一种制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法
专利名称：一种制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法
技术领域：
本发明属制药领域，涉及药物制剂的制备方法，具体涉及一种制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法。
背景技术：
自上世纪八十年代初，即有研究表明，高荷负电的羧基化聚合物(如丙烯酸类聚合物)对体外培养的人眼结膜上皮细胞具有显著高的生物粘附作用和明显低的生物毒性[Park K.et al，Int J Pharm 1984，19107-27]；并经动物体内外胃肠道粘附实验证明，丙烯酸类聚合物(如Polycarbophil)与胃肠道表面的粘蛋白相互作用，使胃肠道对其排空时间明显延长，从而得出生物粘性聚合物可作为口服控释制剂的释药平台结论[Ch’ng H.S.et al，J Pharm Sci 1985，74399-405]。
此后，报道了分别用聚卡波菲[Polycarbophil(CarbopolEX-55 resin)]、卡波姆(Carbomer，Carbopol934P)和脱乙酰壳多糖作为生物粘附材料的微球动物体内粘附及生物利用度研究结果。或以单纯Polycarbophil胃粘附微球与氯噻嗪微球混合的胶囊[Longer M.A.et al，J Pharm Sci1985，74406-11]，或单以Polycarbophil、Carbomer包衣的、Carbomer和EudragitRL100混合包衣的小肠粘附微球[Lehr C.M.et al，JControlled Release 1990，1351-62]、或以Carbomer分散于四甘油五硬脂酸(TGPS)和四甘油单硬脂酸酯(TGMS)制成的胃粘附微球[AkiyamaY.et al，Pharm Res 1995，12(3)397-405]，或以脱乙酰壳多糖制成的阿昔洛韦眼上皮粘附微球[Genta I.et al，J Pharm Pharmacol1997，49737-42]，均证明或明显延长微球在给药部位滞留时间、或显著提高药物的生物利用度。人体试验结果已证明，速尿和维生素B2生物粘附微球的生物利用度分别高于非生物粘附微球1.8和2.4倍，生物利用度提高显著[Akiyama Y.et al，J Pharm Pharmacol 1998，50159-66]。
研究表明，凡具有以下性质的药物均适宜制成生物粘附微球，这些性质包括体内溶解度小、吸收窗狭窄、吸收速度慢或有饱和吸收，生物半衰期短；或在有效作用部位停留时间过短，不足以发挥疗效。具有上述性质的药物经制成生物粘附微球后，可在设定给药部位(如胃肠道、眼部、口腔、鼻腔等)粘附滞留，从而达到定位释药，提高疗效；或改善吸收，提高生物利用度的目的。例如，1981年Burroughs Wellcome公司研制开发了阿昔洛韦，其血浆半衰期段为2.9小时，主要以药物原形经肾排泄，吸收主要依赖于小肠内的被动扩散和吸收速率慢等缘故，虽然国内外先后出现多种口服的阿昔洛韦剂型如片剂、胶囊剂、混悬剂、颗粒剂等，但仍存在生物利用度低(15～30％)和给药次数多(5次/日)的缺点。
再如，幽门螺旋杆菌(HP)已被普遍认为是胃及十二指肠等消化道溃疡的主要病因。HP属于生长缓慢的微生物，对抗菌剂较易产生耐药性。目前临床上抗HP感染的有效给药方案多为抗菌药与标准抗溃疡药物联用，目的就是要达到根除HP，从而减少溃疡的复发率。HP的根除率取决于它对药物的敏感性，和药物与它的作用时间。许多抗菌药物经口服给药后，胃内停留时间较短，不能在胃粘膜层或上皮细胞表面等HP存在的部位达到有效的杀菌浓度或持续时间，故而影响了它们对HP的根除率。1995年，Akiyama等报道了可在胃肠道粘膜表面粘附停留粘附微球(阿莫西林粘附微球)，结果表明，阿莫西林生物粘附微球具有较高的HP清除率。
发明内容
本发明的目的是提供一种生物粘附微球药物制剂制备方法，尤其是一种制备胃肠道生物粘附微球药物制剂方法。本方法所制得的生物粘附微球具有良好的体内外粘附效果和缓释效果。本方法包括选用经口服吸收药物，微球载体材料，生物粘附材料，以极性有机溶媒为分散相介质、非极性有机介质为连续相，采用乳化-气流溶媒蒸发法制备含药胃肠道生物粘附微球。
所述的乳化-气流溶媒蒸发法是，在恒温条件下，反应系统乳化后，用非密闭抽气方式使液面持续保持负压状态以控制溶媒的蒸发速率。
本发明涉及的微球载体材料可在极性有机溶媒中溶解。所述微球载体材料选用包括但不限于乙基纤维素。其中包括乙基纤维素(EC)、聚乳酸(PLA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、聚乙醇酸(PGA)和丙烯酸甲酯共聚物(MA)。
本发明涉及的生物粘附材料可在极性有机溶媒中溶解或良好分散。所述生物粘附材料包括丙烯酸类聚合物及其衍生物、聚卡波菲、壳多糖及脱乙酰壳多糖、海藻酸及其钠盐、透明质酸及其钠盐、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素及其钠盐、羧甲基纤维素及其钠盐与聚异丁烯共混物、聚乙烯醇及其共聚物、聚维酮及其共聚物和瓜耳胶。
本发明胃肠道生物粘附微球药物制剂可选用上述一种或一种以上混合的可粘附药用辅料。
所述的极性有机溶媒能同时溶解微球载体材料和生物粘附材料，或只能溶解微球载体材料、而生物粘附材料能在其中良好分散。
所述的连续相中含有表面活性物质，包括司盘类表面活性剂(Span)，其重量体积百分数为1-4％。
所述经口服吸收药物以固体粉末或固体颗粒形式分散于极性有机溶媒中。
本发明涉及的恒温条件可通过带有夹套的反应容器连接的恒温水浴控制，其温度范围是10-35℃。
所述乳化-气流溶媒蒸发法抽气速率根据微球形状和粒径控制。其中优选抽气速率为15-60L/min。
本发明所制得微球形状为圆球形，微球粒径为200-1250μm，其中生物粘附材料和微球载体材料重量比为1∶1-30。
本发明选用卡波姆934P为生物粘附材料，乙基纤维素(20cps)为骨架材料，运用乳化-气流溶媒蒸发法研制成具有胃肠道粘附作用的阿昔洛韦生物粘附微球。所制得的阿昔洛韦生物粘附微球体内外粘附效果和缓释效果均较明显。
本发明针对普通阿莫西林制剂胃内滞留时间短的不足，选用卡波姆934P或脱乙酰壳多糖或海藻酸钠或透明质酸为生物粘附材料、乙基纤维素(20cps)为骨架材料，运用乳化-气流溶媒蒸发法研制成具有胃肠道粘附作用的阿莫西林生物粘附微球。经体内外粘附性试验，结果均表明阿莫西林生物粘附微球在胃肠道粘附效果明显，微球在胃内滞留时间延长，体内HP的抑制程度明显高于阿莫西林混悬液。
经对本发明方法制备的阿昔洛韦生物粘附微球和阿莫西林-卡波姆-乙基纤维素生物粘附微球体内外粘附性进行考察，结果表明两者均具有良好的粘附作用。体内外粘附性试验及结果如下1、体外粘附性试验——胃粘膜冲洗法取禁食、给水24h的小鼠，断颈处死后取胃，自贲门口处剪开，用生理盐水冲洗干净后剪成1×2厘米块状后平铺于载玻片上；在胃粘膜表面上撒上100粒微球(Acv-Cb-Ec或Amo-Cb-Ec)，以生理盐水润湿后，置于相对湿度为90％的密闭容器内，保湿20min；取出固定在45°斜面上，以pH1.3稀盐酸-氯化钠溶液冲洗(22mL/min)胃粘膜表面微球5min；计数胃粘膜表面滞留的微球个数，计算滞留百分率(以Acv-Ec及Amo-Ec为对照)。表1是阿昔洛韦生物粘附微球(Acv-Ec-Cb)与不含卡波姆934P的阿昔洛韦乙基纤维素(Acv-Ec)体外胃粘膜表面滞留率。表2是阿莫西林生物粘附微球(Amo-Ec-Cb)与不含卡波姆934P的阿莫西林乙基纤维素(Amo-Ec)体外胃粘膜表面滞留率。
表1.
Acv-Ec-Cb Acv-Ec500-1200μm300-500μm500-1200μm 300-500μm滞留率(％) 85±5 95±4 38±4 36±8(n＝3)，x±SD表2.
Amo-Cb-Ec Amo-Ec800-1250μm 250-500μm 800-1250μm滞留率(％) 92±6.8 89±7.3578±5.56(n＝3)，x±SD2、体内粘附性考察取体重为250-300g的清洁级SD大鼠18只，禁食、给水24小时后，随机分成6组，其中三组给予不含粘附材料的Acv-Ec(或Amo-Ec)作为对照；另三组给予Acv-Cb-Ec(或Amo-Cb-Ec)。取内径约2.5mm的塑料管，一端封口后，装入100粒微球，另一端接5ml注射器。当塑料管插入大鼠胃内后，以2ml生理盐水将微球注入大鼠胃内。记录每只大鼠灌胃时间。给药后大鼠禁食禁水，分别于2、4、7小时断颈处死大鼠。解剖大鼠，取出其胃及小肠，剪开，分别计数大鼠胃及小肠中的微球个数，计算滞留百分率。表3是阿昔洛韦生物粘附微球(Acv-Ec-Cb)与不含卡波姆934P的阿昔洛韦乙基纤维素微球(Acv-Ec)于不同时相在大鼠胃肠道内滞留率。表4是阿莫西林生物粘附微球(Amo-Ec-Cb)与不含卡波姆934P的阿莫西林乙基纤维素微球(Amo-Ec)于不同时相在大鼠胃肠道内滞留率。
表3.
(n＝3)
具体实施例方式
以下结合实施例进一步阐明本发明的内容，但本发明并不仅限制于这些实施例的范围。
实施例1 制备阿昔洛韦生物粘附微球1、乙基纤维素∶卡波姆为4∶1分散相制备 采用无水乙醇为分散相介质，将乙基纤维素和卡波姆934P配成浓度为40mg/ml和4mg/ml的透明胶状液，分别取乙基纤维素液3.6ml、卡波姆934P 9ml于磁力搅拌器上搅拌混匀，加入69mg阿昔洛韦粉末，继续搅拌，使阿昔洛韦均匀分散在上述胶状液中，备用。
连续相制备 称取Span 80 4.4g于恒温夹套反应容器中，加入轻质液蜡240ml、正庚烷120ml，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 控制体系温度于10-12℃，于1080转/分电动搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，保温5min后，以15L/min的速度抽气，并将搅拌速度降至660转/分；将体系温度逐渐升高至25℃，并维持2hr，改以30L/min速度抽气1hr；继续升高体系温度至35℃，并维持1hr后即生成微球。除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时。
2、乙基纤维素∶卡波姆为9∶1分散相制备 采用无水乙醇为分散相介质，将乙基纤维素和卡波姆934P配成浓度为40mg/ml和4mg/ml的透明胶状液，分别取乙基纤维素液6.57ml、卡波姆934P 7.3ml，于磁力搅拌器上搅拌混匀；另取阿昔洛韦粉末73mg于5ml无水乙醇中，以超声波粉碎仪分散后转移至上述胶状液中，继续搅拌，使阿昔洛韦均匀分散在上述胶状液中，备用。
连续相制备 称取Span 80 4.4g于恒温夹套反应容器中，加入正庚烷120ml、轻质液蜡240ml，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 控制体系温度于10-12℃，于1100转/分电动搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，保温5min后，搅拌速度降至660转/分。将体系温度逐渐升高至25℃，同时以15L/min的速度抽气，维持2hr后，改以30L/min的速度抽气，待体系澄清后，继续升高体系温度至35℃，并维持3.5hr后即生成微球。除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时。
3、乙基纤维素∶卡波姆为14∶1分散相制备 采用无水乙醇为分散相介质，将乙基纤维素和卡波姆934P配成浓度为40mg/ml和4mg/ml的透明胶状液，分别取乙基纤维素液2.28ml、卡波姆934P 1.63ml，于磁力搅拌器上搅拌混匀；另取阿昔洛韦粉末37mg于3.13ml无水乙醇中，以超声波粉碎仪分散后转移至上述胶状液中，继续搅拌，使阿昔洛韦均匀分散在上述胶状液中，备用。
连续相制备 称取Span 80 1.1g于恒温夹套反应容器中，加入正庚烷30ml、轻质液蜡60ml，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 控制体系温度于10-12℃，于1100转/分电动搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，保温5min后，搅拌速度降至660转/分。将体系温度逐渐升高至25℃，同时以15L/min的速度抽气，维持2hr后，改以30L/min的速度抽气，待体系澄清后，继续升高体系温度至35℃，并维持3.5hr后即生成微球。除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时。
4、乙基纤维素∶卡波姆为19∶1分散相制备 采用无水乙醇为分散相介质，将乙基纤维素和卡波姆934P配成浓度为40mg/ml和4mg/ml的透明胶状液，分别取乙基纤维素液2.49ml、卡波姆934P 1.31ml，于磁力搅拌器上搅拌混匀；另取阿昔洛韦粉末40mg于3.20ml无水乙醇中，以超声波粉碎仪分散后转移至上述胶状液中，继续搅拌，使阿昔洛韦均匀分散在上述胶状液中，备用。
连续相制备 称取Span 80 1.1g于恒温夹套反应容器中，加入正庚烷30ml、轻质液蜡60ml，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 控制体系温度于25℃，于1100转/分电动搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，乳化30min后，以30L/min速度抽气，待载体材料与阿昔洛韦粘合，体系变澄清后，升高体系温度至35℃，并继续抽气，除尽无水乙醇，生成微球。除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时。
5、乙基纤维素∶卡波姆为24∶1分散相制备 采用无水乙醇为分散相介质，将乙基纤维素和卡波姆934P配成浓度为40mg/ml和4mg/ml的透明胶状液，分别取乙基纤维素液2.59ml、卡波姆934P 1.09ml，于磁力搅拌器上搅拌混匀；另取阿昔洛韦粉末42mg于3.18ml无水乙醇中，以超声波粉碎仪分散后转移至上述胶状液中，继续搅拌，使阿昔洛韦均匀分散在上述胶状液中，备用。
连续相制备 称取Span 80 1.1g于恒温夹套反应容器中，加入正庚烷30ml、轻质液蜡60ml，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 控制体系温度于25℃，于1100转/分电动搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，乳化30min后，以30L/min速度抽气，待载体材料与阿昔洛韦粘合，体系变澄清后，升高体系温度至35℃，并继续抽气，除尽无水乙醇，生成微球。除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时。
6、乙基纤维素∶卡波姆为9∶1(放大工艺)分散相制备 采用无水乙醇为分散相介质，分别将乙基纤维素和卡波姆934P配成浓度为100mg/ml和12mg/ml的透明胶状液，分别取乙基纤维素液270ml、卡波姆934P液250ml，于磁力搅拌器上搅拌混匀，加入阿昔洛韦粉末10g，继续搅拌，使阿昔洛韦均匀分散在上述胶状液中，备用。
连续相制备 称取Span 80 100g于25℃恒温夹套反应容器中，加入轻质液蜡4000ml，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于630转/分电动搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，乳化30min后，以60L/min速度抽气22hr，除去分散介质，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，收集粒径介于500-1200μm之间的微球。收率≥85％。
实施例2 制备阿莫西林生物粘附微球1、乙基纤维素∶卡波姆为5∶1分散相制备 采用丙酮为分散介质，将乙基纤维素配成100mg/ml的透明胶状液；取乙基纤维素液44.4ml，于磁力搅拌下分别加入卡波姆934P粉末0.89g、阿莫西林粉末2.3347g，继续搅拌，使分散均匀，备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化60min后，以15L/min的速度抽气2hr，再以30L/min的速度抽气2hr；随后升高温度至25℃，同时以60L/min的速度抽气2hr，除尽分散介质，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质液蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，收集粒径介于500-1250μm之间的微球。
2、乙基纤维素∶卡波姆为6∶1分散相制备 采用丙酮为分散介质，将乙基纤维素配成100mg/ml的透明胶状液；取乙基纤维素液45.7ml，于磁力搅拌下分别加入卡波姆934P粉末0.76g、阿莫西林粉末0.9614g，继续搅拌，使分散均匀，备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化40min后，以15L/min的速度抽气2hr，再以30L/min的速度抽气2hr；随后升高温度至25℃，同时以60L/min的速度抽气2hr，除尽分散介质，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质液蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，收集粒径介于500-1250μm之间的微球。
3、乙基纤维素∶卡波姆为7∶1分散相制备 采用丙酮为分散介质，将乙基纤维素配成100mg/ml的透明胶状液；取乙基纤维素液46.6ml，于磁力搅拌下分别加入卡波姆934P粉末0.67g、阿莫西林粉末2.9334g，继续搅拌，使分散均匀，备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化20min后，以15L/min的速度抽气2hr，再以30L/min的速度抽气2hr；随后升高温度至25℃，同时以60L/min的速度抽气2hr，除尽分散介质，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质液蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，收集粒径介于500-1250μm之间的微球。
4、乙基纤维素∶卡波姆为8∶1
分散相制备 采用丙酮为分散介质，将乙基纤维素配成100mg/ml的透明胶状液；取乙基纤维素液47.4ml，于磁力搅拌下分别加入卡波姆934P粉末0.59g、阿莫西林粉末1.3619g，继续搅拌，使分散均匀，备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化70min后，以15L/min的速度抽气2hr，再以30L/min的速度抽气2hr；随后升高温度至25℃，同时以60L/min的速度抽气2hr，除尽分散介质，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质液蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，收集粒径介于500~1250μm之间的微球。
5、乙基纤维素∶卡波姆为9∶1分散相制备 采用丙酮为分散介质，将乙基纤维素配成100mg/ml的透明胶状液；取乙基纤维素液48.0ml，于磁力搅拌下分别加入卡波姆934P粉末0.53g、阿莫西林粉末3.6318g，继续搅拌，使分散均匀，备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化50min后，以15L/min的速度抽气2hr，再以30L/min的速度抽气2hr；随后升高温度至25℃，同时以60L/min的速度抽气2hr，除尽分散介质，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质液蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，收集粒径介于500~1250μm之间的微球。
6、乙基纤维素∶卡波姆为10∶1分散相制备 采用丙酮为分散介质，将乙基纤维素配成100mg/ml的透明胶状液；取乙基纤维素液48.5ml，于磁力搅拌下分别加入卡波姆934P粉末0.485g、阿莫西林粉末1.8159g，继续搅拌，使分散均匀，备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化30min后，以15L/min的速度抽气2hr，再以30L/min的速度抽气2hr；随后升高温度至25℃，同时以60L/min的速度抽气2hr，除尽分散介质，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质液蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，收集粒径介于500~1250μm之间的微球。
7、乙基纤维素∶卡波姆为6∶1(放大工艺)分散相制备 采用丙酮为分散介质，将乙基纤维素配成100mg/ml的透明胶状液；取乙基纤维素液528ml，于磁力搅拌下分别加入卡波姆934P粉末8.7284g、阿莫西林粉末43.7270g，继续搅拌，使分散均匀，备用。
连续相制备 称取Span 80 104g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入3320ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化30min后，以60L/min的速度抽气22hr；随后升高温度至25℃，并继续以60L/min的速度抽气2hr，除尽分散介质，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质液蜡等介质，以石油醚(60~90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，收集粒径介于500-1250μm之间的微球。收率85％-95％。
实施例3制备阿莫西林-脱乙酰壳多糖-乙基纤维素生物粘附微球分散相制备 于磁力搅拌下，在30ml乙基纤维素丙酮溶液中(100mg/ml)加入500mg脱乙酰壳多糖，待全部溶解后，加入阿莫西林丙酮混悬液(2.33g阿莫西林/1.5ml丙酮)，使混合均匀。备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，使Span 80的含量为1.5％(W/V)，搅拌均匀。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化30min后，循环水真空泵以30L/min的速度抽气除去分散介质，此过程维持6hr，随后将温度升高至20℃，继续抽气并搅拌6hr，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，得粒径介于200-400μm之间的微球。
实施例4、阿莫西林-透明质酸-乙基纤维素生物粘附微球的制备分散相制备 于磁力搅拌下，在30ml乙基纤维素丙酮溶液中(100mg/ml)加入500mg透明质酸，待全部溶解后，加入阿莫西林丙酮混悬液(2.33g阿莫西林/1.5ml丙酮)，使混合均匀。备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化30min后，以30L/min的速度抽气以除去分散介质，此过程维持6hr，随后将温度升高至20℃，继续以相同速度抽气并搅拌6hr，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，得粒径介于200-400μm之间的微球。
实施例4制备阿莫西林-海藻酸钠-乙基纤维素生物粘附微球分散相制备 于磁力搅拌下，在30ml乙基纤维素丙酮溶液中(100mg/ml)加入500mg海藻酸钠，待全部溶解后，加入阿莫西林丙酮混悬液(2.33g阿莫西林/1.5ml丙酮)，使混合均匀。备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化30min后，以30L/min的速度抽气除去大部分分散介质，此过程约维持6hr，随后将温度升高至17-20℃，继续抽气并搅拌过夜，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，得粒径介于200-400μm之间的微球。
权利要求
1.一种制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，包括选用经口服吸收药物，微球载体材料，生物粘附材料，以极性有机溶媒为分散相介质、非极性有机介质为连续相，其特征是采用乳化-气流溶媒蒸发法制备含药胃肠道生物粘附微球。
2.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述的乳化-气流溶媒蒸发法是，在恒温条件下，反应系统乳化后，用非密闭抽气方式使液面持续保持负压状态以控制溶媒的蒸发速率。
3.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述的连续相中含有表面活性物质。
4.按权利要求3所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述的连续相中表面活性物质是司盘类表面活性剂，其重量体积百分数为1-4％。
5.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述的经口服吸收药物具有内溶解度小，吸收窗狭窄，吸收速度慢或有饱和吸收以及生物半衰期短性质。
6.按权利要求5所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述的经口服吸收药物是阿昔洛韦。
7.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述的经口服吸收药物体内停留时间短。
8.按权利要求7所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述的药物是阿莫西林。
9.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述微球载体材料选用一种或一种以上混合的药用辅料。
10.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述微球载体材料包括乙基纤维素、聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚乙醇酸和丙烯酸甲酯共聚物。
11.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述微球载体材料可在极性有机溶媒中溶解。
12.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述生物粘附材料选用一种或一种以上混合的可粘附药用辅料。
13.按权利要求1和12所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述生物粘附材料包括丙烯酸聚合物及其衍生物，聚卡波菲、壳多糖及脱乙酰壳多糖、海藻酸及其钠盐、透明质酸及其钠盐、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素及其钠盐、羧甲基纤维素及其钠盐与聚异丁烯共混物、聚乙烯醇及其共聚物、聚维酮及其共聚物和瓜耳胶。
14.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述生物粘附材料和微球载体材料重量比为1∶1-30。
15.按权利要求1和1 2所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述生物粘附材料可在极性有机溶媒中溶解或良好分散。
16.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述经口服吸收药物是以固体粉末或固体颗粒形式分散于极性有机溶媒中。
17.按权利要求11和15所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述的极性有机溶媒能同时溶解微球载体材料和生物粘附材料，或只能溶解微球载体材料、而生物粘附材料能在其中良好分散。
18.按权利要求17的方法，其中能同时溶解微球载体材料和生物粘附材料的极性有机溶媒是无水乙醇。
19.按权利要求17的方法，其中只能溶解微球载体材料、而生物粘附材料能在其中良好分散的极性有机溶媒是丙酮。
20.按权利要求2的方法，其中恒温条件其温度范围是10-35℃。
21.按权利要求2的方法，其中乳化-气流溶媒蒸发法抽气速率根据微球形状和粒径控制。
22.按权利要求2的方法，其中乳化-气流溶媒蒸发法抽气速率为15-60L/min。
23.按权利要求2的方法，其中微球形状为圆球形，微球粒径为200-1250μm。
全文摘要
本发明属制药领域，具体涉及一种胃肠道生物粘附微球药物制剂的制备方法。本发明选用经口服吸收药物，微球载体材料，生物粘附材料，以极性有机溶媒为分散相介质、非极性有机介质为连续相，采用乳化－气流溶媒蒸发法制备含药胃肠道生物粘附微球。本发明方法是在恒温条件下，反应系统乳化后，用非密闭抽气方式使液面持续保持负压状态以控制溶媒蒸发速率。所制得微球具有良好的胃肠道粘附性和缓释效果。
文档编号A61K9/14GK1528271SQ0315120
公开日2004年9月15日 申请日期2003年9月25日 优先权日2003年9月25日
发明者潘俊, 刘哲鹏, 陆伟跃, 潘 俊 申请人:复旦大学, 上海复康医药科技发展有限公司, 上海美优制药有限公司
技术领域：
本发明属制药领域，涉及药物制剂的制备方法，具体涉及一种制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法。
背景技术：
自上世纪八十年代初，即有研究表明，高荷负电的羧基化聚合物(如丙烯酸类聚合物)对体外培养的人眼结膜上皮细胞具有显著高的生物粘附作用和明显低的生物毒性[Park K.et al，Int J Pharm 1984，19107-27]；并经动物体内外胃肠道粘附实验证明，丙烯酸类聚合物(如Polycarbophil)与胃肠道表面的粘蛋白相互作用，使胃肠道对其排空时间明显延长，从而得出生物粘性聚合物可作为口服控释制剂的释药平台结论[Ch’ng H.S.et al，J Pharm Sci 1985，74399-405]。
此后，报道了分别用聚卡波菲[Polycarbophil(CarbopolEX-55 resin)]、卡波姆(Carbomer，Carbopol934P)和脱乙酰壳多糖作为生物粘附材料的微球动物体内粘附及生物利用度研究结果。或以单纯Polycarbophil胃粘附微球与氯噻嗪微球混合的胶囊[Longer M.A.et al，J Pharm Sci1985，74406-11]，或单以Polycarbophil、Carbomer包衣的、Carbomer和EudragitRL100混合包衣的小肠粘附微球[Lehr C.M.et al，JControlled Release 1990，1351-62]、或以Carbomer分散于四甘油五硬脂酸(TGPS)和四甘油单硬脂酸酯(TGMS)制成的胃粘附微球[AkiyamaY.et al，Pharm Res 1995，12(3)397-405]，或以脱乙酰壳多糖制成的阿昔洛韦眼上皮粘附微球[Genta I.et al，J Pharm Pharmacol1997，49737-42]，均证明或明显延长微球在给药部位滞留时间、或显著提高药物的生物利用度。人体试验结果已证明，速尿和维生素B2生物粘附微球的生物利用度分别高于非生物粘附微球1.8和2.4倍，生物利用度提高显著[Akiyama Y.et al，J Pharm Pharmacol 1998，50159-66]。
研究表明，凡具有以下性质的药物均适宜制成生物粘附微球，这些性质包括体内溶解度小、吸收窗狭窄、吸收速度慢或有饱和吸收，生物半衰期短；或在有效作用部位停留时间过短，不足以发挥疗效。具有上述性质的药物经制成生物粘附微球后，可在设定给药部位(如胃肠道、眼部、口腔、鼻腔等)粘附滞留，从而达到定位释药，提高疗效；或改善吸收，提高生物利用度的目的。例如，1981年Burroughs Wellcome公司研制开发了阿昔洛韦，其血浆半衰期段为2.9小时，主要以药物原形经肾排泄，吸收主要依赖于小肠内的被动扩散和吸收速率慢等缘故，虽然国内外先后出现多种口服的阿昔洛韦剂型如片剂、胶囊剂、混悬剂、颗粒剂等，但仍存在生物利用度低(15～30％)和给药次数多(5次/日)的缺点。
再如，幽门螺旋杆菌(HP)已被普遍认为是胃及十二指肠等消化道溃疡的主要病因。HP属于生长缓慢的微生物，对抗菌剂较易产生耐药性。目前临床上抗HP感染的有效给药方案多为抗菌药与标准抗溃疡药物联用，目的就是要达到根除HP，从而减少溃疡的复发率。HP的根除率取决于它对药物的敏感性，和药物与它的作用时间。许多抗菌药物经口服给药后，胃内停留时间较短，不能在胃粘膜层或上皮细胞表面等HP存在的部位达到有效的杀菌浓度或持续时间，故而影响了它们对HP的根除率。1995年，Akiyama等报道了可在胃肠道粘膜表面粘附停留粘附微球(阿莫西林粘附微球)，结果表明，阿莫西林生物粘附微球具有较高的HP清除率。
发明内容
本发明的目的是提供一种生物粘附微球药物制剂制备方法，尤其是一种制备胃肠道生物粘附微球药物制剂方法。本方法所制得的生物粘附微球具有良好的体内外粘附效果和缓释效果。本方法包括选用经口服吸收药物，微球载体材料，生物粘附材料，以极性有机溶媒为分散相介质、非极性有机介质为连续相，采用乳化-气流溶媒蒸发法制备含药胃肠道生物粘附微球。
所述的乳化-气流溶媒蒸发法是，在恒温条件下，反应系统乳化后，用非密闭抽气方式使液面持续保持负压状态以控制溶媒的蒸发速率。
本发明涉及的微球载体材料可在极性有机溶媒中溶解。所述微球载体材料选用包括但不限于乙基纤维素。其中包括乙基纤维素(EC)、聚乳酸(PLA)、聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)、聚乙醇酸(PGA)和丙烯酸甲酯共聚物(MA)。
本发明涉及的生物粘附材料可在极性有机溶媒中溶解或良好分散。所述生物粘附材料包括丙烯酸类聚合物及其衍生物、聚卡波菲、壳多糖及脱乙酰壳多糖、海藻酸及其钠盐、透明质酸及其钠盐、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素及其钠盐、羧甲基纤维素及其钠盐与聚异丁烯共混物、聚乙烯醇及其共聚物、聚维酮及其共聚物和瓜耳胶。
本发明胃肠道生物粘附微球药物制剂可选用上述一种或一种以上混合的可粘附药用辅料。
所述的极性有机溶媒能同时溶解微球载体材料和生物粘附材料，或只能溶解微球载体材料、而生物粘附材料能在其中良好分散。
所述的连续相中含有表面活性物质，包括司盘类表面活性剂(Span)，其重量体积百分数为1-4％。
所述经口服吸收药物以固体粉末或固体颗粒形式分散于极性有机溶媒中。
本发明涉及的恒温条件可通过带有夹套的反应容器连接的恒温水浴控制，其温度范围是10-35℃。
所述乳化-气流溶媒蒸发法抽气速率根据微球形状和粒径控制。其中优选抽气速率为15-60L/min。
本发明所制得微球形状为圆球形，微球粒径为200-1250μm，其中生物粘附材料和微球载体材料重量比为1∶1-30。
本发明选用卡波姆934P为生物粘附材料，乙基纤维素(20cps)为骨架材料，运用乳化-气流溶媒蒸发法研制成具有胃肠道粘附作用的阿昔洛韦生物粘附微球。所制得的阿昔洛韦生物粘附微球体内外粘附效果和缓释效果均较明显。
本发明针对普通阿莫西林制剂胃内滞留时间短的不足，选用卡波姆934P或脱乙酰壳多糖或海藻酸钠或透明质酸为生物粘附材料、乙基纤维素(20cps)为骨架材料，运用乳化-气流溶媒蒸发法研制成具有胃肠道粘附作用的阿莫西林生物粘附微球。经体内外粘附性试验，结果均表明阿莫西林生物粘附微球在胃肠道粘附效果明显，微球在胃内滞留时间延长，体内HP的抑制程度明显高于阿莫西林混悬液。
经对本发明方法制备的阿昔洛韦生物粘附微球和阿莫西林-卡波姆-乙基纤维素生物粘附微球体内外粘附性进行考察，结果表明两者均具有良好的粘附作用。体内外粘附性试验及结果如下1、体外粘附性试验——胃粘膜冲洗法取禁食、给水24h的小鼠，断颈处死后取胃，自贲门口处剪开，用生理盐水冲洗干净后剪成1×2厘米块状后平铺于载玻片上；在胃粘膜表面上撒上100粒微球(Acv-Cb-Ec或Amo-Cb-Ec)，以生理盐水润湿后，置于相对湿度为90％的密闭容器内，保湿20min；取出固定在45°斜面上，以pH1.3稀盐酸-氯化钠溶液冲洗(22mL/min)胃粘膜表面微球5min；计数胃粘膜表面滞留的微球个数，计算滞留百分率(以Acv-Ec及Amo-Ec为对照)。表1是阿昔洛韦生物粘附微球(Acv-Ec-Cb)与不含卡波姆934P的阿昔洛韦乙基纤维素(Acv-Ec)体外胃粘膜表面滞留率。表2是阿莫西林生物粘附微球(Amo-Ec-Cb)与不含卡波姆934P的阿莫西林乙基纤维素(Amo-Ec)体外胃粘膜表面滞留率。
表1.
Acv-Ec-Cb Acv-Ec500-1200μm300-500μm500-1200μm 300-500μm滞留率(％) 85±5 95±4 38±4 36±8(n＝3)，x±SD表2.
Amo-Cb-Ec Amo-Ec800-1250μm 250-500μm 800-1250μm滞留率(％) 92±6.8 89±7.3578±5.56(n＝3)，x±SD2、体内粘附性考察取体重为250-300g的清洁级SD大鼠18只，禁食、给水24小时后，随机分成6组，其中三组给予不含粘附材料的Acv-Ec(或Amo-Ec)作为对照；另三组给予Acv-Cb-Ec(或Amo-Cb-Ec)。取内径约2.5mm的塑料管，一端封口后，装入100粒微球，另一端接5ml注射器。当塑料管插入大鼠胃内后，以2ml生理盐水将微球注入大鼠胃内。记录每只大鼠灌胃时间。给药后大鼠禁食禁水，分别于2、4、7小时断颈处死大鼠。解剖大鼠，取出其胃及小肠，剪开，分别计数大鼠胃及小肠中的微球个数，计算滞留百分率。表3是阿昔洛韦生物粘附微球(Acv-Ec-Cb)与不含卡波姆934P的阿昔洛韦乙基纤维素微球(Acv-Ec)于不同时相在大鼠胃肠道内滞留率。表4是阿莫西林生物粘附微球(Amo-Ec-Cb)与不含卡波姆934P的阿莫西林乙基纤维素微球(Amo-Ec)于不同时相在大鼠胃肠道内滞留率。
表3.
(n＝3)
具体实施例方式
以下结合实施例进一步阐明本发明的内容，但本发明并不仅限制于这些实施例的范围。
实施例1 制备阿昔洛韦生物粘附微球1、乙基纤维素∶卡波姆为4∶1分散相制备 采用无水乙醇为分散相介质，将乙基纤维素和卡波姆934P配成浓度为40mg/ml和4mg/ml的透明胶状液，分别取乙基纤维素液3.6ml、卡波姆934P 9ml于磁力搅拌器上搅拌混匀，加入69mg阿昔洛韦粉末，继续搅拌，使阿昔洛韦均匀分散在上述胶状液中，备用。
连续相制备 称取Span 80 4.4g于恒温夹套反应容器中，加入轻质液蜡240ml、正庚烷120ml，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 控制体系温度于10-12℃，于1080转/分电动搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，保温5min后，以15L/min的速度抽气，并将搅拌速度降至660转/分；将体系温度逐渐升高至25℃，并维持2hr，改以30L/min速度抽气1hr；继续升高体系温度至35℃，并维持1hr后即生成微球。除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时。
2、乙基纤维素∶卡波姆为9∶1分散相制备 采用无水乙醇为分散相介质，将乙基纤维素和卡波姆934P配成浓度为40mg/ml和4mg/ml的透明胶状液，分别取乙基纤维素液6.57ml、卡波姆934P 7.3ml，于磁力搅拌器上搅拌混匀；另取阿昔洛韦粉末73mg于5ml无水乙醇中，以超声波粉碎仪分散后转移至上述胶状液中，继续搅拌，使阿昔洛韦均匀分散在上述胶状液中，备用。
连续相制备 称取Span 80 4.4g于恒温夹套反应容器中，加入正庚烷120ml、轻质液蜡240ml，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 控制体系温度于10-12℃，于1100转/分电动搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，保温5min后，搅拌速度降至660转/分。将体系温度逐渐升高至25℃，同时以15L/min的速度抽气，维持2hr后，改以30L/min的速度抽气，待体系澄清后，继续升高体系温度至35℃，并维持3.5hr后即生成微球。除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时。
3、乙基纤维素∶卡波姆为14∶1分散相制备 采用无水乙醇为分散相介质，将乙基纤维素和卡波姆934P配成浓度为40mg/ml和4mg/ml的透明胶状液，分别取乙基纤维素液2.28ml、卡波姆934P 1.63ml，于磁力搅拌器上搅拌混匀；另取阿昔洛韦粉末37mg于3.13ml无水乙醇中，以超声波粉碎仪分散后转移至上述胶状液中，继续搅拌，使阿昔洛韦均匀分散在上述胶状液中，备用。
连续相制备 称取Span 80 1.1g于恒温夹套反应容器中，加入正庚烷30ml、轻质液蜡60ml，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 控制体系温度于10-12℃，于1100转/分电动搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，保温5min后，搅拌速度降至660转/分。将体系温度逐渐升高至25℃，同时以15L/min的速度抽气，维持2hr后，改以30L/min的速度抽气，待体系澄清后，继续升高体系温度至35℃，并维持3.5hr后即生成微球。除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时。
4、乙基纤维素∶卡波姆为19∶1分散相制备 采用无水乙醇为分散相介质，将乙基纤维素和卡波姆934P配成浓度为40mg/ml和4mg/ml的透明胶状液，分别取乙基纤维素液2.49ml、卡波姆934P 1.31ml，于磁力搅拌器上搅拌混匀；另取阿昔洛韦粉末40mg于3.20ml无水乙醇中，以超声波粉碎仪分散后转移至上述胶状液中，继续搅拌，使阿昔洛韦均匀分散在上述胶状液中，备用。
连续相制备 称取Span 80 1.1g于恒温夹套反应容器中，加入正庚烷30ml、轻质液蜡60ml，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 控制体系温度于25℃，于1100转/分电动搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，乳化30min后，以30L/min速度抽气，待载体材料与阿昔洛韦粘合，体系变澄清后，升高体系温度至35℃，并继续抽气，除尽无水乙醇，生成微球。除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时。
5、乙基纤维素∶卡波姆为24∶1分散相制备 采用无水乙醇为分散相介质，将乙基纤维素和卡波姆934P配成浓度为40mg/ml和4mg/ml的透明胶状液，分别取乙基纤维素液2.59ml、卡波姆934P 1.09ml，于磁力搅拌器上搅拌混匀；另取阿昔洛韦粉末42mg于3.18ml无水乙醇中，以超声波粉碎仪分散后转移至上述胶状液中，继续搅拌，使阿昔洛韦均匀分散在上述胶状液中，备用。
连续相制备 称取Span 80 1.1g于恒温夹套反应容器中，加入正庚烷30ml、轻质液蜡60ml，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 控制体系温度于25℃，于1100转/分电动搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，乳化30min后，以30L/min速度抽气，待载体材料与阿昔洛韦粘合，体系变澄清后，升高体系温度至35℃，并继续抽气，除尽无水乙醇，生成微球。除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时。
6、乙基纤维素∶卡波姆为9∶1(放大工艺)分散相制备 采用无水乙醇为分散相介质，分别将乙基纤维素和卡波姆934P配成浓度为100mg/ml和12mg/ml的透明胶状液，分别取乙基纤维素液270ml、卡波姆934P液250ml，于磁力搅拌器上搅拌混匀，加入阿昔洛韦粉末10g，继续搅拌，使阿昔洛韦均匀分散在上述胶状液中，备用。
连续相制备 称取Span 80 100g于25℃恒温夹套反应容器中，加入轻质液蜡4000ml，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于630转/分电动搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，乳化30min后，以60L/min速度抽气22hr，除去分散介质，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，收集粒径介于500-1200μm之间的微球。收率≥85％。
实施例2 制备阿莫西林生物粘附微球1、乙基纤维素∶卡波姆为5∶1分散相制备 采用丙酮为分散介质，将乙基纤维素配成100mg/ml的透明胶状液；取乙基纤维素液44.4ml，于磁力搅拌下分别加入卡波姆934P粉末0.89g、阿莫西林粉末2.3347g，继续搅拌，使分散均匀，备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化60min后，以15L/min的速度抽气2hr，再以30L/min的速度抽气2hr；随后升高温度至25℃，同时以60L/min的速度抽气2hr，除尽分散介质，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质液蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，收集粒径介于500-1250μm之间的微球。
2、乙基纤维素∶卡波姆为6∶1分散相制备 采用丙酮为分散介质，将乙基纤维素配成100mg/ml的透明胶状液；取乙基纤维素液45.7ml，于磁力搅拌下分别加入卡波姆934P粉末0.76g、阿莫西林粉末0.9614g，继续搅拌，使分散均匀，备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化40min后，以15L/min的速度抽气2hr，再以30L/min的速度抽气2hr；随后升高温度至25℃，同时以60L/min的速度抽气2hr，除尽分散介质，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质液蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，收集粒径介于500-1250μm之间的微球。
3、乙基纤维素∶卡波姆为7∶1分散相制备 采用丙酮为分散介质，将乙基纤维素配成100mg/ml的透明胶状液；取乙基纤维素液46.6ml，于磁力搅拌下分别加入卡波姆934P粉末0.67g、阿莫西林粉末2.9334g，继续搅拌，使分散均匀，备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化20min后，以15L/min的速度抽气2hr，再以30L/min的速度抽气2hr；随后升高温度至25℃，同时以60L/min的速度抽气2hr，除尽分散介质，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质液蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，收集粒径介于500-1250μm之间的微球。
4、乙基纤维素∶卡波姆为8∶1
分散相制备 采用丙酮为分散介质，将乙基纤维素配成100mg/ml的透明胶状液；取乙基纤维素液47.4ml，于磁力搅拌下分别加入卡波姆934P粉末0.59g、阿莫西林粉末1.3619g，继续搅拌，使分散均匀，备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化70min后，以15L/min的速度抽气2hr，再以30L/min的速度抽气2hr；随后升高温度至25℃，同时以60L/min的速度抽气2hr，除尽分散介质，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质液蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，收集粒径介于500~1250μm之间的微球。
5、乙基纤维素∶卡波姆为9∶1分散相制备 采用丙酮为分散介质，将乙基纤维素配成100mg/ml的透明胶状液；取乙基纤维素液48.0ml，于磁力搅拌下分别加入卡波姆934P粉末0.53g、阿莫西林粉末3.6318g，继续搅拌，使分散均匀，备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化50min后，以15L/min的速度抽气2hr，再以30L/min的速度抽气2hr；随后升高温度至25℃，同时以60L/min的速度抽气2hr，除尽分散介质，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质液蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，收集粒径介于500~1250μm之间的微球。
6、乙基纤维素∶卡波姆为10∶1分散相制备 采用丙酮为分散介质，将乙基纤维素配成100mg/ml的透明胶状液；取乙基纤维素液48.5ml，于磁力搅拌下分别加入卡波姆934P粉末0.485g、阿莫西林粉末1.8159g，继续搅拌，使分散均匀，备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化30min后，以15L/min的速度抽气2hr，再以30L/min的速度抽气2hr；随后升高温度至25℃，同时以60L/min的速度抽气2hr，除尽分散介质，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质液蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，收集粒径介于500~1250μm之间的微球。
7、乙基纤维素∶卡波姆为6∶1(放大工艺)分散相制备 采用丙酮为分散介质，将乙基纤维素配成100mg/ml的透明胶状液；取乙基纤维素液528ml，于磁力搅拌下分别加入卡波姆934P粉末8.7284g、阿莫西林粉末43.7270g，继续搅拌，使分散均匀，备用。
连续相制备 称取Span 80 104g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入3320ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化30min后，以60L/min的速度抽气22hr；随后升高温度至25℃，并继续以60L/min的速度抽气2hr，除尽分散介质，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质液蜡等介质，以石油醚(60~90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，收集粒径介于500-1250μm之间的微球。收率85％-95％。
实施例3制备阿莫西林-脱乙酰壳多糖-乙基纤维素生物粘附微球分散相制备 于磁力搅拌下，在30ml乙基纤维素丙酮溶液中(100mg/ml)加入500mg脱乙酰壳多糖，待全部溶解后，加入阿莫西林丙酮混悬液(2.33g阿莫西林/1.5ml丙酮)，使混合均匀。备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，使Span 80的含量为1.5％(W/V)，搅拌均匀。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化30min后，循环水真空泵以30L/min的速度抽气除去分散介质，此过程维持6hr，随后将温度升高至20℃，继续抽气并搅拌6hr，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，得粒径介于200-400μm之间的微球。
实施例4、阿莫西林-透明质酸-乙基纤维素生物粘附微球的制备分散相制备 于磁力搅拌下，在30ml乙基纤维素丙酮溶液中(100mg/ml)加入500mg透明质酸，待全部溶解后，加入阿莫西林丙酮混悬液(2.33g阿莫西林/1.5ml丙酮)，使混合均匀。备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化30min后，以30L/min的速度抽气以除去分散介质，此过程维持6hr，随后将温度升高至20℃，继续以相同速度抽气并搅拌6hr，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，得粒径介于200-400μm之间的微球。
实施例4制备阿莫西林-海藻酸钠-乙基纤维素生物粘附微球分散相制备 于磁力搅拌下，在30ml乙基纤维素丙酮溶液中(100mg/ml)加入500mg海藻酸钠，待全部溶解后，加入阿莫西林丙酮混悬液(2.33g阿莫西林/1.5ml丙酮)，使混合均匀。备用。
连续相制备 称取Span 80 7.5g于15-16℃恒温夹套反应容器中，加入240ml轻质液蜡，搅拌，使Span 80完全溶解。
微球制备 于搅拌下，将上述分散相连续缓慢地滴加至连续相中，以600转/分的速度搅拌，乳化30min后，以30L/min的速度抽气除去大部分分散介质，此过程约维持6hr，随后将温度升高至17-20℃，继续抽气并搅拌过夜，生成微球，以3号砂芯漏斗抽滤，除去轻质石蜡等介质，以石油醚(60-90℃)洗涤并抽滤数次，除尽残余介质，于25℃真空干燥24小时，过筛，得粒径介于200-400μm之间的微球。
权利要求
1.一种制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，包括选用经口服吸收药物，微球载体材料，生物粘附材料，以极性有机溶媒为分散相介质、非极性有机介质为连续相，其特征是采用乳化-气流溶媒蒸发法制备含药胃肠道生物粘附微球。
2.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述的乳化-气流溶媒蒸发法是，在恒温条件下，反应系统乳化后，用非密闭抽气方式使液面持续保持负压状态以控制溶媒的蒸发速率。
3.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述的连续相中含有表面活性物质。
4.按权利要求3所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述的连续相中表面活性物质是司盘类表面活性剂，其重量体积百分数为1-4％。
5.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述的经口服吸收药物具有内溶解度小，吸收窗狭窄，吸收速度慢或有饱和吸收以及生物半衰期短性质。
6.按权利要求5所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述的经口服吸收药物是阿昔洛韦。
7.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述的经口服吸收药物体内停留时间短。
8.按权利要求7所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述的药物是阿莫西林。
9.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述微球载体材料选用一种或一种以上混合的药用辅料。
10.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述微球载体材料包括乙基纤维素、聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚乙醇酸和丙烯酸甲酯共聚物。
11.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述微球载体材料可在极性有机溶媒中溶解。
12.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述生物粘附材料选用一种或一种以上混合的可粘附药用辅料。
13.按权利要求1和12所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述生物粘附材料包括丙烯酸聚合物及其衍生物，聚卡波菲、壳多糖及脱乙酰壳多糖、海藻酸及其钠盐、透明质酸及其钠盐、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素及其钠盐、羧甲基纤维素及其钠盐与聚异丁烯共混物、聚乙烯醇及其共聚物、聚维酮及其共聚物和瓜耳胶。
14.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述生物粘附材料和微球载体材料重量比为1∶1-30。
15.按权利要求1和1 2所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述生物粘附材料可在极性有机溶媒中溶解或良好分散。
16.按权利要求1所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述经口服吸收药物是以固体粉末或固体颗粒形式分散于极性有机溶媒中。
17.按权利要求11和15所述的制备胃肠道生物粘附微球药物制剂的方法，其特征是所述的极性有机溶媒能同时溶解微球载体材料和生物粘附材料，或只能溶解微球载体材料、而生物粘附材料能在其中良好分散。
18.按权利要求17的方法，其中能同时溶解微球载体材料和生物粘附材料的极性有机溶媒是无水乙醇。
19.按权利要求17的方法，其中只能溶解微球载体材料、而生物粘附材料能在其中良好分散的极性有机溶媒是丙酮。
20.按权利要求2的方法，其中恒温条件其温度范围是10-35℃。
21.按权利要求2的方法，其中乳化-气流溶媒蒸发法抽气速率根据微球形状和粒径控制。
22.按权利要求2的方法，其中乳化-气流溶媒蒸发法抽气速率为15-60L/min。
23.按权利要求2的方法，其中微球形状为圆球形，微球粒径为200-1250μm。
全文摘要
本发明属制药领域，具体涉及一种胃肠道生物粘附微球药物制剂的制备方法。本发明选用经口服吸收药物，微球载体材料，生物粘附材料，以极性有机溶媒为分散相介质、非极性有机介质为连续相，采用乳化－气流溶媒蒸发法制备含药胃肠道生物粘附微球。本发明方法是在恒温条件下，反应系统乳化后，用非密闭抽气方式使液面持续保持负压状态以控制溶媒蒸发速率。所制得微球具有良好的胃肠道粘附性和缓释效果。
文档编号A61K9/14GK1528271SQ0315120
公开日2004年9月15日 申请日期2003年9月25日 优先权日2003年9月25日
发明者潘俊, 刘哲鹏, 陆伟跃, 潘 俊 申请人:复旦大学, 上海复康医药科技发展有限公司, 上海美优制药有限公司
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