16α－甲基或乙基取代的雌激素的制作方法
专利名称：16α－甲基或乙基取代的雌激素的制作方法
技术领域：
本发明涉及16α-取代的甾族化合物，涉及用这类化合物激活雌激素受体的方法，还涉及这类化合物在生产用于雌激素受体相关处理的药物中的应用。
具有雌激素活性的甾族化合物长期适用于治疗各种医疗指征和避孕体制。尽管该领域历史悠久，仍需要比现有化合物更有效的、更安全的和更经济的化合物。鉴于其它领域中保健的进展(它导致日益延长的寿命)，这种需要更为迫切。对于绝经期雌激素急剧减少的妇女来说，这尤其成问题，并且对骨强度和心血管功能具有副作用。就雌激素处理来说，可应用具有高度活性的雌激素16α-取代的雌激素甾族化合物，例如，描述于Fevig等[甾族化合物(Steroids)51pp471～497,1988]、DE 2757157、US 3,704,253和Takikawa等[甾族化合物研究(Res.Steroids)Vol 7，pp291～299，1977]。还有从Tedesco等[生物有机化学和医学化学通讯(Bioorganic & Medicinal ChemistryLetters)Vol7，No22，pp2919～2924，1997]已知的7α，11β-二取代的雌激素，不过，该领域中进一步的进展仍是可能的。雌激素受体亚类[存在这类受体的α-亚类(ERα)和β-亚类(ERβ)]的发现为更选择性的激活那两种受体中的一种特定亚类提供了可能性，本质上导致更有效的处理或更少副作用的处理。特别是描述于González等(甾族化合物，Vol.40；171～187；1982)中的16β-甲基-雌激素，但是具有16β-构型的化合物通常没有本发明化合物那样的有利的选择效果。
本发明基于对α-亚类雌激素受体具有意外选择性的化合物的发现。本发明获得了式1的16α-取代的甾族化合物， 式1其中虚线环(所谓的A环)是具有Δ5-10双键的完全饱和的，完全芳族的或饱和的环；R1是(C1～C3)烷基或(C2～C3)烯基，并且这些基的每一个可被一个或多个卤素取代；R2是(C1～C4)烷基，(C2～C4)烯基或亚甲基，并且这些基的每一个可被一个或多个卤素取代；R3是甲基或乙基。
3位和7位(对于它们来说，没有规定式1中的立体化学)的键相对于所述甾族化合物骨架可以独立处于α或β位。显然，当R2是亚甲基时，11位的键并不意味着呈β构型。
R2中优选的卤素是氯或氟。
对R2优选的选择是(C1～C2)烷基或乙烯基。
当然，本发明还获得上文定义的化合物的前体药物。
将前体药物定义为一种化合物，它在接受者的体内转化为式1定义的化合物。值得注意的是，上式中绘出的羟基可以例如被烷基*氧、烯基*氧、酰基*氧、芳酰基氧、烷*氧基羰基氧、磺酰基或磷酸根取代，于是，不认为星号(*)标示的基的碳链长度受严格的限制，而芳酰基通常将包含苯基、吡啶基或嘧啶基。优选的前体药物是处于一个或两个羟基上的羧酸酯或烷基醚，而更优选的前体药物是(C2～C6)羧酸酯，例如(异)丁酸酯，或是(C1～C4)烷基醚。根据所要求的前体药物的性能选定烷基、烯基和酰基的长度，所以，更长链的前体药物(例如，十二烷基或己酰基链)更适合缓释制剂和长效制剂。已知这样的取代基自发水解或者被酶促水解成化合物骨架上的游离羟基取代基。这样的前体药物将具有的生理活性比得上它们在接受者体内被转化成的化合物。前体药物被转化成的活性化合物称为母体化合物。前体药物在体内的作用开始和作用持续时间以及在体内的分布可能与母体化合物的这类性能不同。至于其它类的前体药物，应该认识到，式1中的羟基可由接受者的代谢系统放置在适当位置。所述羟基对于雌激素受体的亲和性来说是重要的。所以，如式1定义、但是缺少一个或两个羟基的化合物也可用作本发明的化合物，而这样的化合物被称为前体药物。
本说明书中应用的其它术语具有下列含义烷基是支化的或非支化的烷基，例如，甲基，乙基，丙基，丁基或仲丁基；烯基是支化的或非支化的烯基，例如，乙烯基，2-丁烯基等；卤素指氟，氯，溴和碘；芳酰基表示芳基羰基，例如，苯甲酰基；芳基是单环或多环的，碳环或杂环的芳环体系；酰基是烷基羰基。
前缀(C1～C4)、(C2～C4)等具有常规含义而将指示的基的含义限定在分别具有1～4、2～4个碳原子等的那些。
本发明化合物的选择性雌激素受体亲和性分布使它们适用于治疗。所述化合物适用作改良的雌激素，在该意义上它们可用于雌激素受体相关的医疗(例如，关于避孕的那些)，或者用于治疗或预防良性的前列腺肥大、心血管障碍、绝经病、骨质疏松症、雌激素依赖性肿瘤控制或中枢神经系统障碍(例如，抑郁症或早老性痴呆)。
因此，本发明涉及本发明的化合物在生产用于选择性雌激素受体相关处理的药剂中的应用。选择性雌激素受体相关的处理是通过α-亚类雌激素受体的激活达到的。这样的药剂可用于治疗雌激素受体相关的障碍，例如，绝经周的(perimenopausal)病和/或绝经后的病，还使得所述药剂通常适合激素补偿疗法(HRT)的领域。所述处理包括，对具有两亚类受体的生物施用本发明的化合物。所以，本发明还涉及选择性激活α-亚类雌激素受体的处理方法，它包括，对接受者以合适的量施用本发明的化合物。这样的处理方法适合绝经周的病和/或绝经后的(更年期的)病的医疗指征和骨质疏松症，即，激素补偿疗法领域内的处理方法。
一种可成为选择性雌激素处理的接受者的生物可以是动物或人类，而且通常将是需要雌激素处理的雌性动物或妇女。
通过生产药物组合物将大为有助于施用本发明的化合物。因此，本发明还涉及一种药物组合物，它包含与药物上可接受的辅剂混合的本发明化合物。
在一个特定的方面，本发明涉及本发明的化合物在生产具有避孕活性的药剂中的应用。所以，本发明还涉及如本领域中常见的孕激素和雌激素避孕的医疗指征(即，一种避孕方法)，它包括，对接受者以合适的量施用本发明的化合物，所述接受者是妇女或雌性动物，其中，所述雌激素是本文前述的化合物(呈合适的药物剂型)。
本发明的化合物可通过通常的甾族化合物的有机化学技术中已知的各种方法生产。向甾族化合物引入16α甲基或乙基容易通过有机合成文献中已知的方法进行。通常，C-16位上的阴离子可通过用适当的碱[例如有机仲胺(二异丙胺或六甲基二硅烷基胺)的碱金属盐]处理C-17-酮而形成。用烷基化剂(例如，烷基卤)处理这些阴离子导致所需的16α-烷基化甾族化合物。可应用烷基化的备选方法，例如，开始将C17-羰基甾族化合物转化成相应的腙，接着形成C16-阴离子，烷基化，随后通过腙的解离释放羰基。备选地，通过用碱金属共轭还原Δ15-烯-17-酮甾族化合物而形成16位的阴离子。更具体地说，可应用下文的方案和实施例中阐述的合成途径。
酯前体药物可通过具有游离羟基的化合物的酯化来制备，即，与适当的酰氯在吡啶中反应。
制备药物组合物的方法被描述于标准文献Gennaro等，Remmington’s Pharmaceutical Sciences，(第18版，Mack publishingCompany，1990，尤其参见Part8药物制剂及其生产)，而合适的辅剂可见于例如，药物赋形剂手册(Handbook of PharmaceuticalExcipients)(第2版，A.Wade和P.J.Weller编辑；美国药物协会；Washington；The Pharmaceutical Press；London，1994)。可将本发明的化合物和药物上可接受的辅剂的混合物压制成固体单元剂量，例如，丸剂、片剂，或者加工成胶囊或栓剂。通过药物上合适的液体，所述化合物还可用作呈溶液、悬浮液、乳液形式的注射制剂，或者作为喷雾剂(例如，喷鼻剂)。至于制备单元剂量(例如，片剂)，预计应用常规添加剂，例如，填料、着色剂、聚合物粘合剂等。通常，可应用不干扰所述活性化合物的功能的任何药物上可接受的添加剂。本发明的化合物还可含于植入物、阴道环、膜片、凝胶和任何其它缓释制剂中。
可与所述组合物一起施用的合适的载体包括以合适的量应用的乳糖、淀粉、纤维素衍生物等，或其混合物。
本发明的处理方法包括，对动物或人施用如前述的化合物(呈合适的药物剂型)。本发明化合物的合适的剂量将是雌激素化合物的常规数量级，例如，每次施用大约0.01～100mg。
下文参照一些非限制性实施例和涉及的相应结构式示意图进一步阐述了本发明。
然后将反应物倾入水中，用乙酸乙酯萃取，提供9.5g14。NMR3.59(t，CHOH)；2.98(m，H11)，0.92(s，CH3)。化合物15向9.5g14的100ml丙酮溶液中添加8ml 6N HCl。搅拌2h后。用NaHCO3中和该混合物并浓缩至小体积，用水稀释，用乙酸乙酯萃取。这样提供8.2g无色无定形物质15。NMR 5.68(m，H4)；3.10(m，H11)，3.65(m，CHOH)。化合物16在-70℃下，将8.2g15的100ml干THF溶液添加到500ml液态NH3。用一定量的锂金属(约500mg)处理该混合物直至反应混合物的蓝色保持至少15min。通过添加一部分NH4Cl而猝灭反应。
用水稀释蒸发NH3后保留的残余物，用乙酸乙酯萃取。通过色谱法纯化而提供4.0g无色油状16；Rf0.55(庚烷/乙酸乙酯1/1 v/v)。NMR2.80(ab，位于C4的CH2)；0.93(s，CH3)。化合物17向4.0g16的80ml甲醇溶液中添加6ml原甲酸三甲酯，接着添加0.8g甲苯磺酸。搅拌2hr后缩酮化反应完毕。用6ml吡啶处理该混合物并浓缩到小体积。用水稀释残余物，用乙酸乙酯萃取。残余物4.7g，由几乎纯净的17构成；薄层色谱，Rf0.78(庚烷/乙酸乙酯1/1，v/v)。NMR3.22，3.25(2xs，OCH3)。化合物18向33g17的50ml丙酮溶液中添加6g分子筛(4A)，接着添加3.2g N-甲基吗啉-N-氧化物和150mg过钌酸四丙基铵(tetrapropylammonium perruthenate)。将混合物搅拌1h。往反应混合物中添加5g硅胶，接着添加50ml庚烷，又搅拌5min。将混合物滤过白色硅藻土载体(hy-flow)，部分浓缩后，将它吸收于乙酸乙酯中，用水洗涤，再浓缩。将残余物通过短二氧化硅柱而提供2.9g18。Rf0.52(庚烷/乙酸乙酯7/3)。NMR1.02(s，CH3)。化合物19为了乙炔基化，从二溴乙烯和丁基锂制备了乙炔化锂。
在-70℃下，向0.74ml 1，2-二溴乙烯的20ml THF溶液中添加11ml 1.6M BuLi的己烷溶液。搅拌15min后，添加800mg18的2ml THF溶液。在15min内使混合物暖至室温，在室温下又过了15min后，用水猝灭反应，用乙酸乙酯萃取产物。浓缩，随后通过短硅胶柱而给出810mg白色无定形物质19。Rf0.48(庚烷-乙酸乙酯7/3)，Rf原料0.52。NMR2.61(s，乙炔)。化合物20
向3.2g19在60ml乙醇的悬浮液中添加溶于16ml水的0.16g草酸。混合物被搅拌2.5hr后逐渐变得均匀。用NaHCO3处理反应混合物并浓缩至小体积。然后添加水，用乙酸乙酯萃取产物。将这样分离的粗产物通过短硅胶柱，从二异丙醚中结晶而提供2.3g20，Mp136℃。Rf0.66(庚烷-乙酸乙酯1/1)。NMR2.78(ab，2，H4)；2.61(s，乙炔)。化合物21，22向1g20的12ml THF溶液中添加1.6g三叔丁氧基氢化铝锂。在室温下搅拌1h后，用水处理混合物并通过添加2N HCl中和。用乙酸乙酯萃取产物，在硅胶上进行色谱处理(庚烷/乙酸乙酯8/2作为洗脱剂)。这样提供了0.56g 3β醇21(Mp121～123℃)和0.24g 3α醇22(Mp84～87℃)。Rf0.53(21)和0.45(22)，庚烷/乙酸乙酯1/1。NMR(3αOH)3.82(m，CHOH)；(3βOH)4.08(m，CHOH)。化合物23在-40℃下，向六甲基二硅烷基氨化锂(lithiumhexamethyldisilazide)(从1.9ml 1.6M BuLi-己烷溶液和0.71ml六甲基二硅烷基胺的4ml干THF溶液制备的)的溶液中添加1g18和0.7ml DMPU的5ml THF溶液。在-40℃下将混合物搅拌0.5hr，然后通过注射器添加225μl CH3I。在-40℃下又搅拌0.5h后反应完毕。用水稀释混合物，用乙酸乙酯萃取产物。将这样分离的粗产物进行色谱处理而给出1.3克23，Rf0.43(庚烷/乙酸乙酯8/2)。NMR1.10(d，3，16αCH3)，1.06(s，3，CH3)，3.23(2x s，6，OCH3)，5.0(m，2，烯丙基CH2)，5.78(m，1，烯丙基CH)。化合物24按关于制备19所述的方法，将1.3g23转化成所需的24，从而提供1.2g，Rf0.46(庚烷/乙酸乙酯7/3)Rf(23)0.55。NMR2.66(s，1，乙炔)，1.06(s，3，CH3)，1.17(d，3，16αCH3)。化合物25向800mg24的20ml乙醇溶液中添加80mg草酸的5ml水溶液。将混合物搅拌1h，然后添加NaHCO3中和。用水稀释并用乙酸乙酯萃取后，获得0.7g25晶体物质。Rf0.47(庚烷/乙酸乙酯7/3)。NMR2.78(AB，2，H4)，1.08(s，3，CH3)，1.18(d，3，16αCH3)，2.67(s，1，乙炔)。化合物26，27向725mg25在20ml 1/1乙醇和THF混合物中的溶液中添加130mg硼氢化钠。搅拌1h后，添加2ml丙酮以破坏一些过量的试剂。15min后，将混合物倾入水中，用乙酸乙酯萃取产物。通过色谱法在硅胶上纯化这样获得的物质，用二氯甲烷-丙酮或己烷-乙酸乙酯作为洗脱剂。这样给出300mg27(3α-OH)和75mg26(3β-OH)。Rf(26)0.47(二氯甲烷/丙酮95/5)。Rf(27)0.54(二氯甲烷/丙酮95/5)。NMR(27)3.82(m，1，3βH)，2.75(s，1，乙炔)，1.06(s，3，CH3)，1.17(d，3，16αCH3)；(26)4.07(m，1，3βH)，2.76(s，1，乙炔)，5.01(m，2，CH2烯丙基)，5.78(m，1，CH-烯丙基)。
利用竞争性结合到来自重组CHO细胞的细胞质人雌激素受体α或β的测定而估测试验化合物对被人雌激素受体α(hERα)或β受体(hERβ)稳定地转染的重组中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的细胞溶胶中存在的雌激素受体的相对亲和性(潜能比)，与雌二醇(E2)比较。
在体外生物测定中，用被人雌激素受体α(hERα)或β受体(hERβ)、大鼠催产素启动子(RO)和荧光素酶报道基因(LUC)稳定地共转染的重组中国仓鼠卵巢(CHO)细胞测定了化合物的雌激素活性和抗雌激素活性。将试验化合物刺激通过雌激素受体hERα或hERβ介导的荧光素酶的反式激活的雌激素活性(潜能比)与标准雌激素雌二醇对比。将试验化合物抑制通过雌激素受体hERα或hERβ介导的荧光素酶的反式激活的抗雌激素活性(潜能比)与标准ICI 164.384[＝(7α，17β)-N-丁基-3，17-二羟基-N-甲基雌-1，3，5(10)-三烯-7-十一酰胺]对比。结果通过将ERα的百分兴奋活性除以ERβ的百分兴奋活性获得了兴奋剂选择性的定量参数。化合物11a对雌激素受体α的兴奋剂选择性比对雌激素受体β的高86倍。化合物26对ERα的兴奋剂选择性比对ERβ的高59倍。化合物27具有88.3倍的兴奋剂选择性。
权利要求
1.式1的16α-取代的甾族化合物 式1其中虚线环是具有Δ5-10双键的完全饱和的，完全芳族的或饱和的环；R1是(C1～C3)烷基或(C2～C3)烯基，并且这些基的每一个可被一个或多个卤素取代；R2是(C1～C4)烷基，(C2～C4)烯基或亚甲基，并且这些基的每一个可被一个或多个卤素取代；R3是甲基或乙基。
2.权利要求1的16α-取代的甾族化合物，其特征在于，R1和R2中的卤素选自氯或氟。
3.权利要求1或2的16α-取代的甾族化合物，其特征在于，R2是(C1～C2)烷基或乙烯基。
4.用于医疗的权利要求1的化合物。
5.权利要求4的化合物在生产用于雌激素受体相关处理的药剂中的应用，其特征在于，所述处理是雌激素受体α选择性处理。
6.权利要求4在生产用于雌激素受体相关处理的药剂中的应用，其特征在于，所述处理是激素补偿疗法或避孕。
7.一种用于选择性激活α-亚类雌激素受体的处理方法，它包括，以合适的量施用权利要求1的化合物。
8.一种用于激素补偿疗法或避孕的处理方法，它包括，以合适的量施用权利要求1的化合物。
9.一种药物组合物，它包含与药物上可接受的辅剂混合的权利要求1的化合物。
全文摘要
本发明获得了式1的16α－取代的甾族化合物，其中，虚线环是具有Δ5－10双键的完全饱和的，完全芳族的或饱和的环；R
文档编号A61K31/569GK1444596SQ01813398
公开日2003年9月24日 申请日期2001年7月23日 优先权日2000年7月28日
发明者J·梅斯特雷斯, H·J·J·卢曾, G·H·维内曼 申请人:阿克佐诺贝尔公司
技术领域：
本发明涉及16α-取代的甾族化合物，涉及用这类化合物激活雌激素受体的方法，还涉及这类化合物在生产用于雌激素受体相关处理的药物中的应用。
具有雌激素活性的甾族化合物长期适用于治疗各种医疗指征和避孕体制。尽管该领域历史悠久，仍需要比现有化合物更有效的、更安全的和更经济的化合物。鉴于其它领域中保健的进展(它导致日益延长的寿命)，这种需要更为迫切。对于绝经期雌激素急剧减少的妇女来说，这尤其成问题，并且对骨强度和心血管功能具有副作用。就雌激素处理来说，可应用具有高度活性的雌激素16α-取代的雌激素甾族化合物，例如，描述于Fevig等[甾族化合物(Steroids)51pp471～497,1988]、DE 2757157、US 3,704,253和Takikawa等[甾族化合物研究(Res.Steroids)Vol 7，pp291～299，1977]。还有从Tedesco等[生物有机化学和医学化学通讯(Bioorganic & Medicinal ChemistryLetters)Vol7，No22，pp2919～2924，1997]已知的7α，11β-二取代的雌激素，不过，该领域中进一步的进展仍是可能的。雌激素受体亚类[存在这类受体的α-亚类(ERα)和β-亚类(ERβ)]的发现为更选择性的激活那两种受体中的一种特定亚类提供了可能性，本质上导致更有效的处理或更少副作用的处理。特别是描述于González等(甾族化合物，Vol.40；171～187；1982)中的16β-甲基-雌激素，但是具有16β-构型的化合物通常没有本发明化合物那样的有利的选择效果。
本发明基于对α-亚类雌激素受体具有意外选择性的化合物的发现。本发明获得了式1的16α-取代的甾族化合物， 式1其中虚线环(所谓的A环)是具有Δ5-10双键的完全饱和的，完全芳族的或饱和的环；R1是(C1～C3)烷基或(C2～C3)烯基，并且这些基的每一个可被一个或多个卤素取代；R2是(C1～C4)烷基，(C2～C4)烯基或亚甲基，并且这些基的每一个可被一个或多个卤素取代；R3是甲基或乙基。
3位和7位(对于它们来说，没有规定式1中的立体化学)的键相对于所述甾族化合物骨架可以独立处于α或β位。显然，当R2是亚甲基时，11位的键并不意味着呈β构型。
R2中优选的卤素是氯或氟。
对R2优选的选择是(C1～C2)烷基或乙烯基。
当然，本发明还获得上文定义的化合物的前体药物。
将前体药物定义为一种化合物，它在接受者的体内转化为式1定义的化合物。值得注意的是，上式中绘出的羟基可以例如被烷基*氧、烯基*氧、酰基*氧、芳酰基氧、烷*氧基羰基氧、磺酰基或磷酸根取代，于是，不认为星号(*)标示的基的碳链长度受严格的限制，而芳酰基通常将包含苯基、吡啶基或嘧啶基。优选的前体药物是处于一个或两个羟基上的羧酸酯或烷基醚，而更优选的前体药物是(C2～C6)羧酸酯，例如(异)丁酸酯，或是(C1～C4)烷基醚。根据所要求的前体药物的性能选定烷基、烯基和酰基的长度，所以，更长链的前体药物(例如，十二烷基或己酰基链)更适合缓释制剂和长效制剂。已知这样的取代基自发水解或者被酶促水解成化合物骨架上的游离羟基取代基。这样的前体药物将具有的生理活性比得上它们在接受者体内被转化成的化合物。前体药物被转化成的活性化合物称为母体化合物。前体药物在体内的作用开始和作用持续时间以及在体内的分布可能与母体化合物的这类性能不同。至于其它类的前体药物，应该认识到，式1中的羟基可由接受者的代谢系统放置在适当位置。所述羟基对于雌激素受体的亲和性来说是重要的。所以，如式1定义、但是缺少一个或两个羟基的化合物也可用作本发明的化合物，而这样的化合物被称为前体药物。
本说明书中应用的其它术语具有下列含义烷基是支化的或非支化的烷基，例如，甲基，乙基，丙基，丁基或仲丁基；烯基是支化的或非支化的烯基，例如，乙烯基，2-丁烯基等；卤素指氟，氯，溴和碘；芳酰基表示芳基羰基，例如，苯甲酰基；芳基是单环或多环的，碳环或杂环的芳环体系；酰基是烷基羰基。
前缀(C1～C4)、(C2～C4)等具有常规含义而将指示的基的含义限定在分别具有1～4、2～4个碳原子等的那些。
本发明化合物的选择性雌激素受体亲和性分布使它们适用于治疗。所述化合物适用作改良的雌激素，在该意义上它们可用于雌激素受体相关的医疗(例如，关于避孕的那些)，或者用于治疗或预防良性的前列腺肥大、心血管障碍、绝经病、骨质疏松症、雌激素依赖性肿瘤控制或中枢神经系统障碍(例如，抑郁症或早老性痴呆)。
因此，本发明涉及本发明的化合物在生产用于选择性雌激素受体相关处理的药剂中的应用。选择性雌激素受体相关的处理是通过α-亚类雌激素受体的激活达到的。这样的药剂可用于治疗雌激素受体相关的障碍，例如，绝经周的(perimenopausal)病和/或绝经后的病，还使得所述药剂通常适合激素补偿疗法(HRT)的领域。所述处理包括，对具有两亚类受体的生物施用本发明的化合物。所以，本发明还涉及选择性激活α-亚类雌激素受体的处理方法，它包括，对接受者以合适的量施用本发明的化合物。这样的处理方法适合绝经周的病和/或绝经后的(更年期的)病的医疗指征和骨质疏松症，即，激素补偿疗法领域内的处理方法。
一种可成为选择性雌激素处理的接受者的生物可以是动物或人类，而且通常将是需要雌激素处理的雌性动物或妇女。
通过生产药物组合物将大为有助于施用本发明的化合物。因此，本发明还涉及一种药物组合物，它包含与药物上可接受的辅剂混合的本发明化合物。
在一个特定的方面，本发明涉及本发明的化合物在生产具有避孕活性的药剂中的应用。所以，本发明还涉及如本领域中常见的孕激素和雌激素避孕的医疗指征(即，一种避孕方法)，它包括，对接受者以合适的量施用本发明的化合物，所述接受者是妇女或雌性动物，其中，所述雌激素是本文前述的化合物(呈合适的药物剂型)。
本发明的化合物可通过通常的甾族化合物的有机化学技术中已知的各种方法生产。向甾族化合物引入16α甲基或乙基容易通过有机合成文献中已知的方法进行。通常，C-16位上的阴离子可通过用适当的碱[例如有机仲胺(二异丙胺或六甲基二硅烷基胺)的碱金属盐]处理C-17-酮而形成。用烷基化剂(例如，烷基卤)处理这些阴离子导致所需的16α-烷基化甾族化合物。可应用烷基化的备选方法，例如，开始将C17-羰基甾族化合物转化成相应的腙，接着形成C16-阴离子，烷基化，随后通过腙的解离释放羰基。备选地，通过用碱金属共轭还原Δ15-烯-17-酮甾族化合物而形成16位的阴离子。更具体地说，可应用下文的方案和实施例中阐述的合成途径。
酯前体药物可通过具有游离羟基的化合物的酯化来制备，即，与适当的酰氯在吡啶中反应。
制备药物组合物的方法被描述于标准文献Gennaro等，Remmington’s Pharmaceutical Sciences，(第18版，Mack publishingCompany，1990，尤其参见Part8药物制剂及其生产)，而合适的辅剂可见于例如，药物赋形剂手册(Handbook of PharmaceuticalExcipients)(第2版，A.Wade和P.J.Weller编辑；美国药物协会；Washington；The Pharmaceutical Press；London，1994)。可将本发明的化合物和药物上可接受的辅剂的混合物压制成固体单元剂量，例如，丸剂、片剂，或者加工成胶囊或栓剂。通过药物上合适的液体，所述化合物还可用作呈溶液、悬浮液、乳液形式的注射制剂，或者作为喷雾剂(例如，喷鼻剂)。至于制备单元剂量(例如，片剂)，预计应用常规添加剂，例如，填料、着色剂、聚合物粘合剂等。通常，可应用不干扰所述活性化合物的功能的任何药物上可接受的添加剂。本发明的化合物还可含于植入物、阴道环、膜片、凝胶和任何其它缓释制剂中。
可与所述组合物一起施用的合适的载体包括以合适的量应用的乳糖、淀粉、纤维素衍生物等，或其混合物。
本发明的处理方法包括，对动物或人施用如前述的化合物(呈合适的药物剂型)。本发明化合物的合适的剂量将是雌激素化合物的常规数量级，例如，每次施用大约0.01～100mg。
下文参照一些非限制性实施例和涉及的相应结构式示意图进一步阐述了本发明。
然后将反应物倾入水中，用乙酸乙酯萃取，提供9.5g14。NMR3.59(t，CHOH)；2.98(m，H11)，0.92(s，CH3)。化合物15向9.5g14的100ml丙酮溶液中添加8ml 6N HCl。搅拌2h后。用NaHCO3中和该混合物并浓缩至小体积，用水稀释，用乙酸乙酯萃取。这样提供8.2g无色无定形物质15。NMR 5.68(m，H4)；3.10(m，H11)，3.65(m，CHOH)。化合物16在-70℃下，将8.2g15的100ml干THF溶液添加到500ml液态NH3。用一定量的锂金属(约500mg)处理该混合物直至反应混合物的蓝色保持至少15min。通过添加一部分NH4Cl而猝灭反应。
用水稀释蒸发NH3后保留的残余物，用乙酸乙酯萃取。通过色谱法纯化而提供4.0g无色油状16；Rf0.55(庚烷/乙酸乙酯1/1 v/v)。NMR2.80(ab，位于C4的CH2)；0.93(s，CH3)。化合物17向4.0g16的80ml甲醇溶液中添加6ml原甲酸三甲酯，接着添加0.8g甲苯磺酸。搅拌2hr后缩酮化反应完毕。用6ml吡啶处理该混合物并浓缩到小体积。用水稀释残余物，用乙酸乙酯萃取。残余物4.7g，由几乎纯净的17构成；薄层色谱，Rf0.78(庚烷/乙酸乙酯1/1，v/v)。NMR3.22，3.25(2xs，OCH3)。化合物18向33g17的50ml丙酮溶液中添加6g分子筛(4A)，接着添加3.2g N-甲基吗啉-N-氧化物和150mg过钌酸四丙基铵(tetrapropylammonium perruthenate)。将混合物搅拌1h。往反应混合物中添加5g硅胶，接着添加50ml庚烷，又搅拌5min。将混合物滤过白色硅藻土载体(hy-flow)，部分浓缩后，将它吸收于乙酸乙酯中，用水洗涤，再浓缩。将残余物通过短二氧化硅柱而提供2.9g18。Rf0.52(庚烷/乙酸乙酯7/3)。NMR1.02(s，CH3)。化合物19为了乙炔基化，从二溴乙烯和丁基锂制备了乙炔化锂。
在-70℃下，向0.74ml 1，2-二溴乙烯的20ml THF溶液中添加11ml 1.6M BuLi的己烷溶液。搅拌15min后，添加800mg18的2ml THF溶液。在15min内使混合物暖至室温，在室温下又过了15min后，用水猝灭反应，用乙酸乙酯萃取产物。浓缩，随后通过短硅胶柱而给出810mg白色无定形物质19。Rf0.48(庚烷-乙酸乙酯7/3)，Rf原料0.52。NMR2.61(s，乙炔)。化合物20
向3.2g19在60ml乙醇的悬浮液中添加溶于16ml水的0.16g草酸。混合物被搅拌2.5hr后逐渐变得均匀。用NaHCO3处理反应混合物并浓缩至小体积。然后添加水，用乙酸乙酯萃取产物。将这样分离的粗产物通过短硅胶柱，从二异丙醚中结晶而提供2.3g20，Mp136℃。Rf0.66(庚烷-乙酸乙酯1/1)。NMR2.78(ab，2，H4)；2.61(s，乙炔)。化合物21，22向1g20的12ml THF溶液中添加1.6g三叔丁氧基氢化铝锂。在室温下搅拌1h后，用水处理混合物并通过添加2N HCl中和。用乙酸乙酯萃取产物，在硅胶上进行色谱处理(庚烷/乙酸乙酯8/2作为洗脱剂)。这样提供了0.56g 3β醇21(Mp121～123℃)和0.24g 3α醇22(Mp84～87℃)。Rf0.53(21)和0.45(22)，庚烷/乙酸乙酯1/1。NMR(3αOH)3.82(m，CHOH)；(3βOH)4.08(m，CHOH)。化合物23在-40℃下，向六甲基二硅烷基氨化锂(lithiumhexamethyldisilazide)(从1.9ml 1.6M BuLi-己烷溶液和0.71ml六甲基二硅烷基胺的4ml干THF溶液制备的)的溶液中添加1g18和0.7ml DMPU的5ml THF溶液。在-40℃下将混合物搅拌0.5hr，然后通过注射器添加225μl CH3I。在-40℃下又搅拌0.5h后反应完毕。用水稀释混合物，用乙酸乙酯萃取产物。将这样分离的粗产物进行色谱处理而给出1.3克23，Rf0.43(庚烷/乙酸乙酯8/2)。NMR1.10(d，3，16αCH3)，1.06(s，3，CH3)，3.23(2x s，6，OCH3)，5.0(m，2，烯丙基CH2)，5.78(m，1，烯丙基CH)。化合物24按关于制备19所述的方法，将1.3g23转化成所需的24，从而提供1.2g，Rf0.46(庚烷/乙酸乙酯7/3)Rf(23)0.55。NMR2.66(s，1，乙炔)，1.06(s，3，CH3)，1.17(d，3，16αCH3)。化合物25向800mg24的20ml乙醇溶液中添加80mg草酸的5ml水溶液。将混合物搅拌1h，然后添加NaHCO3中和。用水稀释并用乙酸乙酯萃取后，获得0.7g25晶体物质。Rf0.47(庚烷/乙酸乙酯7/3)。NMR2.78(AB，2，H4)，1.08(s，3，CH3)，1.18(d，3，16αCH3)，2.67(s，1，乙炔)。化合物26，27向725mg25在20ml 1/1乙醇和THF混合物中的溶液中添加130mg硼氢化钠。搅拌1h后，添加2ml丙酮以破坏一些过量的试剂。15min后，将混合物倾入水中，用乙酸乙酯萃取产物。通过色谱法在硅胶上纯化这样获得的物质，用二氯甲烷-丙酮或己烷-乙酸乙酯作为洗脱剂。这样给出300mg27(3α-OH)和75mg26(3β-OH)。Rf(26)0.47(二氯甲烷/丙酮95/5)。Rf(27)0.54(二氯甲烷/丙酮95/5)。NMR(27)3.82(m，1，3βH)，2.75(s，1，乙炔)，1.06(s，3，CH3)，1.17(d，3，16αCH3)；(26)4.07(m，1，3βH)，2.76(s，1，乙炔)，5.01(m，2，CH2烯丙基)，5.78(m，1，CH-烯丙基)。
利用竞争性结合到来自重组CHO细胞的细胞质人雌激素受体α或β的测定而估测试验化合物对被人雌激素受体α(hERα)或β受体(hERβ)稳定地转染的重组中国仓鼠卵巢(CHO)细胞的细胞溶胶中存在的雌激素受体的相对亲和性(潜能比)，与雌二醇(E2)比较。
在体外生物测定中，用被人雌激素受体α(hERα)或β受体(hERβ)、大鼠催产素启动子(RO)和荧光素酶报道基因(LUC)稳定地共转染的重组中国仓鼠卵巢(CHO)细胞测定了化合物的雌激素活性和抗雌激素活性。将试验化合物刺激通过雌激素受体hERα或hERβ介导的荧光素酶的反式激活的雌激素活性(潜能比)与标准雌激素雌二醇对比。将试验化合物抑制通过雌激素受体hERα或hERβ介导的荧光素酶的反式激活的抗雌激素活性(潜能比)与标准ICI 164.384[＝(7α，17β)-N-丁基-3，17-二羟基-N-甲基雌-1，3，5(10)-三烯-7-十一酰胺]对比。结果通过将ERα的百分兴奋活性除以ERβ的百分兴奋活性获得了兴奋剂选择性的定量参数。化合物11a对雌激素受体α的兴奋剂选择性比对雌激素受体β的高86倍。化合物26对ERα的兴奋剂选择性比对ERβ的高59倍。化合物27具有88.3倍的兴奋剂选择性。
权利要求
1.式1的16α-取代的甾族化合物 式1其中虚线环是具有Δ5-10双键的完全饱和的，完全芳族的或饱和的环；R1是(C1～C3)烷基或(C2～C3)烯基，并且这些基的每一个可被一个或多个卤素取代；R2是(C1～C4)烷基，(C2～C4)烯基或亚甲基，并且这些基的每一个可被一个或多个卤素取代；R3是甲基或乙基。
2.权利要求1的16α-取代的甾族化合物，其特征在于，R1和R2中的卤素选自氯或氟。
3.权利要求1或2的16α-取代的甾族化合物，其特征在于，R2是(C1～C2)烷基或乙烯基。
4.用于医疗的权利要求1的化合物。
5.权利要求4的化合物在生产用于雌激素受体相关处理的药剂中的应用，其特征在于，所述处理是雌激素受体α选择性处理。
6.权利要求4在生产用于雌激素受体相关处理的药剂中的应用，其特征在于，所述处理是激素补偿疗法或避孕。
7.一种用于选择性激活α-亚类雌激素受体的处理方法，它包括，以合适的量施用权利要求1的化合物。
8.一种用于激素补偿疗法或避孕的处理方法，它包括，以合适的量施用权利要求1的化合物。
9.一种药物组合物，它包含与药物上可接受的辅剂混合的权利要求1的化合物。
全文摘要
本发明获得了式1的16α－取代的甾族化合物，其中，虚线环是具有Δ5－10双键的完全饱和的，完全芳族的或饱和的环；R
文档编号A61K31/569GK1444596SQ01813398
公开日2003年9月24日 申请日期2001年7月23日 优先权日2000年7月28日
发明者J·梅斯特雷斯, H·J·J·卢曾, G·H·维内曼 申请人:阿克佐诺贝尔公司
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