一种含山药的中药组合物及其应用的制作方法

专利名称：：一种含山药的中药组合物及其应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及一种含山药的中药组合物，及其在制备防治功能性消化不良药物中的应用。(二)
背景技术：
：功能性消化不良(FunctionalDysp印sia，FD)是指具有餐后饱胀不适、早饱、嗳气、恶心、呕吐、上腹痛或上腹烧灼感等症状，经检查排除引起这些症状的器质性疾病的一组临床综合征，罗马III标准将其分为餐后不适综合征和上腹疼痛综合征。其发病非常普遍，每个人的一生中几乎都有过消化不良的症状。西方国家流行病学研究表明每年有15%20%的人经历过消化不良，国内统计占正常人群的18.9%，占消化内科病人数的40%左右，约占胃肠专科门诊患者的1/3。而且随着生活节奏日益加快，其发病愈来愈广泛。FD虽然不危及人的生命，却严重影响人们的学习工作和生活质量，占用了相当高的医疗费用。尽管本病预后相对良好，但长期的消化不良会影响患者体质，从而使免疫力下降，处于一种亚健康状态，易于感染其他疾病，因而此病已逐渐成为现代社会中一个主要的医疗保健问题。此外，由于FD的发病机制尚未完全阐明，所以其治疗方面尚无特效药物，西医多局限于对症治疗，疗效不确切且易产生耐药和副作用；中药汤剂虽然疗效好，但多为个体化治疗方案，不易推广。因而如何有效防治FD已成为目前临床和科研的热点。鉴于这种情况，临床迫切需要一种既具备中药的良好疗效，又易于进行群体化治疗，且服用方便的中成药。(三)
发明内容本发明目的是为了提供一种疗效确切、服用方便、药源丰富、价格低廉，无明显毒副作用的能有效调节胃肠运动功能的含山药的中药组合物，以及这种中药组合取物在制备防治功能性消化不良药物中的应用。本发明采用的技术方案是—种含山药的中药组合物，由质量配比如下的组分组成山药525伤、薏苡仁525份陈皮115份。优选的，所述组合物质量配比如下山药10份薏该仁10份陈皮5份。其中山药味甘，性平，归脾、肺、肾经，具有益气养阴，补脾益胃之功效。现代药理研究表明，山药主要含有薯蓣皂苷元、尿囊素、多糖等成分，能调节机体免疫功能及胃肠运动功能。薏苡仁味甘淡，归脾、胃、肺经，具有利水渗湿，健脾益胃，清热排脓除痹之功效，性微寒而不伤胃，益脾而不滋腻，是清补利湿之佳品。薏苡仁含薏苡仁脂、粗蛋白、脂类，还含葡3聚糖和多种挥发油，具有增强机体体液免疫、镇痛、解热、抗炎等作用。陈皮味苦、辛，性温，归肺、脾经，具有理气健脾，燥湿化痰之功效，陈皮主要含有挥发油、黄酮类、有机胺类及微量元素等成分，具有促进唾液淀粉酶活性，促进小鼠胃排空和肠推进的作用，其挥发油对消化道有缓和的剌激作用，利于胃肠积气的排出。三药合用，清补脾胃，健运中州，条畅气机。此方组方思想明确，配伍精炼，力专效宏，充分体现了"健脾关键在运脾"主旨，切合胃肠运动功能障碍的主要病机——脾运失健，气机失调。其临床应用多年，在治疗功能性消化道疾病上都取得良好的疗效。所述中药组合物的有效成分可按常规水提醇沉法进行，具体的，所述方法包括取配方量的山药、薏苡仁和陈皮，加入质量为山药、薏苡仁和陈皮总质量1.55倍质量的水，回流提取13次、每次0.52小时，合并水提取液，过滤，取滤液减压浓縮得清膏，清膏搅拌加入8095%(v/v)的乙醇至乙醇终浓度为6070%(v/v)，静置24小时以上，取上清液，过滤取滤液减压回收乙醇，浓縮，得中药提取物。本发明还涉及所述的中药组合物在制备防治功能性消化不良药物中的应用。所述药物可制成下列之一的剂型①胶囊剂、②颗粒剂、③粉剂、④片剂。功能性消化不良是一种胃肠动力障碍性疾病。其发病与机体应激能力下降、胃肠激素[如胃动素(MTL)、血管活性肠肽(VIP)、一氧化氮(N0)等]失调、氧自由基清除系统功能及免疫功能下降密切相关。本发明所述的含山药的中药组合物不仅能提高机体的应激能力，还对不同状态的胃肠运动起不同的调节作用即在正常情况下，对胃肠运动具有一定的抑制作用；而对功能性消化不良者，能提高其MTL的含量，使其VIP的含量明显降低，降低血清中N0含量及N0S活力，降低MDA含量，升高SOD活力，能提高脾脏指数。通过胃肠激素、氧自由基清除系统及免疫功能多靶点、多途径达到对功能性消化不良的治疗作用。本发明所述的含山药的中药组合物的有益效果主要体现在(l)本发明提供的组合物配方合理，具有健脾理气的作用，能有效调节胃肠运动功能；(2)能提高机体应激能力；(3)能调节功能性消化不良的胃肠激素水平和免疫功能；(4)能提高机体清除氧自由基的能力。具体实施例方式下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不仅限于此实施例1:含山药的中药组合提取物的制备1、处方山药100g薏苡仁100g陈皮50g2、制备方法取上述处方药材，加水提取2次，第一次加3倍量水，浸泡0.5小时，提取1.5小时，第二次加1.5倍量水，提取1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓縮至0.8g/ml的清膏，取清膏，搅拌加入95%(v/v)的乙醇，使乙醇最终浓度为65%(v/v)，静置24小时，取上清液，滤过，滤液减压回收乙醇并浓縮至每毫升生药含量12.5g。实施例2:1、处方山药105g105g40g薏该仁陈皮2、制备方法取上述处方药材，加水提取2次，第一次加3倍量水，浸泡0.5小时，提取1.5小时，第二次加1.5倍量水，提取1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓縮至0.9g/ml的清膏，取清膏，搅拌加入95%(v/v)的乙醇，使乙醇最终浓度为70%(v/v)，静置24小时，取上清液，滤过，滤液减压回收乙醇并浓縮至每毫升生药含量12.5g。实施例3:1、处方山药100g薏该仁95g陈皮55g2、制备方法取上述处方药材，加水提取2次，第一次加2倍量水，浸泡1小时，提取2小时，第二次加1.5倍量水，提取1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓縮至0.8g/ml的清膏，取清膏，搅拌加入90%(v/v)的乙醇，使乙醇最终浓度为60%(v/v)，静置24小时，取上清液，滤过，滤液减压回收乙醇并浓縮至每毫升生药含量12.5g。实施例4:1、处方山药95g薏该仁105g陈皮50g2、制备方法取上述处方药材，加水提取2次，第一次加3倍量水，浸泡1小时，提取2小时，第二次加2倍量水，提取1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓縮至0.8g/ml的清膏，取清膏，搅拌加入95%(v/v)的乙醇，使乙醇最终浓度为65%(v/v)，静置24小时，取上清液，滤过，滤液减压回收乙醇并浓縮至每毫升生药含量12.5g。实施例5:含山药的中药组合提取物对离体肠运动作用的研究1、实验动物健康日本大耳白兔，普通级，雌雄不拘，体重22.5Kg，由浙江中医药大学实验动物研究中心提供。2、实验药品与试剂所述组合提取物按照实施例1制备；台氏液用双蒸水配成含有NaCl8.0g，KC10.2g，MgS047H200.26g，NaH2P042H200.065g，NaHC03l.Og，CaCl20.20g，葡萄糖1.0g的1000ml溶液，备用；制备台氏液所用NaCl，KCl，MgS047H20，NaH2P042H20，NaHC03，CaCl2，葡萄糖均为分析纯。3、实验器材微量多导离体器官水平浴槽及配套器材浙江中医药大学实验动物研究中心提供；MedLab生物信号采集处理系统南京美易科技有限公司；调节张力换能器南京免疫公司。4、实验研究(1)实验方法取健康家兔，实验之前禁食24h，自由饮水，击昏后立即剖开腹腔，找出胃与十二指肠交界处，取出一段十二指肠肠段，找到距回盲部10cm处，取一段回肠，分离肠系膜并用台氏液将其内容物冲洗干净，分别剪成23cm肠管，保存于低温(46°C)含混合气(95%02+5%C02)饱和的台氏液中，备用。按离体肠平滑肌灌注实验方法，以自动供氧器持续供给混合气(95%02+5%C02)，将肠管一端固定于通气钩上，另一端连接固定于张力换能器并引至计算机接口。水浴保持浴槽内温(37±0.5)°C，通入混合气6080个气泡/min，标本负荷lg，纸速4mm/min，量程20mv，平衡3045min，标本稳定期间每15min换新鲜台氏液一次。记录一段正常收縮曲线，开始加入被试药品。药物用微量注射器直接加入恒温浴槽中。每次给药体积O.lml，每项实验完毕后，用台氏液冲洗标本，每次间隔10min，共3次，待肠段收縮稳定后才进行下一步实验。(2)实验内容标本稳定lh，产生规律恒定的自律性后，先记录对照状态平滑肌活动曲线5min，然后在浴槽中加入不同剂量的含山药的中药组合提取物，使其终浓度为(0.025g/ml，0.050g/ml，0.100g/ml，0.200g/ml)(以所含生药量计)，每次加药后观察3min，记录药物发生作用的振幅、平均张力和频率变化。(3)统计方法各项数据均以均数±标准差G±S)表示，用SPSS软件统计包对各组数据进行统计分析。两组均数比较用t检验，多组间均数比较用方差分析，均数间两两比较用q检验。5、实验结果结果表明，此组合提取物对兔离体十二指肠和回肠自发运动呈明显抑制作用，表现为振幅减弱(P<0.01或P<0.05)，紧张性下降(P<0.01或P<0.05)，频率减慢(P<0.01或P<0.05)，且随剂量加大，作用加强。(1)对离体十二指肠自发运动振幅、张力、频率的影响表1表明，与给药前相比，组合提取物各剂量组的振幅均明显降低(P<0.01);各剂量组之间呈明显的量效关系，与0.025g/ml组比较，O.050g/ml、0.100g/ml和0.200g/ml组振幅明显降低(P<0.01);与0.050g/ml组比较，O.100g/ml和0.200g/ml组振幅降低(P<0.01)。与给药前相比，组合提取物各剂量组的张力均明显降低(P<0.01或P<0.05);各剂量组之间呈明显的量效关系，与0.025g/ml组比较，O.100g/ml和0.200g/ml组张力明显降低(P<0.01或P<0.05);与O.050g/ml组比较，O.200g/ml组张力降低(P<0.01);与0.100g/ml组比较，O.200g/ml组张力降低(P<0.05)。与给药前相比，浓度为0.200g/ml组的频率降低(P<0.05);与0.025g/ml组比较，O.100g/ml和0.200g/ml组频率明显降低(P<0.01或P<0.05);与0.050g/ml组比较，O.lOOg/ml和0.200g/ml组频率降低(P<0.01或P<0.05)。[OO69](2)对离体回肠自发运动振幅、张力、频率的影响表2表明，与给药前相比，各剂量组的振幅均明显降低(P<0.01或P<0.05);各剂量组之间呈明显的量效关系，与0.025g/ml组比较，O.050g/ml、0.lOOg/ml和0.200g/ml组振幅明显降低(P<0.01);与0.050g/ml组比较，O.lOOg/ml和0.200g/ml组振幅降低(P<0.01或P<0.05)。与给药前相比，各剂量组的张力均明显降低(P<0.01或P<0.05);各剂量组之间的量效关系不明显(P>0.05)。与给药前相比，浓度为0.lOOg/ml和0.200g/ml组的频率明显降低(P<0.01);与0.025g/ml组比较，O.050g/ml、0.lOOg/ml和0.200g/ml组频率明显降低(P<0.01或P<0.05);与0.050g/ml组比较，O.lOOg/ml和0.200g/ml组频率明显降低(P<0.01)。6、结论含山药的中药组合提取物对离体十二指肠和回肠运动的振幅、张力、频率均有明显的抑制作用，并且呈现一定的量效关系，表明其在体外对胃肠运动具有调节作用。实施例6:含山药的中药组合提取物对小鼠胃排空、小肠推进作用的研究1、实验动物清洁级昆明小鼠60只，雌雄各半，体重1822g，由浙江中医药大学实验动物研究中心提供。2、实验药品所述组合提取物按照实施例1制备；含山药的中药组合物煎剂取处方药材山药、薏该仁、陈皮(2:2:l)适量，加水提取2次，第一次加3倍量水，浸泡0.5小时，提取1.5小时，第二次加1.5倍量水，提取1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓縮至0.8g/ml的煎剂，备用；香砂六君丸河南省宛西制药股份有限公司，批号060602，用前用水调成0.1125g/ml混悬液，备用；自制半固体糊10g羧甲基纤维素，溶于250ml蒸馏水中，分别加入16g奶粉、8g糖、8g淀粉，2g活性炭末，每次加入搅拌均匀，配成300ml约300g的半固体糊，低温冷藏备用。3、实验器材小鼠灌胃器、天平、量筒、常规解剖手术器械浙江中医药大学实验动物研究中心提供。4、动物选择与分组按完全随机设计法将60只小鼠分为6组，每组10只。分别为正常对照组、香砂六君丸组、煎剂组、提取物低、中、高剂量组。正常对照组灌服等体积生理盐水(20ml/kg)，香砂六君丸组灌服香砂六君丸(2.25g/kg)，煎剂组灌服煎剂(20g/kg，以所含生药量计)，提取物高、中、低剂量组分别灌服提取物5g/kg，10g/kg，20g/kg(以所含生药量计)，每天1次，每次O.4ml。5、实验步骤7(1)胃排空实验将各组动物预养3天，观察无异常情况后进入正式实验。各组动物按上述剂量连续用药14天后，禁食不禁水12小时，于第15天每鼠灌服自制半固体糊(0.2ml/10g)，半小时后脱颈椎处死动物，剖开腹腔，结扎胃贲门和幽门，取胃用滤纸拭干后称全重，然后沿胃大弯剪开胃体，洗去胃内容物后拭干，称胃净重，以胃全重和胃净重的差值为胃残留物重，以此与所给糊重的百分比为胃内食物残存率，进而得出胃排空率。计算公式如下胃排空率(％)=100%_(胃全重-胃净重)+糊重X100%[OO91](2)小肠推进实验将胃排空实验中小鼠的消化道自幽门直至直肠末端完整摘出，不加牵引，自然伸直平铺，测量幽门至回盲部距离(小肠总长度)，并记录炭末的前沿到幽门的距离(小肠炭末推进长度)，以下列公式计算炭末推进百分率。小肠推进率(％)=炭末前沿至幽门距离+幽门至回盲部距离X100%6、统计方法各项数据均以均数±标准差G±S)表示，用SPSS软件统计包对各组数据进行统计分析。多组间均数比较用方差分析，均数间两两比较用q检验。7、实验结果(1)对小鼠胃排空的影响结果表明与正常对照组比较，提取物中剂量组和煎剂组胃排空率明显降低(P<0.01或P<0.05);提取物高剂量组胃排空率明显高于香砂六君丸组、煎剂组(P<0.01或P〈0.05)提取物各组之间比较，高剂量组胃排空率明显高于低剂量组和中剂量(P<0.01或P<0.05)。(见表3)(2)对小鼠小肠推进的影响结果表明与正常对照组比较，各药物干预组小肠推进率明显降低(P<0.01和P<0.05);其中提取物高剂量组和香砂六君丸组小肠推进率明显降低(P〈0.01和P<0.05);提取物高剂量组小肠推进率明显低于煎剂组(P<0.01);提取物各组之间比较，高剂量组小肠推进率明显低于低剂量组(P<0.05)。(见表3)表3:各组小鼠胃排空率及小肠推进率的比较组别胃排空率(％)小肠推进率(％)正常对照组10香^f少六君丸组10煎剂组io提取物低剂量组10提取物中剂量组10提取物高剂量组io72.33±10.5562.55±17.7659.04±11.12*61.78±16.2651.54±7.61**74.85±7.45***'79.51±10.1767.29±13參76.73±7.7173.77±11.2271.63±11.8163.32±11.99**"A注与正常对照组比较众P<0.05，☆☆P<0.01;与香砂六君丸组比较*P<0.05;与煎剂组比较★★P<0.01;与提取物低剂量组比较▲P<0.05;与提取物中剂量组比较■■P<0.01。8、结论整体实验表明，含山药的中药组合提取物中剂量组能明显抑制胃排空，高剂量组能抑制小肠推进，提示其可以缓解胃肠道痉挛，降低胃肠道的紧张性，从而调节胃肠道的运动。实施例7:含山药的中药组合提取物调整小鼠应激能力的实验研究1、实验动物清洁级昆明种小鼠120只，体重20士2g，雌雄各半，浙江中医药大学动物实验中心提供。2、实验药品含山药的组合提取物按实施例1制备，临用前用蒸馏水配成浓度分别为0.25g/m1、0.5g/ml、1.Og/ml(以所含生药量计)的灌胃液，分别为低、中、高剂量药液；含山药的组合物煎剂按实施例6中制备方法制备，临用前用蒸馏水配成浓度为2.Og/ml(以所含生药量计)的灌胃液；香砂六君丸河南省宛西制药股份有限公司生产，产品比号050105，临用前研细用蒸馏水调成0.2g/ml的灌胃液。钠石灰上海五四化学试剂有限公司提供，产品编号Q/VAEN1-2006。凡士林南昌白云药业有限公司提供，产品批号20080306。3、实验器材小鼠灌胃器、250ml广口瓶、秒表、铅丝、水浴槽、秒表、电子天平等。4、实验方法(1)动物选择与分组取清洁级昆明种小鼠120只，雌雄各半，体重20士2g，随机分为6组正常对照组、香砂六君丸组、煎剂组、提取物低剂量组、提取物中剂量组、提取物高剂量组。9(2)实验步马聚常规饲养3天后，各药物组按0.2ml/10g体重，分别灌服香砂六君丸混悬液、煎剂、提取物低、中、高剂量药液，正常对照组给予等量蒸馏水灌胃，每天1次，连续给药7天。于末次给药lh后，各组分别取10只小鼠，将其放入盛有15g钠石灰的250ml广口瓶内(每瓶1只)，用凡士林涂抹瓶口，盖严，使之不漏气，开始计时，观察并记录小鼠因缺氧而窒息性死亡的时间。此外，各组剩余10只小鼠，每鼠尾部系以体重10%的负荷放入水深30cm、温度20±2°C的浴槽中游泳，观察并记录小鼠嘴部位于水面以下，即出现死亡的时间。5、统计学方法(1)统计描述采用SPSS13.0统计软件处理。数据处理计量资料用均数±标准差G±S)表示；(2)统计推断数据统计采用单因素方差分析。组间两两比较，方差齐性时用LSD检验，方差不齐时用D皿nettT3检验。P<0.05作为差异显著性标准，P<0.01作为差异非常显著性标准。6、实验结果结果显示与正常对照组比较，提取物高、中剂量组小鼠耐缺氧时间明显延长(P<0.01)，香砂六君丸组和煎剂组小鼠耐缺氧时间延长(P<0.05)。(见表4)结果显示与正常对照组比较，提取物高、中剂量组、煎剂组小鼠游泳时间明显延长(P<0.01)，提取物低剂量组和香砂六君丸组小鼠游泳时间延长(P<0.05)。(见表4)表4:各组小鼠耐缺氧及负重游泳时间比较(；士S，min:s)组另'Jn.耐缺氧时间负重游泳时间正常对照组109.41±2.476.22±0.35香砂、六君丸组1012.24±1.15*7.47±0.28*煎剂组1012.18±1.29*8.9±1.58**提取物低剂量组1011.21±2.498.3±1.55A提取物中剂量组1013.7±2.00^8.46士1.13众众提耳又物高剂量组1014.13±2.41*众8.34±1.51AA注与正常对照组比较众P<0.05，众众P<0.01。7、结论实验结果说明，含山药的中药组合提取物能提高小鼠的应激能力，进而可以推测其对FD的防治作用可能是通过提高机体的应激能力来实现的。实施例8:含山药的中药组合提取物防治功能性消化不良的实验研究1、实验动物清洁级健康成年Wistar大鼠70只，雌雄各半，体重200±20克，浙江中医药大学动物实验中心提供。2、实验药品含山药的组合提取物按实施例1制备，临用前用蒸馏水配成浓度分别为0.125g/ml、0.25g/ml、0.5g/ml(以所含生药量计)的灌胃液为低、中、高剂量药液。含山药的组合物煎剂按实施例6制备方法制备，临用前用蒸馏水配成浓度为1.0g/ml(以所含生药量计)的灌胃液。香砂六君丸河南省宛西制药股份有限公司生产，产品批号050105，临用前研细用蒸馏水调成O.lg/ml的灌胃液。番泻叶由浙江省中医院中药房提供，用前用9(TC热水浸泡两次，每次30分钟，合并浸液，制备成生药浓度为0.3g/ml的番泻叶浸剂。3、主要实验试剂及仪器设备血管活性肠肽(VIP)放免试剂盒北京华英生物技术研究所提供，批号20081028;胃动素(MTL)放免试剂盒北京华英生物技术研究所提供，批号20081028;—氧化氮(NO)试剂盒，南京建成生物工程研究所提供，批号20081028;—氧化氮合酶(NOS)试剂盒，南京建成生物工程研究所提供，批号20081028;丙二醛(MDA)试剂盒，南京建成生物工程研究所提供，批号20081028;超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒，南京建成生物工程研究所提供，批号20081028;0.9%氯化钠注射液，上海百特医疗用品有限公司提供，批号S0807161;10%水合氯醛浙江省中医院药剂科提供；10%中性甲醛溶液浙江中医药大学动物实验中心提供；r_911全自动放免计数仪中国科技大学实业总公司生产；TGL-16G型高速冷冻离心机上海安亭科学仪器厂生产；FJ-200高速分散均质机上海标本模型厂生产；Nikoneslipse80i显微镜Nikon公司；STP120型旋转式组织处理机Microm公司；AP280-2型石蜡包埋机Microm公司；DW_FL208型超低温冰箱中科美菱公司4、动物选择和分组取清洁级健康成年Wistar大鼠70只，雌雄各半，体重200±20克，随机分为7组正常对照组、模型对照组、香砂六君丸组、煎剂组、提取物低、中、高剂量组。5、动物造模(1)造模方法除正常对照组外的所有动物参照郭氏适度夹尾剌激法[4]结合番泻叶灌胃制造肝郁脾虚型FD模型用夹子夹大鼠尾巴根处，以不破皮为度，令其暴怒而与其它大鼠撕打，从而激怒全笼大鼠，每次连续不断地剌激30min，每隔3h剌激1次，每天4次，连续剌激7天，随着打斗的加剧，大鼠可能被抓伤，为避免炎症干扰，可用0.5%的碘伏涂擦受伤部位，控制感染以避免炎症干扰。与此同时，每天每只大鼠予番泻叶浸剂2ml灌胃，每日2次，造模7天，造模期间对实验动物的进食、饮水不予限制。[OH2](2)模型评价造模时通过夹大鼠尾根部的方法激怒全笼大鼠，引发相互间撕打，打斗后，大鼠前肢离地抬高，竖立对峙，并发出"呼呼"的怒叫，半小时内始终保持暴怒状态。造模动物自造模第2天出现进食量减少、排泄物秽臭，第3天起出现烦躁、易怒、肛周污秽，第5天反应迟钝、喜扎堆、弓背，同时有毛色枯槁，光泽减少，并有紧张、焦虑等反应，第7天进食量已明显减少。6、药物干预复制FD动物模型结束次日起开始灌胃给药，各组按2ml/100g体重，分别灌服香砂六君丸混悬液、煎剂、提取物低、中、高剂量药液，正常对照组和模型对照组灌服等量的蒸馏水，每天2次，连续给药7天。给药期间正常进食及饮水。7、观察指标(1)大体观察观察动物的体重、摄食量、被毛状况、活动状况、精神状况及排便状况等。(2)胃窦组织学观察给药第7天后禁食不禁水，于次日用10%水合氯醛(按4ml/kg体重)腹腔注射麻醉，麻醉大鼠后把胃打开，将胃内容物冲洗干净，再用滤纸将胃黏膜表层的水分吸掉，取部分胃窦，立即用生理盐水冲洗，肉眼初步观察有无器质性病变，如糜烂、出血等，然后用大头针将标本固定于塑料纸片上，以防其巻曲，10%的中性甲醛固定，常规脱水，石蜡包埋，切片，HE染色，光学显微镜下观察各组大鼠胃窦一般组织学表现。(3)对胃组织中血管活性肠肽(VIP)含量的影响取靠近幽门的胃组织约100mg，称重后置于煮沸的生理盐水中(生理盐水的体积总量应该是组织块重量的9倍)煮沸3min，冷却后分别加入lmol/L冰醋酸0.5ml，用匀浆机匀浆，加lmolNaNaOHO.5ml中和，4"C离心3500r/min，15min，取上清液在-8(TC低温冰箱内保存。按照放射免疫试剂盒说明进行操作，用组织蛋白定量的方式来检测胃组织中VIP的含量。(4)对空肠组织中胃动素(MTL)含量的影响取上段空肠组织约150mg打开，将内容物冲洗干净，再用滤纸将黏膜表层的水分吸掉，称重后加入煮沸的生理盐水中(生理盐水的体积总量应该是组织块重量的9倍)煮沸3min，冷却后加lmol/L冰醋酸0.5ml于匀浆器中制成匀浆，再用lmol/L的NaOH0.5ml中和，4t:离心3500r/min，15min，取上清液-80°〇低温冰箱内保存。按照放射免疫试剂盒说明进行操作，用组织蛋白定量的方式来检测空肠组织中MTL的含量。(5)对大鼠血清N0、N0S、MDA、SOD含量的影响在灌胃给药第7天下午予禁食不禁水，于次日用10%水合氯醛(按4ml/kg体重)腹腔注射麻醉，由腹腔下静脉抽取10ml血液，静置2h以上，3000r/min离心10min，吸取上清液，移至EP管中，封口，置_801:冰箱中保存待测。按照说明书测定血清N0、N0S、MDA、S0D的含量(6)对大鼠脾脏指数、胸腺指数、肾上腺指数的影响取血结束后，立即取出胸腺、脾脏，肾上腺，用滤纸吸干脏器表面的血水，用电子天平称重，按公式脏器指数=脏器重量/体重*1000(单位mg/g)，计算脏器指数。8、统计学方法(1)统计描述采用SPSS13.0统计软件处理。数据处理计量资料用均数±标准差G±S)表示；(2)统计推断数据统计采用单因素方差分析。组间两两比较，方差齐性时用LSD检验，方差不齐时用D皿nettT3检验。P<0.05作为差异显著性标准，P<0.01作为差异非常显著性标准。9、实验结果(1)大体观察正常对照组大鼠饮食、活动、大便性状及毛发等均无异常，体重逐渐增加；模型对照组大鼠出现活动减少，毛发枯槁，弓背，体重明显下降，食量减少，喜扎堆，大便稀溏等症状；提取物高、中、低三组和煎剂组、香砂六君丸组大鼠的一般症状及消化道症状随着治疗有不同程度的恢复。(2)胃窦组织学观察肉眼观察各组动物胃窦组织均无糜烂、出血等器质性病变。光学显微镜下观察结果显示，胃窦黏膜层次清楚，黏膜上皮细胞排列紧密，无缺损，无溃疡，固有层腺体未见萎縮。(3)对肝郁脾虚型FD大鼠胃肠激素、氧自由基清除能力及免疫功能的影响与正常对照组比较，模型对照组大鼠胃组织中VIP的含量升高(P<0.05)，MTL的含量降低(P<0.05)，血清中NO含量、NOS活力、MAD含量显著升高(P<0.01)，SOD活力显著降低(P<0.01)，脾脏指数明显降低(P<0.05)。胸腺指数和肾上腺指数差异均无显著性意义(P>0.05)。与模型对照组比较，组合提取物各剂量组和香砂六君丸组VIP的含量明显降低(P<0.01或P<0.05)，组合提取物、煎剂和香砂六君丸组MTL的含量明显升高(P<0.01或P<0.05)，NO含量、NOS活力、MDA含量降低(P<0.01或P<0.05)，SOD活力升高(P<0.01或P<0.05)，脾脏指数升高(P<0.05)，组合提取物中各指标均以中剂量组较为显著。与香砂六君丸组比较，提取物低、中剂量组MTL的含量升高(P<0.01或P<0.05)。与煎剂组比较，提取物中剂量组MTL的含量明显升高(P<0.01)，NO含量明显降低(P<0.01)。(见表5)10、结论含山药的中药组合提取物可以明显改善肝郁脾虚型FD大鼠的各种症状，提高其空肠组织MTL含量、降低胃组织VIP含量，降低血清NO含量、NOS活力，表明其能有效调节肝郁脾虚型FD大鼠分泌紊乱的胃肠激素，促进胃肠动力，改善胃排空延迟引起的FD症状。同时，能明显降低脾虚肝郁型FD大鼠血清MDA含量，提高SOD活力，从而提高机体清除氧自由基的能力，抑制胃肠组织中脂质过氧化反应，减少体内氧自由基的大量产生，减轻组织细胞受损程度，可能是其防治FD的作用途径之一。还可提高脾虚肝郁型FD大鼠脾脏重量指数，提示其能增加FD大鼠免疫器官重量，增强淋巴细胞功能，从而具有调整免疫机能的作用。13<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>表5:各组大鼠VIP、MTL、NO、NOS、MDA、SOD含量及脾脏指数的比较(^士S,n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>注与正常对照组比较众P〈0.05,PO.01;与模型对照组比较A尸〈0.05,AAP<0.01;与香砂六君丸组比较V〈0.05,**P<0.01;与煎剂组比较*/<0.05.★★P<0.01;与提取物低剂量组比较AP〈0.05，AAP0.01。权利要求一种含山药的中药组合物，由质量配比如下的组分组成山药5～25份薏苡仁5～25份陈皮1～15份。2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于所述组合物质量配比如下山药10份薏苡仁10份陈皮5份。3.如权利要求1所述中药组合物的提取方法，其特征在于所述方法包括取配方量的山药、薏苡仁和陈皮，加入质量为山药、薏苡仁和陈皮总质量1.55倍质量的水，回流提取13次、每次0.52小时，合并水提取液，过滤，取滤液减压浓縮得清膏，清膏搅拌加入8095%的乙醇至乙醇终浓度为6070%，静置24小时以上，取上清液，过滤取滤液减压回收乙醇，浓縮，得中药提取物。4.如权利要求1所述的中药组合物在制备防治功能性消化不良药物中的应用。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于所述药物制成下列之一的剂型①胶囊剂、②颗粒剂、③粉剂、④片剂。全文摘要本发明提供了一种含山药的中药组合物，由质量配比如下的组分组成山药5～25份，薏苡仁5～25份，陈皮1～15份。本发明所述的含山药的中药组合物的有益效果主要体现在(1)本发明提供的组合物配方合理，具有健脾理气的作用，能有效调节胃肠运动功能；(2)能提高机体应激能力；(3)能调节功能性消化不良的胃肠激素水平和免疫功能；(4)能提高机体清除氧自由基的能力。文档编号A61K9/16GK101716295SQ200910155748公开日2010年6月2日申请日期2009年12月25日优先权日2009年12月25日发明者张永生,徐珊,朱飞叶,杨季国申请人:浙江中医药大学