红景天冻干粉针剂的制备方法
专利名称：红景天冻干粉针剂的制备方法
技术领域：
本发明涉及治疗冠心病的药物红景天冻干粉针剂的制备方法，尤其涉及粉针剂中支架剂的优选。
背景技术：
红景天，为景天科红景天属高山红景天Rhodiola sachalinesis A.Bor.或狭叶红景天R.kirilowlii(Regel)Regel[Sedum kirilowii Regel]、全瓣红景天Rhodiola sacra(Prainex Hamet)Fu、大花红景天R.crenulata或同属植物的干燥全草。早在民间用于清肺止咳、止血、止带，或外用治跌打损伤、烫火伤等。晶珠本草载“味辛甘、涩，气味香，功效治瘟病时疫，肺病，散肿。”近代研究表明该药有明显的保护心脏及抗缺氧作用，临床用于抗缺氧、抗疲劳和冠心病及高山适应不全症的治疗。其活性成分为红景天甙，药理实验表明能明显改善犬急性心肌缺血和心肌梗塞，减轻心肌损伤程度，明显降低血清磷酸肌酸激酶(CK)含量，可明显扩张冠脉血管，降低冠脉阻力。经静脉给药或口服给药对心血瘀阻引起的胸痹心痛(冠心病心绞痛)起效快、效果明显、作用持久。并且红景天甙还具有致适应原的作用目前红景天的制剂有口服和注射剂。静脉注射剂起效快，对于挽救冠心病人具有重要意义，但红景天注射液长期储存的稳定性仍不理想，影响了它的临床使用，为此，将其制备成冻干粉针剂就成为克服此缺陷的一种途径。并且目前在中药冻干粉针剂的制备中，常存在含水量过高、产品外观萎缩或成团、复溶性差等问题，针对每种具体的制剂成分，选择适宜的制剂工艺和辅料，尤其选择适宜的支架剂及其用量，对于形成合格的粉针剂至关重要。
发明内容
本申请的目的就是选择适宜的红景天提取工艺、制剂工艺，和针对红景天提取物的适宜的粉针剂支架材料，制成复溶性好、含水量及外观性状合格的红景天粉针剂。
原料使用临床可以作为红景天使用的所有景天科植物的干燥根及根茎，优选高山红景天Rhodiola sachalinesis A.Bor.或狭叶红景天R.kirilowlii(Regel)Regel[Sedum kirilowii Regel]、全瓣红景天Rhodiola sacra(Prain ex Hamet)Fu、大花红景天。
红景天提取物的制备 可以采用以下提取和除杂方法制备以红景天甙为主的红景天提取物。提取物中红景天甙含量0.5％-10.0％。
提取 提取溶剂可以选用水、30％-80％乙醇或30％-80％甲醇。
提取方法可以采用水煎煮法、热回流法或超声波提取法，提取2-3次，，优选提取3次，每次1-2小时。或用30％-80％乙醇或30％-80％甲醇渗漉至流出液至无色为止。合并提取液，减压浓缩至流浸膏的比重为1.0-1.1(60-80℃热测)。提取所用醇浓度优选50-70％。
除杂 可以采用以下任何一种方法除杂。
(1)流浸膏加95％乙醇至醇浓度达70-80％以上，放置12-24小时，优选低温冷藏12-24小时，滤过或离心，所得药液加入20-40％氢氧化钠，调pH至8.0左右，放置12-24小时，过滤，加盐酸调节pH至7.0，5-10℃放置12-24小时，离心，过滤，浓缩至比重为1.2-1.4(60-80℃热测)的流浸膏。
(2)流浸膏加入5％-10％明胶水溶液，搅拌均匀直至不再产生沉淀，低温5-10℃放置12-24小时，离心，过滤，减压回收溶剂，加入95％乙醇至醇浓度达80％，过滤调pH＝8.0，放置12-24小时，优选低温放置10-12小时，滤过，滤液减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4(60-80℃热测)的流浸膏。
(3)流浸膏加70％乙醇稀释至3-4倍量体积，经过聚酰胺柱，合并流出液，减压回收，得比重在1.2-1.4(60-80℃热测)的流浸膏。
(4)流浸膏加入1％-5％ZTC澄清剂(天津正天成澄清技术有限公司产品)，搅匀，放置8小时，离心，过滤，加入95％乙醇至醇浓度达80％，放置12-24小时，优选低温冷藏12-24小时，离心、滤过，减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4(60-80℃热测)的流浸膏。
离心过程中的参数优选4000r/min-10000r/min。
以上4种方法精制得到的流浸膏，各项指标的检查均符合《中国药典》2000版(一部)注射剂检查项下的各项要求，且其中红景天甙含量0.5％-10.0％，即为本发明制备粉针剂所用的红景天提取物。当然，还可以采用其他提取分离方法制得红景天甙含量为0.5％-10.0％，并符合《中国药典》2000版(一部)注射剂检查项下的各项要求，也可以用于制备本发明的粉针剂，仍在本发明的保护范围内。
冻干粉针剂的制备制备合格的粉针剂，需要优选支架剂，以获得具有合格质量的制剂。
经研究，红景天的粉针剂可以采用多元醇、多元醇酸、单糖、多糖、无机盐、聚醇、聚糖、羟基酸、聚酯、壳聚糖及其衍生物或它们的混合物作为红景天粉针剂的支架剂，其中优选的支架剂有甘露醇、右旋糖酐、葡萄糖、山梨醇、乳糖、明胶、磷酸氢二钠-磷酸二氢钠、乳糖酸钙、右旋糖酐-葡萄糖，更优选的支架剂为甘露醇、葡萄糖、山梨醇、乳糖、明胶、乳糖酸钙、右旋糖酐-葡萄糖。
制备工艺取以上制备的红景天提取物流浸膏适量，加入适量的支架剂，加注射用水3-10毫升，加热溶解，加活性炭除热原，经0.15-0.22um滤膜过滤、超滤膜块过滤(截留分子量大于1000)分装，-5℃以下冷冻干燥，密封即得。
支架剂种类及用量的选择按以上制备工艺的方法，以红景天提取物1g、支架剂若干、注射用水3-4ml的比例制成冻干粉针剂，再加水溶解，比较其成型性、复溶性、粉针剂的含水量，进行综合评价，选择适宜的支架剂种类和用量，结果见表1及表2。
从以上结果优选出适用于制备红景天粉针剂的支架剂甘露醇、右旋糖酐、葡萄糖、山梨醇、乳糖、明胶、磷酸氢二钠-磷酸二氢钠、乳糖酸钙、右旋糖酐-葡萄糖，更优选的支架剂为甘露醇、葡萄糖、山梨醇、乳糖、明胶、乳糖酸钙、右旋糖酐-葡萄糖。红景天提取物与支架剂的优选配比为1∶0.2-1.2，红景天提取物与复合支架剂在配比为1∶0.2时即可收到较好效果，所观察的2种复合支架剂的优选组成为磷酸氢二钠∶磷酸二氢钠为3∶1至1∶3，右旋糖酐∶葡萄糖为3∶17至3∶1。
制得的红景天粉针剂，为疏松固体粉末，加水易溶于水。临用前加注射用水充分溶解，加入0.9％氯化钠或5％葡萄糖注射液中，静脉滴注。用于治疗冠心病和心绞痛等。每日1次或遵医嘱。
表1 粉针剂的配方及评价
表2复合支架剂制备粉针剂
实施例红景天1000g，加50％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，减压回收得到比重为1.0-1.1的流浸膏。
流浸膏加入5％明胶水溶液，搅拌均匀直至不再产生沉淀，低温5℃放置12-24小时，离心，过滤，减压回收溶剂，加入95％乙醇至醇浓度达80％，调pH＝8.0，5℃放置12-24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4的流浸膏。
以上制备的红景天提取物1000g，加入800g甘露醇，加注射用水至4000毫升，加热溶解，加活性炭脱热原，除炭，经0.15-0.22um滤膜过滤、超滤膜块(截留分子量大于1000)分装成1000瓶，-5℃以下冷冻干燥，密封即得。
产品的药理毒理研究总结将本申请制备的粉针剂用注射用水溶解后，为注射用红景天制剂，进行以下药理和毒理学研究，结果如下1主要药效学1.1注射用红景天具有明显抗心肌缺血作用在结扎冠状动脉前降支引起大鼠急性心肌缺血模型上，静脉输注红景天2、4、8g生药/kg能不同程度抑制II导联心电图ST段抬高，4、8g生药/kg 5～15min起效，维持90～180min；能缩小心肌梗死范围，梗死区/危险分别降低了19.6％(P＞0.05)、30.0％(P＜0.01)、43.0％(P＜0.01)；血清心肌酶水平显著下降，AST分别下降了11.3％(P＞0.05)、37.9％(P＜0.001)、44.2％(P＜0.001)；LDH分别下降了9.3％(P＞0.05)、30.0％(P＞0.05)、31.7％(P＜0.05)；XCKM分别下降了5.4％(P＞0.05)、21.0％(P＞0.05)、31.5％(P＜0.05)，高剂量使XCKM异常例数明显减少。
在结扎冠状动脉前降支引起犬急性心肌梗死模型上，静脉输注红景天使心外膜电图标测的缺血程度明显改善，与对照组比较，1、2、4g生药/kg分别下降了26.9±25.5％(P＞0.05)、38.3±23.3％(P＞0.05)、50.5±19.9％(P＞0.01)；缺血范围也有不同程度缩小。心肌梗死范围明显缩小，分别缩小了20.3％(P＞0.05)、37.2％(P＜0.01)、47.3％(P＜0.001)；高剂量能明显抑制血清LDH-L心肌同功酶水平的升高，并降低心肌耗氧量；对冠脉血流量、血管阻力和心率无显著影响，但高剂量出现一过性血压降低。
1.2注射用红景天具有抗栓和降低高粘血症大鼠血液粘度的作用大鼠静脉给予红景天能抑制多种诱导剂引起的血小板聚集性。1、2、4g生药/kg能剂量依赖性抑制ADP诱导的血小板聚集，抑制率分别为14.2％(P＞0.05)、35.8％(P＜0.001)、51.8％(P＜0.001)，最大聚集抑制50％所需的剂量(ED50)为3.6g/kg；能明显抑制花生四烯酸诱导的血小板聚集，抑制率分别为20.9％(P＜0.05)、53.0％(P＜0.001)、69.3％(P＜0.001)，其ED50为1.9g/kg；能抑制胶原诱导的血小板聚集，抑制率分别为22.3％(P＜0.05)、32.9％(P＜0.001)、53.2％(P＜0.001)，其ED50为3.7g/kg。
本品能延长电刺激颈动脉内膜损伤所导致的实验性动脉血栓形成，注射用红景天1、2、4g生药/kg使动脉血栓形成时间分别延长20.1％(P＞0.05)、41.6％(P＜0.001)、54.0％(P＜0.001)。
在高分子右旋糖苷引起的高粘血症大鼠模型上，本品可明显降低血流变异常大鼠的全血粘度及红细胞聚集指数。注射用红景天2、4、8g生药/kg，切变率在1s-1时，增加的全血粘度分别下降了62.2％、74.0％、84.5％，切变率在5s-1时，增加的全血粘度分别下降了39.2％、87.4％、93.1％。增加的红细胞聚集指数分别下降了57.8％、115.6％、137.5％，提示了红景天能减轻高分子右旋糖酐诱导的红细胞聚集性。
1.3注射用红景天对血流动力学的影响血流动力学研究表明，静脉输注红景天注射液1、2g生药/kg对麻醉开胸犬血流动力学各项指标无明显影响，4g生药/kg给药后出现一过性血压下降，并明显降低总外周阻力及冠脉阻力，其它指标无明显变化。
结论为注射用红景天具有明显抗心肌缺血作用和活血化瘀作用。
2一般药理学2.1中枢神经系统用小鼠研究本品对中枢神经系统的影响，结果表明单次尾静脉注射红景天注射液3、6、12g生药/kg对小鼠一般行为、自主活动及平衡均无显著影响，对阈下剂量的戊巴妥钠也无协同催眠作用。
2.2心血管系统用麻醉杂种犬研究本品对心血管系统的影响，结果表明单次静脉输注红景天4、8、16g生药/kg对麻醉犬心率、心电力图波形均无明显影响，但系统血压出现一过性下降，高剂量组平均约下降8mmHg，10min后基本完全恢复。
2.3呼吸系统用麻醉杂种犬研究本品对呼吸系统的影响，结果表明单次静脉输注工景天4、8、16g生药/kg对麻醉犬呼吸频率及幅度均无明显影响。
结论为药效学有效剂量下，红景天对神经系统、呼吸系统无明显不利影响，输注初期除出现一过性血压下降外，对心血管系统其它参数也无明显不利影响。
3急性毒性小鼠单次静脉推注或腹腔注射过量的红景天后出挣扎、惊跳、眼球凸出、眼脸下垂，活动减少，静卧不动，呼吸急促等中毒症状；静注给药后1h、腹腔注射2天内上述症状完全消失。死亡出现在静注给药后5min内或腹腔注射给药后的前2天。小鼠单次静脉及腹腔注射红景天的LD50分别为176.4(168.7～184.5)g、207.3(195.7～219.5)g生药/kg。小鼠静注给药的LD50约为临床用药剂量的320倍。
4长期毒性4.1大鼠给大鼠连续腹腔注射注射用红景天10、25、75g生药/kg/d，每天1次。连续给药30天，观察一般药物反应，检测血液学、血液生化以及病理组织学等指标。结果表明，75g生药/kg/d剂量组大鼠在最初几次给药后约10分钟，绝大多数大鼠出现扭体、步态不稳(可能与扭体有关)、静卧、呼吸加深、呼吸快慢不规则，约6h恢复正常；25g生药/kg/d剂量组亦出现上述症状，但程度较轻；给药10天后上述症状明显减轻或消失。75g生药/kg/d剂量组大鼠体重增长缓慢，连续腹腔给药30天，血清胆红素含量升高，雌性大鼠与对照组比较淋巴细胞百分数降低、中性白细胞百分数增加，肝、脾系数高于生理对照组，上述症状停药可恢复正常。病理组织学检查表明，肉眼观察及镜检75g生药/kg/d、25g生药/kg/d剂量组个别大鼠腹腔出现粘连和腹膜炎(与给药途径有关)，停药恢复症状减轻。10g生药/kg/d剂量组未见异常反应，停药恢复也未见延迟毒性产生，为大鼠安全无毒性反应剂量。
4.2比格狗比格狗24只，随机分为4组，每组6只，雌雄各半，连续静脉给予注射用红景天，每天1次，连续30天，剂量分别为108、36、12g生药/kg/d，各组给予同体积不同浓度的药物，给药体积为5ml/kg，20-30分钟滴注完。结果发现108g生药/kg/d剂量组动物出现伸舌、恶心和较严重的流涎，部分动物(2/6)呕吐，药后动物出现步态不稳，活动减少，个别动物出现伏卧；血液学检查见有血小板数(PLT)明显降低，血小板数(PLT)降低与给药剂量间存在有明显的剂量关系，血红蛋白(Hb)、红细胞数(RBC)、红细胞压积明显低于对照组，同时凝血时间(CT)延长；血液生化检查血糖较对照组明显升高，血清氯明显降低；心电图检查发现部分动物出现短时间内的T波波幅升高；静脉注射部位血管明显损伤，血管内大量纤维组织增生；动物胸腺萎缩，肺泡管轻度损伤；肾小管上皮细胞轻度浊肿，心肌间质血管轻度扩张淤血，肝血窦、淋巴窦扩张。36g生药/kg/d剂量组动物出现伸舌、吞咽等呕心症状，并有少量流涎，上述反应与剂量有明显关系；血液学检查发现血小板数(PLT)明显降低；血液生化检查发现血糖升高；病理组织学检查发现静脉注射部位血管损伤，血管内纤维组织增生，但较108g(生药)/kg剂量组动物明显减轻，同时见有胸腺萎缩、肺泡管轻度损伤，肝血窦枯否氏细胞增生肿胀，淋巴窦扩张。12g生药/kg/d剂量对动物精神、行为、饮食、粪便、体重、尿液生化等均未见明显影响；血液学检查、血液生化检查、眼科检查、心电图检查、骨髓像检查与对照组相比未见明显的变化；病理组织学检查亦未发现由药物引起的明显病理改变；该剂量为未观测到毒性反应的剂量。
结论为大鼠腹腔注射本品无毒性反应剂量为10g生药/kg/d；比格狗静脉注射本品无毒性反应剂量为生药12g生药/kg/d。
5特殊安全性家兔耳缘静脉给予注射用红景天，每天1次，3连续天，肉眼和病理组织学均证明注射部位未见明显局部刺激反应。兔溶血性试验结果表明，本品无溶血现象。豚鼠全身自动过敏试验表明，经3次腹腔给予注射用红景天致敏后，14天及21天后静脉给予注射用红景天进行攻击，未出现全身自动过敏反应；大鼠异种被动皮肤过敏试验表明，本品静注激发，也未见被动过敏反应发生，表明本品无致敏反应。
结论为本品无局部血管刺激性，无溶血，也无过敏原性。
权利要求
1.一种粉针剂，其特征在于其中包括红景天提取物和支架剂，其中红景天提取物的主要成分是红景天甙，在提取物中的含量至少为0.5％-10.0％，支架剂选自多元醇、多元醇酸、单糖、多糖、无机盐、聚醇、聚糖、羟基酸、聚酯、壳聚糖及其衍生物或它们的混合物。
2.根据权利要求1所述的产品，其特征在于红景天提取物流浸膏与支架剂的比例为1∶0.2至1.2。
3.根据权利要求1或2所述的产品，其特征在于支架剂选自甘露醇、右旋糖酐、葡萄糖、山梨醇、乳糖、明胶、磷酸氢二钠-磷酸二氢钠、乳糖酸钙、右旋糖酐-葡萄糖中之一种或它们的混合物。
4.根据权利要求3所述的产品，其特征在于支架剂磷酸氢二钠-磷酸二氢钠的组成为磷酸氢二钠∶磷酸二氢钠为3∶1至1∶3，支架剂右旋糖酐-葡萄糖的组成为右旋糖酐∶葡萄糖为3∶17至3∶1。
5.根据权利要求1或2所述的产品，其特征在于红景天提取物是用水、30％-80％乙醇或30％-80％甲醇提取红景天属植物的根或根茎，得到浸膏，并用以下方法之中的一种纯化后制得(1)流浸膏加95％乙醇至醇浓度达80％以上，放置10-24小时，优选低温冷藏10-24小时，滤过或离心，所得药液加入20-40％氢氧化钠，调pH至8.0左右，放置12-24小时，过滤，减压回收滤液，浓缩至比重为1.2-1.4浸膏；(2)流浸膏加入5％-10％明胶水溶液，搅拌均匀直至不再产生沉淀，低温5-10℃放置12-24小时，离心，过滤，减压回收溶剂，加入95％乙醇至醇浓度达80％～85％，过滤调pH＝8.0，放置12-24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4的浸膏；(3)流浸膏加70％乙醇稀释至3-4倍量体积，经过聚酰胺柱，合并流出液，调pH至8.0左右，放置12-24小时，过滤，减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4的浸膏；(4)流浸膏加入1％-5％ZTC澄清剂，搅匀，放置6-8小时，离心，过滤，加入95％乙醇至醇浓度达80％，低温冷藏10-12小时，离心、滤过，减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4的浸膏。
6.根据权利要求5所述的产品，其特征在于提取红景天所用的乙醇或甲醇的浓度为50％-70％。
7.制备红景天提取物的方法，其特征在于用水、30％-80％乙醇或30％-80％甲醇提取红景天属植物的根或根茎，得到流浸膏，所述提取为煎煮、回流、超声提取或渗漉，并用以下方法之中的一种纯化后制得(1)流浸膏加95％乙醇至醇浓度达70-80％以上，放置10-24小时，优选低温冷藏10-24小时，滤过或离心，所得药液加入20-40％氢氧化钠，调pH至8.0左右，放置12-24小时，过滤，减压回收滤液，浓缩至比重为1.2-1.4浸膏；(2)流浸膏加入5％-10％明胶水溶液，搅拌均匀直至不再产生沉淀，低温5-10℃放置12-24小时，离心，过滤，减压回收溶剂，加入95％乙醇至醇浓度达80％，调pH＝8.0，放置12-24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4的浸膏；(3)流浸膏加70％乙醇稀释至3-4倍量体积，经过聚酰胺柱，合并流出液，调pH至8.0左右，放置12-24小时，过滤，减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4的浸膏；(4)流浸膏加入1％-5％ZTC澄清剂，搅匀，放置6-8小时，离心，过滤，加入95％乙醇至醇浓度达80％，低温冷藏10-12小时，离心、滤过，减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4的浸膏。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于提取所用的乙醇或甲醇的浓度为50％-70％。
9.制备权利要求1或2所述产品的方法，其特征在于如下进行取红景天提取物，加入支架剂，并加注射用水稀释，红景天提取物与水的重量比为1∶3-10，加热溶解，超滤，冷冻干燥，密封即得。
10.制备权利要求3-6中任一权利要求所述产品的方法，其特征在于如下进行取红景天提取物，加入支架剂，并加注射用水稀释，红景天提取物与水的重量比为1∶3-10，加热溶解，超滤，冷冻干燥，密封即得。
全文摘要
本发明涉及治疗冠心病的红景天粉针剂及其制备方法，本药物的活性成分为红景天甙，优选的支架剂为甘露醇、右旋糖酐、葡萄糖、山梨醇、乳糖、明胶、磷酸氢二钠－磷酸二氢钠、乳糖酸钙、右旋糖酐－葡萄糖中之一种或它们的混合物。红景天提取物与支架剂的比例为1∶0.2－1.2。
文档编号A61P9/10GK1593434SQ0315678
公开日2005年3月16日 申请日期2003年9月12日 优先权日2003年9月12日
发明者王健 申请人:王健
技术领域：
本发明涉及治疗冠心病的药物红景天冻干粉针剂的制备方法，尤其涉及粉针剂中支架剂的优选。
背景技术：
红景天，为景天科红景天属高山红景天Rhodiola sachalinesis A.Bor.或狭叶红景天R.kirilowlii(Regel)Regel[Sedum kirilowii Regel]、全瓣红景天Rhodiola sacra(Prainex Hamet)Fu、大花红景天R.crenulata或同属植物的干燥全草。早在民间用于清肺止咳、止血、止带，或外用治跌打损伤、烫火伤等。晶珠本草载“味辛甘、涩，气味香，功效治瘟病时疫，肺病，散肿。”近代研究表明该药有明显的保护心脏及抗缺氧作用，临床用于抗缺氧、抗疲劳和冠心病及高山适应不全症的治疗。其活性成分为红景天甙，药理实验表明能明显改善犬急性心肌缺血和心肌梗塞，减轻心肌损伤程度，明显降低血清磷酸肌酸激酶(CK)含量，可明显扩张冠脉血管，降低冠脉阻力。经静脉给药或口服给药对心血瘀阻引起的胸痹心痛(冠心病心绞痛)起效快、效果明显、作用持久。并且红景天甙还具有致适应原的作用目前红景天的制剂有口服和注射剂。静脉注射剂起效快，对于挽救冠心病人具有重要意义，但红景天注射液长期储存的稳定性仍不理想，影响了它的临床使用，为此，将其制备成冻干粉针剂就成为克服此缺陷的一种途径。并且目前在中药冻干粉针剂的制备中，常存在含水量过高、产品外观萎缩或成团、复溶性差等问题，针对每种具体的制剂成分，选择适宜的制剂工艺和辅料，尤其选择适宜的支架剂及其用量，对于形成合格的粉针剂至关重要。
发明内容
本申请的目的就是选择适宜的红景天提取工艺、制剂工艺，和针对红景天提取物的适宜的粉针剂支架材料，制成复溶性好、含水量及外观性状合格的红景天粉针剂。
原料使用临床可以作为红景天使用的所有景天科植物的干燥根及根茎，优选高山红景天Rhodiola sachalinesis A.Bor.或狭叶红景天R.kirilowlii(Regel)Regel[Sedum kirilowii Regel]、全瓣红景天Rhodiola sacra(Prain ex Hamet)Fu、大花红景天。
红景天提取物的制备 可以采用以下提取和除杂方法制备以红景天甙为主的红景天提取物。提取物中红景天甙含量0.5％-10.0％。
提取 提取溶剂可以选用水、30％-80％乙醇或30％-80％甲醇。
提取方法可以采用水煎煮法、热回流法或超声波提取法，提取2-3次，，优选提取3次，每次1-2小时。或用30％-80％乙醇或30％-80％甲醇渗漉至流出液至无色为止。合并提取液，减压浓缩至流浸膏的比重为1.0-1.1(60-80℃热测)。提取所用醇浓度优选50-70％。
除杂 可以采用以下任何一种方法除杂。
(1)流浸膏加95％乙醇至醇浓度达70-80％以上，放置12-24小时，优选低温冷藏12-24小时，滤过或离心，所得药液加入20-40％氢氧化钠，调pH至8.0左右，放置12-24小时，过滤，加盐酸调节pH至7.0，5-10℃放置12-24小时，离心，过滤，浓缩至比重为1.2-1.4(60-80℃热测)的流浸膏。
(2)流浸膏加入5％-10％明胶水溶液，搅拌均匀直至不再产生沉淀，低温5-10℃放置12-24小时，离心，过滤，减压回收溶剂，加入95％乙醇至醇浓度达80％，过滤调pH＝8.0，放置12-24小时，优选低温放置10-12小时，滤过，滤液减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4(60-80℃热测)的流浸膏。
(3)流浸膏加70％乙醇稀释至3-4倍量体积，经过聚酰胺柱，合并流出液，减压回收，得比重在1.2-1.4(60-80℃热测)的流浸膏。
(4)流浸膏加入1％-5％ZTC澄清剂(天津正天成澄清技术有限公司产品)，搅匀，放置8小时，离心，过滤，加入95％乙醇至醇浓度达80％，放置12-24小时，优选低温冷藏12-24小时，离心、滤过，减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4(60-80℃热测)的流浸膏。
离心过程中的参数优选4000r/min-10000r/min。
以上4种方法精制得到的流浸膏，各项指标的检查均符合《中国药典》2000版(一部)注射剂检查项下的各项要求，且其中红景天甙含量0.5％-10.0％，即为本发明制备粉针剂所用的红景天提取物。当然，还可以采用其他提取分离方法制得红景天甙含量为0.5％-10.0％，并符合《中国药典》2000版(一部)注射剂检查项下的各项要求，也可以用于制备本发明的粉针剂，仍在本发明的保护范围内。
冻干粉针剂的制备制备合格的粉针剂，需要优选支架剂，以获得具有合格质量的制剂。
经研究，红景天的粉针剂可以采用多元醇、多元醇酸、单糖、多糖、无机盐、聚醇、聚糖、羟基酸、聚酯、壳聚糖及其衍生物或它们的混合物作为红景天粉针剂的支架剂，其中优选的支架剂有甘露醇、右旋糖酐、葡萄糖、山梨醇、乳糖、明胶、磷酸氢二钠-磷酸二氢钠、乳糖酸钙、右旋糖酐-葡萄糖，更优选的支架剂为甘露醇、葡萄糖、山梨醇、乳糖、明胶、乳糖酸钙、右旋糖酐-葡萄糖。
制备工艺取以上制备的红景天提取物流浸膏适量，加入适量的支架剂，加注射用水3-10毫升，加热溶解，加活性炭除热原，经0.15-0.22um滤膜过滤、超滤膜块过滤(截留分子量大于1000)分装，-5℃以下冷冻干燥，密封即得。
支架剂种类及用量的选择按以上制备工艺的方法，以红景天提取物1g、支架剂若干、注射用水3-4ml的比例制成冻干粉针剂，再加水溶解，比较其成型性、复溶性、粉针剂的含水量，进行综合评价，选择适宜的支架剂种类和用量，结果见表1及表2。
从以上结果优选出适用于制备红景天粉针剂的支架剂甘露醇、右旋糖酐、葡萄糖、山梨醇、乳糖、明胶、磷酸氢二钠-磷酸二氢钠、乳糖酸钙、右旋糖酐-葡萄糖，更优选的支架剂为甘露醇、葡萄糖、山梨醇、乳糖、明胶、乳糖酸钙、右旋糖酐-葡萄糖。红景天提取物与支架剂的优选配比为1∶0.2-1.2，红景天提取物与复合支架剂在配比为1∶0.2时即可收到较好效果，所观察的2种复合支架剂的优选组成为磷酸氢二钠∶磷酸二氢钠为3∶1至1∶3，右旋糖酐∶葡萄糖为3∶17至3∶1。
制得的红景天粉针剂，为疏松固体粉末，加水易溶于水。临用前加注射用水充分溶解，加入0.9％氯化钠或5％葡萄糖注射液中，静脉滴注。用于治疗冠心病和心绞痛等。每日1次或遵医嘱。
表1 粉针剂的配方及评价
表2复合支架剂制备粉针剂
实施例红景天1000g，加50％乙醇回流提取3次，每次1小时，合并提取液，减压回收得到比重为1.0-1.1的流浸膏。
流浸膏加入5％明胶水溶液，搅拌均匀直至不再产生沉淀，低温5℃放置12-24小时，离心，过滤，减压回收溶剂，加入95％乙醇至醇浓度达80％，调pH＝8.0，5℃放置12-24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4的流浸膏。
以上制备的红景天提取物1000g，加入800g甘露醇，加注射用水至4000毫升，加热溶解，加活性炭脱热原，除炭，经0.15-0.22um滤膜过滤、超滤膜块(截留分子量大于1000)分装成1000瓶，-5℃以下冷冻干燥，密封即得。
产品的药理毒理研究总结将本申请制备的粉针剂用注射用水溶解后，为注射用红景天制剂，进行以下药理和毒理学研究，结果如下1主要药效学1.1注射用红景天具有明显抗心肌缺血作用在结扎冠状动脉前降支引起大鼠急性心肌缺血模型上，静脉输注红景天2、4、8g生药/kg能不同程度抑制II导联心电图ST段抬高，4、8g生药/kg 5～15min起效，维持90～180min；能缩小心肌梗死范围，梗死区/危险分别降低了19.6％(P＞0.05)、30.0％(P＜0.01)、43.0％(P＜0.01)；血清心肌酶水平显著下降，AST分别下降了11.3％(P＞0.05)、37.9％(P＜0.001)、44.2％(P＜0.001)；LDH分别下降了9.3％(P＞0.05)、30.0％(P＞0.05)、31.7％(P＜0.05)；XCKM分别下降了5.4％(P＞0.05)、21.0％(P＞0.05)、31.5％(P＜0.05)，高剂量使XCKM异常例数明显减少。
在结扎冠状动脉前降支引起犬急性心肌梗死模型上，静脉输注红景天使心外膜电图标测的缺血程度明显改善，与对照组比较，1、2、4g生药/kg分别下降了26.9±25.5％(P＞0.05)、38.3±23.3％(P＞0.05)、50.5±19.9％(P＞0.01)；缺血范围也有不同程度缩小。心肌梗死范围明显缩小，分别缩小了20.3％(P＞0.05)、37.2％(P＜0.01)、47.3％(P＜0.001)；高剂量能明显抑制血清LDH-L心肌同功酶水平的升高，并降低心肌耗氧量；对冠脉血流量、血管阻力和心率无显著影响，但高剂量出现一过性血压降低。
1.2注射用红景天具有抗栓和降低高粘血症大鼠血液粘度的作用大鼠静脉给予红景天能抑制多种诱导剂引起的血小板聚集性。1、2、4g生药/kg能剂量依赖性抑制ADP诱导的血小板聚集，抑制率分别为14.2％(P＞0.05)、35.8％(P＜0.001)、51.8％(P＜0.001)，最大聚集抑制50％所需的剂量(ED50)为3.6g/kg；能明显抑制花生四烯酸诱导的血小板聚集，抑制率分别为20.9％(P＜0.05)、53.0％(P＜0.001)、69.3％(P＜0.001)，其ED50为1.9g/kg；能抑制胶原诱导的血小板聚集，抑制率分别为22.3％(P＜0.05)、32.9％(P＜0.001)、53.2％(P＜0.001)，其ED50为3.7g/kg。
本品能延长电刺激颈动脉内膜损伤所导致的实验性动脉血栓形成，注射用红景天1、2、4g生药/kg使动脉血栓形成时间分别延长20.1％(P＞0.05)、41.6％(P＜0.001)、54.0％(P＜0.001)。
在高分子右旋糖苷引起的高粘血症大鼠模型上，本品可明显降低血流变异常大鼠的全血粘度及红细胞聚集指数。注射用红景天2、4、8g生药/kg，切变率在1s-1时，增加的全血粘度分别下降了62.2％、74.0％、84.5％，切变率在5s-1时，增加的全血粘度分别下降了39.2％、87.4％、93.1％。增加的红细胞聚集指数分别下降了57.8％、115.6％、137.5％，提示了红景天能减轻高分子右旋糖酐诱导的红细胞聚集性。
1.3注射用红景天对血流动力学的影响血流动力学研究表明，静脉输注红景天注射液1、2g生药/kg对麻醉开胸犬血流动力学各项指标无明显影响，4g生药/kg给药后出现一过性血压下降，并明显降低总外周阻力及冠脉阻力，其它指标无明显变化。
结论为注射用红景天具有明显抗心肌缺血作用和活血化瘀作用。
2一般药理学2.1中枢神经系统用小鼠研究本品对中枢神经系统的影响，结果表明单次尾静脉注射红景天注射液3、6、12g生药/kg对小鼠一般行为、自主活动及平衡均无显著影响，对阈下剂量的戊巴妥钠也无协同催眠作用。
2.2心血管系统用麻醉杂种犬研究本品对心血管系统的影响，结果表明单次静脉输注红景天4、8、16g生药/kg对麻醉犬心率、心电力图波形均无明显影响，但系统血压出现一过性下降，高剂量组平均约下降8mmHg，10min后基本完全恢复。
2.3呼吸系统用麻醉杂种犬研究本品对呼吸系统的影响，结果表明单次静脉输注工景天4、8、16g生药/kg对麻醉犬呼吸频率及幅度均无明显影响。
结论为药效学有效剂量下，红景天对神经系统、呼吸系统无明显不利影响，输注初期除出现一过性血压下降外，对心血管系统其它参数也无明显不利影响。
3急性毒性小鼠单次静脉推注或腹腔注射过量的红景天后出挣扎、惊跳、眼球凸出、眼脸下垂，活动减少，静卧不动，呼吸急促等中毒症状；静注给药后1h、腹腔注射2天内上述症状完全消失。死亡出现在静注给药后5min内或腹腔注射给药后的前2天。小鼠单次静脉及腹腔注射红景天的LD50分别为176.4(168.7～184.5)g、207.3(195.7～219.5)g生药/kg。小鼠静注给药的LD50约为临床用药剂量的320倍。
4长期毒性4.1大鼠给大鼠连续腹腔注射注射用红景天10、25、75g生药/kg/d，每天1次。连续给药30天，观察一般药物反应，检测血液学、血液生化以及病理组织学等指标。结果表明，75g生药/kg/d剂量组大鼠在最初几次给药后约10分钟，绝大多数大鼠出现扭体、步态不稳(可能与扭体有关)、静卧、呼吸加深、呼吸快慢不规则，约6h恢复正常；25g生药/kg/d剂量组亦出现上述症状，但程度较轻；给药10天后上述症状明显减轻或消失。75g生药/kg/d剂量组大鼠体重增长缓慢，连续腹腔给药30天，血清胆红素含量升高，雌性大鼠与对照组比较淋巴细胞百分数降低、中性白细胞百分数增加，肝、脾系数高于生理对照组，上述症状停药可恢复正常。病理组织学检查表明，肉眼观察及镜检75g生药/kg/d、25g生药/kg/d剂量组个别大鼠腹腔出现粘连和腹膜炎(与给药途径有关)，停药恢复症状减轻。10g生药/kg/d剂量组未见异常反应，停药恢复也未见延迟毒性产生，为大鼠安全无毒性反应剂量。
4.2比格狗比格狗24只，随机分为4组，每组6只，雌雄各半，连续静脉给予注射用红景天，每天1次，连续30天，剂量分别为108、36、12g生药/kg/d，各组给予同体积不同浓度的药物，给药体积为5ml/kg，20-30分钟滴注完。结果发现108g生药/kg/d剂量组动物出现伸舌、恶心和较严重的流涎，部分动物(2/6)呕吐，药后动物出现步态不稳，活动减少，个别动物出现伏卧；血液学检查见有血小板数(PLT)明显降低，血小板数(PLT)降低与给药剂量间存在有明显的剂量关系，血红蛋白(Hb)、红细胞数(RBC)、红细胞压积明显低于对照组，同时凝血时间(CT)延长；血液生化检查血糖较对照组明显升高，血清氯明显降低；心电图检查发现部分动物出现短时间内的T波波幅升高；静脉注射部位血管明显损伤，血管内大量纤维组织增生；动物胸腺萎缩，肺泡管轻度损伤；肾小管上皮细胞轻度浊肿，心肌间质血管轻度扩张淤血，肝血窦、淋巴窦扩张。36g生药/kg/d剂量组动物出现伸舌、吞咽等呕心症状，并有少量流涎，上述反应与剂量有明显关系；血液学检查发现血小板数(PLT)明显降低；血液生化检查发现血糖升高；病理组织学检查发现静脉注射部位血管损伤，血管内纤维组织增生，但较108g(生药)/kg剂量组动物明显减轻，同时见有胸腺萎缩、肺泡管轻度损伤，肝血窦枯否氏细胞增生肿胀，淋巴窦扩张。12g生药/kg/d剂量对动物精神、行为、饮食、粪便、体重、尿液生化等均未见明显影响；血液学检查、血液生化检查、眼科检查、心电图检查、骨髓像检查与对照组相比未见明显的变化；病理组织学检查亦未发现由药物引起的明显病理改变；该剂量为未观测到毒性反应的剂量。
结论为大鼠腹腔注射本品无毒性反应剂量为10g生药/kg/d；比格狗静脉注射本品无毒性反应剂量为生药12g生药/kg/d。
5特殊安全性家兔耳缘静脉给予注射用红景天，每天1次，3连续天，肉眼和病理组织学均证明注射部位未见明显局部刺激反应。兔溶血性试验结果表明，本品无溶血现象。豚鼠全身自动过敏试验表明，经3次腹腔给予注射用红景天致敏后，14天及21天后静脉给予注射用红景天进行攻击，未出现全身自动过敏反应；大鼠异种被动皮肤过敏试验表明，本品静注激发，也未见被动过敏反应发生，表明本品无致敏反应。
结论为本品无局部血管刺激性，无溶血，也无过敏原性。
权利要求
1.一种粉针剂，其特征在于其中包括红景天提取物和支架剂，其中红景天提取物的主要成分是红景天甙，在提取物中的含量至少为0.5％-10.0％，支架剂选自多元醇、多元醇酸、单糖、多糖、无机盐、聚醇、聚糖、羟基酸、聚酯、壳聚糖及其衍生物或它们的混合物。
2.根据权利要求1所述的产品，其特征在于红景天提取物流浸膏与支架剂的比例为1∶0.2至1.2。
3.根据权利要求1或2所述的产品，其特征在于支架剂选自甘露醇、右旋糖酐、葡萄糖、山梨醇、乳糖、明胶、磷酸氢二钠-磷酸二氢钠、乳糖酸钙、右旋糖酐-葡萄糖中之一种或它们的混合物。
4.根据权利要求3所述的产品，其特征在于支架剂磷酸氢二钠-磷酸二氢钠的组成为磷酸氢二钠∶磷酸二氢钠为3∶1至1∶3，支架剂右旋糖酐-葡萄糖的组成为右旋糖酐∶葡萄糖为3∶17至3∶1。
5.根据权利要求1或2所述的产品，其特征在于红景天提取物是用水、30％-80％乙醇或30％-80％甲醇提取红景天属植物的根或根茎，得到浸膏，并用以下方法之中的一种纯化后制得(1)流浸膏加95％乙醇至醇浓度达80％以上，放置10-24小时，优选低温冷藏10-24小时，滤过或离心，所得药液加入20-40％氢氧化钠，调pH至8.0左右，放置12-24小时，过滤，减压回收滤液，浓缩至比重为1.2-1.4浸膏；(2)流浸膏加入5％-10％明胶水溶液，搅拌均匀直至不再产生沉淀，低温5-10℃放置12-24小时，离心，过滤，减压回收溶剂，加入95％乙醇至醇浓度达80％～85％，过滤调pH＝8.0，放置12-24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4的浸膏；(3)流浸膏加70％乙醇稀释至3-4倍量体积，经过聚酰胺柱，合并流出液，调pH至8.0左右，放置12-24小时，过滤，减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4的浸膏；(4)流浸膏加入1％-5％ZTC澄清剂，搅匀，放置6-8小时，离心，过滤，加入95％乙醇至醇浓度达80％，低温冷藏10-12小时，离心、滤过，减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4的浸膏。
6.根据权利要求5所述的产品，其特征在于提取红景天所用的乙醇或甲醇的浓度为50％-70％。
7.制备红景天提取物的方法，其特征在于用水、30％-80％乙醇或30％-80％甲醇提取红景天属植物的根或根茎，得到流浸膏，所述提取为煎煮、回流、超声提取或渗漉，并用以下方法之中的一种纯化后制得(1)流浸膏加95％乙醇至醇浓度达70-80％以上，放置10-24小时，优选低温冷藏10-24小时，滤过或离心，所得药液加入20-40％氢氧化钠，调pH至8.0左右，放置12-24小时，过滤，减压回收滤液，浓缩至比重为1.2-1.4浸膏；(2)流浸膏加入5％-10％明胶水溶液，搅拌均匀直至不再产生沉淀，低温5-10℃放置12-24小时，离心，过滤，减压回收溶剂，加入95％乙醇至醇浓度达80％，调pH＝8.0，放置12-24小时，滤过，滤液减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4的浸膏；(3)流浸膏加70％乙醇稀释至3-4倍量体积，经过聚酰胺柱，合并流出液，调pH至8.0左右，放置12-24小时，过滤，减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4的浸膏；(4)流浸膏加入1％-5％ZTC澄清剂，搅匀，放置6-8小时，离心，过滤，加入95％乙醇至醇浓度达80％，低温冷藏10-12小时，离心、滤过，减压回收乙醇，得比重在1.2-1.4的浸膏。
8.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于提取所用的乙醇或甲醇的浓度为50％-70％。
9.制备权利要求1或2所述产品的方法，其特征在于如下进行取红景天提取物，加入支架剂，并加注射用水稀释，红景天提取物与水的重量比为1∶3-10，加热溶解，超滤，冷冻干燥，密封即得。
10.制备权利要求3-6中任一权利要求所述产品的方法，其特征在于如下进行取红景天提取物，加入支架剂，并加注射用水稀释，红景天提取物与水的重量比为1∶3-10，加热溶解，超滤，冷冻干燥，密封即得。
全文摘要
本发明涉及治疗冠心病的红景天粉针剂及其制备方法，本药物的活性成分为红景天甙，优选的支架剂为甘露醇、右旋糖酐、葡萄糖、山梨醇、乳糖、明胶、磷酸氢二钠－磷酸二氢钠、乳糖酸钙、右旋糖酐－葡萄糖中之一种或它们的混合物。红景天提取物与支架剂的比例为1∶0.2－1.2。
文档编号A61P9/10GK1593434SQ0315678
公开日2005年3月16日 申请日期2003年9月12日 优先权日2003年9月12日
发明者王健 申请人:王健
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