积雪草总皂苷的提取方法及其在医药领域中的应用的制作方法
专利名称：积雪草总皂苷的提取方法及其在医药领域中的应用的制作方法
技术领域：
本发明属医药技术领域，具体涉及一种从积雪草中提取分离得到积雪草总皂 苷及其在治疗抑郁症等精神疾病中的作用。
背景技术：
积雪草是伞形科(Umbelliferae)植物积雪草Centella asiatica (L.) Urban
的干燥全草或带根全草，是一种传统草药。中医理论中其具有清热解毒、利湿 消肿之功效，用于治疗湿热黄疸、中暑腹泻、砂淋血淋、痈肿疮毒、跌扑损 伤等病症；陶弘景曰此草以寒凉得名，其性大寒，故名积雪草。
发明内容
最早记载在《神农本草经》中，全草入药，列为中品，广泛分布于长江流域 以南各地。我国中医用积雪草外用及内服治病已有两千多年历史。其具有清热利 湿、解毒消肿之^3能。适用于湿热黄疸、中暑腹泻、砂淋血淋、痈肿疮毒、跌扑 损伤。本发明的目的是，根据中医药理论和治疗经验，结合现代化学和药理学手 段，从积雪草中提取分离得到高效、无毒，可用作治疗抑郁等精神疾病的皂苷类 化合物，即积雪草总皂苷。
积雪草总皂苷的提取工艺流程如下称取积雪草的全草，加入40%~80%的 乙醇于超声波提取器中提取，将提取液浓縮得浓縮液；再利用空化混悬萃取分离 装置先用氯仿萃取，回收氯仿将水溶液部分用乙酸乙酯萃取，接着回收乙酸乙酯 并将水溶液部分再用正丁醇萃取，回收iH丁醇，干燥，即得到较高含量的积雪草 总皂苷。
本发明对积雪草总皂苷进行了抗抑郁作用的评价实验。
1、 实验目的
探讨积雪草总皂苷的抗抑郁作用机制。
2、 实验方法-
采用育亨宾毒性增强实验、阿朴吗啡致刻板运动实验等多种动物模型实验来 探讨积雪草总皂苷抗抑郁作用的可能机制
3、 实验内容3.1育亨宾毒性增强实验给予育亨宾后，30min内高剂量死亡l只，lh 内，药物高、中、低、阳性及空白各死亡l只，2h内阳性药物组全部死亡；24h 死亡率见表1。
_表l积雪草总皂苷对育亨宾的致死作用的影响(x土s， n-lO)
ii~~剂量(mg'kg—1) 0.5h内死亡lh内死亡(只)2h内死亡(只)24h内死亡(％)
(只)
3.2阿朴吗啡致小鼠刻板运动实验动物分组给药，阳性药氟哌噻吨美利 曲辛片剂量为0.2mg'kg—'。各组小鼠在末次给药lh后，皮下注射阿朴吗啡 16mg.kg—1，立即单独放入16X27cm的小鼠笼中，笼底部预先铺上揉有皱褶的 纸，皱褶向上。根据小鼠刻板运动的评分标准，观察阿朴吗啡lh内动物出现刻 板运动的程度，见表2。
_表2积雪草总皂苷对阿朴吗啡致刻板运动的影响(x士s, n=10)
组别 剂量(mg kg—1 ) 刻板评分 增加率(％)
空白组 2.2±0.63 ^"^"^
Pll性组 1.6 3.4±0.52b 54
总乌-tT组 120 2.6 ±0.70 18
602.6 ±0.52 18 _30 _2.2 ±0.42 _￡_
注与空白对照组比较，6尸<0.05。
4、 实验结果
结果表明积雪草总皂苷在30 120mg 'kg"剂量范围内对育亨宾毒性无增强 作用。积雪草总皂苷对注射阿朴吗啡后的小鼠没有增加刻板作用的能力。
5、 实验结论
以上实验表明积雪草总皂苷等成分的作用特点就在于其改善精神抑郁疗效 显著并且副作用小。
o g o o o
l S 2 1 1
1 5
K 2 1 1
o o 1 o
自 <zv 纟.
白性，
空酐皂
总
具体实施例方式
实施例1
500g积雪草干燥全草，用65%乙醇在超声波提取器进行提取，提取三次， 用量分别是IO、 8、 6倍，每次提取l小时，将三次提取滤液合并浓縮至无醇， 利用空化混悬萃取分离装置分别用三倍量的氯仿，乙酸乙酯及正丁醇依次萃取， 回收溶剂，干燥，得产品34.5g，皂苷含量18.0%。
实施例2
500g积雪草干燥全草，用75%乙醇在超声波提取器进行提取，提取三次， 用量分别是IO、 8、 6倍，每次提取l小时，将三次提取滤液合并浓缩至无醇， 利用空化混悬萃取分离装置分别用三倍量的氯仿，乙酸乙酯及正丁醇依次萃取， 回收溶剂，干燥，得产品22.6g，皂苷含量39.6%。
实施例3
500g积雪草干燥全草，用85%乙醇在超声波提取器中进行提取，提取三次， 用量分别是IO、 S、 6倍，每次提取l小时，将三次提取滤液合并浓縮至无醇， 利用空化混悬萃取分离装置分别用三倍量的氯仿，乙酸乙酯及正丁醇依次萃取， 回收溶剂，干燥，得产品17.5g，皂苷含量68.5%。
实施例4
取积雪草总皂苷100g，用适量注射用水分散，加入辅料适量，混匀，制成 颗粒剂，干燥。
按实施例所得的颗粒剂，按所需剂量分装于空胶壳中，即得胶囊剂。 按实施例所得的颗粒剂，直接压片，薄膜包衣，即得片剂。 用于治疗抑郁症等精神疾病。 实施例5
将积雪草总皂苷适量加注射用水分散，喷雾干燥或真空干燥，得积雪草皂苷 干粉。取聚乙二醇400，加积雪草苷干粉，边加边搅拌至匀，采用压制法，制成 软胶囊。用于治疗抑郁症等精神疾病。
实施例6
取积雪草总皂苷400mg，加注射用水适量溶解。加甘露醇400mg,按照常规 冷冻干燥工艺冻干，即得积雪草总皂苷冻干粉。用于治疗抑郁症等精神疾病。
权利要求
1、一种从积雪草中提取分离积雪草总皂苷的方法，其特征在于将干燥积雪草Centella asiatica(L.)Urb全草浸于40％～80％乙醇中，用超声波提取技术提取，提取液浓缩，得浓缩液；再利用空化混悬萃取设备先用氯仿萃取，取水部分再用乙酸乙酯萃取，又取水部分最后用正丁醇萃取，得正丁醇部分进行减压回流，干燥，即得积雪草总皂苷。
2、 按权利要求1所述积雪草的全草，其特征在于积雪草来源于伞形科植物积 雪草Centella asiatica a.) Urb.的干燥全草。
3、 按权利要求1所述用超声波提取技术提取，其特征在于利用超声波产生的强 烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，加速积雪草全草的有 效成分进入乙醇，这样就提高了提出率，縮短了提取时间，且避免了因长时 间提取，而造成的提取液中含有较多杂质。
4、 按权利要求1所述空化混悬萃取设备，其特征在于利用新型的一种结构简单、 快速传质、快速分离、萃取率达95%以上、废渣中溶剂残留在5%以下的负 压空化液萃取分离装置。
5、 按权利要求1所述用氯仿和乙酸乙酯萃取，其特征在于去除非积雪草皂苷的 成分。
6、 按权利要求l所述氯仿和乙酸乙酯萃取部分液体，其特征在于需回收溶剂。
7、 按权利要求1所述积雪草总皂苷，其特征在于包含有积雪草皂苷类化合物。
8、 按权利要求1所述的积雪草总皂苷可以用于制备抗抑郁药物的应用。
全文摘要
本发明公开了一种从伞形科植物积雪草Centella asiatica(L.)Urb.的干燥的全草中提取纯化积雪草总皂苷的工艺。其工艺流程为称取积雪草全草，加入40％～80％的乙醇于超声波提取器中提取，将提取液浓缩得浓缩液；再利用空化混悬萃取设备先用氯仿萃取，取水部分再用乙酸乙酯萃取，又取水部分最后用正丁醇萃取，得正丁醇部分进行减压回流，干燥，即得到积雪草总皂苷。对积雪草总皂苷实验的研究证明其具有抗抑郁作用。
文档编号A61K36/185GK101653465SQ20091015271
公开日2010年2月24日 申请日期2009年9月15日 优先权日2009年9月15日
发明者丁萍月, 军 傅, 军 巫, 张佳佳, 朱可奇, 王忠华, 许夏冰 申请人:军 傅
技术领域：
本发明属医药技术领域，具体涉及一种从积雪草中提取分离得到积雪草总皂 苷及其在治疗抑郁症等精神疾病中的作用。
背景技术：
积雪草是伞形科(Umbelliferae)植物积雪草Centella asiatica (L.) Urban
的干燥全草或带根全草，是一种传统草药。中医理论中其具有清热解毒、利湿 消肿之功效，用于治疗湿热黄疸、中暑腹泻、砂淋血淋、痈肿疮毒、跌扑损 伤等病症；陶弘景曰此草以寒凉得名，其性大寒，故名积雪草。
发明内容
最早记载在《神农本草经》中，全草入药，列为中品，广泛分布于长江流域 以南各地。我国中医用积雪草外用及内服治病已有两千多年历史。其具有清热利 湿、解毒消肿之^3能。适用于湿热黄疸、中暑腹泻、砂淋血淋、痈肿疮毒、跌扑 损伤。本发明的目的是，根据中医药理论和治疗经验，结合现代化学和药理学手 段，从积雪草中提取分离得到高效、无毒，可用作治疗抑郁等精神疾病的皂苷类 化合物，即积雪草总皂苷。
积雪草总皂苷的提取工艺流程如下称取积雪草的全草，加入40%~80%的 乙醇于超声波提取器中提取，将提取液浓縮得浓縮液；再利用空化混悬萃取分离 装置先用氯仿萃取，回收氯仿将水溶液部分用乙酸乙酯萃取，接着回收乙酸乙酯 并将水溶液部分再用正丁醇萃取，回收iH丁醇，干燥，即得到较高含量的积雪草 总皂苷。
本发明对积雪草总皂苷进行了抗抑郁作用的评价实验。
1、 实验目的
探讨积雪草总皂苷的抗抑郁作用机制。
2、 实验方法-
采用育亨宾毒性增强实验、阿朴吗啡致刻板运动实验等多种动物模型实验来 探讨积雪草总皂苷抗抑郁作用的可能机制
3、 实验内容3.1育亨宾毒性增强实验给予育亨宾后，30min内高剂量死亡l只，lh 内，药物高、中、低、阳性及空白各死亡l只，2h内阳性药物组全部死亡；24h 死亡率见表1。
_表l积雪草总皂苷对育亨宾的致死作用的影响(x土s， n-lO)
ii~~剂量(mg'kg—1) 0.5h内死亡lh内死亡(只)2h内死亡(只)24h内死亡(％)
(只)
3.2阿朴吗啡致小鼠刻板运动实验动物分组给药，阳性药氟哌噻吨美利 曲辛片剂量为0.2mg'kg—'。各组小鼠在末次给药lh后，皮下注射阿朴吗啡 16mg.kg—1，立即单独放入16X27cm的小鼠笼中，笼底部预先铺上揉有皱褶的 纸，皱褶向上。根据小鼠刻板运动的评分标准，观察阿朴吗啡lh内动物出现刻 板运动的程度，见表2。
_表2积雪草总皂苷对阿朴吗啡致刻板运动的影响(x士s, n=10)
组别 剂量(mg kg—1 ) 刻板评分 增加率(％)
空白组 2.2±0.63 ^"^"^
Pll性组 1.6 3.4±0.52b 54
总乌-tT组 120 2.6 ±0.70 18
602.6 ±0.52 18 _30 _2.2 ±0.42 _￡_
注与空白对照组比较，6尸<0.05。
4、 实验结果
结果表明积雪草总皂苷在30 120mg 'kg"剂量范围内对育亨宾毒性无增强 作用。积雪草总皂苷对注射阿朴吗啡后的小鼠没有增加刻板作用的能力。
5、 实验结论
以上实验表明积雪草总皂苷等成分的作用特点就在于其改善精神抑郁疗效 显著并且副作用小。
o g o o o
l S 2 1 1
1 5
K 2 1 1
o o 1 o
自 <zv 纟.
白性，
空酐皂
总
具体实施例方式
实施例1
500g积雪草干燥全草，用65%乙醇在超声波提取器进行提取，提取三次， 用量分别是IO、 8、 6倍，每次提取l小时，将三次提取滤液合并浓縮至无醇， 利用空化混悬萃取分离装置分别用三倍量的氯仿，乙酸乙酯及正丁醇依次萃取， 回收溶剂，干燥，得产品34.5g，皂苷含量18.0%。
实施例2
500g积雪草干燥全草，用75%乙醇在超声波提取器进行提取，提取三次， 用量分别是IO、 8、 6倍，每次提取l小时，将三次提取滤液合并浓缩至无醇， 利用空化混悬萃取分离装置分别用三倍量的氯仿，乙酸乙酯及正丁醇依次萃取， 回收溶剂，干燥，得产品22.6g，皂苷含量39.6%。
实施例3
500g积雪草干燥全草，用85%乙醇在超声波提取器中进行提取，提取三次， 用量分别是IO、 S、 6倍，每次提取l小时，将三次提取滤液合并浓縮至无醇， 利用空化混悬萃取分离装置分别用三倍量的氯仿，乙酸乙酯及正丁醇依次萃取， 回收溶剂，干燥，得产品17.5g，皂苷含量68.5%。
实施例4
取积雪草总皂苷100g，用适量注射用水分散，加入辅料适量，混匀，制成 颗粒剂，干燥。
按实施例所得的颗粒剂，按所需剂量分装于空胶壳中，即得胶囊剂。 按实施例所得的颗粒剂，直接压片，薄膜包衣，即得片剂。 用于治疗抑郁症等精神疾病。 实施例5
将积雪草总皂苷适量加注射用水分散，喷雾干燥或真空干燥，得积雪草皂苷 干粉。取聚乙二醇400，加积雪草苷干粉，边加边搅拌至匀，采用压制法，制成 软胶囊。用于治疗抑郁症等精神疾病。
实施例6
取积雪草总皂苷400mg，加注射用水适量溶解。加甘露醇400mg,按照常规 冷冻干燥工艺冻干，即得积雪草总皂苷冻干粉。用于治疗抑郁症等精神疾病。
权利要求
1、一种从积雪草中提取分离积雪草总皂苷的方法，其特征在于将干燥积雪草Centella asiatica(L.)Urb全草浸于40％～80％乙醇中，用超声波提取技术提取，提取液浓缩，得浓缩液；再利用空化混悬萃取设备先用氯仿萃取，取水部分再用乙酸乙酯萃取，又取水部分最后用正丁醇萃取，得正丁醇部分进行减压回流，干燥，即得积雪草总皂苷。
2、 按权利要求1所述积雪草的全草，其特征在于积雪草来源于伞形科植物积 雪草Centella asiatica a.) Urb.的干燥全草。
3、 按权利要求1所述用超声波提取技术提取，其特征在于利用超声波产生的强 烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，加速积雪草全草的有 效成分进入乙醇，这样就提高了提出率，縮短了提取时间，且避免了因长时 间提取，而造成的提取液中含有较多杂质。
4、 按权利要求1所述空化混悬萃取设备，其特征在于利用新型的一种结构简单、 快速传质、快速分离、萃取率达95%以上、废渣中溶剂残留在5%以下的负 压空化液萃取分离装置。
5、 按权利要求1所述用氯仿和乙酸乙酯萃取，其特征在于去除非积雪草皂苷的 成分。
6、 按权利要求l所述氯仿和乙酸乙酯萃取部分液体，其特征在于需回收溶剂。
7、 按权利要求1所述积雪草总皂苷，其特征在于包含有积雪草皂苷类化合物。
8、 按权利要求1所述的积雪草总皂苷可以用于制备抗抑郁药物的应用。
全文摘要
本发明公开了一种从伞形科植物积雪草Centella asiatica(L.)Urb.的干燥的全草中提取纯化积雪草总皂苷的工艺。其工艺流程为称取积雪草全草，加入40％～80％的乙醇于超声波提取器中提取，将提取液浓缩得浓缩液；再利用空化混悬萃取设备先用氯仿萃取，取水部分再用乙酸乙酯萃取，又取水部分最后用正丁醇萃取，得正丁醇部分进行减压回流，干燥，即得到积雪草总皂苷。对积雪草总皂苷实验的研究证明其具有抗抑郁作用。
文档编号A61K36/185GK101653465SQ20091015271
公开日2010年2月24日 申请日期2009年9月15日 优先权日2009年9月15日
发明者丁萍月, 军 傅, 军 巫, 张佳佳, 朱可奇, 王忠华, 许夏冰 申请人:军 傅
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