑制骨形成会造成骨的老化，骨质量下降。骨质疏松症是一种慢性的老年性退行性疾病，要求必须长期用药，如何改进药物和用药方案，减轻雌激素的不良反应，是一个有待于解决的问题。
在中医药研究中，发现一些中药复方对预防骨质疏松症有一定的疗效，但是许多中药，不论复方还是单方，其预防去卵巢大鼠骨质疏松的效果都不如雌激素。因此，本发明提出了中西药联合防治骨质疏松症的构思。淫羊藿是我国传统的补肾壮阳药，我们近年来证明了淫羊藿和淫羊藿组成的复方具有显著的防治骨质疏松症的作用，但是对去卵巢大鼠骨质疏松的预防作用不如雌激素。因为去卵巢大鼠骨质疏松模型属于高骨转换的骨快速丢失型，在骨吸收增加的同时因偶联作用骨形成也明显增高，骨吸收增加超过了骨形成的速度，故出现骨快速丢失。淫羊藿抑制骨转换较弱，并不抑制因骨吸收增加所致偶联骨形成增加。淫羊藿能促进骨髓细胞DNA合成，促进骨组织蛋白质合成及促进成骨细胞功能，在体外实验可以促进成骨细胞的增殖和分化。淫羊藿如果合用小剂量雌激素，既可以发挥较强的抑制骨转换作用，又可以促进骨形成，对增加骨量可能有协同作用；同时淫羊藿复方可以对抗炔雌醇对子宫及其内膜的刺激作用，而且淫羊藿具有雄激素样作用，如果淫羊藿合用小剂量雌激素，可以减轻雌激素的不良反应。淫羊藿总黄酮是淫羊藿的主要有效成分之一，能有效地预防维A酸诱导及低钙饲料结合去卵巢诱发的大鼠骨质疏松，而且可以促进体外成骨细胞增殖及分化成熟。
因此，本发明的任务是研制一种适合绝经期后妇女预防和治疗骨质疏松症的复方制剂，该复方制剂是由淫羊藿或淫羊藿总黄酮与雌激素组成复方，该复方制剂中淫羊藿可以提高雌激素抗骨质疏松作用而减少其不良反应的，因此，雌激素的用量可以减少1/5～1/2，达到同样的疗效而不良反应明显减少或者消失。研究表明该制剂既能阻止去卵巢大鼠骨质的进一步丢失，又能促进新骨的形成，对子宫没有明显的刺激作用。因此，可用于各种原因所致的骨质疏松症，特别适合于绝经期后妇女预防和治疗骨质疏松症。
解决这一任务的途径是这样实现的，取淫羊藿或淫羊藿总黄酮与雌激素组合起来，组成复方，通过下述工艺制作成片剂、冲剂或胶囊剂，供临床应用，研究表明，本制剂对去卵巢，去睾丸所致的实验性骨质疏松症，长期应用肾上腺皮质激素所致的骨质疏松症，对化疗药羟基脲所致的肾阳虚性骨质疏松症等均有良好的防治作用。本制剂能够阻止骨质的进一步丢失，促进钙磷代谢，促进新骨形成，使疏松的骨组织变得致密，并能消除骨质疏松症所致的各种不良反应。用本复方制剂治疗骨质疏松症国内外文献均未见报道。
本复方制剂可通过下述几个方法制备1、淫羊藿粉碎成粉末，加75～95％乙醇浸泡24小时，过滤，回收乙醇，得醇提物备用，药渣再加水煎煮3次，合并三次滤液，滤过，滤液浓缩至适量，加入前述的醇提物，低温干燥，粉碎，加适量辅料和雌激素，制成颗粒，压片，包糖衣或装胶囊，即得。
2、淫羊藿生药材以数倍水浸泡后煎煮，重复3次，合并滤液浓缩，加3倍乙醇沉淀，回收乙醇后，用乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯得到淫羊藿总黄酮。(以淫羊藿甙作标准品，测得提取物中淫羊藿总黄酮含量为32％)。淫羊藿总黄酮加适量辅料和雌激素，制成颗粒，压片，包糖衣或装胶囊，即得。
3、本复方制剂所用的雌激素可用戊酸雌二醇，炔雌醇，雌三醇，尼尔雌醇，结合型雌激素，己烯雌酚，氯烯雌酚，他莫昔芬。这些雌激素与淫羊藿组成复方时，每片或每粒的含量分别为戊酸雌二醇0.2～0.5mg/片，炔雌醇2.5～5μg/片，雌三醇0.2～0.5mg/片，尼尔雌醇5～15μg/片，结合型雌激素0.075～0.125mg/片，己烯雌酚0.075～0.125mg/片，氯烯雌酚1～2mg/粒，他莫昔芬2～5mg/片。
采用以上1～2方法制得的制品，经药理学、毒理学研究证明，本品对去卵巢所致的大鼠骨质疏松症有明显的预防和治疗作用，急性毒性试验及长期毒性试验(包括3个月至6个月)均证实本品毒性低，长期服用对心、肝、肾、肺、胃、肠、脾、胸腺、淋巴结等各重要器官均无损害作用。临床研究表明，本品对原发性骨质疏松症如绝经期妇女和老年性骨质疏松症有良好的防治作用。
实施例为观察由淫羊霍与雌激素组成的治疗骨质疏松症的复方制剂的药效学作用，进行了下述实验1材料与方法1.1材料1.1.1淫羊藿总黄酮的提取 淫羊藿生药材以数倍水浸泡后煎煮，重复3次，合并滤液浓缩，加3倍乙醇沉淀，回收乙醇后，用乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯得到淫羊藿总黄酮。以淫羊藿甙作标准品，测得提取物中淫羊藿总黄酮含量为32％。淫羊藿总黄酮加适量辅料和雌激素己烯雌酚，制成颗粒，压片，己烯雌酚的含量配成0.075mg/片。1.1.2药品与试剂 己烯雌酚购自广东彼迪药业有限公司，批号20010601；钙黄绿素(Calcein)、盐酸四环素、Goldner’s染料试剂均购自美国Sigma公司；甲基丙烯酸甲酯购自北京化工厂；邻苯二甲酸二丁酯购自天津市化学试剂一厂；过氧化苯甲酰购自广州化学试剂厂；雌二醇放免试剂盒购自天津德普公司；血清钙、磷、碱性磷酸酶、总胆固醇试剂盒由德国贝克曼公司提供。1.1.3仪器 低速锯(Buehler LTD.USA)；硬组织切片机(德国Leica 2155)；碳化钨刚刀(德国Leica公司产品)；自动化图像数字化分析仪包括光镜和荧光显微镜(Nikon，日本)；骨组织形态计量学测量软件(KSS ScientificConsultants，UT USA)；全自动生化分析仪(德国贝克曼公司)；γ计数器(芬兰LKB)；AE240电子天平(Mettler-Toledo instr.shanghai Ltd)；ASD-3D爱华电子计重秤(深圳市爱华衡器有限公司产品)。1.2材料1.2.1动物模型与分组 4月龄未交配的雌性SD大鼠(由中国科学院上海实验动物中心提供，合格证号为中科动管第003号)60只，清洁级，平均体重225±15g；适应性饲养15天，开始实验时平均体重240±12g。分笼饲养，饲养于室温23℃~25℃，相对湿度50％~70％的清洁环境中，自由摄食和摄水；使用标准饲料，其中钙含量1.33％，磷含量0.95％。随机分成6组，每组为10只。基础对照组(Basal)，实验开始时，将其处死取材。除假手术组大鼠外，其余行双侧卵巢切除术，然后接受不同药物治疗。(1)假手术组(Sham)和(2)去卵巢组(OVX)均用体积分数为0.056的乙醇(溶剂对照)；其余分别为(3)己烯雌酚DES 22.5μg·kg-1·d-1；(4)淫羊藿总黄酮EF300mg·kg-1·d-1；(5)淫羊藿总黄酮EF300mg·kg-1·d-1+己烯雌酚DES22.5μg·kg-1·d-1；均灌胃给药。所有动物给药时间为90天，每周称体重1次，并按体重变化调整给药量。在动物处死前第14、13天和第4、3天分别皮下注射盐酸四环素30mg·kg-1和钙黄绿素(Calcein)5mg·kg-1。1.2.2骨标本的制作 大鼠用戊巴比妥钠麻醉后心脏抽血处死，分离血清作生化指标的测定；取出内脏器官，分别称器官湿重，器官湿重除以体重并乘以1000得器官指数；取出左侧胫骨，用慢速锯在近端作矢状打开髓腔，于胫骨上段1/3处横行锯断，取胫骨上段进行固定、脱水、包埋和切片，用硬组织切片机分别切下5μm和8μm切片，5μm骨薄片采用Masson-Goldner Trichrome染色方法，染色后用以观察骨小梁表面破骨细胞数目。8μm骨厚片直接封片采用半自动图象数字化分析仪测量骨组织形态计量学静态参数和动态参数。1.2.3胫骨近端松质骨组织形态计量学测定用KSS Image图象分析系统，按国际骨形态计量学参数测量的定义和计算标准，测量胫骨近端的静态参数和动态参数。静态参数包括骨组织总面积(T.Ar，mm2)、骨小梁面积(Tb.Ar，mm2)、骨小梁周长(Tb.Pm，mm)及其计算参数[骨小梁面积百分数(％Tb.Ar，％)、骨小梁厚度(Tb.Th，μm)和骨小梁分离度(Tb.Sp，μm)]、总破骨细胞数目(Oc.No)及其指数(Oc.N/mm，#/mm)。动态参数包括单标记周长(sL.Pm，mm)、双标记周长(dL.Pm，mm)和双标记间距(Ir.L.Wi，μm)及其计算参数[标记周长百分数(％L.Pm，％)、骨矿化沉积率(MAR，μm/d)、骨形成率BER/BS(表示骨表面形成率，％yr)、骨形成率BER/BV(表示骨转换程度，％yr)、骨形成率BER/TV(表示骨组织形成率，％yr)]。1.2.4血清生化指标及雌二醇的测定 血清钙(Ca)、磷(P)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆固醇(Ch)、含量测定采用德国贝克曼全自动生化分析仪，试剂盒由德国贝克曼公司提供，由广东省农垦医院检验科完成。雌二醇(E2)含量测定采用包被-抗体-计数的放免方法，具体操作按试剂盒说明书进行，与本院同位素教研室老师共同完成。1.2.5子宫组织形态观察和子宫内膜厚度测定 取出子宫后，首先称重观察子宫大小，然后取三个部位切块进行石蜡包埋，并分别制成5μm切片，经HE染色，于10×40倍镜下观察，并用自动图像数字化分析仪测量内膜厚度。1.2.6 统计学方法 所有数据用x±s表示，用SPSS 10.0软件进行方差分析，两两比较用q检验，P＜0.05有统计学意义。2结果2.1淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠体重、血清生化指标和雌二醇的影响淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠体重、血清生化指标和雌二醇的影响见表1表1淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠体重、血清生化指标和雌二醇的影响(m＝10，x±s)组别 剂量体重开始 结束 血清Ca P ALP CHOL E2/(mg·kg-1) g g mmol·L-1mmol·L-1U·L-1mmol·L-1pg·mlSham Vehile240.1±6.6 265.3±6.9 2.49±0.06 2.35±0.4374.6±24.91.27±0.0934.5±12.6OVX Vehile236.8±11.1300.6±15.5#2.44±0.10 2.04±0.3384.3±16.21.75±0.45#12.3±2.1##DES 0.0225241.4±6.1 240.9±25.4**2.55±0.06 2.41±0.50130.1±38.9*0.98±0.35**15.4±6.3EF 300 23g.6±8.1 294.2±28.52.59±0.05*2.18±0.1598.7±38.41.88±0.2127.8±20.1E+D 300+0.0225244.4±10.6289.0±18.0*2.70±0.06*△2.16±0.33113.7±26.8 1.59±0.5026.0±11.9#P＜0.05；##P＜0.01 vs Sham；*P＜0.05；**P＜0.05vs OVX△P＜0.05；△△P＜0.05vs DF.S。
从Tab 1的结果可见.去卵巢组(OVX)大鼠体重明显增加，血清总胆固醇增加和雌二醇浓度明显降低(P＜0.05)。己烯雌酚能明显减轻去卵巢大鼠体重和血清总胆固醇(P＜0.05)，增加血清碱性磷酸酶(P＜0.05)；单用EF使血钙浓度增加，其余指标无明显改变；联合用药组比单用己烯雌酚组体重和血钙浓度增加(P＜0.05)。2.2淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠内脏器官指数和子宫内膜厚度的影响淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠内脏器官指数和子宫内膜厚度的影响见表2表2 淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠内脏器官指数和子宫内膜厚度的影响(n＝10，x±s)组别脚腺(g)肝(g) 脾(g) 肾(g) 肾上腺(g) 子富(g) 子宫内膜厚度(μm)Sham0.6±0.2 25.0±1.0 2.2±0.27.1±0.40.23±0.04 2.2±0.6 23.67±4.20OVX 0.9±0.2#25.4±2.4#2.3±0.16.4±0.5#0.19±0.04 0.4±0.2#9.51±1.06#DES 0.8±0.3 36.6±5.2*2.7±0.3*8.1±1.2*0.27±0.08*2.0±0.6**41.58±8.41**EF 1.0±0.2 24.5±2.7 2.4±0.26.5±0.80.22±0.04 0.64±0.3 12.26±2.73EF+DES 0.6±0.2 32.0±2.2*△2.8±0.3*7.1±0.40.25±0.03 1.6±0.2**△20.28±2.07**△△#P＜0.05；##P＜0.01 vs Sham*P＜0.05；**P＜0.05vs OVX△P＜0.05；△△P＜0.05 vs DES。
从Tab 2的结果可见，去卵巢后大鼠的子宫和肾指数明显减轻，子宫内膜厚度减少，而胸腺指数增加。己烯雌酚组的子宫、肝、脾、肾及肾上腺指数、子宫内膜厚度明显增加，而且高于Sham组(P＜0.05)；单用EF无影响；联合用药组使去卵巢大鼠的子宫和肝指数、子宫内膜厚度增加，但低于己烯雌酚组，与Sham组无差别。2.3 淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠胫骨近端松质骨形态计量学静态参数的影响表3 淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠胫骨近端松质骨静态参数的影晌(n＝10，x±s)GroupTb.Ar(％) Tb.Th(μm) Tb.N(#·mm-1) Tb.Sp(μm) Oc.N(n·mm-2)Basal23.4±5.2 57.0±5.84.1±0.6194.3±43.8 4.3±1.5Sham 22.9±6.4 57.3+13.14.0±0.2195.7±25.9 4.1±1.1OVX 4.5±1.6##46.5±6.61.0±0.3##1111.4±439.7##18.8±7.4##DES 11.4+5.4**44.7±6.62.5±0.9**426.1+208.3*9.2±5.7*EF 7.2+4.4 48.2±9.31.4±0.8908.5±669.2 15.7+12.8EF+DES 19.0±3.9**△△54.2±7.0*△3.5±0.4**△235.4±35.4**△3.3±1.0**△△
*P＜0.05；##P＜0.01 vs Sham*P＜0.05**P＜0.05 vs OVX△P＜0.05△△P＜0.05 vs DES。
从Tab 3的结果可见，去卵巢大鼠与对照大鼠相比，90天后骨量丢失80％(P＜0.01)、骨小梁数目降低75％(P＜0.01)、骨小梁分离度增加468％(P＜0.01)、破骨细胞数目增加358％(P＜0.01)。己烯雌酚使去卵巢大鼠的骨量及骨小梁数目分别增加153％和150％(P＜0.01)、骨小梁分离度及破骨细胞数目分别减少62％和51％(P＜0.05)。单用淫羊藿总黄酮使去卵巢大鼠的骨量有增加60％，但无统计学意义(P＞0.05)。己烯雌酚与淫羊藿总黄酮合用使去卵巢大鼠的骨量及骨小梁数目分别增加322％和250％(P＜0.01)、骨小梁分离度及破骨细胞数目分别减少79％和82％(P＜0.01)，联合用药组增加骨量和抑制破骨细胞的效应超过己烯雌酚组(P＜0.01)，与Sham组无差别。2.4 淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠胫骨近端松质骨形态计量学动态参数的影响淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠胫骨近端松质骨形态计量学动态参数的影响见表4表4 淫羊藿总黄酮和己烯雌酚对大鼠胫骨近端松质动态参数的影响(n＝10，x±s)Group L.Pm(％) MAR(μm·d)BFR/TV(％/year) BFR/BV(％/year)BFR/BS(％/year)Basal 39.2±9.7 0.82±0.18 79.8±29.4 363.0±170.4 12.2±5.2Sham31.3±4.9 0.76±0.12 58.5±15.5 264.6±81.38.8±2.2OVX 35.5±9.5 1.10±0.21#21.9±8.3##548.3±188.9#14.5±5.7#DES 27.5±8.4 0.80±0.22 32.9±16.1 312.1±150.3*8.2±3.7bEF 28.7±8.5 0.95±0.26 20.8±9.2 370.0±205.8 10.1±4.1E+D 16.8±5.1**0.58±0.24*21.0±11.0 123.9±91.5**△3.8±2.3**△△#P＜0.05；##P＜0.01 vs Sham；*P＜0.05；**P＜0.05 vs OVX；△P＜0.05；△△P＜0.05 vs DES。
从Tab 4的结果可见，去卵巢组大鼠骨形成指标明显增加矿化沉积率增加45％(P＜0.05)、骨形成率BFR/BV增加107％(P＜0.05)。己烯雌酚能抑制去卵巢大鼠的骨形成率(BFR/BV降低43％，P＜0.05)。单用淫羊藿总黄酮对去卵巢大鼠骨形成指标无明显影响。己烯雌酚与淫羊藿总黄酮合用明显抑制去卵巢大鼠的骨形成矿化沉积率及骨形成率BFR/BV分别降低47％和77％(P＜0.01)，效应强于单用己烯雌酚(P＜0.05)。
3 讨论结果表明，Sham组与Basal组的各项动静态参数均无差别，提示大鼠在4.5~7.5月龄期间，随月龄增加，骨形成和骨吸收较稳定，骨形成和骨吸收变化不明显，骨量增加不明显。
去卵巢大鼠体重明显增加、血清总胆固醇降低、骨量减少、子宫指数明显减轻和内膜萎缩、肾指数减轻、而胸腺指数增加，可能与雌激素缺乏有关。提示4.5月龄的大鼠去卵巢90天后引起体内雌激素迅速降低而导致骨骼及其他器官的改变，与绝经期后妇女的改变相似，进一步说明本实验用去卵巢大鼠建立骨质疏松的动物模型是成功的。
己烯雌酚是合成雌激素，能抑制去卵巢大鼠的骨形成和骨吸收，由于未能完全抑制去卵巢后的骨高转换，故不能使去卵巢大鼠的骨量恢复到年龄组水平，说明己烯雌酚仅部分预防去卵巢大鼠骨小梁的丢失，同时明显抑制大鼠体重增长，刺激肝、脾、肾上腺增重和子宫增生。
淫羊藿是我国传统的补肾壮骨中药，大量研究发现淫羊藿具有雄激素样作用，能促进骨髓细胞DNA合成，促进骨组织蛋白质合成及促进成骨细胞增殖，直接抑制破骨细胞，能对抗各种骨质疏松动物模型。但是目前对淫羊藿总黄酮防治骨质疏松症的研究较少，本实验结果显示，淫羊藿总黄酮使去卵巢大鼠的骨量有增加的趋势，但是没有统计学意义，可能与淫羊藿总黄酮的剂量有关。体外研究发现，淫羊藿总黄酮对成骨细胞有显著的促进增殖作用，而且与浓度有关，低浓度时促进成骨细胞增殖，浓度过大时反而抑制成骨细胞增殖。淫羊藿总黄酮防治去卵巢大鼠骨质疏松作用的量效关系如何，有待于进一步的研究。
淫羊藿总黄酮与己烯雌酚联合用药能明显增加去卵巢大鼠的骨量和骨小梁数目，减少骨小梁分离度，其效应强于单独应用己烯雌酚；联合用药还明显抑制破骨细胞的活性，降低骨形成率和骨转换率，效应也强于单独应用己烯雌酚。此外，联合用药不抑制大鼠体重增长，对肝和子宫的刺激作用较小。本实验提示，淫羊藿总黄酮与己烯雌酚联合用药，可提高己烯雌酚抗骨质疏松作用并降低了其的毒副作用。
权利要求
1.一种治疗骨质疏松症的复方制剂，其特征是该复方制剂是由中药淫羊藿提取物和雌激素组成。
2.如权利要求1所述的一种治疗骨质疏松症的复方制剂，该复方制剂中的中药淫羊藿淫羊藿提取物是指淫羊藿总黄酮。
3.如权利要求1所述的一种治疗骨质疏松症的复方制剂，该复方制剂中的雌激素是指戊酸雌二醇，炔雌醇，雌三醇，尼尔雌醇，结合型雌激素，已烯雌酚，氯烯雌酚，他莫昔芬。
4.如权利要求1所述的一种治疗骨质疏松症的复方制剂，该复方制剂中的中药淫羊藿淫羊藿提取物是指按下述工艺制备的提取物A、淫羊藿粉碎成粉末，加75～95％乙醇浸泡24小时，过滤，回收乙醇，得醇提物备用，药渣再加水煎煮3次，合并三次滤液，滤过，滤液浓缩至适量，加入前述的醇提物，低温干燥，粉碎，加适量辅料和雌激素，制成颗粒，压片，包糖衣或装胶囊，即得。B、淫羊藿生药材以数倍水浸泡后煎煮，重复3次，合并滤液浓缩，加3倍乙醇沉淀，回收乙醇后，用乙酸乙酯萃取，回收乙酸乙酯得到淫羊藿总黄酮。淫羊藿总黄酮加适量辅料和雌激素，制成颗粒，压片，包糖衣或装胶囊，即得。
5.如权利要求3所述的一种含有雌激素的治疗骨质疏松症的复方制剂，这些雌激素与淫羊藿组成复方时，每片或每粒的含量分别为戊酸雌二醇0.2～0.5mg/片，炔雌醇2.5～5μg/片，雌三醇0.2～0.5mg/片，尼尔雌醇5～15μg/片，结合型雌激素0.075～0.125mg/片，己烯雌酚0.075～0.125mg/片，氯烯雌酚1～2mg/粒，他莫昔芬2～5mg/片。
全文摘要
本发明公开了一种治疗绝经期后妇女骨质疏松症的复方制剂，该制剂由淫羊藿与雌激素所组成，该复方制剂中淫羊藿可以提高雌激素抗骨质疏松作用而减少其不良反应的，因此，雌激素的用量可以减少1/5～1/2，达到同样的疗效而不良反应明显减少或者消失。研究表明该制剂既能阻止去卵巢大鼠骨质的进一步丢失，又能促进新骨的形成，对子宫没有明显的刺激作用。因此，可用于各种原因所致的骨质疏松症，特别适合于绝经期后妇女预防和治疗骨质疏松症。
文档编号A61P19/10GK1480142SQ0314516
公开日2004年3月10日 申请日期2003年6月30日 优先权日2003年6月30日
发明者吴铁, 许碧莲, 崔燎, 刘钰瑜, 邹丽宜, 吴 铁 申请人:广东医学院
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