一种高效低毒抗肿瘤药物及其制备方法
专利名称：一种高效低毒抗肿瘤药物及其制备方法
技术领域：
本发明属医药技术领域，是关于一种新型抗肿瘤药物及其制备方法。
传统的化疗药物即细胞毒药物，对肿瘤细胞的杀灭缺乏选择性，在杀死肿瘤细胞的同时也损伤正常细胞，有较大的毒副作用，给肿瘤病人带来巨大的痛苦。如何获得高效低毒的抗肿瘤药物一直是人们所关注的焦点。
本发明的目的在于提供一种低毒性的能高效杀死肿瘤细胞的新型抗肿瘤药物及其制备方法。
磺胺类化合物是一种传统的抗菌素药物，本身不能作为抗肿瘤药物使用。但是，它能够在肿瘤中有一定程度的富集。本发明利用磺胺类化合物能够在肿瘤中富集的特点，将其作为导向基团，把它和细胞毒抗肿瘤药物通过化学反应接在一定分子量的烷烃两端，通过烷烃结构的多样性和丰富的链构象来屏蔽和减弱导向基团与抗肿瘤药物之间强烈的相互作用，并使之在肿瘤中选择性富集。
本发明通过适当化学反应合成了一种高效低毒抗肿瘤药物，其分子结构中含有磺胺类药物和细胞毒药物，化学通式为A-B-C，其中(1)A通过磺酰胺上的氮与B相连，其通式为 这里R1、R2、R3是各类磺胺药物上的取代基，例如R1:H,CH3CO,C6H5CH2OCO等，R2:H,CH3CO等，R3嘧啶环，吡喃环等；(2)B是分子量为14～140的烷基链(CH2)n，这里n为1～10(3)C为细胞毒抗肿瘤药物中的任一种。例如氮芥类，5-氟脲嘧啶，嘌呤类，阿霉素，甲氨喋呤，生物碱类以及生物工程类抗肿瘤药物。
例如，在A后接(CH2)4，然后再接苯丙氨酸氮芥，效果良好；在A后接(CH2)5，然后再接苯丁酸氮芥，效果良好；在A后接(CH2)8，然后再接5-氟脲嘧啶，效果良好。
上述结构的抗肿瘤药物以磺胺类药物中磺酰胺基为靶向基团，通过适当的化学键，将毒性较大的细胞毒药物与靶基团结合，得到的抗肿瘤药物通过磺胺类药物导向直接进入肿瘤细胞，减小了细胞毒药物对正常细胞的损伤，是一种新概念的抗肿瘤药物。
上述抗肿瘤药物中的B分子量为50-100将更好，n=4-8，使制备方法更方便，成本也有所下降。
上述抗肿瘤药物中的C可以是下述细胞毒抗肿瘤药物的任何一种。氮芥类，5-氟脲嘧啶，嘌呤类，阿霉素，甲氨喋呤，生物碱类以及生物工程类抗肿瘤药物。其中氮芥类有苯丙氨酸氮芥、苯丁酸氮芥、甲氮芥等，嘌呤类如6-巯基嘌呤、硫唑嘌呤，生物碱类如喜树碱、长春新碱、紫杉醇等，生物工程类如白芥素，肿瘤坏死因子等。这些细胞毒类药物偶联效果十分良好。
上述A-B-C通式的抗肿瘤药物经动物实验结果表明，等毒剂量或等摩尔剂量的效果比单一细胞毒抗肿瘤药物效果好，尤其是中、低剂量时抑制率更好。说明该类药物具有明显的导向作用。
本发明药物制备时以含磺酰胺基的磺胺类药物为起始原料A，在保护芳香胺基的条件下通过亲电反应接上烷基链B，该步骤一般将芳香胺基用保护基如苄氧羰基保护，然后成盐，便于亲电试剂反应接B，通过偶联反应将细胞毒抗肿瘤药物接在烷基链上。亲电反应是用常规现有技术反应。最后将保护基团去除，其反应通式为 X为保护芳香胺基的基团其中X可以是乙酰基、苄氧羰基等。反应结束后，产品简单后处理即可，反应过程无特殊要求，易推广实施。
本发明若用苄氧羰基保护磺酰胺芳香胺基，然后成盐，例如钾盐、钠盐，再进行亲电反应接B，偶合细胞毒药物之后，用钯碳和甲酸铵室温下反应2-4小时即可去保护。该反应效果好，产率高。反应过程无特殊要求，易产业化。当R1、R2为H，n=2，C为苯丁酸氮芥时，ABC-1的合成方法见实施例一。其制备路线如下
(B)受试动物为昆明种小鼠(由上海医药工业研究院实验动物组提供，合格证号为“沪动合证字第107号”)；体重19±1克。
(B)性别急性毒性试验，雌雄各半；疗效试验，雌雄皆可，每批试验使用同一种性别。
(D)动物数急性毒性试验，每组20只昆明种小鼠。每一试验组和阳性对照组均为10只，阴性对照组为20只。急性毒性试验1．剂量设置ABC-1样品设五个组，分别为200、160、128、102.4、及81.92mg/kg。2．给药方案采用ip×1。3．试验主要步骤试验设5个剂量组，剂量间距为0.8。动物随机分组，每组20只，雌雄各半。给药后观察即时反应，记录二周内小鼠的死亡分布。对死亡小鼠数及二周后存活小鼠进行解剖，肉眼尸检。当尸检发现有病变组织时，对该组织进行镜检。试验结果以Bliss方法计算。4．试验结果以腹腔途径一次给药，对昆明种小鼠急性毒性试验结果见表1。雌雄动物之间无显著性差异，P值＞0.05。腹腔途径单次给药后一般症状；即时动物行动迟缓，呆滞，腹部略有收缩，与剂量成正相关，15分钟左右低剂量组即恢复至常态。死亡大多出现在48小时内，以24小时内为死亡高峰。死亡动物尸检未发现肉眼可见的、明显的实质性脏器病变。二周后存活动物一般状况良好。因此，ABC-1样品以腹腔途径一次给药对昆明种小鼠急性毒性试验得到的LD50为130.76mg/kg。具体数据见表1。
表1．ABC-1腹腔途径一次给药对昆明种小鼠急性毒性试验
抗S180实体瘤疗效试验1．剂量设置CBL(苯丁酸氮芥)设6.8mg/kg、5mg/kg、2.5mg/kg、1.3mg/kg等剂量；ABC-1设13mg/kg、9.6mg/kg、6.5mg/kg、4.8mg/kg、3.3mg/kg及2.5mg/kg等剂量2．给药方案采用ip×73．对S180实体瘤的疗效试验取生长旺盛的荷S180实体瘤小鼠，无菌条件下取出肿瘤，以匀浆法制备成1～2×107/mL细胞悬液，以相应宿主每鼠右腋皮下接种0.2mL/只，次日按实验设计方案给药，十天左右处死各组动物，剖取肿瘤称重，按下列公式计算肿瘤抑制率肿瘤抑制率=[(对照组平均瘤重-给药组平均瘤重)/对照组平均瘤重]×100％4．试验结果CBL 6.8mg/kg、5mg/kg、2.5mg/kg、1.3mg/kg剂量ip×7qd的治疗方案对小鼠S180肉瘤疗效分别为77.38％、73.30％、52.94％及37.10％；ABC-1以13mg/kg、9.6mg/kg、6.5mg/kg、4.8mg/kg、3.3mg/kg及2.5mg/kg等剂量，以相同方案试验疗效分别为81.45％、76.92％、74.21％、63.35％、50.68％及47.96％，PASE对照剂量13mg/kg，疗效为11.31％。结果详见表2。
表2．ABC-1及CBL化合物对S180实体瘤的疗效试验
***p值＜0.01与阴性对照组相比，其中CBL为阳性对照样品苯丁酸氮芥。5．对动物肿瘤模型S180肉瘤的疗效比较，列表如下表3以等毒剂量比较CBL及ABC-1对小鼠S180的抑制率
表4以等摩尔剂量比较CBL及ABC-1对小鼠S180的抑制率
从表中数据可以看出，等毒剂量或等摩尔剂量比较时ABC-1的效果均比CBL好，尤其是在中、低剂量时抑制率更有明显的提高。根据所得数据计算，CBL的ED50为2.17mg／kg，其疗效指数(TI)为22.84ABC-1的ED50为2.75mg/kg，其疗效指数(TI)为47.55，约为CBL的两倍。
权利要求
1．一种高效低毒抗肿瘤药物，其特征是分子结构中含有磺胺类药物和细胞毒药物，化学通式为A-B-C，其中(1)A通过磺酰胺上的氮与B相连，其通式为 R1、R2、R3是各类磺胺药物上的取代基；(2)B是分子量为14～140的烷基链(CH2)n，这里n为1～10；(3)C为细胞毒抗肿瘤药物中任一种。
2．根据权利要求1所述的高效低毒抗肿瘤药物，其特征是其化学通式A-B-C中B是分子量为50-100的烷基链(CH2)n，这里n=4-8。
3．根据权利要求1所述的高效低毒抗肿瘤药物，其特征是其化学通式A-B-C中C是下述细胞毒抗肿瘤药物中任一种氮芥类，5-氟脲嘧啶，嘌呤类，阿霉素，甲氨喋呤，生物碱类以及生物工程类抗肿瘤药物。
4．根据权利要求1所述的高效低毒抗肿瘤药物，其特征是结构中含有磺胺类药物和细胞毒药物，且对肿瘤细胞具有导向作用。
5．根据权利要求1所述的高效低毒抗肿瘤药物的制备方法，其特征是以磺胺类药物为起始原料A，在保护芳香胺基的条件下通过亲电反应接上烷基链B，然后通过偶联反应将细胞毒抗肿瘤药物C接在烷基链上，最后将保护基脱除即可，反应通式为 X为保护芳香胺基的基团
全文摘要
本发明属医药技术领域,是关于一种新型抗肿瘤药物及其制备方法,抗肿瘤动物试验。传统的化疗药物对肿瘤细胞的杀灭缺乏选择性,在杀死肿瘤细胞的同时也损伤正常细胞,有较大的毒副作用,给肿瘤病人带来巨大的痛苦。如何获得高效低毒的抗肿瘤制剂一直是人们所关注的焦点。本发明以磺胺类药物为靶向基团,通过适当的化学键,将毒性较大的细胞毒药物与靶基团结合,得到一类全新的药物。动物试验表明,这类药物具有高效低毒的特点。
文档编号A61K45/00GK1298743SQ0012758
公开日2001年6月13日 申请日期2000年11月28日 优先权日2000年11月28日
发明者黄骏廉, 黄兆华 申请人:复旦大学
技术领域：
本发明属医药技术领域，是关于一种新型抗肿瘤药物及其制备方法。
传统的化疗药物即细胞毒药物，对肿瘤细胞的杀灭缺乏选择性，在杀死肿瘤细胞的同时也损伤正常细胞，有较大的毒副作用，给肿瘤病人带来巨大的痛苦。如何获得高效低毒的抗肿瘤药物一直是人们所关注的焦点。
本发明的目的在于提供一种低毒性的能高效杀死肿瘤细胞的新型抗肿瘤药物及其制备方法。
磺胺类化合物是一种传统的抗菌素药物，本身不能作为抗肿瘤药物使用。但是，它能够在肿瘤中有一定程度的富集。本发明利用磺胺类化合物能够在肿瘤中富集的特点，将其作为导向基团，把它和细胞毒抗肿瘤药物通过化学反应接在一定分子量的烷烃两端，通过烷烃结构的多样性和丰富的链构象来屏蔽和减弱导向基团与抗肿瘤药物之间强烈的相互作用，并使之在肿瘤中选择性富集。
本发明通过适当化学反应合成了一种高效低毒抗肿瘤药物，其分子结构中含有磺胺类药物和细胞毒药物，化学通式为A-B-C，其中(1)A通过磺酰胺上的氮与B相连，其通式为 这里R1、R2、R3是各类磺胺药物上的取代基，例如R1:H,CH3CO,C6H5CH2OCO等，R2:H,CH3CO等，R3嘧啶环，吡喃环等；(2)B是分子量为14～140的烷基链(CH2)n，这里n为1～10(3)C为细胞毒抗肿瘤药物中的任一种。例如氮芥类，5-氟脲嘧啶，嘌呤类，阿霉素，甲氨喋呤，生物碱类以及生物工程类抗肿瘤药物。
例如，在A后接(CH2)4，然后再接苯丙氨酸氮芥，效果良好；在A后接(CH2)5，然后再接苯丁酸氮芥，效果良好；在A后接(CH2)8，然后再接5-氟脲嘧啶，效果良好。
上述结构的抗肿瘤药物以磺胺类药物中磺酰胺基为靶向基团，通过适当的化学键，将毒性较大的细胞毒药物与靶基团结合，得到的抗肿瘤药物通过磺胺类药物导向直接进入肿瘤细胞，减小了细胞毒药物对正常细胞的损伤，是一种新概念的抗肿瘤药物。
上述抗肿瘤药物中的B分子量为50-100将更好，n=4-8，使制备方法更方便，成本也有所下降。
上述抗肿瘤药物中的C可以是下述细胞毒抗肿瘤药物的任何一种。氮芥类，5-氟脲嘧啶，嘌呤类，阿霉素，甲氨喋呤，生物碱类以及生物工程类抗肿瘤药物。其中氮芥类有苯丙氨酸氮芥、苯丁酸氮芥、甲氮芥等，嘌呤类如6-巯基嘌呤、硫唑嘌呤，生物碱类如喜树碱、长春新碱、紫杉醇等，生物工程类如白芥素，肿瘤坏死因子等。这些细胞毒类药物偶联效果十分良好。
上述A-B-C通式的抗肿瘤药物经动物实验结果表明，等毒剂量或等摩尔剂量的效果比单一细胞毒抗肿瘤药物效果好，尤其是中、低剂量时抑制率更好。说明该类药物具有明显的导向作用。
本发明药物制备时以含磺酰胺基的磺胺类药物为起始原料A，在保护芳香胺基的条件下通过亲电反应接上烷基链B，该步骤一般将芳香胺基用保护基如苄氧羰基保护，然后成盐，便于亲电试剂反应接B，通过偶联反应将细胞毒抗肿瘤药物接在烷基链上。亲电反应是用常规现有技术反应。最后将保护基团去除，其反应通式为 X为保护芳香胺基的基团其中X可以是乙酰基、苄氧羰基等。反应结束后，产品简单后处理即可，反应过程无特殊要求，易推广实施。
本发明若用苄氧羰基保护磺酰胺芳香胺基，然后成盐，例如钾盐、钠盐，再进行亲电反应接B，偶合细胞毒药物之后，用钯碳和甲酸铵室温下反应2-4小时即可去保护。该反应效果好，产率高。反应过程无特殊要求，易产业化。当R1、R2为H，n=2，C为苯丁酸氮芥时，ABC-1的合成方法见实施例一。其制备路线如下
(B)受试动物为昆明种小鼠(由上海医药工业研究院实验动物组提供，合格证号为“沪动合证字第107号”)；体重19±1克。
(B)性别急性毒性试验，雌雄各半；疗效试验，雌雄皆可，每批试验使用同一种性别。
(D)动物数急性毒性试验，每组20只昆明种小鼠。每一试验组和阳性对照组均为10只，阴性对照组为20只。急性毒性试验1．剂量设置ABC-1样品设五个组，分别为200、160、128、102.4、及81.92mg/kg。2．给药方案采用ip×1。3．试验主要步骤试验设5个剂量组，剂量间距为0.8。动物随机分组，每组20只，雌雄各半。给药后观察即时反应，记录二周内小鼠的死亡分布。对死亡小鼠数及二周后存活小鼠进行解剖，肉眼尸检。当尸检发现有病变组织时，对该组织进行镜检。试验结果以Bliss方法计算。4．试验结果以腹腔途径一次给药，对昆明种小鼠急性毒性试验结果见表1。雌雄动物之间无显著性差异，P值＞0.05。腹腔途径单次给药后一般症状；即时动物行动迟缓，呆滞，腹部略有收缩，与剂量成正相关，15分钟左右低剂量组即恢复至常态。死亡大多出现在48小时内，以24小时内为死亡高峰。死亡动物尸检未发现肉眼可见的、明显的实质性脏器病变。二周后存活动物一般状况良好。因此，ABC-1样品以腹腔途径一次给药对昆明种小鼠急性毒性试验得到的LD50为130.76mg/kg。具体数据见表1。
表1．ABC-1腹腔途径一次给药对昆明种小鼠急性毒性试验
抗S180实体瘤疗效试验1．剂量设置CBL(苯丁酸氮芥)设6.8mg/kg、5mg/kg、2.5mg/kg、1.3mg/kg等剂量；ABC-1设13mg/kg、9.6mg/kg、6.5mg/kg、4.8mg/kg、3.3mg/kg及2.5mg/kg等剂量2．给药方案采用ip×73．对S180实体瘤的疗效试验取生长旺盛的荷S180实体瘤小鼠，无菌条件下取出肿瘤，以匀浆法制备成1～2×107/mL细胞悬液，以相应宿主每鼠右腋皮下接种0.2mL/只，次日按实验设计方案给药，十天左右处死各组动物，剖取肿瘤称重，按下列公式计算肿瘤抑制率肿瘤抑制率=[(对照组平均瘤重-给药组平均瘤重)/对照组平均瘤重]×100％4．试验结果CBL 6.8mg/kg、5mg/kg、2.5mg/kg、1.3mg/kg剂量ip×7qd的治疗方案对小鼠S180肉瘤疗效分别为77.38％、73.30％、52.94％及37.10％；ABC-1以13mg/kg、9.6mg/kg、6.5mg/kg、4.8mg/kg、3.3mg/kg及2.5mg/kg等剂量，以相同方案试验疗效分别为81.45％、76.92％、74.21％、63.35％、50.68％及47.96％，PASE对照剂量13mg/kg，疗效为11.31％。结果详见表2。
表2．ABC-1及CBL化合物对S180实体瘤的疗效试验
***p值＜0.01与阴性对照组相比，其中CBL为阳性对照样品苯丁酸氮芥。5．对动物肿瘤模型S180肉瘤的疗效比较，列表如下表3以等毒剂量比较CBL及ABC-1对小鼠S180的抑制率
表4以等摩尔剂量比较CBL及ABC-1对小鼠S180的抑制率
从表中数据可以看出，等毒剂量或等摩尔剂量比较时ABC-1的效果均比CBL好，尤其是在中、低剂量时抑制率更有明显的提高。根据所得数据计算，CBL的ED50为2.17mg／kg，其疗效指数(TI)为22.84ABC-1的ED50为2.75mg/kg，其疗效指数(TI)为47.55，约为CBL的两倍。
权利要求
1．一种高效低毒抗肿瘤药物，其特征是分子结构中含有磺胺类药物和细胞毒药物，化学通式为A-B-C，其中(1)A通过磺酰胺上的氮与B相连，其通式为 R1、R2、R3是各类磺胺药物上的取代基；(2)B是分子量为14～140的烷基链(CH2)n，这里n为1～10；(3)C为细胞毒抗肿瘤药物中任一种。
2．根据权利要求1所述的高效低毒抗肿瘤药物，其特征是其化学通式A-B-C中B是分子量为50-100的烷基链(CH2)n，这里n=4-8。
3．根据权利要求1所述的高效低毒抗肿瘤药物，其特征是其化学通式A-B-C中C是下述细胞毒抗肿瘤药物中任一种氮芥类，5-氟脲嘧啶，嘌呤类，阿霉素，甲氨喋呤，生物碱类以及生物工程类抗肿瘤药物。
4．根据权利要求1所述的高效低毒抗肿瘤药物，其特征是结构中含有磺胺类药物和细胞毒药物，且对肿瘤细胞具有导向作用。
5．根据权利要求1所述的高效低毒抗肿瘤药物的制备方法，其特征是以磺胺类药物为起始原料A，在保护芳香胺基的条件下通过亲电反应接上烷基链B，然后通过偶联反应将细胞毒抗肿瘤药物C接在烷基链上，最后将保护基脱除即可，反应通式为 X为保护芳香胺基的基团
全文摘要
本发明属医药技术领域,是关于一种新型抗肿瘤药物及其制备方法,抗肿瘤动物试验。传统的化疗药物对肿瘤细胞的杀灭缺乏选择性,在杀死肿瘤细胞的同时也损伤正常细胞,有较大的毒副作用,给肿瘤病人带来巨大的痛苦。如何获得高效低毒的抗肿瘤制剂一直是人们所关注的焦点。本发明以磺胺类药物为靶向基团,通过适当的化学键,将毒性较大的细胞毒药物与靶基团结合,得到一类全新的药物。动物试验表明,这类药物具有高效低毒的特点。
文档编号A61K45/00GK1298743SQ0012758
公开日2001年6月13日 申请日期2000年11月28日 优先权日2000年11月28日
发明者黄骏廉, 黄兆华 申请人:复旦大学
最新回复(0)