一种从荷叶中提取分离的化合物的制作方法

专利名称：：一种从荷叶中提取分离的化合物的制作方法
技术领域：
：本发明涉及的化合物2-羟基-1_甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡为紫色粉末(石油醚-乙酸乙酯)，熔点17918rc，易溶于氯仿、二氯甲烷、乙醚、甲醇、乙醇、盐酸水溶液、硫酸水溶液、氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液等，碘化铋钾显色反应呈阳性，示为生物碱类成分。UV入隨(nm):264,367。EI-MS:m/z279[M]+，264[M_CH3]+，248[M_0CH3]+。工HNMR(CDCl3，500MHz):S9.21(1H，d，J=8.5Hz，H-ll)，7.66(1H，d，J=8.OHz，H_8)，7.46(1H，td，J=7.5，H_9)，7.33(1H，tdj=7.5，H—10)，7.05(1H，s，H_3)，6.61(1H，s，H-7)，3.82(3H，s，OCH3)，3.36(2H，td，J=6.0，H_5)，3.23(2H，td，J=5.5，6.OHz，H_4)，3.08(3H，s，N-CH3)。13CNMR(CDC13，125MHz):S142.4(C_l)，124.7(C_la)，118.9(C_lb)，147.7(C-2)，113.9(C-3)，30.8(C_4)，130.5(C_4a)，50.3(C_5)，143.6(C_6a)，101.2(C_7)，136.1(C_7a)，126.3(C_8)，126.9(C_9)，123.4(C_10)，126.8(C_11)，122.6(C-lla)，40.3(N-CH3)，60.0(0CH3)。其2D-NMR数据见表2。表22-羟基-1-甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡的^NMR、"CNMR及2D-NMR数据位置一MR13CNMRHMQCHMBCNOESY1142.4la124.7lb118.92147.737.05(1H,s)113.9113.9142.4(1)U8.9(lb)147.7(2)3.23(4)43.23(2H，td，J=5.5Hz)30.830.850.3(5)130.5(4a)U8.9(lb)113.9(3)7.05(3)3.36(5)130.53.36(2H,td，J=6.0Hz)50.350.330.8(4)143.6(6a)130.5(4a)3.23(4)3.08(N.CH3)6a143.676.61(1H,s)101.2101.2126.3(8)122.6(1la)U8.9(lb)3.08(N-CH3)7.66(8)7a136.187.66(1H,d，J=8.0Hz)126.3126.3101.2(7)122.6(1la)6.61(7)7.46(9)97.46(1H，td,J=7.5Hz)126.9126.9136.1(7a)126.3(8)7.66(8)7.33(10)107.33(1H,td,J=7.5Hz)123.4123.4126.3(8)122.6(lla)7.46(9)9.21(11)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>下述实施例均能实现上述实验例的效果,具体实施方式实施例1:化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基_6a，7_去氢阿朴啡，其结构式如下H3CO其提取分离方法为荷叶lkg加14倍体积份的70%乙醇水溶液，加热回流提取2次，每次提取lh，乙醇提取液合并，减压回收溶剂至干，得乙醇提取物212g。乙醇提取物200g加8倍体积份的1%HC1水溶液超声分散(30min，100Hz)，离心(4000rpm，30min)，分取上清液，重复上述操作4次，合并上清液，通过0.3倍体积份的D001-CC型阳离子交换树脂(树脂床径高比1:7)，先用树脂体积3倍体积份的10%乙醇水溶液洗脱，再用树脂体积5倍体积份的90%氨性乙醇溶液(其中氨浓度为O.1%)洗脱，收集氨性乙醇洗脱液，减压回收溶剂至干，得荷叶生物碱部位53g。荷叶生物碱部位50g用30倍重量份的硅胶(160200目)柱色谱分离(色谱床径高比l:8)，氯仿洗脱至无洗脱物被洗下止，合并氯仿洗脱液，减压回收溶剂至干，残留物用30倍重量份的硅胶(200300目)柱色谱分离(色谱床径高比1:15)，石油醚-甲醇混合溶剂梯度洗脱(80:1—60:1—50:1—40:1—30:1—20:1—15:1—12:1—io:1—8:1)，每100ml收集一份，共收集得到120个流份。合并流份818，回收溶剂至干，残留物用30倍重量份的硅胶(200300目)柱色谱分离(色谱床径高比1:12)，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂(45:1)洗脱，每50ml收集一份，共收集得到50个流份，合并流份1530，回收溶剂至干，残留物用25倍重量份的中性氧化铝(160200目)柱色谱分离(色谱床径高比l:10)，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂(8:1)洗脱，每20ml收集一份，共收集得到35个流份，合并流份1025，回收溶剂至干，得紫色粉末2-羟基-1-甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡30mg。其理化性质为紫色粉末(石油醚-乙酸乙酯)，熔点17918rC，易溶于氯仿、二氯甲烷、乙醚、甲醇、乙醇、盐酸水溶液、硫酸水溶液、氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液等，碘化铋钾显色反应呈阳性。其结构鉴定方法为由EI-MS给出的分子离子峰m/z279[M]+，结合^NMR和13CNMR数据，推断分子式为C18H1702N，综合分析UV，MS，力NMR，13CNMR，HSQC，HMBC和NOESY波谱数据，推定结构。实施例2:化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基_6a，7_去氢阿朴啡，其结构式如下其提取分离方法为荷叶lkg加10倍体积份的75%乙醇水溶液，加热回流提取4次，每次提取lh，乙醇提取液合并，减压回收溶剂至干，得乙醇提取物248g。乙醇提取物240g加10倍体积份的1%HC1水溶液超声分散(40min，100Hz)，离心(3500rpm，45min)，分取上清液，重复上述操作3次，合并上清液，通过0.5倍体积份的D001-CC型阳离子交换树脂(树脂床径高比1:5)，先用树脂体积5倍体积份的水溶液洗脱，再用树脂体积3倍体积份的70%氨性乙醇溶液(其中氨浓度为1%)洗脱，收集氨性乙醇洗脱液，减压回收溶剂至干，得荷叶生物碱部位59g。荷叶生物碱部位50g用40倍重量份的硅胶(160200目)柱色谱分离(色谱床径高比l:12)，氯仿洗脱至无洗脱物被洗下止，合并氯仿洗脱液，减压回收溶剂至干，残留物用40倍重量份的硅胶(200300目)柱色谱分离(色谱床径高比1:IO)，石油醚-甲醇混合溶剂梯度洗脱(80:1—60:1—50:1—40:1—30:1—20:1—15:1—12:1—io:1—8:1)，每120ml收集一份，共收集得到125个流份。合并流份1020，回收溶剂至干，残留物用40倍重量份的硅胶(200300目)柱色谱分离(色谱床径高比1:10)，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂(50:1)洗脱，每50ml收集一份，共收集得到48个流份，合并流份1827，回收溶剂至干，残留物用30倍重量份的中性氧化铝(160200目)柱色谱分离(色谱床径高比l:15)，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂(10:1)洗脱，每30ml收集一份，共收集得到30个流份，合并流份525，回收溶剂至干，得紫色粉末2-羟基-1-甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡38mg。其理化性质为紫色粉末(石油醚-乙酸乙酯)，熔点17918rC，易溶于氯仿、二氯甲烷、乙醚、甲醇、乙醇、盐酸水溶液、硫酸水溶液、氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液等，碘化铋钾显色反应呈阳性。其结构鉴定方法为由EI-MS给出的分子离子峰m/z279[M]+，结合^NMR和13CNMR数据，推断分子式为C18H1702N，综合分析UV，MS，力NMR，13CNMR，HSQC，HMBC和N0ESY波谱数据，推定结构。实施例3:化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基_6a，7_去氢阿朴啡，其结构式如下H3CO其提取分离方法为荷叶2kg加18倍体积份的95%乙醇水溶液，加热回流提取3次，每次提取0.5h，乙醇提取液合并，减压回收溶剂至干，得乙醇提取物391g。乙醇提取物380g加12倍体积份的1%HC1水溶液超声分散(30min，100Hz)，离心(5000rpm，30min)，分取上清液，重复上述操作2次，合并上清液，通过1倍体积份的D001-SS型阳离子交换树脂(树脂床径高比1:10)，先用树脂体积7倍体积份的水溶液洗脱，再用树脂体积10倍体积份的50%氨性乙醇溶液(其中氨浓度为O.5%)洗脱，收集氨性乙醇洗脱液，减压回收溶剂至干，得荷叶生物碱部位87g。荷叶生物碱部位80g用50倍重量份的硅胶(160200目)柱色谱分离(色谱床径高比l:IO)，氯仿洗脱至无洗脱物被洗下止，合并氯仿洗脱液，减压回收溶剂至干，残留物用50倍重量份的硅胶(200300目)柱色谱分离(色谱床径高比1:20)，石油醚-甲醇混合输U梯度洗脱(80:1—60:1—50:1—40:1—30:1—20:1—15:1—12:1—i0:1—8:1)，每150ml收集一份，共收集得到120个流份。合并流份820，回收溶剂至干，残留物用50倍重量份的硅胶(200300目)柱色谱分离(色谱床径高比1:20)，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂(55:1)洗脱，每60ml收集一份，共收集得到40个流份，合并流份2025，回收溶剂至干，残留物用40倍重量份的中性氧化铝(160200目)柱色谱分离(色谱床径高比l:20)，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂(12:1)洗脱，每25ml收集一份，共收集得到40个流份，合并流份832，回收溶剂至干，得紫色粉末2-羟基-1-甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡74mg。其理化性质为紫色粉末(石油醚-乙酸乙酯)，熔点17918rC，易溶于氯仿、二氯甲烷、乙醚、甲醇、乙醇、盐酸水溶液、硫酸水溶液、氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液等，碘化铋钾显色反应呈阳性。其结构鉴定方法为由EI-MS给出的分子离子峰m/z279[M]+，结合^NMR和13CNMR数据，推断分子式为C18H1702N，综合分析UV，MS，力NMR，13CNMR，HSQC，HMBC和NOESY波谱数据，推定结构。实施例4:12化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基_6a，7_去氢阿朴啡，其结构式如下H3CO其提取分离方法为荷叶5kg加12倍体积份的70%乙醇水溶液，加热回流提取2次，每次提取2h，乙醇提取液合并，减压回收溶剂至干，得乙醇提取物970g。乙醇提取物900g加10倍体积份的1%HC1水溶液超声分散(60min，100Hz)，离心(4000rpm，60min)，分取上清液，重复上述操作3次，合并上清液，通过0.5倍体积份的D001-CC型阳离子交换树脂(树脂床径高比1:10)，先用树脂体积3倍体积份的30%乙醇水溶液洗脱，再用树脂体积8倍体积份的90%氨性乙醇溶液(其中氨浓度为2%)洗脱，收集氨性乙醇洗脱液，减压回收溶剂至干，得荷叶生物碱部位208g。荷叶生物碱部位200g用40倍重量份的硅胶(160200目)柱色谱分离(色谱床径高比l:15)，氯仿洗脱至无洗脱物被洗下止，合并氯仿洗脱液，减压回收溶剂至干，残留物用30倍重量份的硅胶(200300目)柱色谱分离(色谱床径高比1:12)，石油醚-甲醇混合溶剂梯度洗脱(80:1—60:1—50:1—40:1—30:1—20:1—15:1—12:1—io:1—8:1)，每100ml收集一份，共收集得到140个流份。合并流份1020，回收溶剂至干，残留物用40倍重量份的硅胶(200300目)柱色谱分离(色谱床径高比1:15)，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂(50:1)洗脱，每50ml收集一份，共收集得到50个流份，合并流份1830，回收溶剂至于，残留物用25倍重量份的中性氧化铝(160200目)柱色谱分离(色谱床径高比l:12)，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂(10:1)洗脱，每25ml收集一份，共收集得到40个流份，合并流份1035，回收溶剂至干，得紫色粉末2-羟基-1-甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡130mg。其理化性质为紫色粉末(石油醚-乙酸乙酯)，熔点17918rC，易溶于氯仿、二氯甲烷、乙醚、甲醇、乙醇、盐酸水溶液、硫酸水溶液、氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液等，碘化铋钾显色反应呈阳性。其结构鉴定方法为由EI-MS给出的分子离子峰m/z279[M]+，结合^NMR和13CNMR数据，推断分子式为C18H1702N，综合分析UV，MS，力NMR，13CNMR，HSQC，HMBC和NOESY波谱数据，推定结构。实施例5:化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基_6a，7_去氢阿朴啡，其结构式如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage14</formula>其提取分离方法为荷叶2kg加15倍体积份的80%乙醇水溶液，加热回流提取3次，每次提取1.5h，乙醇提取液合并，减压回收溶剂至干，得乙醇提取物412g。乙醇提取物400g加8倍体积份的1%HC1水溶液超声分散(50min，100Hz)，离心(3500rpm，60min)，分取上清液，重复上述操作2次，合并上清液，通过0.8倍体积份的D001-SS型阳离子交换树脂(树脂床径高比1:5)，先用树脂体积5倍体积份的20%乙醇水溶液洗脱，再用树脂体积8倍体积份的60%氨性乙醇溶液(其中氨浓度为1.5%)洗脱，收集氨性乙醇洗脱液，减压回收溶剂至干，得荷叶生物碱部位90g。荷叶生物碱部位90g用40倍重量份的硅胶(160200目)柱色谱分离(色谱床径高比l:15)，氯仿洗脱至无洗脱物被洗下止，合并氯仿洗脱液，减压回收溶剂至干，残留物用45倍重量份的硅胶(200300目)柱色谱分离(色谱床径高比1:18)，石油醚-甲醇混合溶剂梯度洗脱(80:1—60:1—50:i—40:i—30:i—20:i—15:i—12:i—io:1—8:1)，每150ml收集一份，共收集得到130个流份。合并流份1018，回收溶剂至干，残留物用30倍重量份的硅胶(200300目)柱色谱分离(色谱床径高比1:10)，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂(49:1)洗脱，每50ml收集一份，共收集得到45个流份，合并流份1528，回收溶剂至干，残留物用30倍重量份的中性氧化铝(160200目)柱色谱分离(色谱床径高比l:20)，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂(8:1)洗脱，每30ml收集一份，共收集得到35个流份，合并流份730，回收溶剂至干，得紫色粉末2-羟基-1-甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡67mg。其理化性质为紫色粉末(石油醚-乙酸乙酯)，熔点17918rC，易溶于氯仿、二氯甲烷、乙醚、甲醇、乙醇、盐酸水溶液、硫酸水溶液、氢氧化钠水溶液、氢氧化钾水溶液等，碘化铋钾显色反应呈阳性。其结构鉴定方法为由EI-MS给出的分子离子峰m/z279[M]+，结合^NMR和13CNMR数据，推断分子式为C18H1702N，综合分析UV，MS，力NMR，13CNMR，HSQC，HMBC和NOESY波谱数据，推定结构。实施例6:化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基_6a，7_去氢阿朴啡与氢氧化钠或氢氧化钾水溶液反应，生成盐类衍生物。实施例7:化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基_6a，7_去氢阿朴啡与盐酸、硫酸或硝酸水溶液反应，生成盐类衍生物。实施例8:化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基_6a，7-去氢阿朴啡lg，加入赋形剂按常规工艺制成胶囊1000粒，治疗血管紧张性头痛，每次1粒，每日3次。实施例9:化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基_6a，7_去氢阿朴啡盐酸盐1.25g，加入赋形剂按常规工艺制成片剂1000片，治疗痛经，每次1片，每日2次。权利要求一种化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡，其特征在于该化合物的化学结构式为F2009101623422C0000011.tif2.如权利要求1所述的化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡，其特征在于该化合物还可以制备成盐类等衍生物，其中该化合物的盐可以是但不限于钠盐、钾盐或盐酸盐、硫酸盐、硝酸盐。3.如权利要求1所述的化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡的制备方法，其特征在于其提取方法为荷叶加1018倍体积份的7095%乙醇水溶液，加热回流提取24次，每次提取0.52h，乙醇提取液合并，减压回收溶剂至干，得乙醇提取物；其中优选提取方法为荷叶加14倍体积份的95%乙醇水溶液，加热回流提取3次，每次提取lh，乙醇提取液合并，减压回收溶剂至干，得乙醇提取物。4.如权利要求1所述的化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡的制备方法，其特征在于其富集方法为乙醇提取物加812倍体积份的1%HC1水溶液超声分散(3060min，100Hz)，离心(35005000rpm，3060min)，分取上清液，重复上述操作24次，合并上清液，通过0.31倍体积份的D001-CC或D001-SS型阳离子交换树脂(树脂床径高比l:510)，先用树脂体积37倍体积份的030%乙醇水溶液洗脱，再用树脂体积310倍体积份的5090%氨性乙醇溶液(其中氨浓度为0.12%)洗脱，收集氨性乙醇洗脱液，减压回收溶剂至干，得荷叶生物碱部位；其中优选富集方法为乙醇提取物加10倍体积份的1%HC1水溶液超声分散(30min，100Hz)，离心(4000rpm，40min)，分取上清液，重复上述操作3次，合并上清液，通过O.5倍体积份的D001-CC型阳离子交换树脂(树脂床径高比1:8)，先用树脂体积5倍体积份的水溶液洗脱，再用树脂体积6倍体积份的90%氨性乙醇溶液(其中氨浓度为0.5%)洗脱，收集氨性乙醇洗脱液，减压回收溶剂至干，得荷叶生物碱部位。5.如权利要求1所述的化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡的制备方法，其特征在于其分离纯化方法为荷叶生物碱部位用3050倍重量份的硅胶(160200目)柱色谱分离(色谱床径高比l:815)，氯仿洗脱至无洗脱物被洗下止，合并氯仿洗脱液，减压回收溶剂至干，残留物用3050倍重量份的硅胶(200300目)柱色谱分离(色谱床径高比i:1020)，石油醚-甲醇混合溶剂梯度洗脱(80:1—60:1—50:i—40:1—30:1—20:1—15:1—12:1—io:1—8:D，每iooi50mi收集一份，共收集得到120140个流份，合并流份810至1520，回收溶剂至干，残留物用3050倍重量份的硅胶(200300目)柱色谱分离(色谱床径高比1:1020)，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂(4555:1)洗脱，每5060ml收集一份，共收集得到4050个流份，合并流份1520至2530，回收溶剂至干，残留物用2540倍重量份的中性氧化铝(160200目)柱色谱分离(色谱床径高比1:1020)，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂(812:1)洗脱，每2030ml收集一份，共收集得到3040个流份，合并流份510至2535，回收溶剂至干，得紫色粉末2-羟基-1-甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡；其中优选分离纯化方法为荷叶生物碱部位用40倍重量份的硅胶(160200目)柱色谱分离(色谱床径高比l:io)，氯仿洗脱至无洗脱物被洗下止，合并氯仿洗脱液，减压回收溶剂至干，残留物用40倍重量份的硅胶(200300目)柱色谱分离(色谱床径高比i:15)，石油醚-甲醇混合溶剂梯度洗脱(80:1—60:1—50:1—40:1—30:1—20:i—15:1—12:l—io:1—8:1)，每ioomi收集一份，共收集得到i30个流份，合并流份918，回收溶剂至干，残留物用40倍重量份的硅胶(200300目)柱色谱分离(色谱床径高比l:15)，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂(50:1)洗脱，每50ml收集一份，共收集得到50个流份，合并流份1525，回收溶剂至干，残留物用30倍重量份的中性氧化铝(160200目)柱色谱分离(色谱床径高比i:15)，石油醚-乙酸乙酯混合溶剂(io:i)洗脱，每25ml收集一份，共收集得到35个流份，合并流份830，回收溶剂至干，得紫色粉末2-羟基-1-甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡。6.如权利要求1所述的化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡在制备镇痛药物中的应用。全文摘要本发明公开了一种化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡及其提取分离方法、结构鉴定方法。本发明化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡的化学结构式如下；经实验证明本发明化合物2-羟基-1-甲氧基-6-甲基-6a，7-去氢阿朴啡具有镇痛作用。文档编号A61P29/00GK101701008SQ20091016234公开日2010年5月5日申请日期2009年8月13日优先权日2009年8月13日发明者刘斌,吴昊,王伟申请人:刘斌