作为激酶抑制剂的吡唑并三嗪类化合物的制作方法
专利名称：作为激酶抑制剂的吡唑并三嗪类化合物的制作方法
技术领域：
本发明涉及吡唑并[1，5-a]三嗪化合物，其可用作蛋白激酶抑制剂(诸如细胞周期蛋白依赖性激酶、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK/ERK)、糖原合成酶激酶3(GSK3β)、关卡激酶-1(″CHK-1″)、关卡激酶-2(″CHK-2″)、Aurora激酶(例如Aurora A、B及C)、蛋白激酶B(例如，丝氨酸/苏氨酸激酶，诸如AKT1、AKT2及AKT3)等的抑制剂)、含有该化合物的药物组合物，及使用所述化合物及组合物治疗诸如癌症、炎症、关节炎、病毒性疾病、诸如阿尔茨海默病的神经变性疾病、心血管疾病及真菌性疾病的方法。本申请要求2004年2月25日提交的美国临时申请第60/547,685的优先权。
背景技术：
蛋白激酶抑制剂包含诸如细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK/ERK)、糖原合成酶激酶3(GSK3β)、关卡激酶-1(″CHK-1″)、关卡激酶-2(″CHK-2″)、Aurora激酶(例如Aurora A、B及C)、蛋白激酶B(例如丝氨酸/苏氨酸激酶，诸如AKT1、AKT2及AKT3)等的抑制剂。蛋白激酶抑制剂例如在M.Hale等人的WO02/22610 A1及Y.Mettey等人的J.Med.Chem.，(2003)46222-236中描述。细胞周期蛋白依赖性激酶为丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，其为细胞周期及细胞增殖背后的驱动力。各个CDK，诸如CDK1、CDK2、CDK3、CDK4、CDK5、CDK6及CDK7、CDK8等，在细胞周期进展中起到不同作用且可分类为G1、S或G2M相酶。无控制增殖为癌细胞的特点，且许多重要的实体瘤中高频率地发生CDK功能的错调节(misregulation)。CDK2及CDK4尤其引起注意，因为在广泛的人类癌症中其活性受到频繁的错调节。细胞周期从G1到S相的整个过程中需要CDK2活性，且CDK2为G1关卡的关键组分之一。关卡用来保持细胞周期事件的的适当顺序且使细胞对损害或增殖信号有应答，而在癌细胞中丧失适当的关卡控制有助于肿瘤发生。CDK2路径在肿瘤遏抑物功能(例如p52、RB及p27)及致癌基因活化(细胞周期蛋白E)水平上影响肿瘤发生。许多报导已显示CDK2的共活化物细胞周期蛋白E及抑制物p27分别在乳癌、结肠癌、非小细胞肺癌、胃癌、前列腺癌、膀胱癌、非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin′slymphoma)、卵巢癌及其它癌症中过度表达或表达不足。已表明它们的表达改变与增加的CDK2活性水平和较差的总存活率相关联。该观察使CDK2及其调节路径成为近几年引人注目的目标，文献中报导了大量腺苷5′-三磷酸(ATP)竞争性有机小分子及肽作为用于潜在治疗癌症的CDK抑制剂。U.S.6,413,974第一栏第23行至第15栏第10行提供各种CDK及其与各种类型癌症的关系的良好描述。
CDK是已知的。例如，flavopiridol(式I)是正在接受人类临床试验的非选择性CDK抑制剂，A.M.Sanderowicz等人，J.Clin.Oncol.(1998)16，2986-2999。
其它已知的CDK抑制剂，例如包括奥罗莫星(olomoucine)(J.Vesely等人，Eur.J.Biochem.，(1994)224，771-786)及roscovitine(l.Meijer等人，Eur.J.Biochem.，(1997)243，527-536)。U.S.6,107,305描述某些作为CDK抑制剂的吡唑并[3，4-b]吡啶化合物。‘305专利的例示性化合物具有式II结构
K.S.Kim等人，J.Med.Chem.45(2002)3905-3927及WO 02/10162公开了某些作为CDK抑制剂的氨基噻唑化合物。
吡唑并嘧啶类是已知的。例如，WO92/18504、WO02/50079、WO95/35298、WO02/40485、EP 94304104.6、EP 0628559(等同于美国专利第5,602,136、5,602,137及5,571,813号)、U.S.6,383,790，Chem.Pharm.Bull.，(1999)47928，J.Med.Chem.，(1977)20，296，J.Med.Chem.，(1976)19517及Chem.Pharm.Bull.，(1962)10620公开了各种吡唑并嘧啶类。其它感兴趣的公开为WO 03/101993(公开于2003年12月11日)、WO 03/091256(公开于2003年11月6日)、及DE 10223917(公开于2003年12月11日)。此外，尚未授权的美国专利申请第10/654,546、10/653,776、10/654,168、10/654,163、10/653,868及10/776,988号公开了各种吡唑并嘧啶类。
吡唑并三嗪类是已知的。一些公开了吡唑并三嗪的专利公开为WO 99/67247(公开于1999年12月29日)、DE 2900288 A1、WO02/096348(公开于2002年12月5日)及WO 02/50079(公开于2002年6月27日)。
现存在对新化合物、制剂、治疗及治疗与CDK相关的疾病及病症的疗法的需求。因此，本发明的目的是提供可用于治疗或预防或改善所述疾病及病症的化合物。
发明内容
在其许多实施方案中，本发明提供一类新颖的吡唑并[1，5-a]三嗪类化合物作为诸如细胞周期蛋白依赖性激酶的激酶抑制剂，制备所述化合物的方法，包括一种或多种所述化合物的药物组合物，制备包括一种或多种所述化合物的药物制剂的方法，及使用所述化合物或药物组合物治疗、预防、抑制或改善与激酶(例如CDK)有关的一种或多种疾病的方法。
在一方面，本申请公开了化合物、或所述化合物的药学可接受的盐、溶剂合物或酯，该化合物具有如式III所示的通式结构 其中R1选自H、烷基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基、NR6R7、环烷基和环烷基烷基，其中所述烷基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基、环烷基烷基和芳基烷基中的每一个可未被取代或任选独立地被一个或多个可相同或不同的部分取代，各部分独立地选自卤代、烷基、芳基、杂芳基、杂环基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)和NO2；R2为烷基、环烷基、烯基、炔基、三氟甲基、-OR7、-SR7、羟基烷基、卤代烷基、芳基、杂芳基、卤代、CN、甲酰基、硝基、烷基羰基、芳烷基羰基、杂芳烷基羰基或-亚烷基-N(R8R9)(其中R8和R9独立表示H或烷基，或R8和R9连同-N(R8R9)中的氮形成五至七元杂环)；R3为-NR4R5、 H、烷基、烷硫基、芳烷硫基、烷基亚磺酰基、或芳烷基亚磺酰基；R4为烷基、环烷基或杂环基，其中所述烷基、环烷基和杂环基中的每一个可未被取代或任选独立地被1-4个可相同或不同的取代基取代，各取代基独立地选自卤代、烷基、羟基甲基、羟基乙基、羟基丙基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)和NO2；
R5为H、烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基、环烷基、杂环基、酰基或杂芳基烷基；R6为H、烷基或芳基；R7为H或烷基；R10为卤代、烷基、羟基烷基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)或NO2；和n为0至4，且当n为2-4时，n部分可相同或不同，每个进行独立选择，前提条件是(i)当R2为C1-C4烷基且R5为H，则R4不为C1-C4烷基；(ii)当R2为卤代、CN、甲酰基、硝基、烷基羰基、芳烷基羰基、杂芳烷基羰基或-亚烷基-N(R8R9)，则(a)R3不为H、烷硫基、芳烷硫基、烷基亚磺酰基、芳烷基亚磺酰基或-NR4R5，和(b)n不为0；和(iii)当R2为烷基、环烷基、烯基或炔基时，则R3不为NH(甲基)、N，N(二甲基)、NH(乙酰基)或N(甲基)(乙酰基)。
式III的化合物可用作蛋白激酶抑制剂且可用于治疗和预防增殖性疾病，例如癌症、炎症和关节炎。其还可用于治疗诸如阿尔茨海默病的神经变性疾病、心血管疾病、病毒性疾病和真菌性疾病。
发明详述在一实施方案中，本发明公开了由结构式III表示的吡唑并[1，5-a]三嗪化合物、或其药学可接受的盐、溶剂合物或酯，其中不同的部分如上文所述。
在另一实施方案中，R1选自烷基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基或NR6R7，其中所述烷基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基和芳基烷基中的每一个可未被取代或任选独立地被一个或多个可相同或不同的取代基取代，各取代基独立地选自卤代、烷基、芳基、杂芳基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)和NO2。
在另一实施方案中，R2为烷基、环烷基、炔基、三氟甲基、-OR7或-SR7。
在另一实施方案中，R3为NR4R5、 在另一实施方案中，R4为烷基、环烷基或杂环基，其中所述烷基、环烷基或杂环基中的每一个可未被取代或任选独立地被一个或多个可相同或不同的部分取代，各部分独立地选自卤代、烷基、羟基甲基、羟基乙基、羟基丙基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)和NO2。
在另一实施方案中，R5为H、烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基或杂芳基烷基。
在另一实施方案中，n为1至2。
在另一实施方案中，R6为H、烷基或芳基。
在另一实施方案中，R7为H或烷基。
在另一实施方案中，R10为卤代、烷基、羟基甲基、羟基乙基、羟基丙基、三氟甲基、OH、NR6R7、SR6、SO2R6、CN或SO2NR6R7。
在另一实施方案中，R1选自苯基、咪唑基、咪唑基-N-氧化物、吡啶基、吡啶基-N-氧化物、吡嗪基、吡嗪基-N-氧化物、苯乙基、吡啶酮、-(CH2)-吡啶基、-(CH2)-吡啶基-N-氧化物、-(CH2)-吡嗪基、-(CH2)-吡嗪基-N-氧化物、-(CH2)-吡啶酮和-(CH2)-咪唑基-N-氧化物，其中所述苯基、咪唑基、吡啶基、吡啶酮和吡嗪基中的每一个可未被取代或任选独立地被一个或多个可相同或不同的部分取代，各部分独立地选自卤代、甲基、乙基、三氟甲基、OH、烷氧基、NH2、SH、SO2CH3、CN和SO2NH(CH2)2CH3。
在另一实施方案中，R2选自甲基、乙基、环丙基、环丁基、环戊基、乙烯基、-CF3、羟基、甲氧基和乙氧基。
在另一实施方案中，n为1。
在另一实施方案中，R3选自下列物质(i)被羟基甲基或羟基乙基取代的哌啶基；(ii)被羟基甲基或羟基乙基取代的吡嗪基；(iii)被羟基甲基或羟基乙基取代的吡咯烷基；(iv)被羟基甲基或羟基乙基取代的环己基；(v)被羟基甲基或羟基乙基取代的环戊基；
(vi)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的哌啶基)；(vii)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的环己基)；(viii)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的环戊基)；(ix)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的吡咯烷基)；和(x)-N(H)[CH(羟基甲基)(异丙基)]。
在另一实施方案中，R4为烷基或环烷基。
在另一实施方案中，R5为H。
在另一实施方案中，R6为H或烷基。
在另一实施方案中，R7为烷基。
在另一实施方案中，R10为羟基甲基或羟基乙基。
在又一实施方案中，R1选自咪唑基、咪唑基-N-氧化物、吡啶基、吡啶基-N-氧化物、吡嗪基、吡嗪基-N-氧化物、苯乙基、吡啶酮、-(CH2)-吡啶基、-(CH2)-吡啶基-N-氧化物、-(CH2)-吡嗪基、-(CH2)-吡啶酮和-(CH2)-吡嗪基-N-氧化物；R2选自甲基、乙基和环丙基；n为1；R3选自下列物质(i)被羟基甲基或羟基乙基取代的哌啶基；(ii)被羟基甲基或羟基乙基取代的吡嗪基；(iii)被羟基甲基或羟基乙基取代的吡咯烷基；(iv)被羟基甲基或羟基乙基取代的环己基；(v)被羟基甲基或羟基乙基取代的环戊基；(vi)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的哌啶基)；(vii)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的环己基)；(viii)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的环戊基)；(ix)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的吡咯烷基)；和(x)-N(H)[CH(羟基甲基)(异丙基)]；R4为烷基或环烷基；R5为H；R6为H或烷基；和R7为烷基。
又一实施方案公开了如表1所示的本发明的化合物。
表1
上文所用并贯穿本公开所用的下列术语除非另外指明，否则应理解为具有如下含义″患者″既包含人类又包含动物。
″哺乳动物″是指人类和其它哺乳动物。
″烷基″是指脂族烃基，其可为直链或支链，且链中包括约1到约20个碳原子。优选的烷基在链中含有约1到约12个碳原子。更优选的烷基在链中含有约1到约6个碳原子。支链指一个或多个诸如甲基、乙基或丙基的低级烷基与直链烷基链连接。″低级烷基″是指链中具有约1到约6个碳原子的基团，其可为直链或支链。术语″被取代的烷基″是指该烷基可被一个或多个可相同或不同的取代基取代，各取代基独立地选自卤代、烷基、芳基、环烷基、氰基、羟基、烷氧基、烷硫基、氨基、-NH(烷基)、-NH(环烷基)、-N(烷基)2、羧基和-C(O)O-烷基。适当烷基的非限制性例子包含甲基、乙基、正丙基、异丙基和叔丁基。
″炔基″是指含有至少一个碳-碳三键的脂族烃基且其可为直链或支链且链中包括约2到约15个碳原子。优选的炔基在链中具有约2到约12个碳原子；更优选在链中具有约2到约4个碳原子。支链是指一个或多个诸如甲基、乙基或丙基的低级烷基与直链炔基链连接。″低级炔基″是指可为直链或支链的链中有约2到约6个碳原子。适当炔基的非限制性例子包含乙炔基、丙炔基、2-丁炔基和3-甲基丁炔基。术语″被取代的炔基″是指该炔基可被一个或多个可相同或不同的取代基取代，各取代基独立地选自烷基、芳基和环烷基。
″芳基″是指芳族单环或多环环系统，其包括约6到约14个环原子，优选约6到约10个环原子。芳基可任选被一个或多个可相同或不同且如本文所定义的″环系统取代基″取代。适当芳基的非限制性例子包含苯基和萘基。
″杂芳基″是指芳族单环或多环环系统，其包括约5到约14个碳原子，优选约5到约10个碳原子，其中所述环原子的一个或多个为除碳之外的元素，例如单独或组合的氮、氧或硫。优选的杂芳基含有约5到约6个环原子。″杂芳基″可任选被一个或多个可相同或不同且如本文所定义的″环系统取代基″取代。在杂芳基词根前的前缀″氮杂″、″氧杂″或″硫杂″分别是指至少一个氮、氧或硫原子作为环原子存在。可任选将杂芳基的氮原子氧化成相应的N-氧化物。适当杂芳基的非限制性例子包含吡啶基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、嘧啶基、吡啶酮(包含N-被取代的吡啶酮)、异唑基、异噻唑基、唑基、噻唑基、吡唑基、呋咱基、吡咯基、吡唑基、三唑基、1，2，4-噻二唑基、吡嗪基、哒嗪基、喹喔啉基、酞嗪基、羟吲哚基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、苯并呋咱基、吲哚基、氮杂吲哚基(azaindolyl)、苯并咪唑基、苯并噻吩基、喹啉基、咪唑基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、噻吩并嘧啶基、吡咯并吡啶基、咪唑并吡啶基、异喹啉基、苯并氮杂吲哚基、1，2，4-三嗪基、苯并噻唑基等。术语″杂芳基″还指部分饱和的杂芳基部分，诸如四氢异喹啉基、四氢喹啉基等。
″芳烷基″或″芳基烷基″是指芳基-烷基-基团，其中芳基和烷基如先前所述。优选的芳烷基含有低级烷基。适当芳烷基的非限制性例子包含苄基、2-苯乙基和萘基甲基。通过烷基与母体部分连接。
″烷基芳基″是指烷基-芳基-基团，其中烷基和芳基如先前所述。优选的烷基芳基包括低级烷基。适当烷芳基的非限制性例子为甲苯基。通过芳基与母体部分连接。
″环烷基″是指非芳族单环或多环系统，其包括约3到约10个碳原子，优选约5到约10个碳原子。优选的环烷基环含有约5到约7个环原子。环烷基可任选被一个或多个可相同或不同且如上文所定义的″环系统取代基″取代。适当单环环烷基的非限制性例子包含环丙基、环戊基、环己基、环庚基等。适当多环环烷基的非限制性例子包含1-十氢萘基、降冰片基、金刚烷基等，和诸如2，3-二氢化茚基、四氢萘基等的部分饱和种类。
″卤素″是指氟、氯、溴或碘。优选氟、氯和溴。
″环系统取代基″是指与芳族或非芳族环系统连接的取代基，其例如置换该环系统上的可用氢。环系统取代基可相同或不同，各自独立地选自烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳烷基、烷基芳基、杂芳烷基、杂芳基烯基，杂芳基炔基、烷基杂芳基、羟基、羟基烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、酰基、芳酰基、卤代、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、芳氧羰基、芳烷氧羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、烷硫基、芳硫基、杂芳硫基、芳烷硫基、杂芳烷硫基、环烷基、杂环基、-C(＝N-CN)-NH2、-C(＝NH)-NH2、-C(＝NH)-NH(烷基)、Y1Y2N-、Y1Y2N-烷基-、Y1Y2NC(O)-、Y1Y2NSO2-和-SO2NY1Y2，其中Y1和Y2可相同或不同且独立地选自氢、烷基、芳基、环烷基和芳烷基。″环系统取代基″还可是指同时置换环系统上两个相邻碳原子上的两个可用氢(每个碳上一个氢)的单独部分。该部分的实例为亚甲二氧基、亚乙二氧基、-C(CH3)2-等，其形成诸如以下的部分 ″杂环基″是指非芳族饱和单环或多环环系统，其包括约3到约10个环原子，优选约5到约10个环原子，其中环系统中的一个或多个碳原子为除碳之外的元素，例如单独或组合的氮、氧或硫。环系统中不存在相邻的氧和/或硫原子。优选的杂环基含有约5到约6个环原子。杂环基词根前的前缀″氮杂″、″氧杂″或″硫杂″分别是指至少一个氮、氧或硫原子作为环原子存在。杂环基环中的任何-NH可以诸如-N(Boc)、-N(CBz)、-N(Tos)基团等的形式经保护存在；所述保护还认为是本发明的部分。该杂环基可任选被一个或多个可相同或不同且如本文所定义的″环系统取代基″取代。可任选将杂环基的氮或硫原子氧化成相应的N-氧化物、S-氧化物或S，S-二氧化物。适当单环杂环基环的非限制性例子包含哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、噻唑烷基、1，4-二氧杂环己烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、内酰胺、内酯等。
应注意在本发明的含有杂原子的环系统中，与N、O或S相邻的碳原子上没有羟基，同时与另一杂原子相邻的碳上没有N或S基团。因此，例如在下环中
其中没有-OH直接与标记为2和5的碳连接。
还应注意互变异构形式，诸如以下部分 被认为在本发明的某些实施方案中是等同的。
″炔基烷基″是指炔基-烷基-基团，其中炔基和烷基如先前所述。优选的炔基烷基含有低级炔基和低级烷基。通过烷基与母体部分连接。适当炔基烷基的非限制性例子包含炔丙基甲基。
″杂芳烷基″是指杂芳基-烷基-基团，其中杂芳基和烷基如先前所述。优选的杂芳烷基含有低级烷基。适当的杂芳烷基的非限制性例子包含吡啶基甲基和喹啉-3-基甲基。通过烷基与母体部分连接。
″羟基烷基″是指HO-烷基-基团，其中烷基如先前所述。优选的羟基烷基含有低级烷基。适当羟基烷基的非限制性例子包含羟基甲基和2-羟基乙基。
″酰基″是指H-C(O)-、烷基-C(O)-或环烷基-C(O)-，其中各种基团如先前描述。通过羰基与母体部分连接。优选的酰基含有低级烷基。适当酰基的非限制性例子包含甲酰基、乙酰基和丙酰基。
″芳酰基″是指芳基-C(O)-基，其中芳基如先前所述。通过羰基与母体部分连接。适当芳酰基的非限制性例子包含苯甲酰基和1-萘甲酰基。
″烷氧基″是指烷基-O-基，其中烷基如先前所述。适当烷氧基的非限制性例子包含甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基和正丁氧基。通过醚氧与母体部分连接。
″芳基氧基″是指芳基-O-基，其中芳基如先前所述。适当芳基氧基的非限制性例子包含苯氧基和萘氧基。通过醚氧与母体部分连接。
″芳烷基氧基″是指芳烷基-O-基，其中芳烷基如先前所述。适当芳烷基氧基的非限制性例子包含苄氧基和1-或2-萘甲氧基。通过醚氧与母体部分连接。
″烷硫基″是指烷基-S-基，其中烷基如先前所述。适当烷硫基的非限制性例子包含甲硫基和乙硫基。通过硫与母体部分连接。
″芳硫基″是指芳基-S-基，其中芳基如先前所述。适当芳硫基的非限制性例子包含苯硫基和萘硫基。通过硫与母体部分连接。
″芳烷硫基″是指芳烷基-S-基，其中芳烷基如先前所述。适当芳烷硫基的非限制性例子为苄硫基。通过硫与母体部分连接。
″烷氧羰基″是指烷基-O-CO-基。适当烷氧羰基的非限制性例子包含甲氧羰基和乙氧羰基。通过羰基与母体部分连接。
″芳氧羰基″是指芳基-O-CO-基。适当芳氧羰基的非限制性例子包含苯氧羰基和萘氧羰基。通过羰基与母体部分连接。
″芳烷氧羰基″是指芳烷基-O-C(O)-基。适当芳烷氧羰基的非限制性例子为苄氧羰基。通过羰基与母体部分连接。
″烷基磺酰基″是指烷基-S(O2)-基。优选的基团为其中烷基为低级烷基的那些。通过磺酰基与母体部分连接。
″芳基磺酰基″是指芳基-S(O2)-。通过磺酰基与母体部分连接。
术语″被取代的″是指指定原子上的一个或多个氢被选择的所示基团置换，前提条件是不超过现状下指定原子的正常价，且该取代产生稳定的化合物。取代基和/或变量的组合仅当所述组合产生稳定的化合物时才是可能的。″稳定的化合物″或″稳定的结构″是指化合物充分稳固以经受住从反应混合物分离达到有用的纯度，和配制成有效治疗剂。
术语″任选被取代的″是指任选被特定基团、基、或部分取代。
用于化合物的术语″分离的″或″分离形式的″是指该化合物自合成过程或其自然源或其组合分离后的物理状态。用于化合物的术语″纯化的″或″纯化形式的″是指该化合物自本文描述或已为技术人员熟知的纯化过程后得到的物理状态，其具有充分的纯度以可通过本文所述的或为本领域技术人员熟知的标准分析技术进行表征。
还应注意本文的正文、流程、实施例和表格中任何具有不饱和价数的杂原子假定具有氢原子以平衡价数。
当化合物中的官能团称为″被保护的″，其是指该基团为经修饰的形式，以防止在该化合物经受反应时该被保护部位发生不希望的副反应。通过本领域的普通技术人员以及通过参考诸如T.W.Greene等人，Protective Groups in organic Synthesis(1991)，Wiley，New York的标准教材应可了解合适的保护基团。
当任何组成物或式III中存在多于一个的任何变量(例如芳基、杂环基、R2等)时，其在各情况下的定义独立于其在所有其它情况下的定义。
本文所用术语″组合物″意在涵盖包括特定量的特定成份的产物，和任何直接或间接由特定量的特定成份的组合产生的产物。
本发明的化合物的前药和溶剂合物还涵盖于本文中。本文采用的术语″前药″表示作为药物前体的化合物，当给用至受试者后，该化合物通过新陈代谢或化学过程经历化学转化以得到式III的化合物或其盐和/或溶剂合物。前药的讨论提供于A.C.S.Symposium Series的T.Higuchi和V.Stella，Pro-drugs as Novel Delivery Systems(1987)14，和Bioreversible Carriers in Drug Design，(1987)Edward B.Roche编，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press中，两者并入本文作为参考。
″溶剂合物″是指本发明的化合物与一个或多个溶剂分子的物理性结合物。该物理性结合物包括不同程度的离子键合和共价键结，包含氢键结合。在某些情况中，溶剂合物将能够分离，例如当结晶固体的晶格中并入一个或多个溶剂分子时。″溶剂合物″包含溶液相和可分离的溶剂合物两者。适当溶剂合物的非限制性例子包含乙醇化物、甲醇化物等。″水合物″为其中溶剂分子为H2O的溶剂合物。
″有效量″或″治疗有效量″用以描述有效抑制CDK且因而产生所需要的治疗、改善、抑制或预防作用的本发明的化合物或组合物的量。
式III的化合物可形成盐，其还在本发明的范畴内。除非另有说明，本文对式III化合物的所指应理解为包含对其盐的所指。本文采用的术语″盐″表示由无机酸和/或有机酸形成的酸性盐，和由无机碱和/或有机碱形成的碱性盐。另外，当式III化合物既含有碱性部分(诸如但不限于吡啶或咪唑)，又含有酸性部分(诸如但不限于羧酸)时，可形成两性离子(″内盐″)且其包含于本文所用术语″盐″中。虽然还可用其它盐，但优选为药学可接受的(即无毒性、生理学上可接受的)盐。例如，可通过使式III的化合物与一定量(诸如当量)的酸或碱在介质(诸如盐沉淀于其中的介质)反应，或在含水介质中反应、随后进行冻干，来形成式III的化合物。
例示性的酸加成盐包含乙酸盐、抗坏血酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、富马酸盐、氢氯酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、草酸盐、磷酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐等。另外，一般认为适于由碱性药学化合物形成药学上有用的盐的酸例如讨论于S.Berge等人，Journal of Pharmaceutical Sciences(1977)66(1)1-19；P.Gould，International J.of Pharmaceutics(1986)33 201-217；Anderson等人，The Practice of Medicinal Chemistry(1996)，Academic Press，NewYork；和The Orange Book(美国食品和药物管理局，Washington D.C.，在其网站上)。这些公开内容并入本文作为参考。
例示性的碱性盐包含铵盐，诸如钠盐、锂盐和钾盐的碱金属盐，诸如钙盐和镁盐的碱土金属盐，与诸如二环己基胺、叔丁基胺的有机碱(例如有机胺)形成的盐，和与诸如精氨酸、赖氨酸的氨基酸形成的盐等。含碱性氮的基团以用诸如如下的试剂进行季铵化低级烷基卤化物(例如甲基、乙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物)、硫酸二烷基酯(例如硫酸二甲酯、硫酸二乙酯和硫酸二丁酯)、长链卤化物(例如癸基、十二烷基和十八烷基的氯化物、溴化物和碘化物)、芳烷基卤化物(例如苄基溴和苯乙基溴)和其它。
所有的所述酸盐和碱盐意在作为本发明范畴内的药学可接受的盐，且认为对于本发明目的而言所有的酸盐和碱盐等同于游离形式的相应化合物。
本发明化合物的药学可接受的酯包括以下组(1)通过羟基酯化作用所得的羧酸酯，其中酯基团的羧酸部分的非羰基部分选自直链或支链烷基(例如乙基、正丙基、叔丁基或正丁基)、烷氧基烷基(例如甲氧基甲基)、芳烷基(如苄基)、芳氧基烷基(例如苯氧基甲基)、芳基(例如任选被例如卤素、C1-4烷基或C1-4烷氧基或氨基取代的苯基)；(2)磺酸酯，诸如烷基磺酰基或芳烷基磺酰基(例如甲磺酰基)；(3)氨基酸酯(例如L-缬氨酰基或L-异亮氨酰基)；(4)膦酸酯和(5)单-、二-或三-磷酸酯。所述磷酸酯可进一步由例如C1-20醇或其反应性衍生物、或由2，3-二(C6-24)酰基甘油进行酯化。
式III的化合物和其盐、溶剂合物和前药可以其互变异构形式存在(例如酰胺或亚氨基醚)。所有的所述互变异构形式作为本发明的部分涵盖于本文中。
本发明化合物(包含所述化合物的盐、溶剂合物和前药，和所述前药的盐和溶剂合物)的所有立体异构体(例如几何异构体、光学异构体等)，诸如由于不同取代基上的不对称碳而存在的那些，包括对映异构形式(其可在甚至没有不对称碳时存在)、旋转异构形式、阻转异构体和非对映体形式涵盖于本发明的范畴内，位置异构体(诸如4-吡啶基和3-吡啶基)还涵盖于本发明的范畴中。本发明化合物的单个立体异构体例如可基本上不合其它异构体，或可例如作为外消旋物或与其它所有立体异构体、或其它经选择的立体异构体混合。本发明的手性中心可具有如IUPAC 1974标准所定义的S或R构型。使用术语″盐″、″溶剂合物″、″前药″等意在同样适用于本发明化合物的对映异构体、立体异构体、旋转异构体、互变异构体、位置异构体、外消旋物或前药的盐、溶剂合物和前药。
式III化合物的多晶型形式，和式III化合物的盐、溶剂合物和前药意在包含于本发明的范畴中。
本发明的化合物具有药理学性质；特别是，式III的化合物可为蛋白激酶抑制剂，诸如细胞周期蛋白依赖性激酶(例如CDK1、CDK2、CDK3、CDK4、CDK5等)、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK/ERK)、糖原合成酶激酶3(GSK3β)、关卡激酶-1(″CHK-1″)、关卡激酶-2(″CHK-2″)、Aurora激酶(例如Aurora A、B和C)、蛋白激酶B(例如，丝氨酸/苏氨酸激酶，诸如AKT1、AKT2和AKT3)等的抑制剂。细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)例如包含CDC2(CDK1)、CDK2、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7和CDK8。预期式III的新型化合物可用于诸如癌症、自身免疫疾病、病毒性疾病、真菌性疾病、神经学疾病/神经变性疾病、关节炎、炎症、抗增殖(例如眼视网膜病)、神经元、脱发症和心血管疾病的增殖性疾病的治疗。许多这些疾病和病症列于先前引用的U.S.6,413,974中，其公开内容并入本文中。
更具体地，式III的化合物可用于治疗各种癌症，包含(但不限于)如下癌症
癌，包括膀胱、乳房、结肠、肾脏、肝脏、肺(包含小细胞肺癌)、食道、胆囊、卵巢、胰腺、胃、子宫颈、甲状腺、前列腺和皮肤的癌，包括鳞状细胞癌；淋巴系统的造血瘤，包括白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性淋巴母细胞性白血病、B细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛状细胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤；脊髓系统的造血瘤，包括急性和慢性髓性白血病、骨髓发育异常综合征和早幼粒细胞白血病；间叶细胞源的瘤，包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；中枢和周围神经系统的瘤，包括星形细胞瘤、神经母细胞瘤、神经胶质瘤和神经鞘瘤；和其它肿瘤，包括黑色素瘤、精原细胞瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、着色性干皮病(xenoderoma pigmentosum)、角化棘皮瘤(keratoctanthoma)、甲状腺滤泡癌和卡波西肉瘤。
由于CDK在一般细胞增殖调节中的关键作用，抑制剂可充当可用于治疗具有异常细胞增殖特征的任何疾病过程的可逆性细胞抑制剂，例如用于良性前列腺增生、家族性腺上皮增生息肉病，神经-纤维瘤病、动脉粥样硬化、肺纤维化、关节炎、牛皮癣、肾小球肾炎、血管成形术或血管手术后再狭窄、肥大性瘢痕、炎症性肠病、移植排斥反应、内毒素性休克和真菌感染。
如新近发现的，即CDK5牵涉τ蛋白质磷酸化作用(J.Biochem，(1995)117，741-749)所表明的，式III的化合物还可用于治疗阿尔茨海默病。
式III的化合物可诱导或抑制细胞程序死亡。细胞程序死亡反应在多种人类疾病中是异常的。作为细胞程序死亡调节剂的式III的化合物将可用于治疗癌症(包括但不限于在上文提及的类型)、病毒性感染(包括但不限于疱疹病毒、痘病毒、埃-巴病毒(Epstein-Barr virus)、辛德比斯病毒(Siudbis virus)和腺病毒)，预防AIDS在感染HIV的个体中的发展、自身免疫疾病(包含但不限于系统狼疮、erythematosus、自身免疫调节的肾小球肾炎、类风湿性关节炎、牛皮癣、炎症性肠病和自身免疫糖尿病)、神经变性病症(包含但不限于阿尔茨海默氏病、AIDS相关性痴呆、帕金森氏病、肌萎缩性侧索硬化、色素性视网膜炎、脊髓肌肉萎缩、小脑变性)、骨髓发育异常综合征、再生障碍性贫血、与心肌梗塞有关的缺血性损伤、中风和再灌注损伤、心律不齐、动脉粥样硬化、毒素诱导或与酒精相关的肝病、血液病(包含但不限于慢性贫血和再生障碍性贫血)、肌肉骨骼系统变性疾病(包含但不限于骨质疏松症和关节炎)、阿司匹林敏感性鼻窦炎、囊肿性纤维化、多发性硬化、肾病和癌性疼痛。
式III的化合物作为CDK抑制剂可调节细胞RNA和DNA合成水平。所述药剂将因此可用于治疗病毒性感染(包含但不限于HIV、人乳头状瘤病毒、疱疹病毒、痘病毒、埃-巴病毒、辛德比斯病毒和腺病毒)。
式III的化合物还可用于化学预防癌症。化学预防定义为通过阻断起始诱变事件或阻断已遭受损害的癌前细胞进程或抑制肿瘤复发来抑制侵袭性癌症的发展。
式III的化合物还可用于抑制肿瘤血管生成和转移。
式III的化合物还可充当其它蛋白激酶例如蛋白激酶C、her2、raf1、MEK1、MAP激酶、EGF受体、PDGF受体、IGF受体、PI3激酶、wee1激酶、Src、Abl的抑制剂，且因此有效治疗与其它蛋白激酶有关的疾病。
本发明的另一方面为治疗患有与CDK有关的疾病或症状的哺乳动物(例如人类)的方法，该方法通过对哺乳动物给用治疗有效量的至少一种式III的化合物、或该化合物的药学可接受的盐、溶剂合物或酯。
式III的化合物的优选剂量为约0.001至500毫克/公斤体重/天。式III的化合物、或该化合物的药学可接受的盐、溶剂合物或酯的特别优选的剂量为约0.01至25毫克/公斤体重/天。
本发明的化合物还可与一种或多种抗癌疗法(诸如放射疗法)和/或一种或多种选自以下的抗癌剂组合(一同或顺序给用)使用细胞抑制剂、细胞毒剂(诸如但不限于DNA相互作用剂(诸如顺铂(cisplatin)或多柔比星(doxorubicin))；紫杉烷类(例如泰索帝(taxotere)、泰素(taxol))；拓扑异构酶II抑制剂(诸如依托泊苷(etoposide))；拓扑异构酶I抑制剂(诸如伊立替康(irinotecan)(或CPT-11)、凯普斯达(camptostar)或拓扑替康(topotecan))；微管蛋白相互作用剂(诸如紫杉醇(paclitaxel)、多西他赛(docetaxel)或埃皮霉素(epothilones))；激素剂(诸如他莫昔芬(tamoxifen))；胸苷酸合酶抑制剂(诸如5-氟尿嘧啶)；抗代谢药物(诸如甲氨喋呤(methoxtrexate))；烷化剂(诸如替莫唑胺(temozolomide)(TEMODARTM购自Schering-Plough Corporation，Kenilworth，New Jersey)、环磷酰胺(cyclophosphamide))；法呢基蛋白转移酶抑制剂(诸如SARASARTM(4-[2-[4-[(11R)-3，10-二溴-8-氯-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环庚[1，2-b]吡啶-11-基-]-1-哌啶基]-2-氧代乙基]-1-哌啶甲酰胺，或购自Schering-Plough Corporation，Kenilworth，New Jersey的SCH 66336)、替匹法尼(tipifarnib)(购自Janssen Pharmaceuticals的Zarnestra或R115777)、L778，123(Merck & Company，WhitehouseStation，New Jersey的法呢基蛋白转移酶抑制剂)；BMS214662(Bristol-Myers Squibb Pharmaceuticals，Princeton，New Jersey的法呢基蛋白转移酶抑制剂)；信号转导抑制剂(诸如易瑞沙(Iressa)(购自英国Astra Zeneca Pharmaceuticals)、它赛瓦(Tarceva)(EGFR激酶抑制剂)、EGFR抗体(例如C225)、格列卫(GLEEVECTM)(NovartisPharmaceuticals，East Hanover，New Jersey的C-abl激酶抑制剂)；干扰素，诸如干扰能(intron)(购自Schering-Plough Corporation)、佩乐能(Peg-Intron)(购自Schering-Plough Corporation)；激素疗法组合；芳香酶组合；ara-C、亚德里亚霉素(adriamycin)、癌得星(cytoxan)和吉西他滨(gemcitabine))。
其它抗癌(还称抗肿瘤)剂包含但不限于尿嘧啶氮芥(Uracilmustard)、氮芥(Chlormethine)、异环磷酰胺(Ifosfamide)、美法仑(Melphalan)、苯丁酸氮芥(Chlorambucil)、哌泊溴烷(Pipobroman)、曲他胺(Triethylenemelamine)、三亚乙基硫代磷酸胺(Triethylenethiophosphoramine)、白消安(Busulfan)、卡莫司汀(Carmustine)、洛莫司汀(Lomustine)、链佐星(Streptozocin)、达卡巴嗪(Dacarbazine)、氮尿苷(Floxuridine)、阿糖胞苷(Cytarabine)、6-巯基嘌呤(6-Mercaptopurine)、6-硫代鸟嘌呤(6-Thioguanine)、磷酸氟达拉滨(Fludarabine phosphate)、奥沙利铂(oxaliplatin)、leucovirin、奥沙利铂(ELOXATINTM，购自Sanofi-Synthelabo Pharmaeuticals，France)、喷司他汀(Pentostatine)、长春碱(Vinblastine)、长春新碱(Vincristine)、长春地辛(Vindesine)、博来霉素(Bleomycin)、放线菌素D(Dactinomycin)、柔红霉素(Daunorubicin)、多柔比星(Doxorubicin)、表柔比星(Epirubicin)、伊达比星(Idarubicin)、光神霉素(Mithramycin)、脱氧柯福霉素(Deoxycoformycin)、丝裂霉素-C(Mitomycin-C)、L-天冬酰胺酶(L-Asparaginase)、替尼泊苷17α-乙炔雌二醇(Teniposide 17α-Ethinylestradiol)、己烯雌酚(Diethylstilbestrol)、睾酮(Testosterone)、泼尼松(Prednisone)、氟甲睾酮(Fluoxymesterone)、丙酸屈他雄酮(Dromostanolone propionate)、睾内酯(Testolactone)、醋酸甲地孕酮(Megestrolacetate)、甲泼尼龙(Methylprednisolone)、甲睾酮(Methyltestosterone)、泼尼松龙(Prednisolone)、曲安西龙(Triamcinolone)、氯烯雌醚(Chlorotrianisene)、羟孕酮(Hydroxyprogesterone)、氨鲁米特(Aminoglutethimide)、雌莫司汀(Estramustine)、醋酸甲羟孕酮(Medroxyprogesteroneacetate)、亮丙立德(Leuprolide)、氟他胺(Flutamide)、托瑞米芬(Toremifene)、戈舍瑞林(goserelin)、顺铂(Cisplatin)、卡铂(Carboplatin)、羟基脲(Hydroxyurea)、安吖啶(Amsacrine)、丙卡巴肼(Procarbazine)、米托坦(Mitotane)、米托蒽醌(Mitoxantrone)、左旋咪唑(Levamisole)、Navelbene、阿那曲唑(Anastrazole)、来曲唑(Letrazole)、卡培他滨(Capecitabine)、Reloxafine、Droloxafine、或者六甲密胺(Hexamethylmelamine)。
当向需要这种给用的患者给用组合疗法时，该组合中的治疗剂，或包括所述治疗剂的一种或多种药物组合物可以任何顺序给用，诸如顺序地、并行、一同、同时等方式。在该组合疗法中不同活性部分的量可为不同量(不同剂量)或相同量(相同剂量)。因此，对于非限制性的说明目的，式III的化合物和另外的治疗剂可在单一剂量单位(例如胶囊、片剂等)中以固定的量(剂量)存在。这种含有固定量的两种不同活性化合物的单一剂量单位的市售例子为VYTORIN(可购自MerckSchering-Plough Pharmaceuticals，Kenilworth，New Jersey)。
若配制成固定剂量，则所述组合产品采用本文所述剂量范围内的本发明的化合物，和另外的在其剂量范围内的药学活性剂或治疗。例如，已发现CDC2抑制剂olomucine与已知的细胞毒剂协同作用诱导细胞程序死亡(J.Cell Sci.，(1995)108，2897)。当组合制剂不适合时，式III的化合物还可与已知的抗癌剂或细胞毒剂顺序地给用。本发明不限于给用顺序；式III的化合物可在已知的抗癌剂或细胞毒剂给用之前或之后给用。例如，细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂flavopiridol的细胞毒活性受到与抗癌剂给用的顺序的影响，Cancer Research，(1997)57，3375。所述技术既在本领域技术人员又在主治医师的范围内。
因此，在一方面，本发明包含组合，其包括一定量的至少一种式III的化合物，或其药学可接受的盐、溶剂合物或酯，和一定量的上文所述的一种或多种抗癌治疗和抗癌剂，其中所述量的化合物/治疗产生所需的治疗效果。
本发明化合物的药理学性质可通过大量药理学试验进行确认。随后所要描述的例示性的药理学试验可对本发明的化合物和其盐进行。
本发明还涉及药物组合物，其包括至少一种式III的化合物，或所述化合物的药学可接受的盐、溶剂合物或酯，和至少一种药学可接受的载体。
对于由本发明描述的化合物制备药物组合物而言，惰性的药学可接受的载体可为固体或液体。固体制剂包含粉末剂、片剂、可分散颗粒、胶囊、扁囊剂和栓剂。粉末剂和片剂可包括约5到约95％的活性成份。适当的固体载体在本领域中是已知的，例如碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、糖或乳糖。片剂、粉末剂、扁囊剂和胶囊可用作适于口服给用的固体剂型。药学可接受的载体的例子和各种组合物的制造方法的例子可发现于A.Gennaro(编)，Remington′s Pharmaceutical Sciences，第18版，(1990)，Mack Publishing Co.，Easton，Pennsylvania中。
液体制剂包含溶液、悬浮液和乳液。作为一例子可提及的是用于非肠道注射的水或水-丙二醇溶液或加入甜味剂和遮光剂以用于口服溶液、悬浮液和乳液。液体制剂还可包含用于鼻内给用的溶液。
适于吸入的气雾剂制剂可包括溶液和粉末状固形物，其可与药学可接受的载体组合，诸如惰性的压缩气体，例如氮气。
还包含如下固体制剂，其意在仅在使用前转化成用于口服或非肠道给用的液体制剂。所述液体形式包含溶液、悬浮液和乳液。
本发明的化合物还可经皮递送。经皮组合物可采取霜剂、洗剂、气雾剂和/或乳液的形式且可包含在本领域常用的用于此目的的基质或储库型经皮贴片中。
本发明的化合物还可进行皮下递送。
化合物优选经口服或静脉内给用。
药物制剂优选为单位剂型。在该形式中，制剂细分为含有适当量的活性组分的具有合适尺寸的单位剂量(例如有效量)以达成所需目的。
根据具体的应用，单位剂量制剂中活性化合物的量可在约1mg约100mg，优选约1mg到约50mg，更优选约1mg到约25mg的范围内改变或调节。
所采用的实际剂量可视患者的要求和受治疗症状的严重性的不同进行改变。针对特定情况确定适当的给药方案在本领域技术人员的范围内。为方便起见，每日总剂量可根据需要分开给用且在一天内以多次给用。
本发明的化合物和/或其药学可接受的盐的给药剂量和频率应根据主治临床医生考虑诸如患者年龄、健康状况和尺寸和受治疗病状的严重性而进行调整。用于口服给用的典型推荐日剂量给药方案可在约1毫克/天到约500毫克/天的范围内，优选在1毫克/天至200毫克/天的范围内，分成两至四份的分开剂量。
本发明的另一方面为药包，其包括治疗有效量的至少一种式III的化合物，或所述化合物的药学可接受的盐、溶剂合物或酯，和药学可接受的载体、媒介物或稀释剂。
本发明的另一方面为药包，其包括一定量的至少一种式III的化合物、或所述化合物的药学可接受的盐、溶剂合物或酯，和一定量的至少一种上文所述的抗癌疗法和/或抗癌剂，其中所述量的两种或多种成分产生所需的治疗效果。
本文所公开的本发明通过以下制备方法、建议路径和实施例进行示例性说明，不应理解它们对公开范畴构成限制。替代性的机械路径和类似结构对本领域的技术人员而言是显而易见的。
当给出NMR数据时，1H光谱获得于Varian VXR-200(200MHz，1H)，Varian Gemini-300(300MHz)或XL-400(400MHz)上，且以自Me4Si向下的磁场ppm方式与附带说明的质子数、多重度和以赫兹为单位的偶合常数一起记录。当给出LC/MS数据时，使用Applied Biosystems API-100质谱仪和Shimadzu SCL-10A LC柱进行分析Altech铂C18，3微米，33mm×7mm ID；梯度流0min-10％CH3CN，5min-95％CH3CN，7min-95％CH3CN，7.5min-10％CH3CN，9min-停止，且给出保留时间和观测到的母离子。
下列溶剂和试剂可以其缩写引用薄层色谱法TLC二氯甲烷CH2Cl2乙酸乙酯AcOEt或EtOAc甲醇MeOH三氟乙酸酯(盐)TFA三乙胺Et3N或TEA丁氧羰基n-Boc或Boc核磁共振光谱NMR液相色谱质谱LCMS高分辨率质谱HRMS毫升mL毫摩尔mmol微升μl克g毫克mg室温或rt(环境温度)约25℃。
二甲氧基乙烷DME实施例一般可如流程1所示制备本发明描述的化合物。酰化适当取代的3-氨基吡唑1和碱催化的环化作用产生硫醇2。
流程1
甲基化、氯化、和用所需胺置换产生4，其可通过氧化和亲核置换转化成所需的产物5。
制备实施例100 将BOC2O(3.3g，1.1当量)和TEA加入至4-氨基甲基吡啶(1.41mL，13.87mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液中，且于室温下搅拌所得溶液2小时。将反应混合物用H2O(50mL)稀释且用CH2Cl2提取。将合并的有机物经Na2SO4干燥、过滤且进行减压浓缩。通过急骤色谱法使用5％(含10％NH4OH的MeOH)的CH2Cl2溶液作为洗脱剂纯化该粗产物得到黄色固体(2.62g，产率91％)。LCMSMH+＝209。
制备实施例101 通过与制备实施例100所陈述的程序基本上相同的程序，仅代替使用3-氨基甲基吡啶，制得呈黄色油状物的上述化合物(2.66g，产率92％)。LCMSMH+＝209。
制备实施例200 在0℃下向制备实施例100制得的化合物(0.20g，0.96mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中加入m-CPBA(0.17g，1.0当量)且于0℃下搅拌所得溶液2小时并于4℃下储存过夜，此时将反应混合物回温至室温且搅拌3小时。将反应混合物用H2O稀释且用CH2Cl2提取。将合并的有机物经Na2SO4干燥、过滤和浓缩。通过急骤色谱法使用10％(含10％NH4OH的MeOH)的溶液作为洗脱剂纯化该粗产物LCMSMH+＝255。
制备实施例201 向溶于MeOH(200mL)和H2O(250mL)中的制备实施例101制得的化合物(27g，0.13mol)和NaHCO3(21.8g，2.0eq.)中滴加过硫酸氢钾(oxone)(58.6g)的H2O(250mL)溶液。将所得溶液于室温下搅拌过夜。用CH2Cl2(500mL)稀释且过滤该反应混合物。分离所述层且用CH2Cl2提取含水层。将合并的有机相经Na2SO4干燥、过滤，且减压浓缩以产生白色固体(21.0g，产率72％)。MSMH+＝255。
制备实施例300
在室温下在二氧杂环己烷(0.97mL)中的4M HCl中搅拌制备实施例200制得的化合物(0.29g，1.29mmol)2小时。反应混合物真空浓缩且不经进一步纯化即可使用。LCMSMH+＝125。
制备实施例301 通过与制备实施例201所提出的程序基本上相同的程序，仅代替使用制备实施例201制得的化合物，制得上述化合物。LCMSMH+＝125。
制备实施例400 步骤A将乙醛(50g，0.41mol)[例如参见WO 0232893]的MeOH(300mL)溶液冷却至0℃，且用NaBH4(20g，0.53mol，分六批)小心处理20分钟。随后使反应回温至20℃且搅拌4小时。将混合物再次冷却至0℃且用饱和NH4Cl水溶液小心淬灭并进行浓缩。急骤色谱法(5-10％7NNH3-MeOH/CH2Cl2)产生呈淡黄色固体的伯醇(31g，62％)。
步骤B
将溶于CH2Cl2(500mL)中的得自制备实施例400步骤A的醇(31g，0.25mol)的浆料冷却至0℃并用SOCl2(55mL，0.74mol，经30分钟)缓慢处理。将该反应随后于20℃下搅拌过夜。浓缩该物质，使其在丙酮中成浆，然后过滤。所得米色固体经真空过夜干燥(38.4g，52％，HCl盐)。
步骤C向装配有搅拌棒的15mL压力管中加入得自制备实施例400步骤B的氯化物(150mg，0.83mmol)，随后加入7M NH3/MeOH(10mL)。于室温下搅拌所得溶液48h，然后减压浓缩该混合物产生淡黄色固体(0.146g，83％)。M+H(游离碱)＝140。
制备实施例401 根据WO 00/37473制备该已知的伯醇，且根据WO 02/064211按照类似于制备实施例400的方式将其转化成所需的胺二盐酸盐形式。
制备实施例500 将在95％EtOH(260mL)中的哌啶-2-乙醇(127g，980mmol)加入到在95％EtOH(150mL)中的(S)-(+)-樟脑磺酸(228.7g，1.0当量)中，且将所得溶液回温至回流。向温溶液中加入Et2O(600mL)，且将溶液冷却至室温并静置3天。过滤和真空干燥所得晶体(25g)mp 173-173℃(文献值168℃)。接着将该盐溶于NaOH(3M，100mL)中且搅拌2小时，并用CH2Cl2(5×100mL)提取所得溶液。将合并的有机相经Na2SO4干燥、过滤且减压浓缩以产生(S)-哌啶-2-乙醇(7.8g)，其一部分自Et2O重结晶mp＝69-70℃(文献值68-69℃)；[α]D＝14.09°(CHCl3，c＝0.2)。
制备实施例501
通过与制备实施例500所提出的程序基本上相同的程序，仅代替使用(R)-(-)-樟脑磺酸，制得(R)-哌啶-2-乙醇。(1.27g)[α]D＝11.3°(CHCl3，c＝0.2)。
制备实施例502 向装有顺式-(1R，2S)-(+)-2-(苄基氨基)环己烷甲醇(1g，4.57mmol)的MeOH(35mL)溶液的压力瓶中一次性加入20重量％的Pd(OH)2(0.3g，＞50％湿度)。在Parr氢化装置中于50psi的H2中振荡该混合物12小时。用N2吹扫该混合物且使其经由硅藻土垫过滤。以MeOH(2×25mL)充分洗涤该垫且减压浓缩所得滤液产生0.57g(97％)的白色固体。M+H＝130。
制备实施例507 在配有加料漏斗的5L烧瓶中，于N2下在无水Et2O(3.0L)中搅拌t-BuOK(112.0g，1.00mol)。在3小时内滴加丁腈(69.0g，1.00mol)与甲酸乙酯(77.7g，1.05mol)的混合物，接着于室温下将该反应混合物搅拌过夜。将混合物冷却至0℃，加入AcOH(57mL)，过滤混合物，且用Et2O(500mL)洗涤该固体。在室温下旋转蒸发该合并的滤液产生浅黄色油状物(95.1g)。
将该油状物溶于无水EtOH(100mL)中，加入99％的一水合肼(48mL)，接着加入AcOH(14mL)，且将该混合物在N2中回流过夜。蒸发溶剂且将所得油状物通过硅胶色谱法分离，使用CH2Cl2在MeOH中的7NNH3洗脱。得到22.4g(20％)呈澄清油状物的3-氨基-4-乙基吡唑，其经静置固化。
制备实施例508 通过与制备实施例507所提出的程序基本上相同的程序，仅代替使用适当的原料，制得氨基吡唑508。
制备实施例509-511通过与制备实施例507所提出的程序基本上相同的程序，仅代替使用适当的原料，制得表500第2栏所示的氨基吡唑。
表500
制备实施例512 步骤A在0℃下向搅拌的来自制备实施例507的吡唑(3.33g，300mmol)的无水CH2Cl2(50mL)溶液中滴加乙氧羰基异硫氰酸酯(3.54mL，3.00mmol)。于室温下搅拌所得混合物24小时，此时过滤沉淀物，将其用Et2O(2×50mL)洗涤，且真空干燥。得到白色固体(3.50g，48％)。LCMSMH+＝243。Mp＝177-179℃。
步骤B搅拌在无水乙腈(20mL)中的得自制备实施例512步骤A的固体(800mg，3.30mmol)与K2CO3(1.37g，9.90mmol)的混合物，使其在氮气中回流4小时。将该混合物冷却至25℃，用乙酸(5mL)酸化且用水(20mL)稀释。蒸发溶剂且使残余物悬浮于水中(50mL)。滤出固体且将固体用水(2×20mL)洗涤并真空干燥。得到灰白色固体(548mg，85％)。LCMSMH+＝197。Mp＝251-253℃。
制备实施例513 步骤A向制备实施例512中描述的化合物(500mg，2.55mmol)的EtOH溶液中加入在H2O(3mL)中的NaOH(204mg，5.10mmol)和然后滴加MeI(362mg，2.55mmol)。于室温下搅拌所得混合物1小时，将其用1M HCl(5mL)酸化，且蒸发溶剂。通过硅胶柱色谱法纯化残余物，用CH2Cl2/MeOH(15∶1)洗脱，产生白色固体(442mg，83％)。LCMSMH+＝211。Mp＝182-184℃。
步骤B向制备实施例513步骤A描述的化合物(400mg，1.90mmol)的POCl3(6mL)溶液中加入N，N-二甲基苯胺(460mg，3.80mmol)，且在氮气中将混合物加热回流历时18小时。将所得溶液倾于碎冰上(200g)且用CH2Cl2(2×50mL)提取。用H2O(100mL)洗涤该合并的提取物，将其经Na2SO4干燥、过滤且蒸发溶剂。以CH2Cl2用作洗脱剂，通过硅胶柱色谱法纯化残余物，得到浅黄色固体(275mg，63％)。LCMSM+＝229。
制备实施例514 通过与制备实施例512-513所提出的程序基本上相同的程序，制得制备实施例514中给出的化合物。
制备实施例515-517通过与制备实施例512-513所提出的程序基本上相同的程序，仅代替使用表501第2栏所示的化合物，制得表501第3栏所示的化合物。
表501
制备实施例518 于70℃下在N2中搅拌在无水乙腈(3mL)中的制备实施例513制得的化合物(130mg，0.57mmol)、胺(94mg，0.68mmol)和NaHCO3(96mg，1.14mmol)的混合物20小时。减压除去所述溶剂，且用CH2Cl2/MeOH(20∶1)作为洗脱剂，通过硅胶柱色谱法纯化该残余物，得到白色固体(150mg，80％)。LCMSMH+＝331。Mp＝162-164℃。
制备实施例519-527通过与制备实施例518所提出的程序基本上相同的程序，仅代替使用表502第2栏的胺类和表502第3栏的氯化物，制得表502第4栏所示的化合物。
表502
实施例1000 步骤A向得自制备实施例518的化合物(80mg，0.24mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中加入70％m-CPBA(60mg，0.24mmol)。于室温下过夜搅拌所得溶剂，接着再加入CH2Cl2(15mL)。用NaHCO3(2×20mL)饱和水溶液洗涤该溶液，将其经MgSO4干燥、过滤，且蒸发溶剂。由此所得白色固体(55mg)直接用于步骤B。
步骤B于100℃下在N2中搅拌在无水NMP(0.2mL)中的实施例1000步骤A的化合物(55mg)与制备实施例500的氨基醇(60mg)的混合物5小时。减压除去NMP且用CH2Cl2/MeOH(5∶1)作为洗脱剂，通过硅胶制备TLC纯化残余物得到浅黄色蜡状物(30mg，51％)。LCMSMH+＝412。
实施例1001-1010通过与实施例1000所提出的程序基本上相同的程序，仅代替使用表1000第2栏的适当的胺和表1000第3栏的硫醚，制得表1000第4栏中的化合物。
表1000
实施例2001-2029通过与实施例1000所提出的程序基本上相同的程序，仅代替使用表2000第2栏中的适当的胺和表2000第3栏中的适当的硫醚，可制得表2000第4栏中的化合物。
表2000
试验下文描述有用的激酶活性试验。
杆状病毒构建通过PCR将细胞周期蛋白A和E克隆到pFASTBAC(Invitrogen)中，同时在氨基末端加入GluTAG序列(EYMPME)以在抗GluTAG亲合柱上纯化。表达的蛋白质的大小接近46kDa(细胞周期蛋白E)和50kDa(细胞周期蛋白A)。还通过PCR将CDK2克隆到pFASTBAC中，同时在羧基末端加入血细胞凝集素抗原决定部位标记物(YDVPDYAS)。表达的蛋白质的大小接近34kDa。
酶生成将表达细胞周期蛋白A、E和CDK2的重组杆状病毒感染至SF9细胞中历时48小时，感染复数(MOI)为5。于1000RPM下离心分离10分钟获得细胞。将含有细胞周期蛋白(E或A)的团粒与含有CDK2的细胞团粒相组合，且以团粒体积的5倍量的溶胞缓冲液在冰上溶胞30分钟，该溶胞缓冲液含有50mM Tris(pH 8.0)、0.5％NP40、1mM DTT和蛋白酶/磷酸酶抑制剂(Roche Diagnostics GmbH，Mannheim，Germany)。搅拌该混合物30-60分钟以促进细胞周期蛋白-CDK2复合物形成。接着使混合的溶胞产物于15000RPM下旋转沉降(spun down)10分钟且保留上清液。接着使用5ml抗GluTAG小珠(对于一升SF9细胞)捕获细胞周期蛋白-CDK2复合物。于溶胞缓冲液中洗涤经结合的小珠三次。用含有100-200μg/mL GluTAG肽的溶胞缓冲液竞争性洗脱蛋白质。在含有50mM Tris(pH 8.0)、1mM DTT、10mM MgCl2、100μM原钒酸钠和20％丙三醇的2升激酶缓冲液中过夜渗析洗脱液。于-70℃下分等份储存酶。
体外激酶试验在弱的蛋白结合96孔板(Corning Inc，Corning，NewYork)中进行CDK2激酶试验(细胞周期蛋白A或E依赖性)。在含有50mM Tris(pH 8.0)、10mM MgCl2、1mM DTT和0.1mM原钒酸钠的激酶缓冲液中将酶稀释至最终浓度为50μg/ml。所述反应中使用的底物为来自组蛋白H1的生物素化肽(购自Amersham，UK)。该底物于冰上解冻且在激酶缓冲液中稀释至2μM。化合物在10％DMSO中稀释至所需浓度。对于各个激酶反应，混合20μl的50μg/ml酶溶液(1μg酶)与20μl的1μM底物溶液，接着在各个孔中与10μl经稀释的化合物组合以供测试。通过加入50μl的4μM ATP和1μCi的33P-ATP(来自Amersham，UK)引发激酶反应。使该反应于室温下进行1小时。通过加入200μl含有0.1％Triton X-100、1mM ATP、5mM EDTA和5mg/ml链霉抗生物素蛋白涂覆的SPA小珠的终止缓冲液(购自Amersham，UK)15分钟来终止反应。接着使用Filtermate通用收集器(Packard/Perkin Elmer LifeSciences)将所述SPA小珠捕获于96孔GF/B滤板(Packard/Perkin ElmerLife Sciences)上。通过将所述小珠用2M NaCl洗涤两次接着用含1％磷酸的2M NaCl洗涤两次以消除非特异性信号。接着使用TopCount 96孔液体闪烁计数器(购自Packard/Perkin Elmer Life Sciences)测量该放射性信号。
IC50测定由产生自抑制性化合物的8点连续稀释液(各一式两份)的抑制数据绘制剂量-反应曲线。化合物浓度对通过用处理样品的CPM除以未经处理样品的CPM计算出的激酶活性百分比作图。为得到IC50值，接着使剂量-反应曲线拟合标准S形曲线且由非线性回归分析得到IC50值。可通过使用上述试验使用细胞周期蛋白A或细胞周期蛋白E得到激酶活性。本发明的一些化合物的IC50示于下表2表2
虽然本发明已结合上述具体实施方案进行描述，但对本领域的普通技术人员而言其许多替代方案、改进和其它变体是显而易见的。所有所述替代方案、改进和变体意在涵盖于本发明的精神和范畴内。
权利要求
1.由以下结构式表示的化合物 或所述化合物的药学可接受的盐、溶剂合物或酯，其中R1选自H、烷基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基、NR6R7、环烷基和环烷基烷基，其中所述烷基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基、环烷基烷基和芳基烷基中的每一个可未被取代或任选独立地被一个或多个可相同或不同的部分取代，各部分独立地选自卤代、烷基、芳基、杂芳基、杂环基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)和NO2；R2为烷基、环烷基、烯基、炔基、三氟甲基、-OR7、-SR7、羟基烷基、卤代烷基、芳基、杂芳基、卤代、CN、甲酰基、硝基、烷基羰基、芳烷基羰基、杂芳烷基羰基或-亚烷基-N(R8R9)(其中R8和R9独立表示H或烷基，或R8和R9连同-N(R8R9)中的氮形成五至七元杂环)；R3为-NR4R5、 或 H、烷基、烷硫基、芳烷硫基、烷基亚磺酰基、或芳烷基亚磺酰基；R4为烷基、环烷基或杂环基，其中所述烷基、环烷基和杂环基中的每一个可未被取代或任选独立地被1-4个可相同或不同的取代基取代，各取代基独立地选自卤代、烷基、羟基甲基、羟基乙基、羟基丙基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)和NO2；R5为H、烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基、环烷基、杂环基、酰基或杂芳基烷基；R6为H、烷基或芳基；R7为H或烷基；R10为卤代、烷基、羟基烷基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)或NO2；和n为0至4，且当n为2-4时，n部分可相同或不同，每个进行独立选择，前提条件是(i)当R2为C1-C4烷基且R5为H，则R4不为C1-C4烷基；(ii)当R2为卤代、CN、甲酰基、硝基、烷基羰基、芳烷基羰基、杂芳烷基羰基或-亚烷基-N(R8R9)，则(a)R3不为H、烷硫基、芳烷硫基、烷基亚磺酰基、芳烷基亚磺酰基或-NR4R5，和(b)n不为0；和(iii)当R2为烷基、环烷基、烯基或炔基时，则R3不为NH(甲基)、N，N(二甲基)、NH(乙酰基)或N(甲基)(乙酰基)。
2.权利要求1的化合物，其中R1选自烷基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基或NR6R7，其中所述烷基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基和芳基烷基中的每一个可未被取代或任选独立地被一个或多个可相同或不同的取代基取代，各取代基独立地选自卤代、烷基、芳基、杂芳基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)和NO2。
3.权利要求1的化合物，其中R2为烷基、环烷基、炔基、三氟甲基、-OR7或-SR7。
4.权利要求1的化合物，其中R3为NR4R5、 或
5.权利要求1的化合物，其中R4为烷基、环烷基或杂环基，其中所述烷基、环烷基或杂环基中的每一个可未被取代或任选独立地被一个或多个可相同或不同的部分取代，各部分独立地选自卤代、烷基、羟基甲基、羟基乙基、羟基丙基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)和NO2。
6.权利要求1的化合物，其中R5为H、烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基或杂芳基烷基。
7.权利要求1的化合物，其中n为1至2。
8.权利要求1的化合物，其中R6为H、烷基或芳基。
9.权利要求1的化合物，其中R7为H或烷基。
10.权利要求1的化合物，其中R10为卤代、烷基、羟基甲基、羟基乙基、羟基丙基、三氟甲基、OH、NR6R7、SR6、SO2R6、CN或SO2NR6R7。
11.权利要求2的化合物，其中R1选自苯基、咪唑基、咪唑基-N-氧化物、吡啶基、吡啶基-N-氧化物、吡嗪基、吡嗪基-N-氧化物、苯乙基、吡啶酮、-(CH2)-吡啶基、-(CH2)-吡啶基-N-氧化物、-(CH2)-吡嗪基、-(CH2)-吡嗪基-N-氧化物、-(CH2)-吡啶酮和-(CH2)-咪唑基-N-氧化物，其中所述苯基、咪唑基、吡啶基、吡啶酮和吡嗪基中的每一个可未被取代或任选独立地被一个或多个可相同或不同的部分取代，各部分独立地选自卤代、甲基、乙基、三氟甲基、OH、烷氧基、NH2、SH、SO2CH3、CN和SO2NH(CH2)2CH3。
12.权利要求3的化合物，其中R2选自甲基、乙基、环丙基、环丁基、环戊基、乙烯基、-CF3、羟基、甲氧基和乙氧基。
13.权利要求7的化合物，其中n为1。
14.权利要求4的化合物，其中R3选自(i)被羟基甲基或羟基乙基取代的哌啶基；(ii)被羟基甲基或羟基乙基取代的吡嗪基；(iii)被羟基甲基或羟基乙基取代的吡咯烷基；(iv)被羟基甲基或羟基乙基取代的环己基；(v)被羟基甲基或羟基乙基取代的环戊基；(vi)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的哌啶基)；(vii)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的环己基)；(viii)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的环戊基)；(ix)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的吡咯烷基)；和(x)-N(H)[CH(羟基甲基)(异丙基)]。
15.权利要求5的化合物，其中R4为烷基或环烷基。
16.权利要求6的化合物，其中R5为H。
17.权利要求8的化合物，其中R6为H或烷基。
18.权利要求9的化合物，其中R7为烷基。
19.权利要求10的化合物，其中R10为羟基甲基或羟基乙基。
20.权利要求1的化合物，其中R1选自咪唑基、咪唑基-N-氧化物、吡啶基、吡啶基-N-氧化物、吡嗪基、吡嗪基-N-氧化物、苯乙基、吡啶酮、-(CH2)-吡啶基、-(CH2)-吡啶基-N-氧化物、-(CH2)-吡嗪基、-(CH2)-吡啶酮和-(CH2)-吡嗪基-N-氧化物；R2选自甲基、乙基和环丙基；n为1；R3选自(i)被羟基甲基或羟基乙基取代的哌啶基；(ii)被羟基甲基或羟基乙基取代的吡嗪基；(iii)被羟基甲基或羟基乙基取代的吡咯烷基；(iv)被羟基甲基或羟基乙基取代的环己基；(v)被羟基甲基或羟基乙基取代的环戊基；(vi)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的哌啶基)；(vii)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的环己基)；(viii)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的环戊基)；(ix)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的吡咯烷基)；和(x)-N(H)[CH(羟基甲基)(异丙基)]；R4为烷基或环烷基；R5为H；R6为H或烷基；和R7为烷基。
21.选自以下的化合物 或其药学可接受的盐、溶剂合物或酯。
22.抑制一种或多种激酶的方法，包括对需要这种抑制的患者给用治疗有效量的至少一种权利要求1的化合物。
23.治疗一种或多种与激酶有关的疾病的方法，包括对需要这种治疗的患者给用治疗有效量的至少一种权利要求1的化合物。
24.权利要求23的方法，其中所述激酶为细胞周期蛋白依赖性激酶-1(″CDK1″)、CDK2、CDK3、CDK4或CDK5。
25.权利要求23的方法，其中所述激酶为促分裂原活化蛋白激酶(MAPK/ERK)。
26.权利要求23的方法，其中所述激酶为糖原合成酶激酶3(GSK3β)、关卡激酶-1(″CHK-1″)、关卡激酶-2(″CHK-2″)、Aurora A、AuroraB、Aurora C、AKT1、AKT2或AKT3。
27.权利要求23的方法，其中所述疾病选自膀胱癌、乳房癌、结肠癌、肾癌、肝癌、肺癌、小细胞肺癌、食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、子宫颈癌、甲状腺癌、前列腺癌和皮肤癌，包括鳞状细胞癌；白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性淋巴母细胞性白血病、B细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛状细胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤；急性和慢性髓性白血病、骨髓发育异常综合征和早幼粒细胞白血病；纤维肉瘤、横纹肌肉瘤；星形细胞瘤、神经母细胞瘤、神经胶质瘤和神经鞘瘤；黑色素瘤、精原细胞瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、着色性干皮病、角化棘皮瘤、甲状腺滤泡癌和卡波西肉瘤。
28.治疗一种或多种与激酶有关的疾病的方法，包括对需要这种治疗的哺乳动物给用一定量的第一化合物，所述第一化合物是权利要求1的化合物，或其药学可接受的盐、溶剂合物或酯；和一定量的至少一种第二化合物，所述第二化合物是抗癌剂；其中所述量的第一化合物和第二化合物产生治疗效果。
29.权利要求28的方法，进一步包括放疗。
30.权利要求28的方法，其中所述抗癌剂选自细胞抑制剂、顺铂、多柔比星、泰索帝、泰素、依托泊苷、伊立替康、凯普斯达、拓扑替康、紫杉醇、多西他赛、埃皮霉素、他莫昔芬、5-氟尿嘧啶、甲氨喋呤、5FU、替莫唑胺、环磷酰胺、SCH 66336、R115777、L778,123、BMS214662、易瑞沙、它赛瓦、EGFR抗体、格列卫、干扰能、ara-C、亚德里亚霉素、癌得星、吉西他滨、尿嘧啶氮芥、氮芥、异环磷酰胺、美法仑、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷、曲他胺、三亚乙基硫代磷酸胺、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀、链佐星、达卡巴嗪、氮尿苷、阿糖胞苷、6-巯基嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、磷酸氟达拉滨、奥沙利铂、leucovirin、ELOXATINTM、喷司他汀、长春碱、长春新碱、长春地辛、博来霉素、放线菌素D、柔红霉素、多柔比星、表柔比星、伊达比星、光神霉素、脱氧柯福霉素、丝裂霉素-C、L-天冬酰胺酶、替尼泊苷17α-乙炔雌二醇、己烯雌酚、睾酮、泼尼松、氟甲睾酮、丙酸屈他雄酮、睾内酯、醋酸甲地孕酮、甲泼尼龙、甲睾酮、泼尼松龙、曲安西龙、氯烯雌醚、羟孕酮、氨鲁米特、雌莫司汀、醋酸甲羟孕酮、亮丙立德、氟他胺、托瑞米芬、戈舍瑞林、卡铂、羟基脲、安吖啶、丙卡巴肼、米托坦、米托蒽醌、左旋咪唑、Navelbene、CPT-11、阿那曲唑、来曲唑、卡培他滨、Reloxafine、Droloxafine、或者六甲密胺。
31.包括治疗有效量的至少一种权利要求1的化合物和至少一种药学可接受的载体的药物组合物。
32.权利要求29的药物组合物，另外包括一种或多种选自以下的抗癌剂细胞抑制剂、顺铂、多柔比星、泰索帝、泰素、依托泊苷、伊立替康、凯普斯达、拓扑替康、紫杉醇、多西他赛、埃皮霉素、他莫昔芬、5-氟尿嘧啶、甲氨喋呤、5FU、替莫唑胺、环磷酰胺、SCH 66336、R115777、L778,123、BMS 214662、易瑞沙、它赛瓦、EGFR抗体、格列卫、干扰能、ara-C、亚德里亚霉素、癌得星、吉西他滨、尿嘧啶氮芥、氮芥、异环磷酰胺、美法仑、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷、曲他胺、三亚乙基硫代磷酸胺、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀、链佐星、达卡巴嗪、氮尿苷、阿糖胞苷、6-巯基嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、磷酸氟达拉滨、喷司他汀、长春碱、长春新碱、长春地辛、博来霉素、放线菌素D、柔红霉素、表柔比星、伊达比星、光神霉素、脱氧柯福霉素、丝裂霉素-C、L-天冬酰胺酶、替尼泊苷17α-乙炔雌二醇、己烯雌酚、睾酮、泼尼松、氟甲睾酮、丙酸屈他雄酮、睾内酯、醋酸甲地孕酮、甲泼尼龙、甲睾酮、泼尼松龙、曲安西龙、氯烯雌醚、羟孕酮、氨鲁米特、雌莫司汀、醋酸甲羟孕酮、亮丙立德、氟他胺、托瑞米芬、戈舍瑞林、卡铂、羟基脲、安吖啶、丙卡巴肼、米托坦、米托蒽醌、左旋咪唑、Navelbene、CPT-11、阿那曲唑、来曲唑、卡培他滨、Reloxafine、Droloxafine、或者六甲密胺。
33.选自以下的化合物 或其药学可接受的盐、溶剂合物或酯。
34.包括一种或多种权利要求33的化合物的药物组合物。
35.权利要求1的化合物，其为纯化形式。
全文摘要
本发明在多个实施方案中提供了一类新颖的作为诸如细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制剂的吡唑并[1，5－a]三嗪类化合物，制备所述化合物的方法，包括一种或多种所述化合物的药物组合物，制备包括一种或多种所述化合物的药物制剂的方法，和使用所述化合物或药物组合物治疗、预防、抑制或改善与所述激酶有关的一种或多种疾病的方法。
文档编号A61P35/00GK1922185SQ200580005864
公开日2007年2月28日 申请日期2005年2月23日 优先权日2004年2月25日
发明者T·J·古奇, K·帕拉奇 申请人:先灵公司
技术领域：
本发明涉及吡唑并[1，5-a]三嗪化合物，其可用作蛋白激酶抑制剂(诸如细胞周期蛋白依赖性激酶、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK/ERK)、糖原合成酶激酶3(GSK3β)、关卡激酶-1(″CHK-1″)、关卡激酶-2(″CHK-2″)、Aurora激酶(例如Aurora A、B及C)、蛋白激酶B(例如，丝氨酸/苏氨酸激酶，诸如AKT1、AKT2及AKT3)等的抑制剂)、含有该化合物的药物组合物，及使用所述化合物及组合物治疗诸如癌症、炎症、关节炎、病毒性疾病、诸如阿尔茨海默病的神经变性疾病、心血管疾病及真菌性疾病的方法。本申请要求2004年2月25日提交的美国临时申请第60/547,685的优先权。
背景技术：
蛋白激酶抑制剂包含诸如细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK/ERK)、糖原合成酶激酶3(GSK3β)、关卡激酶-1(″CHK-1″)、关卡激酶-2(″CHK-2″)、Aurora激酶(例如Aurora A、B及C)、蛋白激酶B(例如丝氨酸/苏氨酸激酶，诸如AKT1、AKT2及AKT3)等的抑制剂。蛋白激酶抑制剂例如在M.Hale等人的WO02/22610 A1及Y.Mettey等人的J.Med.Chem.，(2003)46222-236中描述。细胞周期蛋白依赖性激酶为丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶，其为细胞周期及细胞增殖背后的驱动力。各个CDK，诸如CDK1、CDK2、CDK3、CDK4、CDK5、CDK6及CDK7、CDK8等，在细胞周期进展中起到不同作用且可分类为G1、S或G2M相酶。无控制增殖为癌细胞的特点，且许多重要的实体瘤中高频率地发生CDK功能的错调节(misregulation)。CDK2及CDK4尤其引起注意，因为在广泛的人类癌症中其活性受到频繁的错调节。细胞周期从G1到S相的整个过程中需要CDK2活性，且CDK2为G1关卡的关键组分之一。关卡用来保持细胞周期事件的的适当顺序且使细胞对损害或增殖信号有应答，而在癌细胞中丧失适当的关卡控制有助于肿瘤发生。CDK2路径在肿瘤遏抑物功能(例如p52、RB及p27)及致癌基因活化(细胞周期蛋白E)水平上影响肿瘤发生。许多报导已显示CDK2的共活化物细胞周期蛋白E及抑制物p27分别在乳癌、结肠癌、非小细胞肺癌、胃癌、前列腺癌、膀胱癌、非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin′slymphoma)、卵巢癌及其它癌症中过度表达或表达不足。已表明它们的表达改变与增加的CDK2活性水平和较差的总存活率相关联。该观察使CDK2及其调节路径成为近几年引人注目的目标，文献中报导了大量腺苷5′-三磷酸(ATP)竞争性有机小分子及肽作为用于潜在治疗癌症的CDK抑制剂。U.S.6,413,974第一栏第23行至第15栏第10行提供各种CDK及其与各种类型癌症的关系的良好描述。
CDK是已知的。例如，flavopiridol(式I)是正在接受人类临床试验的非选择性CDK抑制剂，A.M.Sanderowicz等人，J.Clin.Oncol.(1998)16，2986-2999。
其它已知的CDK抑制剂，例如包括奥罗莫星(olomoucine)(J.Vesely等人，Eur.J.Biochem.，(1994)224，771-786)及roscovitine(l.Meijer等人，Eur.J.Biochem.，(1997)243，527-536)。U.S.6,107,305描述某些作为CDK抑制剂的吡唑并[3，4-b]吡啶化合物。‘305专利的例示性化合物具有式II结构
K.S.Kim等人，J.Med.Chem.45(2002)3905-3927及WO 02/10162公开了某些作为CDK抑制剂的氨基噻唑化合物。
吡唑并嘧啶类是已知的。例如，WO92/18504、WO02/50079、WO95/35298、WO02/40485、EP 94304104.6、EP 0628559(等同于美国专利第5,602,136、5,602,137及5,571,813号)、U.S.6,383,790，Chem.Pharm.Bull.，(1999)47928，J.Med.Chem.，(1977)20，296，J.Med.Chem.，(1976)19517及Chem.Pharm.Bull.，(1962)10620公开了各种吡唑并嘧啶类。其它感兴趣的公开为WO 03/101993(公开于2003年12月11日)、WO 03/091256(公开于2003年11月6日)、及DE 10223917(公开于2003年12月11日)。此外，尚未授权的美国专利申请第10/654,546、10/653,776、10/654,168、10/654,163、10/653,868及10/776,988号公开了各种吡唑并嘧啶类。
吡唑并三嗪类是已知的。一些公开了吡唑并三嗪的专利公开为WO 99/67247(公开于1999年12月29日)、DE 2900288 A1、WO02/096348(公开于2002年12月5日)及WO 02/50079(公开于2002年6月27日)。
现存在对新化合物、制剂、治疗及治疗与CDK相关的疾病及病症的疗法的需求。因此，本发明的目的是提供可用于治疗或预防或改善所述疾病及病症的化合物。
发明内容
在其许多实施方案中，本发明提供一类新颖的吡唑并[1，5-a]三嗪类化合物作为诸如细胞周期蛋白依赖性激酶的激酶抑制剂，制备所述化合物的方法，包括一种或多种所述化合物的药物组合物，制备包括一种或多种所述化合物的药物制剂的方法，及使用所述化合物或药物组合物治疗、预防、抑制或改善与激酶(例如CDK)有关的一种或多种疾病的方法。
在一方面，本申请公开了化合物、或所述化合物的药学可接受的盐、溶剂合物或酯，该化合物具有如式III所示的通式结构 其中R1选自H、烷基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基、NR6R7、环烷基和环烷基烷基，其中所述烷基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基、环烷基烷基和芳基烷基中的每一个可未被取代或任选独立地被一个或多个可相同或不同的部分取代，各部分独立地选自卤代、烷基、芳基、杂芳基、杂环基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)和NO2；R2为烷基、环烷基、烯基、炔基、三氟甲基、-OR7、-SR7、羟基烷基、卤代烷基、芳基、杂芳基、卤代、CN、甲酰基、硝基、烷基羰基、芳烷基羰基、杂芳烷基羰基或-亚烷基-N(R8R9)(其中R8和R9独立表示H或烷基，或R8和R9连同-N(R8R9)中的氮形成五至七元杂环)；R3为-NR4R5、 H、烷基、烷硫基、芳烷硫基、烷基亚磺酰基、或芳烷基亚磺酰基；R4为烷基、环烷基或杂环基，其中所述烷基、环烷基和杂环基中的每一个可未被取代或任选独立地被1-4个可相同或不同的取代基取代，各取代基独立地选自卤代、烷基、羟基甲基、羟基乙基、羟基丙基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)和NO2；
R5为H、烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基、环烷基、杂环基、酰基或杂芳基烷基；R6为H、烷基或芳基；R7为H或烷基；R10为卤代、烷基、羟基烷基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)或NO2；和n为0至4，且当n为2-4时，n部分可相同或不同，每个进行独立选择，前提条件是(i)当R2为C1-C4烷基且R5为H，则R4不为C1-C4烷基；(ii)当R2为卤代、CN、甲酰基、硝基、烷基羰基、芳烷基羰基、杂芳烷基羰基或-亚烷基-N(R8R9)，则(a)R3不为H、烷硫基、芳烷硫基、烷基亚磺酰基、芳烷基亚磺酰基或-NR4R5，和(b)n不为0；和(iii)当R2为烷基、环烷基、烯基或炔基时，则R3不为NH(甲基)、N，N(二甲基)、NH(乙酰基)或N(甲基)(乙酰基)。
式III的化合物可用作蛋白激酶抑制剂且可用于治疗和预防增殖性疾病，例如癌症、炎症和关节炎。其还可用于治疗诸如阿尔茨海默病的神经变性疾病、心血管疾病、病毒性疾病和真菌性疾病。
发明详述在一实施方案中，本发明公开了由结构式III表示的吡唑并[1，5-a]三嗪化合物、或其药学可接受的盐、溶剂合物或酯，其中不同的部分如上文所述。
在另一实施方案中，R1选自烷基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基或NR6R7，其中所述烷基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基和芳基烷基中的每一个可未被取代或任选独立地被一个或多个可相同或不同的取代基取代，各取代基独立地选自卤代、烷基、芳基、杂芳基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)和NO2。
在另一实施方案中，R2为烷基、环烷基、炔基、三氟甲基、-OR7或-SR7。
在另一实施方案中，R3为NR4R5、 在另一实施方案中，R4为烷基、环烷基或杂环基，其中所述烷基、环烷基或杂环基中的每一个可未被取代或任选独立地被一个或多个可相同或不同的部分取代，各部分独立地选自卤代、烷基、羟基甲基、羟基乙基、羟基丙基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)和NO2。
在另一实施方案中，R5为H、烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基或杂芳基烷基。
在另一实施方案中，n为1至2。
在另一实施方案中，R6为H、烷基或芳基。
在另一实施方案中，R7为H或烷基。
在另一实施方案中，R10为卤代、烷基、羟基甲基、羟基乙基、羟基丙基、三氟甲基、OH、NR6R7、SR6、SO2R6、CN或SO2NR6R7。
在另一实施方案中，R1选自苯基、咪唑基、咪唑基-N-氧化物、吡啶基、吡啶基-N-氧化物、吡嗪基、吡嗪基-N-氧化物、苯乙基、吡啶酮、-(CH2)-吡啶基、-(CH2)-吡啶基-N-氧化物、-(CH2)-吡嗪基、-(CH2)-吡嗪基-N-氧化物、-(CH2)-吡啶酮和-(CH2)-咪唑基-N-氧化物，其中所述苯基、咪唑基、吡啶基、吡啶酮和吡嗪基中的每一个可未被取代或任选独立地被一个或多个可相同或不同的部分取代，各部分独立地选自卤代、甲基、乙基、三氟甲基、OH、烷氧基、NH2、SH、SO2CH3、CN和SO2NH(CH2)2CH3。
在另一实施方案中，R2选自甲基、乙基、环丙基、环丁基、环戊基、乙烯基、-CF3、羟基、甲氧基和乙氧基。
在另一实施方案中，n为1。
在另一实施方案中，R3选自下列物质(i)被羟基甲基或羟基乙基取代的哌啶基；(ii)被羟基甲基或羟基乙基取代的吡嗪基；(iii)被羟基甲基或羟基乙基取代的吡咯烷基；(iv)被羟基甲基或羟基乙基取代的环己基；(v)被羟基甲基或羟基乙基取代的环戊基；
(vi)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的哌啶基)；(vii)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的环己基)；(viii)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的环戊基)；(ix)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的吡咯烷基)；和(x)-N(H)[CH(羟基甲基)(异丙基)]。
在另一实施方案中，R4为烷基或环烷基。
在另一实施方案中，R5为H。
在另一实施方案中，R6为H或烷基。
在另一实施方案中，R7为烷基。
在另一实施方案中，R10为羟基甲基或羟基乙基。
在又一实施方案中，R1选自咪唑基、咪唑基-N-氧化物、吡啶基、吡啶基-N-氧化物、吡嗪基、吡嗪基-N-氧化物、苯乙基、吡啶酮、-(CH2)-吡啶基、-(CH2)-吡啶基-N-氧化物、-(CH2)-吡嗪基、-(CH2)-吡啶酮和-(CH2)-吡嗪基-N-氧化物；R2选自甲基、乙基和环丙基；n为1；R3选自下列物质(i)被羟基甲基或羟基乙基取代的哌啶基；(ii)被羟基甲基或羟基乙基取代的吡嗪基；(iii)被羟基甲基或羟基乙基取代的吡咯烷基；(iv)被羟基甲基或羟基乙基取代的环己基；(v)被羟基甲基或羟基乙基取代的环戊基；(vi)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的哌啶基)；(vii)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的环己基)；(viii)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的环戊基)；(ix)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的吡咯烷基)；和(x)-N(H)[CH(羟基甲基)(异丙基)]；R4为烷基或环烷基；R5为H；R6为H或烷基；和R7为烷基。
又一实施方案公开了如表1所示的本发明的化合物。
表1
上文所用并贯穿本公开所用的下列术语除非另外指明，否则应理解为具有如下含义″患者″既包含人类又包含动物。
″哺乳动物″是指人类和其它哺乳动物。
″烷基″是指脂族烃基，其可为直链或支链，且链中包括约1到约20个碳原子。优选的烷基在链中含有约1到约12个碳原子。更优选的烷基在链中含有约1到约6个碳原子。支链指一个或多个诸如甲基、乙基或丙基的低级烷基与直链烷基链连接。″低级烷基″是指链中具有约1到约6个碳原子的基团，其可为直链或支链。术语″被取代的烷基″是指该烷基可被一个或多个可相同或不同的取代基取代，各取代基独立地选自卤代、烷基、芳基、环烷基、氰基、羟基、烷氧基、烷硫基、氨基、-NH(烷基)、-NH(环烷基)、-N(烷基)2、羧基和-C(O)O-烷基。适当烷基的非限制性例子包含甲基、乙基、正丙基、异丙基和叔丁基。
″炔基″是指含有至少一个碳-碳三键的脂族烃基且其可为直链或支链且链中包括约2到约15个碳原子。优选的炔基在链中具有约2到约12个碳原子；更优选在链中具有约2到约4个碳原子。支链是指一个或多个诸如甲基、乙基或丙基的低级烷基与直链炔基链连接。″低级炔基″是指可为直链或支链的链中有约2到约6个碳原子。适当炔基的非限制性例子包含乙炔基、丙炔基、2-丁炔基和3-甲基丁炔基。术语″被取代的炔基″是指该炔基可被一个或多个可相同或不同的取代基取代，各取代基独立地选自烷基、芳基和环烷基。
″芳基″是指芳族单环或多环环系统，其包括约6到约14个环原子，优选约6到约10个环原子。芳基可任选被一个或多个可相同或不同且如本文所定义的″环系统取代基″取代。适当芳基的非限制性例子包含苯基和萘基。
″杂芳基″是指芳族单环或多环环系统，其包括约5到约14个碳原子，优选约5到约10个碳原子，其中所述环原子的一个或多个为除碳之外的元素，例如单独或组合的氮、氧或硫。优选的杂芳基含有约5到约6个环原子。″杂芳基″可任选被一个或多个可相同或不同且如本文所定义的″环系统取代基″取代。在杂芳基词根前的前缀″氮杂″、″氧杂″或″硫杂″分别是指至少一个氮、氧或硫原子作为环原子存在。可任选将杂芳基的氮原子氧化成相应的N-氧化物。适当杂芳基的非限制性例子包含吡啶基、吡嗪基、呋喃基、噻吩基、嘧啶基、吡啶酮(包含N-被取代的吡啶酮)、异唑基、异噻唑基、唑基、噻唑基、吡唑基、呋咱基、吡咯基、吡唑基、三唑基、1，2，4-噻二唑基、吡嗪基、哒嗪基、喹喔啉基、酞嗪基、羟吲哚基、咪唑并[1，2-a]吡啶基、咪唑并[2，1-b]噻唑基、苯并呋咱基、吲哚基、氮杂吲哚基(azaindolyl)、苯并咪唑基、苯并噻吩基、喹啉基、咪唑基、噻吩并吡啶基、喹唑啉基、噻吩并嘧啶基、吡咯并吡啶基、咪唑并吡啶基、异喹啉基、苯并氮杂吲哚基、1，2，4-三嗪基、苯并噻唑基等。术语″杂芳基″还指部分饱和的杂芳基部分，诸如四氢异喹啉基、四氢喹啉基等。
″芳烷基″或″芳基烷基″是指芳基-烷基-基团，其中芳基和烷基如先前所述。优选的芳烷基含有低级烷基。适当芳烷基的非限制性例子包含苄基、2-苯乙基和萘基甲基。通过烷基与母体部分连接。
″烷基芳基″是指烷基-芳基-基团，其中烷基和芳基如先前所述。优选的烷基芳基包括低级烷基。适当烷芳基的非限制性例子为甲苯基。通过芳基与母体部分连接。
″环烷基″是指非芳族单环或多环系统，其包括约3到约10个碳原子，优选约5到约10个碳原子。优选的环烷基环含有约5到约7个环原子。环烷基可任选被一个或多个可相同或不同且如上文所定义的″环系统取代基″取代。适当单环环烷基的非限制性例子包含环丙基、环戊基、环己基、环庚基等。适当多环环烷基的非限制性例子包含1-十氢萘基、降冰片基、金刚烷基等，和诸如2，3-二氢化茚基、四氢萘基等的部分饱和种类。
″卤素″是指氟、氯、溴或碘。优选氟、氯和溴。
″环系统取代基″是指与芳族或非芳族环系统连接的取代基，其例如置换该环系统上的可用氢。环系统取代基可相同或不同，各自独立地选自烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、芳烷基、烷基芳基、杂芳烷基、杂芳基烯基，杂芳基炔基、烷基杂芳基、羟基、羟基烷基、烷氧基、芳氧基、芳烷氧基、酰基、芳酰基、卤代、硝基、氰基、羧基、烷氧羰基、芳氧羰基、芳烷氧羰基、烷基磺酰基、芳基磺酰基、杂芳基磺酰基、烷硫基、芳硫基、杂芳硫基、芳烷硫基、杂芳烷硫基、环烷基、杂环基、-C(＝N-CN)-NH2、-C(＝NH)-NH2、-C(＝NH)-NH(烷基)、Y1Y2N-、Y1Y2N-烷基-、Y1Y2NC(O)-、Y1Y2NSO2-和-SO2NY1Y2，其中Y1和Y2可相同或不同且独立地选自氢、烷基、芳基、环烷基和芳烷基。″环系统取代基″还可是指同时置换环系统上两个相邻碳原子上的两个可用氢(每个碳上一个氢)的单独部分。该部分的实例为亚甲二氧基、亚乙二氧基、-C(CH3)2-等，其形成诸如以下的部分 ″杂环基″是指非芳族饱和单环或多环环系统，其包括约3到约10个环原子，优选约5到约10个环原子，其中环系统中的一个或多个碳原子为除碳之外的元素，例如单独或组合的氮、氧或硫。环系统中不存在相邻的氧和/或硫原子。优选的杂环基含有约5到约6个环原子。杂环基词根前的前缀″氮杂″、″氧杂″或″硫杂″分别是指至少一个氮、氧或硫原子作为环原子存在。杂环基环中的任何-NH可以诸如-N(Boc)、-N(CBz)、-N(Tos)基团等的形式经保护存在；所述保护还认为是本发明的部分。该杂环基可任选被一个或多个可相同或不同且如本文所定义的″环系统取代基″取代。可任选将杂环基的氮或硫原子氧化成相应的N-氧化物、S-氧化物或S，S-二氧化物。适当单环杂环基环的非限制性例子包含哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、噻唑烷基、1，4-二氧杂环己烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、内酰胺、内酯等。
应注意在本发明的含有杂原子的环系统中，与N、O或S相邻的碳原子上没有羟基，同时与另一杂原子相邻的碳上没有N或S基团。因此，例如在下环中
其中没有-OH直接与标记为2和5的碳连接。
还应注意互变异构形式，诸如以下部分 被认为在本发明的某些实施方案中是等同的。
″炔基烷基″是指炔基-烷基-基团，其中炔基和烷基如先前所述。优选的炔基烷基含有低级炔基和低级烷基。通过烷基与母体部分连接。适当炔基烷基的非限制性例子包含炔丙基甲基。
″杂芳烷基″是指杂芳基-烷基-基团，其中杂芳基和烷基如先前所述。优选的杂芳烷基含有低级烷基。适当的杂芳烷基的非限制性例子包含吡啶基甲基和喹啉-3-基甲基。通过烷基与母体部分连接。
″羟基烷基″是指HO-烷基-基团，其中烷基如先前所述。优选的羟基烷基含有低级烷基。适当羟基烷基的非限制性例子包含羟基甲基和2-羟基乙基。
″酰基″是指H-C(O)-、烷基-C(O)-或环烷基-C(O)-，其中各种基团如先前描述。通过羰基与母体部分连接。优选的酰基含有低级烷基。适当酰基的非限制性例子包含甲酰基、乙酰基和丙酰基。
″芳酰基″是指芳基-C(O)-基，其中芳基如先前所述。通过羰基与母体部分连接。适当芳酰基的非限制性例子包含苯甲酰基和1-萘甲酰基。
″烷氧基″是指烷基-O-基，其中烷基如先前所述。适当烷氧基的非限制性例子包含甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基和正丁氧基。通过醚氧与母体部分连接。
″芳基氧基″是指芳基-O-基，其中芳基如先前所述。适当芳基氧基的非限制性例子包含苯氧基和萘氧基。通过醚氧与母体部分连接。
″芳烷基氧基″是指芳烷基-O-基，其中芳烷基如先前所述。适当芳烷基氧基的非限制性例子包含苄氧基和1-或2-萘甲氧基。通过醚氧与母体部分连接。
″烷硫基″是指烷基-S-基，其中烷基如先前所述。适当烷硫基的非限制性例子包含甲硫基和乙硫基。通过硫与母体部分连接。
″芳硫基″是指芳基-S-基，其中芳基如先前所述。适当芳硫基的非限制性例子包含苯硫基和萘硫基。通过硫与母体部分连接。
″芳烷硫基″是指芳烷基-S-基，其中芳烷基如先前所述。适当芳烷硫基的非限制性例子为苄硫基。通过硫与母体部分连接。
″烷氧羰基″是指烷基-O-CO-基。适当烷氧羰基的非限制性例子包含甲氧羰基和乙氧羰基。通过羰基与母体部分连接。
″芳氧羰基″是指芳基-O-CO-基。适当芳氧羰基的非限制性例子包含苯氧羰基和萘氧羰基。通过羰基与母体部分连接。
″芳烷氧羰基″是指芳烷基-O-C(O)-基。适当芳烷氧羰基的非限制性例子为苄氧羰基。通过羰基与母体部分连接。
″烷基磺酰基″是指烷基-S(O2)-基。优选的基团为其中烷基为低级烷基的那些。通过磺酰基与母体部分连接。
″芳基磺酰基″是指芳基-S(O2)-。通过磺酰基与母体部分连接。
术语″被取代的″是指指定原子上的一个或多个氢被选择的所示基团置换，前提条件是不超过现状下指定原子的正常价，且该取代产生稳定的化合物。取代基和/或变量的组合仅当所述组合产生稳定的化合物时才是可能的。″稳定的化合物″或″稳定的结构″是指化合物充分稳固以经受住从反应混合物分离达到有用的纯度，和配制成有效治疗剂。
术语″任选被取代的″是指任选被特定基团、基、或部分取代。
用于化合物的术语″分离的″或″分离形式的″是指该化合物自合成过程或其自然源或其组合分离后的物理状态。用于化合物的术语″纯化的″或″纯化形式的″是指该化合物自本文描述或已为技术人员熟知的纯化过程后得到的物理状态，其具有充分的纯度以可通过本文所述的或为本领域技术人员熟知的标准分析技术进行表征。
还应注意本文的正文、流程、实施例和表格中任何具有不饱和价数的杂原子假定具有氢原子以平衡价数。
当化合物中的官能团称为″被保护的″，其是指该基团为经修饰的形式，以防止在该化合物经受反应时该被保护部位发生不希望的副反应。通过本领域的普通技术人员以及通过参考诸如T.W.Greene等人，Protective Groups in organic Synthesis(1991)，Wiley，New York的标准教材应可了解合适的保护基团。
当任何组成物或式III中存在多于一个的任何变量(例如芳基、杂环基、R2等)时，其在各情况下的定义独立于其在所有其它情况下的定义。
本文所用术语″组合物″意在涵盖包括特定量的特定成份的产物，和任何直接或间接由特定量的特定成份的组合产生的产物。
本发明的化合物的前药和溶剂合物还涵盖于本文中。本文采用的术语″前药″表示作为药物前体的化合物，当给用至受试者后，该化合物通过新陈代谢或化学过程经历化学转化以得到式III的化合物或其盐和/或溶剂合物。前药的讨论提供于A.C.S.Symposium Series的T.Higuchi和V.Stella，Pro-drugs as Novel Delivery Systems(1987)14，和Bioreversible Carriers in Drug Design，(1987)Edward B.Roche编，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press中，两者并入本文作为参考。
″溶剂合物″是指本发明的化合物与一个或多个溶剂分子的物理性结合物。该物理性结合物包括不同程度的离子键合和共价键结，包含氢键结合。在某些情况中，溶剂合物将能够分离，例如当结晶固体的晶格中并入一个或多个溶剂分子时。″溶剂合物″包含溶液相和可分离的溶剂合物两者。适当溶剂合物的非限制性例子包含乙醇化物、甲醇化物等。″水合物″为其中溶剂分子为H2O的溶剂合物。
″有效量″或″治疗有效量″用以描述有效抑制CDK且因而产生所需要的治疗、改善、抑制或预防作用的本发明的化合物或组合物的量。
式III的化合物可形成盐，其还在本发明的范畴内。除非另有说明，本文对式III化合物的所指应理解为包含对其盐的所指。本文采用的术语″盐″表示由无机酸和/或有机酸形成的酸性盐，和由无机碱和/或有机碱形成的碱性盐。另外，当式III化合物既含有碱性部分(诸如但不限于吡啶或咪唑)，又含有酸性部分(诸如但不限于羧酸)时，可形成两性离子(″内盐″)且其包含于本文所用术语″盐″中。虽然还可用其它盐，但优选为药学可接受的(即无毒性、生理学上可接受的)盐。例如，可通过使式III的化合物与一定量(诸如当量)的酸或碱在介质(诸如盐沉淀于其中的介质)反应，或在含水介质中反应、随后进行冻干，来形成式III的化合物。
例示性的酸加成盐包含乙酸盐、抗坏血酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐、富马酸盐、氢氯酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、萘磺酸盐、硝酸盐、草酸盐、磷酸盐、丙酸盐、水杨酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐等。另外，一般认为适于由碱性药学化合物形成药学上有用的盐的酸例如讨论于S.Berge等人，Journal of Pharmaceutical Sciences(1977)66(1)1-19；P.Gould，International J.of Pharmaceutics(1986)33 201-217；Anderson等人，The Practice of Medicinal Chemistry(1996)，Academic Press，NewYork；和The Orange Book(美国食品和药物管理局，Washington D.C.，在其网站上)。这些公开内容并入本文作为参考。
例示性的碱性盐包含铵盐，诸如钠盐、锂盐和钾盐的碱金属盐，诸如钙盐和镁盐的碱土金属盐，与诸如二环己基胺、叔丁基胺的有机碱(例如有机胺)形成的盐，和与诸如精氨酸、赖氨酸的氨基酸形成的盐等。含碱性氮的基团以用诸如如下的试剂进行季铵化低级烷基卤化物(例如甲基、乙基和丁基的氯化物、溴化物和碘化物)、硫酸二烷基酯(例如硫酸二甲酯、硫酸二乙酯和硫酸二丁酯)、长链卤化物(例如癸基、十二烷基和十八烷基的氯化物、溴化物和碘化物)、芳烷基卤化物(例如苄基溴和苯乙基溴)和其它。
所有的所述酸盐和碱盐意在作为本发明范畴内的药学可接受的盐，且认为对于本发明目的而言所有的酸盐和碱盐等同于游离形式的相应化合物。
本发明化合物的药学可接受的酯包括以下组(1)通过羟基酯化作用所得的羧酸酯，其中酯基团的羧酸部分的非羰基部分选自直链或支链烷基(例如乙基、正丙基、叔丁基或正丁基)、烷氧基烷基(例如甲氧基甲基)、芳烷基(如苄基)、芳氧基烷基(例如苯氧基甲基)、芳基(例如任选被例如卤素、C1-4烷基或C1-4烷氧基或氨基取代的苯基)；(2)磺酸酯，诸如烷基磺酰基或芳烷基磺酰基(例如甲磺酰基)；(3)氨基酸酯(例如L-缬氨酰基或L-异亮氨酰基)；(4)膦酸酯和(5)单-、二-或三-磷酸酯。所述磷酸酯可进一步由例如C1-20醇或其反应性衍生物、或由2，3-二(C6-24)酰基甘油进行酯化。
式III的化合物和其盐、溶剂合物和前药可以其互变异构形式存在(例如酰胺或亚氨基醚)。所有的所述互变异构形式作为本发明的部分涵盖于本文中。
本发明化合物(包含所述化合物的盐、溶剂合物和前药，和所述前药的盐和溶剂合物)的所有立体异构体(例如几何异构体、光学异构体等)，诸如由于不同取代基上的不对称碳而存在的那些，包括对映异构形式(其可在甚至没有不对称碳时存在)、旋转异构形式、阻转异构体和非对映体形式涵盖于本发明的范畴内，位置异构体(诸如4-吡啶基和3-吡啶基)还涵盖于本发明的范畴中。本发明化合物的单个立体异构体例如可基本上不合其它异构体，或可例如作为外消旋物或与其它所有立体异构体、或其它经选择的立体异构体混合。本发明的手性中心可具有如IUPAC 1974标准所定义的S或R构型。使用术语″盐″、″溶剂合物″、″前药″等意在同样适用于本发明化合物的对映异构体、立体异构体、旋转异构体、互变异构体、位置异构体、外消旋物或前药的盐、溶剂合物和前药。
式III化合物的多晶型形式，和式III化合物的盐、溶剂合物和前药意在包含于本发明的范畴中。
本发明的化合物具有药理学性质；特别是，式III的化合物可为蛋白激酶抑制剂，诸如细胞周期蛋白依赖性激酶(例如CDK1、CDK2、CDK3、CDK4、CDK5等)、促分裂原活化蛋白激酶(MAPK/ERK)、糖原合成酶激酶3(GSK3β)、关卡激酶-1(″CHK-1″)、关卡激酶-2(″CHK-2″)、Aurora激酶(例如Aurora A、B和C)、蛋白激酶B(例如，丝氨酸/苏氨酸激酶，诸如AKT1、AKT2和AKT3)等的抑制剂。细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)例如包含CDC2(CDK1)、CDK2、CDK4、CDK5、CDK6、CDK7和CDK8。预期式III的新型化合物可用于诸如癌症、自身免疫疾病、病毒性疾病、真菌性疾病、神经学疾病/神经变性疾病、关节炎、炎症、抗增殖(例如眼视网膜病)、神经元、脱发症和心血管疾病的增殖性疾病的治疗。许多这些疾病和病症列于先前引用的U.S.6,413,974中，其公开内容并入本文中。
更具体地，式III的化合物可用于治疗各种癌症，包含(但不限于)如下癌症
癌，包括膀胱、乳房、结肠、肾脏、肝脏、肺(包含小细胞肺癌)、食道、胆囊、卵巢、胰腺、胃、子宫颈、甲状腺、前列腺和皮肤的癌，包括鳞状细胞癌；淋巴系统的造血瘤，包括白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性淋巴母细胞性白血病、B细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛状细胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤；脊髓系统的造血瘤，包括急性和慢性髓性白血病、骨髓发育异常综合征和早幼粒细胞白血病；间叶细胞源的瘤，包括纤维肉瘤和横纹肌肉瘤；中枢和周围神经系统的瘤，包括星形细胞瘤、神经母细胞瘤、神经胶质瘤和神经鞘瘤；和其它肿瘤，包括黑色素瘤、精原细胞瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、着色性干皮病(xenoderoma pigmentosum)、角化棘皮瘤(keratoctanthoma)、甲状腺滤泡癌和卡波西肉瘤。
由于CDK在一般细胞增殖调节中的关键作用，抑制剂可充当可用于治疗具有异常细胞增殖特征的任何疾病过程的可逆性细胞抑制剂，例如用于良性前列腺增生、家族性腺上皮增生息肉病，神经-纤维瘤病、动脉粥样硬化、肺纤维化、关节炎、牛皮癣、肾小球肾炎、血管成形术或血管手术后再狭窄、肥大性瘢痕、炎症性肠病、移植排斥反应、内毒素性休克和真菌感染。
如新近发现的，即CDK5牵涉τ蛋白质磷酸化作用(J.Biochem，(1995)117，741-749)所表明的，式III的化合物还可用于治疗阿尔茨海默病。
式III的化合物可诱导或抑制细胞程序死亡。细胞程序死亡反应在多种人类疾病中是异常的。作为细胞程序死亡调节剂的式III的化合物将可用于治疗癌症(包括但不限于在上文提及的类型)、病毒性感染(包括但不限于疱疹病毒、痘病毒、埃-巴病毒(Epstein-Barr virus)、辛德比斯病毒(Siudbis virus)和腺病毒)，预防AIDS在感染HIV的个体中的发展、自身免疫疾病(包含但不限于系统狼疮、erythematosus、自身免疫调节的肾小球肾炎、类风湿性关节炎、牛皮癣、炎症性肠病和自身免疫糖尿病)、神经变性病症(包含但不限于阿尔茨海默氏病、AIDS相关性痴呆、帕金森氏病、肌萎缩性侧索硬化、色素性视网膜炎、脊髓肌肉萎缩、小脑变性)、骨髓发育异常综合征、再生障碍性贫血、与心肌梗塞有关的缺血性损伤、中风和再灌注损伤、心律不齐、动脉粥样硬化、毒素诱导或与酒精相关的肝病、血液病(包含但不限于慢性贫血和再生障碍性贫血)、肌肉骨骼系统变性疾病(包含但不限于骨质疏松症和关节炎)、阿司匹林敏感性鼻窦炎、囊肿性纤维化、多发性硬化、肾病和癌性疼痛。
式III的化合物作为CDK抑制剂可调节细胞RNA和DNA合成水平。所述药剂将因此可用于治疗病毒性感染(包含但不限于HIV、人乳头状瘤病毒、疱疹病毒、痘病毒、埃-巴病毒、辛德比斯病毒和腺病毒)。
式III的化合物还可用于化学预防癌症。化学预防定义为通过阻断起始诱变事件或阻断已遭受损害的癌前细胞进程或抑制肿瘤复发来抑制侵袭性癌症的发展。
式III的化合物还可用于抑制肿瘤血管生成和转移。
式III的化合物还可充当其它蛋白激酶例如蛋白激酶C、her2、raf1、MEK1、MAP激酶、EGF受体、PDGF受体、IGF受体、PI3激酶、wee1激酶、Src、Abl的抑制剂，且因此有效治疗与其它蛋白激酶有关的疾病。
本发明的另一方面为治疗患有与CDK有关的疾病或症状的哺乳动物(例如人类)的方法，该方法通过对哺乳动物给用治疗有效量的至少一种式III的化合物、或该化合物的药学可接受的盐、溶剂合物或酯。
式III的化合物的优选剂量为约0.001至500毫克/公斤体重/天。式III的化合物、或该化合物的药学可接受的盐、溶剂合物或酯的特别优选的剂量为约0.01至25毫克/公斤体重/天。
本发明的化合物还可与一种或多种抗癌疗法(诸如放射疗法)和/或一种或多种选自以下的抗癌剂组合(一同或顺序给用)使用细胞抑制剂、细胞毒剂(诸如但不限于DNA相互作用剂(诸如顺铂(cisplatin)或多柔比星(doxorubicin))；紫杉烷类(例如泰索帝(taxotere)、泰素(taxol))；拓扑异构酶II抑制剂(诸如依托泊苷(etoposide))；拓扑异构酶I抑制剂(诸如伊立替康(irinotecan)(或CPT-11)、凯普斯达(camptostar)或拓扑替康(topotecan))；微管蛋白相互作用剂(诸如紫杉醇(paclitaxel)、多西他赛(docetaxel)或埃皮霉素(epothilones))；激素剂(诸如他莫昔芬(tamoxifen))；胸苷酸合酶抑制剂(诸如5-氟尿嘧啶)；抗代谢药物(诸如甲氨喋呤(methoxtrexate))；烷化剂(诸如替莫唑胺(temozolomide)(TEMODARTM购自Schering-Plough Corporation，Kenilworth，New Jersey)、环磷酰胺(cyclophosphamide))；法呢基蛋白转移酶抑制剂(诸如SARASARTM(4-[2-[4-[(11R)-3，10-二溴-8-氯-6，11-二氢-5H-苯并[5，6]环庚[1，2-b]吡啶-11-基-]-1-哌啶基]-2-氧代乙基]-1-哌啶甲酰胺，或购自Schering-Plough Corporation，Kenilworth，New Jersey的SCH 66336)、替匹法尼(tipifarnib)(购自Janssen Pharmaceuticals的Zarnestra或R115777)、L778，123(Merck & Company，WhitehouseStation，New Jersey的法呢基蛋白转移酶抑制剂)；BMS214662(Bristol-Myers Squibb Pharmaceuticals，Princeton，New Jersey的法呢基蛋白转移酶抑制剂)；信号转导抑制剂(诸如易瑞沙(Iressa)(购自英国Astra Zeneca Pharmaceuticals)、它赛瓦(Tarceva)(EGFR激酶抑制剂)、EGFR抗体(例如C225)、格列卫(GLEEVECTM)(NovartisPharmaceuticals，East Hanover，New Jersey的C-abl激酶抑制剂)；干扰素，诸如干扰能(intron)(购自Schering-Plough Corporation)、佩乐能(Peg-Intron)(购自Schering-Plough Corporation)；激素疗法组合；芳香酶组合；ara-C、亚德里亚霉素(adriamycin)、癌得星(cytoxan)和吉西他滨(gemcitabine))。
其它抗癌(还称抗肿瘤)剂包含但不限于尿嘧啶氮芥(Uracilmustard)、氮芥(Chlormethine)、异环磷酰胺(Ifosfamide)、美法仑(Melphalan)、苯丁酸氮芥(Chlorambucil)、哌泊溴烷(Pipobroman)、曲他胺(Triethylenemelamine)、三亚乙基硫代磷酸胺(Triethylenethiophosphoramine)、白消安(Busulfan)、卡莫司汀(Carmustine)、洛莫司汀(Lomustine)、链佐星(Streptozocin)、达卡巴嗪(Dacarbazine)、氮尿苷(Floxuridine)、阿糖胞苷(Cytarabine)、6-巯基嘌呤(6-Mercaptopurine)、6-硫代鸟嘌呤(6-Thioguanine)、磷酸氟达拉滨(Fludarabine phosphate)、奥沙利铂(oxaliplatin)、leucovirin、奥沙利铂(ELOXATINTM，购自Sanofi-Synthelabo Pharmaeuticals，France)、喷司他汀(Pentostatine)、长春碱(Vinblastine)、长春新碱(Vincristine)、长春地辛(Vindesine)、博来霉素(Bleomycin)、放线菌素D(Dactinomycin)、柔红霉素(Daunorubicin)、多柔比星(Doxorubicin)、表柔比星(Epirubicin)、伊达比星(Idarubicin)、光神霉素(Mithramycin)、脱氧柯福霉素(Deoxycoformycin)、丝裂霉素-C(Mitomycin-C)、L-天冬酰胺酶(L-Asparaginase)、替尼泊苷17α-乙炔雌二醇(Teniposide 17α-Ethinylestradiol)、己烯雌酚(Diethylstilbestrol)、睾酮(Testosterone)、泼尼松(Prednisone)、氟甲睾酮(Fluoxymesterone)、丙酸屈他雄酮(Dromostanolone propionate)、睾内酯(Testolactone)、醋酸甲地孕酮(Megestrolacetate)、甲泼尼龙(Methylprednisolone)、甲睾酮(Methyltestosterone)、泼尼松龙(Prednisolone)、曲安西龙(Triamcinolone)、氯烯雌醚(Chlorotrianisene)、羟孕酮(Hydroxyprogesterone)、氨鲁米特(Aminoglutethimide)、雌莫司汀(Estramustine)、醋酸甲羟孕酮(Medroxyprogesteroneacetate)、亮丙立德(Leuprolide)、氟他胺(Flutamide)、托瑞米芬(Toremifene)、戈舍瑞林(goserelin)、顺铂(Cisplatin)、卡铂(Carboplatin)、羟基脲(Hydroxyurea)、安吖啶(Amsacrine)、丙卡巴肼(Procarbazine)、米托坦(Mitotane)、米托蒽醌(Mitoxantrone)、左旋咪唑(Levamisole)、Navelbene、阿那曲唑(Anastrazole)、来曲唑(Letrazole)、卡培他滨(Capecitabine)、Reloxafine、Droloxafine、或者六甲密胺(Hexamethylmelamine)。
当向需要这种给用的患者给用组合疗法时，该组合中的治疗剂，或包括所述治疗剂的一种或多种药物组合物可以任何顺序给用，诸如顺序地、并行、一同、同时等方式。在该组合疗法中不同活性部分的量可为不同量(不同剂量)或相同量(相同剂量)。因此，对于非限制性的说明目的，式III的化合物和另外的治疗剂可在单一剂量单位(例如胶囊、片剂等)中以固定的量(剂量)存在。这种含有固定量的两种不同活性化合物的单一剂量单位的市售例子为VYTORIN(可购自MerckSchering-Plough Pharmaceuticals，Kenilworth，New Jersey)。
若配制成固定剂量，则所述组合产品采用本文所述剂量范围内的本发明的化合物，和另外的在其剂量范围内的药学活性剂或治疗。例如，已发现CDC2抑制剂olomucine与已知的细胞毒剂协同作用诱导细胞程序死亡(J.Cell Sci.，(1995)108，2897)。当组合制剂不适合时，式III的化合物还可与已知的抗癌剂或细胞毒剂顺序地给用。本发明不限于给用顺序；式III的化合物可在已知的抗癌剂或细胞毒剂给用之前或之后给用。例如，细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂flavopiridol的细胞毒活性受到与抗癌剂给用的顺序的影响，Cancer Research，(1997)57，3375。所述技术既在本领域技术人员又在主治医师的范围内。
因此，在一方面，本发明包含组合，其包括一定量的至少一种式III的化合物，或其药学可接受的盐、溶剂合物或酯，和一定量的上文所述的一种或多种抗癌治疗和抗癌剂，其中所述量的化合物/治疗产生所需的治疗效果。
本发明化合物的药理学性质可通过大量药理学试验进行确认。随后所要描述的例示性的药理学试验可对本发明的化合物和其盐进行。
本发明还涉及药物组合物，其包括至少一种式III的化合物，或所述化合物的药学可接受的盐、溶剂合物或酯，和至少一种药学可接受的载体。
对于由本发明描述的化合物制备药物组合物而言，惰性的药学可接受的载体可为固体或液体。固体制剂包含粉末剂、片剂、可分散颗粒、胶囊、扁囊剂和栓剂。粉末剂和片剂可包括约5到约95％的活性成份。适当的固体载体在本领域中是已知的，例如碳酸镁、硬脂酸镁、滑石、糖或乳糖。片剂、粉末剂、扁囊剂和胶囊可用作适于口服给用的固体剂型。药学可接受的载体的例子和各种组合物的制造方法的例子可发现于A.Gennaro(编)，Remington′s Pharmaceutical Sciences，第18版，(1990)，Mack Publishing Co.，Easton，Pennsylvania中。
液体制剂包含溶液、悬浮液和乳液。作为一例子可提及的是用于非肠道注射的水或水-丙二醇溶液或加入甜味剂和遮光剂以用于口服溶液、悬浮液和乳液。液体制剂还可包含用于鼻内给用的溶液。
适于吸入的气雾剂制剂可包括溶液和粉末状固形物，其可与药学可接受的载体组合，诸如惰性的压缩气体，例如氮气。
还包含如下固体制剂，其意在仅在使用前转化成用于口服或非肠道给用的液体制剂。所述液体形式包含溶液、悬浮液和乳液。
本发明的化合物还可经皮递送。经皮组合物可采取霜剂、洗剂、气雾剂和/或乳液的形式且可包含在本领域常用的用于此目的的基质或储库型经皮贴片中。
本发明的化合物还可进行皮下递送。
化合物优选经口服或静脉内给用。
药物制剂优选为单位剂型。在该形式中，制剂细分为含有适当量的活性组分的具有合适尺寸的单位剂量(例如有效量)以达成所需目的。
根据具体的应用，单位剂量制剂中活性化合物的量可在约1mg约100mg，优选约1mg到约50mg，更优选约1mg到约25mg的范围内改变或调节。
所采用的实际剂量可视患者的要求和受治疗症状的严重性的不同进行改变。针对特定情况确定适当的给药方案在本领域技术人员的范围内。为方便起见，每日总剂量可根据需要分开给用且在一天内以多次给用。
本发明的化合物和/或其药学可接受的盐的给药剂量和频率应根据主治临床医生考虑诸如患者年龄、健康状况和尺寸和受治疗病状的严重性而进行调整。用于口服给用的典型推荐日剂量给药方案可在约1毫克/天到约500毫克/天的范围内，优选在1毫克/天至200毫克/天的范围内，分成两至四份的分开剂量。
本发明的另一方面为药包，其包括治疗有效量的至少一种式III的化合物，或所述化合物的药学可接受的盐、溶剂合物或酯，和药学可接受的载体、媒介物或稀释剂。
本发明的另一方面为药包，其包括一定量的至少一种式III的化合物、或所述化合物的药学可接受的盐、溶剂合物或酯，和一定量的至少一种上文所述的抗癌疗法和/或抗癌剂，其中所述量的两种或多种成分产生所需的治疗效果。
本文所公开的本发明通过以下制备方法、建议路径和实施例进行示例性说明，不应理解它们对公开范畴构成限制。替代性的机械路径和类似结构对本领域的技术人员而言是显而易见的。
当给出NMR数据时，1H光谱获得于Varian VXR-200(200MHz，1H)，Varian Gemini-300(300MHz)或XL-400(400MHz)上，且以自Me4Si向下的磁场ppm方式与附带说明的质子数、多重度和以赫兹为单位的偶合常数一起记录。当给出LC/MS数据时，使用Applied Biosystems API-100质谱仪和Shimadzu SCL-10A LC柱进行分析Altech铂C18，3微米，33mm×7mm ID；梯度流0min-10％CH3CN，5min-95％CH3CN，7min-95％CH3CN，7.5min-10％CH3CN，9min-停止，且给出保留时间和观测到的母离子。
下列溶剂和试剂可以其缩写引用薄层色谱法TLC二氯甲烷CH2Cl2乙酸乙酯AcOEt或EtOAc甲醇MeOH三氟乙酸酯(盐)TFA三乙胺Et3N或TEA丁氧羰基n-Boc或Boc核磁共振光谱NMR液相色谱质谱LCMS高分辨率质谱HRMS毫升mL毫摩尔mmol微升μl克g毫克mg室温或rt(环境温度)约25℃。
二甲氧基乙烷DME实施例一般可如流程1所示制备本发明描述的化合物。酰化适当取代的3-氨基吡唑1和碱催化的环化作用产生硫醇2。
流程1
甲基化、氯化、和用所需胺置换产生4，其可通过氧化和亲核置换转化成所需的产物5。
制备实施例100 将BOC2O(3.3g，1.1当量)和TEA加入至4-氨基甲基吡啶(1.41mL，13.87mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液中，且于室温下搅拌所得溶液2小时。将反应混合物用H2O(50mL)稀释且用CH2Cl2提取。将合并的有机物经Na2SO4干燥、过滤且进行减压浓缩。通过急骤色谱法使用5％(含10％NH4OH的MeOH)的CH2Cl2溶液作为洗脱剂纯化该粗产物得到黄色固体(2.62g，产率91％)。LCMSMH+＝209。
制备实施例101 通过与制备实施例100所陈述的程序基本上相同的程序，仅代替使用3-氨基甲基吡啶，制得呈黄色油状物的上述化合物(2.66g，产率92％)。LCMSMH+＝209。
制备实施例200 在0℃下向制备实施例100制得的化合物(0.20g，0.96mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中加入m-CPBA(0.17g，1.0当量)且于0℃下搅拌所得溶液2小时并于4℃下储存过夜，此时将反应混合物回温至室温且搅拌3小时。将反应混合物用H2O稀释且用CH2Cl2提取。将合并的有机物经Na2SO4干燥、过滤和浓缩。通过急骤色谱法使用10％(含10％NH4OH的MeOH)的溶液作为洗脱剂纯化该粗产物LCMSMH+＝255。
制备实施例201 向溶于MeOH(200mL)和H2O(250mL)中的制备实施例101制得的化合物(27g，0.13mol)和NaHCO3(21.8g，2.0eq.)中滴加过硫酸氢钾(oxone)(58.6g)的H2O(250mL)溶液。将所得溶液于室温下搅拌过夜。用CH2Cl2(500mL)稀释且过滤该反应混合物。分离所述层且用CH2Cl2提取含水层。将合并的有机相经Na2SO4干燥、过滤，且减压浓缩以产生白色固体(21.0g，产率72％)。MSMH+＝255。
制备实施例300
在室温下在二氧杂环己烷(0.97mL)中的4M HCl中搅拌制备实施例200制得的化合物(0.29g，1.29mmol)2小时。反应混合物真空浓缩且不经进一步纯化即可使用。LCMSMH+＝125。
制备实施例301 通过与制备实施例201所提出的程序基本上相同的程序，仅代替使用制备实施例201制得的化合物，制得上述化合物。LCMSMH+＝125。
制备实施例400 步骤A将乙醛(50g，0.41mol)[例如参见WO 0232893]的MeOH(300mL)溶液冷却至0℃，且用NaBH4(20g，0.53mol，分六批)小心处理20分钟。随后使反应回温至20℃且搅拌4小时。将混合物再次冷却至0℃且用饱和NH4Cl水溶液小心淬灭并进行浓缩。急骤色谱法(5-10％7NNH3-MeOH/CH2Cl2)产生呈淡黄色固体的伯醇(31g，62％)。
步骤B
将溶于CH2Cl2(500mL)中的得自制备实施例400步骤A的醇(31g，0.25mol)的浆料冷却至0℃并用SOCl2(55mL，0.74mol，经30分钟)缓慢处理。将该反应随后于20℃下搅拌过夜。浓缩该物质，使其在丙酮中成浆，然后过滤。所得米色固体经真空过夜干燥(38.4g，52％，HCl盐)。
步骤C向装配有搅拌棒的15mL压力管中加入得自制备实施例400步骤B的氯化物(150mg，0.83mmol)，随后加入7M NH3/MeOH(10mL)。于室温下搅拌所得溶液48h，然后减压浓缩该混合物产生淡黄色固体(0.146g，83％)。M+H(游离碱)＝140。
制备实施例401 根据WO 00/37473制备该已知的伯醇，且根据WO 02/064211按照类似于制备实施例400的方式将其转化成所需的胺二盐酸盐形式。
制备实施例500 将在95％EtOH(260mL)中的哌啶-2-乙醇(127g，980mmol)加入到在95％EtOH(150mL)中的(S)-(+)-樟脑磺酸(228.7g，1.0当量)中，且将所得溶液回温至回流。向温溶液中加入Et2O(600mL)，且将溶液冷却至室温并静置3天。过滤和真空干燥所得晶体(25g)mp 173-173℃(文献值168℃)。接着将该盐溶于NaOH(3M，100mL)中且搅拌2小时，并用CH2Cl2(5×100mL)提取所得溶液。将合并的有机相经Na2SO4干燥、过滤且减压浓缩以产生(S)-哌啶-2-乙醇(7.8g)，其一部分自Et2O重结晶mp＝69-70℃(文献值68-69℃)；[α]D＝14.09°(CHCl3，c＝0.2)。
制备实施例501
通过与制备实施例500所提出的程序基本上相同的程序，仅代替使用(R)-(-)-樟脑磺酸，制得(R)-哌啶-2-乙醇。(1.27g)[α]D＝11.3°(CHCl3，c＝0.2)。
制备实施例502 向装有顺式-(1R，2S)-(+)-2-(苄基氨基)环己烷甲醇(1g，4.57mmol)的MeOH(35mL)溶液的压力瓶中一次性加入20重量％的Pd(OH)2(0.3g，＞50％湿度)。在Parr氢化装置中于50psi的H2中振荡该混合物12小时。用N2吹扫该混合物且使其经由硅藻土垫过滤。以MeOH(2×25mL)充分洗涤该垫且减压浓缩所得滤液产生0.57g(97％)的白色固体。M+H＝130。
制备实施例507 在配有加料漏斗的5L烧瓶中，于N2下在无水Et2O(3.0L)中搅拌t-BuOK(112.0g，1.00mol)。在3小时内滴加丁腈(69.0g，1.00mol)与甲酸乙酯(77.7g，1.05mol)的混合物，接着于室温下将该反应混合物搅拌过夜。将混合物冷却至0℃，加入AcOH(57mL)，过滤混合物，且用Et2O(500mL)洗涤该固体。在室温下旋转蒸发该合并的滤液产生浅黄色油状物(95.1g)。
将该油状物溶于无水EtOH(100mL)中，加入99％的一水合肼(48mL)，接着加入AcOH(14mL)，且将该混合物在N2中回流过夜。蒸发溶剂且将所得油状物通过硅胶色谱法分离，使用CH2Cl2在MeOH中的7NNH3洗脱。得到22.4g(20％)呈澄清油状物的3-氨基-4-乙基吡唑，其经静置固化。
制备实施例508 通过与制备实施例507所提出的程序基本上相同的程序，仅代替使用适当的原料，制得氨基吡唑508。
制备实施例509-511通过与制备实施例507所提出的程序基本上相同的程序，仅代替使用适当的原料，制得表500第2栏所示的氨基吡唑。
表500
制备实施例512 步骤A在0℃下向搅拌的来自制备实施例507的吡唑(3.33g，300mmol)的无水CH2Cl2(50mL)溶液中滴加乙氧羰基异硫氰酸酯(3.54mL，3.00mmol)。于室温下搅拌所得混合物24小时，此时过滤沉淀物，将其用Et2O(2×50mL)洗涤，且真空干燥。得到白色固体(3.50g，48％)。LCMSMH+＝243。Mp＝177-179℃。
步骤B搅拌在无水乙腈(20mL)中的得自制备实施例512步骤A的固体(800mg，3.30mmol)与K2CO3(1.37g，9.90mmol)的混合物，使其在氮气中回流4小时。将该混合物冷却至25℃，用乙酸(5mL)酸化且用水(20mL)稀释。蒸发溶剂且使残余物悬浮于水中(50mL)。滤出固体且将固体用水(2×20mL)洗涤并真空干燥。得到灰白色固体(548mg，85％)。LCMSMH+＝197。Mp＝251-253℃。
制备实施例513 步骤A向制备实施例512中描述的化合物(500mg，2.55mmol)的EtOH溶液中加入在H2O(3mL)中的NaOH(204mg，5.10mmol)和然后滴加MeI(362mg，2.55mmol)。于室温下搅拌所得混合物1小时，将其用1M HCl(5mL)酸化，且蒸发溶剂。通过硅胶柱色谱法纯化残余物，用CH2Cl2/MeOH(15∶1)洗脱，产生白色固体(442mg，83％)。LCMSMH+＝211。Mp＝182-184℃。
步骤B向制备实施例513步骤A描述的化合物(400mg，1.90mmol)的POCl3(6mL)溶液中加入N，N-二甲基苯胺(460mg，3.80mmol)，且在氮气中将混合物加热回流历时18小时。将所得溶液倾于碎冰上(200g)且用CH2Cl2(2×50mL)提取。用H2O(100mL)洗涤该合并的提取物，将其经Na2SO4干燥、过滤且蒸发溶剂。以CH2Cl2用作洗脱剂，通过硅胶柱色谱法纯化残余物，得到浅黄色固体(275mg，63％)。LCMSM+＝229。
制备实施例514 通过与制备实施例512-513所提出的程序基本上相同的程序，制得制备实施例514中给出的化合物。
制备实施例515-517通过与制备实施例512-513所提出的程序基本上相同的程序，仅代替使用表501第2栏所示的化合物，制得表501第3栏所示的化合物。
表501
制备实施例518 于70℃下在N2中搅拌在无水乙腈(3mL)中的制备实施例513制得的化合物(130mg，0.57mmol)、胺(94mg，0.68mmol)和NaHCO3(96mg，1.14mmol)的混合物20小时。减压除去所述溶剂，且用CH2Cl2/MeOH(20∶1)作为洗脱剂，通过硅胶柱色谱法纯化该残余物，得到白色固体(150mg，80％)。LCMSMH+＝331。Mp＝162-164℃。
制备实施例519-527通过与制备实施例518所提出的程序基本上相同的程序，仅代替使用表502第2栏的胺类和表502第3栏的氯化物，制得表502第4栏所示的化合物。
表502
实施例1000 步骤A向得自制备实施例518的化合物(80mg，0.24mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中加入70％m-CPBA(60mg，0.24mmol)。于室温下过夜搅拌所得溶剂，接着再加入CH2Cl2(15mL)。用NaHCO3(2×20mL)饱和水溶液洗涤该溶液，将其经MgSO4干燥、过滤，且蒸发溶剂。由此所得白色固体(55mg)直接用于步骤B。
步骤B于100℃下在N2中搅拌在无水NMP(0.2mL)中的实施例1000步骤A的化合物(55mg)与制备实施例500的氨基醇(60mg)的混合物5小时。减压除去NMP且用CH2Cl2/MeOH(5∶1)作为洗脱剂，通过硅胶制备TLC纯化残余物得到浅黄色蜡状物(30mg，51％)。LCMSMH+＝412。
实施例1001-1010通过与实施例1000所提出的程序基本上相同的程序，仅代替使用表1000第2栏的适当的胺和表1000第3栏的硫醚，制得表1000第4栏中的化合物。
表1000
实施例2001-2029通过与实施例1000所提出的程序基本上相同的程序，仅代替使用表2000第2栏中的适当的胺和表2000第3栏中的适当的硫醚，可制得表2000第4栏中的化合物。
表2000
试验下文描述有用的激酶活性试验。
杆状病毒构建通过PCR将细胞周期蛋白A和E克隆到pFASTBAC(Invitrogen)中，同时在氨基末端加入GluTAG序列(EYMPME)以在抗GluTAG亲合柱上纯化。表达的蛋白质的大小接近46kDa(细胞周期蛋白E)和50kDa(细胞周期蛋白A)。还通过PCR将CDK2克隆到pFASTBAC中，同时在羧基末端加入血细胞凝集素抗原决定部位标记物(YDVPDYAS)。表达的蛋白质的大小接近34kDa。
酶生成将表达细胞周期蛋白A、E和CDK2的重组杆状病毒感染至SF9细胞中历时48小时，感染复数(MOI)为5。于1000RPM下离心分离10分钟获得细胞。将含有细胞周期蛋白(E或A)的团粒与含有CDK2的细胞团粒相组合，且以团粒体积的5倍量的溶胞缓冲液在冰上溶胞30分钟，该溶胞缓冲液含有50mM Tris(pH 8.0)、0.5％NP40、1mM DTT和蛋白酶/磷酸酶抑制剂(Roche Diagnostics GmbH，Mannheim，Germany)。搅拌该混合物30-60分钟以促进细胞周期蛋白-CDK2复合物形成。接着使混合的溶胞产物于15000RPM下旋转沉降(spun down)10分钟且保留上清液。接着使用5ml抗GluTAG小珠(对于一升SF9细胞)捕获细胞周期蛋白-CDK2复合物。于溶胞缓冲液中洗涤经结合的小珠三次。用含有100-200μg/mL GluTAG肽的溶胞缓冲液竞争性洗脱蛋白质。在含有50mM Tris(pH 8.0)、1mM DTT、10mM MgCl2、100μM原钒酸钠和20％丙三醇的2升激酶缓冲液中过夜渗析洗脱液。于-70℃下分等份储存酶。
体外激酶试验在弱的蛋白结合96孔板(Corning Inc，Corning，NewYork)中进行CDK2激酶试验(细胞周期蛋白A或E依赖性)。在含有50mM Tris(pH 8.0)、10mM MgCl2、1mM DTT和0.1mM原钒酸钠的激酶缓冲液中将酶稀释至最终浓度为50μg/ml。所述反应中使用的底物为来自组蛋白H1的生物素化肽(购自Amersham，UK)。该底物于冰上解冻且在激酶缓冲液中稀释至2μM。化合物在10％DMSO中稀释至所需浓度。对于各个激酶反应，混合20μl的50μg/ml酶溶液(1μg酶)与20μl的1μM底物溶液，接着在各个孔中与10μl经稀释的化合物组合以供测试。通过加入50μl的4μM ATP和1μCi的33P-ATP(来自Amersham，UK)引发激酶反应。使该反应于室温下进行1小时。通过加入200μl含有0.1％Triton X-100、1mM ATP、5mM EDTA和5mg/ml链霉抗生物素蛋白涂覆的SPA小珠的终止缓冲液(购自Amersham，UK)15分钟来终止反应。接着使用Filtermate通用收集器(Packard/Perkin Elmer LifeSciences)将所述SPA小珠捕获于96孔GF/B滤板(Packard/Perkin ElmerLife Sciences)上。通过将所述小珠用2M NaCl洗涤两次接着用含1％磷酸的2M NaCl洗涤两次以消除非特异性信号。接着使用TopCount 96孔液体闪烁计数器(购自Packard/Perkin Elmer Life Sciences)测量该放射性信号。
IC50测定由产生自抑制性化合物的8点连续稀释液(各一式两份)的抑制数据绘制剂量-反应曲线。化合物浓度对通过用处理样品的CPM除以未经处理样品的CPM计算出的激酶活性百分比作图。为得到IC50值，接着使剂量-反应曲线拟合标准S形曲线且由非线性回归分析得到IC50值。可通过使用上述试验使用细胞周期蛋白A或细胞周期蛋白E得到激酶活性。本发明的一些化合物的IC50示于下表2表2
虽然本发明已结合上述具体实施方案进行描述，但对本领域的普通技术人员而言其许多替代方案、改进和其它变体是显而易见的。所有所述替代方案、改进和变体意在涵盖于本发明的精神和范畴内。
权利要求
1.由以下结构式表示的化合物 或所述化合物的药学可接受的盐、溶剂合物或酯，其中R1选自H、烷基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基、NR6R7、环烷基和环烷基烷基，其中所述烷基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基、环烷基、环烷基烷基和芳基烷基中的每一个可未被取代或任选独立地被一个或多个可相同或不同的部分取代，各部分独立地选自卤代、烷基、芳基、杂芳基、杂环基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)和NO2；R2为烷基、环烷基、烯基、炔基、三氟甲基、-OR7、-SR7、羟基烷基、卤代烷基、芳基、杂芳基、卤代、CN、甲酰基、硝基、烷基羰基、芳烷基羰基、杂芳烷基羰基或-亚烷基-N(R8R9)(其中R8和R9独立表示H或烷基，或R8和R9连同-N(R8R9)中的氮形成五至七元杂环)；R3为-NR4R5、 或 H、烷基、烷硫基、芳烷硫基、烷基亚磺酰基、或芳烷基亚磺酰基；R4为烷基、环烷基或杂环基，其中所述烷基、环烷基和杂环基中的每一个可未被取代或任选独立地被1-4个可相同或不同的取代基取代，各取代基独立地选自卤代、烷基、羟基甲基、羟基乙基、羟基丙基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)和NO2；R5为H、烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基、环烷基、杂环基、酰基或杂芳基烷基；R6为H、烷基或芳基；R7为H或烷基；R10为卤代、烷基、羟基烷基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)或NO2；和n为0至4，且当n为2-4时，n部分可相同或不同，每个进行独立选择，前提条件是(i)当R2为C1-C4烷基且R5为H，则R4不为C1-C4烷基；(ii)当R2为卤代、CN、甲酰基、硝基、烷基羰基、芳烷基羰基、杂芳烷基羰基或-亚烷基-N(R8R9)，则(a)R3不为H、烷硫基、芳烷硫基、烷基亚磺酰基、芳烷基亚磺酰基或-NR4R5，和(b)n不为0；和(iii)当R2为烷基、环烷基、烯基或炔基时，则R3不为NH(甲基)、N，N(二甲基)、NH(乙酰基)或N(甲基)(乙酰基)。
2.权利要求1的化合物，其中R1选自烷基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基、芳基烷基或NR6R7，其中所述烷基、芳基、杂芳基、杂芳基烷基和芳基烷基中的每一个可未被取代或任选独立地被一个或多个可相同或不同的取代基取代，各取代基独立地选自卤代、烷基、芳基、杂芳基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)和NO2。
3.权利要求1的化合物，其中R2为烷基、环烷基、炔基、三氟甲基、-OR7或-SR7。
4.权利要求1的化合物，其中R3为NR4R5、 或
5.权利要求1的化合物，其中R4为烷基、环烷基或杂环基，其中所述烷基、环烷基或杂环基中的每一个可未被取代或任选独立地被一个或多个可相同或不同的部分取代，各部分独立地选自卤代、烷基、羟基甲基、羟基乙基、羟基丙基、三氟甲基、OR6、NR6R7、SR6、SO2R6、CN、SO2N(R6R7)和NO2。
6.权利要求1的化合物，其中R5为H、烷基、芳基、杂芳基、芳基烷基或杂芳基烷基。
7.权利要求1的化合物，其中n为1至2。
8.权利要求1的化合物，其中R6为H、烷基或芳基。
9.权利要求1的化合物，其中R7为H或烷基。
10.权利要求1的化合物，其中R10为卤代、烷基、羟基甲基、羟基乙基、羟基丙基、三氟甲基、OH、NR6R7、SR6、SO2R6、CN或SO2NR6R7。
11.权利要求2的化合物，其中R1选自苯基、咪唑基、咪唑基-N-氧化物、吡啶基、吡啶基-N-氧化物、吡嗪基、吡嗪基-N-氧化物、苯乙基、吡啶酮、-(CH2)-吡啶基、-(CH2)-吡啶基-N-氧化物、-(CH2)-吡嗪基、-(CH2)-吡嗪基-N-氧化物、-(CH2)-吡啶酮和-(CH2)-咪唑基-N-氧化物，其中所述苯基、咪唑基、吡啶基、吡啶酮和吡嗪基中的每一个可未被取代或任选独立地被一个或多个可相同或不同的部分取代，各部分独立地选自卤代、甲基、乙基、三氟甲基、OH、烷氧基、NH2、SH、SO2CH3、CN和SO2NH(CH2)2CH3。
12.权利要求3的化合物，其中R2选自甲基、乙基、环丙基、环丁基、环戊基、乙烯基、-CF3、羟基、甲氧基和乙氧基。
13.权利要求7的化合物，其中n为1。
14.权利要求4的化合物，其中R3选自(i)被羟基甲基或羟基乙基取代的哌啶基；(ii)被羟基甲基或羟基乙基取代的吡嗪基；(iii)被羟基甲基或羟基乙基取代的吡咯烷基；(iv)被羟基甲基或羟基乙基取代的环己基；(v)被羟基甲基或羟基乙基取代的环戊基；(vi)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的哌啶基)；(vii)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的环己基)；(viii)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的环戊基)；(ix)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的吡咯烷基)；和(x)-N(H)[CH(羟基甲基)(异丙基)]。
15.权利要求5的化合物，其中R4为烷基或环烷基。
16.权利要求6的化合物，其中R5为H。
17.权利要求8的化合物，其中R6为H或烷基。
18.权利要求9的化合物，其中R7为烷基。
19.权利要求10的化合物，其中R10为羟基甲基或羟基乙基。
20.权利要求1的化合物，其中R1选自咪唑基、咪唑基-N-氧化物、吡啶基、吡啶基-N-氧化物、吡嗪基、吡嗪基-N-氧化物、苯乙基、吡啶酮、-(CH2)-吡啶基、-(CH2)-吡啶基-N-氧化物、-(CH2)-吡嗪基、-(CH2)-吡啶酮和-(CH2)-吡嗪基-N-氧化物；R2选自甲基、乙基和环丙基；n为1；R3选自(i)被羟基甲基或羟基乙基取代的哌啶基；(ii)被羟基甲基或羟基乙基取代的吡嗪基；(iii)被羟基甲基或羟基乙基取代的吡咯烷基；(iv)被羟基甲基或羟基乙基取代的环己基；(v)被羟基甲基或羟基乙基取代的环戊基；(vi)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的哌啶基)；(vii)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的环己基)；(viii)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的环戊基)；(ix)-N(H)(被羟基甲基或羟基乙基取代的吡咯烷基)；和(x)-N(H)[CH(羟基甲基)(异丙基)]；R4为烷基或环烷基；R5为H；R6为H或烷基；和R7为烷基。
21.选自以下的化合物 或其药学可接受的盐、溶剂合物或酯。
22.抑制一种或多种激酶的方法，包括对需要这种抑制的患者给用治疗有效量的至少一种权利要求1的化合物。
23.治疗一种或多种与激酶有关的疾病的方法，包括对需要这种治疗的患者给用治疗有效量的至少一种权利要求1的化合物。
24.权利要求23的方法，其中所述激酶为细胞周期蛋白依赖性激酶-1(″CDK1″)、CDK2、CDK3、CDK4或CDK5。
25.权利要求23的方法，其中所述激酶为促分裂原活化蛋白激酶(MAPK/ERK)。
26.权利要求23的方法，其中所述激酶为糖原合成酶激酶3(GSK3β)、关卡激酶-1(″CHK-1″)、关卡激酶-2(″CHK-2″)、Aurora A、AuroraB、Aurora C、AKT1、AKT2或AKT3。
27.权利要求23的方法，其中所述疾病选自膀胱癌、乳房癌、结肠癌、肾癌、肝癌、肺癌、小细胞肺癌、食道癌、胆囊癌、卵巢癌、胰腺癌、胃癌、子宫颈癌、甲状腺癌、前列腺癌和皮肤癌，包括鳞状细胞癌；白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性淋巴母细胞性白血病、B细胞淋巴瘤、T细胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛状细胞淋巴瘤和伯基特淋巴瘤；急性和慢性髓性白血病、骨髓发育异常综合征和早幼粒细胞白血病；纤维肉瘤、横纹肌肉瘤；星形细胞瘤、神经母细胞瘤、神经胶质瘤和神经鞘瘤；黑色素瘤、精原细胞瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、着色性干皮病、角化棘皮瘤、甲状腺滤泡癌和卡波西肉瘤。
28.治疗一种或多种与激酶有关的疾病的方法，包括对需要这种治疗的哺乳动物给用一定量的第一化合物，所述第一化合物是权利要求1的化合物，或其药学可接受的盐、溶剂合物或酯；和一定量的至少一种第二化合物，所述第二化合物是抗癌剂；其中所述量的第一化合物和第二化合物产生治疗效果。
29.权利要求28的方法，进一步包括放疗。
30.权利要求28的方法，其中所述抗癌剂选自细胞抑制剂、顺铂、多柔比星、泰索帝、泰素、依托泊苷、伊立替康、凯普斯达、拓扑替康、紫杉醇、多西他赛、埃皮霉素、他莫昔芬、5-氟尿嘧啶、甲氨喋呤、5FU、替莫唑胺、环磷酰胺、SCH 66336、R115777、L778,123、BMS214662、易瑞沙、它赛瓦、EGFR抗体、格列卫、干扰能、ara-C、亚德里亚霉素、癌得星、吉西他滨、尿嘧啶氮芥、氮芥、异环磷酰胺、美法仑、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷、曲他胺、三亚乙基硫代磷酸胺、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀、链佐星、达卡巴嗪、氮尿苷、阿糖胞苷、6-巯基嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、磷酸氟达拉滨、奥沙利铂、leucovirin、ELOXATINTM、喷司他汀、长春碱、长春新碱、长春地辛、博来霉素、放线菌素D、柔红霉素、多柔比星、表柔比星、伊达比星、光神霉素、脱氧柯福霉素、丝裂霉素-C、L-天冬酰胺酶、替尼泊苷17α-乙炔雌二醇、己烯雌酚、睾酮、泼尼松、氟甲睾酮、丙酸屈他雄酮、睾内酯、醋酸甲地孕酮、甲泼尼龙、甲睾酮、泼尼松龙、曲安西龙、氯烯雌醚、羟孕酮、氨鲁米特、雌莫司汀、醋酸甲羟孕酮、亮丙立德、氟他胺、托瑞米芬、戈舍瑞林、卡铂、羟基脲、安吖啶、丙卡巴肼、米托坦、米托蒽醌、左旋咪唑、Navelbene、CPT-11、阿那曲唑、来曲唑、卡培他滨、Reloxafine、Droloxafine、或者六甲密胺。
31.包括治疗有效量的至少一种权利要求1的化合物和至少一种药学可接受的载体的药物组合物。
32.权利要求29的药物组合物，另外包括一种或多种选自以下的抗癌剂细胞抑制剂、顺铂、多柔比星、泰索帝、泰素、依托泊苷、伊立替康、凯普斯达、拓扑替康、紫杉醇、多西他赛、埃皮霉素、他莫昔芬、5-氟尿嘧啶、甲氨喋呤、5FU、替莫唑胺、环磷酰胺、SCH 66336、R115777、L778,123、BMS 214662、易瑞沙、它赛瓦、EGFR抗体、格列卫、干扰能、ara-C、亚德里亚霉素、癌得星、吉西他滨、尿嘧啶氮芥、氮芥、异环磷酰胺、美法仑、苯丁酸氮芥、哌泊溴烷、曲他胺、三亚乙基硫代磷酸胺、白消安、卡莫司汀、洛莫司汀、链佐星、达卡巴嗪、氮尿苷、阿糖胞苷、6-巯基嘌呤、6-硫代鸟嘌呤、磷酸氟达拉滨、喷司他汀、长春碱、长春新碱、长春地辛、博来霉素、放线菌素D、柔红霉素、表柔比星、伊达比星、光神霉素、脱氧柯福霉素、丝裂霉素-C、L-天冬酰胺酶、替尼泊苷17α-乙炔雌二醇、己烯雌酚、睾酮、泼尼松、氟甲睾酮、丙酸屈他雄酮、睾内酯、醋酸甲地孕酮、甲泼尼龙、甲睾酮、泼尼松龙、曲安西龙、氯烯雌醚、羟孕酮、氨鲁米特、雌莫司汀、醋酸甲羟孕酮、亮丙立德、氟他胺、托瑞米芬、戈舍瑞林、卡铂、羟基脲、安吖啶、丙卡巴肼、米托坦、米托蒽醌、左旋咪唑、Navelbene、CPT-11、阿那曲唑、来曲唑、卡培他滨、Reloxafine、Droloxafine、或者六甲密胺。
33.选自以下的化合物 或其药学可接受的盐、溶剂合物或酯。
34.包括一种或多种权利要求33的化合物的药物组合物。
35.权利要求1的化合物，其为纯化形式。
全文摘要
本发明在多个实施方案中提供了一类新颖的作为诸如细胞周期蛋白依赖性激酶的抑制剂的吡唑并[1，5－a]三嗪类化合物，制备所述化合物的方法，包括一种或多种所述化合物的药物组合物，制备包括一种或多种所述化合物的药物制剂的方法，和使用所述化合物或药物组合物治疗、预防、抑制或改善与所述激酶有关的一种或多种疾病的方法。
文档编号A61P35/00GK1922185SQ200580005864
公开日2007年2月28日 申请日期2005年2月23日 优先权日2004年2月25日
发明者T·J·古奇, K·帕拉奇 申请人:先灵公司
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