2-(1，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物制备及用途的制作方法
专利名称：2-(1，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物制备及用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种新的苯并噻唑类化合物、其制备方法及应用，特别涉及2-(1， 3_ 二取代苯基_4-吡唑基)苯并噻唑类化合物的制备方法及该化合物在抗肿瘤方面的作 用。
(二)
背景技术：
苯并噻唑类化合物在化学界具有十分重要的地位，许多含苯并噻唑类结构单元的 化合物因具有很好的生理活性而被开发成为各种药物。近年来，研究发现取代的2-取代苯 并噻唑类化合物有多种生物活性，如抗菌、抗真菌、抗寄生虫、抗结核病、抗风湿病和抗癌活 性等，引起研究者的广泛重视。寻找合成苯并噻唑类化合物的便捷方法及研究它的药理活 性是一项具有现实意义的工作。 文献报道，苯并噻唑化合物如果在2位引入芳环或者杂环往往具有抗癌、抗菌和 抗真菌等作用，吡唑类化合物在抗肿瘤方面也有较多报道。但是争对具体化合物是否具有 抗癌活性具体不确定性，因此我们将1，3_取代二苯基-lH-吡唑-4_甲醛与邻氨基苯硫酚 反应合成了一系列新的2位吡唑环取代苯并噻唑化合物并对其做了抗癌活性测试，希望合 成的一种新型的有良好的抗癌活性化合物。
(三)
发明内容
本发明的目的是提供一类具体抗肿瘤作用的结构新颖的未见文献报道的2-(1， 3_ 二取代苯基_4-吡唑基)苯并噻唑类化合物及其制备方法。 本发明提供的2-(l，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物结构通式为
其中A环可为无取代或单取代，&为H、 Cl ; B环可为无取代、单取代或多取代，R2为H、C1、CH30-、CH3-、N02_， CH3C00， m为1 5的自然数； C环可为无取代、单取代或多取代，R3为H、 N02_ ;m为1 5的自然数；
本发明的另一个目的是提供2-(1， 3- 二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物 的制备方法，所述的方法按如下步骤进行以式(I)所示未取代或取代的邻氨基苯硫酚和 式(II)所示的1-取代苯基_3取代苯基-111-吡唑-4-甲醛类化合物为原料，在有机溶剂 中，反应温度为20-25t:，在对甲苯磺酸的催化下，反应0. 5-2小时，縮合得到所述的2-(1，3_ 二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物；，&为H、C1 ;R2为H、C1、CH30-、CH3-、N02_， CH3C00， m为1 5的自然数；R3为H、 N02- ;n为1 5的自然数；m、 n各自优选为1， &优 选为H，R2推荐为CH3C00。本发明特别优选2-(3-(3-乙羧基苯基)-l-苯基4-吡唑基)苯 并[d]噻唑(IIIi)。
本发明的合成路线如下 进一步，本发明所述的有机溶剂为甲醇或乙醇。所述的有机溶剂的用量推荐为对 甲苯磺酸与1-取代苯基_3取代苯基-1H-吡唑-4-甲醛类化合物质量计为2-8ml/g。
更进一步，本发明所述的未取代或取代的邻氨基苯硫酚和1-取代苯基_3取代苯 基-1H-吡唑-4-甲醛类化合物投料物质的量比为0. 9 1. 1 : l，优选为1 : 1。 再进一步，所述的对甲苯磺酸与1-取代苯基-3取代苯基_111-吡唑-4-甲醛类化
合物物质的量比为o. oi o. 2 : i，优选为o. 05 o. i : i。 本发明还验证了 2-(l，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物多对多种肿 瘤细胞株有抑制增殖作用，对肿瘤细胞有体外抑制作用，有望在制备抗肿瘤药物中应用。
本发明的特点利用药物化学中的拼合原理在苯并噻唑化合物的2位引入吡唑环， 得到2-(l，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物。这是一类结构全新的化合物， 初步的药理活性筛选试验表明这些化合物均具有较好的抗肿瘤活性，为药物筛选提供了更 多的选择，实验表明有些化合物的抗瘤谱很广，有些化合物的选择性很好。
具体实施例方式
以下以具体实施例来说明本发明的技术方案，但本发明的保护范围不限于此
实施例1、2-(1，3-二苯基-4-吡唑基)苯并[d]噻唑(Ilia)的制备
将1，3-二苯基-lH-妣唑-4-甲醛2. 48g(10mmo1) 、2-氨基苯硫酚1. 25g(10mmo1)、 对甲基苯磺酸O. 17g(lmmo1)和乙醇15mL加至反应瓶中，室温反应0. 5h。 TLC跟踪反应， 展开剂石油醚乙酸乙酯=5 : l，过滤，所得固体用5ml乙醇重结晶得白色固体3. 14g， 收率89. 2%。熔点138. 6-139. 0°C 工H NMR(500MHz， CDC13) S :7. 32 (d， 1H， J = 8. 5Hz)， 7. 39 (s， 1H) ， 7. 50-7. 54 (m， 5H) ， 7. 68 (d， 2H， J = 8. 5Hz) ， 7. 75 (d， 2H， J = 7. OHz) ， 7. 93 (d， 2H， J = 7. 1Hz)，8.01(s. 1H) ，8. 70(s， 1H). 13CNMR (125MHz， CDC13) 162. 0， 152. 3， 139. 3， 133. 1， 132. 3， 131. 8， 129. 7， 129. 6， 129. 3， 128. 6， 128. 4， 127. 4， 125. 3， 122. 3， 122. 1， 119. 4， 117. 1 ;MS(EI，70eV) ， m/z(% )352(M+， 100). 实施例2、5-氯-2-(l，3-二苯基-4-吡唑基)苯并[d]噻唑(IIIb)的制备
操作过程如例1，只是用4-氯-2-氨基苯硫酚代替2-氨基苯硫酚，得到白色固 体，收率87. 2 %。熔点:187. 0-188. 7 。C NMR(500MHz， CDC13) S :7. 34-7. 52 (m， 7H)，7. 74 (d， 2H， J = 8. 5Hz) ， 7. 81 (d， 3H， J = 4. 0Hz) ， 8. 02 (d， 1H， J = 8. 0Hz) ， 8. 61 (s， 1H) 13C NMR(125MHz， CDC13) 159. 7， 153. 2， 150. 8， 139. 2， 135. 1， 134. 9， 130. 9， 130. 4， 130. 3， 129. 6，
128. 7， 127. 4， 126. 3， 125. 1， 122. 7， 121. 4， 119. 4， 117. 2. MS (EI， 70eV) ， m/z ( % ) 352 (M"， 100). 实施例3、2-(3-(4_氯苯基)-l-苯基4_吡唑基)苯并[d]噻唑(IIIc)的制备
操作过程如例l，只是用(3-(4-氯苯基)-1-苯基_111-吡唑-4-甲醛代替l，3-二 苯基-lH-妣唑-4-甲醛，得到白色固体，收率86. 2%熔点166. 4-167. 3°C ^ NMR(500MHz， CDC13) S :7. 34-7. 52 (m， 7H) ， 7. 74 (d， 2H， J = 8. 5Hz) ， 7. 81 (d， 3H， J = 4. 0Hz) ， 8. 02 (d， 1H， J = 8. 0Hz) ，8. 61 (s， 1H). 13C NMR (125MHz ， CDC13) 159. 7， 153. 2， 150. 8， 139. 2， 135. 2， 134. 9， 130. 9， 130. 5， 130. 3， 129. 6， 128. 7， 127. 4， 126. 3， 125. 1， 122. 7， 121. 4， 119. 4， 117. 2 ; MS (EI ， 70eV) ， m/z (% ) 386 (M"， 100). 实施例4、5-氯-2-(3-(4-氯苯基)-l-苯基4-吡唑基)苯并[d]噻唑(IIId)的 制备 操作过程如例l，只是用3-(4-氯苯基)-l-苯基-1H-吡唑-4-甲醛代替1，3_ 二 苯基-1H-吡唑-4-甲醛，用4-氯-2-氨基苯硫酚代替2-氨基苯硫酚得到白色固体，收率 84. 6%，熔点184. 5-185. 3°C .丄HNMR (500MHz ， CDC13) S :7. 34(d， 1H， J = 9. 0Hz) ， 7. 39(d， 1H， J = 7. 5Hz) ， 7. 47 (d， 2H， J = 8. 0Hz) ， 7. 53 (t， 2H， J = 8. 5Hz) ， 7. 72 (t， 3H， J = 8. 5Hz)， 7.83(d，2H， J = 8.0Hz)，8.01(s. 1H)，8.64(s，1H).13C NMR (125MHz, CDC13) 161. 5， 154. 2， 150. 9， 139. 2， 135. 3， 133. 1， 132. 3， 130. 9， 130. 2， 129. 7， 128. 7， 128. 7， 127. 6， 125. 4， 122. 5， 122. 0， 119. 4， 117. 0 ; 实施例5、2-(3-(4_甲氧苯基)-1-苯基4_吡唑基)苯并[d]噻唑(IIIe)的制备
操作过程如例l，只是用3_(4-甲氧苯基)-1-苯基-111-吡唑-4-甲醛代替1， 3- 二苯基-1H-妣唑-4-甲醛，得到白色固体，收率85. 6 %，熔点137. 7-138. 4 °C . 'H NMR (500MHz, CDC13) S :2. 29(s，3H， CH3) ， 7. 23 (t， 1H， J = 8. 0Hz) ， 7. 33(d，2H， J = 7. 0Hz)， 7. 45-7. 50 (m， 4H) ， 7. 59 (s， 1H) ， 7. 66 (d， 1H， J = 8. 0Hz) ， 7. 80 (t， 3H， J = 7. 0Hz) ， 8. 01 (d， J = 7. 0Hz) ，8. 60 (s， 1H， C5_H) 13C NMR(125MHz， CDC13) 169. 2， 159. 8， 153. 3， 150. 8， 150. 7， 139. 3， 135. 0， 133. 5， 129. 6， 129. 4， 128. 5， 127. 4， 127. 1， 126. 2， 124. 9， 122. 8， 122. 7， 122. 3， 121. 4， 119. 3， 117. 3，21. 2 ;MS(EI，70eV) ， m/z(% )383 (M+， 100).
实施例6、5-氯-2-(3-(4_甲氧苯基)-1-苯基4_吡唑基)苯并[d]噻唑(IIIf) 的制备 操作过程如例l，只是用3_(4-甲氧苯基)-1-苯基-111-吡唑-4-甲醛代替1， 3- 二苯基-1H-吡唑-4-甲醛，用4-氯-2-氨基苯硫酚代替2-氨基苯硫酚得到白色 固体，收率83. 9 %，熔点201. 5-203. 3 °C 'H NMR(500MHz, CDC13) S :2. 30(s，3H， CH3)， 7. 22 (d， 1H， J = 8. 0Hz) ， 7. 28 (t， 1H， J = 7. OHz) ， 7. 34 (t， 1H， J = 8. OHz) ， 7. 45—7. 49 (m， 3H) ， 7. 56 (s， 1H) ， 7. 65 (t， 2H， J = 8. OHz) ， 7. 87 (d， 2H， J = 8. 5Hz) ， 7. 97 (s， 1H) ， 8. 58 (s， 1H). 13CNMR( 125MHz, CDC13) 169. 2， 161. 6， 154. 1， 150. 9， 150. 7， 139. 2， 133. 3， 133. 2， 132. 2，
129. 6， 129. 5， 128. 6， 127. 5， 127. 1， 125. 3， 122. 9， 122. 4， 122. 1， 119. 3， 117. 1，21. 2 ;MS(EI， 70eV) ， m/z(% )416(,， 100). 实施例7、2-(3-(3-硝基苯基)-l-苯基4-吡唑基)苯并[d]噻唑(IIIg)的制备
操作过程如例1，只是用3_(3-硝基苯基)-l-苯基-1H-吡唑-4-甲醛代替1， 3- 二苯基-1H-妣唑-4-甲醛，得到黄色固体，收率85. 9 %，熔点160. 0-161. 3°C ^ NMR(500MHz， CDC13) S :6. 58 (s， 1H) ， 6. 73 (d， 1H， J = 8. OHz) ， 6. 83 (t， 1H， J = 7. 5Hz)，
6. 98 (t， 1H， J = 7. 5Hz) ， 7. 10 (d， 1H， J = 7. 5Hz) ， 7. 34 (t， 1H， J = 7. 5Hz) ， 7. 48 (t， 2H， J =
7. 5Hz) ， 6. 62 (t， 2H， J = 7. 5Hz) ， 8. 09 (d， 1H， J = 7. 5Hz) ， 8. 23 (d， 1H， J = 7. 5Hz) ， 8. 33 (s， 1H) ，8. 70 (s， 1H). 13C NMR(125MHz， CDC13) 169. 2， 161. 8， 154. 1， 150. 9， 148. 6， 145. 9， 139. 5， 134. 4， 133. 9， 129. 6， 128. 1， 127. 2， 125. 8， 123. 1， 122. 9， 122. 4， 122. 1 ， 121. 9， 119. 2， 111. 4 ;MS(EI，70eV) ， m/z(% )398(M"， 100). 实施例8、5_氯-2-(3-(3-硝基苯基)-l-苯基4_吡唑基)苯并[d]噻唑(IIIh) 的制备 操作过程如例1，只是用3_(3-硝基苯基)-l-苯基-1H-吡唑-4-甲醛代替1， 3- 二苯基-1H-吡唑-4-甲醛，用4-氯-2-氨基苯硫酚代替2-氨基苯硫酚得到白色固体， 收率83. 9 %，熔点:180. 5-181. 3°C 'H NMR(500MHz， CDC13) S :7. 36(d， 1H， J = 8. OHz)， 7. 41 (t， 1H， J = 8. OHz) ， 7. 54 (t， 2H， J = 8. OHz) ， 7. 64 (t， 1H， J = 8. OHz) ， 7. 73 (d， 1H， J =8. OHz) ，7. 84(d，2H， J = 8. OHz) ， 8. 02 (s， 1H) ， 8. 22 (d， 1H， J = 7. 5Hz) ， 8. 32 (d， 1H， J =8. OHz) ，8. 66(s， 1H) ，8. 94(s， 1H) 13C NMR(125MHz， CDC13) 169. 2， 161. 8， 154. 1， 150. 9， 148. 6， 145. 9， 139. 5， 134. 4， 133. 9， 129. 6， 128. 1， 127. 2， 125. 8， 123. 1， 122. 9， 122. 4， 122. 1， 121. 9， 119. 2， 111. 4 ;MS(EI，70eV) ， m/z(% )432(M"， 100). 实施例9、2-(3-(3_乙羧基苯基)-1-苯基4_妣唑基)苯并[d]噻唑(IIIi)的制 备 操作过程如例l，只是用3_(3-乙羧基苯基)-1-苯基-111-吡唑-4-甲醛代替 1，3-二苯基-lH-妣唑-4-甲醛得到白色固体，收率83. 9%，熔点144. 5-145. 3 °C .'H NMR (500MHz， CDC13) S :3. 88 (s， 3H) ， 7. 00 (d， 2H， J = 8. 5Hz) ， 7. 25 (s， 2H) ， 7. 31—7. 35 (m， 3H) ， 7. 44-7. 50 (m， 1H) ， 7. 67 (d， 1H， J = 8. 5Hz) ， 7. 82 (d， 2H， J = 7. OHz) ， 8. 02 (d， 2H， J = 7. OHz) ，8. 65(s， 1H). 13C NMR(125MHz， CDC13) 162. 3， 160. 6， 152. 2， 151. 0， 150. 8， 139. 3，
132. 3， 131. 0， 129. 6， 128. 4， 127. 4， 125. 3， 123. 9， 122. 1， 121. 9， 119. 4， 116. 8， 114. 0,55. 4 ; MS (EI ， 70eV) ， m/z (% ) 403 (M+， 100) 实施例10、5-氯-2- (3- (3-乙羧基苯基)-1-苯基4_吡唑基)苯并[d]噻唑(I11 j) 的制备 操作过程如例l，只是用3-(3_乙羧基苯基)-l-苯基-1H-吡唑-4-甲醛代替1， 3- 二苯基-1H-吡唑-4-甲醛，用4-氯-2-氨基苯硫酚代替2-氨基苯硫酚得到白色固体， 收率83.9%，熔点:164. 5-165. 3 °C . ^ NMR(500MHz， CDC13) S :2. 31 (s， 3H) ， 7. 27 (t， 1H， J = 8. 5Hz) ， 7. 32 (d， 1H， J = 7. 5Hz) ， 7. 37 (t， 1H， J = 7. 5Hz) ， 7. 47—7. 52 (m， 3H) ， 7. 56 (s， 1H) ， 7. 64 (d， 1H， J = 8. OHz) ， 7. 69 (d， 2H， J = 8. 5Hz) ， 7. 82 (d， 2H， J = 8. OHz) ， 7. 99 (s， 1H) ，8. 64(s， 1H). 13C NMR(80MHz， CDC13) 169. 2， 161. 7， 154. 0， 151. 0， 150. 7， 139. 2， 133. 3，
133. 2， 132. 3， 129. 6， 128. 7， 127. 5， 127. 1， 125. 4， 122. 9， 122. 4， 119. 4， 117. 0，55. 4 ;MS(EI， 70eV) ， m/z(% )433(M"， 100). 实施例11、2-(3-(4_甲基苯基)-l-苯基4-吡唑基)苯并[d]噻唑(IIIk)的制 备
6
操作过程如例1，只是用3_(4-甲基苯基)-l-苯基-1H-吡唑-4-甲醛代替1， 3- 二苯基-1H-妣唑-4-甲醛，得到白色固体，收率87. 3 %，熔点135. 6-137. 0 °C . ^ NMR (500MHz, CDC13) S :2. 28(s，3H， CH3) ， 7. 22 (t， 1H， J = 8. 0Hz) ， 7. 32(d，2H， J = 7. OHz)， 7. 46-7. 50 (m， 4H) ， 7. 59 (s， 1H) ， 7. 65 (d， 1H， J = 8. OHz) ， 7. 79 (t， 3H， J = 7. OHz) ， 8. 0 (d， J = 7. OHz) ，8. 59 (s， 1H， C5_H) 13C NMR(125MHz， CDC13) 169. 1， 159. 8， 153. 2， 150. 6， 150. 5， 139. 4， 135. 0， 133. 4， 129. 6， 129. 4， 128. 5， 127. 4， 127. 1， 126. 1， 124. 9， 122. 8， 122. 6， 122. 2， 121. 3， 119. 1， 117. 3，21.2 ;MS (EI， 70eV) ， m/z ( % ) 367 (M+， 100) Anal. Calcd. for C23H17N3S(367) :C，75. 20% ;H，4. 63% ;N， 11. 44% ;Found :C，75. 18% ;H 4. 64% ;N， 11. 46% .
实施例12、5-氯-2-(3-(4_甲基苯基)-l-苯基4-吡唑基)苯并[d]噻唑(III1) 的制备 操作过程如例1，反应时间为2h，反应溶剂用甲醇代替乙醇，用3_(4-甲基苯 基)-1-苯基-1H-吡唑-4-甲醛代替1 ， 3- 二苯基-1H-吡唑-4-甲醛，用4-氯-2-氨基苯硫 酚代替2-氨基苯硫酚，得到白色固体，收率85. 5%，熔点193. 0-194. 7°C ^ NMR(500MHz, CDC13) S :2. 28 (s， 3H， CH3) ， 7. 23 (d， 1H， J = 8. OHz) ， 7. 28 (t， 1H， J = 7. OHz) ， 7. 35 (t， 1H， J =8. OHz) ， 7. 46-7. 50 (m， 3H) ， 7. 55 (s， 1H) ， 7. 67 (t， 2H， J = 8. OHz) ， 7. 89 (d， 2H， J = 8. 5Hz)， 7. 98(s， 1H) ，8. 59(s， 1H). 13C NMR(125MHz， CDC13) 169. 3， 161. 7， 154. 1， 150. 9， 150. 6， 139. 3， 133. 4， 133. 2， 132. 1， 129. 5， 129. 4， 128. 6， 127. 4， 127. 0， 125. 3， 122. 9， 122. 5， 122. 2， 119. 3， 117. 1，21. 2 ;MS(EI，70eV) ， m/z(% )400 Of， 100). 实施例13、5-氯-2-(1-(4-硝基苯基)-3-苯基4-吡唑基)苯并[d]噻唑(IIIm) 的制备 操作过程如例1，只是用1_(4-硝基苯基)-3-苯基-1H-吡唑-4-甲醛代替1， 3- 二苯基-1H-吡唑-4-甲醛，用4-氯-2-氨基苯硫酚代替2-氨基苯硫酚得到白色固体， 收率85. 1%，熔点:176. 5-177. 3°C 'H NMRR(500MHz， CDC13) S :7. 35(d， 1H， J = 8. OHz)， 7. 40 (t， 1H， J = 8. OHz) ， 7. 53 (t， 2H， J = 8. OHz) ， 7. 66 (t， 1H， J = 8. OHz) ， 7. 75 (d， 1H， J =8. OHz) ，7. 86(d，2H， J = 8. OHz) ， 8. 03 (s， 1H) ， 8. 23 (d， 1H， J = 7. 5Hz) ， 8. 31 (d， 1H， J =8. OHz) ，8. 67 (s， 1H) ，8. 94(s， 1H) 13C NMR(125MHz， CDC13) 169. 1， 161. 6， 154. 1， 150. 8， 148. 5， 145. 8， 139. 4， 134. 2， 133. 9， 129. 6， 128. 1， 127. 3， 125. 6， 123. 0， 122. 7， 122. 5， 122. 3， 121. 8， 119. 3， 111. 5 ;MS(EI，70eV) ， m/z(% )432(M+， 100).
实施例14、抗肿瘤生物活性测试方法
肿瘤细胞离体培养 选取肿瘤细胞Chang liver、MCF-7、H印G-2用含10%小牛血清(四季青生物工程 公司)的RPMI1640(Gibco Co. LTD.)培养液于37°C、5% C02细胞培养箱中孵育。待细胞密 度长到70-90%时传代(贴壁细胞用Puck' s EDTA消化后传代)，用于以后实验所需。
MTT法测定苯并噻唑衍生物对不同瘤株的体外抑制作用 待试药物选自实施例1 13制得的2-(1，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑 类化合物，将各化合物按照5ii g/ml溶解在二甲基亚砜中，将对数生长期的细胞，消化后用 培养液稀释到每毫升30000个细胞，每孔100 ill接种于96孔培养板内，5% 0)2，371:孵箱 中培养。培养24小时，加入100 iil含50 ii g/m的药物的培养液，使药物终浓度为25 y g/ m，匿SO终浓度为0. 5% (同时设置该浓度匿SO的阳性对照)。继续培养至实验设计的时间，加入20 ii 1MTT的溶液，继续孵育4小时。小心除去培养液，加入150 y 1 DMS0，摇床振荡10min，待结晶充分溶解，用酶标仪在570nm波长以650nm为参比波长测吸光值，所得数据用于计算ICs。.所得结果见表l。 表1所合成的苯并噻唑衍生物对不同肿瘤细胞株的IC5。(yM)值
序号化合物编号
结构
Hep G2 MCF-7 H印2
ma
、As
>50 >5040.10
2
mb
ci、
A、
24. 75 43. 83 10. 95
3
nic
CI
- N、一S
28. 90 46. 44 34. 18
4
ci
ma d、
、,s
>30 〉30 25.25
me
H3CO
>50 >50
〉50
>30 >30 20.04
40. 69 29. 84 16. 96
22.87 >30 18.25
3,28 6.44 11.72
37. 00 16. 13 20. 16
26. 35 45. 57 12. 35
24.65 >30 20.46
9〉50 〉50 从表l可以看出 1)所有的化合物对不同的肿瘤细胞株均有一定的抑制活性； 2)所有化合物中，化合物IIIi对Chang liver具有最强的抑制活性，IC5。值为3. 28iiM。 3)总而言之，该类化合物有一定的抗肿瘤应用前景。
10
权利要求
2-(1，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物，其特征是具有以下结构通式其中A环可为无取代或单取代，R1为H、Cl；B环可为无取代、单取代或多取代，R2为H、Cl、CH3O-、CH3-、NO2-，CH3COO，m为1～5的自然数；C环可为无取代、单取代或多取代，R3为H、NO2-；n为1～5的自然数。F2009101559017C00011.tif
2. 如权利要求l所述的化合物，其特征在于，所述的m为l，n为1。
3. 制备如权利要求l所述的2-(l，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物的方法，其特征在于所述的方法按如下步骤进行以式(I)所示未取代或取代的邻氨基苯硫酚和式(II)所示的1-取代苯基_3取代苯基-111-吡唑-4-甲醛类化合物为原料，在有机溶剂中，反应温度为20-25t:，在对甲苯磺酸的催化下，反应0. 5-2小时，縮合得到所述的2-(l，3_ 二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物；，&为H、C1 ;R2为H、C1、CH30-、CH3-、N02_，CH3COO， m为1 5的自然数；R3为H、 N02- ;n为1 5的自然数；
4. 如权利要求3所述的方法，其特征在于所述的有机溶剂为甲醇或乙醇。
5. 如权利要求3所述的方法，其特征在于所述的未取代或取代的邻氨基苯硫酚和1-取代苯基-3取代苯基-lH-吡唑-4-甲醛类化合物投料物质的量比为0.9 1. 1 : 1。
6. 如权利要求3所述的方法，其特征在于所述的对甲苯磺酸与l-取代苯基-3取代苯基-lH-吡唑-4-甲醛类化合物物质的量比为O.Ol 0. 2 : 1。
7. 如权利要求3所述的方法，所述的有机溶剂的用量为对甲苯磺酸与l-取代苯基-3取代苯基-1H-吡唑-4-甲醛类化合物质量计为2-8ml/g。
8. 如权利要求l所述的2-(l，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物在制备制疗抗肿瘤药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种2-(1，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物，及制备方法和应用，本发明所述的2-(1，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物的制备方法是以式(I)所示未取代或取代的邻氨基苯硫酚和式(II)所示的1-取代苯基-3取代苯基-1H-吡唑-4-甲醛类化合物为原料，在有机溶剂中，反应温度为20-25℃，在对甲苯磺酸的催化下，反应0.5-2小时，缩合得到所述的2-(1，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物；本发明所提供的2-(1，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物多对多种肿瘤细胞株有抑制增殖作用，对肿瘤细胞有体外抑制作用，为药物筛选提供了更多选择机会。
文档编号A61K31/428GK101759694SQ20091015590
公开日2010年6月30日 申请日期2009年12月31日 优先权日2009年12月31日
发明者姜灵, 施湘君, 苏为科, 陈志卫 申请人:浙江工业大学
技术领域：
本发明涉及一种新的苯并噻唑类化合物、其制备方法及应用，特别涉及2-(1， 3_ 二取代苯基_4-吡唑基)苯并噻唑类化合物的制备方法及该化合物在抗肿瘤方面的作 用。
(二)
背景技术：
苯并噻唑类化合物在化学界具有十分重要的地位，许多含苯并噻唑类结构单元的 化合物因具有很好的生理活性而被开发成为各种药物。近年来，研究发现取代的2-取代苯 并噻唑类化合物有多种生物活性，如抗菌、抗真菌、抗寄生虫、抗结核病、抗风湿病和抗癌活 性等，引起研究者的广泛重视。寻找合成苯并噻唑类化合物的便捷方法及研究它的药理活 性是一项具有现实意义的工作。 文献报道，苯并噻唑化合物如果在2位引入芳环或者杂环往往具有抗癌、抗菌和 抗真菌等作用，吡唑类化合物在抗肿瘤方面也有较多报道。但是争对具体化合物是否具有 抗癌活性具体不确定性，因此我们将1，3_取代二苯基-lH-吡唑-4_甲醛与邻氨基苯硫酚 反应合成了一系列新的2位吡唑环取代苯并噻唑化合物并对其做了抗癌活性测试，希望合 成的一种新型的有良好的抗癌活性化合物。
(三)
发明内容
本发明的目的是提供一类具体抗肿瘤作用的结构新颖的未见文献报道的2-(1， 3_ 二取代苯基_4-吡唑基)苯并噻唑类化合物及其制备方法。 本发明提供的2-(l，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物结构通式为
其中A环可为无取代或单取代，&为H、 Cl ; B环可为无取代、单取代或多取代，R2为H、C1、CH30-、CH3-、N02_， CH3C00， m为1 5的自然数； C环可为无取代、单取代或多取代，R3为H、 N02_ ;m为1 5的自然数；
本发明的另一个目的是提供2-(1， 3- 二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物 的制备方法，所述的方法按如下步骤进行以式(I)所示未取代或取代的邻氨基苯硫酚和 式(II)所示的1-取代苯基_3取代苯基-111-吡唑-4-甲醛类化合物为原料，在有机溶剂 中，反应温度为20-25t:，在对甲苯磺酸的催化下，反应0. 5-2小时，縮合得到所述的2-(1，3_ 二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物；，&为H、C1 ;R2为H、C1、CH30-、CH3-、N02_， CH3C00， m为1 5的自然数；R3为H、 N02- ;n为1 5的自然数；m、 n各自优选为1， &优 选为H，R2推荐为CH3C00。本发明特别优选2-(3-(3-乙羧基苯基)-l-苯基4-吡唑基)苯 并[d]噻唑(IIIi)。
本发明的合成路线如下 进一步，本发明所述的有机溶剂为甲醇或乙醇。所述的有机溶剂的用量推荐为对 甲苯磺酸与1-取代苯基_3取代苯基-1H-吡唑-4-甲醛类化合物质量计为2-8ml/g。
更进一步，本发明所述的未取代或取代的邻氨基苯硫酚和1-取代苯基_3取代苯 基-1H-吡唑-4-甲醛类化合物投料物质的量比为0. 9 1. 1 : l，优选为1 : 1。 再进一步，所述的对甲苯磺酸与1-取代苯基-3取代苯基_111-吡唑-4-甲醛类化
合物物质的量比为o. oi o. 2 : i，优选为o. 05 o. i : i。 本发明还验证了 2-(l，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物多对多种肿 瘤细胞株有抑制增殖作用，对肿瘤细胞有体外抑制作用，有望在制备抗肿瘤药物中应用。
本发明的特点利用药物化学中的拼合原理在苯并噻唑化合物的2位引入吡唑环， 得到2-(l，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物。这是一类结构全新的化合物， 初步的药理活性筛选试验表明这些化合物均具有较好的抗肿瘤活性，为药物筛选提供了更 多的选择，实验表明有些化合物的抗瘤谱很广，有些化合物的选择性很好。
具体实施例方式
以下以具体实施例来说明本发明的技术方案，但本发明的保护范围不限于此
实施例1、2-(1，3-二苯基-4-吡唑基)苯并[d]噻唑(Ilia)的制备
将1，3-二苯基-lH-妣唑-4-甲醛2. 48g(10mmo1) 、2-氨基苯硫酚1. 25g(10mmo1)、 对甲基苯磺酸O. 17g(lmmo1)和乙醇15mL加至反应瓶中，室温反应0. 5h。 TLC跟踪反应， 展开剂石油醚乙酸乙酯=5 : l，过滤，所得固体用5ml乙醇重结晶得白色固体3. 14g， 收率89. 2%。熔点138. 6-139. 0°C 工H NMR(500MHz， CDC13) S :7. 32 (d， 1H， J = 8. 5Hz)， 7. 39 (s， 1H) ， 7. 50-7. 54 (m， 5H) ， 7. 68 (d， 2H， J = 8. 5Hz) ， 7. 75 (d， 2H， J = 7. OHz) ， 7. 93 (d， 2H， J = 7. 1Hz)，8.01(s. 1H) ，8. 70(s， 1H). 13CNMR (125MHz， CDC13) 162. 0， 152. 3， 139. 3， 133. 1， 132. 3， 131. 8， 129. 7， 129. 6， 129. 3， 128. 6， 128. 4， 127. 4， 125. 3， 122. 3， 122. 1， 119. 4， 117. 1 ;MS(EI，70eV) ， m/z(% )352(M+， 100). 实施例2、5-氯-2-(l，3-二苯基-4-吡唑基)苯并[d]噻唑(IIIb)的制备
操作过程如例1，只是用4-氯-2-氨基苯硫酚代替2-氨基苯硫酚，得到白色固 体，收率87. 2 %。熔点:187. 0-188. 7 。C NMR(500MHz， CDC13) S :7. 34-7. 52 (m， 7H)，7. 74 (d， 2H， J = 8. 5Hz) ， 7. 81 (d， 3H， J = 4. 0Hz) ， 8. 02 (d， 1H， J = 8. 0Hz) ， 8. 61 (s， 1H) 13C NMR(125MHz， CDC13) 159. 7， 153. 2， 150. 8， 139. 2， 135. 1， 134. 9， 130. 9， 130. 4， 130. 3， 129. 6，
128. 7， 127. 4， 126. 3， 125. 1， 122. 7， 121. 4， 119. 4， 117. 2. MS (EI， 70eV) ， m/z ( % ) 352 (M"， 100). 实施例3、2-(3-(4_氯苯基)-l-苯基4_吡唑基)苯并[d]噻唑(IIIc)的制备
操作过程如例l，只是用(3-(4-氯苯基)-1-苯基_111-吡唑-4-甲醛代替l，3-二 苯基-lH-妣唑-4-甲醛，得到白色固体，收率86. 2%熔点166. 4-167. 3°C ^ NMR(500MHz， CDC13) S :7. 34-7. 52 (m， 7H) ， 7. 74 (d， 2H， J = 8. 5Hz) ， 7. 81 (d， 3H， J = 4. 0Hz) ， 8. 02 (d， 1H， J = 8. 0Hz) ，8. 61 (s， 1H). 13C NMR (125MHz ， CDC13) 159. 7， 153. 2， 150. 8， 139. 2， 135. 2， 134. 9， 130. 9， 130. 5， 130. 3， 129. 6， 128. 7， 127. 4， 126. 3， 125. 1， 122. 7， 121. 4， 119. 4， 117. 2 ; MS (EI ， 70eV) ， m/z (% ) 386 (M"， 100). 实施例4、5-氯-2-(3-(4-氯苯基)-l-苯基4-吡唑基)苯并[d]噻唑(IIId)的 制备 操作过程如例l，只是用3-(4-氯苯基)-l-苯基-1H-吡唑-4-甲醛代替1，3_ 二 苯基-1H-吡唑-4-甲醛，用4-氯-2-氨基苯硫酚代替2-氨基苯硫酚得到白色固体，收率 84. 6%，熔点184. 5-185. 3°C .丄HNMR (500MHz ， CDC13) S :7. 34(d， 1H， J = 9. 0Hz) ， 7. 39(d， 1H， J = 7. 5Hz) ， 7. 47 (d， 2H， J = 8. 0Hz) ， 7. 53 (t， 2H， J = 8. 5Hz) ， 7. 72 (t， 3H， J = 8. 5Hz)， 7.83(d，2H， J = 8.0Hz)，8.01(s. 1H)，8.64(s，1H).13C NMR (125MHz, CDC13) 161. 5， 154. 2， 150. 9， 139. 2， 135. 3， 133. 1， 132. 3， 130. 9， 130. 2， 129. 7， 128. 7， 128. 7， 127. 6， 125. 4， 122. 5， 122. 0， 119. 4， 117. 0 ; 实施例5、2-(3-(4_甲氧苯基)-1-苯基4_吡唑基)苯并[d]噻唑(IIIe)的制备
操作过程如例l，只是用3_(4-甲氧苯基)-1-苯基-111-吡唑-4-甲醛代替1， 3- 二苯基-1H-妣唑-4-甲醛，得到白色固体，收率85. 6 %，熔点137. 7-138. 4 °C . 'H NMR (500MHz, CDC13) S :2. 29(s，3H， CH3) ， 7. 23 (t， 1H， J = 8. 0Hz) ， 7. 33(d，2H， J = 7. 0Hz)， 7. 45-7. 50 (m， 4H) ， 7. 59 (s， 1H) ， 7. 66 (d， 1H， J = 8. 0Hz) ， 7. 80 (t， 3H， J = 7. 0Hz) ， 8. 01 (d， J = 7. 0Hz) ，8. 60 (s， 1H， C5_H) 13C NMR(125MHz， CDC13) 169. 2， 159. 8， 153. 3， 150. 8， 150. 7， 139. 3， 135. 0， 133. 5， 129. 6， 129. 4， 128. 5， 127. 4， 127. 1， 126. 2， 124. 9， 122. 8， 122. 7， 122. 3， 121. 4， 119. 3， 117. 3，21. 2 ;MS(EI，70eV) ， m/z(% )383 (M+， 100).
实施例6、5-氯-2-(3-(4_甲氧苯基)-1-苯基4_吡唑基)苯并[d]噻唑(IIIf) 的制备 操作过程如例l，只是用3_(4-甲氧苯基)-1-苯基-111-吡唑-4-甲醛代替1， 3- 二苯基-1H-吡唑-4-甲醛，用4-氯-2-氨基苯硫酚代替2-氨基苯硫酚得到白色 固体，收率83. 9 %，熔点201. 5-203. 3 °C 'H NMR(500MHz, CDC13) S :2. 30(s，3H， CH3)， 7. 22 (d， 1H， J = 8. 0Hz) ， 7. 28 (t， 1H， J = 7. OHz) ， 7. 34 (t， 1H， J = 8. OHz) ， 7. 45—7. 49 (m， 3H) ， 7. 56 (s， 1H) ， 7. 65 (t， 2H， J = 8. OHz) ， 7. 87 (d， 2H， J = 8. 5Hz) ， 7. 97 (s， 1H) ， 8. 58 (s， 1H). 13CNMR( 125MHz, CDC13) 169. 2， 161. 6， 154. 1， 150. 9， 150. 7， 139. 2， 133. 3， 133. 2， 132. 2，
129. 6， 129. 5， 128. 6， 127. 5， 127. 1， 125. 3， 122. 9， 122. 4， 122. 1， 119. 3， 117. 1，21. 2 ;MS(EI， 70eV) ， m/z(% )416(,， 100). 实施例7、2-(3-(3-硝基苯基)-l-苯基4-吡唑基)苯并[d]噻唑(IIIg)的制备
操作过程如例1，只是用3_(3-硝基苯基)-l-苯基-1H-吡唑-4-甲醛代替1， 3- 二苯基-1H-妣唑-4-甲醛，得到黄色固体，收率85. 9 %，熔点160. 0-161. 3°C ^ NMR(500MHz， CDC13) S :6. 58 (s， 1H) ， 6. 73 (d， 1H， J = 8. OHz) ， 6. 83 (t， 1H， J = 7. 5Hz)，
6. 98 (t， 1H， J = 7. 5Hz) ， 7. 10 (d， 1H， J = 7. 5Hz) ， 7. 34 (t， 1H， J = 7. 5Hz) ， 7. 48 (t， 2H， J =
7. 5Hz) ， 6. 62 (t， 2H， J = 7. 5Hz) ， 8. 09 (d， 1H， J = 7. 5Hz) ， 8. 23 (d， 1H， J = 7. 5Hz) ， 8. 33 (s， 1H) ，8. 70 (s， 1H). 13C NMR(125MHz， CDC13) 169. 2， 161. 8， 154. 1， 150. 9， 148. 6， 145. 9， 139. 5， 134. 4， 133. 9， 129. 6， 128. 1， 127. 2， 125. 8， 123. 1， 122. 9， 122. 4， 122. 1 ， 121. 9， 119. 2， 111. 4 ;MS(EI，70eV) ， m/z(% )398(M"， 100). 实施例8、5_氯-2-(3-(3-硝基苯基)-l-苯基4_吡唑基)苯并[d]噻唑(IIIh) 的制备 操作过程如例1，只是用3_(3-硝基苯基)-l-苯基-1H-吡唑-4-甲醛代替1， 3- 二苯基-1H-吡唑-4-甲醛，用4-氯-2-氨基苯硫酚代替2-氨基苯硫酚得到白色固体， 收率83. 9 %，熔点:180. 5-181. 3°C 'H NMR(500MHz， CDC13) S :7. 36(d， 1H， J = 8. OHz)， 7. 41 (t， 1H， J = 8. OHz) ， 7. 54 (t， 2H， J = 8. OHz) ， 7. 64 (t， 1H， J = 8. OHz) ， 7. 73 (d， 1H， J =8. OHz) ，7. 84(d，2H， J = 8. OHz) ， 8. 02 (s， 1H) ， 8. 22 (d， 1H， J = 7. 5Hz) ， 8. 32 (d， 1H， J =8. OHz) ，8. 66(s， 1H) ，8. 94(s， 1H) 13C NMR(125MHz， CDC13) 169. 2， 161. 8， 154. 1， 150. 9， 148. 6， 145. 9， 139. 5， 134. 4， 133. 9， 129. 6， 128. 1， 127. 2， 125. 8， 123. 1， 122. 9， 122. 4， 122. 1， 121. 9， 119. 2， 111. 4 ;MS(EI，70eV) ， m/z(% )432(M"， 100). 实施例9、2-(3-(3_乙羧基苯基)-1-苯基4_妣唑基)苯并[d]噻唑(IIIi)的制 备 操作过程如例l，只是用3_(3-乙羧基苯基)-1-苯基-111-吡唑-4-甲醛代替 1，3-二苯基-lH-妣唑-4-甲醛得到白色固体，收率83. 9%，熔点144. 5-145. 3 °C .'H NMR (500MHz， CDC13) S :3. 88 (s， 3H) ， 7. 00 (d， 2H， J = 8. 5Hz) ， 7. 25 (s， 2H) ， 7. 31—7. 35 (m， 3H) ， 7. 44-7. 50 (m， 1H) ， 7. 67 (d， 1H， J = 8. 5Hz) ， 7. 82 (d， 2H， J = 7. OHz) ， 8. 02 (d， 2H， J = 7. OHz) ，8. 65(s， 1H). 13C NMR(125MHz， CDC13) 162. 3， 160. 6， 152. 2， 151. 0， 150. 8， 139. 3，
132. 3， 131. 0， 129. 6， 128. 4， 127. 4， 125. 3， 123. 9， 122. 1， 121. 9， 119. 4， 116. 8， 114. 0,55. 4 ; MS (EI ， 70eV) ， m/z (% ) 403 (M+， 100) 实施例10、5-氯-2- (3- (3-乙羧基苯基)-1-苯基4_吡唑基)苯并[d]噻唑(I11 j) 的制备 操作过程如例l，只是用3-(3_乙羧基苯基)-l-苯基-1H-吡唑-4-甲醛代替1， 3- 二苯基-1H-吡唑-4-甲醛，用4-氯-2-氨基苯硫酚代替2-氨基苯硫酚得到白色固体， 收率83.9%，熔点:164. 5-165. 3 °C . ^ NMR(500MHz， CDC13) S :2. 31 (s， 3H) ， 7. 27 (t， 1H， J = 8. 5Hz) ， 7. 32 (d， 1H， J = 7. 5Hz) ， 7. 37 (t， 1H， J = 7. 5Hz) ， 7. 47—7. 52 (m， 3H) ， 7. 56 (s， 1H) ， 7. 64 (d， 1H， J = 8. OHz) ， 7. 69 (d， 2H， J = 8. 5Hz) ， 7. 82 (d， 2H， J = 8. OHz) ， 7. 99 (s， 1H) ，8. 64(s， 1H). 13C NMR(80MHz， CDC13) 169. 2， 161. 7， 154. 0， 151. 0， 150. 7， 139. 2， 133. 3，
133. 2， 132. 3， 129. 6， 128. 7， 127. 5， 127. 1， 125. 4， 122. 9， 122. 4， 119. 4， 117. 0，55. 4 ;MS(EI， 70eV) ， m/z(% )433(M"， 100). 实施例11、2-(3-(4_甲基苯基)-l-苯基4-吡唑基)苯并[d]噻唑(IIIk)的制 备
6
操作过程如例1，只是用3_(4-甲基苯基)-l-苯基-1H-吡唑-4-甲醛代替1， 3- 二苯基-1H-妣唑-4-甲醛，得到白色固体，收率87. 3 %，熔点135. 6-137. 0 °C . ^ NMR (500MHz, CDC13) S :2. 28(s，3H， CH3) ， 7. 22 (t， 1H， J = 8. 0Hz) ， 7. 32(d，2H， J = 7. OHz)， 7. 46-7. 50 (m， 4H) ， 7. 59 (s， 1H) ， 7. 65 (d， 1H， J = 8. OHz) ， 7. 79 (t， 3H， J = 7. OHz) ， 8. 0 (d， J = 7. OHz) ，8. 59 (s， 1H， C5_H) 13C NMR(125MHz， CDC13) 169. 1， 159. 8， 153. 2， 150. 6， 150. 5， 139. 4， 135. 0， 133. 4， 129. 6， 129. 4， 128. 5， 127. 4， 127. 1， 126. 1， 124. 9， 122. 8， 122. 6， 122. 2， 121. 3， 119. 1， 117. 3，21.2 ;MS (EI， 70eV) ， m/z ( % ) 367 (M+， 100) Anal. Calcd. for C23H17N3S(367) :C，75. 20% ;H，4. 63% ;N， 11. 44% ;Found :C，75. 18% ;H 4. 64% ;N， 11. 46% .
实施例12、5-氯-2-(3-(4_甲基苯基)-l-苯基4-吡唑基)苯并[d]噻唑(III1) 的制备 操作过程如例1，反应时间为2h，反应溶剂用甲醇代替乙醇，用3_(4-甲基苯 基)-1-苯基-1H-吡唑-4-甲醛代替1 ， 3- 二苯基-1H-吡唑-4-甲醛，用4-氯-2-氨基苯硫 酚代替2-氨基苯硫酚，得到白色固体，收率85. 5%，熔点193. 0-194. 7°C ^ NMR(500MHz, CDC13) S :2. 28 (s， 3H， CH3) ， 7. 23 (d， 1H， J = 8. OHz) ， 7. 28 (t， 1H， J = 7. OHz) ， 7. 35 (t， 1H， J =8. OHz) ， 7. 46-7. 50 (m， 3H) ， 7. 55 (s， 1H) ， 7. 67 (t， 2H， J = 8. OHz) ， 7. 89 (d， 2H， J = 8. 5Hz)， 7. 98(s， 1H) ，8. 59(s， 1H). 13C NMR(125MHz， CDC13) 169. 3， 161. 7， 154. 1， 150. 9， 150. 6， 139. 3， 133. 4， 133. 2， 132. 1， 129. 5， 129. 4， 128. 6， 127. 4， 127. 0， 125. 3， 122. 9， 122. 5， 122. 2， 119. 3， 117. 1，21. 2 ;MS(EI，70eV) ， m/z(% )400 Of， 100). 实施例13、5-氯-2-(1-(4-硝基苯基)-3-苯基4-吡唑基)苯并[d]噻唑(IIIm) 的制备 操作过程如例1，只是用1_(4-硝基苯基)-3-苯基-1H-吡唑-4-甲醛代替1， 3- 二苯基-1H-吡唑-4-甲醛，用4-氯-2-氨基苯硫酚代替2-氨基苯硫酚得到白色固体， 收率85. 1%，熔点:176. 5-177. 3°C 'H NMRR(500MHz， CDC13) S :7. 35(d， 1H， J = 8. OHz)， 7. 40 (t， 1H， J = 8. OHz) ， 7. 53 (t， 2H， J = 8. OHz) ， 7. 66 (t， 1H， J = 8. OHz) ， 7. 75 (d， 1H， J =8. OHz) ，7. 86(d，2H， J = 8. OHz) ， 8. 03 (s， 1H) ， 8. 23 (d， 1H， J = 7. 5Hz) ， 8. 31 (d， 1H， J =8. OHz) ，8. 67 (s， 1H) ，8. 94(s， 1H) 13C NMR(125MHz， CDC13) 169. 1， 161. 6， 154. 1， 150. 8， 148. 5， 145. 8， 139. 4， 134. 2， 133. 9， 129. 6， 128. 1， 127. 3， 125. 6， 123. 0， 122. 7， 122. 5， 122. 3， 121. 8， 119. 3， 111. 5 ;MS(EI，70eV) ， m/z(% )432(M+， 100).
实施例14、抗肿瘤生物活性测试方法
肿瘤细胞离体培养 选取肿瘤细胞Chang liver、MCF-7、H印G-2用含10%小牛血清(四季青生物工程 公司)的RPMI1640(Gibco Co. LTD.)培养液于37°C、5% C02细胞培养箱中孵育。待细胞密 度长到70-90%时传代(贴壁细胞用Puck' s EDTA消化后传代)，用于以后实验所需。
MTT法测定苯并噻唑衍生物对不同瘤株的体外抑制作用 待试药物选自实施例1 13制得的2-(1，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑 类化合物，将各化合物按照5ii g/ml溶解在二甲基亚砜中，将对数生长期的细胞，消化后用 培养液稀释到每毫升30000个细胞，每孔100 ill接种于96孔培养板内，5% 0)2，371:孵箱 中培养。培养24小时，加入100 iil含50 ii g/m的药物的培养液，使药物终浓度为25 y g/ m，匿SO终浓度为0. 5% (同时设置该浓度匿SO的阳性对照)。继续培养至实验设计的时间，加入20 ii 1MTT的溶液，继续孵育4小时。小心除去培养液，加入150 y 1 DMS0，摇床振荡10min，待结晶充分溶解，用酶标仪在570nm波长以650nm为参比波长测吸光值，所得数据用于计算ICs。.所得结果见表l。 表1所合成的苯并噻唑衍生物对不同肿瘤细胞株的IC5。(yM)值
序号化合物编号
结构
Hep G2 MCF-7 H印2
ma
、As
>50 >5040.10
2
mb
ci、
A、
24. 75 43. 83 10. 95
3
nic
CI
- N、一S
28. 90 46. 44 34. 18
4
ci
ma d、
、,s
>30 〉30 25.25
me
H3CO
>50 >50
〉50
>30 >30 20.04
40. 69 29. 84 16. 96
22.87 >30 18.25
3,28 6.44 11.72
37. 00 16. 13 20. 16
26. 35 45. 57 12. 35
24.65 >30 20.46
9〉50 〉50 从表l可以看出 1)所有的化合物对不同的肿瘤细胞株均有一定的抑制活性； 2)所有化合物中，化合物IIIi对Chang liver具有最强的抑制活性，IC5。值为3. 28iiM。 3)总而言之，该类化合物有一定的抗肿瘤应用前景。
10
权利要求
2-(1，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物，其特征是具有以下结构通式其中A环可为无取代或单取代，R1为H、Cl；B环可为无取代、单取代或多取代，R2为H、Cl、CH3O-、CH3-、NO2-，CH3COO，m为1～5的自然数；C环可为无取代、单取代或多取代，R3为H、NO2-；n为1～5的自然数。F2009101559017C00011.tif
2. 如权利要求l所述的化合物，其特征在于，所述的m为l，n为1。
3. 制备如权利要求l所述的2-(l，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物的方法，其特征在于所述的方法按如下步骤进行以式(I)所示未取代或取代的邻氨基苯硫酚和式(II)所示的1-取代苯基_3取代苯基-111-吡唑-4-甲醛类化合物为原料，在有机溶剂中，反应温度为20-25t:，在对甲苯磺酸的催化下，反应0. 5-2小时，縮合得到所述的2-(l，3_ 二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物；，&为H、C1 ;R2为H、C1、CH30-、CH3-、N02_，CH3COO， m为1 5的自然数；R3为H、 N02- ;n为1 5的自然数；
4. 如权利要求3所述的方法，其特征在于所述的有机溶剂为甲醇或乙醇。
5. 如权利要求3所述的方法，其特征在于所述的未取代或取代的邻氨基苯硫酚和1-取代苯基-3取代苯基-lH-吡唑-4-甲醛类化合物投料物质的量比为0.9 1. 1 : 1。
6. 如权利要求3所述的方法，其特征在于所述的对甲苯磺酸与l-取代苯基-3取代苯基-lH-吡唑-4-甲醛类化合物物质的量比为O.Ol 0. 2 : 1。
7. 如权利要求3所述的方法，所述的有机溶剂的用量为对甲苯磺酸与l-取代苯基-3取代苯基-1H-吡唑-4-甲醛类化合物质量计为2-8ml/g。
8. 如权利要求l所述的2-(l，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物在制备制疗抗肿瘤药物中的应用。
全文摘要
本发明涉及一种2-(1，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物，及制备方法和应用，本发明所述的2-(1，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物的制备方法是以式(I)所示未取代或取代的邻氨基苯硫酚和式(II)所示的1-取代苯基-3取代苯基-1H-吡唑-4-甲醛类化合物为原料，在有机溶剂中，反应温度为20-25℃，在对甲苯磺酸的催化下，反应0.5-2小时，缩合得到所述的2-(1，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物；本发明所提供的2-(1，3-二取代苯基-4-吡唑基)苯并噻唑类化合物多对多种肿瘤细胞株有抑制增殖作用，对肿瘤细胞有体外抑制作用，为药物筛选提供了更多选择机会。
文档编号A61K31/428GK101759694SQ20091015590
公开日2010年6月30日 申请日期2009年12月31日 优先权日2009年12月31日
发明者姜灵, 施湘君, 苏为科, 陈志卫 申请人:浙江工业大学
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