一种辅助治疗“正气虚弱”证的药物组合物及其质量控制方法
专利名称：一种辅助治疗“正气虚弱”证的药物组合物及其质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种药物组合物，特别涉及用于辅助治疗“正气虚弱”证的药物组合物，同时涉及该组合物的质量控制方法。
背景技术：
中医学认为“正气”对人体具有十分重要的作用，中国古典医籍(难经)指出“气者，人之根本也。”“正气虚弱”可以引发很多疾病，不少疾病在发生发展过程中，可以出现“正气虚弱证”。虽然病不相同，由于“证候”表现基本雷同，可以采用相同的治法，也就是中医所说的“异病同治”，如慢性支气管炎、哮喘、神经衰弱、失眠、食欲不振、白血球减少等病症，凡出现“气虚证”(含肺气虚、脾气虚、肺脾气虚证)者均可运用本发明进行辅助治疗。
发明内容
本发明的一个目的在于公开一种新的辅助治疗“正气虚弱”证的药物组合物；本发明的另一个目的在于公开一种新的辅助治疗“正气虚弱”证的药物组合物制剂的质量控制方法。
本发明药物组合物的原料药组成及配比如下(按重量份)灵芝菌干粉 60-150重量份 蘑菇浸膏粉 150-250重量份维生素B61-5重量份 人参粉 60-150重量份。
按药剂学方法，可以将本发明的组合物加入辅料制备成多种临床药物剂型，包括片剂、胶囊剂、丸剂、混悬剂、滴丸、口服液体制剂中的任何一种。
所述辅料是指常规的赋形剂，如溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂等。
本发明组合物制成药剂的质量控制方法包括鉴别和/或含量测定鉴别方法包括下列方法中的一种和/或几种a.取本发明组合物片剂，置显微镜下观察，有草酸钙簇晶，直径20-68μm，棱角锐尖；b.取本发明组合物片剂1片，除去薄膜衣，研细，加水40ml，研磨，滤过，取滤液2ml，加茚三酮约2mg，摇匀置水浴中加热约5分钟，溶液显紫红色；c.取本发明组合物片剂1片，除去薄膜衣，研细，加20％醋酸钠溶液5ml，研磨，滤过，滤液分置甲、乙两个试管中，甲管中加水1ml，乙管中加4％硼酸溶液1ml，混匀，各迅速加氯亚胺基-2，6-二氯醌试液1ml，甲管中显污绿色，几分钟后转变为红棕色；乙管中不显污绿色；含量测定包括下列方法中的一种和/或几种(照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录VD)测定)a.人参皂苷Rb1色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(15∶85)-(50∶50)梯度(0-15分钟)为流动相；柱温25-35℃；流速为每分钟1ml，检测波长0-8分钟为350nm，8-15分钟为203nm；理论板数按人参皂苷Rb1峰计算应不低于4000；测定法取本发明组合物片剂20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于2.5片)，置具塞锥形瓶中，精密加入45-55％甲醇20-30ml，超声处理30-50分钟，离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取人参皂苷Rb1对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本发明组合物片剂每片含人参皂苷Rb1(C54H92O23)不得少于0.08mg；b.维生素B6色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇0.05mol/L磷酸二氢钾溶液10-25∶80-90为流动相；检测波长为290nm；理论板数按维生素B6峰计算应不低于2500；测定法，取本发明组合物片剂20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量，约相当于1.25片，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，充分振摇，放置10分钟，取溶液离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取维生素B6对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含1.0mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本发明组合物片剂每片含维生索B6(C8H11NO3·HCl)不得少于1.601.80mg。
所述质量控制方法适用于包括片剂在内的各种剂型，各剂型所用剂量与上述片剂量所含原料药量上相当；所述片剂每片相当原药材1.2g。
本发明组合物制剂具有增强体质，解除疲劳的作用，对慢性支气管炎、哮喘、慢性肝炎、神经衰弱、失眠、食欲不振、白血球减少等“正气虚弱”证辅助治疗有很好的效果。
下面实验例用于进一步说明本发明。以下实验用本发明组合物制剂为参维灵片。
实验例 对慢性疾病中体虚羸弱、正气不足证候的辅助治疗作用为考察本发明组合物制剂对慢性支气管炎、哮喘、慢性肝炎、神经衰弱、失眠、食欲不振、白血球减少等的辅助治疗作用及对人体的安全性，我们选择上述慢性疾病中符合中医体虚羸弱、正气不足证候类型患者进行观察。从2000年9月至2001年12月，采用随机单盲对照试验的方法，累计观察患者450例，治疗组300例，对照组150例。其中肺气虚证180例，包括慢性支气管炎(慢性迁延期，临床缓解期)90例，治疗组60例，对照组30例，支气管哮喘(缓解期)90例，治疗组60例，对照组30例，对照药均为灵芝颗粒；脾气虚证(慢性迁延性、慢性活动性肝炎)90例，治疗组60例，对照组30例，对照药为灵芝北芪片；心脾两虚证(神经衰弱失眠证)90例，治疗组60例，对照组30例，对照药为灵芝北芪片；气虚证(白细胞减少症)90例，治疗组60例，对照组30例，对照药为芪枣冲剂。现将结果总结如下。
一般资料本临床验证观察系各临床试验单位门诊和部分住院病人。共观察450例患者，其中治疗组300例，对照组150例。均为经同意自愿受试者。全部病例符合病例选择标准。性别，见表1。
表1各组患者性别分布比较治疗组 例对照组证候 例数男(％) 女(％)数男(％)女(％)肺气虚证120 75(62.50) 45(37.50) 60 37(61.67) 23(38.33)脾气虚证60 34(56.67) 26(43.33) 30 20(66.67) 10(33.33)心脾两虚证 60 19(31.67) 41(68.33) 30 12(40.00) 18(60.00)气虚证 60 27(45.00) 33(55.00) 30 15(50.00) 15(50.00)经x2检验，各组患者性别分布比较，无统计学差异P＞0.05。
二、年龄，见表2。
表2 各组患者年龄(岁)分布比较例治疗组 对照组证候例数数18～30～50～6518～30 ～50～65肺气虚证120 23 43 54 60 15 21 24脾气虚证60 8 38 14 30 5 17 8心脾两虚证 60 10 21 29 30 3 11 16气虚证 60 16 26 18 30 8 11 11经Ridit检验，各组患者年龄分布比较，无统计学差异P＞0.05。
三、病程，见表3。
表3 各组患者病程分布比较治疗组 对照组证候 例数例数≤3月 ～1年 ＞1年 ≤3月 ～1年 ＞1年肺气虚证120 26 52 42 60 16 23 21脾气虚证60 5 16 39 30 2 10 18心脾两虚证 60 12 26 22 30 4 17 9气虚证 60 23 25 12 30 10 13 7经Ridit检验，各组患者病程分布比较，无统计学差异P＞0.05。
四、临床症状，见表4。
表4 两组临床症状轻重分布比较治疗组 例 对照组症状 例数重中轻无 数重中轻无食少纳差28755126 106 13 145 3353595神疲懒言27268112 9228 134 33544716体倦乏力29778113 106 3148 4257492恶风畏寒11723445063 5614192334气短自汗12026464860 6014262030易感冒 13422605246 6314252427头晕少气2695290127 31 131 25416519失眠多梦85 20412435 4613201314心悸健忘82 18362838 407 161720经Ridit检验，两组患者临床症状轻重分布比较，无统计学差异P＞0.05。
五、舌、脉象，见表5。
表5 两组患者舌、脉象分布比较舌、脉象治疗组 对照组舌质淡 300 150脉缓细 109 55脉细弱 191 95经x2检验，两组患者舌、脉象分布比较，无统计学差异P＞0.05。
六、病种，见表6。
表6两组各病种分布比较慢性 支气管白细胞 神衰组别 例数慢性肝炎支气管炎哮喘 减少证失眠症治疗组3006060606060对照组1503030303030经Ridit检验，两组患者病种分布比较，无统计学差异P＞0.05。
七、白细胞减少症治疗前两组白细胞测定值比较，见表7。
表7 治疗前两组白细胞测定值比较(x±S)组别 例数 WBC(X109/L)治疗组 60 3.12±0.52对照组 30 3.25±0.44经t检验，两组白细胞减少症患者治疗前周围血液中白细胞总数测定值比较，无统计学差异P＞0.05。
由以上统计分析可见，两组患者在性别、年龄、病程、症状轻重、病种分布等方面无统计学差异，具有可比性。
试验方法一、病例选择标准(参照《中药新药临床研究指导原则》1993年，第一辑)西医诊断及中医辨证标准慢性(一)支气管炎(慢性迁延期、临床缓解期)1、西医诊断标准(1)临床上以咳嗽、咯痰为主要症状或伴有喘息，每年发病持续3个月，并连续2年以一上。(2)排除具有咳嗽、咯痰、喘息症状的其它疾病(如肺结核、尘肺、肺脓肿、支气管哮喘、支气管扩张、心脏病、心功能不全、慢性鼻咽疾病等)。(3)单纯型符合慢性支气管炎诊断标准，具有咳嗽、咯痰2项症状。(4)喘息型符合慢性支气管炎诊断标准，具有喘息症状，并经常或多次出现哮鸣音。(5)慢性迁延期病人有不同程度的咳、痰、喘症状，迁延不愈；或急性发作期症状1个月后仍未恢复到发作前水平。(6)临床缓解期病人经过治疗或自然缓解，症状不足轻度，可维持2个月以上。
2、中医辨证标准肺气虚病发时常以咳为主，咳声无力，痰量不多，多汗，恶风，易感冒，舌质正常或稍淡，舌苔薄白，脉弦细或缓细。
3、试验病例标准(1)纳入病例标准符合慢性支气管炎(慢性迁延期、临床缓解期)诊断及中医辨证标准者，可纳入试验病例。(2)排除病例标准①慢性支气管炎急性发作期患者、中医辨证属寒热痰喘实证者。②经检查证实由结核、真菌、肿瘤、刺激性气体过敏等因素所致的慢性咳嗽喘息患者。③慢性支气管炎并发严重心功能不全者。
(二)支气管哮喘(缓解期)1、西医诊断标准(1)支气管哮喘的诊断主要依靠病史和体征，并排除可造成气喘或呼吸困难的其它疾病。(2)症状特点①喘息发作或可追溯与某种变应源或刺激因素有关；②往往有静息时突然喘息，继而咳嗽；少数患者于喘息发作前有轻微咳嗽；③以支气管扩张剂雾化吸人，如1％异丙肾上腺素或0.2％舒喘灵，则可改善或中止喘息。
2、中医辨证标准肺虚证畏寒，自汗，面色晃白，气短声低，极易感冒，每因气候变化而诱发，舌淡，苔薄白，脉细弱。
3、试验病例标准(1)纳入病例标准符合本病(缓解期)诊断及辨证标准者可纳入试验病例。(2)排除病例标准①支气管哮喘发作期患者；中医辨证属寒热哮实证者。②可造成气喘或呼吸困难的其它疾病患者。
(三)慢性肝炎1、西医诊断标准(1)慢性迁延肝炎有确诊或可疑的急性肝炎病史，病程超过半年尚未痊愈，病情较轻，可有肝区痛和乏力，可有SGPT升高或轻度肝功损害而不够诊断慢性活动性肝炎者，或肝活体组织检查符合慢性迁延性肝炎的组织学改变，皆可诊断为慢性迁延性肝炎。(2)慢性活动性肝炎①症状既往有肝炎史，目前有较明显的肝炎症状，如乏力、食欲差、腹胀、便溏等。②体征肝肿大，质地中等硬度以上，可有黄疸、蜘蛛痣、肝病面容、肝掌或脾肿大，而排除其它原因者。③实验室检查SGPT反复或持续升高，或血浆白蛋白明显降低，或白/球蛋白比例明显异常，或丙种球蛋白明显升高，或SB长期反复增高。
以上3项为阳性，或②③两项为阳性。或肝活体组织检查符合慢性活动性肝炎的组织学改变者，皆可诊断为慢性活动性肝炎。
2、中医辨证标准以脾气虚为主要表现，症见体倦乏力，纳差，有时腹胀，便溏，或恶心脘闷，口淡无味，舌质淡，苔薄白，脉弱。
3、试验病例标准(1)纳入病例标准符合慢性迁延性肝炎或慢性活动性肝炎诊断和中医辨证标准者、可纳入试验病例。(2)排除病例标准①经检查证实由药物中毒、乙醇中毒等因素所致的肝炎。②急性肝炎、重型病毒性肝炎、淤胆型肝炎。③中医辨证属湿热、肝气郁滞、热毒炽盛等实证、热证者。
(四)神经衰弱失眠症1、诊断标准(参照中国精神疾病分类方案与诊断标准)(1)有失眠的典型症状入睡困难，时常觉醒，睡而不稳或醒后不能再睡，晨醒过早；夜不能入睡，白天昏沉欲睡；睡眠不足5小时，醒后感不适，疲乏或白天困倦。(2)上述睡眠障碍每周至少发生3次，并一个月以上；不是任何一种躯体疾病或精神障碍症状的一部分。
2、中医辨证标准心脾两虚失眠多梦，心悸健忘，神疲体倦，食纳减少，面色少华，大便溏稀，舌质淡，舌体胖，苔薄白，脉细弱。
3、试验病例标准(1)纳入病例标准①具有失眠典型症状，符合上述诊断标准及中医辨证标准者。②病程持续在1个月以上者。(2)排除病例标准①虽具有神经衰弱失眠的典型症状，但中医辨证属肝郁化火或痰热内扰等实证者。②凡是全身性疾病如疼痛、发热、咳嗽、手术等，以及外界干扰因素引起者。③酗酒和/或精神活性物质、药物滥用者和依赖者(含安眠药物)白细胞减少症。
(五)白细胞减少症1、西医诊断标准(参照《实用内科学》人民卫生出版社出版)(1)周围血液白细胞计数持续低于每立方毫米4,000以下。常在每立方毫米2,000-4,000之间。中性粒细胞比例正常或轻度降低，血红蛋白量和血小板计数正常。(2)因化学药物或物理因素达到足够量所致，如长期接触苯、砷制剂，电离辐射、X线及放射物质，某些药物反应，肿瘤病人放、化疗期间，或原因不明的白细胞减少。(3)患者可无症状，或容易出现疲劳，乏力、食欲减退、低热、睡眠差等非特异性症状。一般无特殊阳性体征。(4)除外其它引起白细胞减少的疾病，如再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症、脾机能亢进、免疫性疾病、白血病等。
2、中医辨证标准气虚证体倦乏力，少气懒言，纳差食少，头晕，面色晃白，易感冒，舌质淡，苔薄白，脉虚无力。
3、试验病例标准(1)纳入病例标准符合本症诊断和中医辨证标准并排除其它全身性疾病者，可纳入试验病例。(2)排除病例标准①由其它如再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症，脾机能亢进，PNH引起的全血细胞减少的疾病。②继发感染者，如口腔、咽喉、皮肤或呼吸道感染者。上述疾病“排除病例标准”(包括不适应或剔除标准)中，均须排除下列各项，方可纳入试验病例。①年龄在18岁以下或65岁以上，妊娠或哺乳期妇女，对本药过敏者。②合并有心血管、肝、肾和造血系统等严重原发性疾病，精神病患者。
③凡不符合纳入标准，未按规定用药，无法判断疗效或资料不全等影响疗效或安全性判断者。
二、观察方法符合纳入病例标准，经同意配合临床观察。采用单盲简单随机分组、分治疗组和对照组。观察30天为一疗程。设治疗组300例，对照组150例。其中慢性支气筲炎治疗组60例 对照组(灵芝颗粒)30例支气管哮喘 治疗组60例 对照组(灵芝颗粒)30例白细胞减少症治疗组60例 对照组(芪枣冲剂)30例神经衰弱失眠症 治疗组60例 对照组(灵芝北芪片)30例慢性肝炎治疗组60例 对照组(灵芝北芪片)30例观察药、对照药用法用量治疗组参维灵片，口服，每次4片，每日3次。对照组①灵芝颗粒，冲服，每次10克，每日3次。②芪枣冲剂，冲服，每次15克，每日3次。③灵芝北芪片，口服，每次5片，每日3次。
住院或门诊条件下观察，门诊观察注意控制可变因素，除慢性肝炎可同时服用保肝、降酶等药物，白细胞减少症中肿瘤病人放、化疗药物可以继续使用并如实记录外，不得使用与治疗药或对照药作用相似的其它药物。
(一)观察指标1、安全性观察(1)一般体检项目(2)血、尿、便常规化验(3)肝(ALT)、肾(BUN)功能检查，心电图检查。分别于观察开始和观察结束时各检查一次。
(4)不良反应。注意详细观察，随时记录。包括不良反应(应具体描述)、反应发生时间，反应程度、是否需要停药、是否需要处理及处理方法等。并判断不良反应与药物之间的关系，如有关、很可能有关、可能有关、无关、不能肯定等，就该药安全性作出评价。由观察医师详细记录，并签名。
上述疾病符合中医肺气虚脾气虚、心脾两虚、气虚证辨证标准，根据主症轻重分级。(分级标准参照《中药新药治疗脾虚证(等的)临床研究指导原则》拟定)主症轻重分级标准主症 重(+++) 中(++) 轻(+)食少纳差 无食欲，饭量减少2/3以上 无食欲，饭量比病前减少1/3 食欲差，或觉乏味，但保持原饭量神疲懒言 精神疲乏、思睡、少言语 精神疲乏、懒于言语，多问少答精神欠振，不善多言，不问不答体倦乏力 四肢无力，不能胜任工作 倦怠较甚，不耐持久工作 稍倦，容易疲劳，但可胜任工作恶风畏寒 怯寒，需加衣被 恶风而不加衣被 微恶风气短自汗每日均有多次，稍事活动则出现 经常有，轻微活动时不明显 偶有易感冒 经常有 有时有 偶尔有失眠多梦 ≥5次/周3~5次/周 (3次/周头晕少气 经常有 有时有 偶尔有心悸健忘 经常有 有时有 偶尔有2.疗效性观察(1)肺气虚主症、舌、脉变化。
(2)脾气虚主症、舌、脉变化。
(3)心脾两虚主症，舌、脉变化。
(4)气虚证主症，舌、脉变化。
(二)疗效判定标准临床痊愈全部症状消失。
显效主症改善在2级以上者(由+++～+)；或主症虽改善不及2级，但其它症状全部消失。
有效主症好转，改善在1级以上者；或其它症状改善2级(由+++～+)者。
无效症状无改善或加重者。
结果一、总疗效，见表8及下图。
表8 两组总疗效比较组别例数 临床痊愈(％) 显效(％) 有效(％)无效(％) 总有效率(％)治疗组 30057(19.00)98(32.67) 108(36.00) 37(12.33)87.67对照组 15021(14.00)42(28.00) 52(34.67) 35(23.33)76.67
经Ridit检验，两组治疗后正气虚弱证疗效比较，无统计学差异P＞0.05。
二、两组各证疗效比较，见表9。
表9 两组各证疗效比较例治疗组 总有效率 例 对照组 总有效率症候数临床痊愈 显效 有效 无效(％) 数临床痊愈 显效 有效 无效(％)肺气虚证 120 22 334619 84.16607 12231870.00脾气虚证 60 11 27163 95.00304 10106 80.00心脾两虚证 60 11 25195 91.66305 11104 86.66气虚证 60 10 132710 83.33305 9 9 7 76.67经Ridit检验，肺气虚证、脾气虚证治疗组与对照组比较，有统计学差异P＜0.05；心脾两虚证、气虚证治疗组与对照组比较，无统计学差异P＞0.05。
三、两组症状疗效比较，见表10。
表10 两组症状疗效比较治疗组总有效率 例对照组症状例数总有效率(％)消失 显效 有效 无变化(％)数消失 显效 有效 无变化食少纳差 287918497 15 94.771452040582781.37神疲懒言 272708310217 93.751342440482283.58体倦乏力 297829998 18 93.931482440523278.37恶风畏寒 117283742 10 91.4556 7 11261278.57气短自汗 120223346 19 84 1660 7 12231870.00易感冒134283850 18 86.5663 8 13251773.01头晕少气 269628791 29 89.211312445102283.20失眠多梦 85 143134 6 92.9446 5 18194 91.30心悸健忘 82 112638 7 91.4640 4 13176 85.00经Ridit检验，治疗组对食少纳差、体倦乏力、恶风畏寒、气短自汗、易感冒等症状的疗效与对照组比较，有统计学差异P＜0.05；对其余症状的疗效两组比较，无统计学差异P＞0.05。
四、两组不同病程疗效比较，见表11。
表11两组不同病程疗效比较治疗组 对照组例 总有效率 例 总有效率症候 临床 临床数 显效 有效 无效(％)数 显效 有效 无效 (％)痊愈 痊愈≤366 1320267 89.393288 106 81.25~1年 1192042431488.2363920201477.77＞1年 1152436391686.0855414221572.72经Ridit检验，治疗组不同病程疗效比较，无统计学差异P＞0.05；对病程＜1年患者两组疗效比较，无统计学差异P＞0.05；对病程＞1年患者两组疗效比较，有统计学差异P＜0.05。
五、两组舌、脉象变化比较，见表12。
表12 两组舌、脉象变化比较治疗组例数 对照组舌、脉象 例数 改善率(％) 改善率(％)疗后改善 疗后转常 疗后改善 疗后转常舌质淡300126 8169.00150 543358.00脉缓细109512367.8855171252.72脉细弱191805369.6395341854.73经Ridit检验，治疗后两组患者舌象比较，无统计学差异P＞0.05；脉象变化比较，有统计学差异P＜0.05。六、治疗组不同年龄段患者疗效比较，见表13。
表13 治疗组不同年龄段患者疗效比较年龄(岁) 例数临床痊愈显数有效无效总有效率(％)18～30 57 1217 21 7 87.71～50 1282547 45 1191.40～65 1152034 42 1983.47经Ridit检验，治疗组不同年龄段患者疗效比较，无统计学差异P＞0.05。
七、两组白细胞变化比较，见表14。
表14 两组白细胞变化比较(X±S)组别 例数治疗前治疗后(WBC×109/L)治疗组603.12±0.523.86±0.69对照组303.25±0.443.85±0.59经t检验，治疗组60例白细胞减少症患者，治疗后周围血液中白细胞总数测定值与治疗前比较，有统计学差异P＜0.05；治疗后两组比较，无统计学差异P＞0.05。
八、安全性指标(一)安全性检查结果，见表15。
表15安全性检查结果治疗前 治疗后项目例数 例数正常异常 正常 异常血常规292224 6828627610尿常规287287 0 2792790便常规274274 0 2712710肝功能(ALT) 283245 3828425232肾功能(BUN) 283283 0 2852850心电图288268 2028927613
(二)不良反应观察观察期间未发现治疗组出现恶心、呕吐、腹泻等消化道不良反应。未发现眩晕、发热、皮疹等药物过敏反应及其它不良反应。
典型病例例一王×，男，60岁，退休工人。2000年10月8日初诊。主诉咳嗽气喘近10年，每于冬、春季气温下降时咳喘加重，西医诊断为“慢性喘息型支气管炎”。发作时咳嗽、咯痰、气喘加重，平素咳嗽，咯少量白痰。近半年来咳喘较轻，全身乏力明显，精神、食欲差，易感冒，易汗出，恶风，诊见舌质淡，舌苔薄白，脉缓细。查T36。6℃，P80次/分，R22次/分，BP16/9kpa。双肺呼吸音粗。可闻少许干鸣音，心率80次/分，律齐，各瓣膜听诊区未闻及病理性杂音。血常规WBC6.8×109/L，N70％，L30％。X线双肺纹理增粗。诊断慢性喘息型支气管炎(临床缓解期)。中医辨证咳喘病属肺气虚证。治则益气扶正固本。予参维灵片，口服，每次4片，每日3次。服药10天复诊患者精神稍好转，乏力减轻，纳食略增加，仍咳嗽，咯痰量少，气喘。20天后复诊气喘，咳嗽减轻，偶咯稀白痰，精神、食欲明显好转，汗出明显减少，恶风减轻。继服上药30天再诊精神较振，全身乏力明显减轻，除仍咳嗽，咯少量白痰，活动后喘时有汗出外，无不适主诉。舌质淡、苔薄白、脉细有力。各项化验正常。
例二张×，男，50岁，农民。2001年9月20日就诊。行胃癌切除术后化疗半年。近2个月来食欲明显减退，食量减少，头晕，体倦乏力，少气懒言。诊见面色晃白，舌质淡，舌苔薄少，脉虚无力。查T36.2℃，BP16/10Kpa。双肺呼吸音清，心率78次/分，律齐，各瓣膜听诊区未闻及病理性杂音。心电图正常。化验血常规Hb 8.4g/L，RBC3.8×1012/L，WBC2.9×109/L，N54％，L46％。西医诊断1.胃癌术后，2.白细胞减少症。中医辨证属气虚证。治以益气扶正。予参维灵片，口服，每次4片，每日3次。10天后复诊头晕、乏力减轻，食欲略增加，余症同前。20天再诊精神、食欲好转。进食量增加，体倦乏力、头晕、少气懒言明显减轻，但活动后乏力肢倦。服药30天复诊精神、食欲明显好转，除活动后仍感乏力外，余症消失化验血常规Hb11.2g/L，RBC4.5×1012/L，WBC5.2×109/L，N62％，L38％。
例三刘×，男，65岁，农民。于2001年11月26日初诊。主诉发作性气喘12年，诊断为“支气管哮喘”。气候变化时或感冒后气喘即加重。近年来，病情逐渐加重，发作时不能平卧，需静点氨茶碱及消炎药可缓解。就诊时较轻，咯少量白稀痰，肢软体倦，不欲饮食，畏寒，自汗，易感冒，语声低微，舌质淡，苔薄白，脉细弱。查体T36.8℃，P84次/分，R23次/分，BP17/10kpa，双肺可闻及干鸣音及哮鸣音，心率84次/分，律齐，各瓣膜听诊区未闻及病理性杂音。血常规WBC7.8×109/L，N65％，L35％。X线双肺纹理增粗。西医诊断支气管哮喘(缓解期)。中医辨证肺气虚。治以益气扶正固本。予参维灵片，口服，每次4片，每日3次。10天后复诊食欲略增加，精神稍好转，余症同前。继服上药20天后复诊气喘减轻，仍咯少量白稀痰，肢软体倦减轻，精神、食欲明显好转，进食量增加，畏寒、自汗亦减轻。服药30天后，食欲、进食量明显增加，语声有力，自汗消失。舌质淡、苔薄白，脉细有力。查BP17/10kpa。心电图(一)。血常规WBC6.8×109/L，N62％，L38％。
例四贺××，女，45岁，职员。2000年10月16日就诊。就诊时诉入睡困难，夜间睡眠不足4小时，多梦易醒，间断加重巳近2个月。平素神疲懒言、倦怠乏力、健忘心悸，头晕.注意力难以集中，纳差，不思饮食，面色无华，便溏，便后感乏力，舌质淡，苔薄白，脉细弱。查P70次/分，律齐，BP17/11kpa。间断服用安定片，效果不佳。诊断神经衰弱失眠症。中医辨证属心脾两虚，心失所养。予参维灵片口服，每次4片，每日3次。十天后复诊食欲增加，倦怠乏力减轻，便后乏力感消失。二十天后三诊夜间睡眠可达5小时，夜梦减少，精神显著好转，头晕、心悸明显减轻。三十天后再诊精神较振，睡眠可达6-7小时，睡眠深沉，头晕、心悸、注意力不集中等基本消失，食欲转常，饭量明显增加。舌淡红，苔薄白，脉细有力。
例五周×，男，42岁，2001年5月9日就诊。患者2000年10月因急性乙型肝炎住院治疗一月余，出院后坚持保肝治疗。现自觉乏力，肝区困，有时隐痛，稍有劳累则症状加重，有时头晕、精神萎顿、口淡无味、倦怠、食欲差、便溏，晚饭后腹胀，面色萎黄，舌质淡，舌苔薄白，脉虚无力。化验AI，T52u/L，AST43u/L，TTT6u。HBsAg(+)，HBeAg(+)，抗-HBc(+)。诊断乙型迁延性肝炎。中医辨证脾气虚弱，正虚邪恋。治拟益气健脾，扶正祛邪。予参维灵片口服，每次4片，每日3次。二诊(十天后)，精神、食欲好转。三诊(二十天后)食欲、口淡乏味、倦怠乏力、头晕等明显好转，肝区困、晚饭后腹胀明显减轻。四诊(三十天后)精神较振，食欲好，饭量明显增加，头晕，乏力，腹胀已消，舌质淡红，苔薄白，脉细弦。化验ALT43u/L，AST36u/L，TTT6u。其余化验结果同前。
结论以上观察结果显示，参维灵片治疗肺气虚证治疗组120例，愈显率45.83％，总有效率84.16％；对照组60例，愈显率31.66％，总有效率70.00％。脾气虚证治疗组60例，愈显率68.33％，总有效率95.00％；对照组30例，愈显率46.66％，总有效率80.00％。心脾两虚证治疗组60例，愈显率60.00％，总有效率91.66％；对照组30例，愈显率53.33％，总有效率86.66％。气虚证治疗组60例，愈显率38.33％，总有效率83.33％；对照组30例，愈显率46.66％。总有效率76.67％。两组治疗后疗效比较，经统计学处理，对肺气虚证的疗效有统计学差异P＜0.05；对脾气虚证的疗效有统计学差异P＜0.05；对心脾两虚证的疗效无统计学差异P＞0.05，对气虚证的疗效无统计学差异P＞0.05。临床验证过程中，治疗组无明显不良反应。此次临床验证结果表明参维灵片用于慢性支气管炎(慢性迁延期、临床缓解期)、支气管炎哮喘(缓解期)、慢性肝炎、神经衰弱失眠症、白细胞减少症，中医辨证属肺气虚、脾气虚弱、心脾两虚、气虚证等体虚羸弱、正气不足患者的辅助治疗，安全有效。
下述实施例均能实现上述实验例的效果。
实施例1片剂灵芝菌干粉100g 蘑菇浸膏粉200g维生素B62g人参粉100g加入辅料制成1000片，口服，一次2片，一日3次。
片剂的质量控制方法鉴别方法a.取本品，置显微镜下观察，有草酸钙簇晶，直径20-68μm，棱角锐尖；b.取本品1片，除去薄膜衣，研细，加水40ml，研磨，滤过，取滤液2ml，加茚三酮约2mg，摇匀置水浴中加热约5分钟，溶液显紫红色；c.取本品1片，除去薄膜衣，研细，加20％醋酸钠溶液5ml，研磨，滤过，滤液分置甲、乙两个试管中，甲管中加水1ml，乙管中加4％硼酸溶液1ml，混匀，各迅速加氯亚胺基-2，6-二氯醌试液1ml，甲管中显污绿色，几分钟后转变为红棕色；乙管中不显污绿色；含量测定(照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录VD)测定)a.人参皂苷Rb1色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(25∶75)-(40∶60)梯度(0-15分钟)为流动相；柱温30℃；流速为每分钟1ml，检测波长0-8分钟为350nm，8-15分钟为203nm；理论板数按人参皂苷Rb1峰计算应不低于4000；测定法取本品20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于2.5片)，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，超声处理40分钟，离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取人参皂苷Rb1对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本品每片含人参皂苷Rb1(C54H92O23)不得少于0.10mg；b.维生素B6色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(含1.1％庚烷磺酸钠、0.2％三乙胺，用磷酸调节pH值为2.5)(15∶85)为流动相；检测波长为290nm；理论板数按维生素B6峰计算应不低于2500；测定法，取本品20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于1.25片)，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，充分振摇，放置10分钟，取溶液离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取维生素B6对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含1.0mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；含维生索B6(C8H11NO3·HCl)不得少于1.70mg。
实施例2胶囊剂灵芝菌干粉130g蘑菇浸膏粉230g
维生素B64g 人参粉130g加入辅料制成胶囊1000粒。
实施例3胶囊剂灵芝菌干粉80g蘑菇浸膏粉180g维生素B63g人参粉90g加入辅料制成胶囊1000粒。每粒相当原料药1克。
权利要求
1.一种辅助治疗“正气虚弱”证的药物组合物，其特征在于药物组合物主要是由下述原料药制成的灵芝菌干粉60-150重量份 蘑菇浸膏粉150-250重量份维生素B61-5重量份 人参粉60-150重量份。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物主要是由下述原料药制成的灵芝菌干粉100重量份 蘑菇浸膏粉200重量份维生素B62重量份 人参粉100重量份。
3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物主要是由下述原料药制成的灵芝菌干粉130重量份 蘑菇浸膏粉230重量份维生素B64重量份 人参粉130重量份。
4.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物主要是由下述原料药制成的灵芝菌干粉80重量份 蘑菇浸膏粉180重量份维生素B63重量份 人参粉90重量份。
5.如权利要求1-4所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物可以加入辅料制备成片剂、胶囊剂、丸剂、混悬剂、滴丸、口服液体制剂中的任何一种。
6.如利要求5所述的药物组合物制剂的质量控制方法，其特征在于该方法中的鉴别方法包括如下鉴别中的一种或几种a.取本发明组合物片剂，置显微镜下观察，有草酸钙簇晶，直径20-68μm，棱角锐尖；b.取本发明组合物片剂1片，除去薄膜衣，研细，加水40ml，研磨，滤过，取滤液2ml，加茚三酮约2mg，摇匀置水浴中加热约5分钟，溶液显紫红色；c.取本发明组合物片剂1片，除去薄膜衣，研细，加20％醋酸钠溶液5ml，研磨，滤过，滤液分置甲、乙两个试管中，甲管中加水1ml，乙管中加4％硼酸溶液1ml，混匀，各迅速加氯亚胺基-2，6-二氯醌试液1ml，甲管中显污绿色，几分钟后转变为红棕色；乙管中不显污绿色。
7.如利要求5所述的药物组合物制剂的质量控制方法，其特征在于该方法中的含量测定方法包括如下方法中的一种或几种a.人参皂苷Rb1色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(15∶85)-(50∶50)梯度(0-15分钟)为流动相；柱温25-35℃；流速为每分钟1ml，检测波长0-8分钟为350nm，8-15分钟为203nm；理论板数按人参皂苷Rb1峰计算应不低于4000；测定法取本发明组合物片剂20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量，约相当于2.5片，置具塞锥形瓶中，精密加入45-55％甲醇20-30ml，超声处理30-50分钟，离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取人参皂苷Rb1对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本发明组合物片剂每片含人参皂苷Rb1不得少于0.08mg；b.维生素B6色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇0.05mol/L磷酸二氢钾溶液10-25∶80-90为流动相；检测波长为290nm；理论板数按维生素B6峰计算应不低于2500；测定法，取本发明组合物片剂20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量，约相当于1.25片，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，充分振摇，放置10分钟，取溶液离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取维生素B6对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含1.0mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本发明组合物片剂每片含维生索B6不得少于1.60-1.80mg。
8.如利要求7所述的药物组合物片剂的质量控制方法，其特征在于该方法中的含量测定方法包括如下方法中的一种或几种a.人参皂苷Rb1色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(25∶75)-(40∶60)梯度(0-15分钟)为流动相；柱温30℃；流速为每分钟1ml，检测波长0-8分钟为350nm，8-15分钟为203nm；理论板数按人参皂苷Rb1峰计算应不低于4000；测定法取本品20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量，约相当于2.5片，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，超声处理40分钟，离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取人参皂苷Rb1对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本品每片含人参皂苷Rb1不得少于0.10mg；b.维生素B6色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇0.05mol/L磷酸二氢钾溶液15∶85为流动相；检测波长为290nm；理论板数按维生素B6峰计算应不低于2500；测定法，取本品20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量，约相当于1.25片，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，充分振摇，放置10分钟，取溶液离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取维生素B6对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含1.0mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；含维生索B6不得少于1.70mg。
9.如权利要求5所述的药物组合物制剂的质量控制方法，其特征在于该方法包括以下步骤鉴别a.取本发明组合物片剂，置显微镜下观察，有草酸钙簇晶，直径20-68μm，棱角锐尖；b.取本发明组合物片剂1片，除去薄膜衣，研细，加水40ml，研磨，滤过，取滤液2ml，加茚三酮约2mg，摇匀置水浴中加热约5分钟，溶液显紫红色；c.取本发明组合物片剂1片，除去薄膜衣，研细，加20％醋酸钠溶液5ml，研磨，滤过，滤液分置甲、乙两个试管中，甲管中加水1ml，乙管中加4％硼酸溶液1ml，混匀，各迅速加氯亚胺基-2，6-二氯醌试液1ml，甲管中显污绿色，几分钟后转变为红棕色；乙管中不显污绿色；含量测定d.人参皂苷Rb1色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(15∶85)-(50∶50)梯度(0-15分钟)为流动相；柱温25-35℃；流速为每分钟1ml，检测波长0-8分钟为350nm，8-15分钟为203nm；理沦板数按人参皂苷Rb1峰计算应不低于4000；测定法取本发明组合物片剂20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量，约相当于2.5片，置具塞锥形瓶中，精密加入45-55％甲醇20-30ml，超声处理30-50分钟，离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取人参皂苷Rb1对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本发明组合物片剂每片含人参皂苷Rb1不得少于0.08mg；e.维生素B6色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇0.05mol/L磷酸二氢钾溶液10-25∶80-90为流动相；检测波长为290nm；理论板数按维生素B6峰计算应不低于2500；测定法，取本发明组合物片剂20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量，约相当于1.25片，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，充分振摇，放置10分钟，取溶液离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取维生素B6对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含1.0mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本发明组合物片剂每片含维生索B6不得少于1.60mg。
10.如权利要求7-9所述的药物组合物制剂的质量控制方法，其特征在于磷酸二氢钾溶液含1.1％庚烷磺酸钠、0.2％三乙胺，用磷酸调节pH值为2.5。
全文摘要
本发明公开了一种辅助治疗“正气虚弱”证的药物组合物及其质量控制方法。该组合物由灵芝菌干粉、蘑菇浸膏粉、维生素B6、人参粉组成。同时本发明还提供了对该组合物进行成分鉴别、含量测定的质量控制方法。本组合物具有增强体质，解除疲劳的作用。
文档编号A61K9/00GK1579535SQ0315310
公开日2005年2月16日 申请日期2003年8月7日 优先权日2003年8月7日
发明者李湛明 申请人:李湛明, 关泽明
技术领域：
本发明涉及一种药物组合物，特别涉及用于辅助治疗“正气虚弱”证的药物组合物，同时涉及该组合物的质量控制方法。
背景技术：
中医学认为“正气”对人体具有十分重要的作用，中国古典医籍(难经)指出“气者，人之根本也。”“正气虚弱”可以引发很多疾病，不少疾病在发生发展过程中，可以出现“正气虚弱证”。虽然病不相同，由于“证候”表现基本雷同，可以采用相同的治法，也就是中医所说的“异病同治”，如慢性支气管炎、哮喘、神经衰弱、失眠、食欲不振、白血球减少等病症，凡出现“气虚证”(含肺气虚、脾气虚、肺脾气虚证)者均可运用本发明进行辅助治疗。
发明内容
本发明的一个目的在于公开一种新的辅助治疗“正气虚弱”证的药物组合物；本发明的另一个目的在于公开一种新的辅助治疗“正气虚弱”证的药物组合物制剂的质量控制方法。
本发明药物组合物的原料药组成及配比如下(按重量份)灵芝菌干粉 60-150重量份 蘑菇浸膏粉 150-250重量份维生素B61-5重量份 人参粉 60-150重量份。
按药剂学方法，可以将本发明的组合物加入辅料制备成多种临床药物剂型，包括片剂、胶囊剂、丸剂、混悬剂、滴丸、口服液体制剂中的任何一种。
所述辅料是指常规的赋形剂，如溶剂、崩解剂、矫味剂、防腐剂、着色剂、粘合剂等。
本发明组合物制成药剂的质量控制方法包括鉴别和/或含量测定鉴别方法包括下列方法中的一种和/或几种a.取本发明组合物片剂，置显微镜下观察，有草酸钙簇晶，直径20-68μm，棱角锐尖；b.取本发明组合物片剂1片，除去薄膜衣，研细，加水40ml，研磨，滤过，取滤液2ml，加茚三酮约2mg，摇匀置水浴中加热约5分钟，溶液显紫红色；c.取本发明组合物片剂1片，除去薄膜衣，研细，加20％醋酸钠溶液5ml，研磨，滤过，滤液分置甲、乙两个试管中，甲管中加水1ml，乙管中加4％硼酸溶液1ml，混匀，各迅速加氯亚胺基-2，6-二氯醌试液1ml，甲管中显污绿色，几分钟后转变为红棕色；乙管中不显污绿色；含量测定包括下列方法中的一种和/或几种(照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录VD)测定)a.人参皂苷Rb1色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(15∶85)-(50∶50)梯度(0-15分钟)为流动相；柱温25-35℃；流速为每分钟1ml，检测波长0-8分钟为350nm，8-15分钟为203nm；理论板数按人参皂苷Rb1峰计算应不低于4000；测定法取本发明组合物片剂20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于2.5片)，置具塞锥形瓶中，精密加入45-55％甲醇20-30ml，超声处理30-50分钟，离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取人参皂苷Rb1对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本发明组合物片剂每片含人参皂苷Rb1(C54H92O23)不得少于0.08mg；b.维生素B6色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇0.05mol/L磷酸二氢钾溶液10-25∶80-90为流动相；检测波长为290nm；理论板数按维生素B6峰计算应不低于2500；测定法，取本发明组合物片剂20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量，约相当于1.25片，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，充分振摇，放置10分钟，取溶液离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取维生素B6对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含1.0mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本发明组合物片剂每片含维生索B6(C8H11NO3·HCl)不得少于1.601.80mg。
所述质量控制方法适用于包括片剂在内的各种剂型，各剂型所用剂量与上述片剂量所含原料药量上相当；所述片剂每片相当原药材1.2g。
本发明组合物制剂具有增强体质，解除疲劳的作用，对慢性支气管炎、哮喘、慢性肝炎、神经衰弱、失眠、食欲不振、白血球减少等“正气虚弱”证辅助治疗有很好的效果。
下面实验例用于进一步说明本发明。以下实验用本发明组合物制剂为参维灵片。
实验例 对慢性疾病中体虚羸弱、正气不足证候的辅助治疗作用为考察本发明组合物制剂对慢性支气管炎、哮喘、慢性肝炎、神经衰弱、失眠、食欲不振、白血球减少等的辅助治疗作用及对人体的安全性，我们选择上述慢性疾病中符合中医体虚羸弱、正气不足证候类型患者进行观察。从2000年9月至2001年12月，采用随机单盲对照试验的方法，累计观察患者450例，治疗组300例，对照组150例。其中肺气虚证180例，包括慢性支气管炎(慢性迁延期，临床缓解期)90例，治疗组60例，对照组30例，支气管哮喘(缓解期)90例，治疗组60例，对照组30例，对照药均为灵芝颗粒；脾气虚证(慢性迁延性、慢性活动性肝炎)90例，治疗组60例，对照组30例，对照药为灵芝北芪片；心脾两虚证(神经衰弱失眠证)90例，治疗组60例，对照组30例，对照药为灵芝北芪片；气虚证(白细胞减少症)90例，治疗组60例，对照组30例，对照药为芪枣冲剂。现将结果总结如下。
一般资料本临床验证观察系各临床试验单位门诊和部分住院病人。共观察450例患者，其中治疗组300例，对照组150例。均为经同意自愿受试者。全部病例符合病例选择标准。性别，见表1。
表1各组患者性别分布比较治疗组 例对照组证候 例数男(％) 女(％)数男(％)女(％)肺气虚证120 75(62.50) 45(37.50) 60 37(61.67) 23(38.33)脾气虚证60 34(56.67) 26(43.33) 30 20(66.67) 10(33.33)心脾两虚证 60 19(31.67) 41(68.33) 30 12(40.00) 18(60.00)气虚证 60 27(45.00) 33(55.00) 30 15(50.00) 15(50.00)经x2检验，各组患者性别分布比较，无统计学差异P＞0.05。
二、年龄，见表2。
表2 各组患者年龄(岁)分布比较例治疗组 对照组证候例数数18～30～50～6518～30 ～50～65肺气虚证120 23 43 54 60 15 21 24脾气虚证60 8 38 14 30 5 17 8心脾两虚证 60 10 21 29 30 3 11 16气虚证 60 16 26 18 30 8 11 11经Ridit检验，各组患者年龄分布比较，无统计学差异P＞0.05。
三、病程，见表3。
表3 各组患者病程分布比较治疗组 对照组证候 例数例数≤3月 ～1年 ＞1年 ≤3月 ～1年 ＞1年肺气虚证120 26 52 42 60 16 23 21脾气虚证60 5 16 39 30 2 10 18心脾两虚证 60 12 26 22 30 4 17 9气虚证 60 23 25 12 30 10 13 7经Ridit检验，各组患者病程分布比较，无统计学差异P＞0.05。
四、临床症状，见表4。
表4 两组临床症状轻重分布比较治疗组 例 对照组症状 例数重中轻无 数重中轻无食少纳差28755126 106 13 145 3353595神疲懒言27268112 9228 134 33544716体倦乏力29778113 106 3148 4257492恶风畏寒11723445063 5614192334气短自汗12026464860 6014262030易感冒 13422605246 6314252427头晕少气2695290127 31 131 25416519失眠多梦85 20412435 4613201314心悸健忘82 18362838 407 161720经Ridit检验，两组患者临床症状轻重分布比较，无统计学差异P＞0.05。
五、舌、脉象，见表5。
表5 两组患者舌、脉象分布比较舌、脉象治疗组 对照组舌质淡 300 150脉缓细 109 55脉细弱 191 95经x2检验，两组患者舌、脉象分布比较，无统计学差异P＞0.05。
六、病种，见表6。
表6两组各病种分布比较慢性 支气管白细胞 神衰组别 例数慢性肝炎支气管炎哮喘 减少证失眠症治疗组3006060606060对照组1503030303030经Ridit检验，两组患者病种分布比较，无统计学差异P＞0.05。
七、白细胞减少症治疗前两组白细胞测定值比较，见表7。
表7 治疗前两组白细胞测定值比较(x±S)组别 例数 WBC(X109/L)治疗组 60 3.12±0.52对照组 30 3.25±0.44经t检验，两组白细胞减少症患者治疗前周围血液中白细胞总数测定值比较，无统计学差异P＞0.05。
由以上统计分析可见，两组患者在性别、年龄、病程、症状轻重、病种分布等方面无统计学差异，具有可比性。
试验方法一、病例选择标准(参照《中药新药临床研究指导原则》1993年，第一辑)西医诊断及中医辨证标准慢性(一)支气管炎(慢性迁延期、临床缓解期)1、西医诊断标准(1)临床上以咳嗽、咯痰为主要症状或伴有喘息，每年发病持续3个月，并连续2年以一上。(2)排除具有咳嗽、咯痰、喘息症状的其它疾病(如肺结核、尘肺、肺脓肿、支气管哮喘、支气管扩张、心脏病、心功能不全、慢性鼻咽疾病等)。(3)单纯型符合慢性支气管炎诊断标准，具有咳嗽、咯痰2项症状。(4)喘息型符合慢性支气管炎诊断标准，具有喘息症状，并经常或多次出现哮鸣音。(5)慢性迁延期病人有不同程度的咳、痰、喘症状，迁延不愈；或急性发作期症状1个月后仍未恢复到发作前水平。(6)临床缓解期病人经过治疗或自然缓解，症状不足轻度，可维持2个月以上。
2、中医辨证标准肺气虚病发时常以咳为主，咳声无力，痰量不多，多汗，恶风，易感冒，舌质正常或稍淡，舌苔薄白，脉弦细或缓细。
3、试验病例标准(1)纳入病例标准符合慢性支气管炎(慢性迁延期、临床缓解期)诊断及中医辨证标准者，可纳入试验病例。(2)排除病例标准①慢性支气管炎急性发作期患者、中医辨证属寒热痰喘实证者。②经检查证实由结核、真菌、肿瘤、刺激性气体过敏等因素所致的慢性咳嗽喘息患者。③慢性支气管炎并发严重心功能不全者。
(二)支气管哮喘(缓解期)1、西医诊断标准(1)支气管哮喘的诊断主要依靠病史和体征，并排除可造成气喘或呼吸困难的其它疾病。(2)症状特点①喘息发作或可追溯与某种变应源或刺激因素有关；②往往有静息时突然喘息，继而咳嗽；少数患者于喘息发作前有轻微咳嗽；③以支气管扩张剂雾化吸人，如1％异丙肾上腺素或0.2％舒喘灵，则可改善或中止喘息。
2、中医辨证标准肺虚证畏寒，自汗，面色晃白，气短声低，极易感冒，每因气候变化而诱发，舌淡，苔薄白，脉细弱。
3、试验病例标准(1)纳入病例标准符合本病(缓解期)诊断及辨证标准者可纳入试验病例。(2)排除病例标准①支气管哮喘发作期患者；中医辨证属寒热哮实证者。②可造成气喘或呼吸困难的其它疾病患者。
(三)慢性肝炎1、西医诊断标准(1)慢性迁延肝炎有确诊或可疑的急性肝炎病史，病程超过半年尚未痊愈，病情较轻，可有肝区痛和乏力，可有SGPT升高或轻度肝功损害而不够诊断慢性活动性肝炎者，或肝活体组织检查符合慢性迁延性肝炎的组织学改变，皆可诊断为慢性迁延性肝炎。(2)慢性活动性肝炎①症状既往有肝炎史，目前有较明显的肝炎症状，如乏力、食欲差、腹胀、便溏等。②体征肝肿大，质地中等硬度以上，可有黄疸、蜘蛛痣、肝病面容、肝掌或脾肿大，而排除其它原因者。③实验室检查SGPT反复或持续升高，或血浆白蛋白明显降低，或白/球蛋白比例明显异常，或丙种球蛋白明显升高，或SB长期反复增高。
以上3项为阳性，或②③两项为阳性。或肝活体组织检查符合慢性活动性肝炎的组织学改变者，皆可诊断为慢性活动性肝炎。
2、中医辨证标准以脾气虚为主要表现，症见体倦乏力，纳差，有时腹胀，便溏，或恶心脘闷，口淡无味，舌质淡，苔薄白，脉弱。
3、试验病例标准(1)纳入病例标准符合慢性迁延性肝炎或慢性活动性肝炎诊断和中医辨证标准者、可纳入试验病例。(2)排除病例标准①经检查证实由药物中毒、乙醇中毒等因素所致的肝炎。②急性肝炎、重型病毒性肝炎、淤胆型肝炎。③中医辨证属湿热、肝气郁滞、热毒炽盛等实证、热证者。
(四)神经衰弱失眠症1、诊断标准(参照中国精神疾病分类方案与诊断标准)(1)有失眠的典型症状入睡困难，时常觉醒，睡而不稳或醒后不能再睡，晨醒过早；夜不能入睡，白天昏沉欲睡；睡眠不足5小时，醒后感不适，疲乏或白天困倦。(2)上述睡眠障碍每周至少发生3次，并一个月以上；不是任何一种躯体疾病或精神障碍症状的一部分。
2、中医辨证标准心脾两虚失眠多梦，心悸健忘，神疲体倦，食纳减少，面色少华，大便溏稀，舌质淡，舌体胖，苔薄白，脉细弱。
3、试验病例标准(1)纳入病例标准①具有失眠典型症状，符合上述诊断标准及中医辨证标准者。②病程持续在1个月以上者。(2)排除病例标准①虽具有神经衰弱失眠的典型症状，但中医辨证属肝郁化火或痰热内扰等实证者。②凡是全身性疾病如疼痛、发热、咳嗽、手术等，以及外界干扰因素引起者。③酗酒和/或精神活性物质、药物滥用者和依赖者(含安眠药物)白细胞减少症。
(五)白细胞减少症1、西医诊断标准(参照《实用内科学》人民卫生出版社出版)(1)周围血液白细胞计数持续低于每立方毫米4,000以下。常在每立方毫米2,000-4,000之间。中性粒细胞比例正常或轻度降低，血红蛋白量和血小板计数正常。(2)因化学药物或物理因素达到足够量所致，如长期接触苯、砷制剂，电离辐射、X线及放射物质，某些药物反应，肿瘤病人放、化疗期间，或原因不明的白细胞减少。(3)患者可无症状，或容易出现疲劳，乏力、食欲减退、低热、睡眠差等非特异性症状。一般无特殊阳性体征。(4)除外其它引起白细胞减少的疾病，如再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症、脾机能亢进、免疫性疾病、白血病等。
2、中医辨证标准气虚证体倦乏力，少气懒言，纳差食少，头晕，面色晃白，易感冒，舌质淡，苔薄白，脉虚无力。
3、试验病例标准(1)纳入病例标准符合本症诊断和中医辨证标准并排除其它全身性疾病者，可纳入试验病例。(2)排除病例标准①由其它如再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症，脾机能亢进，PNH引起的全血细胞减少的疾病。②继发感染者，如口腔、咽喉、皮肤或呼吸道感染者。上述疾病“排除病例标准”(包括不适应或剔除标准)中，均须排除下列各项，方可纳入试验病例。①年龄在18岁以下或65岁以上，妊娠或哺乳期妇女，对本药过敏者。②合并有心血管、肝、肾和造血系统等严重原发性疾病，精神病患者。
③凡不符合纳入标准，未按规定用药，无法判断疗效或资料不全等影响疗效或安全性判断者。
二、观察方法符合纳入病例标准，经同意配合临床观察。采用单盲简单随机分组、分治疗组和对照组。观察30天为一疗程。设治疗组300例，对照组150例。其中慢性支气筲炎治疗组60例 对照组(灵芝颗粒)30例支气管哮喘 治疗组60例 对照组(灵芝颗粒)30例白细胞减少症治疗组60例 对照组(芪枣冲剂)30例神经衰弱失眠症 治疗组60例 对照组(灵芝北芪片)30例慢性肝炎治疗组60例 对照组(灵芝北芪片)30例观察药、对照药用法用量治疗组参维灵片，口服，每次4片，每日3次。对照组①灵芝颗粒，冲服，每次10克，每日3次。②芪枣冲剂，冲服，每次15克，每日3次。③灵芝北芪片，口服，每次5片，每日3次。
住院或门诊条件下观察，门诊观察注意控制可变因素，除慢性肝炎可同时服用保肝、降酶等药物，白细胞减少症中肿瘤病人放、化疗药物可以继续使用并如实记录外，不得使用与治疗药或对照药作用相似的其它药物。
(一)观察指标1、安全性观察(1)一般体检项目(2)血、尿、便常规化验(3)肝(ALT)、肾(BUN)功能检查，心电图检查。分别于观察开始和观察结束时各检查一次。
(4)不良反应。注意详细观察，随时记录。包括不良反应(应具体描述)、反应发生时间，反应程度、是否需要停药、是否需要处理及处理方法等。并判断不良反应与药物之间的关系，如有关、很可能有关、可能有关、无关、不能肯定等，就该药安全性作出评价。由观察医师详细记录，并签名。
上述疾病符合中医肺气虚脾气虚、心脾两虚、气虚证辨证标准，根据主症轻重分级。(分级标准参照《中药新药治疗脾虚证(等的)临床研究指导原则》拟定)主症轻重分级标准主症 重(+++) 中(++) 轻(+)食少纳差 无食欲，饭量减少2/3以上 无食欲，饭量比病前减少1/3 食欲差，或觉乏味，但保持原饭量神疲懒言 精神疲乏、思睡、少言语 精神疲乏、懒于言语，多问少答精神欠振，不善多言，不问不答体倦乏力 四肢无力，不能胜任工作 倦怠较甚，不耐持久工作 稍倦，容易疲劳，但可胜任工作恶风畏寒 怯寒，需加衣被 恶风而不加衣被 微恶风气短自汗每日均有多次，稍事活动则出现 经常有，轻微活动时不明显 偶有易感冒 经常有 有时有 偶尔有失眠多梦 ≥5次/周3~5次/周 (3次/周头晕少气 经常有 有时有 偶尔有心悸健忘 经常有 有时有 偶尔有2.疗效性观察(1)肺气虚主症、舌、脉变化。
(2)脾气虚主症、舌、脉变化。
(3)心脾两虚主症，舌、脉变化。
(4)气虚证主症，舌、脉变化。
(二)疗效判定标准临床痊愈全部症状消失。
显效主症改善在2级以上者(由+++～+)；或主症虽改善不及2级，但其它症状全部消失。
有效主症好转，改善在1级以上者；或其它症状改善2级(由+++～+)者。
无效症状无改善或加重者。
结果一、总疗效，见表8及下图。
表8 两组总疗效比较组别例数 临床痊愈(％) 显效(％) 有效(％)无效(％) 总有效率(％)治疗组 30057(19.00)98(32.67) 108(36.00) 37(12.33)87.67对照组 15021(14.00)42(28.00) 52(34.67) 35(23.33)76.67
经Ridit检验，两组治疗后正气虚弱证疗效比较，无统计学差异P＞0.05。
二、两组各证疗效比较，见表9。
表9 两组各证疗效比较例治疗组 总有效率 例 对照组 总有效率症候数临床痊愈 显效 有效 无效(％) 数临床痊愈 显效 有效 无效(％)肺气虚证 120 22 334619 84.16607 12231870.00脾气虚证 60 11 27163 95.00304 10106 80.00心脾两虚证 60 11 25195 91.66305 11104 86.66气虚证 60 10 132710 83.33305 9 9 7 76.67经Ridit检验，肺气虚证、脾气虚证治疗组与对照组比较，有统计学差异P＜0.05；心脾两虚证、气虚证治疗组与对照组比较，无统计学差异P＞0.05。
三、两组症状疗效比较，见表10。
表10 两组症状疗效比较治疗组总有效率 例对照组症状例数总有效率(％)消失 显效 有效 无变化(％)数消失 显效 有效 无变化食少纳差 287918497 15 94.771452040582781.37神疲懒言 272708310217 93.751342440482283.58体倦乏力 297829998 18 93.931482440523278.37恶风畏寒 117283742 10 91.4556 7 11261278.57气短自汗 120223346 19 84 1660 7 12231870.00易感冒134283850 18 86.5663 8 13251773.01头晕少气 269628791 29 89.211312445102283.20失眠多梦 85 143134 6 92.9446 5 18194 91.30心悸健忘 82 112638 7 91.4640 4 13176 85.00经Ridit检验，治疗组对食少纳差、体倦乏力、恶风畏寒、气短自汗、易感冒等症状的疗效与对照组比较，有统计学差异P＜0.05；对其余症状的疗效两组比较，无统计学差异P＞0.05。
四、两组不同病程疗效比较，见表11。
表11两组不同病程疗效比较治疗组 对照组例 总有效率 例 总有效率症候 临床 临床数 显效 有效 无效(％)数 显效 有效 无效 (％)痊愈 痊愈≤366 1320267 89.393288 106 81.25~1年 1192042431488.2363920201477.77＞1年 1152436391686.0855414221572.72经Ridit检验，治疗组不同病程疗效比较，无统计学差异P＞0.05；对病程＜1年患者两组疗效比较，无统计学差异P＞0.05；对病程＞1年患者两组疗效比较，有统计学差异P＜0.05。
五、两组舌、脉象变化比较，见表12。
表12 两组舌、脉象变化比较治疗组例数 对照组舌、脉象 例数 改善率(％) 改善率(％)疗后改善 疗后转常 疗后改善 疗后转常舌质淡300126 8169.00150 543358.00脉缓细109512367.8855171252.72脉细弱191805369.6395341854.73经Ridit检验，治疗后两组患者舌象比较，无统计学差异P＞0.05；脉象变化比较，有统计学差异P＜0.05。六、治疗组不同年龄段患者疗效比较，见表13。
表13 治疗组不同年龄段患者疗效比较年龄(岁) 例数临床痊愈显数有效无效总有效率(％)18～30 57 1217 21 7 87.71～50 1282547 45 1191.40～65 1152034 42 1983.47经Ridit检验，治疗组不同年龄段患者疗效比较，无统计学差异P＞0.05。
七、两组白细胞变化比较，见表14。
表14 两组白细胞变化比较(X±S)组别 例数治疗前治疗后(WBC×109/L)治疗组603.12±0.523.86±0.69对照组303.25±0.443.85±0.59经t检验，治疗组60例白细胞减少症患者，治疗后周围血液中白细胞总数测定值与治疗前比较，有统计学差异P＜0.05；治疗后两组比较，无统计学差异P＞0.05。
八、安全性指标(一)安全性检查结果，见表15。
表15安全性检查结果治疗前 治疗后项目例数 例数正常异常 正常 异常血常规292224 6828627610尿常规287287 0 2792790便常规274274 0 2712710肝功能(ALT) 283245 3828425232肾功能(BUN) 283283 0 2852850心电图288268 2028927613
(二)不良反应观察观察期间未发现治疗组出现恶心、呕吐、腹泻等消化道不良反应。未发现眩晕、发热、皮疹等药物过敏反应及其它不良反应。
典型病例例一王×，男，60岁，退休工人。2000年10月8日初诊。主诉咳嗽气喘近10年，每于冬、春季气温下降时咳喘加重，西医诊断为“慢性喘息型支气管炎”。发作时咳嗽、咯痰、气喘加重，平素咳嗽，咯少量白痰。近半年来咳喘较轻，全身乏力明显，精神、食欲差，易感冒，易汗出，恶风，诊见舌质淡，舌苔薄白，脉缓细。查T36。6℃，P80次/分，R22次/分，BP16/9kpa。双肺呼吸音粗。可闻少许干鸣音，心率80次/分，律齐，各瓣膜听诊区未闻及病理性杂音。血常规WBC6.8×109/L，N70％，L30％。X线双肺纹理增粗。诊断慢性喘息型支气管炎(临床缓解期)。中医辨证咳喘病属肺气虚证。治则益气扶正固本。予参维灵片，口服，每次4片，每日3次。服药10天复诊患者精神稍好转，乏力减轻，纳食略增加，仍咳嗽，咯痰量少，气喘。20天后复诊气喘，咳嗽减轻，偶咯稀白痰，精神、食欲明显好转，汗出明显减少，恶风减轻。继服上药30天再诊精神较振，全身乏力明显减轻，除仍咳嗽，咯少量白痰，活动后喘时有汗出外，无不适主诉。舌质淡、苔薄白、脉细有力。各项化验正常。
例二张×，男，50岁，农民。2001年9月20日就诊。行胃癌切除术后化疗半年。近2个月来食欲明显减退，食量减少，头晕，体倦乏力，少气懒言。诊见面色晃白，舌质淡，舌苔薄少，脉虚无力。查T36.2℃，BP16/10Kpa。双肺呼吸音清，心率78次/分，律齐，各瓣膜听诊区未闻及病理性杂音。心电图正常。化验血常规Hb 8.4g/L，RBC3.8×1012/L，WBC2.9×109/L，N54％，L46％。西医诊断1.胃癌术后，2.白细胞减少症。中医辨证属气虚证。治以益气扶正。予参维灵片，口服，每次4片，每日3次。10天后复诊头晕、乏力减轻，食欲略增加，余症同前。20天再诊精神、食欲好转。进食量增加，体倦乏力、头晕、少气懒言明显减轻，但活动后乏力肢倦。服药30天复诊精神、食欲明显好转，除活动后仍感乏力外，余症消失化验血常规Hb11.2g/L，RBC4.5×1012/L，WBC5.2×109/L，N62％，L38％。
例三刘×，男，65岁，农民。于2001年11月26日初诊。主诉发作性气喘12年，诊断为“支气管哮喘”。气候变化时或感冒后气喘即加重。近年来，病情逐渐加重，发作时不能平卧，需静点氨茶碱及消炎药可缓解。就诊时较轻，咯少量白稀痰，肢软体倦，不欲饮食，畏寒，自汗，易感冒，语声低微，舌质淡，苔薄白，脉细弱。查体T36.8℃，P84次/分，R23次/分，BP17/10kpa，双肺可闻及干鸣音及哮鸣音，心率84次/分，律齐，各瓣膜听诊区未闻及病理性杂音。血常规WBC7.8×109/L，N65％，L35％。X线双肺纹理增粗。西医诊断支气管哮喘(缓解期)。中医辨证肺气虚。治以益气扶正固本。予参维灵片，口服，每次4片，每日3次。10天后复诊食欲略增加，精神稍好转，余症同前。继服上药20天后复诊气喘减轻，仍咯少量白稀痰，肢软体倦减轻，精神、食欲明显好转，进食量增加，畏寒、自汗亦减轻。服药30天后，食欲、进食量明显增加，语声有力，自汗消失。舌质淡、苔薄白，脉细有力。查BP17/10kpa。心电图(一)。血常规WBC6.8×109/L，N62％，L38％。
例四贺××，女，45岁，职员。2000年10月16日就诊。就诊时诉入睡困难，夜间睡眠不足4小时，多梦易醒，间断加重巳近2个月。平素神疲懒言、倦怠乏力、健忘心悸，头晕.注意力难以集中，纳差，不思饮食，面色无华，便溏，便后感乏力，舌质淡，苔薄白，脉细弱。查P70次/分，律齐，BP17/11kpa。间断服用安定片，效果不佳。诊断神经衰弱失眠症。中医辨证属心脾两虚，心失所养。予参维灵片口服，每次4片，每日3次。十天后复诊食欲增加，倦怠乏力减轻，便后乏力感消失。二十天后三诊夜间睡眠可达5小时，夜梦减少，精神显著好转，头晕、心悸明显减轻。三十天后再诊精神较振，睡眠可达6-7小时，睡眠深沉，头晕、心悸、注意力不集中等基本消失，食欲转常，饭量明显增加。舌淡红，苔薄白，脉细有力。
例五周×，男，42岁，2001年5月9日就诊。患者2000年10月因急性乙型肝炎住院治疗一月余，出院后坚持保肝治疗。现自觉乏力，肝区困，有时隐痛，稍有劳累则症状加重，有时头晕、精神萎顿、口淡无味、倦怠、食欲差、便溏，晚饭后腹胀，面色萎黄，舌质淡，舌苔薄白，脉虚无力。化验AI，T52u/L，AST43u/L，TTT6u。HBsAg(+)，HBeAg(+)，抗-HBc(+)。诊断乙型迁延性肝炎。中医辨证脾气虚弱，正虚邪恋。治拟益气健脾，扶正祛邪。予参维灵片口服，每次4片，每日3次。二诊(十天后)，精神、食欲好转。三诊(二十天后)食欲、口淡乏味、倦怠乏力、头晕等明显好转，肝区困、晚饭后腹胀明显减轻。四诊(三十天后)精神较振，食欲好，饭量明显增加，头晕，乏力，腹胀已消，舌质淡红，苔薄白，脉细弦。化验ALT43u/L，AST36u/L，TTT6u。其余化验结果同前。
结论以上观察结果显示，参维灵片治疗肺气虚证治疗组120例，愈显率45.83％，总有效率84.16％；对照组60例，愈显率31.66％，总有效率70.00％。脾气虚证治疗组60例，愈显率68.33％，总有效率95.00％；对照组30例，愈显率46.66％，总有效率80.00％。心脾两虚证治疗组60例，愈显率60.00％，总有效率91.66％；对照组30例，愈显率53.33％，总有效率86.66％。气虚证治疗组60例，愈显率38.33％，总有效率83.33％；对照组30例，愈显率46.66％。总有效率76.67％。两组治疗后疗效比较，经统计学处理，对肺气虚证的疗效有统计学差异P＜0.05；对脾气虚证的疗效有统计学差异P＜0.05；对心脾两虚证的疗效无统计学差异P＞0.05，对气虚证的疗效无统计学差异P＞0.05。临床验证过程中，治疗组无明显不良反应。此次临床验证结果表明参维灵片用于慢性支气管炎(慢性迁延期、临床缓解期)、支气管炎哮喘(缓解期)、慢性肝炎、神经衰弱失眠症、白细胞减少症，中医辨证属肺气虚、脾气虚弱、心脾两虚、气虚证等体虚羸弱、正气不足患者的辅助治疗，安全有效。
下述实施例均能实现上述实验例的效果。
实施例1片剂灵芝菌干粉100g 蘑菇浸膏粉200g维生素B62g人参粉100g加入辅料制成1000片，口服，一次2片，一日3次。
片剂的质量控制方法鉴别方法a.取本品，置显微镜下观察，有草酸钙簇晶，直径20-68μm，棱角锐尖；b.取本品1片，除去薄膜衣，研细，加水40ml，研磨，滤过，取滤液2ml，加茚三酮约2mg，摇匀置水浴中加热约5分钟，溶液显紫红色；c.取本品1片，除去薄膜衣，研细，加20％醋酸钠溶液5ml，研磨，滤过，滤液分置甲、乙两个试管中，甲管中加水1ml，乙管中加4％硼酸溶液1ml，混匀，各迅速加氯亚胺基-2，6-二氯醌试液1ml，甲管中显污绿色，几分钟后转变为红棕色；乙管中不显污绿色；含量测定(照高效液相色谱法(中国药典2000年版二部附录VD)测定)a.人参皂苷Rb1色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(25∶75)-(40∶60)梯度(0-15分钟)为流动相；柱温30℃；流速为每分钟1ml，检测波长0-8分钟为350nm，8-15分钟为203nm；理论板数按人参皂苷Rb1峰计算应不低于4000；测定法取本品20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于2.5片)，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，超声处理40分钟，离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取人参皂苷Rb1对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本品每片含人参皂苷Rb1(C54H92O23)不得少于0.10mg；b.维生素B6色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇∶0.05mol/L磷酸二氢钾溶液(含1.1％庚烷磺酸钠、0.2％三乙胺，用磷酸调节pH值为2.5)(15∶85)为流动相；检测波长为290nm；理论板数按维生素B6峰计算应不低于2500；测定法，取本品20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于1.25片)，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，充分振摇，放置10分钟，取溶液离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取维生素B6对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含1.0mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；含维生索B6(C8H11NO3·HCl)不得少于1.70mg。
实施例2胶囊剂灵芝菌干粉130g蘑菇浸膏粉230g
维生素B64g 人参粉130g加入辅料制成胶囊1000粒。
实施例3胶囊剂灵芝菌干粉80g蘑菇浸膏粉180g维生素B63g人参粉90g加入辅料制成胶囊1000粒。每粒相当原料药1克。
权利要求
1.一种辅助治疗“正气虚弱”证的药物组合物，其特征在于药物组合物主要是由下述原料药制成的灵芝菌干粉60-150重量份 蘑菇浸膏粉150-250重量份维生素B61-5重量份 人参粉60-150重量份。
2.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物主要是由下述原料药制成的灵芝菌干粉100重量份 蘑菇浸膏粉200重量份维生素B62重量份 人参粉100重量份。
3.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物主要是由下述原料药制成的灵芝菌干粉130重量份 蘑菇浸膏粉230重量份维生素B64重量份 人参粉130重量份。
4.如权利要求1所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物主要是由下述原料药制成的灵芝菌干粉80重量份 蘑菇浸膏粉180重量份维生素B63重量份 人参粉90重量份。
5.如权利要求1-4所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物可以加入辅料制备成片剂、胶囊剂、丸剂、混悬剂、滴丸、口服液体制剂中的任何一种。
6.如利要求5所述的药物组合物制剂的质量控制方法，其特征在于该方法中的鉴别方法包括如下鉴别中的一种或几种a.取本发明组合物片剂，置显微镜下观察，有草酸钙簇晶，直径20-68μm，棱角锐尖；b.取本发明组合物片剂1片，除去薄膜衣，研细，加水40ml，研磨，滤过，取滤液2ml，加茚三酮约2mg，摇匀置水浴中加热约5分钟，溶液显紫红色；c.取本发明组合物片剂1片，除去薄膜衣，研细，加20％醋酸钠溶液5ml，研磨，滤过，滤液分置甲、乙两个试管中，甲管中加水1ml，乙管中加4％硼酸溶液1ml，混匀，各迅速加氯亚胺基-2，6-二氯醌试液1ml，甲管中显污绿色，几分钟后转变为红棕色；乙管中不显污绿色。
7.如利要求5所述的药物组合物制剂的质量控制方法，其特征在于该方法中的含量测定方法包括如下方法中的一种或几种a.人参皂苷Rb1色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(15∶85)-(50∶50)梯度(0-15分钟)为流动相；柱温25-35℃；流速为每分钟1ml，检测波长0-8分钟为350nm，8-15分钟为203nm；理论板数按人参皂苷Rb1峰计算应不低于4000；测定法取本发明组合物片剂20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量，约相当于2.5片，置具塞锥形瓶中，精密加入45-55％甲醇20-30ml，超声处理30-50分钟，离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取人参皂苷Rb1对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本发明组合物片剂每片含人参皂苷Rb1不得少于0.08mg；b.维生素B6色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇0.05mol/L磷酸二氢钾溶液10-25∶80-90为流动相；检测波长为290nm；理论板数按维生素B6峰计算应不低于2500；测定法，取本发明组合物片剂20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量，约相当于1.25片，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，充分振摇，放置10分钟，取溶液离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取维生素B6对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含1.0mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本发明组合物片剂每片含维生索B6不得少于1.60-1.80mg。
8.如利要求7所述的药物组合物片剂的质量控制方法，其特征在于该方法中的含量测定方法包括如下方法中的一种或几种a.人参皂苷Rb1色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(25∶75)-(40∶60)梯度(0-15分钟)为流动相；柱温30℃；流速为每分钟1ml，检测波长0-8分钟为350nm，8-15分钟为203nm；理论板数按人参皂苷Rb1峰计算应不低于4000；测定法取本品20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量，约相当于2.5片，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，超声处理40分钟，离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取人参皂苷Rb1对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本品每片含人参皂苷Rb1不得少于0.10mg；b.维生素B6色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇0.05mol/L磷酸二氢钾溶液15∶85为流动相；检测波长为290nm；理论板数按维生素B6峰计算应不低于2500；测定法，取本品20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量，约相当于1.25片，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，充分振摇，放置10分钟，取溶液离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取维生素B6对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含1.0mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；含维生索B6不得少于1.70mg。
9.如权利要求5所述的药物组合物制剂的质量控制方法，其特征在于该方法包括以下步骤鉴别a.取本发明组合物片剂，置显微镜下观察，有草酸钙簇晶，直径20-68μm，棱角锐尖；b.取本发明组合物片剂1片，除去薄膜衣，研细，加水40ml，研磨，滤过，取滤液2ml，加茚三酮约2mg，摇匀置水浴中加热约5分钟，溶液显紫红色；c.取本发明组合物片剂1片，除去薄膜衣，研细，加20％醋酸钠溶液5ml，研磨，滤过，滤液分置甲、乙两个试管中，甲管中加水1ml，乙管中加4％硼酸溶液1ml，混匀，各迅速加氯亚胺基-2，6-二氯醌试液1ml，甲管中显污绿色，几分钟后转变为红棕色；乙管中不显污绿色；含量测定d.人参皂苷Rb1色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-0.05％磷酸溶液(15∶85)-(50∶50)梯度(0-15分钟)为流动相；柱温25-35℃；流速为每分钟1ml，检测波长0-8分钟为350nm，8-15分钟为203nm；理沦板数按人参皂苷Rb1峰计算应不低于4000；测定法取本发明组合物片剂20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量，约相当于2.5片，置具塞锥形瓶中，精密加入45-55％甲醇20-30ml，超声处理30-50分钟，离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取人参皂苷Rb1对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本发明组合物片剂每片含人参皂苷Rb1不得少于0.08mg；e.维生素B6色谱条件与色谱条件适用性试验，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇0.05mol/L磷酸二氢钾溶液10-25∶80-90为流动相；检测波长为290nm；理论板数按维生素B6峰计算应不低于2500；测定法，取本发明组合物片剂20片，除去薄膜衣，在60℃干燥1小时，精密称定，研细，精密称取适量，约相当于1.25片，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇25ml，充分振摇，放置10分钟，取溶液离心，取上清液，作为供试品溶液；另精密称取维生素B6对照品适量，加甲醇溶解并定量稀释制成每1ml中含1.0mg的溶液作为对照品溶液；分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得；本发明组合物片剂每片含维生索B6不得少于1.60mg。
10.如权利要求7-9所述的药物组合物制剂的质量控制方法，其特征在于磷酸二氢钾溶液含1.1％庚烷磺酸钠、0.2％三乙胺，用磷酸调节pH值为2.5。
全文摘要
本发明公开了一种辅助治疗“正气虚弱”证的药物组合物及其质量控制方法。该组合物由灵芝菌干粉、蘑菇浸膏粉、维生素B6、人参粉组成。同时本发明还提供了对该组合物进行成分鉴别、含量测定的质量控制方法。本组合物具有增强体质，解除疲劳的作用。
文档编号A61K9/00GK1579535SQ0315310
公开日2005年2月16日 申请日期2003年8月7日 优先权日2003年8月7日
发明者李湛明 申请人:李湛明, 关泽明
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