一种复方中药的鉴别方法
专利名称：一种复方中药的鉴别方法
技术领域：
本发明涉及一种质量检测方法，特别是涉及一种复方中药的质量检测方 法，属于中药领域。
背景技术：
心舒宝片是具有活血化瘀，益气止痛的心血管药物，用于冠心病，气虚 血瘀引起的胸闷，心绞痛，以及高血压，高血脂，动脉硬化等。该中药品种 方中丹参苦微寒，祛瘀止痛、活血通经，为活血化瘀之要药；刺五加辛微苦 温，益气健脾、补肾安神，令气旺血行、瘀去络通；山楂酸甘微温，消食健 胃、行气散瘀，二药配合丹参则活血化瘀，益气止痛之功益彰；白芍缓急止 痛，郁金行气化瘀，使气行则血行，通则不痛，加强活血、化瘀止痛之功。 本品标本兼治，祛邪而不伤正，扶正而不碍邪，共奏活血化瘀，益气止痛之 功，是治疗冠心病，气虚血瘀引起的胸闷，心绞痛，以及高血压，高血脂， 动脉硬化等的常用药物。为促进中药制剂现代化，中药制剂不断研究质量检 测方法是必要的。
发明内容
本发明目的在于提供一种新的复方中药的质量检测方法。本发明目的是 通过如下技术方案实现的。
本发明复方中药的质量检测方法包括如下含量测定和/或鉴别中的一种 或几种
含量测定照高效液相色谱法测定(中国药典2005年版一部附录VI D); 色谱条件与系统适用性试验，以十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂，
25-29:8-12:60-65甲醇一 乙睛一 1 %甲酸溶液为流动相；检测波长为 280-300nm，理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000;对照品溶液的制备 精密称取丹酚酸B对照品适量，加70-80%甲醇制成每lml含O. 14mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取复方中药固体制剂，研细，取5g，精密称定，
置具塞锥形瓶中，精密加入70-80%甲醇50ml，称定重量，加热回流30-60 分钟，取出，放冷，再称定重量，用70-80%甲醇补足减失的重量，摇匀， 滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液， 注入液相色谱仪，测定，即得。
鉴别a取固体制剂lg，研细，加无水乙醇10ml，超声处理10-30 分钟，滤过，滤液浓縮至lml，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇 制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005 年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点子同一硅胶G 薄层板上，以30-50:3-7:8-12:0.1-0.3三氯甲烷一醋酸乙酯一 甲醇一 甲酸 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3-6%香草醛硫酸溶液，在105。C加热 至斑点显色清晰;供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜 色的斑点。
b取固体制剂5g，研细，加70-80X乙醇50ml，加热回流O. 5-2小时， 滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲垸提取 2-4次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试 品溶液；另取异秦皮啶对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照 品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述 两种溶液各10yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以17-20:1氯仿一甲醇 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中， 在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点。
本发明复方中药的质量检测方法优选如下含量测定和/或鉴别中的一种 或几种
含量测定照高效液相色谱法测定(中国药典2005年版一部附录VID); 色谱条件与系统适用性试验，以十八垸基硅垸键合硅胶为填充剂，27:10:63 甲醇一乙睛一1%甲酸溶液为流动相；检测波长为286nm，理论板数按丹酚酸 B峰计算应不低于2000;对照品溶液的制备精密称取丹酚酸B对照品适量， 加75X甲醇制成每lml含0. 14mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取复 方中药固体制剂，研细，取5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75
5X甲醇50ml，称定重量，加热回流45分钟，取出，放冷，再称定重量，用
75%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精
密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得； 固体制剂中单位制剂含丹参以丹酚酸B(C36H3。016)计，不得少于0. 60mg。
鉴别a取固体制剂lg，研细，加无水乙醇10ml，超声处理20分钟， 滤过，滤液浓縮至lml，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每 lml含lmg的溶液，作为对照品溶液;照薄层色谱法(中国药典2005年版一部 附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各IOpI，分别点子同一硅胶G薄层板 上，以40:5:10:0. 2三氯甲垸_醋酸乙酯_甲醇_甲酸为展开剂，展开，取 出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105°(]加热至斑点显色清晰;供试品 色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
b取固体制剂5g，研细，加75X乙醇50ml，加热回流1小时，滤过， 滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲垸提取3次， 每次10ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液； 另取异秦皮啶对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液； 照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各 10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以19:1氯仿一甲醇为展开剂，展开， 取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相 应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点。
本发明复方中药固体制剂是由如下方法制成的
丹参100 300g白芍 1000 3000g 刺五加500 1500g
郁金150 450g山楂 1000 3000g
以上五味，取白芍200 500g粉碎成细粉，备用；山楂用乙醇加热回流 提取1 3次，每次1 3小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至适量，与白 芍粉或辅料混合，50 8(TC以真空干燥，粉碎成细粉备用，剩余白芍或全部 白芍与其余丹参用6 12倍水煎煮1 3次，每次1 3小时，合并煎液，滤 过，滤液浓縮至密度为1.05 1.35，加乙醇，使含醇量达50 80%，静置 过夜，回收乙醇，浓縮成稠膏，与上述细粉混匀，按常规方法制成片剂、胶 囊剂、颗粒剂、滴丸等固体制剂。本发明质量检测方法使本发明复方中药制剂质量可控、疗效确切。下述 实验和实施例用于进一步说明但不限于本发明。 实验例1 本发明复方中药固体制剂心舒宝片的抗心绞痛作用研究 方法和结果
(一)小鼠心脏耐缺氧能力取ICR系小鼠50只，早$各半，体重23 28g，随机分为5组，每组10只，禁食不禁水12小时后按表1分别给予生 理盐水、复方丹参以及等比剂量的心舒宝灌胃。40分钟后腹腔注射5%乌拉 坦0. 15ml/10g麻醉，暴露气管，以XZ-ll心电监视仪(上海医用电子仪器 厂)监视肢体II导联心电并记录心率，然后以棉线将气管扎紧，完全阻断呼 吸，以心脏停转时间的长短做为心脏耐缺氧的指标，结果进行t测验(表l)。
表l心舒宝对小鼠心脏耐缺氧能力的影响(X士SD， n二10)
组别药物与剂量(灌胃)心脏耐缺氧时间(分)P值
1生理盐水0. 2ml/10g6. 69 ±1. 40
2复方丹参0. 25g/10g18. 85±1.73<0. 001
3心舒宝0. 25g/10g19.10±1. 52<0. 001
4心舒宝0. 20g/10g14. 75±2. 88<0. 001
5心舒宝0. 16g/10g14. 35±2. 19<0. 001
注与生理盐水对照组比较
表1提示，三个等比剂量的心舒宝都显著地提高小鼠心脏的耐缺氧能力
并具有量效关系，其大剂量组的心脏耐缺氧时间延长达185.5%，超过复方丹参组。
(二)离体大鼠心脏冠脉流量雄性SD系大鼠40只，250 320g，随机 分为4组，每组10只，按Langendorff法进行离体心脏灌流(灌流压50cmH20， 洛氏液温38±rC， PH7. 25±1，充氧)，心尖部经换能器与LMS-2A 二道生理记 录仪(成都仪器厂)相连，冠脉流量由自动记录仪(自制)描绘，给药情况 及实验结果见表2。
表2.心舒宝对离体大鼠心脏冠脉流量和心率的影响(X±SD, n=10)
组别药物浓度冠脉流量(ml/min)心率(次/min)
给药前给药后给药前给药后
1心舒宝0. 5mg%4. 86 ±0. 625. 92±0. 60※※188. 1±6. 7115. 36±8. 76
2心舒宝0. 5%4. 79 ±0. 805. 88±1. 12※190. 2 ±10. 97145. 56±14. 75※※
3心舒宝0. 25%4. 53 ±0. 645. 69±0. 98※※182. 6±8. 2130. 3士8.99※※
4心舒宝0. 125%4. 66 ±0. 655. 41±0. 83※186. 8±6. 88160. 9土19,50※※※P〈0.05，※※P〈0.01,给药前后自身对比
从表2可见，心舒宝能显著地减慢离体心脏的心率，提高冠脉灌流量， 其作用特点与心得安相似，其效果以0.25%浓度组最明显，加大灌流浓度并 不相应提高疗效。
(三)对抗大鼠急性心肌缺血心电图雄性SD系大鼠55只，250-350g， 随机分为5组(其中生理盐水组15只)，腹腔注射乌拉坦麻醉后以XDH-2心 电图机(上海医用电子仪器厂)描记肢体II导联心电图(lmv=10mm， 50mm/s) 并按表3所示给药。经l小时(复方丹参组0.5小时)后再次描记心电图， 从尾静脉注入脑下垂体后叶素0.75u/kg(10〃)，分别记录注射后10〃， 20〃， 30"， 40〃， l'， 3'，和5'的心电图，按中国医学科学院药物研究所标准 (中草药有效成份的研究，人民卫生出版社1972)判断是否发生急性心肌缺 血，结果进行X2测验(表3)。
表3.心舒宝对大鼠急性心肌缺血心电图的保护作用
组别给药方法急性心肌缺血鼠数(只)P
阳性阴性
1生理盐水2ml/100g po141
2复方丹参2g/100g po19<0.01
3心舒宝4g/100g po19<0. 01
4心舒宝2g/100g po19<0. 01
5心舒宝lg/100g po28〈0.01
注与生理盐水对照组比较
对照组大鼠在静脉注射脑下垂体后叶素后，出现典型的缺血性T-ST波 形，部份实验鼠还出现心律失常，急性心肌缺血发生率达93. 3%，而口服心 舒宝lg/100g和2g/100g的大鼠，其心肌缺血发生率明显降低，分别只在20% 和1(m。其保护作用与腹腔注射复方丹参2g/100g组相似，组间无显著差异。 这提示，心舒宝片口服有明显的抗急性心肌缺血作用。
下述实施例均能实现上述实验例的效果。
具体实施方式
实施例1:
丹参200g 白芍2000g 刺五加1000g郁金300g 山楂2000g
8以上五味，取白芍330g粉碎成细粉或不粉碎，备用；山楂用乙醇加热 回流提取二次。每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓縮至适量，与白芍
粉或辅料混合，7(TC以下真空干燥，粉碎成细粉备用；剩余白芍或全部白芍 与其余丹参等三味加8、 6倍水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过， 滤液浓縮至密度为1.165—1.205，加乙醇使含醇量达70%，静置过夜，滤 取上清液，回收乙醇，浓縮成稠膏，与上述细粉混匀，制粒，压制成1000 片，即得。
含量测定:照高效液相色谱法测定(中国药典2005年版一部附录VID); 色谱条件与系统适用性试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，27:10:63 甲醇一乙睛一1%甲酸溶液为流动相；检测波长为286nm，理论板数按丹酚酸 B峰计算应不低于2000;对照品溶液的制备精密称取丹酚酸B对照品适量， 加75X甲醇制成每lml含0. 14mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取片 剂，研细，取5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75X甲醇50ml， 称定重量，加热回流45分钟，取出，放冷，再称定重量，用75Q/^甲醇补足 减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品 溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得；固体制剂中单位 制剂含丹参以丹酚酸B(C36H3。016)计，不得少于0. 60mg。
鉴别a取片剂lg，研细，加无水乙醇10ml，超声处理20分钟，滤 过，滤液浓縮至lml，作为供试品溶液;另取芍药苷对照品，加甲醇制成每 lml含lmg的溶液，作为对照品溶液;照薄层色谱法(中国药典2005年版一部 附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10u 1，分别点子同一硅胶G薄层板上， 以40:5:10:0. 2三氯甲垸一醋酸乙酯一甲醇一甲酸为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105°(:加热至斑点显色清晰;供试品色谱 中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
b取片剂5g，研细，加75X乙醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液 蒸干，残渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲垸提取3次，每次 10ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取 异秦皮啶对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄 层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10U 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以19: l氯仿一甲醇为展开剂，展开，
取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相 应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点。 实施例2:
丹参200g 白芍2000g 剌五加1000g 郁金300g 山楂2000g 以上五味，取白芍330g粉碎成细粉或不粉碎，备用；山楂用乙醇加热 回流提取二次。每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓縮至适量，与白芍 粉或辅料混合，7(TC以下真空干燥，粉碎成细粉备用；剩余白芍或全部白芍 与其余丹参等三味加8、 6倍水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过， 滤液浓縮至密度为1.165—1.205，加乙醇使含醇量达70%，静置过夜，滤 取上清液，回收乙醇，浓縮成稠膏，与上述细粉混匀，制粒，制成胶囊1000 粒，即得。
含量测定:照高效液相色谱法测定(中国药典2005年版一部附录VID); 色谱条件与系统适用性试验，以十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂，27:10:63 甲醇一乙睛_1%甲酸溶液为流动相；检测波长为286nm，理论板数按丹酚酸 B峰计算应不低于2000;对照品溶液的制备精密称取丹酚酸B对照品适量， 加75X甲醇制成每lml含0. 14mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取胶 囊内容物，研细，取5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇 50ml，称定重量，加热回流45分钟，取出，放冷，再称定重量，用75%甲 醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取 对照品溶液与供试品溶液各10pl，注入液相色谱仪，测定，即得；固体制剂 中单位制剂含丹参以丹酚酸B(C36H3。016)计，不得少于0. 60mg。
鉴别取胶囊内容物5g，研细，加75X乙醇50ml，加热回流1小时， 滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取3 次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶 液；另取异秦皮啶对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶 液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶 液各10"1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以19: l氯仿一甲醇为展开剂， 展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点。 实施例3:
丹参200g 白芍2000g 刺五加1000g郁金300g 山楂2000g
以上五味，取白芍330g粉碎成细粉或不粉碎，备用；山楂用乙醇加热 回流提取二次。每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓縮至适量，与白芍 粉或辅料混合，7(TC以下真空干燥，粉碎成细粉备用；剩余白芍或全部白芍 与其余丹参等三味加8、 6倍水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过， 滤液浓縮至密度为1.165—1.205，加乙醇使含醇量达70%，静置过夜，滤 取上清液，回收乙醇，浓縮成稠膏，与上述细粉混匀，加常规辅料制成滴丸。
含量测定照高效液相色谱法测定(中国药典2005年版一部附录VID); 色谱条件与系统适用性试验，以十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂，27:10:63 甲醇一乙睛一lQ/^甲酸溶液为流动相；检测波长为286nm，理论板数按丹酚酸 B峰计算应不低于2000;对照品溶液的制备精密称取丹酚酸B对照品适量， 加75X甲醇制成每lml含0. 14mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取滴 丸，研细，取5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75X甲醇50ml， 称定重量，加热回流45分钟，取出，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足 减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品 溶液与供试品溶液各10"1，注入液相色谱仪，测定，即得；固体制剂中单位 制剂含丹参以丹酚酸B(C36H3。016)计，不得少于0. 60mg。
鉴别取滴丸lg，研细，加无水乙醇10ml，超声处理20分钟，滤过， 滤液浓縮至lml，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每lml 含lmg的溶液，作为对照品溶液;照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附 录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点子同一硅胶G薄层板上， 以40:5:10:0. 2三氯甲垸一醋酸乙酯一甲醇一甲酸为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105'C加热至斑点显色清晰;供试品色谱 中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例4:
丹参200g 白芍2000g刺五加1000g郁金300g 山楂2000g 以上五味，取白芍330g粉碎成细粉或不粉碎，备用；山楂用乙醇加热回流提取二次。每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓縮至适量，与白芍 粉或辅料混合，7(TC以下真空干燥，粉碎成细粉备用；剩余白芍或全部白芍
与其余丹参等三味加8、 6倍水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过， 滤液浓縮至密度为1.165—1.205，加乙醇使含醇量达70%，静置过夜，滤 取上清液，回收乙醇，浓縮成稠膏，与上述细粉混匀，加常规辅料制成颗粒剂。
鉴别a取颗粒剂lg，研细，加无水乙醇10ml，超声处理20分钟，滤 过，滤液浓縮至lml，作为供试品溶液;另取芍药苷对照品，加甲醇制成每 lml含lmg的溶液，作为对照品溶液;照薄层色谱法(中国药典2005年版一部 附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10u 1，分别点子同一硅胶G薄层板上， 以40:5:10:0. 2三氯甲烷一醋酸乙酯一甲醇一甲酸为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105"C加热至斑点显色清晰;供试品色谱 中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
b取颗粒剂5g，研细，加75X乙醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤 液蒸干，残渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取3次，每 次10ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另 取异秦皮啶对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照 薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各 10Pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以19:1氯仿一甲醇为展开剂，展开， 取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相 应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点。 实施例5:
丹参200g 白芍2000g 刺五加1500g郁金300g 山楂2000g 以上五味，取白芍330g粉碎成细粉，备用；山楂用乙醇加热回流提取 二次。每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓縮至适量，与白芍粉混合， 7(TC以下真空干燥，粉碎成细粉备用；剩余白芍与其丹参等三味加水8、6倍 水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至密度为1. 165—1.205， 加乙醇使含醇量达70%，静置过夜，滤取上清液，回收乙醇，浓縮成稠膏， 与上述细粉混匀，制粒，压制成1000片，即得。
含量测定照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验，以十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂，27:10:63甲醇一乙睛一1%甲酸溶液为流动 相；检测波长为286nm，理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000;对照品 溶液的制备:精密称取丹酚酸B对照品适量，加75%甲醇制成每lml含O. 14mg 的溶液，即得；供试品溶液的制备取复方中药固体制剂，研细，取5g，精 密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，称定重量，加热回流 45分钟，取出，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀， 滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 lOul，注入液相色谱仪，测定，即得；固体制剂中单位制剂含丹参以丹酚酸 B (C36H3。0lfi)计，不得少于0. 60mg。
权利要求
1、一种复方中药的鉴别方法，其特征在于该方法包括如下鉴别中的一种或几种a取固体制剂1g，研细，加无水乙醇10ml，超声处理10-30分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点子同一硅胶G薄层板上，以30-50∶3-7∶8-12∶0.1-0.3三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3-6％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；b取固体制剂5g，研细，加70-80％乙醇50ml，加热回流0.5-2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取2-4次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取异秦皮啶对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以17-20∶1氯仿一甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点；所述的复方中药固体制剂是由如下方法制成的丹参100～300g白芍1000～3000g刺五加500～1500g郁金150～450g山楂1000～3000g以上五味，取白芍200～500g粉碎成细粉或不粉碎，备用；山楂用乙醇加热回流提取1～3次，每次1～3小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至适量，与白芍粉或辅料混合，50～80℃以真空干燥，粉碎成细粉备用，剩余白芍或全部白芍与其余丹参6～12倍水煎煮1～3次，每次1～3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至密度为1.05～1.35，加乙醇，使含醇量达50～80％，静置过夜，回收乙醇，浓缩成稠膏，与上述细粉混匀，按常规方法制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸等固体制剂。
2、如权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于该方法包括如下鉴别中的一种或几种a取固体制剂lg，研细，加无水乙醇10ml，超声处理20分钟，滤过， 滤液浓縮至lml，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每lml 含lmg的溶液，作为对照品溶液;照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10Ul，分别点子同一硅胶G薄层板上，以40: 5: 10: 0. 2三氯甲垸一醋酸乙酯一甲醇一甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液， 在105QC加热至斑点显色清晰;供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置 上，显相同颜色的斑点；b取固体制剂5g，研细，加75X乙醇50ml，加热回流1小时，滤过， 滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取3次， 每次10ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液； 另取异秦皮啶对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液； 照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层 板上，以19: l氯仿一甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm 下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光 斑点。
全文摘要
一种复方中药心舒宝片的质量检测方法，该方法包括含量测定和/或鉴别，具体指对心舒宝制剂中的刺五加、白芍进行薄层色谱定性鉴别，对丹参采用高效液相色谱法进行丹酚酸B的含量测定。
文档编号A61P3/06GK101584844SQ200910147298
公开日2009年11月25日 申请日期2006年5月10日 优先权日2006年5月10日
发明者松 夏, 绯 洪, 罗志毅, 赵水连, 陈纪鹏 申请人:漳州片仔癀药业股份有限公司
技术领域：
本发明涉及一种质量检测方法，特别是涉及一种复方中药的质量检测方 法，属于中药领域。
背景技术：
心舒宝片是具有活血化瘀，益气止痛的心血管药物，用于冠心病，气虚 血瘀引起的胸闷，心绞痛，以及高血压，高血脂，动脉硬化等。该中药品种 方中丹参苦微寒，祛瘀止痛、活血通经，为活血化瘀之要药；刺五加辛微苦 温，益气健脾、补肾安神，令气旺血行、瘀去络通；山楂酸甘微温，消食健 胃、行气散瘀，二药配合丹参则活血化瘀，益气止痛之功益彰；白芍缓急止 痛，郁金行气化瘀，使气行则血行，通则不痛，加强活血、化瘀止痛之功。 本品标本兼治，祛邪而不伤正，扶正而不碍邪，共奏活血化瘀，益气止痛之 功，是治疗冠心病，气虚血瘀引起的胸闷，心绞痛，以及高血压，高血脂， 动脉硬化等的常用药物。为促进中药制剂现代化，中药制剂不断研究质量检 测方法是必要的。
发明内容
本发明目的在于提供一种新的复方中药的质量检测方法。本发明目的是 通过如下技术方案实现的。
本发明复方中药的质量检测方法包括如下含量测定和/或鉴别中的一种 或几种
含量测定照高效液相色谱法测定(中国药典2005年版一部附录VI D); 色谱条件与系统适用性试验，以十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂，
25-29:8-12:60-65甲醇一 乙睛一 1 %甲酸溶液为流动相；检测波长为 280-300nm，理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000;对照品溶液的制备 精密称取丹酚酸B对照品适量，加70-80%甲醇制成每lml含O. 14mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取复方中药固体制剂，研细，取5g，精密称定，
置具塞锥形瓶中，精密加入70-80%甲醇50ml，称定重量，加热回流30-60 分钟，取出，放冷，再称定重量，用70-80%甲醇补足减失的重量，摇匀， 滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液， 注入液相色谱仪，测定，即得。
鉴别a取固体制剂lg，研细，加无水乙醇10ml，超声处理10-30 分钟，滤过，滤液浓縮至lml，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇 制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005 年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点子同一硅胶G 薄层板上，以30-50:3-7:8-12:0.1-0.3三氯甲烷一醋酸乙酯一 甲醇一 甲酸 为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3-6%香草醛硫酸溶液，在105。C加热 至斑点显色清晰;供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜 色的斑点。
b取固体制剂5g，研细，加70-80X乙醇50ml，加热回流O. 5-2小时， 滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲垸提取 2-4次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试 品溶液；另取异秦皮啶对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照 品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VI B)试验，吸取上述 两种溶液各10yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以17-20:1氯仿一甲醇 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中， 在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点。
本发明复方中药的质量检测方法优选如下含量测定和/或鉴别中的一种 或几种
含量测定照高效液相色谱法测定(中国药典2005年版一部附录VID); 色谱条件与系统适用性试验，以十八垸基硅垸键合硅胶为填充剂，27:10:63 甲醇一乙睛一1%甲酸溶液为流动相；检测波长为286nm，理论板数按丹酚酸 B峰计算应不低于2000;对照品溶液的制备精密称取丹酚酸B对照品适量， 加75X甲醇制成每lml含0. 14mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取复 方中药固体制剂，研细，取5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75
5X甲醇50ml，称定重量，加热回流45分钟，取出，放冷，再称定重量，用
75%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精
密吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得； 固体制剂中单位制剂含丹参以丹酚酸B(C36H3。016)计，不得少于0. 60mg。
鉴别a取固体制剂lg，研细，加无水乙醇10ml，超声处理20分钟， 滤过，滤液浓縮至lml，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每 lml含lmg的溶液，作为对照品溶液;照薄层色谱法(中国药典2005年版一部 附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各IOpI，分别点子同一硅胶G薄层板 上，以40:5:10:0. 2三氯甲垸_醋酸乙酯_甲醇_甲酸为展开剂，展开，取 出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105°(]加热至斑点显色清晰;供试品 色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
b取固体制剂5g，研细，加75X乙醇50ml，加热回流1小时，滤过， 滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲垸提取3次， 每次10ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液； 另取异秦皮啶对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液； 照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各 10ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以19:1氯仿一甲醇为展开剂，展开， 取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相 应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点。
本发明复方中药固体制剂是由如下方法制成的
丹参100 300g白芍 1000 3000g 刺五加500 1500g
郁金150 450g山楂 1000 3000g
以上五味，取白芍200 500g粉碎成细粉，备用；山楂用乙醇加热回流 提取1 3次，每次1 3小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至适量，与白 芍粉或辅料混合，50 8(TC以真空干燥，粉碎成细粉备用，剩余白芍或全部 白芍与其余丹参用6 12倍水煎煮1 3次，每次1 3小时，合并煎液，滤 过，滤液浓縮至密度为1.05 1.35，加乙醇，使含醇量达50 80%，静置 过夜，回收乙醇，浓縮成稠膏，与上述细粉混匀，按常规方法制成片剂、胶 囊剂、颗粒剂、滴丸等固体制剂。本发明质量检测方法使本发明复方中药制剂质量可控、疗效确切。下述 实验和实施例用于进一步说明但不限于本发明。 实验例1 本发明复方中药固体制剂心舒宝片的抗心绞痛作用研究 方法和结果
(一)小鼠心脏耐缺氧能力取ICR系小鼠50只，早$各半，体重23 28g，随机分为5组，每组10只，禁食不禁水12小时后按表1分别给予生 理盐水、复方丹参以及等比剂量的心舒宝灌胃。40分钟后腹腔注射5%乌拉 坦0. 15ml/10g麻醉，暴露气管，以XZ-ll心电监视仪(上海医用电子仪器 厂)监视肢体II导联心电并记录心率，然后以棉线将气管扎紧，完全阻断呼 吸，以心脏停转时间的长短做为心脏耐缺氧的指标，结果进行t测验(表l)。
表l心舒宝对小鼠心脏耐缺氧能力的影响(X士SD， n二10)
组别药物与剂量(灌胃)心脏耐缺氧时间(分)P值
1生理盐水0. 2ml/10g6. 69 ±1. 40
2复方丹参0. 25g/10g18. 85±1.73<0. 001
3心舒宝0. 25g/10g19.10±1. 52<0. 001
4心舒宝0. 20g/10g14. 75±2. 88<0. 001
5心舒宝0. 16g/10g14. 35±2. 19<0. 001
注与生理盐水对照组比较
表1提示，三个等比剂量的心舒宝都显著地提高小鼠心脏的耐缺氧能力
并具有量效关系，其大剂量组的心脏耐缺氧时间延长达185.5%，超过复方丹参组。
(二)离体大鼠心脏冠脉流量雄性SD系大鼠40只，250 320g，随机 分为4组，每组10只，按Langendorff法进行离体心脏灌流(灌流压50cmH20， 洛氏液温38±rC， PH7. 25±1，充氧)，心尖部经换能器与LMS-2A 二道生理记 录仪(成都仪器厂)相连，冠脉流量由自动记录仪(自制)描绘，给药情况 及实验结果见表2。
表2.心舒宝对离体大鼠心脏冠脉流量和心率的影响(X±SD, n=10)
组别药物浓度冠脉流量(ml/min)心率(次/min)
给药前给药后给药前给药后
1心舒宝0. 5mg%4. 86 ±0. 625. 92±0. 60※※188. 1±6. 7115. 36±8. 76
2心舒宝0. 5%4. 79 ±0. 805. 88±1. 12※190. 2 ±10. 97145. 56±14. 75※※
3心舒宝0. 25%4. 53 ±0. 645. 69±0. 98※※182. 6±8. 2130. 3士8.99※※
4心舒宝0. 125%4. 66 ±0. 655. 41±0. 83※186. 8±6. 88160. 9土19,50※※※P〈0.05，※※P〈0.01,给药前后自身对比
从表2可见，心舒宝能显著地减慢离体心脏的心率，提高冠脉灌流量， 其作用特点与心得安相似，其效果以0.25%浓度组最明显，加大灌流浓度并 不相应提高疗效。
(三)对抗大鼠急性心肌缺血心电图雄性SD系大鼠55只，250-350g， 随机分为5组(其中生理盐水组15只)，腹腔注射乌拉坦麻醉后以XDH-2心 电图机(上海医用电子仪器厂)描记肢体II导联心电图(lmv=10mm， 50mm/s) 并按表3所示给药。经l小时(复方丹参组0.5小时)后再次描记心电图， 从尾静脉注入脑下垂体后叶素0.75u/kg(10〃)，分别记录注射后10〃， 20〃， 30"， 40〃， l'， 3'，和5'的心电图，按中国医学科学院药物研究所标准 (中草药有效成份的研究，人民卫生出版社1972)判断是否发生急性心肌缺 血，结果进行X2测验(表3)。
表3.心舒宝对大鼠急性心肌缺血心电图的保护作用
组别给药方法急性心肌缺血鼠数(只)P
阳性阴性
1生理盐水2ml/100g po141
2复方丹参2g/100g po19<0.01
3心舒宝4g/100g po19<0. 01
4心舒宝2g/100g po19<0. 01
5心舒宝lg/100g po28〈0.01
注与生理盐水对照组比较
对照组大鼠在静脉注射脑下垂体后叶素后，出现典型的缺血性T-ST波 形，部份实验鼠还出现心律失常，急性心肌缺血发生率达93. 3%，而口服心 舒宝lg/100g和2g/100g的大鼠，其心肌缺血发生率明显降低，分别只在20% 和1(m。其保护作用与腹腔注射复方丹参2g/100g组相似，组间无显著差异。 这提示，心舒宝片口服有明显的抗急性心肌缺血作用。
下述实施例均能实现上述实验例的效果。
具体实施方式
实施例1:
丹参200g 白芍2000g 刺五加1000g郁金300g 山楂2000g
8以上五味，取白芍330g粉碎成细粉或不粉碎，备用；山楂用乙醇加热 回流提取二次。每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓縮至适量，与白芍
粉或辅料混合，7(TC以下真空干燥，粉碎成细粉备用；剩余白芍或全部白芍 与其余丹参等三味加8、 6倍水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过， 滤液浓縮至密度为1.165—1.205，加乙醇使含醇量达70%，静置过夜，滤 取上清液，回收乙醇，浓縮成稠膏，与上述细粉混匀，制粒，压制成1000 片，即得。
含量测定:照高效液相色谱法测定(中国药典2005年版一部附录VID); 色谱条件与系统适用性试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，27:10:63 甲醇一乙睛一1%甲酸溶液为流动相；检测波长为286nm，理论板数按丹酚酸 B峰计算应不低于2000;对照品溶液的制备精密称取丹酚酸B对照品适量， 加75X甲醇制成每lml含0. 14mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取片 剂，研细，取5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75X甲醇50ml， 称定重量，加热回流45分钟，取出，放冷，再称定重量，用75Q/^甲醇补足 减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品 溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得；固体制剂中单位 制剂含丹参以丹酚酸B(C36H3。016)计，不得少于0. 60mg。
鉴别a取片剂lg，研细，加无水乙醇10ml，超声处理20分钟，滤 过，滤液浓縮至lml，作为供试品溶液;另取芍药苷对照品，加甲醇制成每 lml含lmg的溶液，作为对照品溶液;照薄层色谱法(中国药典2005年版一部 附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10u 1，分别点子同一硅胶G薄层板上， 以40:5:10:0. 2三氯甲垸一醋酸乙酯一甲醇一甲酸为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105°(:加热至斑点显色清晰;供试品色谱 中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
b取片剂5g，研细，加75X乙醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤液 蒸干，残渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲垸提取3次，每次 10ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另取 异秦皮啶对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照薄 层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10U 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以19: l氯仿一甲醇为展开剂，展开，
取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相 应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点。 实施例2:
丹参200g 白芍2000g 剌五加1000g 郁金300g 山楂2000g 以上五味，取白芍330g粉碎成细粉或不粉碎，备用；山楂用乙醇加热 回流提取二次。每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓縮至适量，与白芍 粉或辅料混合，7(TC以下真空干燥，粉碎成细粉备用；剩余白芍或全部白芍 与其余丹参等三味加8、 6倍水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过， 滤液浓縮至密度为1.165—1.205，加乙醇使含醇量达70%，静置过夜，滤 取上清液，回收乙醇，浓縮成稠膏，与上述细粉混匀，制粒，制成胶囊1000 粒，即得。
含量测定:照高效液相色谱法测定(中国药典2005年版一部附录VID); 色谱条件与系统适用性试验，以十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂，27:10:63 甲醇一乙睛_1%甲酸溶液为流动相；检测波长为286nm，理论板数按丹酚酸 B峰计算应不低于2000;对照品溶液的制备精密称取丹酚酸B对照品适量， 加75X甲醇制成每lml含0. 14mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取胶 囊内容物，研细，取5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇 50ml，称定重量，加热回流45分钟，取出，放冷，再称定重量，用75%甲 醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取 对照品溶液与供试品溶液各10pl，注入液相色谱仪，测定，即得；固体制剂 中单位制剂含丹参以丹酚酸B(C36H3。016)计，不得少于0. 60mg。
鉴别取胶囊内容物5g，研细，加75X乙醇50ml，加热回流1小时， 滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取3 次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶 液；另取异秦皮啶对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶 液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶 液各10"1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以19: l氯仿一甲醇为展开剂， 展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点。 实施例3:
丹参200g 白芍2000g 刺五加1000g郁金300g 山楂2000g
以上五味，取白芍330g粉碎成细粉或不粉碎，备用；山楂用乙醇加热 回流提取二次。每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓縮至适量，与白芍 粉或辅料混合，7(TC以下真空干燥，粉碎成细粉备用；剩余白芍或全部白芍 与其余丹参等三味加8、 6倍水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过， 滤液浓縮至密度为1.165—1.205，加乙醇使含醇量达70%，静置过夜，滤 取上清液，回收乙醇，浓縮成稠膏，与上述细粉混匀，加常规辅料制成滴丸。
含量测定照高效液相色谱法测定(中国药典2005年版一部附录VID); 色谱条件与系统适用性试验，以十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂，27:10:63 甲醇一乙睛一lQ/^甲酸溶液为流动相；检测波长为286nm，理论板数按丹酚酸 B峰计算应不低于2000;对照品溶液的制备精密称取丹酚酸B对照品适量， 加75X甲醇制成每lml含0. 14mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取滴 丸，研细，取5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75X甲醇50ml， 称定重量，加热回流45分钟，取出，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足 减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品 溶液与供试品溶液各10"1，注入液相色谱仪，测定，即得；固体制剂中单位 制剂含丹参以丹酚酸B(C36H3。016)计，不得少于0. 60mg。
鉴别取滴丸lg，研细，加无水乙醇10ml，超声处理20分钟，滤过， 滤液浓縮至lml，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每lml 含lmg的溶液，作为对照品溶液;照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附 录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点子同一硅胶G薄层板上， 以40:5:10:0. 2三氯甲垸一醋酸乙酯一甲醇一甲酸为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105'C加热至斑点显色清晰;供试品色谱 中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
实施例4:
丹参200g 白芍2000g刺五加1000g郁金300g 山楂2000g 以上五味，取白芍330g粉碎成细粉或不粉碎，备用；山楂用乙醇加热回流提取二次。每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓縮至适量，与白芍 粉或辅料混合，7(TC以下真空干燥，粉碎成细粉备用；剩余白芍或全部白芍
与其余丹参等三味加8、 6倍水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过， 滤液浓縮至密度为1.165—1.205，加乙醇使含醇量达70%，静置过夜，滤 取上清液，回收乙醇，浓縮成稠膏，与上述细粉混匀，加常规辅料制成颗粒剂。
鉴别a取颗粒剂lg，研细，加无水乙醇10ml，超声处理20分钟，滤 过，滤液浓縮至lml，作为供试品溶液;另取芍药苷对照品，加甲醇制成每 lml含lmg的溶液，作为对照品溶液;照薄层色谱法(中国药典2005年版一部 附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各10u 1，分别点子同一硅胶G薄层板上， 以40:5:10:0. 2三氯甲烷一醋酸乙酯一甲醇一甲酸为展开剂，展开，取出， 晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，在105"C加热至斑点显色清晰;供试品色谱 中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
b取颗粒剂5g，研细，加75X乙醇50ml，加热回流1小时，滤过，滤 液蒸干，残渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取3次，每 次10ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液；另 取异秦皮啶对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液；照 薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述两种溶液各 10Pl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以19:1氯仿一甲醇为展开剂，展开， 取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相 应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点。 实施例5:
丹参200g 白芍2000g 刺五加1500g郁金300g 山楂2000g 以上五味，取白芍330g粉碎成细粉，备用；山楂用乙醇加热回流提取 二次。每次2小时，合并提取液，回收乙醇，浓縮至适量，与白芍粉混合， 7(TC以下真空干燥，粉碎成细粉备用；剩余白芍与其丹参等三味加水8、6倍 水煎煮二次，每次2小时，合并煎液，滤过，滤液浓縮至密度为1. 165—1.205， 加乙醇使含醇量达70%，静置过夜，滤取上清液，回收乙醇，浓縮成稠膏， 与上述细粉混匀，制粒，压制成1000片，即得。
含量测定照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验，以十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂，27:10:63甲醇一乙睛一1%甲酸溶液为流动 相；检测波长为286nm，理论板数按丹酚酸B峰计算应不低于2000;对照品 溶液的制备:精密称取丹酚酸B对照品适量，加75%甲醇制成每lml含O. 14mg 的溶液，即得；供试品溶液的制备取复方中药固体制剂，研细，取5g，精 密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入75%甲醇50ml，称定重量，加热回流 45分钟，取出，放冷，再称定重量，用75%甲醇补足减失的重量，摇匀， 滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 lOul，注入液相色谱仪，测定，即得；固体制剂中单位制剂含丹参以丹酚酸 B (C36H3。0lfi)计，不得少于0. 60mg。
权利要求
1、一种复方中药的鉴别方法，其特征在于该方法包括如下鉴别中的一种或几种a取固体制剂1g，研细，加无水乙醇10ml，超声处理10-30分钟，滤过，滤液浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点子同一硅胶G薄层板上，以30-50∶3-7∶8-12∶0.1-0.3三氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以3-6％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；b取固体制剂5g，研细，加70-80％乙醇50ml，加热回流0.5-2小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取2-4次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取异秦皮啶对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以17-20∶1氯仿一甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光斑点；所述的复方中药固体制剂是由如下方法制成的丹参100～300g白芍1000～3000g刺五加500～1500g郁金150～450g山楂1000～3000g以上五味，取白芍200～500g粉碎成细粉或不粉碎，备用；山楂用乙醇加热回流提取1～3次，每次1～3小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至适量，与白芍粉或辅料混合，50～80℃以真空干燥，粉碎成细粉备用，剩余白芍或全部白芍与其余丹参6～12倍水煎煮1～3次，每次1～3小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至密度为1.05～1.35，加乙醇，使含醇量达50～80％，静置过夜，回收乙醇，浓缩成稠膏，与上述细粉混匀，按常规方法制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、滴丸等固体制剂。
2、如权利要求1所述的鉴别方法，其特征在于该方法包括如下鉴别中的一种或几种a取固体制剂lg，研细，加无水乙醇10ml，超声处理20分钟，滤过， 滤液浓縮至lml，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加甲醇制成每lml 含lmg的溶液，作为对照品溶液;照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10Ul，分别点子同一硅胶G薄层板上，以40: 5: 10: 0. 2三氯甲垸一醋酸乙酯一甲醇一甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液， 在105QC加热至斑点显色清晰;供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置 上，显相同颜色的斑点；b取固体制剂5g，研细，加75X乙醇50ml，加热回流1小时，滤过， 滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，置分液漏斗中，加三氯甲烷提取3次， 每次10ml，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇lml使溶解，作为供试品溶液； 另取异秦皮啶对照品，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作为对照品溶液； 照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10ul，分别点于同一硅胶G薄层 板上，以19: l氯仿一甲醇为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm 下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的蓝色荧光 斑点。
全文摘要
一种复方中药心舒宝片的质量检测方法，该方法包括含量测定和/或鉴别，具体指对心舒宝制剂中的刺五加、白芍进行薄层色谱定性鉴别，对丹参采用高效液相色谱法进行丹酚酸B的含量测定。
文档编号A61P3/06GK101584844SQ200910147298
公开日2009年11月25日 申请日期2006年5月10日 优先权日2006年5月10日
发明者松 夏, 绯 洪, 罗志毅, 赵水连, 陈纪鹏 申请人:漳州片仔癀药业股份有限公司
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