同种骨骨粉及其制备方法
专利名称：同种骨骨粉及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种骨科临床医学上用于治疗骨缺损的植入材料及其制备方法，具体涉及一种可以代替自体骨治疗的同种骨骨粉及其制备方法。
背景技术：
目前国内外普遍认为骨科临床用人类同种骨植入材料替代自体骨治疗各种原因引起的骨缺损，如骨纤维结构不良、骨巨细胞瘤、脊柱侧弯矫正融合、创伤所致骨缺损及骨肿瘤大段骨切除植骨保肢术等是既可行又经济的方式。但目前国内市场上存在的骨植入材料均非人类同种骨，如天津中津药业股份有限公司生物医材科技分公司生产的“金世植骨灵”(又名“重组合异种骨”)、北京市意华健科贸有限责任公司生产的“珊瑚羟基磷灰石人造骨”等，均非人类同种骨，在临床治疗种无法制成大段骨。而且，在口腔科骨缺损的临床治疗中，尚未见到同种骨粉填充材料方面的有关信息。
发明内容
本发明的目的在于公开一种同种骨骨粉及其制备方法，这种同种骨骨粉不仅可以通过与生物调合剂复合重塑各种非天然结构的骨植入材料，为临床上提供更广泛的材料来源，还可以直接作为填充材料应用于口腔科骨缺损的治疗。
所说的同种骨骨粉，是通过如下方法制得的(1)制备粒径为0.125～0.9mm的骨粉颗粒；(2)将骨粉颗粒先后在蒸馏水和乙醇中用超声法清洗进行脱脂；(3)将脱脂后的骨粉颗粒在盐酸中用超声法清洗进行脱矿；(4)冲洗掉盐酸，将骨粉颗粒放入蒸馏水中用超声法清洗；(5)将步骤(4)中得到的骨粉颗粒放入乙醇中进行灭菌处理后，冷冻干燥。
本发明的优选放案为脱脂时所用乙醇浓度为95％、脱矿时所用的盐酸浓度为0.6mol/l、灭菌时所用乙醇浓度为75％，将冷冻干燥后的骨粉包装后，用15～20kGy的剂量辐照进行第二次灭菌。
由于这种骨粉是经过充分脱脂、可控制深度脱矿、彻底去酸和冷冻干燥辐照灭菌制备的，因此，既有效降低了免疫原性、保留了成骨因子，又彻底杀灭致病微生物，避免由骨粉本身引起的感染和疾病传播。
这种骨粉可以直接作为填充材料广泛应用于口腔科牙周病、拔牙窝、囊中、肿瘤等原因引起的骨缺损，也可以与生物调合剂重塑成各种非天然结构的骨植入材料，用于其它原因造成的骨缺损填充修复。
具体实施例方式
下面通过实施例对本发明作更为详细的描述。
1.制粉1.1将清洗干净的皮质骨干利用普通车床旋成碎屑，然后把碎屑放入微型植物试样粉碎机中粉碎，制成骨粉；1.2用块状磁铁在骨粉中移动吸附加工过程中可能产生的铁末微粒；1.3准备孔径为0.9mm和0.125mm的尼龙网袋各一只，分别筛除粒径大于0.9mm和小于0.125mm的粉粒，将粒径在0.125～0.9mm之间的骨粉作为原料进入下一工序。
2.脱脂处理2.1清洗污染物。取已制好的骨粉原料300克放入孔径为0.125mm的尼龙网袋中，将此尼龙网袋放入含有3000ml蒸馏水的不锈钢容器中，用超声清洗机常规超声清洗30分钟，以洗去骨粉中的污物，取出网袋后甩去水分；2.2乙醇脱脂。将甩干的网袋(装有骨粉，下同)放入含1500ml浓度为95％的乙醇的不锈钢容器中，常规超声清洗8小时，中间置换乙醇一次；2.3置换乙醇。用达到饮用水标准的净化水冲洗骨粉4次，取出骨粉甩干。
3.脱矿处理将骨粉倒入不锈钢容器中，加入1500ml、浓度为0.6N的盐酸，在超声清洗机内常规清洗7小时(中间置换1500ml、浓度为0.6N的盐酸一次)，然后将骨粉中的盐酸脱矿液倒掉，把骨粉重新放入孔径为0.125mm的尼龙网袋中，再将网袋放入不锈钢容器用净化水反复漂洗5次，初步洗去盐酸后甩干。
4.去酸调整PH值4.1将尼龙网袋放入不锈钢容器中，加入净化水4000ml，进行常规超声清洗，每小时置换一次净化水。超洗8小时后用蒸馏水代替净化水，每小时置换一次蒸馏水，超洗4小时。
4.2测量骨粉中液体PH值，当骨粉中液体PH值大于6.5时，取出网袋将骨粉甩干，否则继续进行超洗，直到PH值大于6.5。
5.冷冻干燥5.1初次灭菌。将尼龙网袋放入不锈钢中，倒入75％的乙醇，量以淹没骨粉为准，浸泡30分钟以杀灭骨粉中的微生物；5.2冷冻干燥。将骨粉放入冷冻干燥机的托盘中，铺开进行冷冻干燥。
6.包装和二次灭菌6.1包装。在万级洁净间中根据临床需要将骨粉按照0.3克、0.5克、1.0克等规格用医用热封塑料袋包装；6.2二次灭菌。将包装好的骨粉放入钴60γ射线辐照装置中进行灭菌处理，辐照剂量为15～20KGy。
7.出厂检验7.1将经过辐照处理的骨粉在超净工作台中打开，在无菌条件下放入培养基试管中，与枯草芽孢菌和金葡菌平行对比培养(恒温培养箱温度为37℃)72小时，培养结果为阴性即为无菌检验合格，否则为不合格；7.2含水量小于6％为合格，否则不合格。
8.骨粉产品的各项指标8.1粒径骨粉为不规则形颗粒，80％的颗粒粒径在0.1258～0.9mm范围内；8.2脱矿深度经显微镜分析检测系统检测50％的骨粉颗粒脱矿深度大于50微米；8.3酸度骨粉PH值大于6.5；
8.4含水量小于6％；8.5无菌检验检验结果为阴性。
关于实施例需要说明的几点1.在“1.制粉”中1.1的操作还可以是“用常规方法将0.3～0.5cm3的松质骨块直接放入粉碎机中粉碎制成骨粉”。
2.操作中除网袋孔径之外，其余参数的选择均根据实际需要或者相应的操作效果确定。如选取的骨粉的重量、最后骨粉的PH值，超洗时所用洗液的量、浓度以及超洗时间、更换频率等，因此不视为对操作本身的限制。
权利要求
1.一种同种骨骨粉，其特征在于其制备方法如下(1)制备粒径为0.125～0.9mm的骨粉颗粒；(2)将骨粉颗粒先后在蒸馏水和乙醇中用超声法清洗进行脱脂；(3)将脱脂后的骨粉颗粒在盐酸中用超声法清洗进行脱矿；(4)冲洗掉盐酸，将骨粉颗粒放入蒸馏水中用超声法清洗；(5)将步骤(4)中得到的骨粉颗粒放入乙醇中进行灭菌处理后，冷冻干燥。
2.如权利要求1所述的同种骨骨粉，其特征在于将冷冻干燥后并包装好的骨粉颗粒在15～20kGy的剂量下辐照进行第二次灭菌。
3.如权利要求1或2所述的同种骨骨粉，其特征在于在进行步骤(2)前先用磁铁在骨粉颗粒中移动，以吸附可能存在的铁末微粒。
4.如权利要求1或2所述的同种骨骨粉，其特征在于在超声清洗过程中多次置换蒸馏水或乙醇。
5.如权利要求1或2所述的同种骨骨粉，其特征在于步骤(2)中脱脂时所用的乙醇浓度为95％、步骤(3)中脱矿时所用的盐酸浓度为0.6mol/l、步骤(5)中灭菌时所用乙醇浓度为75％。
6.一种同种骨骨粉制备方法，具体步骤如下(1)制备粒径为0.125～0.9mm的骨粉颗粒；(2)将骨粉颗粒先后在蒸馏水和乙醇中用超声法清洗进行脱脂；(3)将脱脂后的骨粉颗粒在盐酸中用超声法清洗进行脱矿；(4)冲洗掉盐酸，将骨粉颗粒放入蒸馏水中用超声法清洗；(5)将步骤(4)中得到的骨粉颗粒放入乙醇中进行灭菌处理后，冷冻干燥。
7.如权利要求6所述的同种骨骨粉制备方法，其特征在于将冷冻干燥后并包装好的骨粉颗粒在15～20kGy的剂量下辐照进行第二次灭菌。
8.如权利要求6或7所述的同种骨骨粉制备方法，其特征在于在进行步骤(2)前先用磁铁在骨粉颗粒中移动，以吸附可能存在的铁末微粒。
9.如权利要求6或7所述的同种骨骨粉制备方法，其特征在于在超声清洗过程中多次置换蒸馏水或乙醇。
10.如权利要求6或7所述的同种骨骨粉制备方法，其特征在于步骤(2)中脱脂时所用的乙醇浓度为95％、步骤(3)中脱矿时所用的盐酸浓度为0.6mol/l、步骤(5)中灭菌时所用乙醇浓度为75％。
全文摘要
一种同种骨骨粉及其制备方法，涉及用于口腔科临床治疗多种原因引起的骨缺损的填充材料及其制备方法。该骨粉是将人类骨粉碎制成0.125～0.9mm的颗粒，然后在蒸馏水和乙醇中用超声法清洗进行脱脂、再在盐酸中超声清洗进行脱矿，接着去酸调pH值、灭菌，最后冷冻干燥辐照而得的，既降低免疫原性、保留成骨因子，又杀灭致病微生物。可直接用作口腔科牙周病、拔牙窝、囊肿、肿瘤等原因引起的骨缺损治疗的填充材料，也可与生物调合剂重塑成各种非天然结构的骨植入材料，用于治疗其它原因造成的骨缺损。
文档编号A61L27/00GK1579561SQ03150100
公开日2005年2月16日 申请日期2003年8月1日 优先权日2003年8月1日
发明者李宝兴, 张康蓉, 邢力, 李幼忱, 李春源, 殷少芳, 石占城, 孙世荃 申请人:山西奥瑞生物材料有限公司
技术领域：
本发明涉及一种骨科临床医学上用于治疗骨缺损的植入材料及其制备方法，具体涉及一种可以代替自体骨治疗的同种骨骨粉及其制备方法。
背景技术：
目前国内外普遍认为骨科临床用人类同种骨植入材料替代自体骨治疗各种原因引起的骨缺损，如骨纤维结构不良、骨巨细胞瘤、脊柱侧弯矫正融合、创伤所致骨缺损及骨肿瘤大段骨切除植骨保肢术等是既可行又经济的方式。但目前国内市场上存在的骨植入材料均非人类同种骨，如天津中津药业股份有限公司生物医材科技分公司生产的“金世植骨灵”(又名“重组合异种骨”)、北京市意华健科贸有限责任公司生产的“珊瑚羟基磷灰石人造骨”等，均非人类同种骨，在临床治疗种无法制成大段骨。而且，在口腔科骨缺损的临床治疗中，尚未见到同种骨粉填充材料方面的有关信息。
发明内容
本发明的目的在于公开一种同种骨骨粉及其制备方法，这种同种骨骨粉不仅可以通过与生物调合剂复合重塑各种非天然结构的骨植入材料，为临床上提供更广泛的材料来源，还可以直接作为填充材料应用于口腔科骨缺损的治疗。
所说的同种骨骨粉，是通过如下方法制得的(1)制备粒径为0.125～0.9mm的骨粉颗粒；(2)将骨粉颗粒先后在蒸馏水和乙醇中用超声法清洗进行脱脂；(3)将脱脂后的骨粉颗粒在盐酸中用超声法清洗进行脱矿；(4)冲洗掉盐酸，将骨粉颗粒放入蒸馏水中用超声法清洗；(5)将步骤(4)中得到的骨粉颗粒放入乙醇中进行灭菌处理后，冷冻干燥。
本发明的优选放案为脱脂时所用乙醇浓度为95％、脱矿时所用的盐酸浓度为0.6mol/l、灭菌时所用乙醇浓度为75％，将冷冻干燥后的骨粉包装后，用15～20kGy的剂量辐照进行第二次灭菌。
由于这种骨粉是经过充分脱脂、可控制深度脱矿、彻底去酸和冷冻干燥辐照灭菌制备的，因此，既有效降低了免疫原性、保留了成骨因子，又彻底杀灭致病微生物，避免由骨粉本身引起的感染和疾病传播。
这种骨粉可以直接作为填充材料广泛应用于口腔科牙周病、拔牙窝、囊中、肿瘤等原因引起的骨缺损，也可以与生物调合剂重塑成各种非天然结构的骨植入材料，用于其它原因造成的骨缺损填充修复。
具体实施例方式
下面通过实施例对本发明作更为详细的描述。
1.制粉1.1将清洗干净的皮质骨干利用普通车床旋成碎屑，然后把碎屑放入微型植物试样粉碎机中粉碎，制成骨粉；1.2用块状磁铁在骨粉中移动吸附加工过程中可能产生的铁末微粒；1.3准备孔径为0.9mm和0.125mm的尼龙网袋各一只，分别筛除粒径大于0.9mm和小于0.125mm的粉粒，将粒径在0.125～0.9mm之间的骨粉作为原料进入下一工序。
2.脱脂处理2.1清洗污染物。取已制好的骨粉原料300克放入孔径为0.125mm的尼龙网袋中，将此尼龙网袋放入含有3000ml蒸馏水的不锈钢容器中，用超声清洗机常规超声清洗30分钟，以洗去骨粉中的污物，取出网袋后甩去水分；2.2乙醇脱脂。将甩干的网袋(装有骨粉，下同)放入含1500ml浓度为95％的乙醇的不锈钢容器中，常规超声清洗8小时，中间置换乙醇一次；2.3置换乙醇。用达到饮用水标准的净化水冲洗骨粉4次，取出骨粉甩干。
3.脱矿处理将骨粉倒入不锈钢容器中，加入1500ml、浓度为0.6N的盐酸，在超声清洗机内常规清洗7小时(中间置换1500ml、浓度为0.6N的盐酸一次)，然后将骨粉中的盐酸脱矿液倒掉，把骨粉重新放入孔径为0.125mm的尼龙网袋中，再将网袋放入不锈钢容器用净化水反复漂洗5次，初步洗去盐酸后甩干。
4.去酸调整PH值4.1将尼龙网袋放入不锈钢容器中，加入净化水4000ml，进行常规超声清洗，每小时置换一次净化水。超洗8小时后用蒸馏水代替净化水，每小时置换一次蒸馏水，超洗4小时。
4.2测量骨粉中液体PH值，当骨粉中液体PH值大于6.5时，取出网袋将骨粉甩干，否则继续进行超洗，直到PH值大于6.5。
5.冷冻干燥5.1初次灭菌。将尼龙网袋放入不锈钢中，倒入75％的乙醇，量以淹没骨粉为准，浸泡30分钟以杀灭骨粉中的微生物；5.2冷冻干燥。将骨粉放入冷冻干燥机的托盘中，铺开进行冷冻干燥。
6.包装和二次灭菌6.1包装。在万级洁净间中根据临床需要将骨粉按照0.3克、0.5克、1.0克等规格用医用热封塑料袋包装；6.2二次灭菌。将包装好的骨粉放入钴60γ射线辐照装置中进行灭菌处理，辐照剂量为15～20KGy。
7.出厂检验7.1将经过辐照处理的骨粉在超净工作台中打开，在无菌条件下放入培养基试管中，与枯草芽孢菌和金葡菌平行对比培养(恒温培养箱温度为37℃)72小时，培养结果为阴性即为无菌检验合格，否则为不合格；7.2含水量小于6％为合格，否则不合格。
8.骨粉产品的各项指标8.1粒径骨粉为不规则形颗粒，80％的颗粒粒径在0.1258～0.9mm范围内；8.2脱矿深度经显微镜分析检测系统检测50％的骨粉颗粒脱矿深度大于50微米；8.3酸度骨粉PH值大于6.5；
8.4含水量小于6％；8.5无菌检验检验结果为阴性。
关于实施例需要说明的几点1.在“1.制粉”中1.1的操作还可以是“用常规方法将0.3～0.5cm3的松质骨块直接放入粉碎机中粉碎制成骨粉”。
2.操作中除网袋孔径之外，其余参数的选择均根据实际需要或者相应的操作效果确定。如选取的骨粉的重量、最后骨粉的PH值，超洗时所用洗液的量、浓度以及超洗时间、更换频率等，因此不视为对操作本身的限制。
权利要求
1.一种同种骨骨粉，其特征在于其制备方法如下(1)制备粒径为0.125～0.9mm的骨粉颗粒；(2)将骨粉颗粒先后在蒸馏水和乙醇中用超声法清洗进行脱脂；(3)将脱脂后的骨粉颗粒在盐酸中用超声法清洗进行脱矿；(4)冲洗掉盐酸，将骨粉颗粒放入蒸馏水中用超声法清洗；(5)将步骤(4)中得到的骨粉颗粒放入乙醇中进行灭菌处理后，冷冻干燥。
2.如权利要求1所述的同种骨骨粉，其特征在于将冷冻干燥后并包装好的骨粉颗粒在15～20kGy的剂量下辐照进行第二次灭菌。
3.如权利要求1或2所述的同种骨骨粉，其特征在于在进行步骤(2)前先用磁铁在骨粉颗粒中移动，以吸附可能存在的铁末微粒。
4.如权利要求1或2所述的同种骨骨粉，其特征在于在超声清洗过程中多次置换蒸馏水或乙醇。
5.如权利要求1或2所述的同种骨骨粉，其特征在于步骤(2)中脱脂时所用的乙醇浓度为95％、步骤(3)中脱矿时所用的盐酸浓度为0.6mol/l、步骤(5)中灭菌时所用乙醇浓度为75％。
6.一种同种骨骨粉制备方法，具体步骤如下(1)制备粒径为0.125～0.9mm的骨粉颗粒；(2)将骨粉颗粒先后在蒸馏水和乙醇中用超声法清洗进行脱脂；(3)将脱脂后的骨粉颗粒在盐酸中用超声法清洗进行脱矿；(4)冲洗掉盐酸，将骨粉颗粒放入蒸馏水中用超声法清洗；(5)将步骤(4)中得到的骨粉颗粒放入乙醇中进行灭菌处理后，冷冻干燥。
7.如权利要求6所述的同种骨骨粉制备方法，其特征在于将冷冻干燥后并包装好的骨粉颗粒在15～20kGy的剂量下辐照进行第二次灭菌。
8.如权利要求6或7所述的同种骨骨粉制备方法，其特征在于在进行步骤(2)前先用磁铁在骨粉颗粒中移动，以吸附可能存在的铁末微粒。
9.如权利要求6或7所述的同种骨骨粉制备方法，其特征在于在超声清洗过程中多次置换蒸馏水或乙醇。
10.如权利要求6或7所述的同种骨骨粉制备方法，其特征在于步骤(2)中脱脂时所用的乙醇浓度为95％、步骤(3)中脱矿时所用的盐酸浓度为0.6mol/l、步骤(5)中灭菌时所用乙醇浓度为75％。
全文摘要
一种同种骨骨粉及其制备方法，涉及用于口腔科临床治疗多种原因引起的骨缺损的填充材料及其制备方法。该骨粉是将人类骨粉碎制成0.125～0.9mm的颗粒，然后在蒸馏水和乙醇中用超声法清洗进行脱脂、再在盐酸中超声清洗进行脱矿，接着去酸调pH值、灭菌，最后冷冻干燥辐照而得的，既降低免疫原性、保留成骨因子，又杀灭致病微生物。可直接用作口腔科牙周病、拔牙窝、囊肿、肿瘤等原因引起的骨缺损治疗的填充材料，也可与生物调合剂重塑成各种非天然结构的骨植入材料，用于治疗其它原因造成的骨缺损。
文档编号A61L27/00GK1579561SQ03150100
公开日2005年2月16日 申请日期2003年8月1日 优先权日2003年8月1日
发明者李宝兴, 张康蓉, 邢力, 李幼忱, 李春源, 殷少芳, 石占城, 孙世荃 申请人:山西奥瑞生物材料有限公司
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