一种松果菊多糖、其制备方法及其在制备治疗抗病毒及抗菌，特别是抗sars药物上的用途的制作方法
专利名称：一种松果菊多糖、其制备方法及其在制备治疗抗病毒及抗菌，特别是抗sars药物上的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种松果菊多糖、其制备方法、含有松果菊多糖的药物制剂及其用途，具体地说，本发明涉及由松果菊提取的松果菊多糖、其制备方法、含有松果菊多糖的药物制剂及其在制备治疗各种炎症、促进免疫功能、抗病毒及抗菌，特别是抗SARS药物上的用途，属于药物领域。
背景技术：
松果菊是菊科Compositae松果菊属Echinacea植物，分布在北美洲，该属植物约有9种，主要药用种是狭叶松果菊E.angustifolia，紫花松果菊E.purpurea和淡紫松果菊E.pallida。
松果菊是国外尤其是欧洲广泛用来治疗各种炎症和促进免疫功能的植物药，其药理作用包括对免疫系统的增强作用、抗炎、抗病毒及抗菌作用等，治疗用途十分广泛，疗效得到了越来越多的临床医生的肯定。
从松果菊的汁液制成的制剂，经体外及动物实验表明，能够增加粒细胞和巨噬细胞的活性。松果菊中所含的烷基酰胺类，链烯酮，菊苣酸能够增强粒细胞的吞噬作用。多糖类可增强巨噬细胞的吞噬作用。1985年，Stuppner在体外实验中发现不同浓度的冷冻干燥的紫花松果菊的汁液(103～105mg·mL-1)，均表现出明显的吞噬作用增强活性，但在更高浓度时，表现为免疫抑制和细胞毒性。
文献报道松果菊醇提物刺激巨噬细胞产生大量免疫增效因子，如肿瘤坏死因子，干扰素，白介素I，II，VI，X。
透明质酸酶是微生物分泌的，可分解透明质酸，使组织通透性增加，更易于毒性产物向周围组织扩散。咖啡酸衍生物能抑制透明质酸酶，保持结缔组织及其胞间基质的结构和完整性。J Jakupovic，R X Tan，F Bohlmann在Pharmacol Res Commun，1988，20(Suppl，5)87中报道了松果菊能够抑制水肿，减少炎症细胞浸润。烷基酰胺能抑制环加氧酶，阻断前列腺素的合成，有减轻疼痛，发热和炎症的作用。
松果菊地上部分新鲜压汁和根水提取物表现出抗病毒活性，在细胞培养中受到抑制的病毒有流感病毒、疱疹病毒等。其作用机理与免疫刺激及抗透明质酸酶有关。松果菊直接抗菌活性非常温和。但松果菊被有效地用于内部和外部细菌感染有着悠久的历史。其临床抗菌效果、作用机制可能是由于其免疫刺激活性。
现有技术中，松果菊制剂主要为原生药直接药用或由松果菊原料经醇和极性溶剂粗提而得到脂溶部分。据李继仁等人在《中国中药杂志》27(5)中报道，松果菊提取物中主要成分为不饱和脂肪酰胺、不饱和酮、咖啡酸衍生物、倍半萜类、生物碱类及其他化学成分组成的混合物，以及C10-33的烷烃、多炔类、植物甾醇、黄酮类和多糖类。其中主要为不饱和酰胺类，苯乙醇苷类和多糖，但前二者含量较少，且极易氧化变质。
现有技术中还公开了含有松果菊的药用组合物，如中国专利申请97195836和WO/11778。
到目前为止，还没松果菊的单体或化学有效成分直接用做药物以治疗的报道。以松果菊提取多糖并直接作为药用，更是在国内外均未见报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种松果菊多糖，是从松果菊中提取的主要活性多糖成分，以多糖直接入药，无毒副作用，服用量大大减少，药物的疗效明确，适用范围广。
本发明的另一目的在于提供一种松果菊多糖药物组合物，该药物组合物含有松果菊的提取物--松果菊多糖，以及药学上可接受的其他辅料、各种药物剂型的安全、价廉、有效的药物组合物。
本发明的再一目的在于提供上述松果菊多糖、松果菊多糖药物组合物的制备方法，该方法简单、有效、适于工业化生产，产品质量稳定、易于控制。
本发明还有一目的在于提供松果菊多糖提取物、松果菊多糖药物在制备治疗免疫系统疾病、消炎、抗病毒及抗菌药物上的用途。
此外，本发明还提供了松果菊多糖在制备治疗各种炎症、促进免疫功能、抗病毒及抗菌，特别是抗SARS药物上的用途。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案为一种松果菊多糖，是松果菊原料经提取得到的，其总糖含量为75-95wt％，平均分子量在3000-130000之间。
优选总糖含量为75-85wt％。
其总糖中单糖的组成及含量为葡萄糖30-75wt％，果糖10％-60wt％，阿拉伯糖5％-20wt％。优选平均分子量为3-8万之间。
本发明的松果菊多糖无臭、无甜味，其固体为灰白色至淡黄色粉末，易溶于热水，不溶于乙醇。
所述松果菊多糖药物组合物含有本发明松果菊多糖和药学上可接受的辅料。
在松果菊多糖药物组合物中，松果菊多糖的含量为0.05-90wt％。
所述松果菊多糖药物组合物还包括至少一种选自抗病毒、抗菌或免疫制剂等药物。包括但不限于青霉素及其衍生物、先锋霉素及其衍生物、红霉素及其衍生物、抗菌中草药提取物、利巴韦林、阿糖腺苷、阿昔洛韦、伐昔洛韦、更昔洛韦、曲氟尿苷、索立夫定、拉米夫定、膦甲酸、吗啉胍、金刚烷胺等。
本发明松果菊多糖的制备方法包括为水煮、醇沉和精制。具体为方法A(1)将松果菊水煮、浓缩，得浓缩提取液，加入极性溶剂沉淀，去沉淀并除尽溶剂，得到去蛋白的松果菊浓缩提取液；(2)向上述步骤(1)得到的松果菊浓缩提取液加入醇，沉淀，弃清液，收集松果菊多糖粗沉淀物；(3)松果菊多糖粗沉淀物经精制得到分子量3000-130000的松果菊多糖粗液。
或者方法B
(1)将松果菊水煮、浓缩，得浓缩提取液，加入醇沉淀，收集沉淀物；(2)加水溶解沉淀物，加入极性溶剂沉淀其中的蛋白，过滤去除沉淀的蛋白，并除尽极性溶剂，得到去蛋白后的浓缩提取液；(3)去蛋白后的浓缩提取液经精制得到平均分子量3000-130000的松果菊多糖粗液。
上述松果菊多糖粗液经进一步处理，得到松果菊多糖。
方法A中，松果菊的水煮包括将松果菊在蒸馏水中煎煮，经处理得提取液上清液；浓缩提取液的上清液，得到浓缩提取液。
这里的松果菊为松果菊全草，包括狭叶松果菊E.angustifolia、紫花松果菊E.purpurea或淡紫松果菊E.pallida等。
所述松果菊全草也可以是经过处理的松果菊全草，如其切段或制成粗粉，以利于更加有效地提取活性成分。
该煎煮在沸腾下进行，煎煮提取1-4次至有效成分充分提取出来，每次1-5小时。
煎煮后的处理为合并提取液、过滤、静置，取其上层清液。
煎煮过程中，加入5-20倍松果菊重量的蒸馏水。
其中，所述浓缩为浓缩提取液的上清液至原体积的1/2-1/5；浓缩可以采用现有技术中的任何方法，如加热浓缩、减压浓缩、薄膜蒸发浓缩。
本发明中，优选在50-70℃下采用薄膜蒸发进行浓缩。
然后，向浓缩提取液中加入浓缩提取液1-5倍体积的极性溶剂，使浓缩提取液中的蛋白质及其他在极性溶剂中不溶的杂质沉淀。
所述极性溶剂为能够溶解本发明松果菊多糖、且能够沉淀蛋白的极性溶剂，包括氯仿、二氯甲烷、乙醚、石油醚、乙酸乙酯、THF、正丁醇中的一种或其中至少两种的混合物。
优选采用选自氯仿、二氯甲烷与THF、正丁醇中的两种混合而成的混合溶剂，两种溶剂的体积比为2∶1-5∶1；更优选采用氯仿与正丁醇的混合溶剂，氯仿为正丁醇体积的3-5倍。
上述沉淀在搅拌下进行，充分沉淀后通过过滤或离心分离去除沉淀的蛋白，减压回收极性溶剂，至极性溶剂完全除尽；采用这种方法，可以除去松果菊中的蛋白质及其他极性溶剂中的不溶物，该沉淀的蛋白可以通过进一步提取蛋白加工再利用。
该沉淀去除蛋白和其他杂质的过程，也可以在恒温震荡器上进行。
向去除蛋白的浓缩提取液部分中加入醇，搅拌均匀以沉淀出松果菊多糖沉淀物，过滤或离心收集沉淀物。也可以先将溶液混合物静置5-30小时，倾出上层清液，再通过过滤或离心收集沉淀物。
其中醇沉所用的醇为甲醇、乙醇或丙醇；一般向去除蛋白的浓缩提取液中加入醇使得混合液的醇浓度为60-80wt％。一般醇的用量为浓缩液的1-5倍体积量，当然，本领域的技术人员可以根据不溶解的浓缩提取液部分的量适当改变醇的用量。通过醇沉，可以进一步去除蛋白和其他杂质，纯化产物。
本发明中优选采用75％-95％的乙醇沉淀去除蛋白的浓缩提取液中的蛋白和其他杂质。
其中，精制过程中，先将粗松果菊多糖沉淀物溶解在松果菊量0.5-3倍的50-85℃蒸馏水中，趁热滤除不溶物后，用层析、透析或超滤的方法分离，去除小分子杂质，得到平均分子量在3000-130000的松果菊多糖组分，优选平均分子量3万-8万的松果菊多糖组分。
本发明中优选采用透析的方法精制，得到松果菊多糖的水溶液。
上述松果菊多糖的水溶液经过干燥，得到松果菊多糖，所述干燥采用现有技术中公知的方法进行，如加热干燥、冷冻干燥、喷雾干燥等。
上述松果菊多糖、松果菊多糖水溶液或含有该松果菊多糖的药物组合物，可以采用现有技术公知的方法制成含有松果菊多糖提取物或松果菊多糖的药物组合物，以及任何一种药剂学上可接受的剂型，如颗粒剂、口服液、胶囊、片剂、注射剂、粉针等药物组合物等。
本发明中，还包括向精制后得到的松果菊多糖提取物溶液中再加入醇沉淀，弃清液，收集松果菊多糖提取物；所述醇为甲醇、乙醇或丙醇，一般醇的加入量为松果菊量的0.6-1.5倍，优选乙醇。如果需要，还可以将沉淀出的松果菊多糖经冷冻、常温或加热干燥，得到松果菊多糖提取物的粉末。
采用本发明方法得到的松果菊多糖提取物无臭，无甜味，为灰白色至淡黄色粉末，易溶于热水，不溶于乙醇，平均分子量在3万-8万之间，总糖含量为75-95％，其单糖组成为葡萄糖30-75％，果糖10％-60％，阿拉伯糖5％-20％。可以制成任何一种药剂学上所说的剂型。
本发明一个优选的实施方式包括以下步骤1)取松果菊全草，经处理后，加入松果菊药材5-20倍重量的蒸馏水煎煮，提取2-4次后，弃沉淀，合并煎煮液；过滤合并的煎煮液，静置后取其上层清液，在50-70℃下，用薄膜蒸发浓缩至原体积的1/3；2)向浓缩提取液中加入4-5倍的氯仿-正丁醇混合溶剂，混匀，弃去沉淀出的蛋白，回收溶剂；3)去除蛋白后，加入1-5倍量醇，使得混合液醇浓度为60-80wt％，搅拌均匀后，沉淀多糖，静置12-30小时后倾出上层清液，离心收集沉淀；4)向沉淀加入2-10倍量蒸馏水，加热至60-90℃使沉淀溶解，趁热过滤，滤液经流动透析，去除小分子杂质，得到平均分子量在3000-130000的松果菊多糖组分。
本发明的优选制备方法还包括搅拌下，向膜内残留液部分加醇至含醇量为80％，静置析出松果菊多糖沉淀物。
其中所述的提取为2-4次，每次提取时间为1-3小时。提取后，各次提取液合并。在实际操作时，通常的做法为水煮3次，各次提取时间分别为2小时、2小时、1小时。
步骤2)所述的提取液过滤可以使用滤布进行，滤布规格通常为100-200目。去蛋白操作时使用的氯仿-正丁醇混合液中，氯仿与正丁醇的用量为4∶1的体积比。去蛋白在搅拌下或在恒温振荡器上混匀，优选在恒温振荡器上以190r/min振摇20min。
制备过程中使用的醇可以用含醇量为75-95％的乙醇，所述的透析可以使用自来水或去离子水。
本发明的制备方法B中，可以参考制备方法A中的原料、用量及处理过程，但具体的操作工艺过程及顺序略有不同。这里仅仅介绍优选的制备步骤为(1)提取取松果菊全草，经处理后用松果菊药材5-20倍重量的蒸馏水煎煮，提取2-4次后，弃沉淀，合并煎煮液；过滤合并后的煎煮液，静置后取其上层清液，加热下薄膜蒸发浓缩至原体积的1/2-1/5；该工艺与制备方法A中相应的条件一致。薄膜蒸发的温度为50-70℃。
(2)醇沉搅拌下向松果菊浓缩提取液中加入1-5倍的醇，将松果菊浓缩提取液中的松果菊多糖沉淀出，静置、弃上清液、离心收集松果菊多糖粗沉淀物；(3)去蛋白向松果菊多糖粗沉淀物中加入0.5-5倍蒸馏水，并使其溶解，在搅拌下向其中加入1-5倍体积比为4∶1的氯仿-正丁醇的混合溶液，过滤去除沉淀出的蛋白及其他杂质，回收去除蛋白后的松果菊提取液中的有机溶剂，至除尽有机溶剂，得到去除蛋白的松果菊提取液。
(4)精制用去离子水流动透析精制，以去除无机盐及小分子物质，得到平均分子量为3-8万的松果菊多糖粗液。
上述制备方法B中，煎煮的时间、次数、醇或极性溶剂的种类及用量，以及其他工艺参数都可以参考制备方法A中公开的内容。
如果需要，可以将该松果菊多糖粗液醇沉，进一步精制。
在本发明的一个实施例中，采用下述组合物制备松果菊多糖口服液松果菊多糖10-40g蒸馏水500-1000ml蜂蜜 70-120ml防腐剂0.1-0.2g将上述组分混合均匀，过滤，装瓶，灭菌。
同样，以松果菊多糖提取物为原料，可以参考现有技术药剂学的方法，制备各种松果菊多糖提取物的药用组合物及各种剂型。
本发明的松果菊多糖建议用量一般为每日0.01-0.05g/kg体重。可以有效治疗感冒、烧伤感染、链球菌感染、金黄色葡萄球菌感染、尿道感染、上呼吸道感染、气管炎、疱疹、百日咳、白细胞减少症、类风湿性关节炎、牙疼及口腔牙龈感染和蛇伤等，还可以用于化疗的辅助治疗。
本发明采用水煮醇沉淀的方法制提取松果菊中的有效成分松果菊多糖，提取过程中，采用溶剂去除松果菊原药中的蛋白及其他杂质；醇沉淀的过程可以进一步提纯和净化，通过分离，得到纯净的一定分子量的松果菊多糖，经检测，总糖含量高，不含其他杂质，避免了由于蛋白及杂质引起的毒、副作用。由于产品纯度大大提高，服用量相对可以大大减少，药物的疗效更加明确并得到提高，且产品质量稳定、易于控制。采用本发明方法制备的松果菊多糖的毒性实验及药效实验结果如下1、毒性观察取昆明种小鼠64只，随机分组，采用服用和不服用松果菊多糖进行毒性对比实验研究，结果表明，松果菊多糖组在高达500mg/kg的剂量下，无任何毒副作用，通过对心、肝、肾、肺解剖观察均无异常，并且体重均有增加。实验结果见表1。
表1松果菊多糖的毒性实验
2、免疫实验研究取新鲜分离的小鼠脾淋巴细胞，调整浓度为1×10y/ml，取96孔细胞培养板，每孔加入细胞悬液100uL/孔，再根据实验设计加入刺激剂ConA100ul/孔和样品100ul/孔，每个样品设3个平行孔，并设有对照孔(仅加RPMT1640)，每孔总体积为200ul。然后将培养板置于5％CO2培养箱中培养48小时，取出培养板，每孔吸弃100ul，各孔加入5mg/mlMTT10ul，继续培养4小时，取出培养板，各孔加入10％SDS裂解液100ul，放置培养箱中过夜，于酶联免疫仪上测570nm处的OD值。实验结果见表2。
表2药物ug/ml OD值空白 0.06±0.04刺激剂ConA0.18±0.070.5(松果菊多糖组) 0.28±0.05*与ConA组对比，各组有显著性差异，2.5(松果菊多糖组) 0.32±0.07*P＜0.015.0(松果菊多糖组) 0.35±0.07*50(松果菊多糖组) 0.43±0.04*100(松果菊多糖组) 0.41±0.06*上述实验结果表明，本发明的松果菊多糖在各种剂量下，具有显著的免疫力。
3.抗炎作用研究将体重为18-22g的雄性小鼠随机分为5组，每组10只，分别为空白对照组，的塞米松组和松果菊多糖各剂量组。空白组灌胃0.5％的羧甲基纤维素钠水溶液，的塞米松剂量为1.5mg/kg。分别配制成0.15mg/ml，4.8mg/ml，22mg/ml，49mg/ml浓度的溶液，按0.1ml/10g的药量灌胃。每天灌胃1次，连续灌胃3天，末次给药1小时后均匀定量涂抹二甲苯于小鼠右耳，1小时后处死小鼠，剪下双耳，0.9cm的打孔器有两耳对称部位冲下圆形耳片，计算其耳重差别。实验结果见表3。
表3组别 剂量(mg/kg)动物数耳重差别(X±S)空白对照组 10 1.03±0.33的塞米松组1.5 10 0.78±0.17*多糖组1 48 10 0.63±0.38*多糖组2 220 10 0.68±0.20*多糖组3 490 10 0.60±0.43*与空白对照组相比，*P＜0.05
实验结果显示多糖各剂量组具有抗炎作用。
3.抗SARS作用研究体外实验表明，本发明的松果菊多糖对于鸡胚法培养的SARS病毒具有抑制作用。
冠状病毒基因组为RNA，通过呼吸道、黏膜或接触，病毒经受体介导吸附于敏感细胞膜或细胞膜的糖蛋白受体，通过膜融合或融膜合成细胞内吞入。冠状病毒基因组RNA进入易感细胞胞质，首先以其自身的基因组RNA作为mRNA作为早期的翻译，产生复制所需的RNA聚合酶，然后RNA聚合酶再以病毒基因组+ssRNA为模板，转录生成负链RNA，以其为模板转录生成病毒mRNA，然后经过翻译及翻译后加工包装形成子代病毒，并以出芽方式释放。临床症状的病理生理变化主要是靶细胞发生极性杀细胞感染，并进一步发展为多器官衰竭。本发明的松果菊多糖或其组合物进入人体后，吸附于敏感细胞膜或细胞膜的糖蛋白受体，抑制病毒体核酸的合成，同时，本发明的松果菊多糖具有良好的杀菌消炎作用和显著的免疫力，可以预防并有效控制SARS导致的并发症和二次感染，有利于治疗SARS的治疗水平，同时降低非典型性肺炎的急性死亡率。
具体实施例方式
实施例1取紫花松果菊全草1kg，制成粗粉，用10kg蒸馏水加热回流，提取3次，第一、第二次各提取2小时，第三次提取1小时，合并三次提取液，用200目双层滤布过滤提取液，滤液静置后取上层清液，在60℃下使用薄膜蒸发浓缩至10kg，加30L体积比为4∶1的氯仿-正丁醇的混合溶液，在恒温振荡器(TH2-82)上，以190r/min振摇20min，过滤去除沉淀出的蛋白及杂质，得到去蛋白的松果菊浓缩提取液；减压回收松果菊浓缩提取液中的有机溶剂，至除尽有机溶剂；搅拌下向松果菊浓缩提取液中加入乙醇(95％)至混合液醇浓度为80％，将松果菊浓缩提取液中的松果菊多糖沉淀出，静置24小时后，弃上层清液，离心收集松果菊多糖粗沉淀物345g。向松果菊多糖粗沉淀物中加入1升蒸馏水，加热至80℃溶解，使用滤纸趁热过滤出不溶物，滤液经去离子水流动透析精制，以去除无机盐及小分子物质，得到平均分子量为5-7万的松果菊多糖粗液。该松果菊多糖粗液可以进一步制备为各种药学上可接受的组合物及各种剂型。
如果需要，得到的松果菊多糖粗液可以进一步醇沉精制，方法为在搅拌下再加入0.8升或适量乙醇(95％)，使醇浓度为80％，静置析出沉淀，弃清液，使用冷冻干燥仪在零下20℃冷冻干燥，得松果菊多糖固体60g。
所得松果菊多糖无臭，无甜味，颜色淡黄，平均分子量为7万，总糖含量80％，其中葡萄糖为61.1％，果糖为28.9％，阿拉伯糖为9.9％。
实施例2取紫花松果菊全草5kg，切段，用25kg蒸馏水加热煮沸提取，提取5次至松果菊中的有效成分基本提尽，过滤提取液去残、合并提取液，用100目双层滤布过滤提取液，滤液静置后取上层清液，在50℃下减压浓缩至25kg，得到松果菊浓缩提取液，向其中加入25L石油醚，搅拌混合2小时，离心分离去除蛋白及其他沉淀出的杂质，减压回收有机溶剂，搅拌下向去蛋白的松果菊浓缩提取液中加入75％乙醇至混合液醇浓度为60％，静置使松果菊多糖沉淀析出，离心收集松果菊多糖粗沉淀物，弃清液。向松果菊多糖粗沉淀物中加入10L蒸馏水，加热至70℃溶解，趁热滤出不溶物，滤液经超滤精制，进一步去除盐及小分子杂质，得到分子量为(大于不行，可能非常大，是不确定的，可以根据实施例调整为一个范围)3-5万的粘稠的松果菊多糖粗液1.5kg，其总糖含量为85％，葡萄糖为71.4％，果糖为13.3％，阿拉伯糖为15.3％。
实施例3取淡紫松果菊全草1kg粉碎或直接用全草，加入20kg蒸馏水加热煮沸提取，至松果菊中的有效成分基本提尽，过滤提取液去残渣，滤液静置后取上层清液，在70℃下薄膜蒸发浓缩至得到4kg浓缩提取液，搅拌下，向浓缩提取液中加入20L二氯甲烷和乙酸乙酯体积比为3∶1的混合溶液，至蛋白及其它杂质充分沉淀出，静置10小时，过滤去除蛋白及杂质等沉淀，减压回收有机溶剂，得到去蛋白的松果菊浓缩提取液，搅拌下向去蛋白的松果菊浓缩提取液中加入75％甲醇混合液醇浓度为70％，充分搅拌后静置使松果菊多糖粗沉淀物析出，离心收集松果菊多糖粗沉淀物。向松果菊多糖粗沉淀物中加入0.5升蒸馏水，加热至60℃溶解，趁热滤出不溶物，滤液经超滤去除小分子杂质，得到分子量为6-8万的松果菊多糖粗液。在搅拌下向松果菊多糖粗液中再加入1.5升75％的乙醇，静置后析出沉淀，过滤收集沉淀、常温干燥得淡黄色无臭、无味松果菊多糖粉末200g。其总糖含量为75％，葡萄糖为36.3％，果糖为50.6％，阿拉伯糖为13.1％。
实施例4取狭叶松果菊全草1kg，参考实施例1所述的方法，提取3次，过滤、浓缩提取液，加40L乙酸乙酯，搅拌下使蛋白及其它杂质充分沉淀出，超滤得分子量为3000---30000的粘稠的松果菊多糖150g，经冷冻干燥得到无臭、无味、淡黄色松果菊多糖粉末，总糖量为92％，其中葡萄糖为44.5％，果糖为46.4％，阿拉伯糖为8.9％。
实施例5取混合松果菊全草1kg，制成粗粉，用15kg蒸馏水加热回流，提取3次，每次提取时间分别为3、2、1小时，合并三次提取液，过滤去残渣，滤液静置后取上层清液，用150目双层滤布过滤提取液，滤液静置后取上层清液，在65℃下使用薄膜蒸发浓缩至9kg，得到松果菊的浓缩提取液；搅拌下向松果菊的浓缩提取液中加入27L75％的乙醇，将松果菊浓缩提取液中的松果菊多糖沉淀出，静置24小时后，弃上层清液，离心收集松果菊多糖粗沉淀物；向松果菊多糖粗沉淀物中加入2升蒸馏水，加热至80℃溶解，然后再在搅拌下向其中加入8L体积比为4∶1的氯仿-正丁醇的混合溶液，在恒温振荡器(TH2-82)上，以150r/min的速度振摇30min，过滤去除沉淀出的蛋白及其他杂质，得到去蛋白的松果菊提取液；减压回收去蛋白的松果菊提取液中的有机溶剂，至除尽有机溶剂；最后用去离子水流动透析精制，以去除无机盐及小分子物质，得到平均分子量为3.5-7.1万的松果菊多糖粗液。该松果菊多糖粗液可以进一步制备为各种药学上可接受的组合物及各种剂型。
如果需要，得到的松果菊多糖粗液可以进一步醇沉精制，方法为在搅拌下再加入0.8升或适量乙醇(95％)，使醇浓度为80％，静置析出沉淀，弃清液，沉淀经干燥得松果菊多糖固体100g。
所得松果菊多糖无臭，无甜味，颜色淡黄，平均分子量为7.3万，总糖含量86％，其中葡萄糖为57.1％，果糖为23.5％，阿拉伯糖为19.3％。
实施例6取松果菊多糖1000g，粉碎，过筛，装胶囊，即得胶囊剂。
实施例7取松果菊多糖250g，加水200ml，加热至溶，成稠浸膏，加入蔗糖750g，制粒，干燥，分装，即得颗粒剂。
实施例8取松果菊多糖1000g，加入注射用水1500ml，溶解，过滤，滤液灌装，即得口服液。
实施例9取松果菊多糖1000g，粉碎，加入10g硬脂酸镁，混合，压片，包薄膜衣，干燥，即得片剂。
实施例10取松果菊多糖500g，加入注射用水1000ml，70℃加热溶解，加入10g活性碳，保温30分钟，过滤，灌装，100℃流通蒸汽灭菌15分钟，即得注射剂。
实验例本发明松果菊多糖测定方法如下1.本发明实施例1-5的松果菊多糖1ml浓度10％的溶液，加苯酚-硫酸试剂呈桔红色，加蒽醌试剂呈蓝绿色，说明制备得到的为多糖。
2.稳定性实验采用留样观察法，将浓度为10％，50％，80％的样品分别贮藏于3-5℃、20-25℃、33-37℃的恒温箱中，隔月取样观察，1年内外观色泽无变化，无沉淀物。
3.总糖量的测定方法精密称取D-葡萄糖0.20g于250ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，为标准品溶液。精密吸取标准品溶液0.5、1、2、3、4、5ml，加蒸馏水稀释至25ml，得不同浓度的标准品溶液。精密吸取标准品溶液2ml，加5％的苯酚水溶液1ml，缓缓加入浓硫酸5ml，摇匀，放冷至室温，以1ml 5％的苯酚水溶液为空白，在490nm下测定吸收度，绘制标准曲线。然后取多糖样品，按标准液配制的方法配制成样品液，同法操作，测定吸收度，从标准曲线计算其总糖含量。
权利要求
1.一种松果菊多糖，由松果菊原料提取得到，其特征在于所述的多糖中，总糖含量为75-95％，平均分子量为3000-130000，其总糖中单糖的组成为葡萄糖30-75％，果糖10％-60％，阿拉伯糖5％-20％；优选分子量为3-8万。
2.含有权利要求1所述松果菊多糖的药物组合物，其特征在于所述的松果菊多糖辅以药学上可接受的辅料，成为任何一种药剂学上所说的剂型，其中松果菊多糖的含量为0.05-90wt％；所述的组合物还包括至少一种选自抗病毒、抗菌或免疫制剂等药物，包括但不限于青霉素及其衍生物、先锋霉素及其衍生物、红霉素及其衍生物、抗菌中草药提取物、利巴韦林、阿糖腺苷、阿昔洛韦、伐昔洛韦、更昔洛韦、曲氟尿苷、索立夫定、拉米夫定、膦甲酸、吗啉胍、金刚烷胺等。
3.一种松果菊多糖的制备方法，包括将松果菊水煮、醇沉、精制，其特征在于方法A(1)将松果菊水煮、浓缩，得浓缩提取液，加入极性溶剂沉淀，去沉淀并除尽溶剂，得到去蛋白的松果菊浓缩提取液；(2)向上述步骤(1)得到的松果菊浓缩提取液加入醇，沉淀，弃清液，收集松果菊多糖粗沉淀物(3)松果菊多糖粗沉淀物经精制得到分子量3000-130000的松果菊多糖粗液。或者方法B(1)将松果菊水煮、浓缩，得浓缩提取液，加入醇沉淀，收集沉淀物；(2)加水溶解沉淀物，加入极性溶剂沉淀其中的蛋白，过滤去除沉淀的蛋白，并除尽极性溶剂，得到去蛋白后的浓缩提取液；(3)去蛋白后的浓缩提取液经精制得到平均分子量3000-130000的松果菊多糖粗液。上述松果菊多糖粗液经进一步处理，得到松果菊多糖。
4.根据权利要求3所述的松果菊多糖的制备方法，其特征在于所述的松果菊的水煮包括将松果菊在蒸馏水中煎煮；经处理得提取液上清液；浓缩提取液的上清液，得到浓缩提取液；所述的松果菊为松果菊全草、经过处理的松果菊全草；如切段或制成粗粉；所述的煎煮在沸腾下进行，煎煮提取1-4次至有效成分充分提取出来，每次1-5小时；煎煮后的处理为合并提取液、过滤、静置，取其上层清液；煎煮过程中，加入5-20倍松果菊重量的蒸馏水；所述的进一步处理为干燥松果菊多糖粗液，得到松果菊多糖，所述干燥采用现有技术中公知的方法进行，如加热干燥、冷冻干燥、喷雾干燥等。
5.根据权利要求3或4所述的松果菊多糖的制备方法，其特征在于所述浓缩为浓缩提取液的上清液至原体积的1/2-1/5；浓缩可以采用现有技术中的任何方法，如加热浓缩、减压浓缩、薄膜蒸发浓缩；优选在50-70℃下采用薄膜蒸发进行浓缩；浓缩后，向浓缩提取液中加入浓缩提取液1-5倍体积的极性溶剂，使浓缩提取液中的蛋白质及其他在极性溶剂中不溶的杂质沉淀；所述沉淀在搅拌下进行，充分沉淀后通过过滤或离心分离去除沉淀的蛋白，减压回收极性溶剂，至极性溶剂完全除尽；该沉淀去除蛋白和其他杂质的过程，也可以在恒温震荡器上进行。
6.根据权利要求3、4或5所述的松果菊多糖的制备方法，其特征在于所述极性溶剂为能够溶解本发明松果菊多糖、且能够沉淀蛋白的极性溶剂，包括氯仿、二氯甲烷、乙醚、石油醚、乙酸乙酯、THF、正丁醇中的一种或其中至少两种的混合物；优选采用选自氯仿、二氯甲烷与THF、正丁醇中的两种混合而成的混合溶剂，两种溶剂的体积比为2∶1-5∶1；更优选采用氟仿与正丁醇的混合溶剂，氯仿为正丁醇体积的3-5倍；所述的方法A中的步骤(2)的醇沉为向去除蛋白的浓缩提取液部分中加入醇，搅拌均匀，过滤或离心收集沉淀物；也可以先将溶液混合物静置5-30小时，倾出上层清液，再通过过滤或离心收集沉淀物；其中所用的醇为甲醇、乙醇或丙醇；加入醇使得混合液的醇浓度为60-80wt％；醇的用量为浓缩液的1-5倍体积量；优选采用75％-95％的乙醇；所述的精制过程中，先将粗松果菊多糖沉淀物溶解在松果菊量0.5-3倍的50-85℃蒸馏水中，趁热滤除不溶物后，用层析、透析或超滤的方法分离，去除小分子杂质，得到平均分子量在3000-130000的松果菊多糖组分，优选平均分子量3万-8万的松果菊多糖组分；优选采用透析的方法精制；所述的述松果菊多糖、松果菊多糖水溶液或含有该松果菊多糖的药物组合物，可以采用现有技术公知的方法制成含有松果菊多糖提取物或松果菊多糖的药物组合物，以及任何一种药剂学上可接受的剂型，如颗粒剂、口服液、胶囊、片剂、注射剂、粉针等药物组合物。
7.根据权利要求3、4、5或6所述的松果菊多糖的制备方法，其特征在于优选的制备方法包括以下步骤1)取松果菊全草，经处理后，加入松果菊药材5-20倍重量的蒸馏水煎煮，提取2-4次后，弃沉淀，合并煎煮液；过滤合并的煎煮液，静置后取其上层清液，在50-70℃下，用薄膜蒸发浓缩至原体积的1/3；2)向浓缩提取液中加入4-5倍的氯仿-正丁醇混合溶剂，混匀，弃去沉淀出的蛋白，回收溶剂；3)去除蛋白后，加入1-5倍量醇，使得混合液醇浓度为60-80wt％，搅拌均匀后，沉淀多糖，静置12-30小时后倾出上层清液，离心收集沉淀；4)向沉淀加入2-10倍量蒸馏水，加热至60-90℃使沉淀溶解，趁热过滤，滤液经流动透析，去除小分子杂质，得到平均分子量在3000-130000的松果菊多糖组分。
8.根据权利要求3、4、5、6或7所述的松果菊多糖的制备方法，其特征在于所述的制备方法还包括搅拌下，向膜内残留液部分加醇至含醇量为80％，静置析出松果菊多糖沉淀物；其中所述的提取为2-4次，每次提取时间为1-3小时；提取后，各次提取液合并；优选的做法为水煮3次，各次提取时间分别为2小时、2小时、1小时；所述的提取液过滤可以使用滤布进行，滤布规格为100-200目；使用的氯仿-正丁醇混合液中，氯仿与正丁醇的用量为4∶1的体积比；去蛋白在搅拌下或在恒温振荡器上混匀，优选在恒温振荡器上以190r/min振摇20min；制备过程中使用的醇为含醇量为75-95％的乙醇；所述的透析使用自来水或去离子水；所述的进一步处理还包括向精制后得到的松果菊多糖提取物溶液中再加入醇沉淀，弃清液，收集松果菊多糖提取物；所述醇为甲醇、乙醇或丙醇，醇的加入量为松果菊量的0.6-1.5倍，优选乙醇；还可以将沉淀出的松果菊多糖经冷冻、常温或加热干燥，得到松果菊多糖提取物的粉末。
9.根据权利要求3、4、5、6、7或8所述的松果菊多糖的制备方法，其特征在于所述的制备方法B可以参考制备方法A中的原料、用量及处理过程；制备方法B中煎煮的时间、次数、醇、极性溶剂的种类及用量，以及其他工艺参数可以参考制备方法A。优选的方法B为(1)提取取松果菊全草，经处理后用松果菊药材5-20倍重量的蒸馏水煎煮，提取2-4次后，弃沉淀，合并煎煮液；过滤合并后的煎煮液，静置后取其上层清液，加热下薄膜蒸发浓缩至原体积的1/2-1/5；该工艺与制备方法A中相应的条件一致；薄膜蒸发的温度为50-70℃；(2)醇沉搅拌下向松果菊浓缩提取液中加入1-5倍的醇，将松果菊浓缩提取液中的松果菊多糖沉淀出，静置、弃上清液、离心收集松果菊多糖粗沉淀物；(3)去蛋白向松果菊多糖粗沉淀物中加入0.5-5倍蒸馏水，并使其溶解，在搅拌下向其中加入1-5倍体积比为4∶1的氯仿-正丁醇的混合溶液，过滤去除沉淀出的蛋白及其他杂质，回收去除蛋白后的松果菊提取液中的有机溶剂，至除尽有机溶剂，得到去除蛋白的松果菊提取液；(4)精制用去离子水流动透析精制，以去除无机盐及小分子物质，得到平均分子量为3-8万的松果菊多糖粗液。
10.权利要求1或2所述的松果菊多糖及含有松果菊多糖的药物制剂在制备治疗各种炎症、促进免疫功能、抗病毒及抗菌，特别是抗SARS药物上的用途。
全文摘要
本发明公开了一种松果菊多糖、其制备方法、含有松果菊多糖的药物制剂及其在制备治疗各种炎症、促进免疫功能、抗病毒及抗菌，特别是抗SARS药物上的用途，其由松果菊原料经提取得到的，总糖含量为75－95％，平均分子量在3万－8万之间，其总糖中单糖的组成为葡萄糖30－75％，果糖10％－60％，阿拉伯糖5％－20％。其制备方法包括将松果菊水煮、醇沉，用极性溶剂溶解松果菊水煮后的浓缩提取液，以去除其中的蛋白和其他杂质；除极性溶剂后，用醇沉淀，收集沉淀物；沉淀物经分离得到分子量为3000－130000的松果菊多糖；经进一步处理，可以得到松果菊多糖粉末。本发明的松果菊多糖不含其他杂质，以多糖直接入药，服用量大大减少，疗效明确，无毒副作用；产品质量稳定、易于控制。
文档编号A61K31/715GK1580077SQ0315323
公开日2005年2月16日 申请日期2003年8月8日 优先权日2003年8月8日
发明者李继仁 申请人:吉林威威药业股份有限公司
技术领域：
本发明涉及一种松果菊多糖、其制备方法、含有松果菊多糖的药物制剂及其用途，具体地说，本发明涉及由松果菊提取的松果菊多糖、其制备方法、含有松果菊多糖的药物制剂及其在制备治疗各种炎症、促进免疫功能、抗病毒及抗菌，特别是抗SARS药物上的用途，属于药物领域。
背景技术：
松果菊是菊科Compositae松果菊属Echinacea植物，分布在北美洲，该属植物约有9种，主要药用种是狭叶松果菊E.angustifolia，紫花松果菊E.purpurea和淡紫松果菊E.pallida。
松果菊是国外尤其是欧洲广泛用来治疗各种炎症和促进免疫功能的植物药，其药理作用包括对免疫系统的增强作用、抗炎、抗病毒及抗菌作用等，治疗用途十分广泛，疗效得到了越来越多的临床医生的肯定。
从松果菊的汁液制成的制剂，经体外及动物实验表明，能够增加粒细胞和巨噬细胞的活性。松果菊中所含的烷基酰胺类，链烯酮，菊苣酸能够增强粒细胞的吞噬作用。多糖类可增强巨噬细胞的吞噬作用。1985年，Stuppner在体外实验中发现不同浓度的冷冻干燥的紫花松果菊的汁液(103～105mg·mL-1)，均表现出明显的吞噬作用增强活性，但在更高浓度时，表现为免疫抑制和细胞毒性。
文献报道松果菊醇提物刺激巨噬细胞产生大量免疫增效因子，如肿瘤坏死因子，干扰素，白介素I，II，VI，X。
透明质酸酶是微生物分泌的，可分解透明质酸，使组织通透性增加，更易于毒性产物向周围组织扩散。咖啡酸衍生物能抑制透明质酸酶，保持结缔组织及其胞间基质的结构和完整性。J Jakupovic，R X Tan，F Bohlmann在Pharmacol Res Commun，1988，20(Suppl，5)87中报道了松果菊能够抑制水肿，减少炎症细胞浸润。烷基酰胺能抑制环加氧酶，阻断前列腺素的合成，有减轻疼痛，发热和炎症的作用。
松果菊地上部分新鲜压汁和根水提取物表现出抗病毒活性，在细胞培养中受到抑制的病毒有流感病毒、疱疹病毒等。其作用机理与免疫刺激及抗透明质酸酶有关。松果菊直接抗菌活性非常温和。但松果菊被有效地用于内部和外部细菌感染有着悠久的历史。其临床抗菌效果、作用机制可能是由于其免疫刺激活性。
现有技术中，松果菊制剂主要为原生药直接药用或由松果菊原料经醇和极性溶剂粗提而得到脂溶部分。据李继仁等人在《中国中药杂志》27(5)中报道，松果菊提取物中主要成分为不饱和脂肪酰胺、不饱和酮、咖啡酸衍生物、倍半萜类、生物碱类及其他化学成分组成的混合物，以及C10-33的烷烃、多炔类、植物甾醇、黄酮类和多糖类。其中主要为不饱和酰胺类，苯乙醇苷类和多糖，但前二者含量较少，且极易氧化变质。
现有技术中还公开了含有松果菊的药用组合物，如中国专利申请97195836和WO/11778。
到目前为止，还没松果菊的单体或化学有效成分直接用做药物以治疗的报道。以松果菊提取多糖并直接作为药用，更是在国内外均未见报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种松果菊多糖，是从松果菊中提取的主要活性多糖成分，以多糖直接入药，无毒副作用，服用量大大减少，药物的疗效明确，适用范围广。
本发明的另一目的在于提供一种松果菊多糖药物组合物，该药物组合物含有松果菊的提取物--松果菊多糖，以及药学上可接受的其他辅料、各种药物剂型的安全、价廉、有效的药物组合物。
本发明的再一目的在于提供上述松果菊多糖、松果菊多糖药物组合物的制备方法，该方法简单、有效、适于工业化生产，产品质量稳定、易于控制。
本发明还有一目的在于提供松果菊多糖提取物、松果菊多糖药物在制备治疗免疫系统疾病、消炎、抗病毒及抗菌药物上的用途。
此外，本发明还提供了松果菊多糖在制备治疗各种炎症、促进免疫功能、抗病毒及抗菌，特别是抗SARS药物上的用途。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案为一种松果菊多糖，是松果菊原料经提取得到的，其总糖含量为75-95wt％，平均分子量在3000-130000之间。
优选总糖含量为75-85wt％。
其总糖中单糖的组成及含量为葡萄糖30-75wt％，果糖10％-60wt％，阿拉伯糖5％-20wt％。优选平均分子量为3-8万之间。
本发明的松果菊多糖无臭、无甜味，其固体为灰白色至淡黄色粉末，易溶于热水，不溶于乙醇。
所述松果菊多糖药物组合物含有本发明松果菊多糖和药学上可接受的辅料。
在松果菊多糖药物组合物中，松果菊多糖的含量为0.05-90wt％。
所述松果菊多糖药物组合物还包括至少一种选自抗病毒、抗菌或免疫制剂等药物。包括但不限于青霉素及其衍生物、先锋霉素及其衍生物、红霉素及其衍生物、抗菌中草药提取物、利巴韦林、阿糖腺苷、阿昔洛韦、伐昔洛韦、更昔洛韦、曲氟尿苷、索立夫定、拉米夫定、膦甲酸、吗啉胍、金刚烷胺等。
本发明松果菊多糖的制备方法包括为水煮、醇沉和精制。具体为方法A(1)将松果菊水煮、浓缩，得浓缩提取液，加入极性溶剂沉淀，去沉淀并除尽溶剂，得到去蛋白的松果菊浓缩提取液；(2)向上述步骤(1)得到的松果菊浓缩提取液加入醇，沉淀，弃清液，收集松果菊多糖粗沉淀物；(3)松果菊多糖粗沉淀物经精制得到分子量3000-130000的松果菊多糖粗液。
或者方法B
(1)将松果菊水煮、浓缩，得浓缩提取液，加入醇沉淀，收集沉淀物；(2)加水溶解沉淀物，加入极性溶剂沉淀其中的蛋白，过滤去除沉淀的蛋白，并除尽极性溶剂，得到去蛋白后的浓缩提取液；(3)去蛋白后的浓缩提取液经精制得到平均分子量3000-130000的松果菊多糖粗液。
上述松果菊多糖粗液经进一步处理，得到松果菊多糖。
方法A中，松果菊的水煮包括将松果菊在蒸馏水中煎煮，经处理得提取液上清液；浓缩提取液的上清液，得到浓缩提取液。
这里的松果菊为松果菊全草，包括狭叶松果菊E.angustifolia、紫花松果菊E.purpurea或淡紫松果菊E.pallida等。
所述松果菊全草也可以是经过处理的松果菊全草，如其切段或制成粗粉，以利于更加有效地提取活性成分。
该煎煮在沸腾下进行，煎煮提取1-4次至有效成分充分提取出来，每次1-5小时。
煎煮后的处理为合并提取液、过滤、静置，取其上层清液。
煎煮过程中，加入5-20倍松果菊重量的蒸馏水。
其中，所述浓缩为浓缩提取液的上清液至原体积的1/2-1/5；浓缩可以采用现有技术中的任何方法，如加热浓缩、减压浓缩、薄膜蒸发浓缩。
本发明中，优选在50-70℃下采用薄膜蒸发进行浓缩。
然后，向浓缩提取液中加入浓缩提取液1-5倍体积的极性溶剂，使浓缩提取液中的蛋白质及其他在极性溶剂中不溶的杂质沉淀。
所述极性溶剂为能够溶解本发明松果菊多糖、且能够沉淀蛋白的极性溶剂，包括氯仿、二氯甲烷、乙醚、石油醚、乙酸乙酯、THF、正丁醇中的一种或其中至少两种的混合物。
优选采用选自氯仿、二氯甲烷与THF、正丁醇中的两种混合而成的混合溶剂，两种溶剂的体积比为2∶1-5∶1；更优选采用氯仿与正丁醇的混合溶剂，氯仿为正丁醇体积的3-5倍。
上述沉淀在搅拌下进行，充分沉淀后通过过滤或离心分离去除沉淀的蛋白，减压回收极性溶剂，至极性溶剂完全除尽；采用这种方法，可以除去松果菊中的蛋白质及其他极性溶剂中的不溶物，该沉淀的蛋白可以通过进一步提取蛋白加工再利用。
该沉淀去除蛋白和其他杂质的过程，也可以在恒温震荡器上进行。
向去除蛋白的浓缩提取液部分中加入醇，搅拌均匀以沉淀出松果菊多糖沉淀物，过滤或离心收集沉淀物。也可以先将溶液混合物静置5-30小时，倾出上层清液，再通过过滤或离心收集沉淀物。
其中醇沉所用的醇为甲醇、乙醇或丙醇；一般向去除蛋白的浓缩提取液中加入醇使得混合液的醇浓度为60-80wt％。一般醇的用量为浓缩液的1-5倍体积量，当然，本领域的技术人员可以根据不溶解的浓缩提取液部分的量适当改变醇的用量。通过醇沉，可以进一步去除蛋白和其他杂质，纯化产物。
本发明中优选采用75％-95％的乙醇沉淀去除蛋白的浓缩提取液中的蛋白和其他杂质。
其中，精制过程中，先将粗松果菊多糖沉淀物溶解在松果菊量0.5-3倍的50-85℃蒸馏水中，趁热滤除不溶物后，用层析、透析或超滤的方法分离，去除小分子杂质，得到平均分子量在3000-130000的松果菊多糖组分，优选平均分子量3万-8万的松果菊多糖组分。
本发明中优选采用透析的方法精制，得到松果菊多糖的水溶液。
上述松果菊多糖的水溶液经过干燥，得到松果菊多糖，所述干燥采用现有技术中公知的方法进行，如加热干燥、冷冻干燥、喷雾干燥等。
上述松果菊多糖、松果菊多糖水溶液或含有该松果菊多糖的药物组合物，可以采用现有技术公知的方法制成含有松果菊多糖提取物或松果菊多糖的药物组合物，以及任何一种药剂学上可接受的剂型，如颗粒剂、口服液、胶囊、片剂、注射剂、粉针等药物组合物等。
本发明中，还包括向精制后得到的松果菊多糖提取物溶液中再加入醇沉淀，弃清液，收集松果菊多糖提取物；所述醇为甲醇、乙醇或丙醇，一般醇的加入量为松果菊量的0.6-1.5倍，优选乙醇。如果需要，还可以将沉淀出的松果菊多糖经冷冻、常温或加热干燥，得到松果菊多糖提取物的粉末。
采用本发明方法得到的松果菊多糖提取物无臭，无甜味，为灰白色至淡黄色粉末，易溶于热水，不溶于乙醇，平均分子量在3万-8万之间，总糖含量为75-95％，其单糖组成为葡萄糖30-75％，果糖10％-60％，阿拉伯糖5％-20％。可以制成任何一种药剂学上所说的剂型。
本发明一个优选的实施方式包括以下步骤1)取松果菊全草，经处理后，加入松果菊药材5-20倍重量的蒸馏水煎煮，提取2-4次后，弃沉淀，合并煎煮液；过滤合并的煎煮液，静置后取其上层清液，在50-70℃下，用薄膜蒸发浓缩至原体积的1/3；2)向浓缩提取液中加入4-5倍的氯仿-正丁醇混合溶剂，混匀，弃去沉淀出的蛋白，回收溶剂；3)去除蛋白后，加入1-5倍量醇，使得混合液醇浓度为60-80wt％，搅拌均匀后，沉淀多糖，静置12-30小时后倾出上层清液，离心收集沉淀；4)向沉淀加入2-10倍量蒸馏水，加热至60-90℃使沉淀溶解，趁热过滤，滤液经流动透析，去除小分子杂质，得到平均分子量在3000-130000的松果菊多糖组分。
本发明的优选制备方法还包括搅拌下，向膜内残留液部分加醇至含醇量为80％，静置析出松果菊多糖沉淀物。
其中所述的提取为2-4次，每次提取时间为1-3小时。提取后，各次提取液合并。在实际操作时，通常的做法为水煮3次，各次提取时间分别为2小时、2小时、1小时。
步骤2)所述的提取液过滤可以使用滤布进行，滤布规格通常为100-200目。去蛋白操作时使用的氯仿-正丁醇混合液中，氯仿与正丁醇的用量为4∶1的体积比。去蛋白在搅拌下或在恒温振荡器上混匀，优选在恒温振荡器上以190r/min振摇20min。
制备过程中使用的醇可以用含醇量为75-95％的乙醇，所述的透析可以使用自来水或去离子水。
本发明的制备方法B中，可以参考制备方法A中的原料、用量及处理过程，但具体的操作工艺过程及顺序略有不同。这里仅仅介绍优选的制备步骤为(1)提取取松果菊全草，经处理后用松果菊药材5-20倍重量的蒸馏水煎煮，提取2-4次后，弃沉淀，合并煎煮液；过滤合并后的煎煮液，静置后取其上层清液，加热下薄膜蒸发浓缩至原体积的1/2-1/5；该工艺与制备方法A中相应的条件一致。薄膜蒸发的温度为50-70℃。
(2)醇沉搅拌下向松果菊浓缩提取液中加入1-5倍的醇，将松果菊浓缩提取液中的松果菊多糖沉淀出，静置、弃上清液、离心收集松果菊多糖粗沉淀物；(3)去蛋白向松果菊多糖粗沉淀物中加入0.5-5倍蒸馏水，并使其溶解，在搅拌下向其中加入1-5倍体积比为4∶1的氯仿-正丁醇的混合溶液，过滤去除沉淀出的蛋白及其他杂质，回收去除蛋白后的松果菊提取液中的有机溶剂，至除尽有机溶剂，得到去除蛋白的松果菊提取液。
(4)精制用去离子水流动透析精制，以去除无机盐及小分子物质，得到平均分子量为3-8万的松果菊多糖粗液。
上述制备方法B中，煎煮的时间、次数、醇或极性溶剂的种类及用量，以及其他工艺参数都可以参考制备方法A中公开的内容。
如果需要，可以将该松果菊多糖粗液醇沉，进一步精制。
在本发明的一个实施例中，采用下述组合物制备松果菊多糖口服液松果菊多糖10-40g蒸馏水500-1000ml蜂蜜 70-120ml防腐剂0.1-0.2g将上述组分混合均匀，过滤，装瓶，灭菌。
同样，以松果菊多糖提取物为原料，可以参考现有技术药剂学的方法，制备各种松果菊多糖提取物的药用组合物及各种剂型。
本发明的松果菊多糖建议用量一般为每日0.01-0.05g/kg体重。可以有效治疗感冒、烧伤感染、链球菌感染、金黄色葡萄球菌感染、尿道感染、上呼吸道感染、气管炎、疱疹、百日咳、白细胞减少症、类风湿性关节炎、牙疼及口腔牙龈感染和蛇伤等，还可以用于化疗的辅助治疗。
本发明采用水煮醇沉淀的方法制提取松果菊中的有效成分松果菊多糖，提取过程中，采用溶剂去除松果菊原药中的蛋白及其他杂质；醇沉淀的过程可以进一步提纯和净化，通过分离，得到纯净的一定分子量的松果菊多糖，经检测，总糖含量高，不含其他杂质，避免了由于蛋白及杂质引起的毒、副作用。由于产品纯度大大提高，服用量相对可以大大减少，药物的疗效更加明确并得到提高，且产品质量稳定、易于控制。采用本发明方法制备的松果菊多糖的毒性实验及药效实验结果如下1、毒性观察取昆明种小鼠64只，随机分组，采用服用和不服用松果菊多糖进行毒性对比实验研究，结果表明，松果菊多糖组在高达500mg/kg的剂量下，无任何毒副作用，通过对心、肝、肾、肺解剖观察均无异常，并且体重均有增加。实验结果见表1。
表1松果菊多糖的毒性实验
2、免疫实验研究取新鲜分离的小鼠脾淋巴细胞，调整浓度为1×10y/ml，取96孔细胞培养板，每孔加入细胞悬液100uL/孔，再根据实验设计加入刺激剂ConA100ul/孔和样品100ul/孔，每个样品设3个平行孔，并设有对照孔(仅加RPMT1640)，每孔总体积为200ul。然后将培养板置于5％CO2培养箱中培养48小时，取出培养板，每孔吸弃100ul，各孔加入5mg/mlMTT10ul，继续培养4小时，取出培养板，各孔加入10％SDS裂解液100ul，放置培养箱中过夜，于酶联免疫仪上测570nm处的OD值。实验结果见表2。
表2药物ug/ml OD值空白 0.06±0.04刺激剂ConA0.18±0.070.5(松果菊多糖组) 0.28±0.05*与ConA组对比，各组有显著性差异，2.5(松果菊多糖组) 0.32±0.07*P＜0.015.0(松果菊多糖组) 0.35±0.07*50(松果菊多糖组) 0.43±0.04*100(松果菊多糖组) 0.41±0.06*上述实验结果表明，本发明的松果菊多糖在各种剂量下，具有显著的免疫力。
3.抗炎作用研究将体重为18-22g的雄性小鼠随机分为5组，每组10只，分别为空白对照组，的塞米松组和松果菊多糖各剂量组。空白组灌胃0.5％的羧甲基纤维素钠水溶液，的塞米松剂量为1.5mg/kg。分别配制成0.15mg/ml，4.8mg/ml，22mg/ml，49mg/ml浓度的溶液，按0.1ml/10g的药量灌胃。每天灌胃1次，连续灌胃3天，末次给药1小时后均匀定量涂抹二甲苯于小鼠右耳，1小时后处死小鼠，剪下双耳，0.9cm的打孔器有两耳对称部位冲下圆形耳片，计算其耳重差别。实验结果见表3。
表3组别 剂量(mg/kg)动物数耳重差别(X±S)空白对照组 10 1.03±0.33的塞米松组1.5 10 0.78±0.17*多糖组1 48 10 0.63±0.38*多糖组2 220 10 0.68±0.20*多糖组3 490 10 0.60±0.43*与空白对照组相比，*P＜0.05
实验结果显示多糖各剂量组具有抗炎作用。
3.抗SARS作用研究体外实验表明，本发明的松果菊多糖对于鸡胚法培养的SARS病毒具有抑制作用。
冠状病毒基因组为RNA，通过呼吸道、黏膜或接触，病毒经受体介导吸附于敏感细胞膜或细胞膜的糖蛋白受体，通过膜融合或融膜合成细胞内吞入。冠状病毒基因组RNA进入易感细胞胞质，首先以其自身的基因组RNA作为mRNA作为早期的翻译，产生复制所需的RNA聚合酶，然后RNA聚合酶再以病毒基因组+ssRNA为模板，转录生成负链RNA，以其为模板转录生成病毒mRNA，然后经过翻译及翻译后加工包装形成子代病毒，并以出芽方式释放。临床症状的病理生理变化主要是靶细胞发生极性杀细胞感染，并进一步发展为多器官衰竭。本发明的松果菊多糖或其组合物进入人体后，吸附于敏感细胞膜或细胞膜的糖蛋白受体，抑制病毒体核酸的合成，同时，本发明的松果菊多糖具有良好的杀菌消炎作用和显著的免疫力，可以预防并有效控制SARS导致的并发症和二次感染，有利于治疗SARS的治疗水平，同时降低非典型性肺炎的急性死亡率。
具体实施例方式
实施例1取紫花松果菊全草1kg，制成粗粉，用10kg蒸馏水加热回流，提取3次，第一、第二次各提取2小时，第三次提取1小时，合并三次提取液，用200目双层滤布过滤提取液，滤液静置后取上层清液，在60℃下使用薄膜蒸发浓缩至10kg，加30L体积比为4∶1的氯仿-正丁醇的混合溶液，在恒温振荡器(TH2-82)上，以190r/min振摇20min，过滤去除沉淀出的蛋白及杂质，得到去蛋白的松果菊浓缩提取液；减压回收松果菊浓缩提取液中的有机溶剂，至除尽有机溶剂；搅拌下向松果菊浓缩提取液中加入乙醇(95％)至混合液醇浓度为80％，将松果菊浓缩提取液中的松果菊多糖沉淀出，静置24小时后，弃上层清液，离心收集松果菊多糖粗沉淀物345g。向松果菊多糖粗沉淀物中加入1升蒸馏水，加热至80℃溶解，使用滤纸趁热过滤出不溶物，滤液经去离子水流动透析精制，以去除无机盐及小分子物质，得到平均分子量为5-7万的松果菊多糖粗液。该松果菊多糖粗液可以进一步制备为各种药学上可接受的组合物及各种剂型。
如果需要，得到的松果菊多糖粗液可以进一步醇沉精制，方法为在搅拌下再加入0.8升或适量乙醇(95％)，使醇浓度为80％，静置析出沉淀，弃清液，使用冷冻干燥仪在零下20℃冷冻干燥，得松果菊多糖固体60g。
所得松果菊多糖无臭，无甜味，颜色淡黄，平均分子量为7万，总糖含量80％，其中葡萄糖为61.1％，果糖为28.9％，阿拉伯糖为9.9％。
实施例2取紫花松果菊全草5kg，切段，用25kg蒸馏水加热煮沸提取，提取5次至松果菊中的有效成分基本提尽，过滤提取液去残、合并提取液，用100目双层滤布过滤提取液，滤液静置后取上层清液，在50℃下减压浓缩至25kg，得到松果菊浓缩提取液，向其中加入25L石油醚，搅拌混合2小时，离心分离去除蛋白及其他沉淀出的杂质，减压回收有机溶剂，搅拌下向去蛋白的松果菊浓缩提取液中加入75％乙醇至混合液醇浓度为60％，静置使松果菊多糖沉淀析出，离心收集松果菊多糖粗沉淀物，弃清液。向松果菊多糖粗沉淀物中加入10L蒸馏水，加热至70℃溶解，趁热滤出不溶物，滤液经超滤精制，进一步去除盐及小分子杂质，得到分子量为(大于不行，可能非常大，是不确定的，可以根据实施例调整为一个范围)3-5万的粘稠的松果菊多糖粗液1.5kg，其总糖含量为85％，葡萄糖为71.4％，果糖为13.3％，阿拉伯糖为15.3％。
实施例3取淡紫松果菊全草1kg粉碎或直接用全草，加入20kg蒸馏水加热煮沸提取，至松果菊中的有效成分基本提尽，过滤提取液去残渣，滤液静置后取上层清液，在70℃下薄膜蒸发浓缩至得到4kg浓缩提取液，搅拌下，向浓缩提取液中加入20L二氯甲烷和乙酸乙酯体积比为3∶1的混合溶液，至蛋白及其它杂质充分沉淀出，静置10小时，过滤去除蛋白及杂质等沉淀，减压回收有机溶剂，得到去蛋白的松果菊浓缩提取液，搅拌下向去蛋白的松果菊浓缩提取液中加入75％甲醇混合液醇浓度为70％，充分搅拌后静置使松果菊多糖粗沉淀物析出，离心收集松果菊多糖粗沉淀物。向松果菊多糖粗沉淀物中加入0.5升蒸馏水，加热至60℃溶解，趁热滤出不溶物，滤液经超滤去除小分子杂质，得到分子量为6-8万的松果菊多糖粗液。在搅拌下向松果菊多糖粗液中再加入1.5升75％的乙醇，静置后析出沉淀，过滤收集沉淀、常温干燥得淡黄色无臭、无味松果菊多糖粉末200g。其总糖含量为75％，葡萄糖为36.3％，果糖为50.6％，阿拉伯糖为13.1％。
实施例4取狭叶松果菊全草1kg，参考实施例1所述的方法，提取3次，过滤、浓缩提取液，加40L乙酸乙酯，搅拌下使蛋白及其它杂质充分沉淀出，超滤得分子量为3000---30000的粘稠的松果菊多糖150g，经冷冻干燥得到无臭、无味、淡黄色松果菊多糖粉末，总糖量为92％，其中葡萄糖为44.5％，果糖为46.4％，阿拉伯糖为8.9％。
实施例5取混合松果菊全草1kg，制成粗粉，用15kg蒸馏水加热回流，提取3次，每次提取时间分别为3、2、1小时，合并三次提取液，过滤去残渣，滤液静置后取上层清液，用150目双层滤布过滤提取液，滤液静置后取上层清液，在65℃下使用薄膜蒸发浓缩至9kg，得到松果菊的浓缩提取液；搅拌下向松果菊的浓缩提取液中加入27L75％的乙醇，将松果菊浓缩提取液中的松果菊多糖沉淀出，静置24小时后，弃上层清液，离心收集松果菊多糖粗沉淀物；向松果菊多糖粗沉淀物中加入2升蒸馏水，加热至80℃溶解，然后再在搅拌下向其中加入8L体积比为4∶1的氯仿-正丁醇的混合溶液，在恒温振荡器(TH2-82)上，以150r/min的速度振摇30min，过滤去除沉淀出的蛋白及其他杂质，得到去蛋白的松果菊提取液；减压回收去蛋白的松果菊提取液中的有机溶剂，至除尽有机溶剂；最后用去离子水流动透析精制，以去除无机盐及小分子物质，得到平均分子量为3.5-7.1万的松果菊多糖粗液。该松果菊多糖粗液可以进一步制备为各种药学上可接受的组合物及各种剂型。
如果需要，得到的松果菊多糖粗液可以进一步醇沉精制，方法为在搅拌下再加入0.8升或适量乙醇(95％)，使醇浓度为80％，静置析出沉淀，弃清液，沉淀经干燥得松果菊多糖固体100g。
所得松果菊多糖无臭，无甜味，颜色淡黄，平均分子量为7.3万，总糖含量86％，其中葡萄糖为57.1％，果糖为23.5％，阿拉伯糖为19.3％。
实施例6取松果菊多糖1000g，粉碎，过筛，装胶囊，即得胶囊剂。
实施例7取松果菊多糖250g，加水200ml，加热至溶，成稠浸膏，加入蔗糖750g，制粒，干燥，分装，即得颗粒剂。
实施例8取松果菊多糖1000g，加入注射用水1500ml，溶解，过滤，滤液灌装，即得口服液。
实施例9取松果菊多糖1000g，粉碎，加入10g硬脂酸镁，混合，压片，包薄膜衣，干燥，即得片剂。
实施例10取松果菊多糖500g，加入注射用水1000ml，70℃加热溶解，加入10g活性碳，保温30分钟，过滤，灌装，100℃流通蒸汽灭菌15分钟，即得注射剂。
实验例本发明松果菊多糖测定方法如下1.本发明实施例1-5的松果菊多糖1ml浓度10％的溶液，加苯酚-硫酸试剂呈桔红色，加蒽醌试剂呈蓝绿色，说明制备得到的为多糖。
2.稳定性实验采用留样观察法，将浓度为10％，50％，80％的样品分别贮藏于3-5℃、20-25℃、33-37℃的恒温箱中，隔月取样观察，1年内外观色泽无变化，无沉淀物。
3.总糖量的测定方法精密称取D-葡萄糖0.20g于250ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，为标准品溶液。精密吸取标准品溶液0.5、1、2、3、4、5ml，加蒸馏水稀释至25ml，得不同浓度的标准品溶液。精密吸取标准品溶液2ml，加5％的苯酚水溶液1ml，缓缓加入浓硫酸5ml，摇匀，放冷至室温，以1ml 5％的苯酚水溶液为空白，在490nm下测定吸收度，绘制标准曲线。然后取多糖样品，按标准液配制的方法配制成样品液，同法操作，测定吸收度，从标准曲线计算其总糖含量。
权利要求
1.一种松果菊多糖，由松果菊原料提取得到，其特征在于所述的多糖中，总糖含量为75-95％，平均分子量为3000-130000，其总糖中单糖的组成为葡萄糖30-75％，果糖10％-60％，阿拉伯糖5％-20％；优选分子量为3-8万。
2.含有权利要求1所述松果菊多糖的药物组合物，其特征在于所述的松果菊多糖辅以药学上可接受的辅料，成为任何一种药剂学上所说的剂型，其中松果菊多糖的含量为0.05-90wt％；所述的组合物还包括至少一种选自抗病毒、抗菌或免疫制剂等药物，包括但不限于青霉素及其衍生物、先锋霉素及其衍生物、红霉素及其衍生物、抗菌中草药提取物、利巴韦林、阿糖腺苷、阿昔洛韦、伐昔洛韦、更昔洛韦、曲氟尿苷、索立夫定、拉米夫定、膦甲酸、吗啉胍、金刚烷胺等。
3.一种松果菊多糖的制备方法，包括将松果菊水煮、醇沉、精制，其特征在于方法A(1)将松果菊水煮、浓缩，得浓缩提取液，加入极性溶剂沉淀，去沉淀并除尽溶剂，得到去蛋白的松果菊浓缩提取液；(2)向上述步骤(1)得到的松果菊浓缩提取液加入醇，沉淀，弃清液，收集松果菊多糖粗沉淀物(3)松果菊多糖粗沉淀物经精制得到分子量3000-130000的松果菊多糖粗液。或者方法B(1)将松果菊水煮、浓缩，得浓缩提取液，加入醇沉淀，收集沉淀物；(2)加水溶解沉淀物，加入极性溶剂沉淀其中的蛋白，过滤去除沉淀的蛋白，并除尽极性溶剂，得到去蛋白后的浓缩提取液；(3)去蛋白后的浓缩提取液经精制得到平均分子量3000-130000的松果菊多糖粗液。上述松果菊多糖粗液经进一步处理，得到松果菊多糖。
4.根据权利要求3所述的松果菊多糖的制备方法，其特征在于所述的松果菊的水煮包括将松果菊在蒸馏水中煎煮；经处理得提取液上清液；浓缩提取液的上清液，得到浓缩提取液；所述的松果菊为松果菊全草、经过处理的松果菊全草；如切段或制成粗粉；所述的煎煮在沸腾下进行，煎煮提取1-4次至有效成分充分提取出来，每次1-5小时；煎煮后的处理为合并提取液、过滤、静置，取其上层清液；煎煮过程中，加入5-20倍松果菊重量的蒸馏水；所述的进一步处理为干燥松果菊多糖粗液，得到松果菊多糖，所述干燥采用现有技术中公知的方法进行，如加热干燥、冷冻干燥、喷雾干燥等。
5.根据权利要求3或4所述的松果菊多糖的制备方法，其特征在于所述浓缩为浓缩提取液的上清液至原体积的1/2-1/5；浓缩可以采用现有技术中的任何方法，如加热浓缩、减压浓缩、薄膜蒸发浓缩；优选在50-70℃下采用薄膜蒸发进行浓缩；浓缩后，向浓缩提取液中加入浓缩提取液1-5倍体积的极性溶剂，使浓缩提取液中的蛋白质及其他在极性溶剂中不溶的杂质沉淀；所述沉淀在搅拌下进行，充分沉淀后通过过滤或离心分离去除沉淀的蛋白，减压回收极性溶剂，至极性溶剂完全除尽；该沉淀去除蛋白和其他杂质的过程，也可以在恒温震荡器上进行。
6.根据权利要求3、4或5所述的松果菊多糖的制备方法，其特征在于所述极性溶剂为能够溶解本发明松果菊多糖、且能够沉淀蛋白的极性溶剂，包括氯仿、二氯甲烷、乙醚、石油醚、乙酸乙酯、THF、正丁醇中的一种或其中至少两种的混合物；优选采用选自氯仿、二氯甲烷与THF、正丁醇中的两种混合而成的混合溶剂，两种溶剂的体积比为2∶1-5∶1；更优选采用氟仿与正丁醇的混合溶剂，氯仿为正丁醇体积的3-5倍；所述的方法A中的步骤(2)的醇沉为向去除蛋白的浓缩提取液部分中加入醇，搅拌均匀，过滤或离心收集沉淀物；也可以先将溶液混合物静置5-30小时，倾出上层清液，再通过过滤或离心收集沉淀物；其中所用的醇为甲醇、乙醇或丙醇；加入醇使得混合液的醇浓度为60-80wt％；醇的用量为浓缩液的1-5倍体积量；优选采用75％-95％的乙醇；所述的精制过程中，先将粗松果菊多糖沉淀物溶解在松果菊量0.5-3倍的50-85℃蒸馏水中，趁热滤除不溶物后，用层析、透析或超滤的方法分离，去除小分子杂质，得到平均分子量在3000-130000的松果菊多糖组分，优选平均分子量3万-8万的松果菊多糖组分；优选采用透析的方法精制；所述的述松果菊多糖、松果菊多糖水溶液或含有该松果菊多糖的药物组合物，可以采用现有技术公知的方法制成含有松果菊多糖提取物或松果菊多糖的药物组合物，以及任何一种药剂学上可接受的剂型，如颗粒剂、口服液、胶囊、片剂、注射剂、粉针等药物组合物。
7.根据权利要求3、4、5或6所述的松果菊多糖的制备方法，其特征在于优选的制备方法包括以下步骤1)取松果菊全草，经处理后，加入松果菊药材5-20倍重量的蒸馏水煎煮，提取2-4次后，弃沉淀，合并煎煮液；过滤合并的煎煮液，静置后取其上层清液，在50-70℃下，用薄膜蒸发浓缩至原体积的1/3；2)向浓缩提取液中加入4-5倍的氯仿-正丁醇混合溶剂，混匀，弃去沉淀出的蛋白，回收溶剂；3)去除蛋白后，加入1-5倍量醇，使得混合液醇浓度为60-80wt％，搅拌均匀后，沉淀多糖，静置12-30小时后倾出上层清液，离心收集沉淀；4)向沉淀加入2-10倍量蒸馏水，加热至60-90℃使沉淀溶解，趁热过滤，滤液经流动透析，去除小分子杂质，得到平均分子量在3000-130000的松果菊多糖组分。
8.根据权利要求3、4、5、6或7所述的松果菊多糖的制备方法，其特征在于所述的制备方法还包括搅拌下，向膜内残留液部分加醇至含醇量为80％，静置析出松果菊多糖沉淀物；其中所述的提取为2-4次，每次提取时间为1-3小时；提取后，各次提取液合并；优选的做法为水煮3次，各次提取时间分别为2小时、2小时、1小时；所述的提取液过滤可以使用滤布进行，滤布规格为100-200目；使用的氯仿-正丁醇混合液中，氯仿与正丁醇的用量为4∶1的体积比；去蛋白在搅拌下或在恒温振荡器上混匀，优选在恒温振荡器上以190r/min振摇20min；制备过程中使用的醇为含醇量为75-95％的乙醇；所述的透析使用自来水或去离子水；所述的进一步处理还包括向精制后得到的松果菊多糖提取物溶液中再加入醇沉淀，弃清液，收集松果菊多糖提取物；所述醇为甲醇、乙醇或丙醇，醇的加入量为松果菊量的0.6-1.5倍，优选乙醇；还可以将沉淀出的松果菊多糖经冷冻、常温或加热干燥，得到松果菊多糖提取物的粉末。
9.根据权利要求3、4、5、6、7或8所述的松果菊多糖的制备方法，其特征在于所述的制备方法B可以参考制备方法A中的原料、用量及处理过程；制备方法B中煎煮的时间、次数、醇、极性溶剂的种类及用量，以及其他工艺参数可以参考制备方法A。优选的方法B为(1)提取取松果菊全草，经处理后用松果菊药材5-20倍重量的蒸馏水煎煮，提取2-4次后，弃沉淀，合并煎煮液；过滤合并后的煎煮液，静置后取其上层清液，加热下薄膜蒸发浓缩至原体积的1/2-1/5；该工艺与制备方法A中相应的条件一致；薄膜蒸发的温度为50-70℃；(2)醇沉搅拌下向松果菊浓缩提取液中加入1-5倍的醇，将松果菊浓缩提取液中的松果菊多糖沉淀出，静置、弃上清液、离心收集松果菊多糖粗沉淀物；(3)去蛋白向松果菊多糖粗沉淀物中加入0.5-5倍蒸馏水，并使其溶解，在搅拌下向其中加入1-5倍体积比为4∶1的氯仿-正丁醇的混合溶液，过滤去除沉淀出的蛋白及其他杂质，回收去除蛋白后的松果菊提取液中的有机溶剂，至除尽有机溶剂，得到去除蛋白的松果菊提取液；(4)精制用去离子水流动透析精制，以去除无机盐及小分子物质，得到平均分子量为3-8万的松果菊多糖粗液。
10.权利要求1或2所述的松果菊多糖及含有松果菊多糖的药物制剂在制备治疗各种炎症、促进免疫功能、抗病毒及抗菌，特别是抗SARS药物上的用途。
全文摘要
本发明公开了一种松果菊多糖、其制备方法、含有松果菊多糖的药物制剂及其在制备治疗各种炎症、促进免疫功能、抗病毒及抗菌，特别是抗SARS药物上的用途，其由松果菊原料经提取得到的，总糖含量为75－95％，平均分子量在3万－8万之间，其总糖中单糖的组成为葡萄糖30－75％，果糖10％－60％，阿拉伯糖5％－20％。其制备方法包括将松果菊水煮、醇沉，用极性溶剂溶解松果菊水煮后的浓缩提取液，以去除其中的蛋白和其他杂质；除极性溶剂后，用醇沉淀，收集沉淀物；沉淀物经分离得到分子量为3000－130000的松果菊多糖；经进一步处理，可以得到松果菊多糖粉末。本发明的松果菊多糖不含其他杂质，以多糖直接入药，服用量大大减少，疗效明确，无毒副作用；产品质量稳定、易于控制。
文档编号A61K31/715GK1580077SQ0315323
公开日2005年2月16日 申请日期2003年8月8日 优先权日2003年8月8日
发明者李继仁 申请人:吉林威威药业股份有限公司
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