肿节风冻干粉针剂、肿节风大容量注射剂及其制备方法
专利名称：肿节风冻干粉针剂、肿节风大容量注射剂及其制备方法
技术领域：
本发明属中药注射制剂领域，具体涉及一种注射用肿节风冻干粉针剂、大容量注射剂及其制备方法。
背景技术：
本发明是从金粟兰科植物肿节风中提取的有效成分经冻干制成的粉针剂及其大容量注射剂。肿节风，又名九节风、九节茶、草珊瑚、接骨莲、抗肿一号等。主要成分有挥发油、香豆酮、黄酮苷、内酯、鞣酸等。其中挥发油、琥珀酸、延胡索酸、黄酮苷等是抗癌的有效成分。肿节风具有祛风通络、活血化瘀功能，并具有抗菌消炎作用、促进骨折愈合作用、调节免疫功能作用、对呼吸系统有止咳平喘的作用、增加胃液分泌量促进食欲、抗疲劳等作用现在上市的肿节风制剂中有片剂、胶囊、口服液和注射液，尚无注射用粉针剂和大容量注射剂。中药注射液存在着成分复杂、色泽不稳定、久贮易产生沉淀的弊病，且制剂中加入的助溶剂也有一定的毒副作用。在中国专利“肿节风粉针剂及其制备方法”(公开号CN1679841)中公开了一种肿节风粉针剂及其制备方法，其方法基本上是采用卫生部药品标准(WS3-2729-97)中的提取方法，包括加增溶剂。上述技术方案不仅制备工艺复杂，在精制过程中有效成分大量损失，而且添加的附加剂有一定的毒副作用，对人体不利。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于克服现有技术存在的缺陷，提供一种注射用肿节风冻干粉针剂、肿节风大容量注射剂及其制备方法，由于采用的制备工艺最大程度的除去了提取物中含有的杂质，解决了肿节风注射液久置易产生沉淀以及中药制剂中鞣质难除净的问题，所以产品中不含有增溶剂。
本发明通过以下技术方案实现发明目的肿节风冻干粉针剂，其特征在于它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体1～4ml加药用辅料50～150mg经冻干制成；所述中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml之间，所述药用辅料为葡萄糖、乳糖、山梨醇、甘露醇、低分子右旋糖苷、水解明胶中的一种或一种以上。
肿节风大容量注射剂，其特征在于它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体5～10ml加药用辅料葡萄糖(5～25g)、氯化钠(0.9～4.5g)中的一种或二种，再加注射用水至100ml～500ml制成。其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml之间。
制备肿节风冻干粉针剂的方法，包括以下步骤A、取肿节风干药材，打成20～80目粗粉，加水浸泡，在60～100℃温度下煎煮，滤过，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱或单过阴离子树脂柱，先用2～4倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.01～1.0mol/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至4～9，加0.05％～0.1％药用活性炭60～100℃吸附脱色15～30min，测定含量，得肿节风提取中间体，所述中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml之间；B、取上述肿节风提取中间体，加药用辅料，用注射用水调节至药液含反丁烯二酸40～160μg/ml，经除菌过滤，灌装于5ml西林瓶中，冷冻干燥，压塞，压盖，即得。
制备肿节风大容量注射剂的方法，包括以下步骤取上述肿节风提取中间体5～10ml加药用辅料葡萄糖(5～25g)、氯化钠(0.9～4.5g)中的一种或二种，再加注射用水至100ml～500ml，调pH至3.2～7.0，经0.05％～0.1％活性炭吸附热原后，再经粗滤、精滤，灌封于输液瓶中，灭菌，即得。
上述方法中所用阳离子树脂为强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂。阴离子树脂为强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂。
上述方法中所用阴树脂洗脱液为0.01～1.0mol/L盐酸溶液。
上述方法中所用药用活性炭为药用粉末活性炭。药用活性炭吸附的pH值为4～9。
在肿节风中间体的制备中，我们采用离子交换的方法，提高了有效成分的收率，同时减少了提取步骤，缩短了生产周期，最大程度的除去了提取物中含有的杂质，改善了产品的外观，使有效成分的提取率达到87～90％(按老工艺制备，最高收率为59.2％)。由于采用的制备工艺最大程度的除去了提取物中含有的杂质，解决了肿节风注射液久置易产生沉淀的问题，所以产品中不含有增溶剂。符合注射剂的辅料应尽量简单的原则，同时也减少了药用辅料可能产生的毒副作用。
用该工艺制备的肿节风制剂，经加速试验6个月及长期放样18个月，澄明度及各项指标均合格，说明本工艺生产的注射液稳定性良好。试验情况见附表3。
具体实施例方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明。
实施例1一种肿节风冻干粉针剂，它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体1ml加药用辅料葡萄糖50mg经冻干制成。其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml.之间实施例2一种肿节风冻干粉针剂，它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体4ml加药用辅料山梨醇150mg经冻干制成，其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml.之间实施例3一种肿节风冻干粉针剂，它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体2ml加药用辅料低分子右旋糖苷100mg重量份经冻干制成，其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml之间。
实施例4一种肿节风冻干粉针剂，它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体3ml加药用辅料乳糖80mg经冻干制成，其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml.之间实施例5一种肿节风冻干粉针剂，它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体3ml加药用辅料葡萄糖40mg、乳糖40mg、山梨醇30mg、甘露醇20mg、低分子右旋糖苷10mg、水解明胶10mg经冻干制成，其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml.之间实施例6一种肿节风冻干粉针剂，它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体3ml加药用辅料甘露醇80mg、乳糖40mg经冻干制成，其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml.之间实施例7一种肿节风冻干粉针剂，它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体3ml加药用辅料水解明胶60mg经冻干制成，其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml.之间实施例8制备肿节风冻干粉针剂的方法，其制备步骤为A、取肿节风干药材，打成20目粗粉，加5倍水浸泡12小时，在60℃温度煎煮3次，每次1小时，滤过，合并滤液，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱，先用2倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.01mol/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至4.0，加0.05％药用活性炭60℃吸附脱色15min，测定含量，得肿节风提取中间体；B、取上述肿节风提取中间体1ml，加乳糖50mg，用注射用水调节至含反丁烯二酸60μg/ml，经除菌过滤，灌装于5ml西林瓶中，冷冻干燥，压塞，压盖，即得。
实施例9制备肿节风冻干粉针剂的方法，其制备步骤为A、取肿节风干药材，打成40目粗粉，加7倍水浸泡8小时，在80℃煎煮3次，每次2小时，滤过，合并滤液，过阴离子树脂柱，先用3倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.5mol/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至6.0，加0.08％药用活性炭80℃吸附脱色20min，测定含量，得肿节风提取中间体；B、取上述肿节风提取中间体2ml，加山梨醇100mg，用注射用水调节至含反丁烯二酸120μg/ml，经除菌过滤，灌装于5ml西林瓶中，冷冻干燥，压塞，压盖，即得。
实施例10制备肿节风冻干粉针剂的方法，其制备步骤为A、取肿节风干药材，打成80目粗粉，加10倍水浸泡12小时，在100℃煎煮2次，每次2小时，滤过，合并滤液，过阴离子树脂柱，先用4倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用1.0mol/L HC1溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至9，加0.1％药用活性炭100℃吸附脱色30min，测定含量，得肿节风提取中间体；B、取上述肿节风提取中间体1ml，加甘露醇150mg，用注射用水调节至含反丁烯二酸240μg/ml，经除菌过滤，灌装于5ml西林瓶中，冷冻干燥，压塞，压盖，即得。
实施例11制备肿节风大容量注射剂的方法，其步骤为A、取肿节风干药材，打成20目粗粉，加5倍水浸泡12小时，在60℃温度煎煮3次，每次1小时，滤过，合并滤液，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱，先用2倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.01mol/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至4，加0.05％药用活性炭60℃吸附脱色15min，测定含量，得肿节风提取中间体；B、取上述肿节风提取中间体5ml，加葡萄糖5g，加注射用水至100ml，调pH至3.2-5.5，加0.05％药用活性炭60℃吸附脱色15min，再经粗滤、精滤，灌封于输液瓶中，灭菌，即得。
实施例12制备肿节风大容量注射剂的方法，其步骤为A、取肿节风干药材，打成20目粗粉，加5倍水浸泡12小时，在60℃温度煎煮3次，每次1小时，滤过，合并滤液，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱，先用2倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.01mo l/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至4，加0.05％药用活性炭60℃吸附脱色15min，测定含量，得肿节风提取中间体；B、取上述肿节风提取中间体10ml，加葡萄糖25g，加注射用水至500ml，调pH至3.2-5.5，加0.1％药用活性炭60℃吸附脱色15min，再经粗滤、精滤，灌封于输液瓶中，灭菌，即得。
实施例13制备肿节风大容量注射剂的方法，其步骤为A、取肿节风干药材，打成20目粗粉，加8倍水浸泡12小时，在60℃温度煎煮3次，每次1小时，滤过，合并滤液，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱，先用2倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.01mol/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至5，加0.05％药用活性炭60℃吸附脱色15min，测定含量，得肿节风提取中间体；B、取上述肿节风提取中间体6ml，加入氯化钠2.25g，加注射用水至250ml，调pH至4.5-7.0，加0.1％药用活性炭60℃吸附脱色15min，再经粗滤、精滤，灌封于输液瓶中，灭菌，即得。
实施例14制备肿节风大容量注射剂的方法，其步骤为A、取肿节风干药材，打成20目粗粉，加8倍水浸泡12小时，在60℃温度煎煮3次，每次1小时，滤过，合并滤液，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱，先用2倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.01mol/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至5，加0.05％药用活性炭60℃吸附脱色15min，测定含量，得肿节风提取中间体；B、取上述肿节风提取中间体8ml，加入氯化钠4.5g，加注射用水至500ml，调pH至4.5-7.0，加0.1％药用活性炭60℃吸附脱色15min，再经粗滤、精滤，灌封于输液瓶中，灭菌，即得。
主要药效学试验本发明进行了抗菌消炎、抗肿瘤等方面的研究，研究结果表明肿节风具有广谱抗菌作用，其中对金黄色葡萄球菌、志贺氏痢疾杆菌I极为敏感，对金葡耐菌株、鲍氏痢疾杆菌C-2型、副伤寒甲型高敏。
肿节风对S180肉瘤的抑制率为27％-29％，对HePA实体瘤的抑制率为25.00％-36.25％、对EAC小鼠生命延长率为21.95％-27.64％.
毒性试验对肿节风粉针进行了急性毒性试验，结果表明小鼠经注射LD50测定属无毒范围，小鼠精子畸形试验、小鼠骨髓细胞微核试验、Ames试验均为阴性，未发现致突变性，对人体肝肾功能、血压、脉搏等均无明显损坏。
溶血性试验试验目的观察肿节风冻干粉针的溶血性。
试验动物及材料动物大耳白兔1只，成年健康，体重3.0kg左右。
药物(1)肿节风冻干粉针规格60μg，动物试验临用时加入到5％的葡萄注射液中；(2)肿节风冻干粉针规格120μg，动物试验临用时加入到5％的葡萄注射液中；(3)0.9％氯化钠注射液。
试验方法每组取试管8只，按表3配比量依次加入2％红细胞混悬液和生理盐水，混匀后，于37℃恒温箱放置半小时，然后分别加入不同量的药液(第8管为阳性对照管)，摇匀后，置37℃恒温箱中。开始每隔15分钟观察一次，1小时后，每隔1小时观察一次，观察4小时，如溶液呈透明红色，即表示溶血，如溶液中有棕红色絮状沉淀，表示有红细胞凝聚作用。加药方法见表1表1 溶血性试验的药液加入方法
*8号管为2.5ml蒸馏水试验结果经观察在4小时内肿节风冻干粉针无溶血现象发生。观察结果见表2。
表2 溶血性试验结果
注(-)为不溶血，(+)为溶血，第8管为空白对照管结论肿节风冻干粉针不引起兔红细胞溶血反应。
附表3
权利要求
1.一种肿节风冻干粉针剂，其特征在于它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体1～4ml加药用辅料50～150mg经冻干制成；所述中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml之间，所述药用辅料为葡萄糖、乳糖、山梨醇、甘露醇、低分子右旋糖苷、水解明胶中的一种或一种以上。
2.一种肿节风大容量注射剂，其特征在于它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体5～10ml加药用辅料葡萄糖5～25g、氯化钠0.9～4.5g中的一种或二种，再加注射用水至100ml-500ml制成；所述中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml之间。
3.一种制备权利要求1所述的肿节风冻干粉针剂的方法，其特征在于包括以下步骤A、取肿节风干药材，打成20～80目粗粉，加水浸泡，在60～100℃温度煎煮，滤过，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱或单过阴离子树脂柱，先用2～4倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.01～1.0mol/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至4～9，加0.05％～0.1％药用活性炭60～100℃吸附脱色15～30min，测定含量，得肿节风提取中间体，其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml之间；B、取上述肿节风提取中间体1～4ml，加药用辅料50～150mg，用注射用水调节至药液含反丁烯二酸40～160μg/ml，经除菌过滤，灌装于5ml西林瓶中，冷冻干燥，压塞，压盖，即得。
4.根据权利要求3所述的制备权利要求1所述的肿节风冻干粉针剂的方法，其中阳离子树脂为强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂，阴离子树脂为强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂；所述阴树脂洗脱液为0.01～1.0mol/L盐酸溶液；所述药用活性炭为药用粉末活性炭，药用活性炭吸附的pH值为4～9。
5.一种制备权利要求2所述的肿节风大容量注射剂的方法，其特征在于包括以下步骤A.取肿节风干药材，打成20～80目粗粉，加水浸泡，在60～100℃温度煎煮，滤过，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱或单过阴离子树脂柱，先用2～4倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.01～1.0mol/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至4～9，加0.05％～0.1％药用活性炭60～100℃吸附脱色15～30min，测定含量，得肿节风提取中间体，其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml.之间；B.取上述肿节风提取中间体5-10ml，加药用辅料葡萄糖5～25g、氯化钠0.9～4.5g中的一种或二种，再加注射用水至100ml-500ml；经除菌过滤，灌装于输液瓶中，压塞，压盖，灭菌即得。
6.根据权利要求5所述的制备权利要求2所述的肿节风大容量注射剂的方法，其中阳离子树脂为强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂，阴离子树脂为强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂；所述阴树脂洗脱液为0.01～1.0mol/L盐酸溶液；所述药用活性炭为药用粉末活性炭，药用活性炭吸附的pH值为4～9。
全文摘要
本发明公开了肿节风冻干粉针剂、肿节风大容量注射剂及其制备方法。两种注射剂均是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体加药用辅料制成，不含增溶剂。其制备方法是取肿节风干药材打成粗粉，加水浸泡，低温煎煮，滤过，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱或单过阴离子树脂柱，先用注射用水洗涤，再用HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至4～9，加药用活性炭60～100℃吸附脱色；再加药用辅料制成。用该方法制备肿节风中间体，有效成分收率高，提取步骤减少，最大程度地除去了提取物中含有的杂质，解决了肿节风注射液久置易产生沉淀的问题，产品中不含有增溶剂，减少了药用辅料可能产生的毒副作用。
文档编号A61P1/14GK1813831SQ20051012300
公开日2006年8月9日 申请日期2005年12月13日 优先权日2005年12月13日
发明者高恒, 张凤侠, 谈学兵, 周露 申请人:南京虹桥医药技术研究所
技术领域：
本发明属中药注射制剂领域，具体涉及一种注射用肿节风冻干粉针剂、大容量注射剂及其制备方法。
背景技术：
本发明是从金粟兰科植物肿节风中提取的有效成分经冻干制成的粉针剂及其大容量注射剂。肿节风，又名九节风、九节茶、草珊瑚、接骨莲、抗肿一号等。主要成分有挥发油、香豆酮、黄酮苷、内酯、鞣酸等。其中挥发油、琥珀酸、延胡索酸、黄酮苷等是抗癌的有效成分。肿节风具有祛风通络、活血化瘀功能，并具有抗菌消炎作用、促进骨折愈合作用、调节免疫功能作用、对呼吸系统有止咳平喘的作用、增加胃液分泌量促进食欲、抗疲劳等作用现在上市的肿节风制剂中有片剂、胶囊、口服液和注射液，尚无注射用粉针剂和大容量注射剂。中药注射液存在着成分复杂、色泽不稳定、久贮易产生沉淀的弊病，且制剂中加入的助溶剂也有一定的毒副作用。在中国专利“肿节风粉针剂及其制备方法”(公开号CN1679841)中公开了一种肿节风粉针剂及其制备方法，其方法基本上是采用卫生部药品标准(WS3-2729-97)中的提取方法，包括加增溶剂。上述技术方案不仅制备工艺复杂，在精制过程中有效成分大量损失，而且添加的附加剂有一定的毒副作用，对人体不利。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于克服现有技术存在的缺陷，提供一种注射用肿节风冻干粉针剂、肿节风大容量注射剂及其制备方法，由于采用的制备工艺最大程度的除去了提取物中含有的杂质，解决了肿节风注射液久置易产生沉淀以及中药制剂中鞣质难除净的问题，所以产品中不含有增溶剂。
本发明通过以下技术方案实现发明目的肿节风冻干粉针剂，其特征在于它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体1～4ml加药用辅料50～150mg经冻干制成；所述中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml之间，所述药用辅料为葡萄糖、乳糖、山梨醇、甘露醇、低分子右旋糖苷、水解明胶中的一种或一种以上。
肿节风大容量注射剂，其特征在于它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体5～10ml加药用辅料葡萄糖(5～25g)、氯化钠(0.9～4.5g)中的一种或二种，再加注射用水至100ml～500ml制成。其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml之间。
制备肿节风冻干粉针剂的方法，包括以下步骤A、取肿节风干药材，打成20～80目粗粉，加水浸泡，在60～100℃温度下煎煮，滤过，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱或单过阴离子树脂柱，先用2～4倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.01～1.0mol/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至4～9，加0.05％～0.1％药用活性炭60～100℃吸附脱色15～30min，测定含量，得肿节风提取中间体，所述中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml之间；B、取上述肿节风提取中间体，加药用辅料，用注射用水调节至药液含反丁烯二酸40～160μg/ml，经除菌过滤，灌装于5ml西林瓶中，冷冻干燥，压塞，压盖，即得。
制备肿节风大容量注射剂的方法，包括以下步骤取上述肿节风提取中间体5～10ml加药用辅料葡萄糖(5～25g)、氯化钠(0.9～4.5g)中的一种或二种，再加注射用水至100ml～500ml，调pH至3.2～7.0，经0.05％～0.1％活性炭吸附热原后，再经粗滤、精滤，灌封于输液瓶中，灭菌，即得。
上述方法中所用阳离子树脂为强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂。阴离子树脂为强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂。
上述方法中所用阴树脂洗脱液为0.01～1.0mol/L盐酸溶液。
上述方法中所用药用活性炭为药用粉末活性炭。药用活性炭吸附的pH值为4～9。
在肿节风中间体的制备中，我们采用离子交换的方法，提高了有效成分的收率，同时减少了提取步骤，缩短了生产周期，最大程度的除去了提取物中含有的杂质，改善了产品的外观，使有效成分的提取率达到87～90％(按老工艺制备，最高收率为59.2％)。由于采用的制备工艺最大程度的除去了提取物中含有的杂质，解决了肿节风注射液久置易产生沉淀的问题，所以产品中不含有增溶剂。符合注射剂的辅料应尽量简单的原则，同时也减少了药用辅料可能产生的毒副作用。
用该工艺制备的肿节风制剂，经加速试验6个月及长期放样18个月，澄明度及各项指标均合格，说明本工艺生产的注射液稳定性良好。试验情况见附表3。
具体实施例方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步详细说明。
实施例1一种肿节风冻干粉针剂，它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体1ml加药用辅料葡萄糖50mg经冻干制成。其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml.之间实施例2一种肿节风冻干粉针剂，它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体4ml加药用辅料山梨醇150mg经冻干制成，其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml.之间实施例3一种肿节风冻干粉针剂，它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体2ml加药用辅料低分子右旋糖苷100mg重量份经冻干制成，其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml之间。
实施例4一种肿节风冻干粉针剂，它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体3ml加药用辅料乳糖80mg经冻干制成，其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml.之间实施例5一种肿节风冻干粉针剂，它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体3ml加药用辅料葡萄糖40mg、乳糖40mg、山梨醇30mg、甘露醇20mg、低分子右旋糖苷10mg、水解明胶10mg经冻干制成，其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml.之间实施例6一种肿节风冻干粉针剂，它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体3ml加药用辅料甘露醇80mg、乳糖40mg经冻干制成，其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml.之间实施例7一种肿节风冻干粉针剂，它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体3ml加药用辅料水解明胶60mg经冻干制成，其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml.之间实施例8制备肿节风冻干粉针剂的方法，其制备步骤为A、取肿节风干药材，打成20目粗粉，加5倍水浸泡12小时，在60℃温度煎煮3次，每次1小时，滤过，合并滤液，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱，先用2倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.01mol/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至4.0，加0.05％药用活性炭60℃吸附脱色15min，测定含量，得肿节风提取中间体；B、取上述肿节风提取中间体1ml，加乳糖50mg，用注射用水调节至含反丁烯二酸60μg/ml，经除菌过滤，灌装于5ml西林瓶中，冷冻干燥，压塞，压盖，即得。
实施例9制备肿节风冻干粉针剂的方法，其制备步骤为A、取肿节风干药材，打成40目粗粉，加7倍水浸泡8小时，在80℃煎煮3次，每次2小时，滤过，合并滤液，过阴离子树脂柱，先用3倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.5mol/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至6.0，加0.08％药用活性炭80℃吸附脱色20min，测定含量，得肿节风提取中间体；B、取上述肿节风提取中间体2ml，加山梨醇100mg，用注射用水调节至含反丁烯二酸120μg/ml，经除菌过滤，灌装于5ml西林瓶中，冷冻干燥，压塞，压盖，即得。
实施例10制备肿节风冻干粉针剂的方法，其制备步骤为A、取肿节风干药材，打成80目粗粉，加10倍水浸泡12小时，在100℃煎煮2次，每次2小时，滤过，合并滤液，过阴离子树脂柱，先用4倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用1.0mol/L HC1溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至9，加0.1％药用活性炭100℃吸附脱色30min，测定含量，得肿节风提取中间体；B、取上述肿节风提取中间体1ml，加甘露醇150mg，用注射用水调节至含反丁烯二酸240μg/ml，经除菌过滤，灌装于5ml西林瓶中，冷冻干燥，压塞，压盖，即得。
实施例11制备肿节风大容量注射剂的方法，其步骤为A、取肿节风干药材，打成20目粗粉，加5倍水浸泡12小时，在60℃温度煎煮3次，每次1小时，滤过，合并滤液，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱，先用2倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.01mol/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至4，加0.05％药用活性炭60℃吸附脱色15min，测定含量，得肿节风提取中间体；B、取上述肿节风提取中间体5ml，加葡萄糖5g，加注射用水至100ml，调pH至3.2-5.5，加0.05％药用活性炭60℃吸附脱色15min，再经粗滤、精滤，灌封于输液瓶中，灭菌，即得。
实施例12制备肿节风大容量注射剂的方法，其步骤为A、取肿节风干药材，打成20目粗粉，加5倍水浸泡12小时，在60℃温度煎煮3次，每次1小时，滤过，合并滤液，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱，先用2倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.01mo l/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至4，加0.05％药用活性炭60℃吸附脱色15min，测定含量，得肿节风提取中间体；B、取上述肿节风提取中间体10ml，加葡萄糖25g，加注射用水至500ml，调pH至3.2-5.5，加0.1％药用活性炭60℃吸附脱色15min，再经粗滤、精滤，灌封于输液瓶中，灭菌，即得。
实施例13制备肿节风大容量注射剂的方法，其步骤为A、取肿节风干药材，打成20目粗粉，加8倍水浸泡12小时，在60℃温度煎煮3次，每次1小时，滤过，合并滤液，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱，先用2倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.01mol/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至5，加0.05％药用活性炭60℃吸附脱色15min，测定含量，得肿节风提取中间体；B、取上述肿节风提取中间体6ml，加入氯化钠2.25g，加注射用水至250ml，调pH至4.5-7.0，加0.1％药用活性炭60℃吸附脱色15min，再经粗滤、精滤，灌封于输液瓶中，灭菌，即得。
实施例14制备肿节风大容量注射剂的方法，其步骤为A、取肿节风干药材，打成20目粗粉，加8倍水浸泡12小时，在60℃温度煎煮3次，每次1小时，滤过，合并滤液，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱，先用2倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.01mol/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至5，加0.05％药用活性炭60℃吸附脱色15min，测定含量，得肿节风提取中间体；B、取上述肿节风提取中间体8ml，加入氯化钠4.5g，加注射用水至500ml，调pH至4.5-7.0，加0.1％药用活性炭60℃吸附脱色15min，再经粗滤、精滤，灌封于输液瓶中，灭菌，即得。
主要药效学试验本发明进行了抗菌消炎、抗肿瘤等方面的研究，研究结果表明肿节风具有广谱抗菌作用，其中对金黄色葡萄球菌、志贺氏痢疾杆菌I极为敏感，对金葡耐菌株、鲍氏痢疾杆菌C-2型、副伤寒甲型高敏。
肿节风对S180肉瘤的抑制率为27％-29％，对HePA实体瘤的抑制率为25.00％-36.25％、对EAC小鼠生命延长率为21.95％-27.64％.
毒性试验对肿节风粉针进行了急性毒性试验，结果表明小鼠经注射LD50测定属无毒范围，小鼠精子畸形试验、小鼠骨髓细胞微核试验、Ames试验均为阴性，未发现致突变性，对人体肝肾功能、血压、脉搏等均无明显损坏。
溶血性试验试验目的观察肿节风冻干粉针的溶血性。
试验动物及材料动物大耳白兔1只，成年健康，体重3.0kg左右。
药物(1)肿节风冻干粉针规格60μg，动物试验临用时加入到5％的葡萄注射液中；(2)肿节风冻干粉针规格120μg，动物试验临用时加入到5％的葡萄注射液中；(3)0.9％氯化钠注射液。
试验方法每组取试管8只，按表3配比量依次加入2％红细胞混悬液和生理盐水，混匀后，于37℃恒温箱放置半小时，然后分别加入不同量的药液(第8管为阳性对照管)，摇匀后，置37℃恒温箱中。开始每隔15分钟观察一次，1小时后，每隔1小时观察一次，观察4小时，如溶液呈透明红色，即表示溶血，如溶液中有棕红色絮状沉淀，表示有红细胞凝聚作用。加药方法见表1表1 溶血性试验的药液加入方法
*8号管为2.5ml蒸馏水试验结果经观察在4小时内肿节风冻干粉针无溶血现象发生。观察结果见表2。
表2 溶血性试验结果
注(-)为不溶血，(+)为溶血，第8管为空白对照管结论肿节风冻干粉针不引起兔红细胞溶血反应。
附表3
权利要求
1.一种肿节风冻干粉针剂，其特征在于它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体1～4ml加药用辅料50～150mg经冻干制成；所述中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml之间，所述药用辅料为葡萄糖、乳糖、山梨醇、甘露醇、低分子右旋糖苷、水解明胶中的一种或一种以上。
2.一种肿节风大容量注射剂，其特征在于它是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体5～10ml加药用辅料葡萄糖5～25g、氯化钠0.9～4.5g中的一种或二种，再加注射用水至100ml-500ml制成；所述中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml之间。
3.一种制备权利要求1所述的肿节风冻干粉针剂的方法，其特征在于包括以下步骤A、取肿节风干药材，打成20～80目粗粉，加水浸泡，在60～100℃温度煎煮，滤过，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱或单过阴离子树脂柱，先用2～4倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.01～1.0mol/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至4～9，加0.05％～0.1％药用活性炭60～100℃吸附脱色15～30min，测定含量，得肿节风提取中间体，其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml之间；B、取上述肿节风提取中间体1～4ml，加药用辅料50～150mg，用注射用水调节至药液含反丁烯二酸40～160μg/ml，经除菌过滤，灌装于5ml西林瓶中，冷冻干燥，压塞，压盖，即得。
4.根据权利要求3所述的制备权利要求1所述的肿节风冻干粉针剂的方法，其中阳离子树脂为强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂，阴离子树脂为强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂；所述阴树脂洗脱液为0.01～1.0mol/L盐酸溶液；所述药用活性炭为药用粉末活性炭，药用活性炭吸附的pH值为4～9。
5.一种制备权利要求2所述的肿节风大容量注射剂的方法，其特征在于包括以下步骤A.取肿节风干药材，打成20～80目粗粉，加水浸泡，在60～100℃温度煎煮，滤过，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱或单过阴离子树脂柱，先用2～4倍阴离子树脂量注射用水洗涤，再用0.01～1.0mol/L HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至4～9，加0.05％～0.1％药用活性炭60～100℃吸附脱色15～30min，测定含量，得肿节风提取中间体，其中间体中含反丁烯二酸的含量在60～2400μg/ml.之间；B.取上述肿节风提取中间体5-10ml，加药用辅料葡萄糖5～25g、氯化钠0.9～4.5g中的一种或二种，再加注射用水至100ml-500ml；经除菌过滤，灌装于输液瓶中，压塞，压盖，灭菌即得。
6.根据权利要求5所述的制备权利要求2所述的肿节风大容量注射剂的方法，其中阳离子树脂为强酸性苯乙烯系阳离子交换树脂，阴离子树脂为强碱性苯乙烯系阴离子交换树脂；所述阴树脂洗脱液为0.01～1.0mol/L盐酸溶液；所述药用活性炭为药用粉末活性炭，药用活性炭吸附的pH值为4～9。
全文摘要
本发明公开了肿节风冻干粉针剂、肿节风大容量注射剂及其制备方法。两种注射剂均是由中药肿节风提取的反丁烯二酸作活性成分的中间体加药用辅料制成，不含增溶剂。其制备方法是取肿节风干药材打成粗粉，加水浸泡，低温煎煮，滤过，依次过阳离子树脂柱和阴离子树脂柱或单过阴离子树脂柱，先用注射用水洗涤，再用HCl溶液洗涤阴树脂柱，收集洗脱液，用氢氧化钠溶液调pH至4～9，加药用活性炭60～100℃吸附脱色；再加药用辅料制成。用该方法制备肿节风中间体，有效成分收率高，提取步骤减少，最大程度地除去了提取物中含有的杂质，解决了肿节风注射液久置易产生沉淀的问题，产品中不含有增溶剂，减少了药用辅料可能产生的毒副作用。
文档编号A61P1/14GK1813831SQ20051012300
公开日2006年8月9日 申请日期2005年12月13日 优先权日2005年12月13日
发明者高恒, 张凤侠, 谈学兵, 周露 申请人:南京虹桥医药技术研究所
最新回复(0)