羟喜树碱乳剂及其制备方法
专利名称：羟喜树碱乳剂及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种乳剂及其制备方法，尤其是羟喜树碱乳剂及其制备方法，属于医药技术领域。
背景技术：
研究发现，从喜树中分离得到的10-羟基喜树碱(10-HCPT)是所有天然或合成喜树碱类似物中活性最高的化合物。
由于HCPT可以选择抑制DNA拓扑异构酶I的活性，干扰拓扑异构酶催化的DNA切断链接反应，使酶与DNA断链复合物稳定，并抑制切口处的重新接合，因此具有导致DNA断链、干扰DNA复制，具有抗肿瘤的作用。医学上，HCPT作为细胞周期特异性药物，主要作用于S期，对G2-M边界也有延缓作用，对原发性肝癌有效率达56.2％，头颈部肿瘤有效率达64.3％，胃癌有效率达47％。从临床应用看，羟喜树碱钠盐注射液抗癌谱广，疗效较好。但其水溶性小，在碱液中溶解形成钠盐的过程中导致羟喜树碱E环开裂，从而活性降低，副反应增大。临床主要表现为胃肠道反应，骨髓抑制，泌尿道反应。{参见(1)、董锡裕等，中草药，199627(4)243～245；(2)杨时成等，药学学报，1999，34(2)146～150；(3)顾德辛，中国医药情报，19951(6)340～344}发明内容本发明要解决的技术问题是研究一种用作静脉注射的羟喜树碱乳剂，其应能保护羟喜树碱结构中的E环，使治疗药物成份羟喜树碱稳定，减少由于E环破裂结构降解产生的副反应，从而提高疗效。
本发明还包括羟喜树碱乳剂可工业化实施的制备方法。
为解决上述问题，本发明提供如下技术方案。
一种羟喜树碱注射乳剂，其按重量百分比计，包括羟喜树碱0.01～2.2％、乳化剂0.3～8％、甘油三酯类化合物2～30％、等张剂注射用甘油2.0～3.0％，其余为注射用水。
所述注射乳剂，其较好的重量百分比为羟喜树碱为0.05～2％、乳化剂为0.6～5％、甘油三酯类化合物为5～20％、等张剂2.2～2.5％。其中乳化剂选自豆磷脂、卵磷脂或非离子表面活性剂普朗克尼188F68中的一种或二种；甘油三酯类化合物选自长链甘油三酯和/或中链甘油三酯的一种或二种。长链甘油三酯选自大豆油、红花油、玉米油、椰子油、蓖麻油中的一种或二种。
所述注射乳剂的制备方法，包括下列步骤a)取羟喜树碱、乳化剂、甘油三酯类化合物、等张剂注射用甘油、注射用水备用；b)将羟喜树碱、乳化剂、甘油三酯类化合物混合形成油相B；c)将等张剂注射用甘油与注射用水混合形成水相C；d)将油相B与水相C混合，超声或均质形成乳剂。
前述注射乳剂，较好的配比为加入0.1～4％的稳定剂油酸、胆固醇和/或油酸钠；0.5～5％助乳化剂聚乙烯吡咯烷酮；0.01-0.5％抗氧剂VE；0.5～7％助溶剂聚乙二醇200、聚乙二醇300、聚乙二醇400、苯甲酸苄酯或1，2-丙二醇。
所述注射乳剂的制备方法，包括如下步骤
a)取羟喜树碱、乳化剂、甘油三酯类化合物、等张剂注射用甘油、注射用水、稳定剂、助乳化剂、抗氧剂、助溶剂备用；b)将羟喜树碱、乳化剂、甘油三酯类化合物与稳定剂混合形成油相B；c)将等张剂注射用甘油、助乳化剂与注射用水混合形成水相C；d)将油相B与水相C混合，超声或均质形成乳剂；或者，b)用乙醇将羟喜树碱和/或助溶剂溶解，形成羟喜树碱乙醇液B1；将乳化剂、甘油三酯类化合物与稳定剂混合形成油相B2；再将羟喜树碱乙醇液B1与油相B2混合形成油相B；c)将等张剂注射用甘油、助乳化剂与注射用水混合形成水相C；d)将油相B与水相C混合，超声或均质形成乳剂；或者，b)用乙醇将羟喜树碱和/或助溶剂溶解，形成羟喜树碱乙醇液B1；将甘油三酯类化合物形成油相B2；再将羟喜树碱乙醇液B1与油相B2混合形成油相B；c)将等张剂注射用甘油、助乳化剂、乳化剂、稳定剂与注射用水混合形成水相C；d)将油相B与水相C混合，超声或均质形成乳剂。所述注射乳剂的制备方法，还可以c)在水相C中加入0.5-3％的赋形剂山梨醇、葡萄糖、甘露醇、NaCl、乳糖和/或右旋糖苷，得水相D；
d)将油相B与水相D混合，超声或均质形成乳剂后，冷冻干燥，制成冻干剂。
所述注射乳剂的较好的制备方法包括如下步骤a)取羟喜树碱0.05％、聚乙二醇2001％、乙醇适量，超声溶解，制成含药溶液B1；b)取大豆油10％、中链甘油三酯10％，豆磷脂0.6％，胆固醇0.4％，形成油相B2；c)在油相B2中加入含药溶液B1，超声促使混匀，减压除去乙醇，得油相B；d)取甘油2.5％，聚乙烯吡咯烷酮4％，加注射水至100％，得水相C；e)将水相C与油相B混匀，经超声波或均质仪乳化，形成乳剂。
所述注射乳剂的另一种较好的制备方法，包括如下步骤a)取羟喜树碱2％、聚乙二醇2006％与乙醇适量，超声溶解，制成含药溶液B1；b)取大豆油5％、中链甘油三酯5％、豆磷脂2％与胆固醇0.6％混合，形成油相B2；c)在油相B2中加入含药溶液B1，超声使药液分散于油相，减压去除乙醇，得油相B；d)取甘油2.2％与聚乙烯吡咯烷酮4％，加注射水至100％，形成水相C；e)将水相C、油相D混匀，经超声波或均质仪乳化，形成乳剂。
本发明的羟喜树碱乳剂组合物为一种以油/水乳剂为载体的制剂，包括——羟喜树碱；——乳化剂——甘油三酯油相；——含有等张剂的水相；所述羟喜树碱溶解于所述油相中，再于所述水相中形成稳定的亚微(粒径100～500纳米)乳或纳米(粒径10～100纳米)乳剂。
本发明的羟喜树碱重量百分比含量为0.01～2％，乳化剂为0.3～8％，甘油三酯2～20％，其余为水相。此外，还可以根据需要，加入助乳化剂、稳定剂、助溶剂、抗氧剂。
以上甘油三酯可以是大豆油、红花油玉米油、椰子油、蓖麻油等长链甘油三酯中的一种，也可以是中链甘油三酯(MCT)；乳化剂可以是豆磷脂、卵磷脂或非离子表面活性剂普朗克尼(Poloxamer)188F68；等张剂为注射用甘油；助乳化剂为聚乙烯吡咯烷酮(PVP)；稳定剂为油酸、胆固醇、油酸钠；抗氧剂为VE；助溶剂为PEG200、PEG300、PEG400、苯甲酸苄酯，或1，2-丙二醇。
本发明的羟喜树碱注射乳剂组合物可以通过以下步骤的制备方法制取1)、将羟喜树碱均匀分散于含有乳化剂的甘油三酯油相中；2)加入水相，混匀，制成初乳；3)超声乳化或均质乳化，使羟喜树碱溶解于油相形成稳定的分散体，制得亚微米或纳米乳剂。
以上步骤1可以通过下述三种方法实现方法一1-1)将羟喜树碱溶于有机溶剂中；1-2)将溶解液体加入含有乳化剂的甘油三酯油相中；1-3)减压旋转，蒸发除去有机溶剂，形成羟喜树碱油相。
方法二2-1)将羟喜树碱加入含有乳化剂的甘油三酯油相；2-2)加热使羟喜树碱溶于油相。
方法三3-1)将羟喜树碱与含有乳化剂的甘油三酯油相混合；3-2)研磨，使羟喜树碱均匀分散于油相。
以上乳剂可以作用静脉注射液、输液，也可以在形成乳剂前的水相中加入甘露醇、NaCl、乳糖、右旋糖苷等赋形剂，制成乳剂后，再冷冻干燥，制成冻干剂。
不难看出，本发明药物载体的乳剂及制备方法切实可行，容易实现产品化。并且实验表明，以脂肪乳作为载体，不仅解决了因PH值高引起的E环开裂问题，还增加了制成品的化学稳定性，改变了的药物在体内的分布，具有组织靶向性，从而提高了药物的疗效。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明。
原料来源与规格羟喜树碱 湖北美尔雅(集团)美升药业有限公司生产 批号030201......含量98.9％符合WS1-XG-014-2001相应项下标准对照品羟喜树碱注射液 湖北美尔雅(集团)美升药业有限公司生产 批号030623大豆油 铁岭北区药用油有限公司 符合中国药典标准中链甘油三酯 上海高维实业有限公司 符合欧洲药典标准豆磷脂 上海太伟药业有限公司 符合中国药典标准聚乙烯吡咯烷酮 (上海)巴斯夫有限公司 符合欧洲药典标准实施例一如表1第一列所示，按乳剂重量百分比称取羟喜树碱0.05克(即为乳剂总重量的0.005％)，加入聚乙二醇1.0克(1％)，加入乙醇适量，超声溶解，制成含药溶液。
称取大豆油和MCT各10克(10％)，豆磷脂0.6克(0.6％)，胆固醇0.4克(0.4％)，形成油相。
在油相中加入含药溶液，超声使磷脂溶解，药物分散于油相。减压旋转蒸发，去除有机溶剂。
称取甘油2.5克(2.5％)，PVP4克(4％)，加注射水至100g水相、油相混匀，形成初乳，按制剂常规经超声波乳化，形成乳剂。
使用方法静注5mg/100ml/d连续5天为一疗程本发明乳剂的制剂稳定性试验与抗肿瘤药效学试验参见实施例八、九。
实施例二如表1第二列所示，按重量百分比称取羟喜树碱0.05克，加入大豆油2克，MCT4克，豆磷脂1.2克，胆固醇3克，加热熔融，温度控制在80℃，形成油相。
称取甘油2.5克，加注射水至100克。
水相、油相混匀，形成初乳，在经超声波或均质仪粉碎，形成乳剂。
实施例三如表1第三列所示，按重量百分比称取羟喜树碱0.05g，加入聚乙二醇6g，大豆油2.5g，MCT2.5g，豆磷脂1.2g，胆固醇4g，研磨，使主药分散于油相。
称取甘油2.2g，加注射水至100g。
水相、油相混匀，形成初乳，在经超声波或均质仪粉碎，形成乳剂。
使用方法实施例二、三的乳剂采用5％葡萄糖或0.9％氯化钠稀释至500ml静注10mg/d连续5天为一疗程。
实施例四如表1第四列所示，按乳剂重量百分比称取羟喜树碱2g，加入聚乙二醇6g，加入乙醇适量，超声溶解，制成含药溶液。
称取大豆油5g和MCT5g，豆磷脂2g，胆固醇0.6g，形成油相。
在油相中加入含药溶液，超声使磷脂溶解，药物分散于油相。减压旋转蒸发，去除有机溶剂。
称取甘油2.2g，PVP4g，加注射水至100g水相、油相混匀，形成初乳，在经超声波或均质仪乳化，形成乳剂。
实施例五如表1第五列所示，按重量百分比称取羟喜树碱1g，加入聚乙二醇1g，大豆油4g，MCT2g，豆磷脂5g，加热熔融，温度控制在150℃，形成油相。
称取甘油2.5g，PVP4g，加注射水至100g。
水相、油相混匀，形成初乳，在经超声波或均质仪粉碎，形成乳剂。
实施例六如表1第六列所示，按重量百分比称取羟喜树碱1g，加入聚乙二醇1g，大豆油3g，MCT3g，豆磷脂2g，胆固醇0.4g，研磨，使主药分散于油相。
称取甘油2.5g，PVP4g，加注射水至100g。
水相、油相混匀，形成初乳，在经超声波或均质仪粉碎，形成乳剂。
实施例七在以上实施例一的水相中加入右旋糖苷0.5克(0.5％)；或者，在实施例二的水相中加入山梨醇1.5克(1.5％)；或者，在实施例三的水相中加入葡萄糖3.0克(3％)；然后再乳化，形成的乳剂按冻干剂制备常规经冷冻干燥，制成冻干剂。临床使用时加入0.9％NaCl或者5％葡萄糖稀释，供静脉注射用。
使用方法实施例五、六、七的乳剂采用5％葡萄糖或0.9％氯化钠稀释至500ml静注20mg/d，四次为一疗程。
实施例一至实施例七的参考文献(1)平其能，现代药剂学；(2)M.Jayne LawrenceAdvanced Drug Delivery Reviews 2000(45)89～121；(3)Tstsuo Yamaguch，et.PharmaceuticalResearch，vol12，1995(9)1273～1278；(4)Christian VonCorswant，et.Joumal of Pharmaceutial Sciences.Vol871998(2)200～208。
实施例八对表1中6个配方分别作10天、60℃影响因素试验研究，稳定性考察指标包括药物含量、总有关物质、粒径、表面电位、PH值、粘度，结果如表2。
表1、本发明乳剂原料配比乳剂 1 2 34 56豆磷酯 0.6％ 1.2％ 1.2％2％ 5％ 2％大豆油 10％ 2％ 2.5％5％ 4％ 3％中链甘油酯 10％ 4％ 2.5％5％ 2％ 3％胆固醇 0.4％ 3％ 4％ 0.6％ 00.4％聚乙二醇 1％0 6％ 6％ 1％ 1％甘油 2.5％ 2.5％ 2.2％2.2％ 2.2％2.5％聚乙烯砒咯烷酮 4％0 00 4％ 4％10-羟基喜树碱 0.005％0.005％ 0.005％ 2％ 1％ 1％表2、本发明乳剂的稳定性试验乳剂110天 5天 10天浓度(μg/ml) 49.8 49.849.8总有关物质(％) 2.33 2.572.55平均粒径(nm) 323.9 339.4 347.9表面电位(mv) -31.2 -34.2 -31.5PH值 4.72 4.774.72
粘度(cp) 1.72 1.80 1.79乳剂2 0天 5天 10天浓度(μg/ml) 48.7 48.5 48.0总有关物质(％) 2.40 2.41 2.71平均粒径(nm) 185.3182.3 201.8表面电位(mv) -37.6-38.2 -41.6PH值 4.80 4.78 4.78粘度(cp) 1.59 1.55 1.67乳剂3 0天 5天 10天浓度(μg/ml) 48.7 48.8 48.0总有关物质(％) 2.55 2.58 2.70平均粒径(nm) 170.1172.6 178.8表面电位(mv) -43.6-40.1 -46.9PH值 4.70 4.71 4.77粘度(cp) 1.43 1.55 1.67乳剂4 0天 5天 10天浓度(mg/ml)19.6319.58 19.55总有关物质(％) 2.70％ 2.77％2.79％平均粒径(nm) 241.9293.5 298.1表面电位(mv) -35.8-36.0 -38.1PH值 4.83 4.80 4.80粘度(cp) 2.03 2.13 2.29乳剂5 0天 5天 10天浓度(mg/ml)9.93 9.79 9.71总有关物质(％) 2.77 2.83 2.90平均粒径(nm) 160.4159.5 167.6表面电位(mv) -41.1-41.0 -43.4
PH值 4.73 4.73 4.69粘度(cp) 1.66 1.74 1.73乳剂60天 5天10天浓度(mg/ml) 9.83 9.71 9.73总有关物质(％) 2.71 2.73 2.88平均粒径(nm) 147.3149.7 154.5表面电位(mv) -37.5-36.9 -35.4PH值 4.74 4.74 4.66粘度(cp) 1.77 1.80 1.79对表1的1、6两处方作4℃、25℃加速试验研究及室温实验研究于1，2、3、6个月时作定量检查，结果如表3(单位如前)表3、本发明乳剂的加速试验与室温实验乳剂11个月 2个月3个月6个月4℃25℃室温 4℃25℃室温 4℃25℃室温 4℃25℃室温浓度49.6 49.8 49.1 48.9 49.1 48.7 49.7 47.5 47.9 48.0 47.3 47.4总有关物质 2.51 2.66 2.59 2.55 2.61 2.56 2.64 2.75 2.76 2.66 2.79 2.65平均粒径249.6 249.3 231.7226.1 226.8 229.4227.3 245.0 239.1227.9 282.3 212.0表面电位-28.5 -36.9 -31.1-37.5 -42.0 -39.0-35.4 -34.8 -39.6-32.8 -35.8 -38.2PH值4.70 4.74 4.73 4.71 4.74 4.69 4.79 4.66 4.70 4.73 4.72 4.68粘度1.77 1.79 1.71 1.76 1.87 1.74 1.73 1.88 1.79 1.72 1.821.85乳剂61个月 2个月 3个月 6个月4℃25℃室温4℃25℃室温 4℃25℃室温4℃25℃室温浓度(mg/ml)9.71 9.83 9.77 9.75 9.70 9.69 9.81 9.82 9.74 9.72 9.669.74
总有关物质 2.60 2.63 2.55 2.57 2.73 2.662.58 2.74 2.64 2.59 2.76 2.62平均粒径 131.1 159.1 141.5 128.6 150.3 149.8 144.7 166.4 159.3 154.1 160.5 161.6表面电位 -30.5 -33.1 -38.0 -38.2 -35.8 -38.8 -40.0 -37.6 -31.5 -43.1 -42.4 -42.0PH值 4.73 4.70 4.69 4.77 4.72 4.764.76 4.68 4.72 4.79 4.68 4.71粘度 1.72 1.80 1.72 1.75 1.82 1.771.71 1.80 1.74 1.76 1.831.73模拟临床试验为了临床应用该产品，表1中乳剂6用5％葡萄糖或0.9％NaCl稀释(1∶9)，将样品置在室温下放置12小时，观察样品外观，测定药物浓度，药物降解产物，结果如表4(单位如前)表4、本发明乳剂6与5％葡萄糖稀释液的稳定试验时间(h) 0 2 4 6 8 10 12外观 均匀，白色 均匀 均匀 均匀 均匀 均匀均匀乳液 无分层、无沉淀 同前 同前 同前 同前 同前同前浓度(mg/ml) 9.94 9.93 9.94 9.99.91 9.9 9.93总有关物质 2.70 2.66 2.67 2.71 2.65 2.702.72表5、本发明乳剂6与0.9％NaCl稀释液的稳定试验时间(h) 0 2 4 6 8 10 12外观 均匀，白色 均匀 均匀 均匀 均匀 均匀均匀乳液 无分层、无沉淀 同前 同前 同前 同前 同前同前浓度(mg/ml) 9.94 9.90 9.97 9.90 9.86 9.839.88总有关物质 2.70 2.74 2.88 2.85 2.91 2.992.95
影响因素60℃，加速4℃、25℃情况下，经高效液相、马尔文粒径仪分析得出的数据，整个过程，羟喜树碱含量无明显变化，总有关物质明显增加，粒径在研究期间保持相对稳定，模拟临床给药试验样品保持稳定，证明了羟喜树碱乳剂物理、化学稳定性较好。
本实验方法参考文献中国药典(二部)国家药品标准WS-XG-2002实施例九对C26实体瘤(肠癌)的药效试验采用昆明小鼠10只一组，分6组，市售羟喜树碱针剂与本发明羟喜树碱乳剂各三组，三个剂量组分别给药，连续静注7天，7天后检查抑瘤率，结果如下抑瘤率(％)HCPT乳剂 2mg/Kg63.231mg/Kg47.420.5mg/kg 37.80市售 2mg/kg51.551mg/kg40.210.5mg/Kg 29.55本发明HCPT乳剂组明显优于市售同类药品组。
脑神经胶质瘤(颅内接种)疗效试验采用G422小鼠，每组成10只，分6组，市售羟喜树碱针剂与本发明羟喜树碱乳剂各三组，进行对比试验，连续静注解天，观察小鼠死亡情况，结果如下
平均天数(天)T-C/C(％)HCPT乳剂 2mg/Kg 16.3±4.8 79.121mg/Kg 15.0±4.6 64.80.5mg/kg 13.4±2.9 47.25市售水针 2mg/Kg 15.1+3.765.91mg/Kg 13.7±3.8 50.550.5mg/kg 12.2±3.2 34.0本发明HCPT乳剂比市售水针明显延长神经胶质瘤鼠的生存时间。
Lewis肺癌药效试验采用昆明小鼠，每组成10只，分6组，市售水针与本发明羟喜树碱乳剂进行对照比较其抑瘤率(连续静注7天)，结果如下抑瘤率(％)HCPT乳剂 2mg/kg64.441mg/Kg50.630.5mg/Kg 38.49市售水针 2mg/kg53.141mg/Kg42.260.5mg/Kg 32.64本发明HCPT乳剂较市售水针抑制肺瘤率明显提高。
本发明HCPT乳剂毒性试验HCPT乳剂昆明小鼠20只，雄雌各半，最高浓度(1mg/ml)，最大给药量(0.5ml)，尾静脉连续，给药7天后，体重增大，无明显毒性。小鼠最大耐受量为40mg/kg。
本发明HCPT乳剂连续7天静注给药亚急毒性试验，昆明小鼠雄雌各3组，每组10只，结果如下雄性昆明小鼠HCPT乳剂 LD50＝3.64mg/Kg 95％--105％可信区间为3.3--4.03mg/kg雌性昆明小鼠HCPT乳剂 LD50＝3.76mg/Kg，95％--105％可信区间为3.26--4.35mg/Kg此LD50数值较文献值较好。
以上实验数据充分表明，本发明避免了用氢氧化钠溶液作溶剂，从而防止了E环开裂，提高了药物疗效，降低了毒副作用，使用范围变宽(普通水针不宜与5％葡萄糖混合使用)，因此有望成为一种安全可靠、疗效确切的抗肿瘤新制剂。
本实施方法的参考文献有(1)Zhang.D Cancer ChemotherPhermaco1998，41(4)；(2)钱之玉等药理学实验与指导。
权利要求
1.一种羟喜树碱注射乳剂，其按重量百分比计，包括羟喜树碱0.01～2.2％、乳化剂0.3～8％、甘油三酯类化合物2～30％、等张剂注射用甘油2.0～3.0％，其余为注射用水。
2.根据权利要求1所述注射乳剂，其特征在于羟喜树碱为0.05～2％、乳化剂为0.6～5％、甘油三酯类化合物为5～20％、等张剂注射用甘油2.2～2.5％。
3.根据权利要求1或2所述注射乳剂，其特征在于乳化剂选自豆磷脂、卵磷脂或非离子表面活性剂普朗克尼188F68中的一种或二种；甘油三酯类化合物选自长链甘油三酯和/或中链甘油三酯的一种或二种。
4.根据权利要求3所述注射乳剂，其特征在于长链甘油三酯选自大豆油、红花油、玉米油、椰子油、蓖麻油中的一种或二种。
5.权利要求1或2所述注射乳剂的制备方法，包括下列步骤a)取羟喜树碱、乳化剂、甘油三酯类化合物、等张剂注射用甘油、注射用水备用；b)将羟喜树碱、乳化剂、甘油三酯类化合物混合形成油相B；c)将等张剂注射用甘油与注射用水混合形成水相C；d)将油相B与水相C混合，超声或均质形成乳剂。
6.根据权利要求1所述注射乳剂，其特征在于加入0.3～4％的稳定剂油酸、胆固醇和/或油酸钠；0.5～5％助乳化剂聚乙烯吡咯烷酮；0.01-0.5％抗氧剂VE；0.5～7％助溶剂聚乙二醇200、聚乙二醇300、聚乙二醇400、苯甲酸苄酯或1，2-丙二醇。
7.权利要求6所述注射乳剂的制备方法，包括如下步骤a)取羟喜树碱、乳化剂、甘油三酯类化合物、等张剂注射用甘油、注射用水、稳定剂、助乳化剂、抗氧剂、助溶剂备用；b)将羟喜树碱、乳化剂、甘油三酯类化合物与稳定剂混合形成油相B；c)将等张剂注射用甘油、助乳化剂与注射用水混合形成水相C；d)将油相B与水相C混合，超声或均质形成乳剂；或者，b)用乙醇将羟喜树碱和/或助溶剂溶解，形成羟喜树碱乙醇液B1；将乳化剂、甘油三酯类化合物与稳定剂混合形成油相B2；再将羟喜树碱乙醇液B1与油相B2混合形成油相B；c)将等张剂注射用甘油、助乳化剂与注射用水混合形成水相C；d)将油相B与水相C混合，超声或均质形成乳剂；或者，b)用乙醇将羟喜树碱和/或助溶剂溶解，形成羟喜树碱乙醇液B1；将甘油三酯类化合物形成油相B2；再将羟喜树碱乙醇液B1与油相B2混合形成油相B；c)将等张剂注射用甘油、助乳化剂、乳化剂、稳定剂与注射用水混合形成水相C；d)将油相B与水相C混合，超声或均质形成乳剂。
8.根据权利要求7所述注射乳剂的制备方法，其特征在于c)在水相C中加入0.5-3％的赋形剂山梨醇、葡萄糖、甘露醇、NaCl、乳糖和/或右旋糖苷，得水相D；d)将油相B与水相D混合，超声或均质形成乳剂后，冷冻干燥，制成冻干剂。
9.根据权利要求7或8所述注射乳剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤a)取羟喜树碱0.05％、聚乙二醇2001％、乙醇适量，超声溶解，制成含药溶液B1；b)取大豆油10％、中链甘油三酯10％，豆磷脂0.6％，胆固醇0.4％，形成油相B2；c)在油相B2中加入含药溶液B1，超声促使混匀，减压除去乙醇，得油相B；d)取甘油2.5％，聚乙烯吡咯烷酮4％，加注射水至100％，得水相C；e)将水相C与油相B混匀，经超声波或均质仪乳化，形成乳剂。
10.根据权利要求7或8所述注射乳剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤a)取羟喜树碱2％、聚乙二醇2006％与乙醇适量，超声溶解，制成含药溶液B1；b)取大豆油5％、中链甘油三酯5％、豆磷脂2％与胆固醇0.6％混合，形成油相B2；c)在油相B2中加入含药溶液B1，超声使药液分散于油相，减压去除乙醇，得油相B；d)取甘油2.2％与聚乙烯吡咯烷酮4％，加注射水至100％，形成水相C；e)将水相C、油相D混匀，经超声波或均质仪乳化，形成乳剂。
全文摘要
本发明涉及一种羟喜树碱乳剂及其制备方法，属于医药技术领域。该乳剂其按重量百分比计，包括羟喜树碱0.01～2.2％、乳化剂0.3～8％、甘油三酯类化合物2～30％、等张剂注射用甘油2.0～3.0％，其余为注射用水。其制备方法为将10－羟基喜树碱溶于均匀分散的含有乳化剂的甘油三酯油相中；加入水相，混匀，制成初乳；超声乳化或均质乳化，形成稳定的分散体，制得乳剂。本发明的含药乳剂制备方法切实可行，容易实现产品化。并且实验表明，以脂肪乳作为药物10－羟基喜树碱的载体，不仅解决了因pH值高引起的E环开裂问题，还增加了药物的化学稳定性，改变了的药物在体内的分布，具有组织靶向性，提高了药物的疗效。
文档编号A61P35/00GK1493289SQ0315283
公开日2004年5月5日 申请日期2003年8月26日 优先权日2003年8月26日
发明者曹永强, 熊俊, 袁建华 申请人:袁建华, 熊俊
技术领域：
本发明涉及一种乳剂及其制备方法，尤其是羟喜树碱乳剂及其制备方法，属于医药技术领域。
背景技术：
研究发现，从喜树中分离得到的10-羟基喜树碱(10-HCPT)是所有天然或合成喜树碱类似物中活性最高的化合物。
由于HCPT可以选择抑制DNA拓扑异构酶I的活性，干扰拓扑异构酶催化的DNA切断链接反应，使酶与DNA断链复合物稳定，并抑制切口处的重新接合，因此具有导致DNA断链、干扰DNA复制，具有抗肿瘤的作用。医学上，HCPT作为细胞周期特异性药物，主要作用于S期，对G2-M边界也有延缓作用，对原发性肝癌有效率达56.2％，头颈部肿瘤有效率达64.3％，胃癌有效率达47％。从临床应用看，羟喜树碱钠盐注射液抗癌谱广，疗效较好。但其水溶性小，在碱液中溶解形成钠盐的过程中导致羟喜树碱E环开裂，从而活性降低，副反应增大。临床主要表现为胃肠道反应，骨髓抑制，泌尿道反应。{参见(1)、董锡裕等，中草药，199627(4)243～245；(2)杨时成等，药学学报，1999，34(2)146～150；(3)顾德辛，中国医药情报，19951(6)340～344}发明内容本发明要解决的技术问题是研究一种用作静脉注射的羟喜树碱乳剂，其应能保护羟喜树碱结构中的E环，使治疗药物成份羟喜树碱稳定，减少由于E环破裂结构降解产生的副反应，从而提高疗效。
本发明还包括羟喜树碱乳剂可工业化实施的制备方法。
为解决上述问题，本发明提供如下技术方案。
一种羟喜树碱注射乳剂，其按重量百分比计，包括羟喜树碱0.01～2.2％、乳化剂0.3～8％、甘油三酯类化合物2～30％、等张剂注射用甘油2.0～3.0％，其余为注射用水。
所述注射乳剂，其较好的重量百分比为羟喜树碱为0.05～2％、乳化剂为0.6～5％、甘油三酯类化合物为5～20％、等张剂2.2～2.5％。其中乳化剂选自豆磷脂、卵磷脂或非离子表面活性剂普朗克尼188F68中的一种或二种；甘油三酯类化合物选自长链甘油三酯和/或中链甘油三酯的一种或二种。长链甘油三酯选自大豆油、红花油、玉米油、椰子油、蓖麻油中的一种或二种。
所述注射乳剂的制备方法，包括下列步骤a)取羟喜树碱、乳化剂、甘油三酯类化合物、等张剂注射用甘油、注射用水备用；b)将羟喜树碱、乳化剂、甘油三酯类化合物混合形成油相B；c)将等张剂注射用甘油与注射用水混合形成水相C；d)将油相B与水相C混合，超声或均质形成乳剂。
前述注射乳剂，较好的配比为加入0.1～4％的稳定剂油酸、胆固醇和/或油酸钠；0.5～5％助乳化剂聚乙烯吡咯烷酮；0.01-0.5％抗氧剂VE；0.5～7％助溶剂聚乙二醇200、聚乙二醇300、聚乙二醇400、苯甲酸苄酯或1，2-丙二醇。
所述注射乳剂的制备方法，包括如下步骤
a)取羟喜树碱、乳化剂、甘油三酯类化合物、等张剂注射用甘油、注射用水、稳定剂、助乳化剂、抗氧剂、助溶剂备用；b)将羟喜树碱、乳化剂、甘油三酯类化合物与稳定剂混合形成油相B；c)将等张剂注射用甘油、助乳化剂与注射用水混合形成水相C；d)将油相B与水相C混合，超声或均质形成乳剂；或者，b)用乙醇将羟喜树碱和/或助溶剂溶解，形成羟喜树碱乙醇液B1；将乳化剂、甘油三酯类化合物与稳定剂混合形成油相B2；再将羟喜树碱乙醇液B1与油相B2混合形成油相B；c)将等张剂注射用甘油、助乳化剂与注射用水混合形成水相C；d)将油相B与水相C混合，超声或均质形成乳剂；或者，b)用乙醇将羟喜树碱和/或助溶剂溶解，形成羟喜树碱乙醇液B1；将甘油三酯类化合物形成油相B2；再将羟喜树碱乙醇液B1与油相B2混合形成油相B；c)将等张剂注射用甘油、助乳化剂、乳化剂、稳定剂与注射用水混合形成水相C；d)将油相B与水相C混合，超声或均质形成乳剂。所述注射乳剂的制备方法，还可以c)在水相C中加入0.5-3％的赋形剂山梨醇、葡萄糖、甘露醇、NaCl、乳糖和/或右旋糖苷，得水相D；
d)将油相B与水相D混合，超声或均质形成乳剂后，冷冻干燥，制成冻干剂。
所述注射乳剂的较好的制备方法包括如下步骤a)取羟喜树碱0.05％、聚乙二醇2001％、乙醇适量，超声溶解，制成含药溶液B1；b)取大豆油10％、中链甘油三酯10％，豆磷脂0.6％，胆固醇0.4％，形成油相B2；c)在油相B2中加入含药溶液B1，超声促使混匀，减压除去乙醇，得油相B；d)取甘油2.5％，聚乙烯吡咯烷酮4％，加注射水至100％，得水相C；e)将水相C与油相B混匀，经超声波或均质仪乳化，形成乳剂。
所述注射乳剂的另一种较好的制备方法，包括如下步骤a)取羟喜树碱2％、聚乙二醇2006％与乙醇适量，超声溶解，制成含药溶液B1；b)取大豆油5％、中链甘油三酯5％、豆磷脂2％与胆固醇0.6％混合，形成油相B2；c)在油相B2中加入含药溶液B1，超声使药液分散于油相，减压去除乙醇，得油相B；d)取甘油2.2％与聚乙烯吡咯烷酮4％，加注射水至100％，形成水相C；e)将水相C、油相D混匀，经超声波或均质仪乳化，形成乳剂。
本发明的羟喜树碱乳剂组合物为一种以油/水乳剂为载体的制剂，包括——羟喜树碱；——乳化剂——甘油三酯油相；——含有等张剂的水相；所述羟喜树碱溶解于所述油相中，再于所述水相中形成稳定的亚微(粒径100～500纳米)乳或纳米(粒径10～100纳米)乳剂。
本发明的羟喜树碱重量百分比含量为0.01～2％，乳化剂为0.3～8％，甘油三酯2～20％，其余为水相。此外，还可以根据需要，加入助乳化剂、稳定剂、助溶剂、抗氧剂。
以上甘油三酯可以是大豆油、红花油玉米油、椰子油、蓖麻油等长链甘油三酯中的一种，也可以是中链甘油三酯(MCT)；乳化剂可以是豆磷脂、卵磷脂或非离子表面活性剂普朗克尼(Poloxamer)188F68；等张剂为注射用甘油；助乳化剂为聚乙烯吡咯烷酮(PVP)；稳定剂为油酸、胆固醇、油酸钠；抗氧剂为VE；助溶剂为PEG200、PEG300、PEG400、苯甲酸苄酯，或1，2-丙二醇。
本发明的羟喜树碱注射乳剂组合物可以通过以下步骤的制备方法制取1)、将羟喜树碱均匀分散于含有乳化剂的甘油三酯油相中；2)加入水相，混匀，制成初乳；3)超声乳化或均质乳化，使羟喜树碱溶解于油相形成稳定的分散体，制得亚微米或纳米乳剂。
以上步骤1可以通过下述三种方法实现方法一1-1)将羟喜树碱溶于有机溶剂中；1-2)将溶解液体加入含有乳化剂的甘油三酯油相中；1-3)减压旋转，蒸发除去有机溶剂，形成羟喜树碱油相。
方法二2-1)将羟喜树碱加入含有乳化剂的甘油三酯油相；2-2)加热使羟喜树碱溶于油相。
方法三3-1)将羟喜树碱与含有乳化剂的甘油三酯油相混合；3-2)研磨，使羟喜树碱均匀分散于油相。
以上乳剂可以作用静脉注射液、输液，也可以在形成乳剂前的水相中加入甘露醇、NaCl、乳糖、右旋糖苷等赋形剂，制成乳剂后，再冷冻干燥，制成冻干剂。
不难看出，本发明药物载体的乳剂及制备方法切实可行，容易实现产品化。并且实验表明，以脂肪乳作为载体，不仅解决了因PH值高引起的E环开裂问题，还增加了制成品的化学稳定性，改变了的药物在体内的分布，具有组织靶向性，从而提高了药物的疗效。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作进一步的说明。
原料来源与规格羟喜树碱 湖北美尔雅(集团)美升药业有限公司生产 批号030201......含量98.9％符合WS1-XG-014-2001相应项下标准对照品羟喜树碱注射液 湖北美尔雅(集团)美升药业有限公司生产 批号030623大豆油 铁岭北区药用油有限公司 符合中国药典标准中链甘油三酯 上海高维实业有限公司 符合欧洲药典标准豆磷脂 上海太伟药业有限公司 符合中国药典标准聚乙烯吡咯烷酮 (上海)巴斯夫有限公司 符合欧洲药典标准实施例一如表1第一列所示，按乳剂重量百分比称取羟喜树碱0.05克(即为乳剂总重量的0.005％)，加入聚乙二醇1.0克(1％)，加入乙醇适量，超声溶解，制成含药溶液。
称取大豆油和MCT各10克(10％)，豆磷脂0.6克(0.6％)，胆固醇0.4克(0.4％)，形成油相。
在油相中加入含药溶液，超声使磷脂溶解，药物分散于油相。减压旋转蒸发，去除有机溶剂。
称取甘油2.5克(2.5％)，PVP4克(4％)，加注射水至100g水相、油相混匀，形成初乳，按制剂常规经超声波乳化，形成乳剂。
使用方法静注5mg/100ml/d连续5天为一疗程本发明乳剂的制剂稳定性试验与抗肿瘤药效学试验参见实施例八、九。
实施例二如表1第二列所示，按重量百分比称取羟喜树碱0.05克，加入大豆油2克，MCT4克，豆磷脂1.2克，胆固醇3克，加热熔融，温度控制在80℃，形成油相。
称取甘油2.5克，加注射水至100克。
水相、油相混匀，形成初乳，在经超声波或均质仪粉碎，形成乳剂。
实施例三如表1第三列所示，按重量百分比称取羟喜树碱0.05g，加入聚乙二醇6g，大豆油2.5g，MCT2.5g，豆磷脂1.2g，胆固醇4g，研磨，使主药分散于油相。
称取甘油2.2g，加注射水至100g。
水相、油相混匀，形成初乳，在经超声波或均质仪粉碎，形成乳剂。
使用方法实施例二、三的乳剂采用5％葡萄糖或0.9％氯化钠稀释至500ml静注10mg/d连续5天为一疗程。
实施例四如表1第四列所示，按乳剂重量百分比称取羟喜树碱2g，加入聚乙二醇6g，加入乙醇适量，超声溶解，制成含药溶液。
称取大豆油5g和MCT5g，豆磷脂2g，胆固醇0.6g，形成油相。
在油相中加入含药溶液，超声使磷脂溶解，药物分散于油相。减压旋转蒸发，去除有机溶剂。
称取甘油2.2g，PVP4g，加注射水至100g水相、油相混匀，形成初乳，在经超声波或均质仪乳化，形成乳剂。
实施例五如表1第五列所示，按重量百分比称取羟喜树碱1g，加入聚乙二醇1g，大豆油4g，MCT2g，豆磷脂5g，加热熔融，温度控制在150℃，形成油相。
称取甘油2.5g，PVP4g，加注射水至100g。
水相、油相混匀，形成初乳，在经超声波或均质仪粉碎，形成乳剂。
实施例六如表1第六列所示，按重量百分比称取羟喜树碱1g，加入聚乙二醇1g，大豆油3g，MCT3g，豆磷脂2g，胆固醇0.4g，研磨，使主药分散于油相。
称取甘油2.5g，PVP4g，加注射水至100g。
水相、油相混匀，形成初乳，在经超声波或均质仪粉碎，形成乳剂。
实施例七在以上实施例一的水相中加入右旋糖苷0.5克(0.5％)；或者，在实施例二的水相中加入山梨醇1.5克(1.5％)；或者，在实施例三的水相中加入葡萄糖3.0克(3％)；然后再乳化，形成的乳剂按冻干剂制备常规经冷冻干燥，制成冻干剂。临床使用时加入0.9％NaCl或者5％葡萄糖稀释，供静脉注射用。
使用方法实施例五、六、七的乳剂采用5％葡萄糖或0.9％氯化钠稀释至500ml静注20mg/d，四次为一疗程。
实施例一至实施例七的参考文献(1)平其能，现代药剂学；(2)M.Jayne LawrenceAdvanced Drug Delivery Reviews 2000(45)89～121；(3)Tstsuo Yamaguch，et.PharmaceuticalResearch，vol12，1995(9)1273～1278；(4)Christian VonCorswant，et.Joumal of Pharmaceutial Sciences.Vol871998(2)200～208。
实施例八对表1中6个配方分别作10天、60℃影响因素试验研究，稳定性考察指标包括药物含量、总有关物质、粒径、表面电位、PH值、粘度，结果如表2。
表1、本发明乳剂原料配比乳剂 1 2 34 56豆磷酯 0.6％ 1.2％ 1.2％2％ 5％ 2％大豆油 10％ 2％ 2.5％5％ 4％ 3％中链甘油酯 10％ 4％ 2.5％5％ 2％ 3％胆固醇 0.4％ 3％ 4％ 0.6％ 00.4％聚乙二醇 1％0 6％ 6％ 1％ 1％甘油 2.5％ 2.5％ 2.2％2.2％ 2.2％2.5％聚乙烯砒咯烷酮 4％0 00 4％ 4％10-羟基喜树碱 0.005％0.005％ 0.005％ 2％ 1％ 1％表2、本发明乳剂的稳定性试验乳剂110天 5天 10天浓度(μg/ml) 49.8 49.849.8总有关物质(％) 2.33 2.572.55平均粒径(nm) 323.9 339.4 347.9表面电位(mv) -31.2 -34.2 -31.5PH值 4.72 4.774.72
粘度(cp) 1.72 1.80 1.79乳剂2 0天 5天 10天浓度(μg/ml) 48.7 48.5 48.0总有关物质(％) 2.40 2.41 2.71平均粒径(nm) 185.3182.3 201.8表面电位(mv) -37.6-38.2 -41.6PH值 4.80 4.78 4.78粘度(cp) 1.59 1.55 1.67乳剂3 0天 5天 10天浓度(μg/ml) 48.7 48.8 48.0总有关物质(％) 2.55 2.58 2.70平均粒径(nm) 170.1172.6 178.8表面电位(mv) -43.6-40.1 -46.9PH值 4.70 4.71 4.77粘度(cp) 1.43 1.55 1.67乳剂4 0天 5天 10天浓度(mg/ml)19.6319.58 19.55总有关物质(％) 2.70％ 2.77％2.79％平均粒径(nm) 241.9293.5 298.1表面电位(mv) -35.8-36.0 -38.1PH值 4.83 4.80 4.80粘度(cp) 2.03 2.13 2.29乳剂5 0天 5天 10天浓度(mg/ml)9.93 9.79 9.71总有关物质(％) 2.77 2.83 2.90平均粒径(nm) 160.4159.5 167.6表面电位(mv) -41.1-41.0 -43.4
PH值 4.73 4.73 4.69粘度(cp) 1.66 1.74 1.73乳剂60天 5天10天浓度(mg/ml) 9.83 9.71 9.73总有关物质(％) 2.71 2.73 2.88平均粒径(nm) 147.3149.7 154.5表面电位(mv) -37.5-36.9 -35.4PH值 4.74 4.74 4.66粘度(cp) 1.77 1.80 1.79对表1的1、6两处方作4℃、25℃加速试验研究及室温实验研究于1，2、3、6个月时作定量检查，结果如表3(单位如前)表3、本发明乳剂的加速试验与室温实验乳剂11个月 2个月3个月6个月4℃25℃室温 4℃25℃室温 4℃25℃室温 4℃25℃室温浓度49.6 49.8 49.1 48.9 49.1 48.7 49.7 47.5 47.9 48.0 47.3 47.4总有关物质 2.51 2.66 2.59 2.55 2.61 2.56 2.64 2.75 2.76 2.66 2.79 2.65平均粒径249.6 249.3 231.7226.1 226.8 229.4227.3 245.0 239.1227.9 282.3 212.0表面电位-28.5 -36.9 -31.1-37.5 -42.0 -39.0-35.4 -34.8 -39.6-32.8 -35.8 -38.2PH值4.70 4.74 4.73 4.71 4.74 4.69 4.79 4.66 4.70 4.73 4.72 4.68粘度1.77 1.79 1.71 1.76 1.87 1.74 1.73 1.88 1.79 1.72 1.821.85乳剂61个月 2个月 3个月 6个月4℃25℃室温4℃25℃室温 4℃25℃室温4℃25℃室温浓度(mg/ml)9.71 9.83 9.77 9.75 9.70 9.69 9.81 9.82 9.74 9.72 9.669.74
总有关物质 2.60 2.63 2.55 2.57 2.73 2.662.58 2.74 2.64 2.59 2.76 2.62平均粒径 131.1 159.1 141.5 128.6 150.3 149.8 144.7 166.4 159.3 154.1 160.5 161.6表面电位 -30.5 -33.1 -38.0 -38.2 -35.8 -38.8 -40.0 -37.6 -31.5 -43.1 -42.4 -42.0PH值 4.73 4.70 4.69 4.77 4.72 4.764.76 4.68 4.72 4.79 4.68 4.71粘度 1.72 1.80 1.72 1.75 1.82 1.771.71 1.80 1.74 1.76 1.831.73模拟临床试验为了临床应用该产品，表1中乳剂6用5％葡萄糖或0.9％NaCl稀释(1∶9)，将样品置在室温下放置12小时，观察样品外观，测定药物浓度，药物降解产物，结果如表4(单位如前)表4、本发明乳剂6与5％葡萄糖稀释液的稳定试验时间(h) 0 2 4 6 8 10 12外观 均匀，白色 均匀 均匀 均匀 均匀 均匀均匀乳液 无分层、无沉淀 同前 同前 同前 同前 同前同前浓度(mg/ml) 9.94 9.93 9.94 9.99.91 9.9 9.93总有关物质 2.70 2.66 2.67 2.71 2.65 2.702.72表5、本发明乳剂6与0.9％NaCl稀释液的稳定试验时间(h) 0 2 4 6 8 10 12外观 均匀，白色 均匀 均匀 均匀 均匀 均匀均匀乳液 无分层、无沉淀 同前 同前 同前 同前 同前同前浓度(mg/ml) 9.94 9.90 9.97 9.90 9.86 9.839.88总有关物质 2.70 2.74 2.88 2.85 2.91 2.992.95
影响因素60℃，加速4℃、25℃情况下，经高效液相、马尔文粒径仪分析得出的数据，整个过程，羟喜树碱含量无明显变化，总有关物质明显增加，粒径在研究期间保持相对稳定，模拟临床给药试验样品保持稳定，证明了羟喜树碱乳剂物理、化学稳定性较好。
本实验方法参考文献中国药典(二部)国家药品标准WS-XG-2002实施例九对C26实体瘤(肠癌)的药效试验采用昆明小鼠10只一组，分6组，市售羟喜树碱针剂与本发明羟喜树碱乳剂各三组，三个剂量组分别给药，连续静注7天，7天后检查抑瘤率，结果如下抑瘤率(％)HCPT乳剂 2mg/Kg63.231mg/Kg47.420.5mg/kg 37.80市售 2mg/kg51.551mg/kg40.210.5mg/Kg 29.55本发明HCPT乳剂组明显优于市售同类药品组。
脑神经胶质瘤(颅内接种)疗效试验采用G422小鼠，每组成10只，分6组，市售羟喜树碱针剂与本发明羟喜树碱乳剂各三组，进行对比试验，连续静注解天，观察小鼠死亡情况，结果如下
平均天数(天)T-C/C(％)HCPT乳剂 2mg/Kg 16.3±4.8 79.121mg/Kg 15.0±4.6 64.80.5mg/kg 13.4±2.9 47.25市售水针 2mg/Kg 15.1+3.765.91mg/Kg 13.7±3.8 50.550.5mg/kg 12.2±3.2 34.0本发明HCPT乳剂比市售水针明显延长神经胶质瘤鼠的生存时间。
Lewis肺癌药效试验采用昆明小鼠，每组成10只，分6组，市售水针与本发明羟喜树碱乳剂进行对照比较其抑瘤率(连续静注7天)，结果如下抑瘤率(％)HCPT乳剂 2mg/kg64.441mg/Kg50.630.5mg/Kg 38.49市售水针 2mg/kg53.141mg/Kg42.260.5mg/Kg 32.64本发明HCPT乳剂较市售水针抑制肺瘤率明显提高。
本发明HCPT乳剂毒性试验HCPT乳剂昆明小鼠20只，雄雌各半，最高浓度(1mg/ml)，最大给药量(0.5ml)，尾静脉连续，给药7天后，体重增大，无明显毒性。小鼠最大耐受量为40mg/kg。
本发明HCPT乳剂连续7天静注给药亚急毒性试验，昆明小鼠雄雌各3组，每组10只，结果如下雄性昆明小鼠HCPT乳剂 LD50＝3.64mg/Kg 95％--105％可信区间为3.3--4.03mg/kg雌性昆明小鼠HCPT乳剂 LD50＝3.76mg/Kg，95％--105％可信区间为3.26--4.35mg/Kg此LD50数值较文献值较好。
以上实验数据充分表明，本发明避免了用氢氧化钠溶液作溶剂，从而防止了E环开裂，提高了药物疗效，降低了毒副作用，使用范围变宽(普通水针不宜与5％葡萄糖混合使用)，因此有望成为一种安全可靠、疗效确切的抗肿瘤新制剂。
本实施方法的参考文献有(1)Zhang.D Cancer ChemotherPhermaco1998，41(4)；(2)钱之玉等药理学实验与指导。
权利要求
1.一种羟喜树碱注射乳剂，其按重量百分比计，包括羟喜树碱0.01～2.2％、乳化剂0.3～8％、甘油三酯类化合物2～30％、等张剂注射用甘油2.0～3.0％，其余为注射用水。
2.根据权利要求1所述注射乳剂，其特征在于羟喜树碱为0.05～2％、乳化剂为0.6～5％、甘油三酯类化合物为5～20％、等张剂注射用甘油2.2～2.5％。
3.根据权利要求1或2所述注射乳剂，其特征在于乳化剂选自豆磷脂、卵磷脂或非离子表面活性剂普朗克尼188F68中的一种或二种；甘油三酯类化合物选自长链甘油三酯和/或中链甘油三酯的一种或二种。
4.根据权利要求3所述注射乳剂，其特征在于长链甘油三酯选自大豆油、红花油、玉米油、椰子油、蓖麻油中的一种或二种。
5.权利要求1或2所述注射乳剂的制备方法，包括下列步骤a)取羟喜树碱、乳化剂、甘油三酯类化合物、等张剂注射用甘油、注射用水备用；b)将羟喜树碱、乳化剂、甘油三酯类化合物混合形成油相B；c)将等张剂注射用甘油与注射用水混合形成水相C；d)将油相B与水相C混合，超声或均质形成乳剂。
6.根据权利要求1所述注射乳剂，其特征在于加入0.3～4％的稳定剂油酸、胆固醇和/或油酸钠；0.5～5％助乳化剂聚乙烯吡咯烷酮；0.01-0.5％抗氧剂VE；0.5～7％助溶剂聚乙二醇200、聚乙二醇300、聚乙二醇400、苯甲酸苄酯或1，2-丙二醇。
7.权利要求6所述注射乳剂的制备方法，包括如下步骤a)取羟喜树碱、乳化剂、甘油三酯类化合物、等张剂注射用甘油、注射用水、稳定剂、助乳化剂、抗氧剂、助溶剂备用；b)将羟喜树碱、乳化剂、甘油三酯类化合物与稳定剂混合形成油相B；c)将等张剂注射用甘油、助乳化剂与注射用水混合形成水相C；d)将油相B与水相C混合，超声或均质形成乳剂；或者，b)用乙醇将羟喜树碱和/或助溶剂溶解，形成羟喜树碱乙醇液B1；将乳化剂、甘油三酯类化合物与稳定剂混合形成油相B2；再将羟喜树碱乙醇液B1与油相B2混合形成油相B；c)将等张剂注射用甘油、助乳化剂与注射用水混合形成水相C；d)将油相B与水相C混合，超声或均质形成乳剂；或者，b)用乙醇将羟喜树碱和/或助溶剂溶解，形成羟喜树碱乙醇液B1；将甘油三酯类化合物形成油相B2；再将羟喜树碱乙醇液B1与油相B2混合形成油相B；c)将等张剂注射用甘油、助乳化剂、乳化剂、稳定剂与注射用水混合形成水相C；d)将油相B与水相C混合，超声或均质形成乳剂。
8.根据权利要求7所述注射乳剂的制备方法，其特征在于c)在水相C中加入0.5-3％的赋形剂山梨醇、葡萄糖、甘露醇、NaCl、乳糖和/或右旋糖苷，得水相D；d)将油相B与水相D混合，超声或均质形成乳剂后，冷冻干燥，制成冻干剂。
9.根据权利要求7或8所述注射乳剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤a)取羟喜树碱0.05％、聚乙二醇2001％、乙醇适量，超声溶解，制成含药溶液B1；b)取大豆油10％、中链甘油三酯10％，豆磷脂0.6％，胆固醇0.4％，形成油相B2；c)在油相B2中加入含药溶液B1，超声促使混匀，减压除去乙醇，得油相B；d)取甘油2.5％，聚乙烯吡咯烷酮4％，加注射水至100％，得水相C；e)将水相C与油相B混匀，经超声波或均质仪乳化，形成乳剂。
10.根据权利要求7或8所述注射乳剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤a)取羟喜树碱2％、聚乙二醇2006％与乙醇适量，超声溶解，制成含药溶液B1；b)取大豆油5％、中链甘油三酯5％、豆磷脂2％与胆固醇0.6％混合，形成油相B2；c)在油相B2中加入含药溶液B1，超声使药液分散于油相，减压去除乙醇，得油相B；d)取甘油2.2％与聚乙烯吡咯烷酮4％，加注射水至100％，形成水相C；e)将水相C、油相D混匀，经超声波或均质仪乳化，形成乳剂。
全文摘要
本发明涉及一种羟喜树碱乳剂及其制备方法，属于医药技术领域。该乳剂其按重量百分比计，包括羟喜树碱0.01～2.2％、乳化剂0.3～8％、甘油三酯类化合物2～30％、等张剂注射用甘油2.0～3.0％，其余为注射用水。其制备方法为将10－羟基喜树碱溶于均匀分散的含有乳化剂的甘油三酯油相中；加入水相，混匀，制成初乳；超声乳化或均质乳化，形成稳定的分散体，制得乳剂。本发明的含药乳剂制备方法切实可行，容易实现产品化。并且实验表明，以脂肪乳作为药物10－羟基喜树碱的载体，不仅解决了因pH值高引起的E环开裂问题，还增加了药物的化学稳定性，改变了的药物在体内的分布，具有组织靶向性，提高了药物的疗效。
文档编号A61P35/00GK1493289SQ0315283
公开日2004年5月5日 申请日期2003年8月26日 优先权日2003年8月26日
发明者曹永强, 熊俊, 袁建华 申请人:袁建华, 熊俊
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