重组人干扰素a2b栓剂及其制备方法

专利名称：：重组人干扰素a2b栓剂及其制备方法
技术领域：
：本发明涉及药物制剂领域，具体涉及一种重组人干扰素a2b栓剂及其制备方法。
背景技术：
：重组人干扰素a2b栓剂在临床上主要用于因病毒感染所引起的妇女慢性宫颈炎的治疗，其临床疗效主要与重组人干扰素a2b的生物活性有关；重组人干扰素a2b作为一种蛋白质，因受各种因素的影响，其结构往往会被破坏而失去生物活性，因此在传统的制剂生产过程中需要加入人血白蛋白作为保护剂，保持其生物活性，然而以人血白蛋白作为保护剂存在着来源困难、价格昂贵、生产成本增加、有感染血液病毒风险等，有必要选择其它物质代替血白蛋白作为重组人干扰素a2b保护剂。
发明内容本发明的目的是提供一种重组人干扰素a2b栓剂，该重组人干扰素a2b栓剂是以无血清物质作为保护剂，该无血清物质来源广泛、价格便宜、生产成本低且无毒无害。本发明的重组人干扰素a2b栓剂的具体组成如下-重组人干扰素a2b1.0X108IUlmg;聚乙二醇10001000g;聚乙二醇4000660g;无血清物质0.3g-6g;其中的无血清物质为药用明胶。本发明中，上述技术方案是本发明的一个制剂处方，一个制剂处方可制成一千粒重组人干扰素a2b栓剂，用无血清物质药用明胶作为重组人干扰素a2b的保护剂，药用明胶在药剂中应用很广，药用明胶具有来源广泛、价格便宜、生产成本低、无毒无害且保护效果明显，用药用明胶代替人血白蛋白作为重组人干扰素a2b栓剂的保护剂，可以大大降低生产成本，提高产品的稳定性。本发明的另一个目的是提供一种上述重组人干扰素a2b栓剂的制备方法，该方法操作简单。本发明中重组人干扰素a2b栓剂的制备方法包括以下步骤先是重组人干扰素a2b经药用明胶的处理，其次是聚乙二醇的加热灭菌处理，再将处理好的重组人干扰素a2b和聚乙二醇溶液混合搅匀，再经灌注冷却成型即可制成成品。本发明的制备方法操作简单方便。具体实施例方式本发明的重组人干扰素a2b栓剂的具体组成如下重组人干扰素a2b1.0X108IUlmg;聚乙二醇10001000g;聚乙二醇4000660g;无血清物质0.3g-6g;其中的无血清物质为药用明胶，即药用明胶的加入量是0.3g-6g，上述技术方案是本发明的一个制剂处方，一个制剂处方可制成一千粒重组人干扰素a2b栓剂，一般药用明胶的加入质量是相对于重组人干扰素a2b溶液体积的0.5%-10%，如需要100毫升重组人干扰素a2b溶液时就应加入0.5-10g的药用明胶。重组人干扰素a2b1.0X108IU:代表干扰素的生物活性为1.0Xl()8国际单位；聚乙二醇10001000g:表示型号为1000的聚乙二醇1000g;聚乙二醇4000660g:表示型号为600的聚乙二醇660g;药用明胶的加入量是0.3g-6g，这个范围内可以对重组人干扰素a2b的生物活性有很好的保护作用，药用明胶具有来源广泛、价格便宜、生产成本低、无毒无害且保护效果明显，用药用明胶代替人血白蛋白作为重组人干扰素a2b栓剂的保护剂，可以大大降低生产成本，提高产品的稳定性。本发明中，上述重组人干扰素a2b栓剂的制备方法包括以下步骤先是重组人干扰素a2b经药用明胶的处理，其次是聚乙二醇的加热灭菌处理，再将处理好的重组人干扰素a2b和聚乙二醇溶液混合搅匀，再经灌注冷却成型即可制成成品。该制作方法操作简单方便。本发明中，重组人干扰素a2b经药用明胶的处理是指先将药用明胶加入缓冲液中溶解、高压湿热灭菌、冷却至45X:以下，再将重组人干扰素a2b加入药用明胶溶液用缓冲液定容，再至少平衡10分钟。因为药用明胶是固体，缓冲液的作用是能够让药用明胶溶解，待药用明胶溶解后，即可进行灭菌，根据药品的制备方法和明胶的性质，此过程必须要高压湿热灭菌，可以在灭菌锅或灭菌柜中，在O.1Mpa，12rC条件下灭菌30分钟，药用明胶溶液灭菌后可以自然冷却至45t:以下，也可以采用放置于冰箱、水浴等环境中冷却至45'C以下，这样可确保重组人干扰素a2b加入药用明胶溶液中不会丧失活性，重组人干扰素a2b加入药用明胶溶液中搅拌混匀后可根据生产处方量定容，再至少平衡10分钟，这样能使重组人干扰素a2b溶液的温度均匀，有利于更好的与聚乙二醇溶液混合。在本发明中，聚乙二醇的加热灭菌处理是指将所述的两种聚乙二醇加入缓冲液中加热溶解、灭菌，冷却至25X:-45'C，再至少平衡IO分钟。因为型号为1000和型号为4000的聚乙二醇的状态不一样，故将两种聚乙二醇在缓冲液中加热溶解，待其完全溶解后进行灭菌，灭菌可用高压湿热灭菌，也可用其他的灭菌方法，再将灭菌后的聚乙二醇溶液冷却至25°C-45°C，温度在25。C-45。C之间既能保证聚乙二醇溶液不会凝固，又可确保重组人干扰素a2b溶液与其混合后不会丧失活性，一般最好在水浴中进行冷却，这样便于操作且可使聚乙二醇的温度维持稳定，再至少平衡10分钟，这样能使聚乙二醇溶液的温度均匀，有利于重组人干扰素a2b溶液的加入。在本发明中，药用明胶加入缓冲液溶解是将药用明胶在缓冲液中加热溶解。药用明胶是固体，加热可以促进药用明胶溶解，有助于药用明胶完全溶胀和溶解。在本发明中，缓冲液是指磷酸盐溶液、水、柠檬酸盐缓冲液或磷酸盐-柠檬酸盐缓冲液。在本发明中，缓冲液是指pH为6.0-7.5、浓度为0.01-0.2mol/L的缓冲液。一般缓冲液的浓度为0.01-0.2mol/L，pH为6.0-7.5，pH最好在6.5-7.5之间，这个范围便于重组人干扰素a2b栓剂的制备。在本发明中，重组人干扰素a2b溶液和聚乙二醇溶液均平衡至37°C。将聚乙二醇溶液和重组人干扰素a2b溶液均都平衡到37。C，这样两者容易混合均匀，重组人干扰素a2b的生物活性也最佳。在本发明中，药用明胶在缓冲液中加热溶解是指药用明胶在缓冲液中经20-40"C的水浴中加热溶解。在本发明中，缓冲液优选磷酸氢二钠-磷酸二氢钠溶液。实施例1聚乙二醇1000(PEG1000)10.0千克，聚乙二醇4000(PEG4000)6.6千克于容器中，加入0.01mol/LpH7.4的磷酸缓冲液1400ml，溶化混匀后，置于高压灭菌锅内，在0.1Mpa，12rC条件下灭菌30分钟。将灭菌后的聚乙二醇基质置于37'C水浴中，不断搅拌使聚乙二醇基质温度降至37"C后，再平衡10分钟。称取药用明胶3.0g加入到0.lmo1/1、pH7.0磷酸氢二钠-磷酸二氢钠溶液500ml中，置水浴中微热，待溶胀均匀后，置于高压灭菌锅内，在0.1Mpa，12rC条件下灭菌30分钟，放冷。精确量取重组干扰素a2b原料药lOmg(l.0乂109113)加入明胶溶液中，混匀后再用0.lmol/l、pH7.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液定容至600ml，平衡10分钟至37°C。将平衡至37。C的干扰素溶液缓缓加入到不断搅拌中的聚乙二醇基质中，快速充分搅拌10分钟，再倒入灌装机组中。经过灌装机组连续工序完成药液灌注、冷却成型。将灭菌后的聚乙二醇基质置于37'C水浴中，不断搅拌使聚乙二醇基质温度降至37'C后，再平衡10分钟。称取药用明胶12.0g加入到0.lmo1/1、pH7.0磷酸氢二钠-磷酸二氢钠溶液500ml中，置水浴中微热，待溶胀均匀后，置于高压灭菌锅内，在O.1Mpa，12rC条件下灭菌30分钟，放冷。精确量取重组干扰素a2b原料药lOmg(l.OX1(flU)加入明胶溶液中，混匀后再用0.lmol/l、pH7.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠溶液定容至600ml，平衡10分钟至37°C。将平衡至37。C的干扰素溶液缓缓加入到不断搅拌中的聚乙二醇基质中，快速充分搅拌10分钟，再倒入灌装机组中，经过灌装机组连续工序完成药液灌注、冷却成型。实施例3将灭菌后的聚乙二醇基质置于37X:水浴中，不断搅拌使聚乙二醇基质温度降至37"C后，再平衡10分钟。称取药用明胶60.0g加到0.lmo1/1、pH7.0磷酸氢二钠-磷酸二氢钠溶液500ml中，置水浴中微热，待溶胀均匀后，置于高压灭菌锅内，在O.1Mpa，12rC条件下灭菌30分钟，放冷。称取重组人干扰素a2b原料药lOmg(l.0X1(^IU)加入药用明胶溶液，混匀后再用0.lmol/l、pH7.0的磷酸氢二钠-磷酸二氢钠溶液定容至600ml，平衡10分钟至37°C。将平衡至37。C的干扰素溶液缓缓加入到不断搅拌中的聚乙二醇基质中，快速充分搅拌10分钟，再倒入灌装机组中，经过灌装机组连续工序完成药液灌注、冷却成型。本发明的处方是以药用明胶作为保护剂，而传统的重组人干扰素a2b栓剂的处方是以人血白蛋白作为保护剂，两个处方中其他成分完全没有变化，分别对本发明处方和传统处方进行质量检测对比，试验结果表明两者各项指标均没有差异。详细结果请参见表l。为了进一步确定本发明的处方和制备方法的稳定性，分别对实施例1-3进行了考察，试验结果表明各项指标均符合标准。详细结果请参见表2。其中表1和表2中效价和融变时间的解释如下效价是干扰素生物活性的简称；IU代表国际单位；融变时间是栓剂质量检测中的一项指标，要求栓剂在60分钟内完全溶解于37'C的水中。表1:重组人干扰素a2b(10万IU/粒)栓剂质量检测结果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>表2:重组人干扰素a2b栓剂4'C条件下贮存的稳定性试验结果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>本发明的重组人干扰素a2b栓剂的使用方法是直接涂抹于患处，一天一次，七天为一个疗程。临床试验结果如表3和表4所示，结果表明，通过将重组人干扰素a2b栓剂用于治疗宫颈糜烂，共完成病历60例，经过3个月经周期的观察，痊愈率和有效率分别为28.33%、85.00%;对改善受试者腰酸、腹痛、白带增多等症状有较好效果；HSV病毒转阴率77.14%，HPV病毒转阴率71.05%。表3:重组人干扰素a2b栓疗效分析症状体征用药前阳性例数用药后消失例数消失率/%腰酸272592.59腹痛1818100.00白带增多504896.00表4:病毒学检测及转阴情况分析病毒株病毒检测病毒检测用药后病毒转阴率/%名称总例数阳性例数转阴例数HSV60352777.14HPV60382771.0权利要求1、一种重组人干扰素a2b栓剂，该栓剂的具体组成如下重组人干扰素a2b1.0×108IU1mg；聚乙二醇10001000g；聚乙二醇4000660g；无血清物质0.3g-6g；其中的无血清物质为药用明胶。2、制备权利要求1所述的重组人干扰素a2b栓剂的方法，包括以下步骤先是重组人干扰素a2b经药用明胶的处理，其次是聚乙二醇的加热灭菌处理，再将处理好的重组人干扰素a2b和聚乙二醇溶液混合搅匀，再经灌注冷却成型即可制成成品。3、根据权利要求2所述的重组人干扰素a2b栓剂的制备方法，其特征在于所述的重组人干扰素a2b经药用明胶的处理是指先将药用明胶加入缓冲液中溶解、高压湿热灭菌、冷却至45'C以下，再将重组人干扰素a2b加入药用明胶溶液用缓冲液定容，再至少平衡10分钟。4、根据权利要求2所述的重组人干扰素a2b栓剂的制备方法，其特征在于所述的聚乙二醇的加热灭菌处理是指将所述的两种聚乙二醇加入缓冲液中加热溶解、灭菌，冷却至25'C-45"C，再至少平衡IO分钟。5、根据权利要求3所述的重组人干扰素a2b栓剂的制备方法，其特征在于所述的药用明胶加入缓冲液溶解是指药用明胶在缓冲液中加热溶解。6、根据权利要求3或4所述的重组人干扰素a2b栓剂的制备方法，其特征在于所述的缓冲液是指磷酸盐溶液、水、拧檬酸盐缓冲液或磷酸盐-柠檬酸盐缓冲液。7、根据权利要求3或4所述的重组人干扰素a2b栓剂的制备方法，其特征在于所述的缓冲液是指pH为6.0-7.5、浓度为0.01-0.2mol/L的缓冲液。8、根据权利要求3或4所述的重组人干扰素a2b栓剂的制备方法，其特征在于所述的重组人干扰素a2b溶液和聚乙二醇溶液均平衡至37°C。9、根据权利要求5所述的重组人干扰素a2b栓剂的制备方法，其特征在于所述的药用明胶在缓冲液中加热溶解是指药用明胶在缓冲液中经20-4(TC的水浴中加热溶解。10、根据权利要求6所述的重组人干扰素a2b栓剂的制备方法，其特征在于所述的缓冲液是指磷酸氢二钠-磷酸二氢钠溶液。全文摘要本发明涉及药物制剂领域，具体涉及一种重组人干扰素a2b栓剂及其制备方法。本发明的重组人干扰素a2b栓剂的具体组成如下重组人干扰素a2b1mg(1.0×10⁸IU)；型号为1000的聚乙二醇1000克；型号为600的聚乙二醇660克；无血清物质0.3g-6g；其中的无血清物质为药用明胶。本发明栓剂的制备方法包括以下步骤先是重组人干扰素a2b经药用明胶的处理，其次是聚乙二醇的加热灭菌处理，再将处理好的重组人干扰素a2b和聚乙二醇溶液混合搅匀，再经灌注冷却成型即可制成成品。采用药用明胶作为保护剂，具有来源广泛、价格便宜、生产成本低、无毒无害、保护效果明显，且本发明的制备方法操作简单方便。文档编号A61K9/02GK101612114SQ20091014439公开日2009年12月30日申请日期2009年8月6日优先权日2009年8月6日发明者倪晓燕,储成风,宋礼华,王荣海申请人:安徽安科生物工程(集团)股份有限公司