阿尔比多亚砜及其盐在制备预防和治疗呼吸道病毒感染药物中的应用的制作方法
专利名称：阿尔比多亚砜及其盐在制备预防和治疗呼吸道病毒感染药物中的应用的制作方法
技术领域：
本发明属医药领域，具体涉及阿尔比多亚砜或其生理相容的酸加合盐在制备预防和治疗呼吸道病毒感染药物中的应用。
背景技术：
感冒是由病毒引起的一种严重危害人类健康的急性呼吸道传染病，发病率占所有呼吸道传染病的首位，往往造成季节性大流行。历史上流感大规模流行曾给人类带来深重灾难，现在全世界每年仍有大约10％的人患流感，即约5亿多人感染流感病毒。仅美国每年就因流感损失数百万个工作日，导致2万-4万人死亡，30万人住院，流感已成为致死率最高的病毒传染病之一。
流感可引起很多合并症，如继发细菌感染，引起咽喉炎、中耳炎、鼻窦炎和支气管炎。严重感染者可引起病毒性肺炎，尤其是对老年人、慢性病人和小孩。流感还可使原有的慢性病加重，包括心脏病、肺病、肾脏疾病和糖尿病，可导致相应器官功能的衰竭。
对于流感的治疗，临床上多数是对症治疗及预防继发感染，而缺乏病因治疗药。国内外的研究方向有三种疫苗、干扰素和抗病毒化疗药物。由于流感病毒抗原的易变性和急性呼吸道病毒感染的多重性，造成开发疫苗难以逾越的障碍。而干扰素由于来源、给药剂量、副作用等原因，限制了它在流感防治上的应用。因此，开发抗病毒化疗药物是防治流感的重要方向。
目前临床上使用的抗病毒化疗药物有核苷类(如利巴韦林)、金刚烷胺类、神经氨酸酶抑制剂、病毒受体阻断剂等。其中，口服核苷类抗病毒药物预防和治疗甲型流感效果不明显，虽在大剂量时，对甲型和乙型流感病毒有活性，但具有核苷类药物的致畸、致突变毒性，可引起贫血及免疫抑制；金刚烷胺类抗病毒药物仅对甲型流感有效，且易引起中枢神经系统毒性反应，迅速产生耐药毒株，并且这些化合物有交叉耐药性，从而降低了临床使用价值；神经氨酸酶抑制剂是一类新上市的目前在临床上应用较广，对甲型、乙型流感病毒均有效的抗病毒药物，但价格昂贵，且在老年人、儿童及高危病人身上使用经验不足，其中Oseltamivir(商品名为Tamiflu)发生频率较多的副作用是头疼，另外服用高剂量(主要是首次的剂量)的志愿者会有轻微或中等的一过性恶心，该药物目前正在做四期临床，其潜在抗药性的发展及临床和流行病特征都需进一步研究。
1992年在第八届地中海化疗会议和1993年第九届国际病毒学会议上，前苏联研究人员报告了新药盐酸阿尔比多的抗流感病毒活性。对甲型和乙型流感病毒复制均有很高的抑制率，可使小鼠流感病毒性肺炎的死亡率下降60-70％。据国外资料报道，新药盐酸阿尔比多用于防治流感和其它急性呼吸道病毒感染，具有以下特点1.对流感病毒甲型和乙型均有效。2.既有治疗作用，也有预防作用；3.兼有直接抑制病毒和诱导内源性干扰素的双重作用。4.可口服给药，使用方便。5.为非核苷类化合物，毒性低、耐受良好。是用于治疗甲、乙型病毒引起的流感和急性呼吸道病毒性感染的新型抗病毒药物。
阿尔比多在体内有多种代谢产物，其中在人体内主要是硫原子氧化成亚砜的化合物，及阿尔比多亚砜，其化学结构式如下经人体药代动力学研究，阿尔比多亚砜的血药浓度与阿尔比多的主要药效学特性更符合。而有关阿尔比多亚砜及其生理相容的酸加合盐的药效学方面的研究报道至今尚未见报道。
发明内容
本发明需要解决的技术问题是公开阿尔比多亚砜及其生理相容的酸加合盐的一种医药用途，具体地说是在制备预防和治疗呼吸道病毒感染药物中的应用，其特点是具有预防和治疗甲、乙型病毒引起的流感和急性呼吸道病毒性感染的作用。本发明使阿尔比多亚砜或其生理相容的酸加合盐可成为新的预防和治疗呼吸道病毒感染的药物。
本发明中用于制备预防和治疗呼吸道病毒感染药物的有效成分为阿尔比多亚砜。
在本发明所述的阿尔比多亚砜的生理相容的酸为盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、马来酸、富马酸、苯磺酸、苯甲酸、乙酸、琥珀酸、甲磺酸、草酸、柠檬酸、酒石酸、苹果酸或肉桂酸。
发明所述的阿尔比多亚砜的生理相容的酸加合盐中，含0-3分子结晶水。
本发明所述的阿尔比多亚砜或其生理相容的酸加合盐制备预防和治疗呼吸道病毒感染的药物的剂型可以为任何一种药剂学上所述的剂型，可以为为注射剂型、口服剂型、喷雾剂型、或滴液剂型。
本发明所述的阿尔比多亚砜及其生理相容的酸加合盐制备预防和治疗呼吸道病毒感染的药物时，可以添加药剂学上常用的填充剂、溶液、崩解剂、矫味剂、防腐剂、助溶剂、色素等。
本发明所述的阿尔比多亚砜及其生理相容的酸加合盐制备预防和治疗呼吸道病毒感染的药物时，可以和本专利权力要求中其他相容的一种可一种以上的治疗药物一起制成复方制剂。
本发明所述的阿尔比多亚砜及其生理相容的酸加合盐制备预防和治疗呼吸道病毒感染的药物时，与其他相容的治疗药物一起制成复方制剂的其他相容的治疗药物可以是非甾体类抗炎药物、抗过敏药物、伪麻黄碱或愈创木酚。
本发明的施用量可根据用药途径、患者的年龄、体重、所治疗的疾病的类型和严重程度等进行变化，其日剂量为20-1000mg(口服)或10-500mg(注射)。
具体实施例方式实施例一盐酸阿尔比多体外抗流感病毒实验研究一、材料与方法1、病毒流感病毒甲型(H1N1和H2N2)、乙型均引自中国预防医学科学院病毒所；流感病毒临床分离甲型病毒株，由河北省卫生防疫站提供；病毒接种鸡胚增毒后，收取尿囊液，-70℃保存备用。
2、MDCK细胞株引自中国药品生物制品检定所。
3、药物(1)阳性对照药病毒唑(RBV)，湖北科益制药厂产品，批号(010913)。
(2)实验药盐酸阿尔比多亚砜，本所提供，批号(020101)。
4、药物的配制用MEM培养液溶解，过滤除菌，加谷氨酰胺，青链霉素，NaHCO3，调pH7.2。
5、病毒毒力测定MDCK细胞消化计数后接种于96孔板，104个/ml，长成单层后，加入各病毒系列10倍稀释液，35℃，5％CO2培养3天，观察细胞病变(CPE)，测定病毒半数致细胞病变剂量(TCID50)。
6、药物毒性测定MDCK细胞单层，加入系列稀释药液5-7个浓度，37℃，5％CO2培养3天，每天观察细胞病变(CPE)。第3天中性红染色，用DG3022型酶联比色仪测OD540，测定药物致细胞最大无毒浓度(TC0)和半数中毒浓度(TC50)。
7、抗病毒的药效试验MDCK细胞单层，用Hanks液洗1-2次，加入100TCID50病毒，35℃，5％CO2培养2小时，吸去病毒，Hands液洗1-2次，加入最大无毒浓度药液2倍稀释液6个浓度，35℃，5％CO2培养，设阳性药对照，细胞对照、病毒对照及盐酸阿尔比多亚砜组，每天观察细胞病变。因预试验中发现盐酸阿尔比多亚砜在培养液中的溶解度随培养时间延长而降低，正式试验时第3天倾去培养基，加入中性经染色，测OD540，计算50％抑制病毒病变浓度(IC50)及治疗指数(TI)。
实验重复三次。
二、实验结果1、病毒毒力测定结果流感病毒甲型H1N1TCID50为10-4.8；流感病毒甲型H2N2TCID50为10-4.0；流感病毒甲型临床分离株TCID50为10-4.2；流感病毒乙型TCID50为基10-5.5(见表1)。
表1 流感病毒毒力测定结果病毒株病毒稀释度细胞病变 正常孔 累积 CPE百分比CPE孔CPE孔正常孔 (％)甲型H1N110-13 0 13 010010-23 0 10 010010-33 0 7 010010-42 1 4 180
10-51 2 2 34010-61 2 1 516.710-70 3 0 80甲型H2N210-16 0 21 010010-26 0 15 010010-35 1 9 19010-43 3 4 45010-51 5 1 91010-60 6 0 15 0乙型 10-13 0 15 010010-23 0 12 010010-33 0 9 010010-43 0 6 010010-52 1 3 17510-61 2 1 32510-70 3 0 60甲型临床 10-13 0 11 010010-23 0 8 010010-32 1 5 183.310-42 1 3 26010-51 2 1 42010-60 3 0 702、药物毒性测定结果盐酸阿尔比多亚砜的最大无毒浓度(TC0)为10.63μg/ml，TC50＝45.8μg/ml，病毒唑的TC0为630μg/ml，TC50＝2880μg/ml(结果见表2)。
表2药物细胞毒性测定结果药物浓度(μg/ml) n [OD]X±SD 病变百分比(％)TC(μg/ml)盐酸阿尔比多亚砜 340.00 60.037±0.008 98.06170.00 60.040±0.008 94.6585.00 60.198±0.009 75.66 45.842.50 60.291±0.009 46.8921.25 60.380±0.006 21.0610.63 60.462±0.0345.73病毒唑 10000 60.040±0.006 97.005000 60.237±0.015 73.912500 60.333±0.021 43.83 28801250 60.403±0.021 20.49630 60.465±0.0107.28310 60.515±0.0221.630 60.548±0.034 0
2、盐酸阿尔比多亚砜抗流感病毒的药效学试验结果(1)盐酸阿尔比多亚砜抗流感病毒甲型(H1N1)结果经三批试验盐酸阿尔比多亚砜的IC50(μg/ml)为1.22、1.23和1.20，TI为37.54、37.23和38.17；病毒唑的IC50(μg/ml)为36、34和38；TI为80、84.7和75.8。见表3。
表3 盐酸阿尔比多亚砜对流感甲型H1N1的影响组别 浓度 n第一批 第二批第三批(μg/ml) (孔/批)OD值 抑制率 OD值 抑制率 OD值 抑制率(X±SD) (％) (X±SD) (％) (X±SD) (％)正常细胞4 1.010±0.051 0.801±0.007 1.067±0.133盐酸阿尔比21.25 4 0.880±0.060 97.23 0.753±0.029 98.68 1.023±0.089 99.12多亚砜10.63 4 0.880±0.098 93.40 0.709±0.008 95.30 1.014±0.099 97.595.31 4 0.910±0.053 88.61 0.614±0.094 86.70 0.952±0.114 93.222.66 4 0.790±0.195 76.52 0.578±0.028 73.39 0.923±0.007 84.661.33 4 0.640±0.179 53.66 0.520±0.020 53.05 0.550±0.004 54.390.67 4 0.460±0.075 23.47 0.419±0.013 25.67 0.491±0.020 25.31病毒唑 6304 1.010±0.091 100.00 0.782±0.023 99.49 1.038±0.061 99.413104 0.960±0.076 98.63 0.738±0.030 97.26 1.006±0.015 97.701604 0.810±0.022 91.38 0.696±0.012 92.09 0.954±0.031 93.2780 4 0.670±0.041 75.72 0.590±0.014 78.81 0.739±0.197 77.7740 4 0.570±0.025 53.18 0.493±0.006 55.76 0.537±0.011 51.3320 4 0.600±0.070 29.41 0.397±0.002 26.34 0.582±0.018 27.35病毒对照4 0.025±0.011 0.033±0.013 0.043±0.013(2)盐酸阿尔比多亚砜抗流感病毒甲型(H2N2)结果经三批试验盐酸阿尔比多亚砜的IC50(μg/ml)为1.56、1.49和1.45，TI为29.35、30.74和31.59；病毒唑的IC50(μg/ml)为48、41和44；TI为60、70.24和65.45。见表4。
表4盐酸阿尔比多亚砜对抗流感病毒甲型H2N2的影响组别 浓度 n 第一批 第二批 第三批(μg/ml) (孔批) OD值 抑制率 OD值 抑制率 OD值抑制率
(X±SD)(％) (X±SD) (％) (X±SD) (％)正常细胞 41.082±0.006 0.678±0.006 0.891±0.017盐酸阿尔比多21.2541.050±0.01599.310.672±0.00699.79 0.859±0.018 99.17亚砜10.6340.959±0.01795.810.672±0.00499.47 0.814±0.016 96.455.31 40.730±0.00583.610.665±0.00398.43 0.719±0.012 88.452.66 40.573±0.01964.620.453±0.05078.24 0.629±0.022 72.51133 40.566±0.01545.580.370±0.01244.42 0.515±0.010 46.630.67 40.402±0.01624 480.052±0.6266.03 0.212±0.038 15.270.33 40.315±0.0059.56 0.024±0.0121.29 0.076±0.018 3.05病毒唑 630 41.052±0.00699.350.676±0.00399.93 0.858±0.023 99.17310 41.024±0.00897.580.647±0.00498.59 0.802±0.011 96.21160 40.980±0.00992.990.615±0.02694.53 0.785±0.009 90.9880 40.712±0.01873.320.411±0.01574.18 0.751±0.012 80.4540 40.438±0.02240.720.371±0.01748.54 0.296±0.011 44.2120 40.286±0.00516.280.211±0.01618.67 0.261±0.008 22.6710 40.103±0.0083.34 0.050±0.0122.75 0.206±0.027 8.29病毒对照 40.048±0.008 0.038±0.008 0.025±0.005(3)盐酸阿尔比多亚砜抗流感病毒乙型结果最大抑制率为浓度21.25μg/ml的盐酸阿尔比多亚砜抑制47.03％、44.87％和41.28％的乙型流感病毒增殖(结果见表5)。
表5 盐酸阿尔比多对流感病毒乙型的影响组别浓度 n 第一批 第二批 第三批(μg/ml) (孔/批) OD值 抑制率 OD值 抑制率OD值 抑制率(X±SD) (％)(X±SD) (％) (X±SD) (％)正常细胞 40.800±0.019 0.622±0.031 0.987±0.007盐酸阿尔比多21.25 40.133±0.02547.030.146±0.01344.870.201±0.01241.28亚砜10.63 40.128±0.02925.560.108±0.00219.580.112±0.01217.495.31 40.103±0.02514.010.086±0.0058.02 0.101±0.0108.612.66 40.073±0.0087.65 0.022±0.0082.16 0.077±0.0073.871.33 40.098±0.0164.3 10.014±0.0040.91 0.050±0.0071.390.67 40.058±0.0181.36 0.011±0.0040.33 0.012±0.0020.22病毒唑 630 40.758±0.12898.810.533±0.01296.910.979±0.00599.83310 40.668±0.07593.990.529±0.01192.530.900±0.00997.43160 40.608±0.01185.230.501±0.01185.070.886±0.00493.248040.558±0.02371.480.469±0.01072.870.801±0.01382.624040.508±0.02351.990.435±0.00754.040.550±0.01255.342040.473±0.03027.730.321±0.01925.380.465±0.00825.75
病毒对照 40.025±0.011 0.013±0.004 0.033±0.008(4)盐酸阿尔比多亚砜抗流感病毒甲型临床分离株结果经三批试验盐酸阿尔比多亚砜的IC50(μg/ml)为1.59、1.57和1.78，TI为28.81、29.15和25.63；病毒唑的IC50(μg/ml)为33、32和38；TI为87.27、88.62和75.79。见表6。
表6 盐酸阿尔比多亚砜对流感甲型临床株的影响组别浓度 n 第一批第二批 第三批(μg/ml)(孔/批) OD值 抑制率 OD值 抑制率 OD值 抑制率(X±SD) (％) (X±SD) (％) (X±SD) (％)正常细胞4 1.185±0.034 0.815±0.0170.863±0.012盐酸阿尔比多21.254 0.878±0.082 94.09 0.727±0.011 97.490.837±0.014 99.26亚砜10.634 0.893±0.075 86.99 0.701±0.006 93.010.775±0.012 95.885.31 4 0.830±0.066 76.54 0.653±0.008 84.520.653±0.015 85.292.66 4 0.825±0.100 63.47 0.712±0.007 74.080.537±0.016 65.351.33 4 0.735±0.050 45.25 0.433±0.013 42.320.413±0.012 38.510.67 4 0.723±0.086 24.52 0.190±0.007 11.420.276±0.005 14.06病毒唑 630 4 1.113±0.054 98.82 0.801±0.010 99.640.844±0.023 99.51310 4 1.050±0.016 95.98 0.794±0.005 98.870.825±0.013 98.14160 4 0.965±0.025 88.96 0.769±0.016 96.540.751±0.008 92.8080 4 0.885±0.065 77.30 0.702±0.007 88.470.662±0.011 79.4140 4 0.860±0.073 60.18 0.505±0.015 60.960.524±0.012 51.9020 4 0.763±0.008 18.86 0.282±0.013 21.380.241±0.006 15.33病毒对照4 0.045±0.005 0.038±0.0190.050±0.007三、结论经三次重复试验，结果可见盐酸阿尔比多亚砜对感染流感病毒甲型H1N1、H2N2和临床分离株的MDCK细胞有明显的保护作用，其50％抑制病毒病变浓度(IC50)分别为1.22±0.015、1.50±0.056和1.65±0.12μg/ml，其治疗指数(TI)分别为37.6±0.48、30.6±1.13和27.9±1.94；盐酸阿尔比多亚砜浓度为21.25μg/ml时对乙型流感病毒的抑制率为47.03％。表明盐酸阿尔比多亚砜有直接抗甲型、乙型流感病毒作用。
实施例二制备盐酸阿尔比多亚砜氯化钠注射液(1)在无菌操作室内，称取49.18g(0.036mol)羟丙基-β-环糊精，再加入525mg酒石酸，加水溶解至900ml，加入1g输液用活性炭，搅拌加热至80℃，保温15分钟，过滤脱炭。
(2)称取10g(0.018mol)盐酸阿尔比多亚砜，加入羟丙基-β-环糊精溶液中。
(3)磁力搅拌混合液体约20分钟，溶液逐渐澄清，即得盐酸阿尔比多亚砜-羟丙基-β-环糊精包合物溶液。
(4)称取注射用氯化钠75g，加水至1L，搅拌溶解，加入1g输液用活性炭，加热微沸15分钟，脱炭。
(5)氯化钠液倒入包合物溶液中，补水至8L，用0.05N的盐酸和0.05N氢氧化钠调PH＝4.0～7.0，补水至10L，加入1g活性炭，40℃保温20分钟。
(6)溶液分别过布氏漏斗及0.45μm微孔滤膜进行粗滤、精滤，然后进行灌装(100ml/瓶)，115℃、30分钟热压灭菌即得。
实施例三盐酸阿尔比多亚砜片剂的制备1配方盐酸阿尔比多亚砜 100mg淀粉 83mg微晶纤维素 167mg交联聚乙烯吡咯烷酮 15mg10％聚乙烯吡咯烷酮80％乙醇 适量溶液十二烷基硫酸钠 2.5mg硬脂酸镁 2.5mg
片重约 400mg2操作步骤(1)将盐酸阿尔比多亚砜过80目筛，称取处方量与淀粉、微晶纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮混合均匀。
(2)用15％聚乙烯吡咯烷酮85％乙醇溶液制软材，20目筛制粒，50～55℃干燥后，18目筛整粒。
(3)按干颗粒重量加入十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁后压片。
实施例四盐酸阿尔比多亚砜/伪麻黄碱片的制备1配方盐酸阿尔比多亚砜100mg伪麻黄碱30mg淀粉83mg微晶纤维素 167mg交联聚乙烯吡咯烷酮 15mg10％聚乙烯吡咯烷酮80％乙醇 适量溶液十二烷基硫酸钠 2.5mg硬脂酸镁2.5mg片重约 400mg2操作步骤(1)将盐酸阿尔比多亚砜和伪麻黄碱分别过80目筛，称取处方量与淀粉、微晶纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮混合均匀。
(2)用15％聚乙烯吡咯烷酮85％乙醇溶液制软材，20目筛制粒，50～55℃干燥后，18目筛整粒。
(3)按干颗粒重量加入十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁后压片。
实施例五盐酸阿尔比多亚砜/右美沙芬片的制备1配方盐酸阿尔比多亚砜100mg右美沙芬10mg淀粉90mg微晶纤维素 180mg交联聚乙烯吡咯烷酮 15mg10％聚乙烯吡咯烷酮80％乙醇 适量溶液十二烷基硫酸钠 2.5mg硬脂酸镁2.5mg片重约 400mg2操作步骤(1)将盐酸阿尔比多亚砜和右美沙芬分别过80目筛，称取处方量与淀粉、微晶纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮混合均匀，(2)用15％聚乙烯吡咯烷酮85％乙醇溶液制软材，20目筛制粒，50～55℃干燥后，18目筛整粒。
(3)按干颗粒重量加入十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁后压片。
实施例六盐酸阿尔比多亚砜/布洛芬/伪麻黄碱片1配方盐酸阿尔比多亚砜100mg布洛芬 100mg伪麻黄碱15mg淀粉88mg
微晶纤维素176mg交联聚乙烯吡咯烷酮15mg10％聚乙烯吡咯烷酮80％乙醇适量溶液十二烷基硫酸钠2.5mg硬脂酸镁 2.5mg片重约500mg2操作步骤(1)将盐酸阿尔比多亚砜、布洛芬和伪麻黄碱分别过80目筛，称取处方量与淀粉、微晶纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮混合均匀，(2)用15％聚乙烯吡咯烷酮85％乙醇溶液制软材，20目筛制粒，50～55℃干燥后，18目筛整粒。
(3)按干颗粒重量加入十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁后压片。
权利要求
1.阿尔比多亚砜或其生理相容的酸加合盐在制备预防和治疗呼吸道病毒感染药物中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于用于制备预防和治疗呼吸道病毒感染药物的有效成分为阿尔比多亚砜。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的阿尔比多亚砜生理相容的酸为盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、马来酸、富马酸、苯磺酸、苯甲酸、乙酸、琥珀酸、甲磺酸、草酸、柠檬酸、酒石酸、苹果酸或肉桂酸。
4.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于所述的阿尔比多亚砜生理相容的酸加合盐含0-3分子结晶水。
5.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的制备预防和治疗呼吸道病毒感染的药物的剂型为任何一种药剂学上所述的剂型。
6.如权利要求1或5所述的应用，其特征在于所述的制备预防和治疗呼吸道病毒感染的药物的剂型为注射剂型、口服剂型、喷雾剂型、或滴液剂型。
7.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的制备预防和治疗流行性感冒的药物时，可以和其他相容的治疗药物一起制成复方制剂。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于其他相容的治疗药物为非甾体类抗炎药物。
9.如权利要求7所述的应用，其特征在于其他相容的治疗药物为抗过敏药物。
10.如权利要求7所述的应用，其特征在于其他相容的治疗药物为伪麻黄碱或愈创木酚。
全文摘要
本发明属医药领域，具体涉及阿尔比多亚砜或其生理相容的酸加合盐在制备预防和治疗呼吸道病毒感染药物中的应用。体外试验以流感病毒甲型(H
文档编号A61K9/00GK1596886SQ0315788
公开日2005年3月23日 申请日期2003年9月15日 优先权日2003年9月15日
发明者卢建英, 席英会, 廖兴珍, 张吉庆 申请人:卢建英, 席英会, 廖兴珍, 张吉庆
技术领域：
本发明属医药领域，具体涉及阿尔比多亚砜或其生理相容的酸加合盐在制备预防和治疗呼吸道病毒感染药物中的应用。
背景技术：
感冒是由病毒引起的一种严重危害人类健康的急性呼吸道传染病，发病率占所有呼吸道传染病的首位，往往造成季节性大流行。历史上流感大规模流行曾给人类带来深重灾难，现在全世界每年仍有大约10％的人患流感，即约5亿多人感染流感病毒。仅美国每年就因流感损失数百万个工作日，导致2万-4万人死亡，30万人住院，流感已成为致死率最高的病毒传染病之一。
流感可引起很多合并症，如继发细菌感染，引起咽喉炎、中耳炎、鼻窦炎和支气管炎。严重感染者可引起病毒性肺炎，尤其是对老年人、慢性病人和小孩。流感还可使原有的慢性病加重，包括心脏病、肺病、肾脏疾病和糖尿病，可导致相应器官功能的衰竭。
对于流感的治疗，临床上多数是对症治疗及预防继发感染，而缺乏病因治疗药。国内外的研究方向有三种疫苗、干扰素和抗病毒化疗药物。由于流感病毒抗原的易变性和急性呼吸道病毒感染的多重性，造成开发疫苗难以逾越的障碍。而干扰素由于来源、给药剂量、副作用等原因，限制了它在流感防治上的应用。因此，开发抗病毒化疗药物是防治流感的重要方向。
目前临床上使用的抗病毒化疗药物有核苷类(如利巴韦林)、金刚烷胺类、神经氨酸酶抑制剂、病毒受体阻断剂等。其中，口服核苷类抗病毒药物预防和治疗甲型流感效果不明显，虽在大剂量时，对甲型和乙型流感病毒有活性，但具有核苷类药物的致畸、致突变毒性，可引起贫血及免疫抑制；金刚烷胺类抗病毒药物仅对甲型流感有效，且易引起中枢神经系统毒性反应，迅速产生耐药毒株，并且这些化合物有交叉耐药性，从而降低了临床使用价值；神经氨酸酶抑制剂是一类新上市的目前在临床上应用较广，对甲型、乙型流感病毒均有效的抗病毒药物，但价格昂贵，且在老年人、儿童及高危病人身上使用经验不足，其中Oseltamivir(商品名为Tamiflu)发生频率较多的副作用是头疼，另外服用高剂量(主要是首次的剂量)的志愿者会有轻微或中等的一过性恶心，该药物目前正在做四期临床，其潜在抗药性的发展及临床和流行病特征都需进一步研究。
1992年在第八届地中海化疗会议和1993年第九届国际病毒学会议上，前苏联研究人员报告了新药盐酸阿尔比多的抗流感病毒活性。对甲型和乙型流感病毒复制均有很高的抑制率，可使小鼠流感病毒性肺炎的死亡率下降60-70％。据国外资料报道，新药盐酸阿尔比多用于防治流感和其它急性呼吸道病毒感染，具有以下特点1.对流感病毒甲型和乙型均有效。2.既有治疗作用，也有预防作用；3.兼有直接抑制病毒和诱导内源性干扰素的双重作用。4.可口服给药，使用方便。5.为非核苷类化合物，毒性低、耐受良好。是用于治疗甲、乙型病毒引起的流感和急性呼吸道病毒性感染的新型抗病毒药物。
阿尔比多在体内有多种代谢产物，其中在人体内主要是硫原子氧化成亚砜的化合物，及阿尔比多亚砜，其化学结构式如下经人体药代动力学研究，阿尔比多亚砜的血药浓度与阿尔比多的主要药效学特性更符合。而有关阿尔比多亚砜及其生理相容的酸加合盐的药效学方面的研究报道至今尚未见报道。
发明内容
本发明需要解决的技术问题是公开阿尔比多亚砜及其生理相容的酸加合盐的一种医药用途，具体地说是在制备预防和治疗呼吸道病毒感染药物中的应用，其特点是具有预防和治疗甲、乙型病毒引起的流感和急性呼吸道病毒性感染的作用。本发明使阿尔比多亚砜或其生理相容的酸加合盐可成为新的预防和治疗呼吸道病毒感染的药物。
本发明中用于制备预防和治疗呼吸道病毒感染药物的有效成分为阿尔比多亚砜。
在本发明所述的阿尔比多亚砜的生理相容的酸为盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、马来酸、富马酸、苯磺酸、苯甲酸、乙酸、琥珀酸、甲磺酸、草酸、柠檬酸、酒石酸、苹果酸或肉桂酸。
发明所述的阿尔比多亚砜的生理相容的酸加合盐中，含0-3分子结晶水。
本发明所述的阿尔比多亚砜或其生理相容的酸加合盐制备预防和治疗呼吸道病毒感染的药物的剂型可以为任何一种药剂学上所述的剂型，可以为为注射剂型、口服剂型、喷雾剂型、或滴液剂型。
本发明所述的阿尔比多亚砜及其生理相容的酸加合盐制备预防和治疗呼吸道病毒感染的药物时，可以添加药剂学上常用的填充剂、溶液、崩解剂、矫味剂、防腐剂、助溶剂、色素等。
本发明所述的阿尔比多亚砜及其生理相容的酸加合盐制备预防和治疗呼吸道病毒感染的药物时，可以和本专利权力要求中其他相容的一种可一种以上的治疗药物一起制成复方制剂。
本发明所述的阿尔比多亚砜及其生理相容的酸加合盐制备预防和治疗呼吸道病毒感染的药物时，与其他相容的治疗药物一起制成复方制剂的其他相容的治疗药物可以是非甾体类抗炎药物、抗过敏药物、伪麻黄碱或愈创木酚。
本发明的施用量可根据用药途径、患者的年龄、体重、所治疗的疾病的类型和严重程度等进行变化，其日剂量为20-1000mg(口服)或10-500mg(注射)。
具体实施例方式实施例一盐酸阿尔比多体外抗流感病毒实验研究一、材料与方法1、病毒流感病毒甲型(H1N1和H2N2)、乙型均引自中国预防医学科学院病毒所；流感病毒临床分离甲型病毒株，由河北省卫生防疫站提供；病毒接种鸡胚增毒后，收取尿囊液，-70℃保存备用。
2、MDCK细胞株引自中国药品生物制品检定所。
3、药物(1)阳性对照药病毒唑(RBV)，湖北科益制药厂产品，批号(010913)。
(2)实验药盐酸阿尔比多亚砜，本所提供，批号(020101)。
4、药物的配制用MEM培养液溶解，过滤除菌，加谷氨酰胺，青链霉素，NaHCO3，调pH7.2。
5、病毒毒力测定MDCK细胞消化计数后接种于96孔板，104个/ml，长成单层后，加入各病毒系列10倍稀释液，35℃，5％CO2培养3天，观察细胞病变(CPE)，测定病毒半数致细胞病变剂量(TCID50)。
6、药物毒性测定MDCK细胞单层，加入系列稀释药液5-7个浓度，37℃，5％CO2培养3天，每天观察细胞病变(CPE)。第3天中性红染色，用DG3022型酶联比色仪测OD540，测定药物致细胞最大无毒浓度(TC0)和半数中毒浓度(TC50)。
7、抗病毒的药效试验MDCK细胞单层，用Hanks液洗1-2次，加入100TCID50病毒，35℃，5％CO2培养2小时，吸去病毒，Hands液洗1-2次，加入最大无毒浓度药液2倍稀释液6个浓度，35℃，5％CO2培养，设阳性药对照，细胞对照、病毒对照及盐酸阿尔比多亚砜组，每天观察细胞病变。因预试验中发现盐酸阿尔比多亚砜在培养液中的溶解度随培养时间延长而降低，正式试验时第3天倾去培养基，加入中性经染色，测OD540，计算50％抑制病毒病变浓度(IC50)及治疗指数(TI)。
实验重复三次。
二、实验结果1、病毒毒力测定结果流感病毒甲型H1N1TCID50为10-4.8；流感病毒甲型H2N2TCID50为10-4.0；流感病毒甲型临床分离株TCID50为10-4.2；流感病毒乙型TCID50为基10-5.5(见表1)。
表1 流感病毒毒力测定结果病毒株病毒稀释度细胞病变 正常孔 累积 CPE百分比CPE孔CPE孔正常孔 (％)甲型H1N110-13 0 13 010010-23 0 10 010010-33 0 7 010010-42 1 4 180
10-51 2 2 34010-61 2 1 516.710-70 3 0 80甲型H2N210-16 0 21 010010-26 0 15 010010-35 1 9 19010-43 3 4 45010-51 5 1 91010-60 6 0 15 0乙型 10-13 0 15 010010-23 0 12 010010-33 0 9 010010-43 0 6 010010-52 1 3 17510-61 2 1 32510-70 3 0 60甲型临床 10-13 0 11 010010-23 0 8 010010-32 1 5 183.310-42 1 3 26010-51 2 1 42010-60 3 0 702、药物毒性测定结果盐酸阿尔比多亚砜的最大无毒浓度(TC0)为10.63μg/ml，TC50＝45.8μg/ml，病毒唑的TC0为630μg/ml，TC50＝2880μg/ml(结果见表2)。
表2药物细胞毒性测定结果药物浓度(μg/ml) n [OD]X±SD 病变百分比(％)TC(μg/ml)盐酸阿尔比多亚砜 340.00 60.037±0.008 98.06170.00 60.040±0.008 94.6585.00 60.198±0.009 75.66 45.842.50 60.291±0.009 46.8921.25 60.380±0.006 21.0610.63 60.462±0.0345.73病毒唑 10000 60.040±0.006 97.005000 60.237±0.015 73.912500 60.333±0.021 43.83 28801250 60.403±0.021 20.49630 60.465±0.0107.28310 60.515±0.0221.630 60.548±0.034 0
2、盐酸阿尔比多亚砜抗流感病毒的药效学试验结果(1)盐酸阿尔比多亚砜抗流感病毒甲型(H1N1)结果经三批试验盐酸阿尔比多亚砜的IC50(μg/ml)为1.22、1.23和1.20，TI为37.54、37.23和38.17；病毒唑的IC50(μg/ml)为36、34和38；TI为80、84.7和75.8。见表3。
表3 盐酸阿尔比多亚砜对流感甲型H1N1的影响组别 浓度 n第一批 第二批第三批(μg/ml) (孔/批)OD值 抑制率 OD值 抑制率 OD值 抑制率(X±SD) (％) (X±SD) (％) (X±SD) (％)正常细胞4 1.010±0.051 0.801±0.007 1.067±0.133盐酸阿尔比21.25 4 0.880±0.060 97.23 0.753±0.029 98.68 1.023±0.089 99.12多亚砜10.63 4 0.880±0.098 93.40 0.709±0.008 95.30 1.014±0.099 97.595.31 4 0.910±0.053 88.61 0.614±0.094 86.70 0.952±0.114 93.222.66 4 0.790±0.195 76.52 0.578±0.028 73.39 0.923±0.007 84.661.33 4 0.640±0.179 53.66 0.520±0.020 53.05 0.550±0.004 54.390.67 4 0.460±0.075 23.47 0.419±0.013 25.67 0.491±0.020 25.31病毒唑 6304 1.010±0.091 100.00 0.782±0.023 99.49 1.038±0.061 99.413104 0.960±0.076 98.63 0.738±0.030 97.26 1.006±0.015 97.701604 0.810±0.022 91.38 0.696±0.012 92.09 0.954±0.031 93.2780 4 0.670±0.041 75.72 0.590±0.014 78.81 0.739±0.197 77.7740 4 0.570±0.025 53.18 0.493±0.006 55.76 0.537±0.011 51.3320 4 0.600±0.070 29.41 0.397±0.002 26.34 0.582±0.018 27.35病毒对照4 0.025±0.011 0.033±0.013 0.043±0.013(2)盐酸阿尔比多亚砜抗流感病毒甲型(H2N2)结果经三批试验盐酸阿尔比多亚砜的IC50(μg/ml)为1.56、1.49和1.45，TI为29.35、30.74和31.59；病毒唑的IC50(μg/ml)为48、41和44；TI为60、70.24和65.45。见表4。
表4盐酸阿尔比多亚砜对抗流感病毒甲型H2N2的影响组别 浓度 n 第一批 第二批 第三批(μg/ml) (孔批) OD值 抑制率 OD值 抑制率 OD值抑制率
(X±SD)(％) (X±SD) (％) (X±SD) (％)正常细胞 41.082±0.006 0.678±0.006 0.891±0.017盐酸阿尔比多21.2541.050±0.01599.310.672±0.00699.79 0.859±0.018 99.17亚砜10.6340.959±0.01795.810.672±0.00499.47 0.814±0.016 96.455.31 40.730±0.00583.610.665±0.00398.43 0.719±0.012 88.452.66 40.573±0.01964.620.453±0.05078.24 0.629±0.022 72.51133 40.566±0.01545.580.370±0.01244.42 0.515±0.010 46.630.67 40.402±0.01624 480.052±0.6266.03 0.212±0.038 15.270.33 40.315±0.0059.56 0.024±0.0121.29 0.076±0.018 3.05病毒唑 630 41.052±0.00699.350.676±0.00399.93 0.858±0.023 99.17310 41.024±0.00897.580.647±0.00498.59 0.802±0.011 96.21160 40.980±0.00992.990.615±0.02694.53 0.785±0.009 90.9880 40.712±0.01873.320.411±0.01574.18 0.751±0.012 80.4540 40.438±0.02240.720.371±0.01748.54 0.296±0.011 44.2120 40.286±0.00516.280.211±0.01618.67 0.261±0.008 22.6710 40.103±0.0083.34 0.050±0.0122.75 0.206±0.027 8.29病毒对照 40.048±0.008 0.038±0.008 0.025±0.005(3)盐酸阿尔比多亚砜抗流感病毒乙型结果最大抑制率为浓度21.25μg/ml的盐酸阿尔比多亚砜抑制47.03％、44.87％和41.28％的乙型流感病毒增殖(结果见表5)。
表5 盐酸阿尔比多对流感病毒乙型的影响组别浓度 n 第一批 第二批 第三批(μg/ml) (孔/批) OD值 抑制率 OD值 抑制率OD值 抑制率(X±SD) (％)(X±SD) (％) (X±SD) (％)正常细胞 40.800±0.019 0.622±0.031 0.987±0.007盐酸阿尔比多21.25 40.133±0.02547.030.146±0.01344.870.201±0.01241.28亚砜10.63 40.128±0.02925.560.108±0.00219.580.112±0.01217.495.31 40.103±0.02514.010.086±0.0058.02 0.101±0.0108.612.66 40.073±0.0087.65 0.022±0.0082.16 0.077±0.0073.871.33 40.098±0.0164.3 10.014±0.0040.91 0.050±0.0071.390.67 40.058±0.0181.36 0.011±0.0040.33 0.012±0.0020.22病毒唑 630 40.758±0.12898.810.533±0.01296.910.979±0.00599.83310 40.668±0.07593.990.529±0.01192.530.900±0.00997.43160 40.608±0.01185.230.501±0.01185.070.886±0.00493.248040.558±0.02371.480.469±0.01072.870.801±0.01382.624040.508±0.02351.990.435±0.00754.040.550±0.01255.342040.473±0.03027.730.321±0.01925.380.465±0.00825.75
病毒对照 40.025±0.011 0.013±0.004 0.033±0.008(4)盐酸阿尔比多亚砜抗流感病毒甲型临床分离株结果经三批试验盐酸阿尔比多亚砜的IC50(μg/ml)为1.59、1.57和1.78，TI为28.81、29.15和25.63；病毒唑的IC50(μg/ml)为33、32和38；TI为87.27、88.62和75.79。见表6。
表6 盐酸阿尔比多亚砜对流感甲型临床株的影响组别浓度 n 第一批第二批 第三批(μg/ml)(孔/批) OD值 抑制率 OD值 抑制率 OD值 抑制率(X±SD) (％) (X±SD) (％) (X±SD) (％)正常细胞4 1.185±0.034 0.815±0.0170.863±0.012盐酸阿尔比多21.254 0.878±0.082 94.09 0.727±0.011 97.490.837±0.014 99.26亚砜10.634 0.893±0.075 86.99 0.701±0.006 93.010.775±0.012 95.885.31 4 0.830±0.066 76.54 0.653±0.008 84.520.653±0.015 85.292.66 4 0.825±0.100 63.47 0.712±0.007 74.080.537±0.016 65.351.33 4 0.735±0.050 45.25 0.433±0.013 42.320.413±0.012 38.510.67 4 0.723±0.086 24.52 0.190±0.007 11.420.276±0.005 14.06病毒唑 630 4 1.113±0.054 98.82 0.801±0.010 99.640.844±0.023 99.51310 4 1.050±0.016 95.98 0.794±0.005 98.870.825±0.013 98.14160 4 0.965±0.025 88.96 0.769±0.016 96.540.751±0.008 92.8080 4 0.885±0.065 77.30 0.702±0.007 88.470.662±0.011 79.4140 4 0.860±0.073 60.18 0.505±0.015 60.960.524±0.012 51.9020 4 0.763±0.008 18.86 0.282±0.013 21.380.241±0.006 15.33病毒对照4 0.045±0.005 0.038±0.0190.050±0.007三、结论经三次重复试验，结果可见盐酸阿尔比多亚砜对感染流感病毒甲型H1N1、H2N2和临床分离株的MDCK细胞有明显的保护作用，其50％抑制病毒病变浓度(IC50)分别为1.22±0.015、1.50±0.056和1.65±0.12μg/ml，其治疗指数(TI)分别为37.6±0.48、30.6±1.13和27.9±1.94；盐酸阿尔比多亚砜浓度为21.25μg/ml时对乙型流感病毒的抑制率为47.03％。表明盐酸阿尔比多亚砜有直接抗甲型、乙型流感病毒作用。
实施例二制备盐酸阿尔比多亚砜氯化钠注射液(1)在无菌操作室内，称取49.18g(0.036mol)羟丙基-β-环糊精，再加入525mg酒石酸，加水溶解至900ml，加入1g输液用活性炭，搅拌加热至80℃，保温15分钟，过滤脱炭。
(2)称取10g(0.018mol)盐酸阿尔比多亚砜，加入羟丙基-β-环糊精溶液中。
(3)磁力搅拌混合液体约20分钟，溶液逐渐澄清，即得盐酸阿尔比多亚砜-羟丙基-β-环糊精包合物溶液。
(4)称取注射用氯化钠75g，加水至1L，搅拌溶解，加入1g输液用活性炭，加热微沸15分钟，脱炭。
(5)氯化钠液倒入包合物溶液中，补水至8L，用0.05N的盐酸和0.05N氢氧化钠调PH＝4.0～7.0，补水至10L，加入1g活性炭，40℃保温20分钟。
(6)溶液分别过布氏漏斗及0.45μm微孔滤膜进行粗滤、精滤，然后进行灌装(100ml/瓶)，115℃、30分钟热压灭菌即得。
实施例三盐酸阿尔比多亚砜片剂的制备1配方盐酸阿尔比多亚砜 100mg淀粉 83mg微晶纤维素 167mg交联聚乙烯吡咯烷酮 15mg10％聚乙烯吡咯烷酮80％乙醇 适量溶液十二烷基硫酸钠 2.5mg硬脂酸镁 2.5mg
片重约 400mg2操作步骤(1)将盐酸阿尔比多亚砜过80目筛，称取处方量与淀粉、微晶纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮混合均匀。
(2)用15％聚乙烯吡咯烷酮85％乙醇溶液制软材，20目筛制粒，50～55℃干燥后，18目筛整粒。
(3)按干颗粒重量加入十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁后压片。
实施例四盐酸阿尔比多亚砜/伪麻黄碱片的制备1配方盐酸阿尔比多亚砜100mg伪麻黄碱30mg淀粉83mg微晶纤维素 167mg交联聚乙烯吡咯烷酮 15mg10％聚乙烯吡咯烷酮80％乙醇 适量溶液十二烷基硫酸钠 2.5mg硬脂酸镁2.5mg片重约 400mg2操作步骤(1)将盐酸阿尔比多亚砜和伪麻黄碱分别过80目筛，称取处方量与淀粉、微晶纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮混合均匀。
(2)用15％聚乙烯吡咯烷酮85％乙醇溶液制软材，20目筛制粒，50～55℃干燥后，18目筛整粒。
(3)按干颗粒重量加入十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁后压片。
实施例五盐酸阿尔比多亚砜/右美沙芬片的制备1配方盐酸阿尔比多亚砜100mg右美沙芬10mg淀粉90mg微晶纤维素 180mg交联聚乙烯吡咯烷酮 15mg10％聚乙烯吡咯烷酮80％乙醇 适量溶液十二烷基硫酸钠 2.5mg硬脂酸镁2.5mg片重约 400mg2操作步骤(1)将盐酸阿尔比多亚砜和右美沙芬分别过80目筛，称取处方量与淀粉、微晶纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮混合均匀，(2)用15％聚乙烯吡咯烷酮85％乙醇溶液制软材，20目筛制粒，50～55℃干燥后，18目筛整粒。
(3)按干颗粒重量加入十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁后压片。
实施例六盐酸阿尔比多亚砜/布洛芬/伪麻黄碱片1配方盐酸阿尔比多亚砜100mg布洛芬 100mg伪麻黄碱15mg淀粉88mg
微晶纤维素176mg交联聚乙烯吡咯烷酮15mg10％聚乙烯吡咯烷酮80％乙醇适量溶液十二烷基硫酸钠2.5mg硬脂酸镁 2.5mg片重约500mg2操作步骤(1)将盐酸阿尔比多亚砜、布洛芬和伪麻黄碱分别过80目筛，称取处方量与淀粉、微晶纤维素、交联聚乙烯吡咯烷酮混合均匀，(2)用15％聚乙烯吡咯烷酮85％乙醇溶液制软材，20目筛制粒，50～55℃干燥后，18目筛整粒。
(3)按干颗粒重量加入十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁后压片。
权利要求
1.阿尔比多亚砜或其生理相容的酸加合盐在制备预防和治疗呼吸道病毒感染药物中的应用。
2.如权利要求1所述的应用，其特征在于用于制备预防和治疗呼吸道病毒感染药物的有效成分为阿尔比多亚砜。
3.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的阿尔比多亚砜生理相容的酸为盐酸、硫酸、磷酸、硝酸、马来酸、富马酸、苯磺酸、苯甲酸、乙酸、琥珀酸、甲磺酸、草酸、柠檬酸、酒石酸、苹果酸或肉桂酸。
4.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于所述的阿尔比多亚砜生理相容的酸加合盐含0-3分子结晶水。
5.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的制备预防和治疗呼吸道病毒感染的药物的剂型为任何一种药剂学上所述的剂型。
6.如权利要求1或5所述的应用，其特征在于所述的制备预防和治疗呼吸道病毒感染的药物的剂型为注射剂型、口服剂型、喷雾剂型、或滴液剂型。
7.如权利要求1所述的应用，其特征在于所述的制备预防和治疗流行性感冒的药物时，可以和其他相容的治疗药物一起制成复方制剂。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于其他相容的治疗药物为非甾体类抗炎药物。
9.如权利要求7所述的应用，其特征在于其他相容的治疗药物为抗过敏药物。
10.如权利要求7所述的应用，其特征在于其他相容的治疗药物为伪麻黄碱或愈创木酚。
全文摘要
本发明属医药领域，具体涉及阿尔比多亚砜或其生理相容的酸加合盐在制备预防和治疗呼吸道病毒感染药物中的应用。体外试验以流感病毒甲型(H
文档编号A61K9/00GK1596886SQ0315788
公开日2005年3月23日 申请日期2003年9月15日 优先权日2003年9月15日
发明者卢建英, 席英会, 廖兴珍, 张吉庆 申请人:卢建英, 席英会, 廖兴珍, 张吉庆
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