由葫芦形联脲[7－12]部分包封的多核金属配合物的制作方法
专利名称：由葫芦形联脲[7－12]部分包封的多核金属配合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及由一个或多个葫芦形联脲[7-12]部分包封的多核金属配合物或其相似物。本发明还涉及通过使用由一种或多种葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的具有抗肿瘤活性的多核金属配合物治疗癌症的方法，和包括由一种或多种葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的具有抗肿瘤活性的多核金属配合物的药物组合物。
背景技术：
葫芦形联脲是对由六个(6)甘脲单元通过亚甲基桥连接形成的环状寡聚体的名称。虽然，已经使用过术语“葫芦形联脲”，但在本说明书中用来指一族化合物(包括葫芦形联脲的一族)。为避免混淆，在本说明书中，化合物葫芦形联脲是指“未取代的葫芦形联脲[6]”。
葫芦形联脲是一族环状化合物。葫芦形联脲包含由4到12个通式(C)的单元所组成的大环 其中R1、R2、R3和R5可以是任何基团，并且在葫芦形联脲中的通式(C)的不同单元中可以是不同的。葫芦形联脲具有一个，有两个朝着中心空腔的开口的中心空腔，这两个开口被R3基(和R5基)围绕，并且中心空腔具有比两个开口更大的直径。葫芦形联脲可以将各种化合物包括气体和挥发性化合物包封在葫芦形联脲的空腔内。
在文献中，第一次记载未取代的葫芦形联脲[6]是1905年在由R.Behrend、E.Meyer、F.Rusche发表在Leibigs Ann.Chem.，399，1，1905的一篇论文中。未取代的葫芦形联脲[6]的大环结构第一次记载于1981年W.A.Freeman等人在J.Am.Chem.Soc.103(1981)，7367-7368的“Cucurbituril”中。未取代的葫芦形联脲[6]具有化学式C36H36N24O12，并且是具有中心空腔的大环化合物。
WO 00/68232描述多种未取代的和取代的葫芦形联脲[n]的合成。美国专利No 6,365,734也描述了多种葫芦形联脲[n]的合成。
另外的葫芦形联脲[n]和制备葫芦形联脲[n]的方法在待审的国际专利申请No.PCT/AU2004/001232中描述。
最近也描述了多种葫芦形联脲相似物。这些相似物具有如上所述的葫芦形联脲的基本结构，但是其中涉及上述的通式(C)中的一个或一些单元被别的基团如芳基取代的(例如，如Lagona J.等人在Oranic Letters，2003第5卷，第20期，3745-3747的“Cucurbit[n]uril Analogues”中描述)。
顺铂是一种具有抗肿瘤活性的单核铂配合物。顺铂已经用于治疗人类的各种癌症，包括睾丸、卵巢、膀胱、头和颈、肺和子宫颈的癌症。然而，顺铂具有许多缺点。许多人类癌症对顺铂具有天然的抗性，最初对顺铂治疗适用的许多癌症在后来获得耐药性。使用顺铂还受到其毒性的限制。已经开发了具有抗肿瘤活性的其他单核铂配合物，例如卡波铂。这些配合物中的一些的毒性比顺铂低。然而，很少成功发现对顺铂具有天然抗性的癌细胞具有活性的单核铂配合物。
最近描述了一类具有抗肿瘤活性的全新铂(II)配合物。这些配合物是包含二个或多个连接铂中心的多核铂(II)配合物，其中该配合物对在人或动物体内配合物的化学分解有抗性，以致该配合物作为多核配合物输送到体内的活性部位(例如肿瘤)。在多核铂配合物中的两个或多个铂中心可以各与DNA结合，并且该配合物因此能形成与顺铂及其他单核铂配合物相比完全不同的DNA加合物。在现有技术中认为这些多核铂配合物包括独特种类的抗肿瘤剂。与单核铂配合物如顺铂、卡波铂和美国专利No.4,225,529中描述的那些相比，这些配合物具有明显的化学和生物学性能。与单核铂配合物相反，大多数多核铂配合物是带电物种。
美国专利No.4,797,393描述了一种双铂(II)配合物，它作为双铂(II)配合物输送到活性部位。这种双铂配合物具有桥联二胺或多胺配体，并且具有配位到铂原子上的伯胺或仲胺或吡啶类氮，以及两种不同或相同的配体，该配体可以是卤素、硫酸根、磷酸根、硝酸根、羧酸基、取代的羧酸基或二羧酸基。
美国专利No.5,380,897描述了包含通过二胺或三胺桥联试剂而偶合的三铂配位球(spheres)的三铂(II)配合物。
虽然认为这些双铂(II)和三铂(II)配合物是有效的抗肿瘤剂，利用这些配合物治疗癌症受到它们对动物和人的毒性的限制。其他多核金属配合物也具有抗肿瘤或其他治疗性活性，但是也对动物和人也有毒性。
需要开发一种减少双铂(II)和三铂(II)配合物及其他多核金属配合物的毒性的方法。
发明内容
本发明人已经发现葫芦形联脲[7-12]及其相似物部分包封多核金属配合物。本发明人意外地发现多核金属配合物在被葫芦形联脲[7-12]或其相似物包封时对人和动物具有比游离配合物更低的毒性。
在第一个方面中，本发明提供了一种由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物。该金属配合物一般是双核或三核金属配合物。
在本发明的一些实施方案中，该金属配合物是通式(IIA)、(IIB)、(IIC)或(IID)的金属配合物 其中
每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；E是通过具有孤对电子的氮原子配位到每个M原子的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
在一些实施方案中，该金属配合物是通式(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的金属配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IIID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；每个E是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到两个M原子中每一个的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
当X是单齿配体时，X一般选自卤素、硫酸盐、磷酸盐(即H2PO4-或HPO42-)、硝酸盐、羧酸盐和取代羧酸盐的基团。
一般B选自氨合物、伯胺、仲胺、叔胺和包含含有一个或多个N原子的杂环的基团。
一般地，该金属配合物被葫芦形联脲[7-12]包封。通常，该葫芦形联脲[7-12]是通式为(I)的葫芦形联脲 其中n为7到12的整数，而且其中对通式(I)中的通式(B)的每个单元是 R1和R2可以相同或者不同，并且各为单价的基，或R1、R2和将它们结合在一起的碳原子形成任意取代的环基，或通式(B)的一个单元的R1和通式(B)的邻接单元的R2一起形成键或二价基，每个R3独立地选自＝O、＝S、＝NR、＝CXZ、＝CRZ和＝CZ2，其中Z是吸电子基团，如-NO2、-CO2R、-COR或CX3，X是卤素而R是H、任意取代的直链、支链或环状的饱和或不饱和的烃基，或任意取代的杂环基，并且每个R5独立地选自H、烷基和芳基。
在第二个方面中，本发明提供一种减少多核金属配合物在体内的毒性的方法，该方法包括形成一种金属配合物与一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物的缔合体，其中金属配合物被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封。
通常，金属配合物与一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物的缔合体是通过将金属配合物与一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物相接触而形成的。
在第三个方面中，本发明提供一种用于治疗对象癌症的方法，该方法包括对该对象使用治疗有效量的被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的具有抗肿瘤活性的多核金属配合物。
本发明进一步提供被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的具有抗肿瘤活性的多核金属配合物在制造用于治疗对象癌症的药剂中的用途。
癌症可以包括例如睾丸癌、卵巢癌、膀胱癌、头和颈的癌症、肺癌或子宫颈癌。该癌症可以是对顺铂具有抗性的癌症。
在第四个方面中，本发明提供一种药物组合物，其包括由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的具有抗肿瘤活性的多核金属配合物，和一种药物可接受的载体。
实施本发明的最佳方式在本文中所使用的术语“葫芦形联脲[n]”是指包含由n个通式(C)的单元组成的环的葫芦形联脲 其中R1、R2、R3和R5可以是任何基团，而n是从4到12的整数。一般，R1、R2、R3和R5如以上通式(I)中定义。
在本文中使用的术语“未取代的葫芦形联脲[n]”是指一种葫芦形联脲[n]，其中在该葫芦形联脲[n]中通式(C)中所有单元中的R3是O而R1、R2和R5都是H。而术语“取代的葫芦形联脲[n]”是指除了未取代的葫芦形联脲[n]以外的葫芦形联脲[n]。
在本文中使用的葫芦形联脲[n]的“相似物”是指一种具有类似于葫芦形联脲[n]的环状结构的化合物但其中通式
的一个或一些单元是被其它基团例如芳基所代替，并且其中该相似物能够部分包封多核金属配合物。
如在本文中使用的，通过由葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，是指部分金属配合物是位于葫芦形联脲[7-12]或其相似物的空腔内。一般，金属配合物是被葫芦形联脲[n]或其相似物可逆地包封，即在一定条件下金属配合物从葫芦形联脲[n]或其相似物中释放出来。
单独使用或在复合词如“烷基芳基”中使用的术语“烷基”表示直链、支链或单环或多环的烷基，优选C1-30的烷基。直链和支链烷基的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、仲戊基、1，2-二甲丙基、1，1-二甲丙基、己基、4-甲戊基、1-甲戊基、2-甲戊基、3-甲戊基、1，1-二甲丁基、2，2-二甲丁基、3，3-二甲丁基、1，2-二甲丁基、1，3-二甲丁基、1，2，2-三甲丙基、1，1，2-三甲丙基、庚基、5-甲己基、1-甲己基、2，2-二甲戊基、3，3-二甲戊基、4，4-二甲戊基、1，2-二甲戊基、1，3-二甲戊基、1，4-二甲戊基、1，2，3-三甲丁基、1，1，2-三甲丁基、壬基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-甲辛基、1-、2-、3-、4-或5-乙庚基、1-、2-或3-丙己基、癸基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-甲壬基、1-、2-、3-、4-、5-或6-乙辛基、1-、2-、3-或4-丙庚基、十一烷基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-或9-甲癸基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-乙壬基、1-、2-、3-、4-或5-丙辛基、1-、2-或3-丁庚基、1-戊己基、十二烷基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-、9-或10-甲十一烷基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-乙癸基、1-、2-、3-、4-、5-或6-丙壬基、1-、2-、3-或4-丁辛基、1-2-戊庚基等。环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基和环癸基等。
单独使用或在复合词中使用的术语“链烯基”表示直链、支链或环状链烯、优选C2-30的烯基。烯基的实例包括乙烯基、烯丙基、1-甲乙烯基、丁烯基、异丁烯基、3-甲基-2-丁烯基、1-戊烯基、环戊烯基、1-甲基-环戊烯基、1-己烯基、3-己烯基、环己烯基、1-庚烯基、3-庚烯基、1-辛烯基、环辛烯基、1-壬烯基、2-壬烯基、3-壬烯基、1-癸烯基、3-癸烯基、1，3-丁二烯基、1，4-戊二烯基、1，3-环戊二烯基、1，3-己二烯基、1，4-己二烯基、1，3-环己二烯基、1，4-环己二烯基、1，3-环庚二烯基、1，3，5-环庚三烯基和1，3，5，7-环幸四烯基。
单独使用或在复合词中使用的术语“烷氧基”表示直链、支链的烷氧基，优选C1-30的烷氧基。烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、n-丙氧基、异丙氧基和不同的丁氧基异构体。
单独使用或在复合词中使用的术语“芳基”表示芳烃或芳族杂环体系的单环、多环、共轭的或稠合的(fused)残基。芳基的实例包括苯基、萘基、吡啶基、呋喃等。当芳基是杂芳基时，芳族杂环体系可以包含1到4个独立选自N、O和S的杂原子。
本发明涉及由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物。这种金属配合物和一种或多种葫芦形联脲[7-12]或其相似物的缔合体可以称为配合物与葫芦形联脲[7-12]或其相似物的“缔合加合物”。
金属配合物被葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封，并且因此部分金属配合物从葫芦形联脲[7-12]或其相似物的一个或两个开口处伸出。在本发明的一些实施方案中，金属配合物被两个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封。
金属配合物可以是任何多核金属配合物。位于配合物中心的金属可以是相同或不同的。
一般，金属配合物是如上定义的通式(IIA)、(IIB)、(IIC)、(IID)、(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的金属配合物。这些通式的金属配合物具有抗肿瘤活性。这些通式的金属配合物在人或动物体内也是对多核配合物的化学分解有抗性，以致当对人或动物体使用该配合物时，该配合物作为多核配合物输送到体内活性部位(例如肿瘤)。
然而，本发明不局限于通式(IIA)、(IIB)、(IIC)、(IID)、(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的金属配合物。金属可以是例如另外的多核金属配合物，如以下通式的配合物
或 或 在本发明的一些实施方案中，金属配合物是通式(IIA)、(IIB)、(IIC)、(IID)、(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的金属配合物，其中M是Pt(II)。优选地，金属配合物是通式(IIA)或(IIIA)的金属配合物，其中M是Pt(II)。优选这些金属配合物，因为已经发现其中X和E是反式构型的金属配合物与这种配合物的其他异构体相比是更有效的抗肿瘤剂。
对于通式(IIA)、(IIB)、(IIC)、(IID)、(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)和(IIID)的金属配合物，位于葫芦形联脲[7-12]或其相似物的空腔内的配合物的部分一般是E或部分E。
在通式(IIA)、(IIB)、(IIC)、(IID)、(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或者(IIID)中，当X是羧酸基或取代羧酸基时，X可以由以下通式表示CR6(C(R6)2)mCO2，其中m是从0到5的整数，包括0和5在内，R6基可以是相同或不同的，并且可以是氢、任意取代的直链或者支链烷基(例如C1-5烷基)、任意取代的芳基、任意取代的烷基芳基、任意取代的芳烷基、任意取代的链烯基、任意取代的炔基、任意取代的环烷基、任意取代的环烯基、卤素、拟卤素(pseudohalogen)、羟基、羰基、甲酰、硝基、酰胺基、氨基、烷氧基、芳氧基和磺酸盐，或者可以结合为(R6)2的两个R6基团，以使(R6)2表示双键氧或硫。任意的取代基可以选自芳基、2到6个碳原子的环烷基、环烯基、芳烷基、卤素、拟卤素、羟基、烷氧基、1到5个碳原子的环氨基或羧酸盐或酯。
在本文中使用的术语“拟卤素”具有由Cotton和Wilkinson在Interscience出版社1966年在“Advanced Inorganic Chemistry”的560页上的含义。该原文描述拟卤素是一种包含二个以上的以游离状态存在的负电原子的分子代表卤素。这些分子的实例是氰化物、氰酸物、硫氰酸物和叠氮化物一般B选自氨合物(NH3)、伯胺、仲胺、叔胺和包括含有一个或多个N原子的杂环的基团。包含一个或多个N原子的杂环可以是芳基或脂肪基。当B是胺时，B可以是例如支链或直链的烷基胺(一般是C1-5的烷基胺)，芳基胺、芳烷基胺或链烯基胺(一般是C1-5的链烯基胺)。B也可以是环烷基胺，多环烃胺、核苷、核苷酸、吡啶型含氮基团或具有羟基、烷氧基(一般C1-5的烷氧基)、羧酸或羧酸酯、硝基、或卤素取代基的胺。
优选的伯胺是通式为NH2-R10的烷基胺，其中R10是直链或支链的C1-5的烷基、C3-C6的环烷基(即环丙基、环丁基、环戊基或环己基)或-CH2OH。
优选的仲胺包括通式为NH(R10)2的烷基胺，其中每个R10是独立选择的，并且R10如上定义。
两个配位到单个M原子上的B配体可以是二齿配体例如二氨合物。同样地，E和一个或两个B配体可以是相同的三齿或四齿配体的一部分。
E可以是包含两个或多个具有孤对电子的N原子的任何配体，其中一个这种N原子与一个M原子配位，而另一个这样的N原子与另一个M原子配位。
E可以例如具有通式NDG-(C(R7)2)n-(R8)o-(C(R9)2)p-NDG其中n和p可以是从1到6的整数，包括1和6在内，而o是0或1；R7和R9基团各是独立地选自氢、烷基(一般C1-5的烷基)、芳基、环烷基、环烯基、芳烷基、卤素、拟卤素、羟基、烷氧基、芳氧基、羧酸酯和羧酸盐，优选地，所有R7和R9基团为H；R8选自烷基(例如C1-5的烷基)、芳基(例如苯基)、氨基、烷氨基、通式为-(NH(CH2)qNH)的二氨基——其中q是1到4的整数(包括1和4)、羟烷基、烷氧基、硫和氧；并且每个D和G均独立地选自氢、烷基(一般C1-5的烷基)、芳基、烷芳基、芳烷基、链烯基、环烷基、环烯基、卤素、拟卤素、羟基、烷氧基、芳氧基、磺酸和其盐，优选地D和G是H。
E可以是例如亚精胺、在中心N原子处双甲基化的亚精胺、精胺、二吡唑基甲烷或1，6-己二胺。
当B和E是电中性时，通式(IIA)、(IIB)或(IIC)的金属配合物的总电荷一般是2+，而通式(IID)的金属配合物一般是中性的。当B和E电中性时，通式(IIIA)、(IIIB)或(IIIC)的金属配合物的总电荷一般是4+，并且通式(IIID)的金属配合物一般是2+。
在现有技术中描述了各种具有抗肿瘤活性的多核铂(II)配合物。例如，各种具有抗肿瘤活性的多核铂(II)配合物记载在Wheate NJ和Collins JG的Coordinated Chemistry Reviews，241(2003)，133-145的“Multi-nuclear platinumcomplexes as anti-cancer drugs”文章和Kellard L.R.和Farrell N.P.(编辑)2000年321-338页的“Platinum-Based Drugs in Cancer Therapy”，Humana出版社，Totowa的章节中。其内容在本文中引用供参考。在本发明中使用的多核金属配合物可以是这些文献中描述的任何一种多核铂(II)配合物。
现有技术中记载的具有抗肿瘤活性的具体多核铂(II)配合物的实例包括
其中(a)m＝1，n＝2，o＝1(BBR3535)；(b)m＝3，n＝2，o＝3(BBR3610)；或(c)m＝4，n＝0，o＝4(BBR3611) 二-Pt 三-Pt通式(IIA)的金属配合物的实例是 N-二甲基BBR3571在本发明的一些实施方案中，金属配合物是通式(IIA)的金属配合物，其中X是氯化物，B是氨合物而E是二吡唑基甲烷。这种具有抗衡离子氯的配合物已知的是氯化{反式-二氨合氯(μ-二吡唑基甲烷)铂(II)}。该配合物以下称为“二-Pt”。
在本发明的一些其它实施方案中，金属配合物是通式(IIA)的金属配合物，其中X是氯化物，B是氨合物而E是亚精胺。这种具有抗衡离子氯的配合物是已知的是氯化{反式-二氨合氯(μ-亚精胺)铂(II)}。这个配合物以下称为“BBR3571”。
在本发明的一些实施方案中，金属配合物是通式(IIIA)的金属配合物，其中X是氯化物，B是氨合物而E是二吡唑基甲烷。这种具有抗衡离子氯的配合物已知的如氯化{反式-二氨合双{反式-二氨合氯(μ-二吡唑基甲烷)铂(II)}铂(II)}。这种配合物以下称为“三-Pt”。
在本发明的一些实施方案中，金属配合物是通式(IIIA)的金属配合物，其中X是氯化物、B是氨合物而E是1，6-己二胺。这种具有硝酸根抗衡离子的配合物已知的如硝酸{反式-二氨合双{反式-二氨合氯(μ-1，6己二胺)铂(II)}铂(II)}。这种配合物以下称为“BBR3464”。
葫芦形联脲[7-12]或其相似物可以是能包封部分金属配合物的任何葫芦形联脲[7-12]或其相似物。一般，葫芦形联脲[7-12]是通式(I)的葫芦形联脲[7-12]。当金属配合物被两个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封时，该两个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物可以是相同或不同的。
一般，在通式(I)中，当R1和R2是单价基时，R1和R2独立地选自-R、-OR、-SR、-NR2，其中每个R独立地选择；-NO2、-CN、-X、-COR、-COX、-COOR、 其中每个R独立地选择； 其中每个R独立地选择；-SeR、-SiR3，其中每个R独立地选择；-SR、-SOR、 -SO2R、-S-S-R、-BR2，其中每个R独立地选择；-PR2其中每个R独立地选择； 其中每个R独立地选择； 其中每个R独立地选择；-P+R2其中每个R独立地选择；和金属或金属配合物，其中R是H、任意取代的直链、支链或环状的饱和或不饱和的烃基，或任意取代的杂环基，而X是卤素。R可以例如是H或直链或者支链C1-5的烷基、或C1-5的链烯基。
当R1和R2是单价基时，R1和R2可以例如选自H、任意取代的烷基(例如C1-5的烷基如甲基、乙基、丙基、异丙基、n-丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基等)、任意取代的链烯基、任意取代的炔基、任意取代的杂环基、任意取代的芳基(例如苯基、萘基、吡啶基、呋喃基或苯硫基)、-OR、-SR或-NR2。
在一些实施方案中，当R1和R2是单价基时，R1和R2各包括小于30个碳原子。R1和R2可以例如独立地选自1到30个碳原子的烷基、2到30个碳原子的烯基、5到30个碳原子的环烃基、4到30个碳原子的具有一个或多个诸如O、N或S的杂原子的环基、6到30个碳原子的芳基和5到30个碳原子的具有一个或多个诸如O、N或S的杂原子的芳基。
R1和R2可以是例如烷氧基如甲氧基、乙氧基、丙氧基等。R1和R2也可以是羟基、卤素、氰基、硝基、氨基、烷氨基或烷硫基。
由R1、R2和将其结合在一起的碳原子所形成的任意取代的环基的实例包括5到30个碳原子的任意取代的饱和或不饱和的环烃基，和3到30，一般为4到30个碳原子的具有一个或多个诸如O、N或S的杂原子的任意取代的饱和或不饱和环基。
在通式(1)的化合物中可连接通式(B)相邻单元的R1和R2的二价基可以是例如包括1个或多个碳原子的二价的任意取代的直链或支链的饱和或不饱和的烃基。二价基可以是或包含一个或多个杂原子如O、N或S。
当R是任意取代的烃基或任意取代的杂环基时，烃基或杂环基可以被一个或多个取代基取代。同样地，当R1、R2和将其结合在一起的碳原子一起形成任意取代的环基时，该环基可以被一个或多个取代基取代。任意的取代基可以是任何基团，并且可以是例如任意取代的烷基(例如C1-5的烷基)、任意取代的烯基(例如C2-5的烯基)、任意取代的炔基(例如C2-5的炔基)、任意取代的杂环基、任意取代的芳基、卤素(例如F、Cl、Br或I)、羟基、烷氧基、羰基、酰基卤、硝基、羧酸、羧酸酯、氨基、亚氨基、氰基、异氰酸酯、硫醇、硫醇酯、硫代酰胺、硫代脲、砜、硫化物、亚砜、或磺酸基团或金属或金属配合物。任意的取代基也可以是硼烷、含磷基团如磷化氢、烷基磷化氢、磷酸盐或磷酰胺、含硅基团或含硒基团。
一般，Z选自-NO2、-CO2R、-COR、-CX3，其中X是卤素(例如F、Cl、Br或I)并且R是H、烷基(例如C1-5的烷基)、链烯基(例如C2-5的烯基)、炔基(例如C2-5的炔基)、芳基、杂芳基或饱和或不饱和的杂环基。
迄今为止制备的大多数葫芦形联脲[4到12]是其中在装配成葫芦形联脲的通式(B)中的所有单元中的R3为O并且R5为H的葫芦形联脲[4到12]。因此，在本发明的一些实施方案中，葫芦形联脲[7-12]是一种通式(I)的葫芦形联脲[7-12]，其中，装配成通式(I)的通式(B)的所有单元中的R3为O并且R5为H。
通式(I)的葫芦形联脲[7-12]可以按照WO 00/68232、美国专利No.6,365,734所描述的或按照国际专利申请No.PCT/AU2004/001232所描述的进行制备。葫芦形联脲[7-12]的相似物可以按照Lagona J.等人在OrganicLetters，2003第5卷，第20期，3745-3747页的“Cucurbit[n]uril Analogue”所描述的进行制备，其内容在本文中引用供参考。
多核金属配合物和葫芦形联脲[7-12]或其相似物的缔合加合物可以通过将金属配合物与葫芦形联脲[7-12]或其相似物相接触而制备。一般，通过将金属配合物和葫芦形联脲[7-12]或其相似物溶解或悬浮在溶剂，通常为水中，使金属配合物与葫芦形联脲[7-12]或其相似物相接触。
缔合加合物可以例如通过以下步骤形成相对于金属配合物为1或2摩尔当量的葫芦形联脲[7-12]或其相似物(注释1)溶解或悬浮在水中(注释2)，然后加入金属配合物，并且在环境温度下(≤35℃)搅拌该混合物。特别是当葫芦形联脲[7-12]或其相似物在含水体系(注释3)中具有低的溶解度时，可以使用相反的添加顺序。几个小时之后，通过过滤收集或除去所有不溶材料。可以通过NMR共振波谱检测缔合加合物的形成。然后将含水混合物冷冻干燥(注释4)以产生呈细粉的缔合加合物。注释1.化学计量取决于缔合加合物中葫芦形联脲[7-12]或其相似物对多核金属配合物的要求为2∶1、1∶1或任何其他组合。
2.在有些情况下，可以使用盐水(saline)溶液。可以使用加热到沸腾以便在含水体系中溶解葫芦形联脲[7-12]或其相似物，然后在添加金属配合物之前将其冷却到环境温度。
3.对于在含水体系中不是很易溶的葫芦形联脲[7-12]或其相似物，可以将有机溶剂如乙腈、四氢呋喃、三氟乙醇和甲酸添加到含水体系中。在从含水体系中分离缔合体之前，该有机溶剂以真空除去。
4.当使用盐水溶液时，缔合加合物不通过冷冻干燥从溶液中分离，而是通过从盐溶液中结晶分离。
本发明人已经发现被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物对人和动物具有比未缔合的金属配合物的毒性更低。
因此，本发明提供一种减少多核金属配合物的活体内毒性的方法，该方法包括使金属配合物与一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物形成一种缔合体，其中部分金属配合物被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物所包封。
不希望受理论的限制，本发明人相信当被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封时多核金属配合物在活体内毒性的减少是由于金属配合物的包封导致减少金属配合物和人或动物体内的化合物之间的不希望的反应。人们相信多核金属配合物的毒性是由于，至少部分是由于人或动物体内的化合物如硫代蛋白和/或血浆蛋白和金属配合物之间的反应，认为其产物诱发中毒反应。金属配合物被葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封被认为特别是在血流中减少了这些反应。认为不希望的生化反应的减少是由于葫芦形联脲[7-12]或其相似物通过葫芦形联脲[7-12]或其相似物的体积位阻或通过葫芦形联脲[7-12]或其相似物的负电性入口的排斥作用而阻碍体内分子和多核金属配合物之间反应。
许多多核金属配合物具有抗肿瘤活性。
本发明提供一种治疗对象癌症的方法，该方法包括对该对象使用治疗有效量的被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的具有抗肿瘤活性的多核金属配合物。可以由本领域的技术人员容易地通过活体外筛选抗癌细胞系配合物的活性而确定多核金属配合物的抗肿瘤活性。一般，具有抗肿瘤活性的多核金属配合物是如上通式(IIA)、(IIB)、(IIC)、(IID)、(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)定义的金属配合物。更一般地，多核金属配合物是通式(IIA)、(IIB)、(IIC)、(IID)、(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的金属配合物，其中M是Pt(II)。在一些实施方案中，具有抗瘤活性的多核金属配合物选自
以下通式的配合物 其中m＝1，n＝2和o＝1；m＝3，n＝2和o＝3；或m＝4，n＝0和o＝4 或 对象可以是哺乳动物，优选是人。对象可以是非人类的灵长目动物或非灵长目动物如动物模型试验中使用的。虽然特别期待该方法适合在人类的医疗中使用，但它也适用于兽医治疗，包括宠物如狗和猫，以及家畜如马、小型马、驴、骡、骆驼、羊驼、猪、牛、和羊，或者动物园动物如灵长目动物、猫科动物、犬科动物、牛科动物和有蹄类动物的治疗。
合适的哺乳动物依次包括灵长目、啮齿目、复齿目、鲸目、食肉目、奇蹄目和偶蹄目的成员。
本文中使用的术语“治疗学有效量”指有效地获得所需治疗学反应如通过减缓癌细胞的生长或扩散速率来治疗癌症的量。具体的“治疗学有效量”显然随着这种因素如治疗的具体条件、对象的身体条件、要治疗对象的类型、治疗的持续时间、同时治疗(如果有的话)的性质和使用的具体配方而变化。考虑缔合加合物的LD50值，例如，该缔合加合物可以以相当于顺铂的有效剂量使用。
本文中使用的术语“治疗”、“处理”等是指影响对象、组织或细胞以便获得所需的药理学和/或生理效果。该效果可以是预防性的，完全或部分预防疾病或其征兆或症状，和/或可以是治疗学上的，部分或完全治愈疾病。本文中使用的“治疗”覆盖疾病的任何治疗或预防，并且包括(a)预防易感染该疾病但是还没有被诊断为感染的对象所发生疾病；(b)抑制疾病，即阻止其发展；或(c)减轻或改善疾病的影响，即致使疾病的影响消退。
金属配合物和一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物的缔合加合物可另外与其他治疗剂结合以便提供有效的组合物。旨在包括治疗剂的任何化学上兼容的组合物，只要组合物不消除缔合加合物的活性。应该理解为缔合加合物和另一治疗剂可以单独使用、依次先后使用、或同时使用。
缔合加合物可以口服或肠胃外注射给对象使用。给药可以是静脉内、动脉内、腹膜内、肌内、皮下、腔内、表皮内或通过例如渗透泵注入。
本发明的组合物包括具有抗肿瘤活性的多核金属配合物和一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物的至少一种缔合加合物，和一种或多种药物可接受的载体。该组合物还可以任意包括其他的治疗剂。本发明的组合物包括那些适合口服、直肠、鼻、局部(包括口腔和舌下)、阴道或肠胃外(包括皮下、肌肉、静脉内和皮内)给药。该组合物可以方便地以单位剂型存在，并且可以通过制药业中众所周知的方法制备。这种方法包括步骤用药物可以接受的载体和该组合物的任何其他成分将活性成分带进缔合物内。通常，组合物是通过将活性成分与药物上可接受的载体和该组合物的任何其他成分均匀地并且密切地进行缔合而制备，并且然后如果有必要，使产品成型。
如本文中使用的“药物载体”是用于将活性成分输送到对象的药物可接受的溶剂、悬浮剂或者介质。载体可以是液体或固体，并且根据给药所计划的方式选择。载体是药物“可接受的”，意思不是生物学上或者另外不受欢迎的，即载体能与活性成分一起使用于对象，而不导致任何或相当的不良反应。
本发明用于口服用途的药物组合物可以包含选自甜味剂、崩解剂、调味剂、着色剂、防腐剂、润滑剂和延时剂中的一种或多种试剂，以制造药物上精致和可口的制剂。合适的甜味剂包括蔗糖、乳糖、葡萄糖、天冬甜素或糖精。合适的崩解剂包括玉米淀粉、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、黄原胶、膨润土、藻酸或琼脂。合适的调味剂包括薄荷油、冬青油、樱桃、橙或覆盆子调味剂。合适的防腐剂包括苯甲酸钠、维生素E、α-生育酚、抗坏血酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯或亚硫酸氢钠。合适的润滑剂包括硬脂酸镁、硬脂酸、油酸钠、氯化钠或滑石。合适的延时剂包括单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
本发明片剂形式的药物组合物可以包括(1)惰性稀释剂如碳酸钙、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；(2)粒化剂和崩解剂如玉米淀粉或藻酸；(3)粘合剂如淀粉、凝胶或阿拉伯胶；和(4)润滑剂如硬脂酸镁、硬脂酸、或滑石。片剂可以没有包衣或通过已知技术进行包衣，以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，并且因此在较长时期内持续作用。例如，可以使用延时材料如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
肠胃外给药的组合物包括无菌含水或无水的溶液、悬浮液和乳化液。可以用于这种组合物的无水载体的实例是丙二醇、聚乙二醇、植物油如橄榄油和可注射的有机酯如油酸乙酯。含水载体包括水、乙醇/水溶液、乳化液或悬浮液，包括盐水和缓冲介质。肠胃外的介质包括氯化钠溶液、林格氏(Ringer′s)右旋糖、右旋糖和氯化钠、乳酸化的林格氏静脉内介质包括液体和营养补充剂、电解质补充剂(如基于林格氏右旋糖的)等。也可以存在防腐剂及其他添加剂，例如抗微生物剂、抗氧化剂、螯合剂、生长刺激素和惰性气体等。
兽医组合物例如可以通过现有技术中的常规方法制备。这种兽医组合物的实例包括那些适合于
(a)口服给药，例如片剂；用于与饲料混合的粉末、颗粒或小球；用于舌头的糊剂；(b)肠胃外给药，例如作为无菌溶液或悬浮液通过皮下、肌肉内或静脉注射；或(当合适时)通过乳房内注射，通过乳头将悬浮液或溶液引入乳房；(c)局部应用，例如作为应用到皮肤上的乳剂、油膏或喷雾剂；或(d)阴道内给药、例如作为阴道栓、膏或泡沫体。
现在参考以下非限制性实施例对本发明进行描述。
实施例1由葫芦形联脲[7-12]包封的二铂配合物，1∶1缔合加合物的制备将未取代的葫芦形联脲[7](1摩尔当量)完全溶解在热(60-90℃)的200mM的NaCl溶液(150毫升)或H2O(150毫升)中。对此添加1摩尔当量的氯化{反式-二氨合氯(μ-二吡唑基甲烷)铂(II)}(二-Pt)，并且将该溶液搅拌1小时。缓慢蒸发产生缔合加合物的晶体。
使用未取代的葫芦形联脲[8]代替未取代的葫芦形联脲[7]并按照相同的步骤，也得到白色粉末。
类似的方法可用于制备金属配合物和其它未取代的或取代的葫芦形联脲[7-12]或葫芦形联脲[7-12]的相似物的缔合加合物。
实施例2由葫芦形联脲[n]包封的三铂配合物，1∶2缔合加合物的制备将大约50毫克溶于水(10毫升)中的未取代的葫芦形联脲[7]或未取代的葫芦形联脲[8]添加到半摩尔当量的溶于水(10毫升)中的BBR3464中。样品在室温下搅拌1小时，之后将该溶液冷冻干燥。通过1H NMR谱分析样品，表明金属配合物被葫芦形联脲包封。
类似的方法也可以用于制备金属配合物与其它未取代的或取代的葫芦形联脲[7-12]或葫芦形联脲[7-12]的相似物的缔合加合物。
实施例3缔合加合物形成的NMR分析将未取代的葫芦形联脲[7]或未取代的葫芦形联脲[8]的等分量的溶液(5mM)直接添加到含有D2O中的BBR3571或BBR3464的稀释溶液(1.5mM)的NMR管中，并且每次添加后记录的1H NMR波谱，表明金属配合物被葫芦形联脲包封。
实施例4生物测试样品的制备将约50毫克溶于水(10毫升)中的未取代的葫芦形联脲[7]或未取代的葫芦形联脲[8]添加到等摩尔量的溶于水(10毫升)中的BBR3571中。样品在室温下搅拌1小时，之后将该溶液冷冻干燥。通过1H NMR波谱分析样品，表明金属配合物被葫芦形联脲包封。
按照实施例2中的方法制备BBR3464/未取代的葫芦形联脲[7]和BBR3464/未取代的葫芦形联脲[8]加合物。按照实施例5中所述，制备BBR3464/未取代的葫芦形联脲[10]加合物。
实施例5微溶的葫芦形联脲[n]将溶于水(2毫升)中的BBR3464(6毫克)添加到5毫克未取代的葫芦形联脲[10]中，另外添加4毫升水并且将该悬浮液搅拌过夜。然后再添加5毫克葫芦形联脲[10]和5毫升水，并且将该悬浮液再搅拌48小时。然后将该悬浮液离心并且将上层清液冷冻干燥。通过1H NMR波谱分析样品，表明金属配合物被葫芦形联脲包封。
实施例6活体外的生物测试对BBR3571、如以上实施例4所述制备的BBR3571和未取代的葫芦形联脲[7]的缔合加合物、二-Pt和如以上实施例1所述制备的二-Pt和未取代的葫芦形联脲[7]的缔合加合物测试其抗L1210鼠科白血病细胞以及其相配的耐顺铂的细胞L1210/DDP的细胞毒素活性。测试按照N.J.Wheate等人在Anti-Cancer Drug Design，16，91(2001)中提出的步骤在活体外进行。并且结果列于表I中。表I中的结果是以抑制细胞生长50％所需要的配合物或缔合加合物的最小浓度IC50表示的。
表I
由于缔合加合物产生与游离配合物类似的数值，认为缔合加合物是抗这些白血病细胞系的有效抗癌剂。因此，BBR3571和二-Pt的总的细胞毒素活性保持在BBR3571和二-Pt和未取代的葫芦形联脲[7]的缔合加合物中。
在表II中，按照以上指出的步骤，使用实施例4和5所述制备的BBR3464与未取代的葫芦形联脲[7]、未取代的葫芦形联脲[8]或未取代的葫芦形联脲[10]的缔合加合物，证明能通过与葫芦形联脲[7-10]形成的缔合加合物来调节铂配合物的细胞毒素活性。活体外测试证明通过减小包封葫芦形联脲[n]的尺寸减小配合物BBR3464的细胞毒性。
表II
实施例7活体内的生物测试A.最大耐受剂量(MTD)在雌性balb/c裸鼠中，在活体内测试铂配合物BBR3571和BBR3571与未取代的葫芦形联脲[7]的缔合加合物。
这些测试的结果表明缔合加合物在以盐水溶液在静脉内输送时，BBR3571具有比游离配合物高1.7倍的最大耐受剂量(MTD)，表III
与葫芦形联脲[7]/BBR3571缔合加合物的0.45毫克/公斤相比，游离的铂配合物BBR3571的最大耐受量是0.1毫克/公斤。
B.游离金属配合物与缔合加合物的活体内细胞毒素活性的对比BBR3571与未取代的联脲葫芦形[7]的缔合加合物在药当量为1(等摩尔量)的细胞毒素活性与游离金属配合物比较。实验受到游离金属配合物的MTD的限制。对雌性balb/c裸鼠在侧腹皮下接种2008卵巢癌细胞系的细胞。一旦肿瘤达到大约100立方毫米的体积，将小鼠随机分组，并且以BBR3571的盐水溶液在MTD下给药，或以未取代的葫芦形联脲[7]和BBR3571等摩尔量的缔合加合物(0.27毫克/公斤的缔合加合物)的盐水溶液给药。以盐水或未取代的葫芦形联脲[7]的盐水溶液进行对比给药。剂量按照0，4天和8天给药。结果在表IV中所示。
表IV
a肿瘤生长指数(TGI)定义为100减去(治疗组小鼠的平均相对肿瘤体积除以对比组小鼠的平均相对肿瘤体积乘以100)。
b生长延迟指数(GDI)定义为治疗肿瘤的平均生长延迟除以对比(未治疗)肿瘤的平均生长延迟。
游离配合物和缔合加合物显示在药当量为1时两者具有相当的活性。实施例8-葫芦形联脲[n]/金属配合物缔合加合物的总的1H NMR波谱按实施例4制备的BBR3571和未取代的葫芦形联脲[7]或未取代的葫芦形联脲[8]的缔合加合物，按实施例1中制备的二-Pt和未取代的葫芦形联脲[7]的缔合加合物、通过与在实施例2所述的类似方法制备的三-Pt与未取代的葫芦形联脲[7]的缔合加合物和在实施例5中制备的BBR3464与未取代的葫芦形联脲[10]的缔合加合物通过1H NMR波谱分析，并且其结果列于表V。
葫芦形联脲[n]的空腔的特征性屏蔽效应表明在大多数实施例中，作为缔合加合物的金属配合物的质子的共振在与游离金属配合物的样品比较时向高磁场位移(以负号表示)。这表明连接基团E在葫芦形联脲[n]的空腔内部结合，并且因此证实金属配合物被葫芦形联脲部分包封。
实旋例
1.在BBR3571中E＝NH2CH2CH2CH2NH2+CH2CH2CH2CH2NH2a b c d*c*b*a*2.在配合物二-Pt和三-Pt中，E＝
3.在BBR3464中，E＝NH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2NH2a b c c*b*a*表V1H NMR共振位移的表。在游离金属配合物的质子和作为葫芦形联脲[n]/金属配合物加合物的相同的质子之间化学位移的差异对比
本发明人已经发现葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封多核金属配合物，并且所产生的缔合加合物对人或动物体具有比游离金属配合物更低的毒性。由于多核金属配合物的尺寸，它们没有被完全包封在葫芦形联脲[7-12]或其相似物内部。然而，本发明人已经意外地发现当多核金属配合物被一种或多种葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封时，所生成的缔合加合物对人和动物具有比游离配合物更低的毒性，并且因此，在配合物作为与一种或多种葫芦形联脲[7-12]或其相似物的缔合加合物的一部分时对人或动物的给药的剂量可比作为游离配合物给药的剂量更高。具有抗肿瘤活性的多核金属配合物和一种或多种葫芦形联脲[7-12]或其相似物的缔合加合物可以用于治疗能用该金属配合物治疗的症状。
多核金属配合物被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封也具有许多其他优点。例如葫芦形联脲[7-12]或其相似物可以将多核金属配合物更好地输送到或对准(targeting)体内所需位点。对准可以通过在葫芦形联脲[7-12]或其相似物上的适当取代基实现。例如，在葫芦形联脲[7-12]或其相似物上的亲脂基可以帮助多核金属配合物输送到亲脂性的肿瘤和癌症如肝的那些。另外，附着于或结合到聚合物上的葫芦形联脲[7-12]或其相似物可以提供在延长时期内输送多核金属配合物的手段。另外，不同的葫芦形联脲[7-12]对多核金属配合物可以具有不同的结合能力，并且因此可以用于提供多核金属配合物随着时间变化的特定释放速率。
对本领域的技术人员是显然的本发明的被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物在医学和兽医领域具有广范围的应用。例如，本发明减少多核金属配合物的活体内毒性的方法可以用于减少多核金属配合物——包括具有抗瘤活性的多核金属配合物——的药学活性的毒性。
本领域的技术人员应该理解为可以对实施例中所述的发明进行多种改变和/或修改，如同实施例中所述的那样，而不背离本发明的精神和范围。因此，在各方面均认为实施例中描述的实施方案是说明性的而不是限制性的。
权利要求
1.一种由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物。
2.权利要求1所述的由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，其中金属配合物是双核或三核金属配合物。
3.如权利要求1或2所述的由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，其中该金属配合物是通式(IIA)、(IIB)、(IIC)或(IID)的金属配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；E是一个通过具有孤对电子的氮原子配位到每个M原子上的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
4.如权利要求1或2所述的由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，其中该金属配合物是通式为(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IIID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成一二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；每个E是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到两个M原子中每一个的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
5.如权利要求3或4所述的由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，其中X选自卤素、硫酸根、磷酸根、硝酸根、羧酸基和取代羧酸基的单齿配体。
6.如权利要求3到5中任何一项所述的由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，其中B选自氨合物、伯胺、仲胺、叔胺和包括含有一个或多个N原子的杂环的基团。
7.如权利要求3到6中任何一项所述的由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，其中M是Pt(II)。
8.如权利要求1所述的由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，其中金属配合物选自 以下通式的配合物 其中m＝1，n＝2和o＝1；m＝3，n＝2和o＝3；或m＝4，n＝0和o＝4
9.如权利要求1到8中任何一项所述的由一个或多个葫芦形联脲[7 12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，其中，葫芦形联脲[7-12]是通式为(I)的葫芦形联脲 其中n是从7到12的整数并且其中通式(I)中的通式(B)的每个单元为 R1和R2可以相同或者不同，并且各为单价的基，或者R1、R2和将其结合在一起的碳原子形成任意取代的环基，或通式(B)的一个单元的R1和通式(B)的邻接单元的R2一起形成键或二价自由基，每个R3独立地选自＝O、＝S、＝NR、＝CXZ、＝CRZ和＝CZ2，并且其中Z是吸电子基团，X是卤素，而R是H、任意取代的直链、支链或环的饱和或不饱和的烃基、或任意取代的杂环基，并且每个R5独立地选自H、烷基和芳基。
10.一种减少多核金属配合物在活体内毒性的方法，该方法包括形成一种金属配合物和一个或多个联脲葫芦形[7-12]或其相似物的缔合体，其中，金属配合物被一个或多个葫芦形联脲联脲[7-12]部分包封。
11.如权利要求10所述的方法，其中该金属配合物是通式(IIA)、(IIB)、(IIC)或(IID)的金属配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；E是通过具有孤对电子的氮原子配位到每个M原子的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
12.如权利要求10所述的方法，其中该金属配合物是通式(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的金属配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IIID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；每个E是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到两个M原子中每一个的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
13.如权利要求11或12所述的方法，其中X选自卤化物、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、羧酸盐和取代羧酸盐的单齿配体。
14.如权利要求11到13中任何一项所述的方法，其中B选自氨合物、伯胺、仲胺、叔胺和包括含有一个或多个N原子的杂环基团。
15.如权利要求11到14中任何一项所述的方法，其中M是Pt(II)。
16.如权利要求10所述的方法，其中该金属配合物选自 (5)以下通式的配合物 其中m＝1、n＝2和o＝1；m＝3、n＝2和o＝3；或m＝4、n＝0和o＝4
17.一种治疗对象癌症的方法，该方法包括对该对象使用治疗有效量的被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的具有抗瘤活性的多核金属配合物。
18.如权利要求17所述的方法，其中该金属配合物是通式(IIA)、(IIB)、(IIC)或(IID)的金属配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；E是通过具有孤对电子的氮原子配位到每个M原子的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
19.如权利要求17所述的方法，其中该金属配合物是通式(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的金属配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IIID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；每个E是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到两个M原子中每一个的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
20.如权利要求18或19所述的方法，其中X选自卤素、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、羧酸盐和取代羧酸盐的单齿配体。
21.如权利要求18到20中任何一项所述的方法，其中B选自氨合物、伯胺、仲胺、叔胺和包括含有一个或多个N原子的杂环基团。
22.如权利要求18到21中任何一项所述的方法，其中M是Pt(II)。
23.如权利要求17所述的方法，其中该金属配合物选自 以下通式的配合物 其中m＝1、n＝2和o＝1；m＝3、n＝2和o＝3；或m＝4、n＝0和o＝4(6)
24.一种药物组合物，其包含被一种或多种葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的具有抗瘤活性的多核金属配合物和药物可接受的载体。
25.如权利要求24所述的组合物，其中该金属配合物是通式(IIA)、(IIB)、(IIC)或(IID)的金属配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；E是通过具有孤对电子的氮原子配位到每个M原子的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
26.如权利要求24所述的组合物，其中该金属配合物是通式为(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的金属配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IIID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；每个E是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到两个M原子中每一个的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
全文摘要
本发明提供由一个或多个葫芦形联脲[7－12]或其相似物部分包封的多核金属配合物。本发明还涉及通过使用由一个或多个葫芦形联脲[7－12]或其相似物部分包封的具有抗瘤活性的多核金属配合物治疗癌症的方法。
文档编号A61K31/28GK1922187SQ200580005664
公开日2007年2月28日 申请日期2005年1月14日 优先权日2004年1月15日
发明者尼尔·J·惠特, 安东尼·I·戴, 罗德尼·J·布兰奇, 约翰·G·柯林斯 申请人:新南创新有限公司
技术领域：
本发明涉及由一个或多个葫芦形联脲[7-12]部分包封的多核金属配合物或其相似物。本发明还涉及通过使用由一种或多种葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的具有抗肿瘤活性的多核金属配合物治疗癌症的方法，和包括由一种或多种葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的具有抗肿瘤活性的多核金属配合物的药物组合物。
背景技术：
葫芦形联脲是对由六个(6)甘脲单元通过亚甲基桥连接形成的环状寡聚体的名称。虽然，已经使用过术语“葫芦形联脲”，但在本说明书中用来指一族化合物(包括葫芦形联脲的一族)。为避免混淆，在本说明书中，化合物葫芦形联脲是指“未取代的葫芦形联脲[6]”。
葫芦形联脲是一族环状化合物。葫芦形联脲包含由4到12个通式(C)的单元所组成的大环 其中R1、R2、R3和R5可以是任何基团，并且在葫芦形联脲中的通式(C)的不同单元中可以是不同的。葫芦形联脲具有一个，有两个朝着中心空腔的开口的中心空腔，这两个开口被R3基(和R5基)围绕，并且中心空腔具有比两个开口更大的直径。葫芦形联脲可以将各种化合物包括气体和挥发性化合物包封在葫芦形联脲的空腔内。
在文献中，第一次记载未取代的葫芦形联脲[6]是1905年在由R.Behrend、E.Meyer、F.Rusche发表在Leibigs Ann.Chem.，399，1，1905的一篇论文中。未取代的葫芦形联脲[6]的大环结构第一次记载于1981年W.A.Freeman等人在J.Am.Chem.Soc.103(1981)，7367-7368的“Cucurbituril”中。未取代的葫芦形联脲[6]具有化学式C36H36N24O12，并且是具有中心空腔的大环化合物。
WO 00/68232描述多种未取代的和取代的葫芦形联脲[n]的合成。美国专利No 6,365,734也描述了多种葫芦形联脲[n]的合成。
另外的葫芦形联脲[n]和制备葫芦形联脲[n]的方法在待审的国际专利申请No.PCT/AU2004/001232中描述。
最近也描述了多种葫芦形联脲相似物。这些相似物具有如上所述的葫芦形联脲的基本结构，但是其中涉及上述的通式(C)中的一个或一些单元被别的基团如芳基取代的(例如，如Lagona J.等人在Oranic Letters，2003第5卷，第20期，3745-3747的“Cucurbit[n]uril Analogues”中描述)。
顺铂是一种具有抗肿瘤活性的单核铂配合物。顺铂已经用于治疗人类的各种癌症，包括睾丸、卵巢、膀胱、头和颈、肺和子宫颈的癌症。然而，顺铂具有许多缺点。许多人类癌症对顺铂具有天然的抗性，最初对顺铂治疗适用的许多癌症在后来获得耐药性。使用顺铂还受到其毒性的限制。已经开发了具有抗肿瘤活性的其他单核铂配合物，例如卡波铂。这些配合物中的一些的毒性比顺铂低。然而，很少成功发现对顺铂具有天然抗性的癌细胞具有活性的单核铂配合物。
最近描述了一类具有抗肿瘤活性的全新铂(II)配合物。这些配合物是包含二个或多个连接铂中心的多核铂(II)配合物，其中该配合物对在人或动物体内配合物的化学分解有抗性，以致该配合物作为多核配合物输送到体内的活性部位(例如肿瘤)。在多核铂配合物中的两个或多个铂中心可以各与DNA结合，并且该配合物因此能形成与顺铂及其他单核铂配合物相比完全不同的DNA加合物。在现有技术中认为这些多核铂配合物包括独特种类的抗肿瘤剂。与单核铂配合物如顺铂、卡波铂和美国专利No.4,225,529中描述的那些相比，这些配合物具有明显的化学和生物学性能。与单核铂配合物相反，大多数多核铂配合物是带电物种。
美国专利No.4,797,393描述了一种双铂(II)配合物，它作为双铂(II)配合物输送到活性部位。这种双铂配合物具有桥联二胺或多胺配体，并且具有配位到铂原子上的伯胺或仲胺或吡啶类氮，以及两种不同或相同的配体，该配体可以是卤素、硫酸根、磷酸根、硝酸根、羧酸基、取代的羧酸基或二羧酸基。
美国专利No.5,380,897描述了包含通过二胺或三胺桥联试剂而偶合的三铂配位球(spheres)的三铂(II)配合物。
虽然认为这些双铂(II)和三铂(II)配合物是有效的抗肿瘤剂，利用这些配合物治疗癌症受到它们对动物和人的毒性的限制。其他多核金属配合物也具有抗肿瘤或其他治疗性活性，但是也对动物和人也有毒性。
需要开发一种减少双铂(II)和三铂(II)配合物及其他多核金属配合物的毒性的方法。
发明内容
本发明人已经发现葫芦形联脲[7-12]及其相似物部分包封多核金属配合物。本发明人意外地发现多核金属配合物在被葫芦形联脲[7-12]或其相似物包封时对人和动物具有比游离配合物更低的毒性。
在第一个方面中，本发明提供了一种由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物。该金属配合物一般是双核或三核金属配合物。
在本发明的一些实施方案中，该金属配合物是通式(IIA)、(IIB)、(IIC)或(IID)的金属配合物 其中
每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；E是通过具有孤对电子的氮原子配位到每个M原子的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
在一些实施方案中，该金属配合物是通式(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的金属配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IIID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；每个E是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到两个M原子中每一个的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
当X是单齿配体时，X一般选自卤素、硫酸盐、磷酸盐(即H2PO4-或HPO42-)、硝酸盐、羧酸盐和取代羧酸盐的基团。
一般B选自氨合物、伯胺、仲胺、叔胺和包含含有一个或多个N原子的杂环的基团。
一般地，该金属配合物被葫芦形联脲[7-12]包封。通常，该葫芦形联脲[7-12]是通式为(I)的葫芦形联脲 其中n为7到12的整数，而且其中对通式(I)中的通式(B)的每个单元是 R1和R2可以相同或者不同，并且各为单价的基，或R1、R2和将它们结合在一起的碳原子形成任意取代的环基，或通式(B)的一个单元的R1和通式(B)的邻接单元的R2一起形成键或二价基，每个R3独立地选自＝O、＝S、＝NR、＝CXZ、＝CRZ和＝CZ2，其中Z是吸电子基团，如-NO2、-CO2R、-COR或CX3，X是卤素而R是H、任意取代的直链、支链或环状的饱和或不饱和的烃基，或任意取代的杂环基，并且每个R5独立地选自H、烷基和芳基。
在第二个方面中，本发明提供一种减少多核金属配合物在体内的毒性的方法，该方法包括形成一种金属配合物与一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物的缔合体，其中金属配合物被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封。
通常，金属配合物与一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物的缔合体是通过将金属配合物与一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物相接触而形成的。
在第三个方面中，本发明提供一种用于治疗对象癌症的方法，该方法包括对该对象使用治疗有效量的被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的具有抗肿瘤活性的多核金属配合物。
本发明进一步提供被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的具有抗肿瘤活性的多核金属配合物在制造用于治疗对象癌症的药剂中的用途。
癌症可以包括例如睾丸癌、卵巢癌、膀胱癌、头和颈的癌症、肺癌或子宫颈癌。该癌症可以是对顺铂具有抗性的癌症。
在第四个方面中，本发明提供一种药物组合物，其包括由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的具有抗肿瘤活性的多核金属配合物，和一种药物可接受的载体。
实施本发明的最佳方式在本文中所使用的术语“葫芦形联脲[n]”是指包含由n个通式(C)的单元组成的环的葫芦形联脲 其中R1、R2、R3和R5可以是任何基团，而n是从4到12的整数。一般，R1、R2、R3和R5如以上通式(I)中定义。
在本文中使用的术语“未取代的葫芦形联脲[n]”是指一种葫芦形联脲[n]，其中在该葫芦形联脲[n]中通式(C)中所有单元中的R3是O而R1、R2和R5都是H。而术语“取代的葫芦形联脲[n]”是指除了未取代的葫芦形联脲[n]以外的葫芦形联脲[n]。
在本文中使用的葫芦形联脲[n]的“相似物”是指一种具有类似于葫芦形联脲[n]的环状结构的化合物但其中通式
的一个或一些单元是被其它基团例如芳基所代替，并且其中该相似物能够部分包封多核金属配合物。
如在本文中使用的，通过由葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，是指部分金属配合物是位于葫芦形联脲[7-12]或其相似物的空腔内。一般，金属配合物是被葫芦形联脲[n]或其相似物可逆地包封，即在一定条件下金属配合物从葫芦形联脲[n]或其相似物中释放出来。
单独使用或在复合词如“烷基芳基”中使用的术语“烷基”表示直链、支链或单环或多环的烷基，优选C1-30的烷基。直链和支链烷基的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、异戊基、仲戊基、1，2-二甲丙基、1，1-二甲丙基、己基、4-甲戊基、1-甲戊基、2-甲戊基、3-甲戊基、1，1-二甲丁基、2，2-二甲丁基、3，3-二甲丁基、1，2-二甲丁基、1，3-二甲丁基、1，2，2-三甲丙基、1，1，2-三甲丙基、庚基、5-甲己基、1-甲己基、2，2-二甲戊基、3，3-二甲戊基、4，4-二甲戊基、1，2-二甲戊基、1，3-二甲戊基、1，4-二甲戊基、1，2，3-三甲丁基、1，1，2-三甲丁基、壬基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-甲辛基、1-、2-、3-、4-或5-乙庚基、1-、2-或3-丙己基、癸基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-甲壬基、1-、2-、3-、4-、5-或6-乙辛基、1-、2-、3-或4-丙庚基、十一烷基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-或9-甲癸基、1-、2-、3-、4-、5-、6-或7-乙壬基、1-、2-、3-、4-或5-丙辛基、1-、2-或3-丁庚基、1-戊己基、十二烷基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-、8-、9-或10-甲十一烷基、1-、2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-乙癸基、1-、2-、3-、4-、5-或6-丙壬基、1-、2-、3-或4-丁辛基、1-2-戊庚基等。环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基、环壬基和环癸基等。
单独使用或在复合词中使用的术语“链烯基”表示直链、支链或环状链烯、优选C2-30的烯基。烯基的实例包括乙烯基、烯丙基、1-甲乙烯基、丁烯基、异丁烯基、3-甲基-2-丁烯基、1-戊烯基、环戊烯基、1-甲基-环戊烯基、1-己烯基、3-己烯基、环己烯基、1-庚烯基、3-庚烯基、1-辛烯基、环辛烯基、1-壬烯基、2-壬烯基、3-壬烯基、1-癸烯基、3-癸烯基、1，3-丁二烯基、1，4-戊二烯基、1，3-环戊二烯基、1，3-己二烯基、1，4-己二烯基、1，3-环己二烯基、1，4-环己二烯基、1，3-环庚二烯基、1，3，5-环庚三烯基和1，3，5，7-环幸四烯基。
单独使用或在复合词中使用的术语“烷氧基”表示直链、支链的烷氧基，优选C1-30的烷氧基。烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、n-丙氧基、异丙氧基和不同的丁氧基异构体。
单独使用或在复合词中使用的术语“芳基”表示芳烃或芳族杂环体系的单环、多环、共轭的或稠合的(fused)残基。芳基的实例包括苯基、萘基、吡啶基、呋喃等。当芳基是杂芳基时，芳族杂环体系可以包含1到4个独立选自N、O和S的杂原子。
本发明涉及由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物。这种金属配合物和一种或多种葫芦形联脲[7-12]或其相似物的缔合体可以称为配合物与葫芦形联脲[7-12]或其相似物的“缔合加合物”。
金属配合物被葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封，并且因此部分金属配合物从葫芦形联脲[7-12]或其相似物的一个或两个开口处伸出。在本发明的一些实施方案中，金属配合物被两个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封。
金属配合物可以是任何多核金属配合物。位于配合物中心的金属可以是相同或不同的。
一般，金属配合物是如上定义的通式(IIA)、(IIB)、(IIC)、(IID)、(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的金属配合物。这些通式的金属配合物具有抗肿瘤活性。这些通式的金属配合物在人或动物体内也是对多核配合物的化学分解有抗性，以致当对人或动物体使用该配合物时，该配合物作为多核配合物输送到体内活性部位(例如肿瘤)。
然而，本发明不局限于通式(IIA)、(IIB)、(IIC)、(IID)、(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的金属配合物。金属可以是例如另外的多核金属配合物，如以下通式的配合物
或 或 在本发明的一些实施方案中，金属配合物是通式(IIA)、(IIB)、(IIC)、(IID)、(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的金属配合物，其中M是Pt(II)。优选地，金属配合物是通式(IIA)或(IIIA)的金属配合物，其中M是Pt(II)。优选这些金属配合物，因为已经发现其中X和E是反式构型的金属配合物与这种配合物的其他异构体相比是更有效的抗肿瘤剂。
对于通式(IIA)、(IIB)、(IIC)、(IID)、(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)和(IIID)的金属配合物，位于葫芦形联脲[7-12]或其相似物的空腔内的配合物的部分一般是E或部分E。
在通式(IIA)、(IIB)、(IIC)、(IID)、(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或者(IIID)中，当X是羧酸基或取代羧酸基时，X可以由以下通式表示CR6(C(R6)2)mCO2，其中m是从0到5的整数，包括0和5在内，R6基可以是相同或不同的，并且可以是氢、任意取代的直链或者支链烷基(例如C1-5烷基)、任意取代的芳基、任意取代的烷基芳基、任意取代的芳烷基、任意取代的链烯基、任意取代的炔基、任意取代的环烷基、任意取代的环烯基、卤素、拟卤素(pseudohalogen)、羟基、羰基、甲酰、硝基、酰胺基、氨基、烷氧基、芳氧基和磺酸盐，或者可以结合为(R6)2的两个R6基团，以使(R6)2表示双键氧或硫。任意的取代基可以选自芳基、2到6个碳原子的环烷基、环烯基、芳烷基、卤素、拟卤素、羟基、烷氧基、1到5个碳原子的环氨基或羧酸盐或酯。
在本文中使用的术语“拟卤素”具有由Cotton和Wilkinson在Interscience出版社1966年在“Advanced Inorganic Chemistry”的560页上的含义。该原文描述拟卤素是一种包含二个以上的以游离状态存在的负电原子的分子代表卤素。这些分子的实例是氰化物、氰酸物、硫氰酸物和叠氮化物一般B选自氨合物(NH3)、伯胺、仲胺、叔胺和包括含有一个或多个N原子的杂环的基团。包含一个或多个N原子的杂环可以是芳基或脂肪基。当B是胺时，B可以是例如支链或直链的烷基胺(一般是C1-5的烷基胺)，芳基胺、芳烷基胺或链烯基胺(一般是C1-5的链烯基胺)。B也可以是环烷基胺，多环烃胺、核苷、核苷酸、吡啶型含氮基团或具有羟基、烷氧基(一般C1-5的烷氧基)、羧酸或羧酸酯、硝基、或卤素取代基的胺。
优选的伯胺是通式为NH2-R10的烷基胺，其中R10是直链或支链的C1-5的烷基、C3-C6的环烷基(即环丙基、环丁基、环戊基或环己基)或-CH2OH。
优选的仲胺包括通式为NH(R10)2的烷基胺，其中每个R10是独立选择的，并且R10如上定义。
两个配位到单个M原子上的B配体可以是二齿配体例如二氨合物。同样地，E和一个或两个B配体可以是相同的三齿或四齿配体的一部分。
E可以是包含两个或多个具有孤对电子的N原子的任何配体，其中一个这种N原子与一个M原子配位，而另一个这样的N原子与另一个M原子配位。
E可以例如具有通式NDG-(C(R7)2)n-(R8)o-(C(R9)2)p-NDG其中n和p可以是从1到6的整数，包括1和6在内，而o是0或1；R7和R9基团各是独立地选自氢、烷基(一般C1-5的烷基)、芳基、环烷基、环烯基、芳烷基、卤素、拟卤素、羟基、烷氧基、芳氧基、羧酸酯和羧酸盐，优选地，所有R7和R9基团为H；R8选自烷基(例如C1-5的烷基)、芳基(例如苯基)、氨基、烷氨基、通式为-(NH(CH2)qNH)的二氨基——其中q是1到4的整数(包括1和4)、羟烷基、烷氧基、硫和氧；并且每个D和G均独立地选自氢、烷基(一般C1-5的烷基)、芳基、烷芳基、芳烷基、链烯基、环烷基、环烯基、卤素、拟卤素、羟基、烷氧基、芳氧基、磺酸和其盐，优选地D和G是H。
E可以是例如亚精胺、在中心N原子处双甲基化的亚精胺、精胺、二吡唑基甲烷或1，6-己二胺。
当B和E是电中性时，通式(IIA)、(IIB)或(IIC)的金属配合物的总电荷一般是2+，而通式(IID)的金属配合物一般是中性的。当B和E电中性时，通式(IIIA)、(IIIB)或(IIIC)的金属配合物的总电荷一般是4+，并且通式(IIID)的金属配合物一般是2+。
在现有技术中描述了各种具有抗肿瘤活性的多核铂(II)配合物。例如，各种具有抗肿瘤活性的多核铂(II)配合物记载在Wheate NJ和Collins JG的Coordinated Chemistry Reviews，241(2003)，133-145的“Multi-nuclear platinumcomplexes as anti-cancer drugs”文章和Kellard L.R.和Farrell N.P.(编辑)2000年321-338页的“Platinum-Based Drugs in Cancer Therapy”，Humana出版社，Totowa的章节中。其内容在本文中引用供参考。在本发明中使用的多核金属配合物可以是这些文献中描述的任何一种多核铂(II)配合物。
现有技术中记载的具有抗肿瘤活性的具体多核铂(II)配合物的实例包括
其中(a)m＝1，n＝2，o＝1(BBR3535)；(b)m＝3，n＝2，o＝3(BBR3610)；或(c)m＝4，n＝0，o＝4(BBR3611) 二-Pt 三-Pt通式(IIA)的金属配合物的实例是 N-二甲基BBR3571在本发明的一些实施方案中，金属配合物是通式(IIA)的金属配合物，其中X是氯化物，B是氨合物而E是二吡唑基甲烷。这种具有抗衡离子氯的配合物已知的是氯化{反式-二氨合氯(μ-二吡唑基甲烷)铂(II)}。该配合物以下称为“二-Pt”。
在本发明的一些其它实施方案中，金属配合物是通式(IIA)的金属配合物，其中X是氯化物，B是氨合物而E是亚精胺。这种具有抗衡离子氯的配合物是已知的是氯化{反式-二氨合氯(μ-亚精胺)铂(II)}。这个配合物以下称为“BBR3571”。
在本发明的一些实施方案中，金属配合物是通式(IIIA)的金属配合物，其中X是氯化物，B是氨合物而E是二吡唑基甲烷。这种具有抗衡离子氯的配合物已知的如氯化{反式-二氨合双{反式-二氨合氯(μ-二吡唑基甲烷)铂(II)}铂(II)}。这种配合物以下称为“三-Pt”。
在本发明的一些实施方案中，金属配合物是通式(IIIA)的金属配合物，其中X是氯化物、B是氨合物而E是1，6-己二胺。这种具有硝酸根抗衡离子的配合物已知的如硝酸{反式-二氨合双{反式-二氨合氯(μ-1，6己二胺)铂(II)}铂(II)}。这种配合物以下称为“BBR3464”。
葫芦形联脲[7-12]或其相似物可以是能包封部分金属配合物的任何葫芦形联脲[7-12]或其相似物。一般，葫芦形联脲[7-12]是通式(I)的葫芦形联脲[7-12]。当金属配合物被两个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封时，该两个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物可以是相同或不同的。
一般，在通式(I)中，当R1和R2是单价基时，R1和R2独立地选自-R、-OR、-SR、-NR2，其中每个R独立地选择；-NO2、-CN、-X、-COR、-COX、-COOR、 其中每个R独立地选择； 其中每个R独立地选择；-SeR、-SiR3，其中每个R独立地选择；-SR、-SOR、 -SO2R、-S-S-R、-BR2，其中每个R独立地选择；-PR2其中每个R独立地选择； 其中每个R独立地选择； 其中每个R独立地选择；-P+R2其中每个R独立地选择；和金属或金属配合物，其中R是H、任意取代的直链、支链或环状的饱和或不饱和的烃基，或任意取代的杂环基，而X是卤素。R可以例如是H或直链或者支链C1-5的烷基、或C1-5的链烯基。
当R1和R2是单价基时，R1和R2可以例如选自H、任意取代的烷基(例如C1-5的烷基如甲基、乙基、丙基、异丙基、n-丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基等)、任意取代的链烯基、任意取代的炔基、任意取代的杂环基、任意取代的芳基(例如苯基、萘基、吡啶基、呋喃基或苯硫基)、-OR、-SR或-NR2。
在一些实施方案中，当R1和R2是单价基时，R1和R2各包括小于30个碳原子。R1和R2可以例如独立地选自1到30个碳原子的烷基、2到30个碳原子的烯基、5到30个碳原子的环烃基、4到30个碳原子的具有一个或多个诸如O、N或S的杂原子的环基、6到30个碳原子的芳基和5到30个碳原子的具有一个或多个诸如O、N或S的杂原子的芳基。
R1和R2可以是例如烷氧基如甲氧基、乙氧基、丙氧基等。R1和R2也可以是羟基、卤素、氰基、硝基、氨基、烷氨基或烷硫基。
由R1、R2和将其结合在一起的碳原子所形成的任意取代的环基的实例包括5到30个碳原子的任意取代的饱和或不饱和的环烃基，和3到30，一般为4到30个碳原子的具有一个或多个诸如O、N或S的杂原子的任意取代的饱和或不饱和环基。
在通式(1)的化合物中可连接通式(B)相邻单元的R1和R2的二价基可以是例如包括1个或多个碳原子的二价的任意取代的直链或支链的饱和或不饱和的烃基。二价基可以是或包含一个或多个杂原子如O、N或S。
当R是任意取代的烃基或任意取代的杂环基时，烃基或杂环基可以被一个或多个取代基取代。同样地，当R1、R2和将其结合在一起的碳原子一起形成任意取代的环基时，该环基可以被一个或多个取代基取代。任意的取代基可以是任何基团，并且可以是例如任意取代的烷基(例如C1-5的烷基)、任意取代的烯基(例如C2-5的烯基)、任意取代的炔基(例如C2-5的炔基)、任意取代的杂环基、任意取代的芳基、卤素(例如F、Cl、Br或I)、羟基、烷氧基、羰基、酰基卤、硝基、羧酸、羧酸酯、氨基、亚氨基、氰基、异氰酸酯、硫醇、硫醇酯、硫代酰胺、硫代脲、砜、硫化物、亚砜、或磺酸基团或金属或金属配合物。任意的取代基也可以是硼烷、含磷基团如磷化氢、烷基磷化氢、磷酸盐或磷酰胺、含硅基团或含硒基团。
一般，Z选自-NO2、-CO2R、-COR、-CX3，其中X是卤素(例如F、Cl、Br或I)并且R是H、烷基(例如C1-5的烷基)、链烯基(例如C2-5的烯基)、炔基(例如C2-5的炔基)、芳基、杂芳基或饱和或不饱和的杂环基。
迄今为止制备的大多数葫芦形联脲[4到12]是其中在装配成葫芦形联脲的通式(B)中的所有单元中的R3为O并且R5为H的葫芦形联脲[4到12]。因此，在本发明的一些实施方案中，葫芦形联脲[7-12]是一种通式(I)的葫芦形联脲[7-12]，其中，装配成通式(I)的通式(B)的所有单元中的R3为O并且R5为H。
通式(I)的葫芦形联脲[7-12]可以按照WO 00/68232、美国专利No.6,365,734所描述的或按照国际专利申请No.PCT/AU2004/001232所描述的进行制备。葫芦形联脲[7-12]的相似物可以按照Lagona J.等人在OrganicLetters，2003第5卷，第20期，3745-3747页的“Cucurbit[n]uril Analogue”所描述的进行制备，其内容在本文中引用供参考。
多核金属配合物和葫芦形联脲[7-12]或其相似物的缔合加合物可以通过将金属配合物与葫芦形联脲[7-12]或其相似物相接触而制备。一般，通过将金属配合物和葫芦形联脲[7-12]或其相似物溶解或悬浮在溶剂，通常为水中，使金属配合物与葫芦形联脲[7-12]或其相似物相接触。
缔合加合物可以例如通过以下步骤形成相对于金属配合物为1或2摩尔当量的葫芦形联脲[7-12]或其相似物(注释1)溶解或悬浮在水中(注释2)，然后加入金属配合物，并且在环境温度下(≤35℃)搅拌该混合物。特别是当葫芦形联脲[7-12]或其相似物在含水体系(注释3)中具有低的溶解度时，可以使用相反的添加顺序。几个小时之后，通过过滤收集或除去所有不溶材料。可以通过NMR共振波谱检测缔合加合物的形成。然后将含水混合物冷冻干燥(注释4)以产生呈细粉的缔合加合物。注释1.化学计量取决于缔合加合物中葫芦形联脲[7-12]或其相似物对多核金属配合物的要求为2∶1、1∶1或任何其他组合。
2.在有些情况下，可以使用盐水(saline)溶液。可以使用加热到沸腾以便在含水体系中溶解葫芦形联脲[7-12]或其相似物，然后在添加金属配合物之前将其冷却到环境温度。
3.对于在含水体系中不是很易溶的葫芦形联脲[7-12]或其相似物，可以将有机溶剂如乙腈、四氢呋喃、三氟乙醇和甲酸添加到含水体系中。在从含水体系中分离缔合体之前，该有机溶剂以真空除去。
4.当使用盐水溶液时，缔合加合物不通过冷冻干燥从溶液中分离，而是通过从盐溶液中结晶分离。
本发明人已经发现被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物对人和动物具有比未缔合的金属配合物的毒性更低。
因此，本发明提供一种减少多核金属配合物的活体内毒性的方法，该方法包括使金属配合物与一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物形成一种缔合体，其中部分金属配合物被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物所包封。
不希望受理论的限制，本发明人相信当被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封时多核金属配合物在活体内毒性的减少是由于金属配合物的包封导致减少金属配合物和人或动物体内的化合物之间的不希望的反应。人们相信多核金属配合物的毒性是由于，至少部分是由于人或动物体内的化合物如硫代蛋白和/或血浆蛋白和金属配合物之间的反应，认为其产物诱发中毒反应。金属配合物被葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封被认为特别是在血流中减少了这些反应。认为不希望的生化反应的减少是由于葫芦形联脲[7-12]或其相似物通过葫芦形联脲[7-12]或其相似物的体积位阻或通过葫芦形联脲[7-12]或其相似物的负电性入口的排斥作用而阻碍体内分子和多核金属配合物之间反应。
许多多核金属配合物具有抗肿瘤活性。
本发明提供一种治疗对象癌症的方法，该方法包括对该对象使用治疗有效量的被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的具有抗肿瘤活性的多核金属配合物。可以由本领域的技术人员容易地通过活体外筛选抗癌细胞系配合物的活性而确定多核金属配合物的抗肿瘤活性。一般，具有抗肿瘤活性的多核金属配合物是如上通式(IIA)、(IIB)、(IIC)、(IID)、(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)定义的金属配合物。更一般地，多核金属配合物是通式(IIA)、(IIB)、(IIC)、(IID)、(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的金属配合物，其中M是Pt(II)。在一些实施方案中，具有抗瘤活性的多核金属配合物选自
以下通式的配合物 其中m＝1，n＝2和o＝1；m＝3，n＝2和o＝3；或m＝4，n＝0和o＝4 或 对象可以是哺乳动物，优选是人。对象可以是非人类的灵长目动物或非灵长目动物如动物模型试验中使用的。虽然特别期待该方法适合在人类的医疗中使用，但它也适用于兽医治疗，包括宠物如狗和猫，以及家畜如马、小型马、驴、骡、骆驼、羊驼、猪、牛、和羊，或者动物园动物如灵长目动物、猫科动物、犬科动物、牛科动物和有蹄类动物的治疗。
合适的哺乳动物依次包括灵长目、啮齿目、复齿目、鲸目、食肉目、奇蹄目和偶蹄目的成员。
本文中使用的术语“治疗学有效量”指有效地获得所需治疗学反应如通过减缓癌细胞的生长或扩散速率来治疗癌症的量。具体的“治疗学有效量”显然随着这种因素如治疗的具体条件、对象的身体条件、要治疗对象的类型、治疗的持续时间、同时治疗(如果有的话)的性质和使用的具体配方而变化。考虑缔合加合物的LD50值，例如，该缔合加合物可以以相当于顺铂的有效剂量使用。
本文中使用的术语“治疗”、“处理”等是指影响对象、组织或细胞以便获得所需的药理学和/或生理效果。该效果可以是预防性的，完全或部分预防疾病或其征兆或症状，和/或可以是治疗学上的，部分或完全治愈疾病。本文中使用的“治疗”覆盖疾病的任何治疗或预防，并且包括(a)预防易感染该疾病但是还没有被诊断为感染的对象所发生疾病；(b)抑制疾病，即阻止其发展；或(c)减轻或改善疾病的影响，即致使疾病的影响消退。
金属配合物和一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物的缔合加合物可另外与其他治疗剂结合以便提供有效的组合物。旨在包括治疗剂的任何化学上兼容的组合物，只要组合物不消除缔合加合物的活性。应该理解为缔合加合物和另一治疗剂可以单独使用、依次先后使用、或同时使用。
缔合加合物可以口服或肠胃外注射给对象使用。给药可以是静脉内、动脉内、腹膜内、肌内、皮下、腔内、表皮内或通过例如渗透泵注入。
本发明的组合物包括具有抗肿瘤活性的多核金属配合物和一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物的至少一种缔合加合物，和一种或多种药物可接受的载体。该组合物还可以任意包括其他的治疗剂。本发明的组合物包括那些适合口服、直肠、鼻、局部(包括口腔和舌下)、阴道或肠胃外(包括皮下、肌肉、静脉内和皮内)给药。该组合物可以方便地以单位剂型存在，并且可以通过制药业中众所周知的方法制备。这种方法包括步骤用药物可以接受的载体和该组合物的任何其他成分将活性成分带进缔合物内。通常，组合物是通过将活性成分与药物上可接受的载体和该组合物的任何其他成分均匀地并且密切地进行缔合而制备，并且然后如果有必要，使产品成型。
如本文中使用的“药物载体”是用于将活性成分输送到对象的药物可接受的溶剂、悬浮剂或者介质。载体可以是液体或固体，并且根据给药所计划的方式选择。载体是药物“可接受的”，意思不是生物学上或者另外不受欢迎的，即载体能与活性成分一起使用于对象，而不导致任何或相当的不良反应。
本发明用于口服用途的药物组合物可以包含选自甜味剂、崩解剂、调味剂、着色剂、防腐剂、润滑剂和延时剂中的一种或多种试剂，以制造药物上精致和可口的制剂。合适的甜味剂包括蔗糖、乳糖、葡萄糖、天冬甜素或糖精。合适的崩解剂包括玉米淀粉、甲基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、黄原胶、膨润土、藻酸或琼脂。合适的调味剂包括薄荷油、冬青油、樱桃、橙或覆盆子调味剂。合适的防腐剂包括苯甲酸钠、维生素E、α-生育酚、抗坏血酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯或亚硫酸氢钠。合适的润滑剂包括硬脂酸镁、硬脂酸、油酸钠、氯化钠或滑石。合适的延时剂包括单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
本发明片剂形式的药物组合物可以包括(1)惰性稀释剂如碳酸钙、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；(2)粒化剂和崩解剂如玉米淀粉或藻酸；(3)粘合剂如淀粉、凝胶或阿拉伯胶；和(4)润滑剂如硬脂酸镁、硬脂酸、或滑石。片剂可以没有包衣或通过已知技术进行包衣，以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，并且因此在较长时期内持续作用。例如，可以使用延时材料如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
肠胃外给药的组合物包括无菌含水或无水的溶液、悬浮液和乳化液。可以用于这种组合物的无水载体的实例是丙二醇、聚乙二醇、植物油如橄榄油和可注射的有机酯如油酸乙酯。含水载体包括水、乙醇/水溶液、乳化液或悬浮液，包括盐水和缓冲介质。肠胃外的介质包括氯化钠溶液、林格氏(Ringer′s)右旋糖、右旋糖和氯化钠、乳酸化的林格氏静脉内介质包括液体和营养补充剂、电解质补充剂(如基于林格氏右旋糖的)等。也可以存在防腐剂及其他添加剂，例如抗微生物剂、抗氧化剂、螯合剂、生长刺激素和惰性气体等。
兽医组合物例如可以通过现有技术中的常规方法制备。这种兽医组合物的实例包括那些适合于
(a)口服给药，例如片剂；用于与饲料混合的粉末、颗粒或小球；用于舌头的糊剂；(b)肠胃外给药，例如作为无菌溶液或悬浮液通过皮下、肌肉内或静脉注射；或(当合适时)通过乳房内注射，通过乳头将悬浮液或溶液引入乳房；(c)局部应用，例如作为应用到皮肤上的乳剂、油膏或喷雾剂；或(d)阴道内给药、例如作为阴道栓、膏或泡沫体。
现在参考以下非限制性实施例对本发明进行描述。
实施例1由葫芦形联脲[7-12]包封的二铂配合物，1∶1缔合加合物的制备将未取代的葫芦形联脲[7](1摩尔当量)完全溶解在热(60-90℃)的200mM的NaCl溶液(150毫升)或H2O(150毫升)中。对此添加1摩尔当量的氯化{反式-二氨合氯(μ-二吡唑基甲烷)铂(II)}(二-Pt)，并且将该溶液搅拌1小时。缓慢蒸发产生缔合加合物的晶体。
使用未取代的葫芦形联脲[8]代替未取代的葫芦形联脲[7]并按照相同的步骤，也得到白色粉末。
类似的方法可用于制备金属配合物和其它未取代的或取代的葫芦形联脲[7-12]或葫芦形联脲[7-12]的相似物的缔合加合物。
实施例2由葫芦形联脲[n]包封的三铂配合物，1∶2缔合加合物的制备将大约50毫克溶于水(10毫升)中的未取代的葫芦形联脲[7]或未取代的葫芦形联脲[8]添加到半摩尔当量的溶于水(10毫升)中的BBR3464中。样品在室温下搅拌1小时，之后将该溶液冷冻干燥。通过1H NMR谱分析样品，表明金属配合物被葫芦形联脲包封。
类似的方法也可以用于制备金属配合物与其它未取代的或取代的葫芦形联脲[7-12]或葫芦形联脲[7-12]的相似物的缔合加合物。
实施例3缔合加合物形成的NMR分析将未取代的葫芦形联脲[7]或未取代的葫芦形联脲[8]的等分量的溶液(5mM)直接添加到含有D2O中的BBR3571或BBR3464的稀释溶液(1.5mM)的NMR管中，并且每次添加后记录的1H NMR波谱，表明金属配合物被葫芦形联脲包封。
实施例4生物测试样品的制备将约50毫克溶于水(10毫升)中的未取代的葫芦形联脲[7]或未取代的葫芦形联脲[8]添加到等摩尔量的溶于水(10毫升)中的BBR3571中。样品在室温下搅拌1小时，之后将该溶液冷冻干燥。通过1H NMR波谱分析样品，表明金属配合物被葫芦形联脲包封。
按照实施例2中的方法制备BBR3464/未取代的葫芦形联脲[7]和BBR3464/未取代的葫芦形联脲[8]加合物。按照实施例5中所述，制备BBR3464/未取代的葫芦形联脲[10]加合物。
实施例5微溶的葫芦形联脲[n]将溶于水(2毫升)中的BBR3464(6毫克)添加到5毫克未取代的葫芦形联脲[10]中，另外添加4毫升水并且将该悬浮液搅拌过夜。然后再添加5毫克葫芦形联脲[10]和5毫升水，并且将该悬浮液再搅拌48小时。然后将该悬浮液离心并且将上层清液冷冻干燥。通过1H NMR波谱分析样品，表明金属配合物被葫芦形联脲包封。
实施例6活体外的生物测试对BBR3571、如以上实施例4所述制备的BBR3571和未取代的葫芦形联脲[7]的缔合加合物、二-Pt和如以上实施例1所述制备的二-Pt和未取代的葫芦形联脲[7]的缔合加合物测试其抗L1210鼠科白血病细胞以及其相配的耐顺铂的细胞L1210/DDP的细胞毒素活性。测试按照N.J.Wheate等人在Anti-Cancer Drug Design，16，91(2001)中提出的步骤在活体外进行。并且结果列于表I中。表I中的结果是以抑制细胞生长50％所需要的配合物或缔合加合物的最小浓度IC50表示的。
表I
由于缔合加合物产生与游离配合物类似的数值，认为缔合加合物是抗这些白血病细胞系的有效抗癌剂。因此，BBR3571和二-Pt的总的细胞毒素活性保持在BBR3571和二-Pt和未取代的葫芦形联脲[7]的缔合加合物中。
在表II中，按照以上指出的步骤，使用实施例4和5所述制备的BBR3464与未取代的葫芦形联脲[7]、未取代的葫芦形联脲[8]或未取代的葫芦形联脲[10]的缔合加合物，证明能通过与葫芦形联脲[7-10]形成的缔合加合物来调节铂配合物的细胞毒素活性。活体外测试证明通过减小包封葫芦形联脲[n]的尺寸减小配合物BBR3464的细胞毒性。
表II
实施例7活体内的生物测试A.最大耐受剂量(MTD)在雌性balb/c裸鼠中，在活体内测试铂配合物BBR3571和BBR3571与未取代的葫芦形联脲[7]的缔合加合物。
这些测试的结果表明缔合加合物在以盐水溶液在静脉内输送时，BBR3571具有比游离配合物高1.7倍的最大耐受剂量(MTD)，表III
与葫芦形联脲[7]/BBR3571缔合加合物的0.45毫克/公斤相比，游离的铂配合物BBR3571的最大耐受量是0.1毫克/公斤。
B.游离金属配合物与缔合加合物的活体内细胞毒素活性的对比BBR3571与未取代的联脲葫芦形[7]的缔合加合物在药当量为1(等摩尔量)的细胞毒素活性与游离金属配合物比较。实验受到游离金属配合物的MTD的限制。对雌性balb/c裸鼠在侧腹皮下接种2008卵巢癌细胞系的细胞。一旦肿瘤达到大约100立方毫米的体积，将小鼠随机分组，并且以BBR3571的盐水溶液在MTD下给药，或以未取代的葫芦形联脲[7]和BBR3571等摩尔量的缔合加合物(0.27毫克/公斤的缔合加合物)的盐水溶液给药。以盐水或未取代的葫芦形联脲[7]的盐水溶液进行对比给药。剂量按照0，4天和8天给药。结果在表IV中所示。
表IV
a肿瘤生长指数(TGI)定义为100减去(治疗组小鼠的平均相对肿瘤体积除以对比组小鼠的平均相对肿瘤体积乘以100)。
b生长延迟指数(GDI)定义为治疗肿瘤的平均生长延迟除以对比(未治疗)肿瘤的平均生长延迟。
游离配合物和缔合加合物显示在药当量为1时两者具有相当的活性。实施例8-葫芦形联脲[n]/金属配合物缔合加合物的总的1H NMR波谱按实施例4制备的BBR3571和未取代的葫芦形联脲[7]或未取代的葫芦形联脲[8]的缔合加合物，按实施例1中制备的二-Pt和未取代的葫芦形联脲[7]的缔合加合物、通过与在实施例2所述的类似方法制备的三-Pt与未取代的葫芦形联脲[7]的缔合加合物和在实施例5中制备的BBR3464与未取代的葫芦形联脲[10]的缔合加合物通过1H NMR波谱分析，并且其结果列于表V。
葫芦形联脲[n]的空腔的特征性屏蔽效应表明在大多数实施例中，作为缔合加合物的金属配合物的质子的共振在与游离金属配合物的样品比较时向高磁场位移(以负号表示)。这表明连接基团E在葫芦形联脲[n]的空腔内部结合，并且因此证实金属配合物被葫芦形联脲部分包封。
实旋例
1.在BBR3571中E＝NH2CH2CH2CH2NH2+CH2CH2CH2CH2NH2a b c d*c*b*a*2.在配合物二-Pt和三-Pt中，E＝
3.在BBR3464中，E＝NH2CH2CH2CH2CH2CH2CH2NH2a b c c*b*a*表V1H NMR共振位移的表。在游离金属配合物的质子和作为葫芦形联脲[n]/金属配合物加合物的相同的质子之间化学位移的差异对比
本发明人已经发现葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封多核金属配合物，并且所产生的缔合加合物对人或动物体具有比游离金属配合物更低的毒性。由于多核金属配合物的尺寸，它们没有被完全包封在葫芦形联脲[7-12]或其相似物内部。然而，本发明人已经意外地发现当多核金属配合物被一种或多种葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封时，所生成的缔合加合物对人和动物具有比游离配合物更低的毒性，并且因此，在配合物作为与一种或多种葫芦形联脲[7-12]或其相似物的缔合加合物的一部分时对人或动物的给药的剂量可比作为游离配合物给药的剂量更高。具有抗肿瘤活性的多核金属配合物和一种或多种葫芦形联脲[7-12]或其相似物的缔合加合物可以用于治疗能用该金属配合物治疗的症状。
多核金属配合物被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封也具有许多其他优点。例如葫芦形联脲[7-12]或其相似物可以将多核金属配合物更好地输送到或对准(targeting)体内所需位点。对准可以通过在葫芦形联脲[7-12]或其相似物上的适当取代基实现。例如，在葫芦形联脲[7-12]或其相似物上的亲脂基可以帮助多核金属配合物输送到亲脂性的肿瘤和癌症如肝的那些。另外，附着于或结合到聚合物上的葫芦形联脲[7-12]或其相似物可以提供在延长时期内输送多核金属配合物的手段。另外，不同的葫芦形联脲[7-12]对多核金属配合物可以具有不同的结合能力，并且因此可以用于提供多核金属配合物随着时间变化的特定释放速率。
对本领域的技术人员是显然的本发明的被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物在医学和兽医领域具有广范围的应用。例如，本发明减少多核金属配合物的活体内毒性的方法可以用于减少多核金属配合物——包括具有抗瘤活性的多核金属配合物——的药学活性的毒性。
本领域的技术人员应该理解为可以对实施例中所述的发明进行多种改变和/或修改，如同实施例中所述的那样，而不背离本发明的精神和范围。因此，在各方面均认为实施例中描述的实施方案是说明性的而不是限制性的。
权利要求
1.一种由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物。
2.权利要求1所述的由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，其中金属配合物是双核或三核金属配合物。
3.如权利要求1或2所述的由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，其中该金属配合物是通式(IIA)、(IIB)、(IIC)或(IID)的金属配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；E是一个通过具有孤对电子的氮原子配位到每个M原子上的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
4.如权利要求1或2所述的由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，其中该金属配合物是通式为(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IIID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成一二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；每个E是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到两个M原子中每一个的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
5.如权利要求3或4所述的由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，其中X选自卤素、硫酸根、磷酸根、硝酸根、羧酸基和取代羧酸基的单齿配体。
6.如权利要求3到5中任何一项所述的由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，其中B选自氨合物、伯胺、仲胺、叔胺和包括含有一个或多个N原子的杂环的基团。
7.如权利要求3到6中任何一项所述的由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，其中M是Pt(II)。
8.如权利要求1所述的由一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，其中金属配合物选自 以下通式的配合物 其中m＝1，n＝2和o＝1；m＝3，n＝2和o＝3；或m＝4，n＝0和o＝4
9.如权利要求1到8中任何一项所述的由一个或多个葫芦形联脲[7 12]或其相似物部分包封的多核金属配合物，其中，葫芦形联脲[7-12]是通式为(I)的葫芦形联脲 其中n是从7到12的整数并且其中通式(I)中的通式(B)的每个单元为 R1和R2可以相同或者不同，并且各为单价的基，或者R1、R2和将其结合在一起的碳原子形成任意取代的环基，或通式(B)的一个单元的R1和通式(B)的邻接单元的R2一起形成键或二价自由基，每个R3独立地选自＝O、＝S、＝NR、＝CXZ、＝CRZ和＝CZ2，并且其中Z是吸电子基团，X是卤素，而R是H、任意取代的直链、支链或环的饱和或不饱和的烃基、或任意取代的杂环基，并且每个R5独立地选自H、烷基和芳基。
10.一种减少多核金属配合物在活体内毒性的方法，该方法包括形成一种金属配合物和一个或多个联脲葫芦形[7-12]或其相似物的缔合体，其中，金属配合物被一个或多个葫芦形联脲联脲[7-12]部分包封。
11.如权利要求10所述的方法，其中该金属配合物是通式(IIA)、(IIB)、(IIC)或(IID)的金属配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；E是通过具有孤对电子的氮原子配位到每个M原子的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
12.如权利要求10所述的方法，其中该金属配合物是通式(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的金属配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IIID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；每个E是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到两个M原子中每一个的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
13.如权利要求11或12所述的方法，其中X选自卤化物、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、羧酸盐和取代羧酸盐的单齿配体。
14.如权利要求11到13中任何一项所述的方法，其中B选自氨合物、伯胺、仲胺、叔胺和包括含有一个或多个N原子的杂环基团。
15.如权利要求11到14中任何一项所述的方法，其中M是Pt(II)。
16.如权利要求10所述的方法，其中该金属配合物选自 (5)以下通式的配合物 其中m＝1、n＝2和o＝1；m＝3、n＝2和o＝3；或m＝4、n＝0和o＝4
17.一种治疗对象癌症的方法，该方法包括对该对象使用治疗有效量的被一个或多个葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的具有抗瘤活性的多核金属配合物。
18.如权利要求17所述的方法，其中该金属配合物是通式(IIA)、(IIB)、(IIC)或(IID)的金属配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；E是通过具有孤对电子的氮原子配位到每个M原子的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
19.如权利要求17所述的方法，其中该金属配合物是通式(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的金属配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IIID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；每个E是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到两个M原子中每一个的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
20.如权利要求18或19所述的方法，其中X选自卤素、硫酸盐、磷酸盐、硝酸盐、羧酸盐和取代羧酸盐的单齿配体。
21.如权利要求18到20中任何一项所述的方法，其中B选自氨合物、伯胺、仲胺、叔胺和包括含有一个或多个N原子的杂环基团。
22.如权利要求18到21中任何一项所述的方法，其中M是Pt(II)。
23.如权利要求17所述的方法，其中该金属配合物选自 以下通式的配合物 其中m＝1、n＝2和o＝1；m＝3、n＝2和o＝3；或m＝4、n＝0和o＝4(6)
24.一种药物组合物，其包含被一种或多种葫芦形联脲[7-12]或其相似物部分包封的具有抗瘤活性的多核金属配合物和药物可接受的载体。
25.如权利要求24所述的组合物，其中该金属配合物是通式(IIA)、(IIB)、(IIC)或(IID)的金属配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；E是通过具有孤对电子的氮原子配位到每个M原子的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
26.如权利要求24所述的组合物，其中该金属配合物是通式为(IIIA)、(IIIB)、(IIIC)或(IIID)的金属配合物 其中每个X是独立选择的，并且是单齿配体，或者，在通式(IIID)的情况中，两个配位到M原子的X基可以分别是单齿配体或可以一起形成二羧酸二齿配体；每个B是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到M原子的配体；每个E是独立选择的，并且是通过具有孤对电子的氮原子配位到两个M原子中每一个的配体；并且每个M独立地选自Pt(II)、Pd(II)和Au(II)。
全文摘要
本发明提供由一个或多个葫芦形联脲[7－12]或其相似物部分包封的多核金属配合物。本发明还涉及通过使用由一个或多个葫芦形联脲[7－12]或其相似物部分包封的具有抗瘤活性的多核金属配合物治疗癌症的方法。
文档编号A61K31/28GK1922187SQ200580005664
公开日2007年2月28日 申请日期2005年1月14日 优先权日2004年1月15日
发明者尼尔·J·惠特, 安东尼·I·戴, 罗德尼·J·布兰奇, 约翰·G·柯林斯 申请人:新南创新有限公司
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