用于治疗或预防rsv感染的苯并二氮杂的制作方法
专利名称：用于治疗或预防rsv感染的苯并二氮杂的制作方法
技术领域：
本发明涉及一系列苯并二氮杂衍生物，其对抗呼吸道合胞病毒(RSV)是有活性的。
RSV是所有年龄段患者呼吸系统疾病的首要原因。对成人而言，它倾向于导致轻微的感冒症状。在学龄儿童中，它能导致感冒和支气管咳嗽。在婴儿和刚学步的小孩中，它能导致细支气管炎(肺较小气道的炎症)或肺炎。其还被发现是学龄前儿童中耳感染(中耳炎)的常见病因。在生命的第一年中出现RSV感染已经牵连到儿童期间哮喘的发生。
当前抗RSV治疗包括使用RSV的单克隆抗体，该抗体被称为帕利珠单抗。这样使用帕利珠单抗是预防性而非治疗性的RSV治疗。然而，尽管该抗体时常是有效的，但是它是昂贵的。事实上，它的费用意味着它对于需要抗RSV治疗的许多人们而言是得不到的。因此存在对现有抗RSV治疗的有效替代的迫切需要。
现在已经令人惊奇地发现下文给出的特定的通式(I)苯并二氮杂衍生物对抗RSV是有活性的。
因此，在第一实施方案中，本发明提供了化合物在制备用于治疗或预防RSV感染的药物中的用途，所述化合物为(a)式(I)的苯并二氮杂衍生物或其N-氧化物或者(b)其可药用盐， 其中-R1表示C1-6烷基、芳基或杂芳基；-R2表示氢或C1-6烷基；-R3各自相同或不同，表示卤素、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、氨基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、硝基、氰基、-CO2R′、-CONR′R″、-NH-CO-R′、-S(O)R′、-S(O)2R′、-NH-S(O)2R′、-S(O)NR′R″或-S(O)2NR′R″，其中R′和R″各自相同或不同，表示氢或C1-6烷基；-n为0-3；-R4表示氢或C1-6烷基；-X表示-CO-、-CO-NR′-、-S(O)-或-S(O)2-，其中R′为氢或C1-C6烷基；且-R5表示芳基、杂芳基或杂环基，其C1-C6羟基烷基或-(C1-C4烷基)-X1-(C1-C4烷基)-X2-(C1-C4烷基)取代，其中X1表示-O-、-S-或-NR′-，其中R′表示H或C1-C4烷基，且X2表示-CO-、-SO-或-SO2-，或者R5表示-A1-Y-A2，其中-A1为芳基、杂芳基、碳环或杂环基团；-Y表示直键或C1-C4亚烷基、-SO2-、-CO-、-O-、-S-或-NR′-部分，其中R′为C1-C6烷基；且-A2为芳基、杂芳基、碳环或杂环基团。
本文所用的C1-6烷基基团或部分为含有1-6个碳原子的直链或支链的烷基基团或部分，例如C1-4烷基基团或部分。C1-4烷基基团和部分的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基。特此说明，当基团中存在两个烷基部分时，所述烷基部分可以相同或不同。
本文所用的羟基烷基通常为被一个或多个羟基取代的所述烷基。通常其被一个、两个或三个羟基取代。优选其被单个羟基取代。优选的羟基烷基为-CH2-OH。
本文所用的酰基为C2-7酰基，例如基团-CO-R，其中R为所述C1-6烷基。
本文所用的芳基通常为C6-10芳基，例如苯基或萘基。苯基是优选的。芳基可以为未取代的或在任意位置被取代。通常其带有0、1、2或3个取代基。
在芳基上的适宜取代基包括卤素、C1-6烷基、C2-7酰基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、硝基、氰基、氨甲酰基、单(C1-6烷基)氨甲酰基、二(C1-6烷基)氨甲酰基、氨基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、-CO2R′、-CONR′R″、-S(O)R′、-S(O)2R′、-S(O)NR′R″、-S(O)2NR′R″-NH-S(O)2R′或-NH-CO-R′，其中R′和R″各自相同或不同，表示氢或C1-6烷基。
在芳基上的优选取代基包括卤素、C1-6烷基、C2-7酰基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、氨基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、硝基、氰基、-CO2R′、-S(O)R′、-S(O)2R′和-S(O)2NR′R″，其中R′和R″各自相同或不同，表示氢或C1-4烷基。
特别优选的取代基包括氟、氯、溴、碘、氰基、C1-4烷基、C2-4酰基、羟基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4卤代烷基、C1-4卤代烷氧基、氨基、单(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基、硝基、-CO2R′、-S(O)2R′和-S(O)2NH2，其中R′表示C1-2烷基。最优选的取代基为氯、氟、氰基、C1-C4烷基和C1-C4卤代烷基取代基。
本文所用的芳基的称谓包括稠合环系，其中芳基与单环碳环、杂环或杂芳基稠合，或与被苯环稠合的单环碳环、杂环或杂芳基的稠合基团稠合。通常所述稠合环系为其中芳基与单环碳环、杂环或杂芳基稠合的系统。
优选该稠合环系为如下定义的那些其中芳基与单环杂环或杂芳基稠合，或与被苯环稠合的单环碳环稠合；特别是其中芳基与杂环基或杂芳基稠合的那些。该稠合环系的实例有如下定义的基团其中苯环与噻吩基或四氢呋喃基稠合形成苯并噻吩基或二氢苯并呋喃基。该稠环的其它实例有如下定义的那些其中苯环与二烷基、吡咯基或2，3-二氢茚-1-酮基团稠合形成苯并二烯基、吲哚基或9H-芴-9-酮基团。但是最优选的是，本文所用的芳基不与单环碳环、杂环或杂芳基或不与所述稠合基团稠合。
本文所用的碳环基团为非芳香饱和或不饱和的单环烃环，通常具有3-6个碳原子。优选其为具有3-6个碳原子的饱和烃环(即环烷基)。实例包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。优选环丙基、环戊基或环己基，最优选环丙基。环烷基可以为未取代的或在任意位置被取代。通常其带有0、1、2或3个取代基。
在碳环基团上的适宜取代基包括卤素、C1-6烷基、C2-7酰基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、硝基、氰基、氨甲酰基、单(C1-6烷基)氨甲酰基、二(C1-6烷基)氨甲酰基、氨基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、氧代、-CO2R′、-CONR′R″、-S(O)R′、-S(O)2R′、-S(O)NR′R″、-S(O)2NR′R″、-NH-S(O)2R′或-NH-CO-R′，其中R′和R″各自相同或不同，表示氢或C1-6烷基。
在碳环基团上的优选取代基包括卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、硝基、氰基和氧代。特别优选的取代基包括氟、氯、溴、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷基、硝基和氧代。最优选碳环基团为未取代的。
本文所用的杂环基团为非芳香的饱和或不饱和碳环，通常具有5-10个碳原子，其中一个或多个，例如1、2或3个碳原子被选自N、O和S的杂原子替换。饱和杂环基团是优选的。实例包括四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、二氧戊环基、噻唑烷基、四氢吡喃基、哌啶基、二烷基、哌嗪基、吗啉基、硫吗啉基和噻烷基。其它实例包括二硫戊烷基、唑烷基、四氢硫吡喃基和二噻烷基。哌嗪基、哌啶基、硫吗啉基、咪唑烷基和吗啉基是优选的。
本文所用的杂环基团的称谓包括其中杂环基团与苯基稠合的稠合环系。优选的该稠合环系为其中5-至6-元杂环基团与苯基稠合的那些。该稠合环系的实例为如下定义的那些其中1H-咪唑-2(3H)-酮基或咪唑烷-2-酮基与苯环或吡啶环稠合，形成例如1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮基或1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮基。然而最优选杂环基团为单环。
杂环基团可以为未取代的或在任意位置被取代。通常其带有0、1或2个取代基。
在杂环基团上的适宜取代基包括卤素、C1-6烷基、C2-7酰基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、硝基、氰基、氨甲酰基、单(C1-6烷基)氨甲酰基、二(C1-6烷基)氨甲酰基(carbomyl)、氨基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、氧代、-CO2R′、-CONR′R″、-S(O)R′、-S(O)2R′、-S(O)NR′R″、-S(O)2NR′R″、-NH-S(O)2R′或-NH-CO-R′，其中R′和R″各自相同或不同，表示氢或C1-6烷基。
在杂环基团上的优选取代基包括卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、硝基、氰基和氧代。特别优选的取代基包括氟、氯、溴、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷基、硝基和氧代。最优选杂环基团为未取代的或被一个或两个C1-2烷基或氧代基取代。取代的杂环基团的实例为S，S-二氧代硫吗啉代基。
本文所用的卤素通常为氯、氟、溴或碘。优选是氯、氟或溴。更优选是氯或氟。
本文所用的烷氧基通常为与氧原子连接的所述烷基。烷硫基通常为与硫基连接的所述烷基。卤代烷基或卤代烷氧基通常为被一个或多个所述卤素原子取代的所述烷基或烷氧基。通常其被1、2或3个所述卤素原子取代。优选的卤代烷基和卤代烷氧基包括全卤代烷基和全卤代烷氧基，例如-CX3和-OCX3，其中X为所述卤素原子，例如氯或氟。特别优选的卤代烷基为-CF3和-CCl3。特别优选的卤代烷氧基为-OCF3和-OCCl3。
本文所用的杂芳基通常为5-至10-元芳香环，例如5-或6-元环，含有至少一个、例如1、2或3个选自O、S和N的杂原子。实例包括吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、呋喃基、噻吩基、吡唑烷基、吡咯基、二唑基、异唑基、噻二唑基、噻唑基、咪唑基和吡唑基。其它实例包括唑基和异噻唑基。优选的杂芳基为吡啶基、噻吩基、唑基、异唑基、噻唑基、呋喃基和吡唑基。
本文所用的杂芳基的称谓包括其中杂芳基与苯基或单环杂环基团稠合的稠合环系。优选的该稠合环系为如下定义的那些其中5-至6-元杂芳基与苯基或5-至6-元杂环基团稠合。该稠合环系的实例有苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并唑基、喹啉基、喹唑啉基、异喹啉基和1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮部分。最优选所述稠合环系为1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮部分。
杂芳基可以为未取代的或在任意位置被取代。通常带有0、1、2或3个取代基。
在杂芳基上的适宜取代基包括卤素、C1-6烷基、C2-7酰基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、硝基、氰基、氨甲酰基、单(C1-6烷基)氨甲酰基、二(C1-6烷基)氨甲酰基、氨基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、-CO2R′、-CONR′R″、-S(O)R′、-S(O)2R′、-S(O)NR′R″、-S(O)2NR′R″、-NH-S(O)2R′或-NH-CO-R′，其中R′和R″各自相同或不同，表示氢或C1-6烷基。
在杂芳基上的优选取代基包括卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、硝基和氰基。特别优选的取代基包括氟、氯、溴、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷基和硝基。最优选的取代基包括氟、氯、溴、C1-2烷基和C1-2卤代烷基取代基。
当R1为芳基或杂芳基时，其通常为未取代的或被一个、两个或三个选自卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基或C1-6卤代烷氧基的取代基取代。优选其是未取代的或被一个或两个选自氟、氯、溴、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4卤代烷基或C1-4卤代烷氧基的取代基取代。更优选其为未取代的或被单个氟、氯、C1-2烷基、C1-2烷氧基、C1-2烷硫基、C1-2卤代烷基或C1-2卤代烷氧基取代基取代。
通常R1为C1-6烷基或芳基。优选R1为C1-2烷基或芳基。更优选R1为C1-2烷基或苯基。更优选R1为未取代的苯基。
通常R2为氢或C1-4烷基。优选R2为氢。
通常R3为卤素、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4卤代烷基、C1-4卤代烷氧基、氨基、单(C1-4烷基)氨基或二(C1-4烷基)氨基。优选R3为氟、氯、溴、C1-2烷基、C1-2烷氧基、C1-2烷硫基、C1-2卤代烷基、C1-2卤代烷氧基、氨基、单(C1-2烷基)氨基或二(C1-2烷基)氨基。更优选R3为甲基、三氟甲基、氟、氯或溴。最优选R3为甲基或氯。
通常n为0、1或2。优选的n为0或1。最优选n为0。
通常R4为氢或C1-4烷基。优选R4为氢或C1-2烷基。更优选R4为氢或甲基。最优选R4为氢。
通常X为-CO-、-S(O)2-或-CO-NR′-，其中R′表示氢或C1-C2烷基。优选X为-CO-或-CO-NR′-。
当R5为被C1-C6羟基烷基或-(C1-C4烷基)-X1-(C1-C4烷基)-X2-(C1-C4烷基)基团取代的杂环基或杂芳基时，杂环基或杂芳基通常为5-或6-元环。优选其为5-或6-元杂芳基，例如呋喃基。
通常C1-C6羟基烷基为-CH2-OH基团。通常X为-NR′-，其中R′为氢或C1-C2烷基。通常X2为-S(O)2-。
通常A1为芳基或杂芳基。优选A1为单环芳基或杂芳基、萘基或与被氧代基取代的单环杂环基团稠合的杂芳基。更优选A1为苯基、单环5-或6-元杂芳基或与被氧代基取代的单环5-至6-元杂环基团(例如氧代基取代的咪唑烷基团)稠合的5-至6-元杂芳基。最优选A1为苯基、吡啶基、呋喃基、噻唑基、唑基、异唑基、噻吩基或1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-(3H)-酮部分。
通常A1部分为未取代的或被1或2个选自卤素、氰基、硝基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基和C1-C4烷氧基的取代基取代。优选取代基选自卤素、氰基、C1-C2烷基、C1-C2卤代烷基和C1-C2烷氧基。
通常Y表示直键，C1-C2亚烷基、-SO2-或-O-。
通常A2为苯基、5-至6-元杂芳基、5-至6-元杂环基或C3-C6环烷基。优选A2为哌嗪基、吡啶基、吗啉基、硫吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、吡嗪基、环丙基或苯基。
通常，当A2为杂环基团时，它通过N原子与Y部分连接。
通常A2部分为未取代的或被一个或两个取代基取代，其中当A2为杂芳基或芳基时，所述取代基选自C1-C4烷基和卤素，当A2为碳环或杂环基时，所述取代基选自C1-C4烷基、卤素和氧代基。
最优选A2为哌嗪基、吡啶基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、吡嗪基、环丙基、苯基或S，S-二氧代硫吗啉代基，其中基团为未取代的或被C1-C2烷基取代。
本发明的优选化合物为如下定义的那些，其中-R1为C1-6烷基或芳基；
-R2为氢或C1-4烷基；-R3为卤素、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4卤代烷基、C1-4卤代烷氧基、氨基、单(C1-4烷基)氨基或二(C1-4烷基)氨基，或优选R3为氟、氯、溴、C1-2烷基、C1-2烷氧基、C1-2烷硫基、C1-2卤代烷基、C1-2卤代烷氧基、氨基、单(C1-2烷基)氨基或二(C1-2烷基)氨基；-n为0、1或2；-R4为氢或C1-4烷基；-X为-CO-、-CO-NR′或-S(O)2-，其中R′为氢或C1-C2烷基；且-R5为5-或6-元杂环基或杂芳基环，其被C1-C6羟基烷基或-(C1-C4烷基)-X1-(C1-C4烷基)-X2-(C1-C4烷基)取代，其中X1和X2如上定义，或者R5表示-A1-Y-A2，其中-A1为芳基或杂芳基；-Y为直键、C1-C2亚烷基、-SO2-或-O-；且-A2为芳基、杂芳基、杂环基或碳环基；在R1基团中的芳基部分为未取代的或被1、2或3个选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基的取代基取代；A1部分为未取代的或被1或2个选自卤素、氰基、硝基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基和C1-C4烷氧基的取代基取代；且A2部分为未取代的或被一个或两个取代基取代，其中当A2为杂芳基或芳基时，所述取代基选自C1-C4烷基和卤素，当A2为碳环或杂环基团时，所述取代基选自C1-C4烷基、卤素和氧代。
本发明的其它优选化合物为如下定义的那些，其中-R1为C1-2烷基或苯基；-R2为氢或C1-4烷基；-R3为甲基、三氟甲基、氟、氯或溴；-n为0或1；
-R4为氢或C1-2烷基；-X为-CO-、-CO-NR′-或-S(O)2，其中R′为氢或C1-C2烷基；且-R5为5-或6-元杂环基或杂芳基，其被C1-C6羟基烷基或-(C1-C4烷基)-NR′-(C1-C4烷基)-SO2-(C1-C4烷基)取代，其中R′为氢或C1-C2烷基，或者R5表示-A1-Y-A2，其中-A1为苯基、单环5-或6-元杂芳基或与被氧代基取代的单环5-至6-元杂环基团稠合的5-或6-元杂芳基；-Y表示直键、C1-C2亚烷基、-SO2-或-O-；且-A2为苯基、5-至6-元杂芳基、5-至6-元杂环基或C3-C6环烷基，在R1基团中的苯基部分为未取代的或被一个或两个选自氟、氯、溴、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4卤代烷基或C1-4卤代烷氧基的取代基取代；A1部分为未取代的或被1或2个选自卤素、氰基、硝基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基和C1-C4烷氧基的取代基取代；且A2部分为未取代的或被1或2个取代基取代，其中当A2为杂环基或环烷基时，所述取代基选自C1-C4烷基、卤素和氧代基，当A2为苯基或杂芳基时，所述取代基选自C1-C4烷基和卤素。
本发明特别优选的化合物为式(Ia)化合物及其可药用盐， 其中-X为-CO-或-CO-NH-；且-R5为5-至6-元杂芳基，例如呋喃基，其被-CH2-OH或-(C1-C4烷基)-N(CH3)-(C1-C4烷基)-SO2-(C1-C4烷基)取代，或者R5表示-A1-Y-A2，其中
-A1为苯基、吡啶基、呋喃基、噻唑基、唑基、异唑基、噻吩基或1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-(3H)-酮部分，其为未取代的或被1或2个选自卤素、氰基、C1-C2烷基、C1-C2卤代烷基和C1-C2烷氧基的取代基取代；-Y为直键、C1-C2亚烷基、-SO2-或-O-；且-A2为哌嗪基、吡啶基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、吡嗪基、环丙基、苯基或S，S-二氧代硫吗啉代基，其为未取代的或被C1-C2烷基取代。
在式(Ia)化合物中，通常n为0且R4为氢。
含有一个或多个手性中心的式(I)化合物可以以对映异构或非对映异构纯的形式使用，或以异构体混合物的形式使用。特此说明，本文所述的化学结构意欲囊括所示化合物的所有立体异构体，包括外消旋和非外消旋混合物以及纯的对映异构体和/或非对映异构体。
本发明的优选化合物为旋光活性异构体。因此，例如仅仅含有一个手性中心的优选的式(I)化合物包括基本上纯的形式的R对映异构体、基本上纯的形式的S对映异构体和含有过量R对映异构体或过量S对映异构体的混合物。特此说明，如果需要的话，式(I)化合物可以以溶剂化物形式使用。
本文所用的可药用盐为与可药用酸或碱形成的盐。可药用酸包括无机酸和有机酸两者，无机酸例如有盐酸、硫酸、磷酸、焦磷酸、氢溴酸或硝酸，有机酸例如有柠檬酸、富马酸、马来酸、苹果酸、抗坏血酸、丁二酸、酒石酸、苯甲酸、乙酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸或对甲苯磺酸。可药用碱包括碱金属(例如钠或钾)和碱土金属(例如钙或镁)氢氧化物以及有机碱如烷基胺、芳烷基胺或杂环胺。
本发明特别优选的化合物包括6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺；3，4，5，6-四氢-2H-[1，2′]联吡啶基-5′-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-苯甲酰胺；
(S)-2-氯-4-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-氟-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-苯甲酰胺；(S)-5-氯-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-5-氟-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-吡咯烷-1-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-哌啶-1-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-二甲基氨基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-4-氟-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-哌啶-1-基-苯甲酰胺；(S)-4-氟-2-吗啉代-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-4-氰基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-苯甲酰胺；(S)-4-氰基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-哌啶-1-基-苯甲酰胺；(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-4-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-哌啶-1-基-4-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-4-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-5-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-3-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-6-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-氯-6-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-3-环丙基-2-氧代-2，3-二氢-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-3-(4-甲基-哌嗪-1-磺酰基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-3-(哌啶-1-磺酰基)-苯甲酰胺；(S)-3-(吗啉-4-磺酰基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；
(S)-5-羟甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基甲基)-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-氯-4-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-氯-5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-{[(2-甲磺酰基乙基)-甲基-氨基]-甲基}-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-酰胺；(S)-2-吡啶-3-基-噻唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-吡啶-4-基-噻唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-4-甲基-2-吡嗪-2-基-噻唑-5-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-吗啉-4-基甲基-呋喃-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-3-吗啉-4-基甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-吗啉-4-基甲基-异唑-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-3-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-吡啶-2-基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-甲基-4-(吗啉-4-磺酰基)-呋喃-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-6-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺；(S)-3-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-苯基-唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；1-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-3-(4-苯氧基-苯基)-脲；上述任意化合物的N-氧化物；及其可药用盐。
式(I)化合物可以如下制备使乙醛酸(HCO-CO2H)、苯并三唑和适当的氨基甲酸苄酯在甲苯中在Dean-Stark条件下回流反应，得到式(II)的关键的被保护的氨基酸， 然后使如此所得的式(II)氨基酸与适宜的氯化剂如草酰氯反应，随后与式(III)的2-氨基二苯甲酮反应， 得到中间体式(IV)酰胺，
其不需要被表征。
然后式(IV)化合物进行氨解，随后在含有乙酸铵的乙酸中闭环，得到式(V)的被保护的苯并二氮杂， 然后使用在乙酸中的溴化氢将式(V)化合物脱保护，得到式(VI)的脱保护的胺， 其中X为-CO-或-CO-NR′的式(I)化合物可以如下制备使如上定义的式(VI)化合物与酸酐在适宜溶剂、优选吡啶中在环境温度下反应，或与酰氯在适宜溶剂中和在碱的存在下、优选在THF中在环境温度和在三乙胺存在下反应。或者，化合物可如下制备使式(VI)化合物与酸在适宜的溶剂中在碱和偶联试剂的存在下、优选在THF中在环境温度和在三乙胺和O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基脲输六氟磷酸盐(HBTU)存在下反应。
如果所用酰氯为氨基碳酰氯，则式(I)化合物为脲。当X部分中的R′为氢时，该化合物还可以通过式(VI)化合物与异氰酸酯的反应制备。该反应优选在THF中和在环境温度下完成。或者，异氰酸酯可以在碱、通常为三乙胺的存在下在THF中由相应的胺和光气原位制备。当然，其中R′不为氢的化合物可以通过其中R′为氢的相应化合物与适当的烷基化剂反应来制备，所述的烷基化剂例如为L-(C1-C6烷基)，其中L为离去基如氯。
其中X为-S(O)2-的式(I)化合物可以通过式(VI)化合物与适宜的磺酰氯反应来制备。类似地，其中X为-S(O)-的式(I)化合物可以通过式(VI)化合物与适宜的亚磺酰氯反应来制备。
在苯并二氮杂骨架的制备中，当可能时，可以使用商购获得的式(III)的氨基二苯甲酮化合物。不能商购获得的式(III)化合物可以通过已知的方法制备，例如通过式(VII)的Weinreb类型的酰胺与基团R1-Li或格氏试剂如R1-MgBr反应来制备。优选该反应在THF中于-100℃完成。
式(VII)化合物为已知的化合物或可以通过与已知方法类似的方法制备。例如它们可以由式(VIII)的靛红酸酐与N，O-二甲基羟胺在标准反应条件反应来制备。
式(II)、(III)、(VII)和(VIH)的原料是已知的化合物，或可以通过与已知方法类似的方法制备。
如此得到的式(I)化合物的其它合成操作可以通过常规方法完成以获得其它式(I)化合物。式(I)的苯并二氮杂可以通过用适当的酸或碱处理被成盐化。
尽管所要求化合物的所述路线提供了足以在实验室规模制备的合成，但是仍探索了可选的潜在用于生产的路线。两者均使用相同的原料(2-氨基-二苯甲酮)(1)，但是在可选的路线中，苯并二氮杂环系通过首先与溴乙酰溴(或等同试剂)反应、随后用氨闭环来形成。这些反应在适宜的溶剂例如二氯甲烷中和在适宜的温度(其范围可以为-20至150℃)下完成。为了保护NH官能团，在该阶段使未被取代的苯并二氮杂与碱和烷基化剂反应。例如加入在DMF中的氢化钠，随后加入4-甲氧基-苄基氯，得到下文所示的中间体(2)。
该物质与碱(例如叔丁醇钾)在适宜的溶剂(例如THF或DMF)中进一步反应，随后用亚硝酸异戊酯(或可选的类似试剂)淬灭，提供了肟中间体(3)，其可以通过某些方法被转化为外消旋的伯胺，所述方法包括使用氢和适宜的催化剂。然后该胺进行动态动力学拆分方法，通过该方法外消旋的胺在适宜的旋光活性的酸和适宜的醛存在下以很好的产率和异常高的对映异构体过量沉淀出所需的(S)-胺(4)的盐。适于该转化的酸可以为例如樟脑磺酸、Boc-苯基丙氨酸等，适宜的醛可以为苯甲醛例如3，5-二氯水杨醛。
然后，如此形成的旋光活性的胺可以被转化为所需的衍生物，例如酰胺或脲。酰胺的形成可以使用适宜的羧酸和偶联剂或碳酰氯或其它适宜的试剂完成，脲的制备使用适宜的异氰酸酯进行，或者与光气反应并随后与适宜的胺反应。
然后，如此形成的这些衍生物可以被除去保护基。这个过程可以在路易斯酸例如氯化铝、三氟化硼、四氯化钛等存在下完成。这些反应在适宜的惰性溶剂例如二氯甲烷中完成。反应温度可以为-20至150℃，但是通常在室温下或更低温度下完成。
如上所述，本发明的化合物对抗RSV是有活性的。因此，本发明提供了治疗患有或易患有RSV感染的患者的方法，所述方法包含对所述患者施用有效量的式(I)化合物或其可药用盐。
RSV在两岁以下的儿童，在受累于哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)或免疫缺陷的成人以及在老年人中是流行的。其在患有慢性肺部疾病的儿童中有特别严重的危险性。因此，所述组合物或药物通常用于治疗如下患者两岁以下的儿童，受累于哮喘、COPD或免疫缺陷的成人，老年人，或者长期需要护理设施的人。通常所述儿童患有慢性肺部疾病。
而且，抗RSV预防推荐用于在妊娠32周或更早时出生的婴儿至他们达到6月龄，用于老年人、受累于免疫缺陷的人以及那些长期需要护理设施的人。因此，所述组合物或药物通常用于在妊娠32周或更早出生的6岁以下的幼儿、老年人、受累于免疫缺陷的人以及那些长期需要护理设施的人，以预防RSV感染。
已经表明RSV感染伴随有炎性反应(Noah等人，Clinical Immunology2000，第97卷，43-49)。本发明还涉及式(I)化合物或其可药用盐与抗炎化合物的组合以及该组合在治疗RSV中的用途。通常，所述抗炎化合物为类固醇类如布地奈德或氟替卡松、非类固醇类如白三烯拮抗剂、磷酸二酯酶4抑制剂或TNFα抑制剂或者白介素8或白介素9抑制剂。
因此，在一项实施方案中，式(I)化合物或其可药用盐与类固醇类抗炎化合物例如布地奈德或氟替卡松组合。在优选的实施方案中，以低剂量施用类固醇类以使免疫抑制作用最小化。在另一项实施方案中，式(I)化合物或其可药用盐与非类固醇类抗炎化合物组合，所述抗炎化合物例如是白三烯拮抗剂如Singulair(Merck)或Accolate(Astra Zeneca)、磷酸二酯酶4抑制剂如罗氟司特(Altana)、TNFα抑制剂如Enbrel(Amgen)、Remicade(Centocor)、Humira(Abbott)或CDP870(Celltech)或NSAIDS。在其它实施方案中，式(I)化合物与白介素8或白介素9抑制剂组合。因此，本发明还涉及含有同时、分别或依次使用来治疗RSV的式(I)化合物或其可药用盐以及抗炎化合物的产品。
本发明还涉及式(I)化合物或其可药用盐与抗流行性感冒化合物组合，以及该组合在治疗并发的RSV和流行性感冒感染中的用途。因此，本发明还涉及含有同时、分别或依次使用来治疗并发的RSV和流行性感冒感染的式(I)化合物或其可药用盐以及抗流行性感冒化合物的产品。
本发明其它令人惊奇的发现是，本发明的化合物对抗人肺间质病毒(human metapneumovirus)、麻疹、副流感病毒、副粘病毒和流行性腮腺炎是有活性的。因此，本发明提供了式(I)化合物或其可药用盐在制备药物中的用途，所述药物用于治疗人肺间质病毒、麻疹、副流感病毒、副粘病毒和流行性腮腺炎。
本发明的化合物可以以各种剂型施用。因此，它们可以经口服施用，例如为片剂、糖锭剂、锭剂、水性或油性混悬剂、可分散的散剂或颗粒剂。本发明的化合物还可以经胃肠道外施用，可以经皮下、静脉内、肌内、胸腔内、经皮或通过输注技术施用。化合物还可以以栓剂施用。
在优选的实施方案中，本发明通过鼻内或支气管内施用。本发明还提供了含有药物的吸入器或喷雾器(nebuliser)，所述药物包含(a)如上定义的式(I)的苯并二氮杂衍生物或其可药用盐和(b)可药用载体或稀释剂。
本发明还提供了含有该苯并二氮杂衍生物或其可药用盐以及可药用载体或稀释剂的药物组合物。
所述药物组合物通常含有至多85wt％的本发明化合物。更通常而言，它含有至多50wt％的本发明化合物。优选的药物组合物为灭菌的和无热原的。而且，本发明提供的药物组合物通常含有基本上为纯的旋光异构体的本发明化合物。
本发明的化合物通常与可药用载体或稀释剂配制施用。例如固体口服形式可以含有活性化合物和稀释剂，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、纤维素、玉米淀粉或马铃薯淀粉；润滑剂，例如二氧化硅、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁或硬脂酸钙和/或聚乙二醇；粘合剂，例如淀粉、阿拉伯胶、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮；崩解剂，例如淀粉、海藻酸、海藻酸盐或淀粉乙醇酸钠；泡腾混合物；染剂；甜味剂；润湿剂，例如卵磷脂、聚山梨醇酯、十二烷基硫酸盐；以及通常用于药物制剂的无毒和无药理活性的物质。该药物制剂可以以已知的方式制备，例如通过混合、制粒、压片、包糖衣或包薄膜衣方法来制备。
用于口服施用的液体分散剂可以为糖浆、乳剂和混悬剂。糖浆可以含有例如蔗糖或蔗糖与甘油和/或甘露醇和/或山梨醇作为载体。
混悬剂和乳剂可以含有例如天然胶状物、琼脂、海藻酸钠、果胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯醇作为载体。用于肌内注射的混悬剂或溶液可以含有活性化合物和可药用载体如灭菌水、橄榄油、油酸乙酯、二元醇例如丙二醇，以及如果需要含有适宜量的盐酸利多卡因。
用于注射或输注的溶液可以含有例如灭菌水作为载体，或优选它们可以是灭菌的水性等张盐水溶液的形式。
将治疗有效量的本发明化合物施用于患者。根据特定化合物的活性，被治疗对象的年龄、体重和状况，疾病的类型和严重性以及施用频率和途径，典型的剂量为约0.001至50mg/kg体重。优选日剂量水平为5mg至2g。
某些式(I)的苯并二氮杂衍生物本身是新的。本发明包括这些新的化合物及其可药用盐。因此，本发明还提供了式(Ib)化合物或其可药用盐，
其中R1、R3、n、R4、X和R5如上定义。
通常在式(Ib)中，R1为未取代的苯基。
通常在式(Ib)中，当A1为杂芳基时，它不是5-甲基-异唑基部分。
通常在式(Ib)中，A1为芳基或杂芳基部分。
通常在式(Ib)中，X为-CO-或-CO-NR′-，其中R′如上定义，条件是当X为-CO-NR′-时，部分-A1-Y-A2为-苯基-O-苯基。
通常在式(Ib)中，A2不是其中碳原子之一被N原子替换的4-至10-元的饱和环烷基环。具体而言，A2通常不是取代或未取代的下式部分 其中n和m相同或不同，且各自表示1-4的整数。
通常在式(Ib)中，A2为哌嗪基、吡啶基、吡咯烷基、吡嗪基、环丙基、苯基或S，S-二氧代硫吗啉代基，其为未取代的或被C1-C2烷基取代。
本发明还涉及用于在治疗人或动物身体的方法中使用的如上定义的新化合物或其可药用盐。本发明还涉及包含如上定义的新化合物以及可药用稀释剂或载体的药物组合物。优选所述药物组合物包含如上定义的新化合物的可药用盐。可药用盐如上文定义。本发明的新化合物通常以如上定义的方式施用，化合物通常以如上定义的方式施用。
优选药物组合物包含本发明的新化合物的旋光活性异构体。因此，例如仅仅含有一个手性中心的优选的本发明新化合物包括基本上纯的形式的R对映异构体、基本上纯的形式的S对映异构体和含有过量R对映异构体或过量S对映异构体的对映异构体混合物。特别优选药物含有的本发明化合物为基本上纯的旋光异构体。特此说明，如果需要的话，本发明的新化合物可以以溶剂化物形式使用。
下列实施例举例说明本发明。但是它们不以任何方式限制本发明。在此方面，以下理解是重要的用于实施例部分的特定检验仅仅设计用于提供抗RSV活性的显示。存在许多可利用的检验确定给定化合物的抗RSV活性，因此在任何特定检验中的阴性结果是不起决定作用的。
实施例中间体12-氯-4-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸将4-氨基-2-氯苯甲酸(172mg)和乙烯磺酰基乙烯(0.15ml)在含有碳酸钠(212mg)的水(3ml)中的混合物加热至100℃持续18小时。使混合物冷却，用2N HCl酸化。收集灰白色沉淀并干燥(263mg)。
LC/MS RT＝4.09分钟，ES-288，290中间体22-氯-5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸将5-氨基-2-氯苯甲酸(172mg)和乙烯磺酰基乙烯(0.15ml)在水(3ml)中的混合物加热至100℃持续18小时。使混合物冷却，用二氯甲烷萃取。蒸发经干燥的萃取液，得到浅棕色固体(265mg)。
LC/MS RT＝4.13分钟，ES-288，290中间体32-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-烟酸除使用2-氨基-烟酸(138mg)之外，按照对中间体1的描述制备该物质。分离标题化合物，为灰白色固体(93mg)。
中间体42-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-3-甲基-苯甲酸除使用2-氨基-3-甲基-苯甲酸(302mg)之外，按照对中间体2的描述制备该物质。分离标题化合物，为浅棕色固体(486mg)。
中间体52-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-甲基-苯甲酸除使用2-氨基-4-甲基-苯甲酸(302mg)之外，按照对中间体2的描述制备该物质。分离标题化合物，为棕色固体(430mg)。
中间体62-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-6-甲基-苯甲酸除使用2-氨基-6-甲基-苯甲酸(302mg)之外，按照对中间体2的描述制备该物质。分离标题化合物，为棕色固体(490mg)。
中间体73-(4-甲基-1-磺酰基)-苯甲酸将3-氯磺酰基-苯甲酸(89mg)、4-二甲基氨基-吡啶(催化量)和N-甲基哌嗪(0.045ml)在二氯甲烷(10ml)中的溶液加热至回流持续2小时。然后蒸发溶剂，粗品未经纯化或表征用于下一合成步骤。
中间体83-哌啶-1-磺酰基-苯甲酸除使用哌啶作为亲核试剂之外，按照对中间体7的描述制备该物质。与中间体7一样，使用该物质的粗品。
中间体93-(吗啉-4-磺酰基)-苯甲酸除使用吗啉作为亲核试剂之外，按照对中间体7的描述制备该物质。与中间体7一样，使用该物质的粗品。
中间体102-氯-6-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸除使用2-氨基-6-氯-苯甲酸(343mg)之外，按照对中间体2的描述制备该物质。分离标题化合物，为浅黄色固体(405mg)。
中间体115-氯-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸除使用2-氨基-5-氯-苯甲酸(200mg)之外，按照对中间体2的描述制备该物质。分离标题化合物，为白色固体(233mg)。
1H NMR(DMSO，δ)3.25(brs，4H)3.47(brs，4H)7.31(d，1H)7.54(dd，1H)7.71(d，1H)。
LC/MS RT＝4.66分钟 实测值ES+＝290，292
中间体122-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-5-氟-苯甲酸除使用2-氨基-5-氟-苯甲酸(200mg)之外，按照对中间体2的描述制备该物质。分离标题化合物，为白色固体(310mg)。
1H NMR(DMSO，δ)3.28(m，4H)3.42(m，4H)7.33-7.56(m，3H)。
LC/MSRT＝4.28分钟 实测值ES-＝272中间体134-氟-2-硫吗啉-4-基-苯甲酸将2，4-二氟-苯甲酸(0.5g)、硫吗啉(0.33ml)和三乙胺(0.88ml)在乙腈(2ml)中的混合物在微波反应器中加热至200℃持续20分钟。残余物在水和二氯甲烷之间分配。蒸发经干燥的有机层，然后在硅胶SPE短柱(cartridge)上纯化。用二氯甲烷、随后用二氯甲烷∶乙醇∶0.880氨＝800∶8∶1至200∶8∶1梯度洗脱，得到标题物质，为白色固体(292mg)。
1H NMR(DMSO，δ)2.81(m，4H)3.27(m，4H)7.11(m，1H)7.40(dd，1H)7.95(m，1H)。
中间体142-(1，1-二氧代-4-氧基-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-氟-苯甲酸将在甲醇(5ml)和水(2.5ml)中的中间体11(262mg)和过一硫酸钾(1.34g)于室温搅拌6小时。过滤收集形成的沉淀，然后溶解在碳酸氢钠水溶液中。用1M HCl酸化至pH3，形成白色沉淀成，将其收集并干燥(194mg)。
1H NMR(DMSO，δ)3.2-3.48(brm，4H)3.59(t，2H)3.89(t，2H)6.96(m，1H)7.30(dd，1H)7.85(m，1H)。
中间体156-氯-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺将外消旋的3-氨基-5-苯基-1，3-二氢-苯并[e][1，4]二氮杂-2-酮(1g)、O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸盐(1.51g)、三乙胺(0.83ml)和6-氯-烟酸(0.63g)在干燥的DMF(20ml)中的混合物于室温搅拌1.5小时。然后加入水(200ml)，剧烈搅拌混合物10分钟。过滤收集无色沉淀并干燥(1.1g)。
1H NMR(DMSO，δ)5.50(d，1H)7.28-7.71(m，10H)8.42(dd，1H)9.01(d，1H)9.99(d，1H)10.95(s，1H)。
LC/MS RT＝4.96分钟，ES+391，393中间体16硫吗啉-1，1-二氧化物将9.98g硫吗啉和14.8g三氟甲磺酸酐一起在DCM中于室温搅拌2小时。然后将反应物在1M K2CO3(水溶液)和DCM之间分配。分离有机层，穿过疏水玻璃料(frit)干燥，然后真空浓缩。将13.82g所得油与85.2g过硫酸氢钾制剂在50mL甲醇和50mL水中于室温搅拌18小时。然后过滤反应物，用甲醇洗涤，浓缩滤液。然后将其在水和EtOAc之间分配，水层用EtOAc洗涤3次。然后干燥(MgSO4)所合并的有机萃取液，浓缩得到白色固体。然后将其在室温下与在80mL甲醇中的40g K2CO3一起搅拌18小时。然后在真空下除去甲醇，将残余物在DCM和饱和K2CO3(水溶液)之间分配。将所合并的有机萃取液穿过疏水玻璃料并真空浓缩，得到标题化合物，3.51g。
1H NMR(CDCl3，δ)1.54(s，1H)，2.93-2.97(m，4H)，3.24-3.28(m，4H)。中间体175-{[(2-甲磺酰基乙基)-甲基-氨基]-甲基}-呋喃-2-甲酸乙酯在氮气氛下，将0.5g 5-氯甲基-呋喃-2-甲酸乙酯和20mL 2M甲胺的THF溶液于室温搅拌5天。然后浓缩溶液，通过SPE纯化。将所得油与在3mL乙腈中的0.2mL甲磺酰基乙烯一起于200℃微波中加热1小时。浓缩溶液，通过色谱法纯化，得到标题化合物，为无色油。
LC/MS RT＝3.55分钟，实测值ES+＝2901H NMR(CDCl3，δ)1.29(t，3H)，2.25(s，3H)，2.92-2.88(m，2H)，2.99(s，3H)，3.06-2.99(t，2H)，3.6(s，2H)，4.26(q，2H)，6.28(d，1H)，7.04(d，1H)。
中间体185-二甲基氨基甲基-呋喃-2-甲酸在氮气氛和在室温下，经30分钟将0.16mL 2M二甲胺溶液加入到搅拌的19.2mg氢化钠在2mL DMF中的混悬液中。然后经30分钟滴加5-氯甲基-呋喃-2-甲酸乙酯在2mL DMF中的溶液。然后将反应物搅拌2天。然后在真空下除去溶剂，加入5mL EtOH和0.35ml 2M NaOH，在80℃搅拌40分钟。当返回时，反应物被酸化低于pH 5.0并真空除去溶剂，得到欲被水解的标题化合物，然后在下一阶段使用粗品以类似方式制备中间体19-23，未经表征用于下一合成步骤。
中间体195-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-甲酸中间体205-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基甲基)-呋喃-2-甲酸中间体215-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸中间体225-(哌啶-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸中间体235-(吡咯烷-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸中间体243-环丙基-1，3-二氢[4，5-b]吡啶-2-酮将2-氯-3-硝基-吡啶(2g)、环丙胺(1.13ml)和碳酸钾(3.48g)在乙腈(30ml)中的混合物于室温搅拌18小时。然后将混合物在水和乙酸乙酯之间分配。蒸发经干燥的萃取液，得到亮黄色固体(2.1g)。然后在乙醇(150ml)中在披钯炭催化剂(10％，100mg)上在大气压下氢化该物质。当氢气吸收已经停止时，通过硅藻土过滤混合物，蒸发得到黑色胶状物(1.7g)。然后将该物质溶解在干燥的THF(40ml)中，用羰基二咪唑(2.2g)在回流下处理2.5小时。然后将混合物在水和乙酸乙酯之间分配。蒸发经干燥的有机萃取液，得到黑色胶状物，从乙酸乙酯/石油醚中结晶，得到无色固体(1.2g)。
1H NMR(DMSO，δ)0.97-1.04(m，4H)2.92(m，1H)6.97(dd，1H)7.22(dd，1H)7.92(dd，1H)10.95(brs，1H)中间体252-吗啉-4-基甲基-呋喃-3-甲酸甲酯将2-氯甲基-呋喃-3-甲酸甲酯(100mg)和吗啉(0.08ml)在乙腈(4ml)中的混合物于室温搅拌2小时。然后将混合物在二氯甲烷和碳酸氢钠水溶液之间分配。蒸发经干燥的有机层，得到黄色油(75mg)。
1H NMR(CDCl3，δ)2.57(m，4H)3.74(m，4H)3.86(s，3H)3.97(s，2H)6.70(d，1H)7.38(d，1H)中间体263-吗啉-4-基甲基-苯甲酸甲酯按照中间体25中所述制备该物质。产物为无色的油(210mg)。
1H NMR(CDCl3，δ)2.43(m，4H)3.53(s，2H)3.70(m，4H)3.91(s，3H)7.39(t，1H)7.42(dd，1H)7.93(dt，1H)7.99(brs，1H)中间体275-吗啉-4-基甲基-异唑-3-甲酸甲酯将在干燥氯仿(4ml)中的5-甲基-异唑-3-甲酸甲酯(200mg)、N-溴代琥珀酰亚胺(252mg)和过氧苯甲酰(30mg)搅拌并加热至85℃持续5小时。将溶液冷却至室温，用吗啉(0.27ml)处理。继续搅拌20小时，然后将混合物在水和二氯甲烷之间分配。蒸发经干燥的有机萃取液，残余物用硅胶SPE短柱纯化。用二氯甲烷、随后用二氯甲烷∶乙醇∶0.880氨＝200∶8∶1洗脱，得到无色的油(50mg)。
1H NMR(CDCl3，δ)2.46(m，4H)3.64(m，4H)3.67(s，2H)3.90(s，3H)6.55(s，1H)中间体28-30以类似于中间体25的方法制备中间体283-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-甲酸甲酯分离出该化合物，为黄色油(189mg)。
1H NMR(CDCl3，δ)2.45(m，4H)3.65(m，4H)3.71(s，2H)3.85(s，3H)6.56(d，1H)7.45(d，1H)中间体293-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸甲酯分离出该化合物，为黄色油(197mg)。
1H NMR(CDCl3，δ)2.50(m，4H)3.69(s，2H)3.72(m，4H)3.86(s，3H)6.90(d，1H)7.64(d，1H)中间体305-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸甲酯分离出该化合物，为黄色油(214mg)。
1H NMR(CDCl3，δ)2.44(m，4H)3.64(m，4H)3.79(s，3H)3.84(s，2H)7.15(d，1H)7.36(d，1H)在合成序列的最终偶联步骤使用之前，使中间体25-30水解为相应的羧酸。
中间体314-氟-2-吗啉-4-基-苯甲酸将在乙腈(0.5ml)中的2，4-二氟-苯甲酸(50mg)和吗啉(0.03ml)在微波中在200℃加热15分钟。蒸发溶剂，剩下黑色胶状物，未经纯化用于下一步骤。
中间体324-氟-2-哌啶-1-基-苯甲酸以类似于中间体31中的方法制备。
除使用2-氟-4-三氟甲基-苯甲酸之外，中间体33-5以类似于中间体31中的方法制备。
中间体332-吡咯烷-1-基-4-三氟甲基-苯甲酸中间体342-哌啶-1-基-4-三氟甲基-苯甲酸中间体352-吗啉-4-基-4-三氟甲基-苯甲酸除使用2-氟-5-三氟甲基-苯甲酸之外，中间体36和37以类似于中间体31中的方法制备。
中间体362-吡咯烷-1-基-5-三氟甲基-苯甲酸中间体37
2-吗啉-4-基-5-三氟甲基-苯甲酸除使用4-氰基-2-氟-苯甲酸之外，中间体38和39以类似于中间体31中的方法制备。
中间体384-氰基-2-吡咯烷-1-基-苯甲酸中间体394-氰基-2-哌啶-1-基-苯甲酸实施例1.
6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺将中间体15(50mg)和N-甲基哌嗪(0.022mL)在含有三乙胺(0.027mL)的乙腈(1mL)中在200℃微波中加热10分钟。然后将混合物在水和二氯甲烷之间分配。蒸发经干燥的有机层，残余物在硅键SPE短柱上纯化。用含5-10％甲醇的二氯甲烷梯度洗脱，得到无色固体(10mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.28(s，3H)2.45(m，4H)3.68(m，4H)5.56(d，1H)6.93(d，1H)7.32-7.72(m，10H)8.20(dd，1H)8.82(d，1H)9.42(d，1H)10.94(s，1H)RT＝3.94分钟，ES+455实施例23，4，5，6-四氢-2H-[1，2′]联吡啶基-5′-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用哌啶作为亲核试剂之外，该物质按照实施例1中所述制备。该产物为无色固体(15mg)。
1H NMR(DMSO，d)1.54-1.63(brm，6H)3.65(m，4H)5.48(d，1H)6.86(d，1H)7.25-7.65(m，10H)8.11(dd，1H)8.75(d，1H)9.32(d，1H)RT＝4.54分钟，ES+440
实施例3(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-苯甲酰胺将(S)-3-氨基-5-苯基-1，3-二氢-苯并[e][1，4]二氮杂-2-酮(100mg)、O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸盐(150mg)、2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸(102mg)和三乙胺(0.083ml)在干燥的DMF(1ml)中于室温搅拌1小时。然后加入水(10ml)，继续搅拌10分钟。过滤收集无色沉淀，然后在二氯甲烷和水之间分配。蒸发经干燥的有机相，残余物在硅胶SPE短柱上纯化。用乙酸乙酯∶石油醚(petrol)1∶1洗脱，得到标题化合物，为无色固体(140mg)。
1H NMR(DMSO，δ)3.49(brs，8H)5.48(d，1H)7.31-7.95(m，13H)10.86(d，1H)11.18(s，1H)实施例4(S)-2-氯-4-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用2-氯-4-吗啉-4-基-苯甲酸(86mg)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(112mg)。
1H NMR(DMSO，δ)3.21(m，4H)3.70(t，4H)5.36(d，1H)6.90-6.97(m，2H)7.21-7.66(m，10H)9.21(d，1H)10.86(s，1H)实施例5(S)-2-(1，1-二氧代-4-氧基-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-氟-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-苯甲酰胺除使用2-(1，1-二氧代-4-氧基-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸(中间体14，30mg)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(29mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.32-3.98(m，8H)5.34(d，1H)6.99(dt，1H)7.16-7.65(m，11H)9.51(d，1H)10.98(s，1H)RT＝5.09分钟，ES+523
实施例6(S)-5-氯-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用5-氯-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸(中间体11，58mg)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(70mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.54(s，8H)5.53(d，1H)7.37-7.75(m，11H)7.90(d，1H)10.84(d，1H)11.24(s，1H)。
RT＝5.38分钟，ES+523，525实施例7(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-5-氟-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用5-氟-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸(中间体12，54mg)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(70mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.49(m，8H)5.47(d，1H)7.34-7.69(m，12H)11.12(d，1H)11.20(s，1H)RT＝5.19分钟，ES+507实施例8(S)-5-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸(中间体21)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(15mg)。
1H NMR(CDCl3，d)2.23(s，3H)，2.43-2.51(m，8H)，3.56(s，2H)，5.65(d，1H)，6.29(d，1H)，7.05-7.51(m，11H)，7.92(d，1H)。
RT＝4.10分钟，ES+458实施例9(S)-5-吡咯烷-1-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-(吡咯烷-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸(中间体23)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(52mg)。
1H NMR(CDCl3，δ)1.76-1.77(m，4H)，2.60-2.62(m，4H)，3.71(s，2H)，5.64(d，1H)，6.31(d，1H)，7.05-7.50(m，10H)，7.98(d，1H)，8.04(s，1H)。
RT＝4.09分钟，ES+403实施例10(S)-5-哌啶-1-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-(哌啶-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸(中间体22)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(21mg)。
1H NMR(CDCl3，d)1.36-1.45(m，2H)，1.53-1.60(m，4H)，2.45-2.55(m，4H)，3.62(s，2H)，5.65(d，1H)，6.34(d，1H)，7.06-5.52(m，10H)，7.81-7.89(m，1H)，7.96(d，1H)。
RT＝4.16分钟，ES+443实施例11(S)-5-二甲基氨基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-二甲基氨基甲基呋喃-2-甲酸(中间体18)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(5mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.35(s，6H)，3.69(s，2H)，5.56(d，1H)，6.65(d，1H)，7.48-7.85(m，10H)，9.1(d，1H)，11.13(s，1H)。
RT＝4.09分钟，ES+403实施例12(S)-4-氟-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-哌啶-1-基-苯甲酰胺除使用4-氟-2-哌啶-1-基苯甲酸(中间体32)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(58mg)。
1H NMR(DMSO，d)1.62-1.67(m，2H)1.91-1.99(m，4H)3.08-3.16(m，4H)5.56(d，1H)7.15-7.79(m，11H)8.10-8.13(m，1H)11.08(s和d，2H)RT＝6.02分钟，ES+457实施例13(S)-4-氟-2-吗啉代-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用4-氟-2-吗啉-4-基苯甲酸(中间体31)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(19mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.94-3.00(m，4H)3.71-3.82(m，4H)5.35(d，1H)6.98-7.85(m，12H)10.52(d，1H)10.90(s，1H)RT＝5.34分钟，ES+459实施例14(S)-4-氰基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-苯甲酰胺除使用4-氰基-2-吡咯烷-1-基-苯甲酸(中间体38)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(13mg)。
1H NMR(DMSO，d)1.87(brs，4H)3.29(brs，4H)5.37(d，1H)7.01-7.65(m，12H)9.60(d，1H)10.88(s，1H)RT＝5.45分钟，ES+450实施例15(S)-4-氰基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-哌啶-1-基-苯甲酰胺除使用4-氰基-2-哌啶-1-基-苯甲酸(中间体39)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(27mg)。
1H NMR(DMSO，d)1.32-1.36(m，2H)1.58-1.67(m，4H)2.81-2.89(m，4H)5.25(d，1H)7.10-7.83(m，12H)10.70(d，1H)10.81(s，1H)RT＝5.88分钟，ES+464
实施例16(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-4-三氟甲基-苯甲酰胺除使用2-吡咯烷-1-基-4-三氟甲基-苯甲酸(中间体33)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(5mg)。
1H NMR(DMSO，d)1.89-1.92(brs，4H)3.29-3.32(brs，4H)5.40(d，1H)6.88(s，1H)6.94(d，1H)7.24-7.67(m，10H)9.56(d，1H)10.89(s，1H)RT＝5.91分钟，ES+493实施例17(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-哌啶-1-基-4-三氟甲基-苯甲酰胺除使用2-哌啶-1-基-4-三氟甲基-苯甲酸(中间体34)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(14mg)。
1H NMR(DMSO，d)1.53-1.57(m，2H)1.80-1.91(m，4H)3.00-3.14(m，4H)5.46(d，1H)7.30-7.72(m，11H)8.09(d，1H)10.98(d，1H)10.99(s，1H)RT＝6.39分钟，ES+507实施例18(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-4-三氟甲基-苯甲酰胺除使用2-吗啉-4-基-4-三氟甲基-苯甲酸(中间体35)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(14mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.18-3.24(m，4H)3.90-3.96(m，4H)5.52(d，1H)7.36-8.10(m，12H)10.59(d，1H)11.10(s，1H)RT＝5.72分钟，ES+509实施例19(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-5-三氟甲基-苯甲酰胺除使用2-吡咯烷-1-基-5-三氟甲基-苯甲酸(中间体36)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(8mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.00-2.02(brs，4H)3.40-3.43(brs，4H)5.48(d，1H)6.90(d，1H)7.34-7.74(m，11H)9.71(d，1H)10.98(s，1H)RT＝5.84分钟，ES+493实施例20(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺除使用2-吗啉-4-基-5-三氟甲基-苯甲酸(中间体37)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(19mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.13-3.18(m，4H)3.85-3.90(m，4H)5.46(d，1H)7.30-7.69(m，10H)7.88(dd，1H)8.04(d，1H)10.37(d，1H)11.04(s，1H)RT＝5.72分钟，ES+509实施例21(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺除使用2-吗啉-4-基-烟酸之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(45mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.30-3.36(m，4H)3.82-3.85(m，4H)5.45(d，1H)7.14-7.17(m，1H)7.19-7.71(m，9H)8.07(dd，1H)8.44(dd，1H)10.00(d，1H)11.05(s，1H)RT＝4.86分钟，ES+442实施例22(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺除使用2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-烟酸(中间体3)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(10mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.25(t，2H)3.40(t，2H)3.75-3.88(m，4H)5.47(d，1H)6.67-6.72(m，1H)7.28-7.67(m，8H)8.24-8.38(m，3H)9.56(d，1H)10.92(s，1H)RT＝4.43分钟，ES+508实施例23(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-3-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-3-甲基-苯甲酸(中间体4)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(65mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.36(s，3H)3.24(brs，4H)3.49(brs，4H)5.43(d，1H)7.11-7.68(m，12H)9.61(d，1H)10.99(s，1H)RT＝5.04分钟，ES+503实施例24(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-甲基-苯甲酸(中间体5)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(72mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.39(s，3H)3.44-3.54(brm，8H)5.46(d，1H)7.14(d，1H)7.31-7.69(m，10H)7.86(d，1H)10.94(d，1H)11.17(s，1H)RT＝5.20分钟，ES+503实施例25(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-6-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-6-甲基-苯甲酸(中间体6)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(32mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.27(s，3H)3.24-3.27(m，4H)3.41-3.43(m，4H)5.56(d，1H)7.03(d，1H)7.11(d，1H)7.25-7.68(m，10H)9.44(d，1H)10.96(s，1H)。
RT＝5.03分钟，ES+503实施例26(S)-2-氯-6-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用2-氯-6-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸(中间体10)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(51mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.43-3.47(m，4H)3.59-3.61(m，4H)5.63(d，1H)7.39-7.83(m，12H)9.86(d，1H)11.14(s，1H)。
RT＝5.07分钟，ES+523，525实施例27(S)-3-环丙基-2-氧代-2，3-二氢-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][14]二氮杂-3-基)-酰胺将3-环丙基-1，3-二氢[4，5-b]吡啶-2-酮(中间体24，35mg)、三乙胺(0.028ml)和三光气(20mg)在二氯甲烷(3ml)中于室温搅拌1小时。然后加入(S)-3-氨基-5-苯基-1，3-二氢-苯并[e][1，4]二氮杂-2-酮(50mg)，继续搅拌18小时。蒸发溶剂，残余物在硅胶SPE短柱上纯化。用二氯甲烷∶乙醇∶0.880氨；200∶8∶1洗脱，得到无色固体(3mg)。
1H NMR(DMSO，d)0.88-1.09(m，4H)2.92(m，1H)5.25(d，1H)7.06-7.71(m，10H)8.08(m，2H)9.94(d，1H)11.08(s，1H)RT＝4.90分钟，ES+453实施例28(S)-3-(4-甲基-哌嗪-1-磺酰基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e]氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用3-(4-甲基-哌嗪-1-磺酰基)-苯甲酸(中间体7)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为浅黄色固体(23mg)。
1H NMR(CDCl3，d)2.19(s，3H)，2.39-2.43(m，4H)，2.95-3.05(m，4H)，5.68(d，1H)，6.5(s，1H)，7.13(t，2H)，7.19(s，1H)，7.32-7.83(m，8H)，8.08-8.11(m，2H)，8.28-8.29(m，1H)。
RT＝4.25分钟，ES+518实施例29(S)-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯甲酸之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(46mg)。
1H NMR(CDCl3，d)2.30(s，3H)，2.50-2.54(m，4H)，3.26-3.30(m，4H)，5.70(d，1H)，6.86(d，2H)，7.14(t，1H)，7.17-7.50(m，8H)，7.74(d，1H)，7.80(d，2H)，8.25-8.40(m，1H)。
RT＝4.16分钟，ES+454实施例30(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-3-(哌啶-1-磺酰基)-苯甲酰胺除使用3-哌啶-1-磺酰基-苯甲酸(中间体8)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(35mg)。
1H NMR(CDCl3，d)1.35-1.38(m，2H)，1.57-1.65(m，4H)，2.91-2.99(m，4H)，5.70(d，1H)，7.14(t，2H)，7.19(s，2H)，7.31-7.84(m，7H)，8.04-8.12(m，2H)，8.28-8.29(m，1H)，8.41(s，1H)。
RT＝5.47分钟，ES+503实施例31(S)-3-(吗啉-4-磺酰基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用3-(吗啉-4-磺酰基)苯甲酸(中间体9)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(29mg)。
1H NMR(CDCl3，d)2.97-3.00(m，4H)，3.66-3.70(m，4H)，5.68(d，1H)，7.10-8.18(m，13H)，8.29-8.31(m，2H)。
RT＝5.06分钟，ES+505实施例32(S)-5-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-吗啉-4-基甲基呋喃-2-甲酸(中间体19)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(35mg)。
1H NMR(CDCl3，d)2.46-2.49(m，4H)，3.55(s，2H)，3.66-3.70(m，4H)，5.65(d，1H)，6.30(d，1H)，7.06-7.51(m，10H)，7.95(d，1H)，8.38(s，1H)。
RT＝4.28分钟，ES+445实施例33(S)-5-羟甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-氯甲基-呋喃-2-甲酸乙酯的水解产物之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(48mg)。
1H NMR(CDCl3，d)2.78(s，1H)，4.55-4.56(m，2H)，5.63(d，1H)，6.25(d，1H)，7.00(d，1H)，7.09(t，2H)，7.15-7.49(m，7H)，8.10(d，1H)，8.46(s，1H)。
RT＝4.54分钟，ES+376实施例34(S)-5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基甲基)-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基甲基)-呋喃-2-甲酸(中间体20)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(192mg)。
1H NMR(CDCl3，d)3.00-3.10(m，8H)，3.68(s，2H)，5.65(d，1H)，6.32(d，1H)，7.06-7.50(m，10H)，7.95(d，1H)，8.08-8.16(s，1H)。
RT＝4.65分钟，ES+493
实施例35(S)-2-氯-4-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用2-氯-4-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸(中间体1)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(41mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.15(brs，4H)3.92(brs，4H)5.41(d，1H)7.10-7.68(m，12H)9.26(d，1H)10.92(s，1H)。
RT＝4.70分钟，ES+523，525实施例36(S)-2-氯-5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用2-氯-5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸(中间体2)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(69mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.14(brs，4H)3.81(brs，4H)5.37(d，1H)7.08-7.63(m，12H)9.56(d，1H)10.84(s，1H)。
RT＝4.76分钟，ES+523，525实施例37(S)-5-{[2-甲磺酰基乙基)-甲基-氨基]-甲基}-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-酰胺除使用5-{[(2-甲磺酰基乙基)-甲基-氨基]-甲基}-呋喃-2-甲酸乙酯(中间体17)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(87mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.05(s，3H)，2.61(t，2H)，2.84(s，3H)，3.12(t，2H)，3.48(s，2H)，5.21(d，1H)，6.34(d，1H)，7.05-7.39(m，9H)，7.50(td，1H)，8.77(d，1H)，10.78(s，1H)。
RT＝4.78分钟，ES+495
实施例38(S)-2-吡啶-3-基-噻唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用2-吡啶-3-基-噻唑-4-甲酸之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(55mg)。
1H NMR(DMSO，d)5.64(d，1H)7.48-7.86(m，10H)8.66(dt，1H)8.73(s，1H)8.93(dd，1H)9.31(d，1H)9.47(d，1H)11.28(s，1H)。
RT＝4.70分钟，ES+440实施例39(S)-2-吡啶-4-基-噻唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用2-吡啶-4-基-噻唑-4-甲酸之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(54mg)。
1H NMR(DMSO，d)5.36(d，1H)7.19-7.58(m，9H)7.96(dd，2H)8.53(s，1H)8.69(dd，2H)9.02(d，1H)11.01(s，1H)。
RT＝4.69分钟，ES+440实施例40(S)-4-甲基-2-吡嗪-2-基-噻唑-5-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用4-甲基-2-吡嗪-2-基噻唑-5-甲酸之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(67mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.56(s，3H)5.25(d，1H)7.10-7.49(m，9H)8.58-8.63(s+dd，2H)9.16(d，1H)9.38(d，1H)10.78(s，1H)。
RT＝4.82分钟，ES+455实施例41(S)-2-吗啉-4-基甲基-呋喃-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用2-吗啉-4-基甲基呋喃-3-甲酸(中间体25)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(24mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.58(brm，4H)3.67(brm，4H)3.91(s，2H)5.45(d，1H)6.88(d，1H)7.33-7.75(m，10H)10.95(s，1H)11.01(d，1H)。
RT＝5.04分钟，ES+445实施例42(S)-3-吗啉-4-基甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用3-吗啉-4-基甲基苯甲酸(中间体26)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(24mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.39(brm，4H)3.55(s，2H)3.60(brm，4H)5.51(d，1H)7.28-7.71(m，11H)7.93(s，1H)7.97(s，1H)9.50(d，1H)10.93(s，1H)。
RT＝4.86分钟，ES+455实施例43(S)-5-吗啉-4-基甲基-异唑-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-吗啉-4-基甲基-异唑-3-甲酸(中间体27)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(11mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.93(m，4H)3.46(m，4H)3.66(brs，2H)5.26(d，1H)6.77(s，1H)7.13-7.38(m，9H)9.17(d，1H)10.90(s，1H)。
RT＝4.75分钟，ES+446实施例44(S)-3-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用3-吗啉-4-基甲基呋喃-2-甲酸(中间体28)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(20mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.52(brm，4H)3.62(brs，4H)3.67(m，2H)5.39(d，1H)6.67(d，1H)7.25-7.71(m，9H)7.84(d，1H)10.93(s，1H)11.34(d，1H)。
RT＝4.96分钟，ES+445实施例45(S)-5-吡啶-2-基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-吡啶-2-基-噻吩-2-甲酸之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(32mg)。
1H NMR(DMSO，d)5.58(d，1H)7.37-7.77(m，10H)7.96-7.99(m，2H)8.10(d，1H)8.32(d，1H)8.67(d，1H)9.81(d，1H)11.03(s，1H)。
RT＝4.91分钟，ES+439实施例46(S)-2-甲基-4-(吗啉-4-磺酰基)-呋喃-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用2-甲基-4-(吗啉-4磺酰基)-呋喃-3-甲酸之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(75mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.77(s，3H)3.26(m，4H)3.85(m，4H)5.60(d，1H)7.43-7.83(m，9H)8.23(s，1H)9.68(d，1H)11.07(s，1H)。
RT＝4.90分钟，ES+509实施例47(S)-6-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺除使用6-吗啉-4-烟酸之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(28mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.58-3.61(m，4H)3.70-3.73(m，4H)5.51(d，1H)6.89(d，1H)7.24-7.71(m，9H)8.19(dd，1H)8.80(d，1H)9.39(d，1H)10.89(s，1H)。
RT＝4.59分钟，ES+442
实施例48(S)-3-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用3-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸(中间体29)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(34mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.43(m，4H)3.59(m，4H)3.70(s，2H)5.45(d，1H)7.05(d，1H)7.24-7.70(m，9H)8.05(d，1H)9.54(d，1H)10.92(s，1H)。
RT＝5.02分钟，ES+461实施例49(S)-5-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸(中间体30)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(41mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.28(brm，4H)3.38(brm，4H)3.56(s，2H)5.16(d，1H)6.90(d，1H)7.04-7.44(m，9H)7.52(d，1H)10.68(s，1H)11.82(d，1H)RT＝5.33分钟，ES+461实施例502-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)苯甲酰胺除使用2-吗啉-4-基苯甲酸(49mg)之外，该物质按照中间体15中所述制备。产物为无色固体(33mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.01-3.12(m，4H)3.86-3.93(m，4H)5.44(d，1H)7.21-7.71(m，12H)7.93(dd，1H)10.99(d，1H)11.02(s，1H)RT＝5.47分钟，ES+441实施例51(S)-5-苯基-唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺将(S)-3-氨基-5-苯基-1，3-二氢-苯并[e][1，4]二氮杂-2-酮(60mg)、三乙胺(0.037ml)和5-苯基-唑-4-碳酰氯(50mg)在THF(3ml)中于室温搅拌2小时。然后将混合物在水和二氯甲烷之间分配。蒸发经干燥的有机相，残余物在硅胶SPE短柱上纯化。用二氯甲烷∶乙醇∶0.880氨＝400∶8∶1洗脱，得到标题化合物，为无色固体(42mg)。
1H NMR(DMSO，δ)5.40(d，1H)7.27-7.70(m，12H)8.22-8.26(m，2H)8.72(s，1H)8.88(d，1H)11.14(s，1H)RT＝5.22分钟，ES+423.49实施例521-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-3-(4-苯氧基苯基-脲将外消旋的3-氨基-5-苯基-1，3-二氢-苯并[e][1，4]二氮杂-2-酮(30mg)和1-异氰酸根-4-苯氧基-苯(0.022ml)在干燥的THF(4ml)中于室温搅拌18小时。然后将混合物在水和二氯甲烷之间分配。蒸发经干燥的有机层，残余物在二氯甲烷/乙醚中研磨，得到标题化合物，为白色固体(25mg)。
1H NMR(DMSO，d)5.23(d，1H)6.98-7.03(m，3H)7.11(t，1H)7.33-7.58(m，13H)7.71(dt，1H)9.18(s，1H)11.03(brs，1H)RT＝5.57分钟，ES+463.45活性实施例1通过邻苯二胺二盐酸盐(OPD)底物向有色产物的纯化，使用RSV的磷蛋白(P)、核壳(N)&融合(F)蛋白的鼠单克隆抗体和兔抗鼠辣根过氧化物酶(HRP)缀合二级抗体来证明RSV抗原的减少。通过光密度(OD)测定进行定量。
使用平底96-孔板的所有96个孔设置该检验。在3天检验期间，外侧的孔没有受到比内侧的孔多的蒸发量(即未观察到“边缘效应”)。
在加入病毒和化合物前一天将平板设置。然后进行检验3天，在第四天进行ELISA显影。
第0天检验板的设置在微量滴定板的所有96个孔中，在100μl/孔生长培养基(GM)中以4×103Hep-2个细胞/孔进行接种，所述生长培养基(GM)由含有Glutamax-1、丙酮酸钠、1000mg/l葡萄糖和吡哆醇(Invitrogen，目录号21885-025)并补充有10％FBS的Dulbecco′s MEM(DMEM)组成。(参见平板1)。
在组织培养中，细胞粘附于组织培养瓶上，在37℃和5％CO2生长至90％汇合。
用20ml灭菌PBS洗涤单层以除去血清，用1ml胰蛋白酶处理以从培养瓶上分离细胞。
将细胞悬浮在少量已知体积的生长培养基中，用血细胞计数器计数。将细胞悬浮液在生长培养基中配成所需浓度，通过多通道移液管加入各孔中。简言之，轻轻摇动以使细胞在各孔中更均匀地分散。
平板1
将平板在37℃和5％CO2气氛下保持24小时不受干扰，在此期间细胞栖息形成均匀的细胞单层。
第1天加入病毒将RSV(由Virogen Ltd提供的RSS品系)储备液的冷冻小瓶从-80冰箱或液氮储藏室中取出，在生长培养基中稀释至已知的感染复数(m.o.i)。
通过以前对病毒储备液的滴定(采用ELISA检验方法)计算m.o.i.，因此病毒输入要求在感染和未受感染的对照孔之间获得至少0.8OD单位的窗口。
通过多通道移液管将50μl稀释病毒加入受感染(“病毒+”)孔中；通过多通道移液管将50μl生长培养基加入未受感染的细胞对照孔(CC)中。(参见平板2)。
平板2
平板面用条纹标记以在分离盖子时识别平板。
将平板在37℃培养1小时，使病毒吸附。
化合物稀释将化合物以4×浓度配制在含有2％DMSO(在检验中最终DMSO浓度为0.5％)的GM中。
如下所示，在各检验板上测试6种化合物(参见平板3)。在一式两份的孔中跨越7-点稀释系列(50μM-0.78μM)测试化合物有病毒存在。
受病毒感染的未经处理的孔用作病毒对照(VC)；未受感染的未经处理的孔用作细胞对照(CC)。CC和VC孔之间的吸收度差异构成检验窗口。
平板3
注释Cpd＝化合物稀释板的设置将化合物如下在分离的微量滴定板中系列稀释。(参见平板4)除“50μM”或第一栏孔中加入392μl GM外，其它所有孔中加入200μl含有2％DMSO的GM。从溶化的Arrow筛选板中挑选出各8μl的测试化合物，转移至“50μM”栏的适宜孔中。因为化合物储备液在100％DMSO中为10mM浓度，所以这将维持DMSO水平在最高化合物浓度时为2％。
采用多通道移液管，从50μM栏转移200μl至25μM栏，然后转移至12.5μM栏，如此类推跨越稀释板，产生一系列双倍稀释。在转移时将化合物混合，在转移之间更换转移端头，还确保没有化合物被转移到不含化合物的最后一栏孔中(0μM)。
平板4
注释Cpd＝化合物；BL＝空白孔化合物的加入将稀释板转动为长方向，通过多通道移液管将50μl化合物容易地由稀释板逐栏转移至检验板。因此，在稀释板中有100μl的过量剩余。
将平板在37℃和5％CO2下培养3天。
ELISA阶段第4天将培养基直接从各孔抽入至Virkon(1％水溶液)中，通过浸入含PBS的塑料盒中洗涤平板。通过多通道移液管加入50μl/孔的75％/25％体积/体积丙酮/甲醇定影液，放置3分钟。
将丙酮/甲醇从孔中弃去进入Virkon中，各孔如上所述用PBS洗涤。
通过多通道移液管向每孔加入200μl封闭溶液(2％，Marvel在含有0.05％Tween的PBS中的溶液)。将平板在37℃和振荡培养仪中培养60分钟。
将封闭溶液弃入水槽，将稀释的一级抗体直接加入孔中(即无需洗涤)。
将RSV鼠单克隆抗体NCL-RSV3(Novocastra)以1/400在PBS/2％Marvel/0.05％Tween中稀释，每孔加入50μl。将平板在37℃和振荡培养仪中培养90分钟。
将抗体弃入水槽，平板通过浸入PBS/0.05％Tween中洗涤4次。
将DAKo兔抗鼠HRP缀合物(DAKO目录号P0260)以1/1000在PBS/2％Marvel/0.05％Tween中稀释，每孔加入50μl。将平板在37℃和振荡培养仪中培养60分钟。
将抗体弃入水槽，平板通过浸入PBS/0.05％Tween中洗涤6次。
通过将1片脲片剂溶于20mL水中预先准备底物(SigmaFast OPD)。临用前将1片OPD片剂加入脲溶液中(NB.OPD是光敏的)并涡流混合。每孔加入50μl底物。
一旦出现充分的颜色但同时细胞对照背景仍然是浅色的时(～5分钟)，加入25μl/孔20％硫酸终止反应。
在SpectraMax(Molecular Devices)分光光度计上于490nm波长对平板读数，利用SOFTmax Pro软件包。
将孔排空，用自来水洗涤，单层用50μl/孔的结晶紫在20％甲醇/水中的溶液(2％)染色至少1小时。然后洗涤孔，风干，将单层在显微镜下检查细胞毒性的指示。
结果SOFTmax数据文件以Excel输出，数据处理采用Excel模板以小时-剂量响应曲线给出，从所得曲线计算IC50值。
对所有一式两份的孔计算平均值。通过从平均病毒对照(VC)中减去平均细胞对照(CC)计算检验窗口。对于各化合物，从各浓度点的平均值中减去平均CC。然后计算各浓度点的对照％，以窗口百分数表示。
将对照％对化合物浓度作图。将曲线拟合为直线，采用斜率和截距函数计算IC50。
A＜5μMB＝5-10μMC＞10μM
权利要求
1.化合物在制备用于治疗或预防RSV感染的药物中的用途，所述化合物为(a)式(I)的苯并二氮杂衍生物或其N-氧化物或者(b)其可药用盐， 其中-R1表示C1-6烷基、芳基或杂芳基；-R2表示氢或C1-6烷基；-R3各自相同或不同，表示卤素、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、氨基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、硝基、氰基、-CO2R′、-CONR′R″、-NH-CO-R′、-S(O)R′、-S(O)2R′、-NH-S(O)2R′、-S(O)NR′R″或-S(O)2NR′R″，其中R′和R″各自相同或不同，表示氢或C1-6烷基；-n为0-3；-R4表示氢或C1-6烷基；-X表示-CO-、-CO-NR′-、-S(O)-或-S(O)2-，其中R′为氢或C1-C6烷基；且-R5表示芳基、杂芳基或杂环基，其C1-C6羟基烷基或-(C1-C4烷基)-X1-(C1-C4烷基)-X2-(C1-C4烷基)取代，其中X1表示-O-、-S-或-NR′-，其中R′表示H或C1-C4烷基，且X2表示-CO-、-SO-或-SO2-，或者R5表示-A1-Y-A2，其中-A1为芳基、杂芳基、碳环或杂环基团；-Y表示直键或C1-C4亚烷基、-SO2-、-CO-、-O-、-S-或-NR′-部分，其中R′为C1-C6烷基；且-A2为芳基、杂芳基、碳环或杂环基团。
2.权利要求1的用途，其中R1为C1-2烷基或苯基。
3.权利要求1或2的用途，其中R2为氢。
4.前述权利要求任一项的用途，其中R3为卤素、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4卤代烷基、C1-4卤代烷氧基、氨基、单(C1-4烷基)氨基或二(C1-4烷基)氨基。
5.权利要求4的用途，其中R3为氟、氯、溴、C1-2烷基、C1-2烷氧基、C1-2烷硫基、C1-2卤代烷基、C1-2卤代烷氧基、氨基、单(C1-2烷基)氨基或二(C1-2烷基)氨基。
6.前述权利要求任一项的用途，其中R4为氢或C1-2烷基。
7.前述权利要求任一项的用途，其中X为-CO-或-CO-NR′-，其中R′表示氢或C1-C2烷基。
8.前述权利要求任一项的用途，其中R5为5-或6-元杂环基或杂芳基环，其被C1-C6羟基烷基或-(C1-C4烷基)-X1-(C1-C4烷基)-X2-(C1-C4烷基)取代，其中X1和X2如权利要求1所定义。
9.权利要求8的用途，其中R5为5-或6-元杂芳基，其被-CH2-OH或-(C1-C4烷基)-NR′-(C1-C4烷基)-S(O)2-(C1-C4烷基)取代，其中R′为氢或C1-C2烷基。
10.前述权利要求任一项的用途，其中A1为芳基或杂芳基。
11.权利要求10的用途，其中A1为苯基、单环5-或6-元杂芳基或者与被氧代基取代的单环5-至6-元杂环基稠合的5-至6-元杂芳基。
12.前述权利要求任一项的用途，其中A1为未取代的或被1或2个选自卤素、氰基、硝基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基和C1-C4烷氧基的取代基取代。
13.前述权利要求任一项的用途，其中Y表示直键、C1-C2亚烷基、-SO2-或-O-。
14.前述权利要求任一项的用途，其中A2为苯基、5-至6-元杂芳基、5-至6-元杂环基或C3-C6环烷基。
15.前述权利要求任一项的用途，其中当A2为杂环基时，它通过N原子与Y部分连接。
16.前述权利要求任一项的用途，其中A2为未取代的或被1或2个取代基取代，其中当A2为杂芳基或芳基时，所述取代基选自C1-C4烷基和卤素，当A2为碳环或杂环基团时，所述取代基选自C1-C4烷基、卤素和氧代基。
17.前述权利要求任一项的用途，其中A2为哌嗪基、吡啶基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、吡嗪基、环丙基、苯基或S，S-二氧代硫吗啉代基，其为未取代的或被C1-C2烷基取代。
18.前述权利要求任一项的用途，其中式(I)的苯并二氮杂衍生物为式(Ia)的苯并二氮杂衍生物 其中-X为-CO-或-CO-NH-；且-R5为5-至6-元杂芳基，例如呋喃基，其被-CH2-OH或-(C1-C4烷基)-N(CH3)-(C1-C4烷基)-SO2-(C1-C4烷基)取代，或者R5表示-A1-Y-A2，其中-A1为苯基、吡啶基、呋喃基、噻唑基、唑基、异唑基、噻吩基或1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-(3H)-酮部分，其为未取代的或被1或2个选自卤素、氰基、C1-C2烷基、C1-C2卤代烷基和C1-C2烷氧基的取代基取代；-Y为直键、C1-C2亚烷基、-SO2-或-O-；且-A2为哌嗪基、吡啶基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、吡嗪基、环丙基、苯基或S，S-二氧代硫吗啉代基，其为未取代的或被C1-C2烷基取代。
19.前述权利要求任一项的用途，其中所述药物用于治疗如下患者两岁以下的儿童，受累于哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)或免疫缺陷的成人，老年人，或者长期需要护理设施的人。
20.权利要求19的用途，其中所述儿童患有慢性肺部疾病。
21.权利要求1-18任一项的用途，其中所述药物用于在妊娠32周或更早时出生的6岁以下的幼儿中预防RSV感染。
22.前述权利要求任一项的用途，其中药物适于经鼻内或支气管内施用。
23.前述权利要求任一项的用途，其中所述药物还包含抗炎化合物或抗流行性感冒化合物。
24.权利要求23的用途，其中抗炎化合物为布地奈德或氟替卡松。
25.权利要求23的用途，其中抗炎化合物为白三烯拮抗剂、磷酸二酯酶4抑制剂或TNFα抑制剂。
26.权利要求23的用途，其中抗炎化合物为白介素8或白介素9抑制剂。
27.权利要求1-22任一项的用途，其中所述药物与权利要求24-26任一项所定义的抗炎化合物或抗流行性感冒化合物共同施用。
28.治疗患有或易患有RSV感染的患者的方法，该方法包含给所述患者施用有效量的权利要求1-18任一项定义的化合物。
29.权利要求28的方法，其中所述患者为权利要求19-21任一项定义的患者。
30.权利要求28或29的方法，其中所述化合物经鼻内或支气管内施用。
31.含有药物的吸入器或喷雾器，所述药物包含(a)权利要求1-18任一项所定义的化合物，和(b)可药用载体或稀释剂。
32.产品，包含权利要求1-18任一项所定义的化合物和权利要求24-26任一项所定义的抗炎化合物或抗流行性感冒化合物。
33.权利要求32的产品在制备药物中的用途，所述药物用于治疗并发的RSV和流行性感冒感染。
34.权利要求1-18任一项所定义的化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗人肺间质病毒、麻疹、副流感病毒、流行性腮腺炎、黄热病病毒(B5品系)、登革热2病毒或西尼罗河病毒。
35.化合物，其为(a)式(Ib)的苯并二氮杂衍生物或其N-氧化物或者(b)其可药用盐， 其中R1、R3、n、R4、X和R5如权利要求1-18任一项中定义。
36.权利要求35的化合物，其中R1为未取代的苯基。
37.权利要求35或36的化合物，其中当A1为杂芳基时，它不是5-甲基-异唑基部分。
38.权利要求35-37任一项的化合物，其中A1为芳基或杂芳基部分。
39.权利要求35-38任一项的化合物，其中X为-CO-或-CO-NR′-，其中R′如权利要求1-18任一项所定义，条件是当X为-CO-NR′-时，-A1-Y-A2部分为-苯基-O-苯基。
40.权利要求35-39任一项的化合物，其中A2不是其中碳原子之一被N原子替换的4-至10-元的饱和环烷基环。
41.权利要求35-40任一项的化合物，其中A2为哌嗪基、吡啶基、吡咯烷基、吡嗪基、环丙基、苯基或S，S-二氧代硫吗啉代基，其为未取代的或被C1-C2烷基取代。
42.权利要求35的化合物，其中式(Ib)的苯并二氮杂衍生物为6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺；3，4，5，6-四氢-2H-[1，2′]联吡啶基-5′-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-苯甲酰胺；(S)-2-氯-4-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-氟-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-苯甲酰胺；(S)-5-氯-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-5-氟-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-吡咯烷-1-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-哌啶-1-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-二甲基氨基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-4-氟-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-哌啶-1-基-苯甲酰胺；(S)-4-氟-2-吗啉代-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-4-氰基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-苯甲酰胺；(S)-4-氰基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-哌啶-1-基-苯甲酰胺；(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-4-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-哌啶-1-基-4-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-4-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-5-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-3-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-6-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-氯-6-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-3-环丙基-2-氧代-2，3-二氢-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-3-(4-甲基-哌嗪-1-磺酰基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-3-(哌啶-1-磺酰基)-苯甲酰胺；(S)-3-(吗啉-4-磺酰基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-羟甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基甲基)-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-氯-4-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-氯-5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-{[(2-甲磺酰基乙基)-甲基-氨基]-甲基}-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-酰胺；(S)-2-吡啶-3-基-噻唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-吡啶-4-基-噻唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-4-甲基-2-吡嗪-2-基-噻唑-5-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-吗啉-4-基甲基-呋喃-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-3-吗啉-4-基甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-吗啉-4-基甲基-异唑-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-3-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-吡啶-2-基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-甲基-4-(吗啉-4-磺酰基)-呋喃-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-6-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺；(S)-3-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)苯甲酰胺；(S)-5-苯基-唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；或1-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-3-(4-苯氧基-苯基)-脲。
43.权利要求35-42任一项的化合物，用于在治疗人或动物身体的方法中使用。
44.药物组合物，包含权利要求35-43任一项的化合物和可药用稀释剂或载体。
45.权利要求44的组合物，包含权利要求35-42任一项的化合物的旋光活性异构体。
46.权利要求44或45的组合物，其为片剂、糖锭剂、锭剂、水性或油性混悬剂、可分散的散剂或颗粒剂的形式。
全文摘要
化合物在制备药物中的用途，所述化合物为(a)式(I)的苯并二氮杂衍生物或其N－氧化物或(b)其可药用盐，所述药物用于治疗或预防RSV感染，其中R
文档编号A61P31/12GK1929848SQ200580008070
公开日2007年3月14日 申请日期2005年3月18日 优先权日2004年3月19日
发明者V·多德尔, M·卡特, D·阿伯, E·亨德森 申请人:阿罗医疗有限公司
技术领域：
本发明涉及一系列苯并二氮杂衍生物，其对抗呼吸道合胞病毒(RSV)是有活性的。
RSV是所有年龄段患者呼吸系统疾病的首要原因。对成人而言，它倾向于导致轻微的感冒症状。在学龄儿童中，它能导致感冒和支气管咳嗽。在婴儿和刚学步的小孩中，它能导致细支气管炎(肺较小气道的炎症)或肺炎。其还被发现是学龄前儿童中耳感染(中耳炎)的常见病因。在生命的第一年中出现RSV感染已经牵连到儿童期间哮喘的发生。
当前抗RSV治疗包括使用RSV的单克隆抗体，该抗体被称为帕利珠单抗。这样使用帕利珠单抗是预防性而非治疗性的RSV治疗。然而，尽管该抗体时常是有效的，但是它是昂贵的。事实上，它的费用意味着它对于需要抗RSV治疗的许多人们而言是得不到的。因此存在对现有抗RSV治疗的有效替代的迫切需要。
现在已经令人惊奇地发现下文给出的特定的通式(I)苯并二氮杂衍生物对抗RSV是有活性的。
因此，在第一实施方案中，本发明提供了化合物在制备用于治疗或预防RSV感染的药物中的用途，所述化合物为(a)式(I)的苯并二氮杂衍生物或其N-氧化物或者(b)其可药用盐， 其中-R1表示C1-6烷基、芳基或杂芳基；-R2表示氢或C1-6烷基；-R3各自相同或不同，表示卤素、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、氨基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、硝基、氰基、-CO2R′、-CONR′R″、-NH-CO-R′、-S(O)R′、-S(O)2R′、-NH-S(O)2R′、-S(O)NR′R″或-S(O)2NR′R″，其中R′和R″各自相同或不同，表示氢或C1-6烷基；-n为0-3；-R4表示氢或C1-6烷基；-X表示-CO-、-CO-NR′-、-S(O)-或-S(O)2-，其中R′为氢或C1-C6烷基；且-R5表示芳基、杂芳基或杂环基，其C1-C6羟基烷基或-(C1-C4烷基)-X1-(C1-C4烷基)-X2-(C1-C4烷基)取代，其中X1表示-O-、-S-或-NR′-，其中R′表示H或C1-C4烷基，且X2表示-CO-、-SO-或-SO2-，或者R5表示-A1-Y-A2，其中-A1为芳基、杂芳基、碳环或杂环基团；-Y表示直键或C1-C4亚烷基、-SO2-、-CO-、-O-、-S-或-NR′-部分，其中R′为C1-C6烷基；且-A2为芳基、杂芳基、碳环或杂环基团。
本文所用的C1-6烷基基团或部分为含有1-6个碳原子的直链或支链的烷基基团或部分，例如C1-4烷基基团或部分。C1-4烷基基团和部分的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基和叔丁基。特此说明，当基团中存在两个烷基部分时，所述烷基部分可以相同或不同。
本文所用的羟基烷基通常为被一个或多个羟基取代的所述烷基。通常其被一个、两个或三个羟基取代。优选其被单个羟基取代。优选的羟基烷基为-CH2-OH。
本文所用的酰基为C2-7酰基，例如基团-CO-R，其中R为所述C1-6烷基。
本文所用的芳基通常为C6-10芳基，例如苯基或萘基。苯基是优选的。芳基可以为未取代的或在任意位置被取代。通常其带有0、1、2或3个取代基。
在芳基上的适宜取代基包括卤素、C1-6烷基、C2-7酰基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、硝基、氰基、氨甲酰基、单(C1-6烷基)氨甲酰基、二(C1-6烷基)氨甲酰基、氨基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、-CO2R′、-CONR′R″、-S(O)R′、-S(O)2R′、-S(O)NR′R″、-S(O)2NR′R″-NH-S(O)2R′或-NH-CO-R′，其中R′和R″各自相同或不同，表示氢或C1-6烷基。
在芳基上的优选取代基包括卤素、C1-6烷基、C2-7酰基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、氨基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、硝基、氰基、-CO2R′、-S(O)R′、-S(O)2R′和-S(O)2NR′R″，其中R′和R″各自相同或不同，表示氢或C1-4烷基。
特别优选的取代基包括氟、氯、溴、碘、氰基、C1-4烷基、C2-4酰基、羟基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4卤代烷基、C1-4卤代烷氧基、氨基、单(C1-4烷基)氨基、二(C1-4烷基)氨基、硝基、-CO2R′、-S(O)2R′和-S(O)2NH2，其中R′表示C1-2烷基。最优选的取代基为氯、氟、氰基、C1-C4烷基和C1-C4卤代烷基取代基。
本文所用的芳基的称谓包括稠合环系，其中芳基与单环碳环、杂环或杂芳基稠合，或与被苯环稠合的单环碳环、杂环或杂芳基的稠合基团稠合。通常所述稠合环系为其中芳基与单环碳环、杂环或杂芳基稠合的系统。
优选该稠合环系为如下定义的那些其中芳基与单环杂环或杂芳基稠合，或与被苯环稠合的单环碳环稠合；特别是其中芳基与杂环基或杂芳基稠合的那些。该稠合环系的实例有如下定义的基团其中苯环与噻吩基或四氢呋喃基稠合形成苯并噻吩基或二氢苯并呋喃基。该稠环的其它实例有如下定义的那些其中苯环与二烷基、吡咯基或2，3-二氢茚-1-酮基团稠合形成苯并二烯基、吲哚基或9H-芴-9-酮基团。但是最优选的是，本文所用的芳基不与单环碳环、杂环或杂芳基或不与所述稠合基团稠合。
本文所用的碳环基团为非芳香饱和或不饱和的单环烃环，通常具有3-6个碳原子。优选其为具有3-6个碳原子的饱和烃环(即环烷基)。实例包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。优选环丙基、环戊基或环己基，最优选环丙基。环烷基可以为未取代的或在任意位置被取代。通常其带有0、1、2或3个取代基。
在碳环基团上的适宜取代基包括卤素、C1-6烷基、C2-7酰基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、硝基、氰基、氨甲酰基、单(C1-6烷基)氨甲酰基、二(C1-6烷基)氨甲酰基、氨基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、氧代、-CO2R′、-CONR′R″、-S(O)R′、-S(O)2R′、-S(O)NR′R″、-S(O)2NR′R″、-NH-S(O)2R′或-NH-CO-R′，其中R′和R″各自相同或不同，表示氢或C1-6烷基。
在碳环基团上的优选取代基包括卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、硝基、氰基和氧代。特别优选的取代基包括氟、氯、溴、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷基、硝基和氧代。最优选碳环基团为未取代的。
本文所用的杂环基团为非芳香的饱和或不饱和碳环，通常具有5-10个碳原子，其中一个或多个，例如1、2或3个碳原子被选自N、O和S的杂原子替换。饱和杂环基团是优选的。实例包括四氢呋喃基、四氢噻吩基、吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、二氧戊环基、噻唑烷基、四氢吡喃基、哌啶基、二烷基、哌嗪基、吗啉基、硫吗啉基和噻烷基。其它实例包括二硫戊烷基、唑烷基、四氢硫吡喃基和二噻烷基。哌嗪基、哌啶基、硫吗啉基、咪唑烷基和吗啉基是优选的。
本文所用的杂环基团的称谓包括其中杂环基团与苯基稠合的稠合环系。优选的该稠合环系为其中5-至6-元杂环基团与苯基稠合的那些。该稠合环系的实例为如下定义的那些其中1H-咪唑-2(3H)-酮基或咪唑烷-2-酮基与苯环或吡啶环稠合，形成例如1H-苯并[d]咪唑-2(3H)-酮基或1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮基。然而最优选杂环基团为单环。
杂环基团可以为未取代的或在任意位置被取代。通常其带有0、1或2个取代基。
在杂环基团上的适宜取代基包括卤素、C1-6烷基、C2-7酰基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、硝基、氰基、氨甲酰基、单(C1-6烷基)氨甲酰基、二(C1-6烷基)氨甲酰基(carbomyl)、氨基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、氧代、-CO2R′、-CONR′R″、-S(O)R′、-S(O)2R′、-S(O)NR′R″、-S(O)2NR′R″、-NH-S(O)2R′或-NH-CO-R′，其中R′和R″各自相同或不同，表示氢或C1-6烷基。
在杂环基团上的优选取代基包括卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、硝基、氰基和氧代。特别优选的取代基包括氟、氯、溴、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷基、硝基和氧代。最优选杂环基团为未取代的或被一个或两个C1-2烷基或氧代基取代。取代的杂环基团的实例为S，S-二氧代硫吗啉代基。
本文所用的卤素通常为氯、氟、溴或碘。优选是氯、氟或溴。更优选是氯或氟。
本文所用的烷氧基通常为与氧原子连接的所述烷基。烷硫基通常为与硫基连接的所述烷基。卤代烷基或卤代烷氧基通常为被一个或多个所述卤素原子取代的所述烷基或烷氧基。通常其被1、2或3个所述卤素原子取代。优选的卤代烷基和卤代烷氧基包括全卤代烷基和全卤代烷氧基，例如-CX3和-OCX3，其中X为所述卤素原子，例如氯或氟。特别优选的卤代烷基为-CF3和-CCl3。特别优选的卤代烷氧基为-OCF3和-OCCl3。
本文所用的杂芳基通常为5-至10-元芳香环，例如5-或6-元环，含有至少一个、例如1、2或3个选自O、S和N的杂原子。实例包括吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、呋喃基、噻吩基、吡唑烷基、吡咯基、二唑基、异唑基、噻二唑基、噻唑基、咪唑基和吡唑基。其它实例包括唑基和异噻唑基。优选的杂芳基为吡啶基、噻吩基、唑基、异唑基、噻唑基、呋喃基和吡唑基。
本文所用的杂芳基的称谓包括其中杂芳基与苯基或单环杂环基团稠合的稠合环系。优选的该稠合环系为如下定义的那些其中5-至6-元杂芳基与苯基或5-至6-元杂环基团稠合。该稠合环系的实例有苯并呋喃基、苯并噻吩基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并唑基、喹啉基、喹唑啉基、异喹啉基和1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮部分。最优选所述稠合环系为1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2(3H)-酮部分。
杂芳基可以为未取代的或在任意位置被取代。通常带有0、1、2或3个取代基。
在杂芳基上的适宜取代基包括卤素、C1-6烷基、C2-7酰基、羟基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、硝基、氰基、氨甲酰基、单(C1-6烷基)氨甲酰基、二(C1-6烷基)氨甲酰基、氨基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、-CO2R′、-CONR′R″、-S(O)R′、-S(O)2R′、-S(O)NR′R″、-S(O)2NR′R″、-NH-S(O)2R′或-NH-CO-R′，其中R′和R″各自相同或不同，表示氢或C1-6烷基。
在杂芳基上的优选取代基包括卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、硝基和氰基。特别优选的取代基包括氟、氯、溴、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷基和硝基。最优选的取代基包括氟、氯、溴、C1-2烷基和C1-2卤代烷基取代基。
当R1为芳基或杂芳基时，其通常为未取代的或被一个、两个或三个选自卤素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基或C1-6卤代烷氧基的取代基取代。优选其是未取代的或被一个或两个选自氟、氯、溴、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4卤代烷基或C1-4卤代烷氧基的取代基取代。更优选其为未取代的或被单个氟、氯、C1-2烷基、C1-2烷氧基、C1-2烷硫基、C1-2卤代烷基或C1-2卤代烷氧基取代基取代。
通常R1为C1-6烷基或芳基。优选R1为C1-2烷基或芳基。更优选R1为C1-2烷基或苯基。更优选R1为未取代的苯基。
通常R2为氢或C1-4烷基。优选R2为氢。
通常R3为卤素、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4卤代烷基、C1-4卤代烷氧基、氨基、单(C1-4烷基)氨基或二(C1-4烷基)氨基。优选R3为氟、氯、溴、C1-2烷基、C1-2烷氧基、C1-2烷硫基、C1-2卤代烷基、C1-2卤代烷氧基、氨基、单(C1-2烷基)氨基或二(C1-2烷基)氨基。更优选R3为甲基、三氟甲基、氟、氯或溴。最优选R3为甲基或氯。
通常n为0、1或2。优选的n为0或1。最优选n为0。
通常R4为氢或C1-4烷基。优选R4为氢或C1-2烷基。更优选R4为氢或甲基。最优选R4为氢。
通常X为-CO-、-S(O)2-或-CO-NR′-，其中R′表示氢或C1-C2烷基。优选X为-CO-或-CO-NR′-。
当R5为被C1-C6羟基烷基或-(C1-C4烷基)-X1-(C1-C4烷基)-X2-(C1-C4烷基)基团取代的杂环基或杂芳基时，杂环基或杂芳基通常为5-或6-元环。优选其为5-或6-元杂芳基，例如呋喃基。
通常C1-C6羟基烷基为-CH2-OH基团。通常X为-NR′-，其中R′为氢或C1-C2烷基。通常X2为-S(O)2-。
通常A1为芳基或杂芳基。优选A1为单环芳基或杂芳基、萘基或与被氧代基取代的单环杂环基团稠合的杂芳基。更优选A1为苯基、单环5-或6-元杂芳基或与被氧代基取代的单环5-至6-元杂环基团(例如氧代基取代的咪唑烷基团)稠合的5-至6-元杂芳基。最优选A1为苯基、吡啶基、呋喃基、噻唑基、唑基、异唑基、噻吩基或1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-(3H)-酮部分。
通常A1部分为未取代的或被1或2个选自卤素、氰基、硝基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基和C1-C4烷氧基的取代基取代。优选取代基选自卤素、氰基、C1-C2烷基、C1-C2卤代烷基和C1-C2烷氧基。
通常Y表示直键，C1-C2亚烷基、-SO2-或-O-。
通常A2为苯基、5-至6-元杂芳基、5-至6-元杂环基或C3-C6环烷基。优选A2为哌嗪基、吡啶基、吗啉基、硫吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、吡嗪基、环丙基或苯基。
通常，当A2为杂环基团时，它通过N原子与Y部分连接。
通常A2部分为未取代的或被一个或两个取代基取代，其中当A2为杂芳基或芳基时，所述取代基选自C1-C4烷基和卤素，当A2为碳环或杂环基时，所述取代基选自C1-C4烷基、卤素和氧代基。
最优选A2为哌嗪基、吡啶基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、吡嗪基、环丙基、苯基或S，S-二氧代硫吗啉代基，其中基团为未取代的或被C1-C2烷基取代。
本发明的优选化合物为如下定义的那些，其中-R1为C1-6烷基或芳基；
-R2为氢或C1-4烷基；-R3为卤素、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4卤代烷基、C1-4卤代烷氧基、氨基、单(C1-4烷基)氨基或二(C1-4烷基)氨基，或优选R3为氟、氯、溴、C1-2烷基、C1-2烷氧基、C1-2烷硫基、C1-2卤代烷基、C1-2卤代烷氧基、氨基、单(C1-2烷基)氨基或二(C1-2烷基)氨基；-n为0、1或2；-R4为氢或C1-4烷基；-X为-CO-、-CO-NR′或-S(O)2-，其中R′为氢或C1-C2烷基；且-R5为5-或6-元杂环基或杂芳基环，其被C1-C6羟基烷基或-(C1-C4烷基)-X1-(C1-C4烷基)-X2-(C1-C4烷基)取代，其中X1和X2如上定义，或者R5表示-A1-Y-A2，其中-A1为芳基或杂芳基；-Y为直键、C1-C2亚烷基、-SO2-或-O-；且-A2为芳基、杂芳基、杂环基或碳环基；在R1基团中的芳基部分为未取代的或被1、2或3个选自卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷硫基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基的取代基取代；A1部分为未取代的或被1或2个选自卤素、氰基、硝基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基和C1-C4烷氧基的取代基取代；且A2部分为未取代的或被一个或两个取代基取代，其中当A2为杂芳基或芳基时，所述取代基选自C1-C4烷基和卤素，当A2为碳环或杂环基团时，所述取代基选自C1-C4烷基、卤素和氧代。
本发明的其它优选化合物为如下定义的那些，其中-R1为C1-2烷基或苯基；-R2为氢或C1-4烷基；-R3为甲基、三氟甲基、氟、氯或溴；-n为0或1；
-R4为氢或C1-2烷基；-X为-CO-、-CO-NR′-或-S(O)2，其中R′为氢或C1-C2烷基；且-R5为5-或6-元杂环基或杂芳基，其被C1-C6羟基烷基或-(C1-C4烷基)-NR′-(C1-C4烷基)-SO2-(C1-C4烷基)取代，其中R′为氢或C1-C2烷基，或者R5表示-A1-Y-A2，其中-A1为苯基、单环5-或6-元杂芳基或与被氧代基取代的单环5-至6-元杂环基团稠合的5-或6-元杂芳基；-Y表示直键、C1-C2亚烷基、-SO2-或-O-；且-A2为苯基、5-至6-元杂芳基、5-至6-元杂环基或C3-C6环烷基，在R1基团中的苯基部分为未取代的或被一个或两个选自氟、氯、溴、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4卤代烷基或C1-4卤代烷氧基的取代基取代；A1部分为未取代的或被1或2个选自卤素、氰基、硝基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基和C1-C4烷氧基的取代基取代；且A2部分为未取代的或被1或2个取代基取代，其中当A2为杂环基或环烷基时，所述取代基选自C1-C4烷基、卤素和氧代基，当A2为苯基或杂芳基时，所述取代基选自C1-C4烷基和卤素。
本发明特别优选的化合物为式(Ia)化合物及其可药用盐， 其中-X为-CO-或-CO-NH-；且-R5为5-至6-元杂芳基，例如呋喃基，其被-CH2-OH或-(C1-C4烷基)-N(CH3)-(C1-C4烷基)-SO2-(C1-C4烷基)取代，或者R5表示-A1-Y-A2，其中
-A1为苯基、吡啶基、呋喃基、噻唑基、唑基、异唑基、噻吩基或1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-(3H)-酮部分，其为未取代的或被1或2个选自卤素、氰基、C1-C2烷基、C1-C2卤代烷基和C1-C2烷氧基的取代基取代；-Y为直键、C1-C2亚烷基、-SO2-或-O-；且-A2为哌嗪基、吡啶基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、吡嗪基、环丙基、苯基或S，S-二氧代硫吗啉代基，其为未取代的或被C1-C2烷基取代。
在式(Ia)化合物中，通常n为0且R4为氢。
含有一个或多个手性中心的式(I)化合物可以以对映异构或非对映异构纯的形式使用，或以异构体混合物的形式使用。特此说明，本文所述的化学结构意欲囊括所示化合物的所有立体异构体，包括外消旋和非外消旋混合物以及纯的对映异构体和/或非对映异构体。
本发明的优选化合物为旋光活性异构体。因此，例如仅仅含有一个手性中心的优选的式(I)化合物包括基本上纯的形式的R对映异构体、基本上纯的形式的S对映异构体和含有过量R对映异构体或过量S对映异构体的混合物。特此说明，如果需要的话，式(I)化合物可以以溶剂化物形式使用。
本文所用的可药用盐为与可药用酸或碱形成的盐。可药用酸包括无机酸和有机酸两者，无机酸例如有盐酸、硫酸、磷酸、焦磷酸、氢溴酸或硝酸，有机酸例如有柠檬酸、富马酸、马来酸、苹果酸、抗坏血酸、丁二酸、酒石酸、苯甲酸、乙酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸或对甲苯磺酸。可药用碱包括碱金属(例如钠或钾)和碱土金属(例如钙或镁)氢氧化物以及有机碱如烷基胺、芳烷基胺或杂环胺。
本发明特别优选的化合物包括6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺；3，4，5，6-四氢-2H-[1，2′]联吡啶基-5′-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-苯甲酰胺；
(S)-2-氯-4-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-氟-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-苯甲酰胺；(S)-5-氯-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-5-氟-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-吡咯烷-1-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-哌啶-1-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-二甲基氨基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-4-氟-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-哌啶-1-基-苯甲酰胺；(S)-4-氟-2-吗啉代-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-4-氰基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-苯甲酰胺；(S)-4-氰基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-哌啶-1-基-苯甲酰胺；(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-4-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-哌啶-1-基-4-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-4-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-5-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-3-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-6-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-氯-6-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-3-环丙基-2-氧代-2，3-二氢-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-3-(4-甲基-哌嗪-1-磺酰基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-3-(哌啶-1-磺酰基)-苯甲酰胺；(S)-3-(吗啉-4-磺酰基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；
(S)-5-羟甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基甲基)-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-氯-4-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-氯-5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-{[(2-甲磺酰基乙基)-甲基-氨基]-甲基}-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-酰胺；(S)-2-吡啶-3-基-噻唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-吡啶-4-基-噻唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-4-甲基-2-吡嗪-2-基-噻唑-5-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-吗啉-4-基甲基-呋喃-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-3-吗啉-4-基甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-吗啉-4-基甲基-异唑-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-3-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-吡啶-2-基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-甲基-4-(吗啉-4-磺酰基)-呋喃-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-6-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺；(S)-3-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-苯基-唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；1-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-3-(4-苯氧基-苯基)-脲；上述任意化合物的N-氧化物；及其可药用盐。
式(I)化合物可以如下制备使乙醛酸(HCO-CO2H)、苯并三唑和适当的氨基甲酸苄酯在甲苯中在Dean-Stark条件下回流反应，得到式(II)的关键的被保护的氨基酸， 然后使如此所得的式(II)氨基酸与适宜的氯化剂如草酰氯反应，随后与式(III)的2-氨基二苯甲酮反应， 得到中间体式(IV)酰胺，
其不需要被表征。
然后式(IV)化合物进行氨解，随后在含有乙酸铵的乙酸中闭环，得到式(V)的被保护的苯并二氮杂， 然后使用在乙酸中的溴化氢将式(V)化合物脱保护，得到式(VI)的脱保护的胺， 其中X为-CO-或-CO-NR′的式(I)化合物可以如下制备使如上定义的式(VI)化合物与酸酐在适宜溶剂、优选吡啶中在环境温度下反应，或与酰氯在适宜溶剂中和在碱的存在下、优选在THF中在环境温度和在三乙胺存在下反应。或者，化合物可如下制备使式(VI)化合物与酸在适宜的溶剂中在碱和偶联试剂的存在下、优选在THF中在环境温度和在三乙胺和O-苯并三唑-1-基-N，N，N′，N′-四甲基脲输六氟磷酸盐(HBTU)存在下反应。
如果所用酰氯为氨基碳酰氯，则式(I)化合物为脲。当X部分中的R′为氢时，该化合物还可以通过式(VI)化合物与异氰酸酯的反应制备。该反应优选在THF中和在环境温度下完成。或者，异氰酸酯可以在碱、通常为三乙胺的存在下在THF中由相应的胺和光气原位制备。当然，其中R′不为氢的化合物可以通过其中R′为氢的相应化合物与适当的烷基化剂反应来制备，所述的烷基化剂例如为L-(C1-C6烷基)，其中L为离去基如氯。
其中X为-S(O)2-的式(I)化合物可以通过式(VI)化合物与适宜的磺酰氯反应来制备。类似地，其中X为-S(O)-的式(I)化合物可以通过式(VI)化合物与适宜的亚磺酰氯反应来制备。
在苯并二氮杂骨架的制备中，当可能时，可以使用商购获得的式(III)的氨基二苯甲酮化合物。不能商购获得的式(III)化合物可以通过已知的方法制备，例如通过式(VII)的Weinreb类型的酰胺与基团R1-Li或格氏试剂如R1-MgBr反应来制备。优选该反应在THF中于-100℃完成。
式(VII)化合物为已知的化合物或可以通过与已知方法类似的方法制备。例如它们可以由式(VIII)的靛红酸酐与N，O-二甲基羟胺在标准反应条件反应来制备。
式(II)、(III)、(VII)和(VIH)的原料是已知的化合物，或可以通过与已知方法类似的方法制备。
如此得到的式(I)化合物的其它合成操作可以通过常规方法完成以获得其它式(I)化合物。式(I)的苯并二氮杂可以通过用适当的酸或碱处理被成盐化。
尽管所要求化合物的所述路线提供了足以在实验室规模制备的合成，但是仍探索了可选的潜在用于生产的路线。两者均使用相同的原料(2-氨基-二苯甲酮)(1)，但是在可选的路线中，苯并二氮杂环系通过首先与溴乙酰溴(或等同试剂)反应、随后用氨闭环来形成。这些反应在适宜的溶剂例如二氯甲烷中和在适宜的温度(其范围可以为-20至150℃)下完成。为了保护NH官能团，在该阶段使未被取代的苯并二氮杂与碱和烷基化剂反应。例如加入在DMF中的氢化钠，随后加入4-甲氧基-苄基氯，得到下文所示的中间体(2)。
该物质与碱(例如叔丁醇钾)在适宜的溶剂(例如THF或DMF)中进一步反应，随后用亚硝酸异戊酯(或可选的类似试剂)淬灭，提供了肟中间体(3)，其可以通过某些方法被转化为外消旋的伯胺，所述方法包括使用氢和适宜的催化剂。然后该胺进行动态动力学拆分方法，通过该方法外消旋的胺在适宜的旋光活性的酸和适宜的醛存在下以很好的产率和异常高的对映异构体过量沉淀出所需的(S)-胺(4)的盐。适于该转化的酸可以为例如樟脑磺酸、Boc-苯基丙氨酸等，适宜的醛可以为苯甲醛例如3，5-二氯水杨醛。
然后，如此形成的旋光活性的胺可以被转化为所需的衍生物，例如酰胺或脲。酰胺的形成可以使用适宜的羧酸和偶联剂或碳酰氯或其它适宜的试剂完成，脲的制备使用适宜的异氰酸酯进行，或者与光气反应并随后与适宜的胺反应。
然后，如此形成的这些衍生物可以被除去保护基。这个过程可以在路易斯酸例如氯化铝、三氟化硼、四氯化钛等存在下完成。这些反应在适宜的惰性溶剂例如二氯甲烷中完成。反应温度可以为-20至150℃，但是通常在室温下或更低温度下完成。
如上所述，本发明的化合物对抗RSV是有活性的。因此，本发明提供了治疗患有或易患有RSV感染的患者的方法，所述方法包含对所述患者施用有效量的式(I)化合物或其可药用盐。
RSV在两岁以下的儿童，在受累于哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)或免疫缺陷的成人以及在老年人中是流行的。其在患有慢性肺部疾病的儿童中有特别严重的危险性。因此，所述组合物或药物通常用于治疗如下患者两岁以下的儿童，受累于哮喘、COPD或免疫缺陷的成人，老年人，或者长期需要护理设施的人。通常所述儿童患有慢性肺部疾病。
而且，抗RSV预防推荐用于在妊娠32周或更早时出生的婴儿至他们达到6月龄，用于老年人、受累于免疫缺陷的人以及那些长期需要护理设施的人。因此，所述组合物或药物通常用于在妊娠32周或更早出生的6岁以下的幼儿、老年人、受累于免疫缺陷的人以及那些长期需要护理设施的人，以预防RSV感染。
已经表明RSV感染伴随有炎性反应(Noah等人，Clinical Immunology2000，第97卷，43-49)。本发明还涉及式(I)化合物或其可药用盐与抗炎化合物的组合以及该组合在治疗RSV中的用途。通常，所述抗炎化合物为类固醇类如布地奈德或氟替卡松、非类固醇类如白三烯拮抗剂、磷酸二酯酶4抑制剂或TNFα抑制剂或者白介素8或白介素9抑制剂。
因此，在一项实施方案中，式(I)化合物或其可药用盐与类固醇类抗炎化合物例如布地奈德或氟替卡松组合。在优选的实施方案中，以低剂量施用类固醇类以使免疫抑制作用最小化。在另一项实施方案中，式(I)化合物或其可药用盐与非类固醇类抗炎化合物组合，所述抗炎化合物例如是白三烯拮抗剂如Singulair(Merck)或Accolate(Astra Zeneca)、磷酸二酯酶4抑制剂如罗氟司特(Altana)、TNFα抑制剂如Enbrel(Amgen)、Remicade(Centocor)、Humira(Abbott)或CDP870(Celltech)或NSAIDS。在其它实施方案中，式(I)化合物与白介素8或白介素9抑制剂组合。因此，本发明还涉及含有同时、分别或依次使用来治疗RSV的式(I)化合物或其可药用盐以及抗炎化合物的产品。
本发明还涉及式(I)化合物或其可药用盐与抗流行性感冒化合物组合，以及该组合在治疗并发的RSV和流行性感冒感染中的用途。因此，本发明还涉及含有同时、分别或依次使用来治疗并发的RSV和流行性感冒感染的式(I)化合物或其可药用盐以及抗流行性感冒化合物的产品。
本发明其它令人惊奇的发现是，本发明的化合物对抗人肺间质病毒(human metapneumovirus)、麻疹、副流感病毒、副粘病毒和流行性腮腺炎是有活性的。因此，本发明提供了式(I)化合物或其可药用盐在制备药物中的用途，所述药物用于治疗人肺间质病毒、麻疹、副流感病毒、副粘病毒和流行性腮腺炎。
本发明的化合物可以以各种剂型施用。因此，它们可以经口服施用，例如为片剂、糖锭剂、锭剂、水性或油性混悬剂、可分散的散剂或颗粒剂。本发明的化合物还可以经胃肠道外施用，可以经皮下、静脉内、肌内、胸腔内、经皮或通过输注技术施用。化合物还可以以栓剂施用。
在优选的实施方案中，本发明通过鼻内或支气管内施用。本发明还提供了含有药物的吸入器或喷雾器(nebuliser)，所述药物包含(a)如上定义的式(I)的苯并二氮杂衍生物或其可药用盐和(b)可药用载体或稀释剂。
本发明还提供了含有该苯并二氮杂衍生物或其可药用盐以及可药用载体或稀释剂的药物组合物。
所述药物组合物通常含有至多85wt％的本发明化合物。更通常而言，它含有至多50wt％的本发明化合物。优选的药物组合物为灭菌的和无热原的。而且，本发明提供的药物组合物通常含有基本上为纯的旋光异构体的本发明化合物。
本发明的化合物通常与可药用载体或稀释剂配制施用。例如固体口服形式可以含有活性化合物和稀释剂，例如乳糖、葡萄糖、蔗糖、纤维素、玉米淀粉或马铃薯淀粉；润滑剂，例如二氧化硅、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁或硬脂酸钙和/或聚乙二醇；粘合剂，例如淀粉、阿拉伯胶、明胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯吡咯烷酮；崩解剂，例如淀粉、海藻酸、海藻酸盐或淀粉乙醇酸钠；泡腾混合物；染剂；甜味剂；润湿剂，例如卵磷脂、聚山梨醇酯、十二烷基硫酸盐；以及通常用于药物制剂的无毒和无药理活性的物质。该药物制剂可以以已知的方式制备，例如通过混合、制粒、压片、包糖衣或包薄膜衣方法来制备。
用于口服施用的液体分散剂可以为糖浆、乳剂和混悬剂。糖浆可以含有例如蔗糖或蔗糖与甘油和/或甘露醇和/或山梨醇作为载体。
混悬剂和乳剂可以含有例如天然胶状物、琼脂、海藻酸钠、果胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙烯醇作为载体。用于肌内注射的混悬剂或溶液可以含有活性化合物和可药用载体如灭菌水、橄榄油、油酸乙酯、二元醇例如丙二醇，以及如果需要含有适宜量的盐酸利多卡因。
用于注射或输注的溶液可以含有例如灭菌水作为载体，或优选它们可以是灭菌的水性等张盐水溶液的形式。
将治疗有效量的本发明化合物施用于患者。根据特定化合物的活性，被治疗对象的年龄、体重和状况，疾病的类型和严重性以及施用频率和途径，典型的剂量为约0.001至50mg/kg体重。优选日剂量水平为5mg至2g。
某些式(I)的苯并二氮杂衍生物本身是新的。本发明包括这些新的化合物及其可药用盐。因此，本发明还提供了式(Ib)化合物或其可药用盐，
其中R1、R3、n、R4、X和R5如上定义。
通常在式(Ib)中，R1为未取代的苯基。
通常在式(Ib)中，当A1为杂芳基时，它不是5-甲基-异唑基部分。
通常在式(Ib)中，A1为芳基或杂芳基部分。
通常在式(Ib)中，X为-CO-或-CO-NR′-，其中R′如上定义，条件是当X为-CO-NR′-时，部分-A1-Y-A2为-苯基-O-苯基。
通常在式(Ib)中，A2不是其中碳原子之一被N原子替换的4-至10-元的饱和环烷基环。具体而言，A2通常不是取代或未取代的下式部分 其中n和m相同或不同，且各自表示1-4的整数。
通常在式(Ib)中，A2为哌嗪基、吡啶基、吡咯烷基、吡嗪基、环丙基、苯基或S，S-二氧代硫吗啉代基，其为未取代的或被C1-C2烷基取代。
本发明还涉及用于在治疗人或动物身体的方法中使用的如上定义的新化合物或其可药用盐。本发明还涉及包含如上定义的新化合物以及可药用稀释剂或载体的药物组合物。优选所述药物组合物包含如上定义的新化合物的可药用盐。可药用盐如上文定义。本发明的新化合物通常以如上定义的方式施用，化合物通常以如上定义的方式施用。
优选药物组合物包含本发明的新化合物的旋光活性异构体。因此，例如仅仅含有一个手性中心的优选的本发明新化合物包括基本上纯的形式的R对映异构体、基本上纯的形式的S对映异构体和含有过量R对映异构体或过量S对映异构体的对映异构体混合物。特别优选药物含有的本发明化合物为基本上纯的旋光异构体。特此说明，如果需要的话，本发明的新化合物可以以溶剂化物形式使用。
下列实施例举例说明本发明。但是它们不以任何方式限制本发明。在此方面，以下理解是重要的用于实施例部分的特定检验仅仅设计用于提供抗RSV活性的显示。存在许多可利用的检验确定给定化合物的抗RSV活性，因此在任何特定检验中的阴性结果是不起决定作用的。
实施例中间体12-氯-4-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸将4-氨基-2-氯苯甲酸(172mg)和乙烯磺酰基乙烯(0.15ml)在含有碳酸钠(212mg)的水(3ml)中的混合物加热至100℃持续18小时。使混合物冷却，用2N HCl酸化。收集灰白色沉淀并干燥(263mg)。
LC/MS RT＝4.09分钟，ES-288，290中间体22-氯-5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸将5-氨基-2-氯苯甲酸(172mg)和乙烯磺酰基乙烯(0.15ml)在水(3ml)中的混合物加热至100℃持续18小时。使混合物冷却，用二氯甲烷萃取。蒸发经干燥的萃取液，得到浅棕色固体(265mg)。
LC/MS RT＝4.13分钟，ES-288，290中间体32-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-烟酸除使用2-氨基-烟酸(138mg)之外，按照对中间体1的描述制备该物质。分离标题化合物，为灰白色固体(93mg)。
中间体42-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-3-甲基-苯甲酸除使用2-氨基-3-甲基-苯甲酸(302mg)之外，按照对中间体2的描述制备该物质。分离标题化合物，为浅棕色固体(486mg)。
中间体52-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-甲基-苯甲酸除使用2-氨基-4-甲基-苯甲酸(302mg)之外，按照对中间体2的描述制备该物质。分离标题化合物，为棕色固体(430mg)。
中间体62-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-6-甲基-苯甲酸除使用2-氨基-6-甲基-苯甲酸(302mg)之外，按照对中间体2的描述制备该物质。分离标题化合物，为棕色固体(490mg)。
中间体73-(4-甲基-1-磺酰基)-苯甲酸将3-氯磺酰基-苯甲酸(89mg)、4-二甲基氨基-吡啶(催化量)和N-甲基哌嗪(0.045ml)在二氯甲烷(10ml)中的溶液加热至回流持续2小时。然后蒸发溶剂，粗品未经纯化或表征用于下一合成步骤。
中间体83-哌啶-1-磺酰基-苯甲酸除使用哌啶作为亲核试剂之外，按照对中间体7的描述制备该物质。与中间体7一样，使用该物质的粗品。
中间体93-(吗啉-4-磺酰基)-苯甲酸除使用吗啉作为亲核试剂之外，按照对中间体7的描述制备该物质。与中间体7一样，使用该物质的粗品。
中间体102-氯-6-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸除使用2-氨基-6-氯-苯甲酸(343mg)之外，按照对中间体2的描述制备该物质。分离标题化合物，为浅黄色固体(405mg)。
中间体115-氯-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸除使用2-氨基-5-氯-苯甲酸(200mg)之外，按照对中间体2的描述制备该物质。分离标题化合物，为白色固体(233mg)。
1H NMR(DMSO，δ)3.25(brs，4H)3.47(brs，4H)7.31(d，1H)7.54(dd，1H)7.71(d，1H)。
LC/MS RT＝4.66分钟 实测值ES+＝290，292
中间体122-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-5-氟-苯甲酸除使用2-氨基-5-氟-苯甲酸(200mg)之外，按照对中间体2的描述制备该物质。分离标题化合物，为白色固体(310mg)。
1H NMR(DMSO，δ)3.28(m，4H)3.42(m，4H)7.33-7.56(m，3H)。
LC/MSRT＝4.28分钟 实测值ES-＝272中间体134-氟-2-硫吗啉-4-基-苯甲酸将2，4-二氟-苯甲酸(0.5g)、硫吗啉(0.33ml)和三乙胺(0.88ml)在乙腈(2ml)中的混合物在微波反应器中加热至200℃持续20分钟。残余物在水和二氯甲烷之间分配。蒸发经干燥的有机层，然后在硅胶SPE短柱(cartridge)上纯化。用二氯甲烷、随后用二氯甲烷∶乙醇∶0.880氨＝800∶8∶1至200∶8∶1梯度洗脱，得到标题物质，为白色固体(292mg)。
1H NMR(DMSO，δ)2.81(m，4H)3.27(m，4H)7.11(m，1H)7.40(dd，1H)7.95(m，1H)。
中间体142-(1，1-二氧代-4-氧基-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-氟-苯甲酸将在甲醇(5ml)和水(2.5ml)中的中间体11(262mg)和过一硫酸钾(1.34g)于室温搅拌6小时。过滤收集形成的沉淀，然后溶解在碳酸氢钠水溶液中。用1M HCl酸化至pH3，形成白色沉淀成，将其收集并干燥(194mg)。
1H NMR(DMSO，δ)3.2-3.48(brm，4H)3.59(t，2H)3.89(t，2H)6.96(m，1H)7.30(dd，1H)7.85(m，1H)。
中间体156-氯-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺将外消旋的3-氨基-5-苯基-1，3-二氢-苯并[e][1，4]二氮杂-2-酮(1g)、O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸盐(1.51g)、三乙胺(0.83ml)和6-氯-烟酸(0.63g)在干燥的DMF(20ml)中的混合物于室温搅拌1.5小时。然后加入水(200ml)，剧烈搅拌混合物10分钟。过滤收集无色沉淀并干燥(1.1g)。
1H NMR(DMSO，δ)5.50(d，1H)7.28-7.71(m，10H)8.42(dd，1H)9.01(d，1H)9.99(d，1H)10.95(s，1H)。
LC/MS RT＝4.96分钟，ES+391，393中间体16硫吗啉-1，1-二氧化物将9.98g硫吗啉和14.8g三氟甲磺酸酐一起在DCM中于室温搅拌2小时。然后将反应物在1M K2CO3(水溶液)和DCM之间分配。分离有机层，穿过疏水玻璃料(frit)干燥，然后真空浓缩。将13.82g所得油与85.2g过硫酸氢钾制剂在50mL甲醇和50mL水中于室温搅拌18小时。然后过滤反应物，用甲醇洗涤，浓缩滤液。然后将其在水和EtOAc之间分配，水层用EtOAc洗涤3次。然后干燥(MgSO4)所合并的有机萃取液，浓缩得到白色固体。然后将其在室温下与在80mL甲醇中的40g K2CO3一起搅拌18小时。然后在真空下除去甲醇，将残余物在DCM和饱和K2CO3(水溶液)之间分配。将所合并的有机萃取液穿过疏水玻璃料并真空浓缩，得到标题化合物，3.51g。
1H NMR(CDCl3，δ)1.54(s，1H)，2.93-2.97(m，4H)，3.24-3.28(m，4H)。中间体175-{[(2-甲磺酰基乙基)-甲基-氨基]-甲基}-呋喃-2-甲酸乙酯在氮气氛下，将0.5g 5-氯甲基-呋喃-2-甲酸乙酯和20mL 2M甲胺的THF溶液于室温搅拌5天。然后浓缩溶液，通过SPE纯化。将所得油与在3mL乙腈中的0.2mL甲磺酰基乙烯一起于200℃微波中加热1小时。浓缩溶液，通过色谱法纯化，得到标题化合物，为无色油。
LC/MS RT＝3.55分钟，实测值ES+＝2901H NMR(CDCl3，δ)1.29(t，3H)，2.25(s，3H)，2.92-2.88(m，2H)，2.99(s，3H)，3.06-2.99(t，2H)，3.6(s，2H)，4.26(q，2H)，6.28(d，1H)，7.04(d，1H)。
中间体185-二甲基氨基甲基-呋喃-2-甲酸在氮气氛和在室温下，经30分钟将0.16mL 2M二甲胺溶液加入到搅拌的19.2mg氢化钠在2mL DMF中的混悬液中。然后经30分钟滴加5-氯甲基-呋喃-2-甲酸乙酯在2mL DMF中的溶液。然后将反应物搅拌2天。然后在真空下除去溶剂，加入5mL EtOH和0.35ml 2M NaOH，在80℃搅拌40分钟。当返回时，反应物被酸化低于pH 5.0并真空除去溶剂，得到欲被水解的标题化合物，然后在下一阶段使用粗品以类似方式制备中间体19-23，未经表征用于下一合成步骤。
中间体195-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-甲酸中间体205-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基甲基)-呋喃-2-甲酸中间体215-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸中间体225-(哌啶-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸中间体235-(吡咯烷-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸中间体243-环丙基-1，3-二氢[4，5-b]吡啶-2-酮将2-氯-3-硝基-吡啶(2g)、环丙胺(1.13ml)和碳酸钾(3.48g)在乙腈(30ml)中的混合物于室温搅拌18小时。然后将混合物在水和乙酸乙酯之间分配。蒸发经干燥的萃取液，得到亮黄色固体(2.1g)。然后在乙醇(150ml)中在披钯炭催化剂(10％，100mg)上在大气压下氢化该物质。当氢气吸收已经停止时，通过硅藻土过滤混合物，蒸发得到黑色胶状物(1.7g)。然后将该物质溶解在干燥的THF(40ml)中，用羰基二咪唑(2.2g)在回流下处理2.5小时。然后将混合物在水和乙酸乙酯之间分配。蒸发经干燥的有机萃取液，得到黑色胶状物，从乙酸乙酯/石油醚中结晶，得到无色固体(1.2g)。
1H NMR(DMSO，δ)0.97-1.04(m，4H)2.92(m，1H)6.97(dd，1H)7.22(dd，1H)7.92(dd，1H)10.95(brs，1H)中间体252-吗啉-4-基甲基-呋喃-3-甲酸甲酯将2-氯甲基-呋喃-3-甲酸甲酯(100mg)和吗啉(0.08ml)在乙腈(4ml)中的混合物于室温搅拌2小时。然后将混合物在二氯甲烷和碳酸氢钠水溶液之间分配。蒸发经干燥的有机层，得到黄色油(75mg)。
1H NMR(CDCl3，δ)2.57(m，4H)3.74(m，4H)3.86(s，3H)3.97(s，2H)6.70(d，1H)7.38(d，1H)中间体263-吗啉-4-基甲基-苯甲酸甲酯按照中间体25中所述制备该物质。产物为无色的油(210mg)。
1H NMR(CDCl3，δ)2.43(m，4H)3.53(s，2H)3.70(m，4H)3.91(s，3H)7.39(t，1H)7.42(dd，1H)7.93(dt，1H)7.99(brs，1H)中间体275-吗啉-4-基甲基-异唑-3-甲酸甲酯将在干燥氯仿(4ml)中的5-甲基-异唑-3-甲酸甲酯(200mg)、N-溴代琥珀酰亚胺(252mg)和过氧苯甲酰(30mg)搅拌并加热至85℃持续5小时。将溶液冷却至室温，用吗啉(0.27ml)处理。继续搅拌20小时，然后将混合物在水和二氯甲烷之间分配。蒸发经干燥的有机萃取液，残余物用硅胶SPE短柱纯化。用二氯甲烷、随后用二氯甲烷∶乙醇∶0.880氨＝200∶8∶1洗脱，得到无色的油(50mg)。
1H NMR(CDCl3，δ)2.46(m，4H)3.64(m，4H)3.67(s，2H)3.90(s，3H)6.55(s，1H)中间体28-30以类似于中间体25的方法制备中间体283-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-甲酸甲酯分离出该化合物，为黄色油(189mg)。
1H NMR(CDCl3，δ)2.45(m，4H)3.65(m，4H)3.71(s，2H)3.85(s，3H)6.56(d，1H)7.45(d，1H)中间体293-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸甲酯分离出该化合物，为黄色油(197mg)。
1H NMR(CDCl3，δ)2.50(m，4H)3.69(s，2H)3.72(m，4H)3.86(s，3H)6.90(d，1H)7.64(d，1H)中间体305-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸甲酯分离出该化合物，为黄色油(214mg)。
1H NMR(CDCl3，δ)2.44(m，4H)3.64(m，4H)3.79(s，3H)3.84(s，2H)7.15(d，1H)7.36(d，1H)在合成序列的最终偶联步骤使用之前，使中间体25-30水解为相应的羧酸。
中间体314-氟-2-吗啉-4-基-苯甲酸将在乙腈(0.5ml)中的2，4-二氟-苯甲酸(50mg)和吗啉(0.03ml)在微波中在200℃加热15分钟。蒸发溶剂，剩下黑色胶状物，未经纯化用于下一步骤。
中间体324-氟-2-哌啶-1-基-苯甲酸以类似于中间体31中的方法制备。
除使用2-氟-4-三氟甲基-苯甲酸之外，中间体33-5以类似于中间体31中的方法制备。
中间体332-吡咯烷-1-基-4-三氟甲基-苯甲酸中间体342-哌啶-1-基-4-三氟甲基-苯甲酸中间体352-吗啉-4-基-4-三氟甲基-苯甲酸除使用2-氟-5-三氟甲基-苯甲酸之外，中间体36和37以类似于中间体31中的方法制备。
中间体362-吡咯烷-1-基-5-三氟甲基-苯甲酸中间体37
2-吗啉-4-基-5-三氟甲基-苯甲酸除使用4-氰基-2-氟-苯甲酸之外，中间体38和39以类似于中间体31中的方法制备。
中间体384-氰基-2-吡咯烷-1-基-苯甲酸中间体394-氰基-2-哌啶-1-基-苯甲酸实施例1.
6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺将中间体15(50mg)和N-甲基哌嗪(0.022mL)在含有三乙胺(0.027mL)的乙腈(1mL)中在200℃微波中加热10分钟。然后将混合物在水和二氯甲烷之间分配。蒸发经干燥的有机层，残余物在硅键SPE短柱上纯化。用含5-10％甲醇的二氯甲烷梯度洗脱，得到无色固体(10mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.28(s，3H)2.45(m，4H)3.68(m，4H)5.56(d，1H)6.93(d，1H)7.32-7.72(m，10H)8.20(dd，1H)8.82(d，1H)9.42(d，1H)10.94(s，1H)RT＝3.94分钟，ES+455实施例23，4，5，6-四氢-2H-[1，2′]联吡啶基-5′-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用哌啶作为亲核试剂之外，该物质按照实施例1中所述制备。该产物为无色固体(15mg)。
1H NMR(DMSO，d)1.54-1.63(brm，6H)3.65(m，4H)5.48(d，1H)6.86(d，1H)7.25-7.65(m，10H)8.11(dd，1H)8.75(d，1H)9.32(d，1H)RT＝4.54分钟，ES+440
实施例3(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-苯甲酰胺将(S)-3-氨基-5-苯基-1，3-二氢-苯并[e][1，4]二氮杂-2-酮(100mg)、O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸盐(150mg)、2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸(102mg)和三乙胺(0.083ml)在干燥的DMF(1ml)中于室温搅拌1小时。然后加入水(10ml)，继续搅拌10分钟。过滤收集无色沉淀，然后在二氯甲烷和水之间分配。蒸发经干燥的有机相，残余物在硅胶SPE短柱上纯化。用乙酸乙酯∶石油醚(petrol)1∶1洗脱，得到标题化合物，为无色固体(140mg)。
1H NMR(DMSO，δ)3.49(brs，8H)5.48(d，1H)7.31-7.95(m，13H)10.86(d，1H)11.18(s，1H)实施例4(S)-2-氯-4-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用2-氯-4-吗啉-4-基-苯甲酸(86mg)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(112mg)。
1H NMR(DMSO，δ)3.21(m，4H)3.70(t，4H)5.36(d，1H)6.90-6.97(m，2H)7.21-7.66(m，10H)9.21(d，1H)10.86(s，1H)实施例5(S)-2-(1，1-二氧代-4-氧基-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-氟-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-苯甲酰胺除使用2-(1，1-二氧代-4-氧基-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸(中间体14，30mg)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(29mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.32-3.98(m，8H)5.34(d，1H)6.99(dt，1H)7.16-7.65(m，11H)9.51(d，1H)10.98(s，1H)RT＝5.09分钟，ES+523
实施例6(S)-5-氯-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用5-氯-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸(中间体11，58mg)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(70mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.54(s，8H)5.53(d，1H)7.37-7.75(m，11H)7.90(d，1H)10.84(d，1H)11.24(s，1H)。
RT＝5.38分钟，ES+523，525实施例7(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-5-氟-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用5-氟-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸(中间体12，54mg)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(70mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.49(m，8H)5.47(d，1H)7.34-7.69(m，12H)11.12(d，1H)11.20(s，1H)RT＝5.19分钟，ES+507实施例8(S)-5-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸(中间体21)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(15mg)。
1H NMR(CDCl3，d)2.23(s，3H)，2.43-2.51(m，8H)，3.56(s，2H)，5.65(d，1H)，6.29(d，1H)，7.05-7.51(m，11H)，7.92(d，1H)。
RT＝4.10分钟，ES+458实施例9(S)-5-吡咯烷-1-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-(吡咯烷-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸(中间体23)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(52mg)。
1H NMR(CDCl3，δ)1.76-1.77(m，4H)，2.60-2.62(m，4H)，3.71(s，2H)，5.64(d，1H)，6.31(d，1H)，7.05-7.50(m，10H)，7.98(d，1H)，8.04(s，1H)。
RT＝4.09分钟，ES+403实施例10(S)-5-哌啶-1-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-(哌啶-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸(中间体22)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(21mg)。
1H NMR(CDCl3，d)1.36-1.45(m，2H)，1.53-1.60(m，4H)，2.45-2.55(m，4H)，3.62(s，2H)，5.65(d，1H)，6.34(d，1H)，7.06-5.52(m，10H)，7.81-7.89(m，1H)，7.96(d，1H)。
RT＝4.16分钟，ES+443实施例11(S)-5-二甲基氨基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-二甲基氨基甲基呋喃-2-甲酸(中间体18)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(5mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.35(s，6H)，3.69(s，2H)，5.56(d，1H)，6.65(d，1H)，7.48-7.85(m，10H)，9.1(d，1H)，11.13(s，1H)。
RT＝4.09分钟，ES+403实施例12(S)-4-氟-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-哌啶-1-基-苯甲酰胺除使用4-氟-2-哌啶-1-基苯甲酸(中间体32)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(58mg)。
1H NMR(DMSO，d)1.62-1.67(m，2H)1.91-1.99(m，4H)3.08-3.16(m，4H)5.56(d，1H)7.15-7.79(m，11H)8.10-8.13(m，1H)11.08(s和d，2H)RT＝6.02分钟，ES+457实施例13(S)-4-氟-2-吗啉代-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用4-氟-2-吗啉-4-基苯甲酸(中间体31)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(19mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.94-3.00(m，4H)3.71-3.82(m，4H)5.35(d，1H)6.98-7.85(m，12H)10.52(d，1H)10.90(s，1H)RT＝5.34分钟，ES+459实施例14(S)-4-氰基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-苯甲酰胺除使用4-氰基-2-吡咯烷-1-基-苯甲酸(中间体38)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(13mg)。
1H NMR(DMSO，d)1.87(brs，4H)3.29(brs，4H)5.37(d，1H)7.01-7.65(m，12H)9.60(d，1H)10.88(s，1H)RT＝5.45分钟，ES+450实施例15(S)-4-氰基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-哌啶-1-基-苯甲酰胺除使用4-氰基-2-哌啶-1-基-苯甲酸(中间体39)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(27mg)。
1H NMR(DMSO，d)1.32-1.36(m，2H)1.58-1.67(m，4H)2.81-2.89(m，4H)5.25(d，1H)7.10-7.83(m，12H)10.70(d，1H)10.81(s，1H)RT＝5.88分钟，ES+464
实施例16(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-4-三氟甲基-苯甲酰胺除使用2-吡咯烷-1-基-4-三氟甲基-苯甲酸(中间体33)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(5mg)。
1H NMR(DMSO，d)1.89-1.92(brs，4H)3.29-3.32(brs，4H)5.40(d，1H)6.88(s，1H)6.94(d，1H)7.24-7.67(m，10H)9.56(d，1H)10.89(s，1H)RT＝5.91分钟，ES+493实施例17(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-哌啶-1-基-4-三氟甲基-苯甲酰胺除使用2-哌啶-1-基-4-三氟甲基-苯甲酸(中间体34)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(14mg)。
1H NMR(DMSO，d)1.53-1.57(m，2H)1.80-1.91(m，4H)3.00-3.14(m，4H)5.46(d，1H)7.30-7.72(m，11H)8.09(d，1H)10.98(d，1H)10.99(s，1H)RT＝6.39分钟，ES+507实施例18(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-4-三氟甲基-苯甲酰胺除使用2-吗啉-4-基-4-三氟甲基-苯甲酸(中间体35)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(14mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.18-3.24(m，4H)3.90-3.96(m，4H)5.52(d，1H)7.36-8.10(m，12H)10.59(d，1H)11.10(s，1H)RT＝5.72分钟，ES+509实施例19(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-5-三氟甲基-苯甲酰胺除使用2-吡咯烷-1-基-5-三氟甲基-苯甲酸(中间体36)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(8mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.00-2.02(brs，4H)3.40-3.43(brs，4H)5.48(d，1H)6.90(d，1H)7.34-7.74(m，11H)9.71(d，1H)10.98(s，1H)RT＝5.84分钟，ES+493实施例20(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺除使用2-吗啉-4-基-5-三氟甲基-苯甲酸(中间体37)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(19mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.13-3.18(m，4H)3.85-3.90(m，4H)5.46(d，1H)7.30-7.69(m，10H)7.88(dd，1H)8.04(d，1H)10.37(d，1H)11.04(s，1H)RT＝5.72分钟，ES+509实施例21(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺除使用2-吗啉-4-基-烟酸之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(45mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.30-3.36(m，4H)3.82-3.85(m，4H)5.45(d，1H)7.14-7.17(m，1H)7.19-7.71(m，9H)8.07(dd，1H)8.44(dd，1H)10.00(d，1H)11.05(s，1H)RT＝4.86分钟，ES+442实施例22(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺除使用2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-烟酸(中间体3)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(10mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.25(t，2H)3.40(t，2H)3.75-3.88(m，4H)5.47(d，1H)6.67-6.72(m，1H)7.28-7.67(m，8H)8.24-8.38(m，3H)9.56(d，1H)10.92(s，1H)RT＝4.43分钟，ES+508实施例23(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-3-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-3-甲基-苯甲酸(中间体4)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(65mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.36(s，3H)3.24(brs，4H)3.49(brs，4H)5.43(d，1H)7.11-7.68(m，12H)9.61(d，1H)10.99(s，1H)RT＝5.04分钟，ES+503实施例24(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-甲基-苯甲酸(中间体5)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(72mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.39(s，3H)3.44-3.54(brm，8H)5.46(d，1H)7.14(d，1H)7.31-7.69(m，10H)7.86(d，1H)10.94(d，1H)11.17(s，1H)RT＝5.20分钟，ES+503实施例25(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-6-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-6-甲基-苯甲酸(中间体6)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(32mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.27(s，3H)3.24-3.27(m，4H)3.41-3.43(m，4H)5.56(d，1H)7.03(d，1H)7.11(d，1H)7.25-7.68(m，10H)9.44(d，1H)10.96(s，1H)。
RT＝5.03分钟，ES+503实施例26(S)-2-氯-6-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用2-氯-6-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸(中间体10)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(51mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.43-3.47(m，4H)3.59-3.61(m，4H)5.63(d，1H)7.39-7.83(m，12H)9.86(d，1H)11.14(s，1H)。
RT＝5.07分钟，ES+523，525实施例27(S)-3-环丙基-2-氧代-2，3-二氢-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][14]二氮杂-3-基)-酰胺将3-环丙基-1，3-二氢[4，5-b]吡啶-2-酮(中间体24，35mg)、三乙胺(0.028ml)和三光气(20mg)在二氯甲烷(3ml)中于室温搅拌1小时。然后加入(S)-3-氨基-5-苯基-1，3-二氢-苯并[e][1，4]二氮杂-2-酮(50mg)，继续搅拌18小时。蒸发溶剂，残余物在硅胶SPE短柱上纯化。用二氯甲烷∶乙醇∶0.880氨；200∶8∶1洗脱，得到无色固体(3mg)。
1H NMR(DMSO，d)0.88-1.09(m，4H)2.92(m，1H)5.25(d，1H)7.06-7.71(m，10H)8.08(m，2H)9.94(d，1H)11.08(s，1H)RT＝4.90分钟，ES+453实施例28(S)-3-(4-甲基-哌嗪-1-磺酰基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e]氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用3-(4-甲基-哌嗪-1-磺酰基)-苯甲酸(中间体7)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为浅黄色固体(23mg)。
1H NMR(CDCl3，d)2.19(s，3H)，2.39-2.43(m，4H)，2.95-3.05(m，4H)，5.68(d，1H)，6.5(s，1H)，7.13(t，2H)，7.19(s，1H)，7.32-7.83(m，8H)，8.08-8.11(m，2H)，8.28-8.29(m，1H)。
RT＝4.25分钟，ES+518实施例29(S)-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-苯甲酸之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(46mg)。
1H NMR(CDCl3，d)2.30(s，3H)，2.50-2.54(m，4H)，3.26-3.30(m，4H)，5.70(d，1H)，6.86(d，2H)，7.14(t，1H)，7.17-7.50(m，8H)，7.74(d，1H)，7.80(d，2H)，8.25-8.40(m，1H)。
RT＝4.16分钟，ES+454实施例30(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-3-(哌啶-1-磺酰基)-苯甲酰胺除使用3-哌啶-1-磺酰基-苯甲酸(中间体8)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(35mg)。
1H NMR(CDCl3，d)1.35-1.38(m，2H)，1.57-1.65(m，4H)，2.91-2.99(m，4H)，5.70(d，1H)，7.14(t，2H)，7.19(s，2H)，7.31-7.84(m，7H)，8.04-8.12(m，2H)，8.28-8.29(m，1H)，8.41(s，1H)。
RT＝5.47分钟，ES+503实施例31(S)-3-(吗啉-4-磺酰基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用3-(吗啉-4-磺酰基)苯甲酸(中间体9)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(29mg)。
1H NMR(CDCl3，d)2.97-3.00(m，4H)，3.66-3.70(m，4H)，5.68(d，1H)，7.10-8.18(m，13H)，8.29-8.31(m，2H)。
RT＝5.06分钟，ES+505实施例32(S)-5-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-吗啉-4-基甲基呋喃-2-甲酸(中间体19)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(35mg)。
1H NMR(CDCl3，d)2.46-2.49(m，4H)，3.55(s，2H)，3.66-3.70(m，4H)，5.65(d，1H)，6.30(d，1H)，7.06-7.51(m，10H)，7.95(d，1H)，8.38(s，1H)。
RT＝4.28分钟，ES+445实施例33(S)-5-羟甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-氯甲基-呋喃-2-甲酸乙酯的水解产物之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(48mg)。
1H NMR(CDCl3，d)2.78(s，1H)，4.55-4.56(m，2H)，5.63(d，1H)，6.25(d，1H)，7.00(d，1H)，7.09(t，2H)，7.15-7.49(m，7H)，8.10(d，1H)，8.46(s，1H)。
RT＝4.54分钟，ES+376实施例34(S)-5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基甲基)-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基甲基)-呋喃-2-甲酸(中间体20)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(192mg)。
1H NMR(CDCl3，d)3.00-3.10(m，8H)，3.68(s，2H)，5.65(d，1H)，6.32(d，1H)，7.06-7.50(m，10H)，7.95(d，1H)，8.08-8.16(s，1H)。
RT＝4.65分钟，ES+493
实施例35(S)-2-氯-4-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用2-氯-4-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸(中间体1)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(41mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.15(brs，4H)3.92(brs，4H)5.41(d，1H)7.10-7.68(m，12H)9.26(d，1H)10.92(s，1H)。
RT＝4.70分钟，ES+523，525实施例36(S)-2-氯-5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用2-氯-5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-苯甲酸(中间体2)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(69mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.14(brs，4H)3.81(brs，4H)5.37(d，1H)7.08-7.63(m，12H)9.56(d，1H)10.84(s，1H)。
RT＝4.76分钟，ES+523，525实施例37(S)-5-{[2-甲磺酰基乙基)-甲基-氨基]-甲基}-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-酰胺除使用5-{[(2-甲磺酰基乙基)-甲基-氨基]-甲基}-呋喃-2-甲酸乙酯(中间体17)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(87mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.05(s，3H)，2.61(t，2H)，2.84(s，3H)，3.12(t，2H)，3.48(s，2H)，5.21(d，1H)，6.34(d，1H)，7.05-7.39(m，9H)，7.50(td，1H)，8.77(d，1H)，10.78(s，1H)。
RT＝4.78分钟，ES+495
实施例38(S)-2-吡啶-3-基-噻唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用2-吡啶-3-基-噻唑-4-甲酸之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(55mg)。
1H NMR(DMSO，d)5.64(d，1H)7.48-7.86(m，10H)8.66(dt，1H)8.73(s，1H)8.93(dd，1H)9.31(d，1H)9.47(d，1H)11.28(s，1H)。
RT＝4.70分钟，ES+440实施例39(S)-2-吡啶-4-基-噻唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用2-吡啶-4-基-噻唑-4-甲酸之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(54mg)。
1H NMR(DMSO，d)5.36(d，1H)7.19-7.58(m，9H)7.96(dd，2H)8.53(s，1H)8.69(dd，2H)9.02(d，1H)11.01(s，1H)。
RT＝4.69分钟，ES+440实施例40(S)-4-甲基-2-吡嗪-2-基-噻唑-5-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用4-甲基-2-吡嗪-2-基噻唑-5-甲酸之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(67mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.56(s，3H)5.25(d，1H)7.10-7.49(m，9H)8.58-8.63(s+dd，2H)9.16(d，1H)9.38(d，1H)10.78(s，1H)。
RT＝4.82分钟，ES+455实施例41(S)-2-吗啉-4-基甲基-呋喃-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用2-吗啉-4-基甲基呋喃-3-甲酸(中间体25)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(24mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.58(brm，4H)3.67(brm，4H)3.91(s，2H)5.45(d，1H)6.88(d，1H)7.33-7.75(m，10H)10.95(s，1H)11.01(d，1H)。
RT＝5.04分钟，ES+445实施例42(S)-3-吗啉-4-基甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺除使用3-吗啉-4-基甲基苯甲酸(中间体26)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(24mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.39(brm，4H)3.55(s，2H)3.60(brm，4H)5.51(d，1H)7.28-7.71(m，11H)7.93(s，1H)7.97(s，1H)9.50(d，1H)10.93(s，1H)。
RT＝4.86分钟，ES+455实施例43(S)-5-吗啉-4-基甲基-异唑-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-吗啉-4-基甲基-异唑-3-甲酸(中间体27)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(11mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.93(m，4H)3.46(m，4H)3.66(brs，2H)5.26(d，1H)6.77(s，1H)7.13-7.38(m，9H)9.17(d，1H)10.90(s，1H)。
RT＝4.75分钟，ES+446实施例44(S)-3-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用3-吗啉-4-基甲基呋喃-2-甲酸(中间体28)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(20mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.52(brm，4H)3.62(brs，4H)3.67(m，2H)5.39(d，1H)6.67(d，1H)7.25-7.71(m，9H)7.84(d，1H)10.93(s，1H)11.34(d，1H)。
RT＝4.96分钟，ES+445实施例45(S)-5-吡啶-2-基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-吡啶-2-基-噻吩-2-甲酸之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(32mg)。
1H NMR(DMSO，d)5.58(d，1H)7.37-7.77(m，10H)7.96-7.99(m，2H)8.10(d，1H)8.32(d，1H)8.67(d，1H)9.81(d，1H)11.03(s，1H)。
RT＝4.91分钟，ES+439实施例46(S)-2-甲基-4-(吗啉-4-磺酰基)-呋喃-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用2-甲基-4-(吗啉-4磺酰基)-呋喃-3-甲酸之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(75mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.77(s，3H)3.26(m，4H)3.85(m，4H)5.60(d，1H)7.43-7.83(m，9H)8.23(s，1H)9.68(d，1H)11.07(s，1H)。
RT＝4.90分钟，ES+509实施例47(S)-6-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺除使用6-吗啉-4-烟酸之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(28mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.58-3.61(m，4H)3.70-3.73(m，4H)5.51(d，1H)6.89(d，1H)7.24-7.71(m，9H)8.19(dd，1H)8.80(d，1H)9.39(d，1H)10.89(s，1H)。
RT＝4.59分钟，ES+442
实施例48(S)-3-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用3-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸(中间体29)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(34mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.43(m，4H)3.59(m，4H)3.70(s，2H)5.45(d，1H)7.05(d，1H)7.24-7.70(m，9H)8.05(d，1H)9.54(d，1H)10.92(s，1H)。
RT＝5.02分钟，ES+461实施例49(S)-5-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺除使用5-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸(中间体30)之外，该物质按照实施例3中所述制备。标题化合物为无色固体(41mg)。
1H NMR(DMSO，d)2.28(brm，4H)3.38(brm，4H)3.56(s，2H)5.16(d，1H)6.90(d，1H)7.04-7.44(m，9H)7.52(d，1H)10.68(s，1H)11.82(d，1H)RT＝5.33分钟，ES+461实施例502-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)苯甲酰胺除使用2-吗啉-4-基苯甲酸(49mg)之外，该物质按照中间体15中所述制备。产物为无色固体(33mg)。
1H NMR(DMSO，d)3.01-3.12(m，4H)3.86-3.93(m，4H)5.44(d，1H)7.21-7.71(m，12H)7.93(dd，1H)10.99(d，1H)11.02(s，1H)RT＝5.47分钟，ES+441实施例51(S)-5-苯基-唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺将(S)-3-氨基-5-苯基-1，3-二氢-苯并[e][1，4]二氮杂-2-酮(60mg)、三乙胺(0.037ml)和5-苯基-唑-4-碳酰氯(50mg)在THF(3ml)中于室温搅拌2小时。然后将混合物在水和二氯甲烷之间分配。蒸发经干燥的有机相，残余物在硅胶SPE短柱上纯化。用二氯甲烷∶乙醇∶0.880氨＝400∶8∶1洗脱，得到标题化合物，为无色固体(42mg)。
1H NMR(DMSO，δ)5.40(d，1H)7.27-7.70(m，12H)8.22-8.26(m，2H)8.72(s，1H)8.88(d，1H)11.14(s，1H)RT＝5.22分钟，ES+423.49实施例521-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-3-(4-苯氧基苯基-脲将外消旋的3-氨基-5-苯基-1，3-二氢-苯并[e][1，4]二氮杂-2-酮(30mg)和1-异氰酸根-4-苯氧基-苯(0.022ml)在干燥的THF(4ml)中于室温搅拌18小时。然后将混合物在水和二氯甲烷之间分配。蒸发经干燥的有机层，残余物在二氯甲烷/乙醚中研磨，得到标题化合物，为白色固体(25mg)。
1H NMR(DMSO，d)5.23(d，1H)6.98-7.03(m，3H)7.11(t，1H)7.33-7.58(m，13H)7.71(dt，1H)9.18(s，1H)11.03(brs，1H)RT＝5.57分钟，ES+463.45活性实施例1通过邻苯二胺二盐酸盐(OPD)底物向有色产物的纯化，使用RSV的磷蛋白(P)、核壳(N)&融合(F)蛋白的鼠单克隆抗体和兔抗鼠辣根过氧化物酶(HRP)缀合二级抗体来证明RSV抗原的减少。通过光密度(OD)测定进行定量。
使用平底96-孔板的所有96个孔设置该检验。在3天检验期间，外侧的孔没有受到比内侧的孔多的蒸发量(即未观察到“边缘效应”)。
在加入病毒和化合物前一天将平板设置。然后进行检验3天，在第四天进行ELISA显影。
第0天检验板的设置在微量滴定板的所有96个孔中，在100μl/孔生长培养基(GM)中以4×103Hep-2个细胞/孔进行接种，所述生长培养基(GM)由含有Glutamax-1、丙酮酸钠、1000mg/l葡萄糖和吡哆醇(Invitrogen，目录号21885-025)并补充有10％FBS的Dulbecco′s MEM(DMEM)组成。(参见平板1)。
在组织培养中，细胞粘附于组织培养瓶上，在37℃和5％CO2生长至90％汇合。
用20ml灭菌PBS洗涤单层以除去血清，用1ml胰蛋白酶处理以从培养瓶上分离细胞。
将细胞悬浮在少量已知体积的生长培养基中，用血细胞计数器计数。将细胞悬浮液在生长培养基中配成所需浓度，通过多通道移液管加入各孔中。简言之，轻轻摇动以使细胞在各孔中更均匀地分散。
平板1
将平板在37℃和5％CO2气氛下保持24小时不受干扰，在此期间细胞栖息形成均匀的细胞单层。
第1天加入病毒将RSV(由Virogen Ltd提供的RSS品系)储备液的冷冻小瓶从-80冰箱或液氮储藏室中取出，在生长培养基中稀释至已知的感染复数(m.o.i)。
通过以前对病毒储备液的滴定(采用ELISA检验方法)计算m.o.i.，因此病毒输入要求在感染和未受感染的对照孔之间获得至少0.8OD单位的窗口。
通过多通道移液管将50μl稀释病毒加入受感染(“病毒+”)孔中；通过多通道移液管将50μl生长培养基加入未受感染的细胞对照孔(CC)中。(参见平板2)。
平板2
平板面用条纹标记以在分离盖子时识别平板。
将平板在37℃培养1小时，使病毒吸附。
化合物稀释将化合物以4×浓度配制在含有2％DMSO(在检验中最终DMSO浓度为0.5％)的GM中。
如下所示，在各检验板上测试6种化合物(参见平板3)。在一式两份的孔中跨越7-点稀释系列(50μM-0.78μM)测试化合物有病毒存在。
受病毒感染的未经处理的孔用作病毒对照(VC)；未受感染的未经处理的孔用作细胞对照(CC)。CC和VC孔之间的吸收度差异构成检验窗口。
平板3
注释Cpd＝化合物稀释板的设置将化合物如下在分离的微量滴定板中系列稀释。(参见平板4)除“50μM”或第一栏孔中加入392μl GM外，其它所有孔中加入200μl含有2％DMSO的GM。从溶化的Arrow筛选板中挑选出各8μl的测试化合物，转移至“50μM”栏的适宜孔中。因为化合物储备液在100％DMSO中为10mM浓度，所以这将维持DMSO水平在最高化合物浓度时为2％。
采用多通道移液管，从50μM栏转移200μl至25μM栏，然后转移至12.5μM栏，如此类推跨越稀释板，产生一系列双倍稀释。在转移时将化合物混合，在转移之间更换转移端头，还确保没有化合物被转移到不含化合物的最后一栏孔中(0μM)。
平板4
注释Cpd＝化合物；BL＝空白孔化合物的加入将稀释板转动为长方向，通过多通道移液管将50μl化合物容易地由稀释板逐栏转移至检验板。因此，在稀释板中有100μl的过量剩余。
将平板在37℃和5％CO2下培养3天。
ELISA阶段第4天将培养基直接从各孔抽入至Virkon(1％水溶液)中，通过浸入含PBS的塑料盒中洗涤平板。通过多通道移液管加入50μl/孔的75％/25％体积/体积丙酮/甲醇定影液，放置3分钟。
将丙酮/甲醇从孔中弃去进入Virkon中，各孔如上所述用PBS洗涤。
通过多通道移液管向每孔加入200μl封闭溶液(2％，Marvel在含有0.05％Tween的PBS中的溶液)。将平板在37℃和振荡培养仪中培养60分钟。
将封闭溶液弃入水槽，将稀释的一级抗体直接加入孔中(即无需洗涤)。
将RSV鼠单克隆抗体NCL-RSV3(Novocastra)以1/400在PBS/2％Marvel/0.05％Tween中稀释，每孔加入50μl。将平板在37℃和振荡培养仪中培养90分钟。
将抗体弃入水槽，平板通过浸入PBS/0.05％Tween中洗涤4次。
将DAKo兔抗鼠HRP缀合物(DAKO目录号P0260)以1/1000在PBS/2％Marvel/0.05％Tween中稀释，每孔加入50μl。将平板在37℃和振荡培养仪中培养60分钟。
将抗体弃入水槽，平板通过浸入PBS/0.05％Tween中洗涤6次。
通过将1片脲片剂溶于20mL水中预先准备底物(SigmaFast OPD)。临用前将1片OPD片剂加入脲溶液中(NB.OPD是光敏的)并涡流混合。每孔加入50μl底物。
一旦出现充分的颜色但同时细胞对照背景仍然是浅色的时(～5分钟)，加入25μl/孔20％硫酸终止反应。
在SpectraMax(Molecular Devices)分光光度计上于490nm波长对平板读数，利用SOFTmax Pro软件包。
将孔排空，用自来水洗涤，单层用50μl/孔的结晶紫在20％甲醇/水中的溶液(2％)染色至少1小时。然后洗涤孔，风干，将单层在显微镜下检查细胞毒性的指示。
结果SOFTmax数据文件以Excel输出，数据处理采用Excel模板以小时-剂量响应曲线给出，从所得曲线计算IC50值。
对所有一式两份的孔计算平均值。通过从平均病毒对照(VC)中减去平均细胞对照(CC)计算检验窗口。对于各化合物，从各浓度点的平均值中减去平均CC。然后计算各浓度点的对照％，以窗口百分数表示。
将对照％对化合物浓度作图。将曲线拟合为直线，采用斜率和截距函数计算IC50。
A＜5μMB＝5-10μMC＞10μM
权利要求
1.化合物在制备用于治疗或预防RSV感染的药物中的用途，所述化合物为(a)式(I)的苯并二氮杂衍生物或其N-氧化物或者(b)其可药用盐， 其中-R1表示C1-6烷基、芳基或杂芳基；-R2表示氢或C1-6烷基；-R3各自相同或不同，表示卤素、羟基、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、C1-6卤代烷基、C1-6卤代烷氧基、氨基、单(C1-6烷基)氨基、二(C1-6烷基)氨基、硝基、氰基、-CO2R′、-CONR′R″、-NH-CO-R′、-S(O)R′、-S(O)2R′、-NH-S(O)2R′、-S(O)NR′R″或-S(O)2NR′R″，其中R′和R″各自相同或不同，表示氢或C1-6烷基；-n为0-3；-R4表示氢或C1-6烷基；-X表示-CO-、-CO-NR′-、-S(O)-或-S(O)2-，其中R′为氢或C1-C6烷基；且-R5表示芳基、杂芳基或杂环基，其C1-C6羟基烷基或-(C1-C4烷基)-X1-(C1-C4烷基)-X2-(C1-C4烷基)取代，其中X1表示-O-、-S-或-NR′-，其中R′表示H或C1-C4烷基，且X2表示-CO-、-SO-或-SO2-，或者R5表示-A1-Y-A2，其中-A1为芳基、杂芳基、碳环或杂环基团；-Y表示直键或C1-C4亚烷基、-SO2-、-CO-、-O-、-S-或-NR′-部分，其中R′为C1-C6烷基；且-A2为芳基、杂芳基、碳环或杂环基团。
2.权利要求1的用途，其中R1为C1-2烷基或苯基。
3.权利要求1或2的用途，其中R2为氢。
4.前述权利要求任一项的用途，其中R3为卤素、羟基、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4烷硫基、C1-4卤代烷基、C1-4卤代烷氧基、氨基、单(C1-4烷基)氨基或二(C1-4烷基)氨基。
5.权利要求4的用途，其中R3为氟、氯、溴、C1-2烷基、C1-2烷氧基、C1-2烷硫基、C1-2卤代烷基、C1-2卤代烷氧基、氨基、单(C1-2烷基)氨基或二(C1-2烷基)氨基。
6.前述权利要求任一项的用途，其中R4为氢或C1-2烷基。
7.前述权利要求任一项的用途，其中X为-CO-或-CO-NR′-，其中R′表示氢或C1-C2烷基。
8.前述权利要求任一项的用途，其中R5为5-或6-元杂环基或杂芳基环，其被C1-C6羟基烷基或-(C1-C4烷基)-X1-(C1-C4烷基)-X2-(C1-C4烷基)取代，其中X1和X2如权利要求1所定义。
9.权利要求8的用途，其中R5为5-或6-元杂芳基，其被-CH2-OH或-(C1-C4烷基)-NR′-(C1-C4烷基)-S(O)2-(C1-C4烷基)取代，其中R′为氢或C1-C2烷基。
10.前述权利要求任一项的用途，其中A1为芳基或杂芳基。
11.权利要求10的用途，其中A1为苯基、单环5-或6-元杂芳基或者与被氧代基取代的单环5-至6-元杂环基稠合的5-至6-元杂芳基。
12.前述权利要求任一项的用途，其中A1为未取代的或被1或2个选自卤素、氰基、硝基、C1-C4烷基、C1-C4卤代烷基和C1-C4烷氧基的取代基取代。
13.前述权利要求任一项的用途，其中Y表示直键、C1-C2亚烷基、-SO2-或-O-。
14.前述权利要求任一项的用途，其中A2为苯基、5-至6-元杂芳基、5-至6-元杂环基或C3-C6环烷基。
15.前述权利要求任一项的用途，其中当A2为杂环基时，它通过N原子与Y部分连接。
16.前述权利要求任一项的用途，其中A2为未取代的或被1或2个取代基取代，其中当A2为杂芳基或芳基时，所述取代基选自C1-C4烷基和卤素，当A2为碳环或杂环基团时，所述取代基选自C1-C4烷基、卤素和氧代基。
17.前述权利要求任一项的用途，其中A2为哌嗪基、吡啶基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、吡嗪基、环丙基、苯基或S，S-二氧代硫吗啉代基，其为未取代的或被C1-C2烷基取代。
18.前述权利要求任一项的用途，其中式(I)的苯并二氮杂衍生物为式(Ia)的苯并二氮杂衍生物 其中-X为-CO-或-CO-NH-；且-R5为5-至6-元杂芳基，例如呋喃基，其被-CH2-OH或-(C1-C4烷基)-N(CH3)-(C1-C4烷基)-SO2-(C1-C4烷基)取代，或者R5表示-A1-Y-A2，其中-A1为苯基、吡啶基、呋喃基、噻唑基、唑基、异唑基、噻吩基或1H-咪唑并[4，5-b]吡啶-2-(3H)-酮部分，其为未取代的或被1或2个选自卤素、氰基、C1-C2烷基、C1-C2卤代烷基和C1-C2烷氧基的取代基取代；-Y为直键、C1-C2亚烷基、-SO2-或-O-；且-A2为哌嗪基、吡啶基、吗啉基、吡咯烷基、哌啶基、吡嗪基、环丙基、苯基或S，S-二氧代硫吗啉代基，其为未取代的或被C1-C2烷基取代。
19.前述权利要求任一项的用途，其中所述药物用于治疗如下患者两岁以下的儿童，受累于哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)或免疫缺陷的成人，老年人，或者长期需要护理设施的人。
20.权利要求19的用途，其中所述儿童患有慢性肺部疾病。
21.权利要求1-18任一项的用途，其中所述药物用于在妊娠32周或更早时出生的6岁以下的幼儿中预防RSV感染。
22.前述权利要求任一项的用途，其中药物适于经鼻内或支气管内施用。
23.前述权利要求任一项的用途，其中所述药物还包含抗炎化合物或抗流行性感冒化合物。
24.权利要求23的用途，其中抗炎化合物为布地奈德或氟替卡松。
25.权利要求23的用途，其中抗炎化合物为白三烯拮抗剂、磷酸二酯酶4抑制剂或TNFα抑制剂。
26.权利要求23的用途，其中抗炎化合物为白介素8或白介素9抑制剂。
27.权利要求1-22任一项的用途，其中所述药物与权利要求24-26任一项所定义的抗炎化合物或抗流行性感冒化合物共同施用。
28.治疗患有或易患有RSV感染的患者的方法，该方法包含给所述患者施用有效量的权利要求1-18任一项定义的化合物。
29.权利要求28的方法，其中所述患者为权利要求19-21任一项定义的患者。
30.权利要求28或29的方法，其中所述化合物经鼻内或支气管内施用。
31.含有药物的吸入器或喷雾器，所述药物包含(a)权利要求1-18任一项所定义的化合物，和(b)可药用载体或稀释剂。
32.产品，包含权利要求1-18任一项所定义的化合物和权利要求24-26任一项所定义的抗炎化合物或抗流行性感冒化合物。
33.权利要求32的产品在制备药物中的用途，所述药物用于治疗并发的RSV和流行性感冒感染。
34.权利要求1-18任一项所定义的化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗人肺间质病毒、麻疹、副流感病毒、流行性腮腺炎、黄热病病毒(B5品系)、登革热2病毒或西尼罗河病毒。
35.化合物，其为(a)式(Ib)的苯并二氮杂衍生物或其N-氧化物或者(b)其可药用盐， 其中R1、R3、n、R4、X和R5如权利要求1-18任一项中定义。
36.权利要求35的化合物，其中R1为未取代的苯基。
37.权利要求35或36的化合物，其中当A1为杂芳基时，它不是5-甲基-异唑基部分。
38.权利要求35-37任一项的化合物，其中A1为芳基或杂芳基部分。
39.权利要求35-38任一项的化合物，其中X为-CO-或-CO-NR′-，其中R′如权利要求1-18任一项所定义，条件是当X为-CO-NR′-时，-A1-Y-A2部分为-苯基-O-苯基。
40.权利要求35-39任一项的化合物，其中A2不是其中碳原子之一被N原子替换的4-至10-元的饱和环烷基环。
41.权利要求35-40任一项的化合物，其中A2为哌嗪基、吡啶基、吡咯烷基、吡嗪基、环丙基、苯基或S，S-二氧代硫吗啉代基，其为未取代的或被C1-C2烷基取代。
42.权利要求35的化合物，其中式(Ib)的苯并二氮杂衍生物为6-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺；3，4，5，6-四氢-2H-[1，2′]联吡啶基-5′-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-苯甲酰胺；(S)-2-氯-4-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-氟-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-苯甲酰胺；(S)-5-氯-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-5-氟-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-(4-甲基-哌嗪-1-基甲基)-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-吡咯烷-1-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-哌啶-1-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-二甲基氨基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-4-氟-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-哌啶-1-基-苯甲酰胺；(S)-4-氟-2-吗啉代-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-4-氰基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-苯甲酰胺；(S)-4-氰基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-哌啶-1-基-苯甲酰胺；(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-4-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-哌啶-1-基-4-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-4-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-2-吡咯烷-1-基-5-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-5-三氟甲基-苯甲酰胺；(S)-2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-3-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-4-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-6-甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-氯-6-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-3-环丙基-2-氧代-2，3-二氢-咪唑并[4，5-b]吡啶-1-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-3-(4-甲基-哌嗪-1-磺酰基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-4-(4-甲基-哌嗪-1-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-3-(哌啶-1-磺酰基)-苯甲酰胺；(S)-3-(吗啉-4-磺酰基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-羟甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基甲基)-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-氯-4-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-2-氯-5-(1，1-二氧代-1λ6-硫吗啉-4-基)-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-{[(2-甲磺酰基乙基)-甲基-氨基]-甲基}-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基-酰胺；(S)-2-吡啶-3-基-噻唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-吡啶-4-基-噻唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-4-甲基-2-吡嗪-2-基-噻唑-5-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-吗啉-4-基甲基-呋喃-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-3-吗啉-4-基甲基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-苯甲酰胺；(S)-5-吗啉-4-基甲基-异唑-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-3-吗啉-4-基甲基-呋喃-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-吡啶-2-基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-2-甲基-4-(吗啉-4-磺酰基)-呋喃-3-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-6-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-烟酰胺；(S)-3-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；(S)-5-吗啉-4-基甲基-噻吩-2-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；2-吗啉-4-基-N-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)苯甲酰胺；(S)-5-苯基-唑-4-甲酸(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-酰胺；或1-(2-氧代-5-苯基-2，3-二氢-1H-苯并[e][1，4]二氮杂-3-基)-3-(4-苯氧基-苯基)-脲。
43.权利要求35-42任一项的化合物，用于在治疗人或动物身体的方法中使用。
44.药物组合物，包含权利要求35-43任一项的化合物和可药用稀释剂或载体。
45.权利要求44的组合物，包含权利要求35-42任一项的化合物的旋光活性异构体。
46.权利要求44或45的组合物，其为片剂、糖锭剂、锭剂、水性或油性混悬剂、可分散的散剂或颗粒剂的形式。
全文摘要
化合物在制备药物中的用途，所述化合物为(a)式(I)的苯并二氮杂衍生物或其N－氧化物或(b)其可药用盐，所述药物用于治疗或预防RSV感染，其中R
文档编号A61P31/12GK1929848SQ200580008070
公开日2007年3月14日 申请日期2005年3月18日 优先权日2004年3月19日
发明者V·多德尔, M·卡特, D·阿伯, E·亨德森 申请人:阿罗医疗有限公司
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