包含src激酶抑制剂azd0530和抗雌激素或egfr-tk抑制剂的组合产品的制作方法
专利名称：包含src激酶抑制剂azd0530和抗雌激素或egfr-tk抑制剂的组合产品的制作方法
技术领域：
在第一方面，本发明涉及包含抗雄激素和非受体酪氨酸激醉的Src家族的特定抑制刑的组合.本发明的组合在治疗癌症，尤其是乳腺癌的方法中或在延緩该癌症发展的方法中是有用的.本发明还涉及包含该组合的药物组合物及其在制备用于治疗癌症的药物或制备用于延緩癌症发展的药物中的应用.
在另一方面，本发明涉及包含表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶(TK)抑制刑和非受体酪氨酸激醉的Src家族的特定抑制刑的组合.本发明的该组合在治疗癌症，尤其是乳腺癌、结肠直炀癌、前列腺癌、非小细胞肺癌和头颈部癌的方法中或在延緩这些癌症发展的方法中是有用的.本发明的该方面还涉及包含该组合的药物组合物及其在制备用于治疗癌症，尤其是肺癌、结肠直肠癌、乳腺癌、前列腺癌和头颈部癌的药物或制备用于延緩这些癌症发展的药物中的应用.
在另一方面，本发明涉及包含抗雌激素、EGFRTK抑制刑和非受体酪氨酸激酶的Src家族的特定抑制刑的组合.本发明的该组合在治疗癌症，尤其是乳腺癌的方法中或在延緩该癌症发展的方法中是有用的，本发明的该方面还涉及包含该组合的药物组合物及其在制备用于治疗癌症的药物或制备用于延緩癌症发展的药物中的应用.
背景技术：
现在治疗癌症的逸择包括外科切除、外粒子束放射治疗和/或全身化疗.这些在癌症的一些形式中获得了某种程度的成功，但是在其他的形式中则很少成功.明显需要治疗癌症的新的疗法.
目前许多用于细胞增殖疾病，如癌症的治疗方法都使用押制DNA合成的化合物.这些化合物通常具有细胞毒性，但是它们对于快速分裂的细胞，如肺难细胞的毒性作用可能是有益的.其它不通过抑制DNA合成机理而发挥作用的抗肿瘤刑方法具有增强的作用选择性.
近年来发现，通过将其DNA的一部分转化为致癌基因，即在激活时导致恶性肿痏细胞形成的基因可以导致细胞癌化(Bradshaw,Mutagenesis, 1986， 1, 91).几种这样的致癌基罔会引起作为生长因子受体的肽的产生.生长因子受体复合物的激活随后导致细胞增殖增加.已知几种致痛基闳编码酷A酸激酶，某些生长困子受体也是路A
酸激峰(Yarden等人，Ann. Rev, Biochem,, 1988， S7, 443; Larsen等人,Ann. R印orts in Med. Chem" 1989, Chpt. 13) 首批被识別的路氛酸激眯来自这些病毒性致痛基阁，例如pp60vSrc *氨酸激醉(又被称为v-Src)和在正常细胞中的相应路我酸激味，例如pp60c-Src酵我酸激酶(又被称为c-Src).
受体路氨酸激醉在引发细胞复制的生化信号传速中是重要的，它们是跨越细胞胰的较大的峰并且具有用于与生长西子如表皮生长困子(EGF)结合的细胞外结合区和作为激跨鱗酸化蛋白质中的路A酸并阁此影响细胞增殖的细胞内部分.根据与不同受体路氛酸激睥结合的生长因子家族，己知多种类型的受体路我酸激酵(WiHw， AdvancesinCancer Research, 1993， 60, 43-73).该分类包括I类受体錄氛酸激錄，其包括受体酵A酸激II的EGF家族，如EGF, TGFa, Neu和erbB受体，II类受体膝氨酸激味，其包括受体路氨酸激錄的胰岛素家族，如胰島素和1GF1受体以及胰岛素相关受体(IRR)，和III类受体錄A酸歉跨，其包舍受体酷泉酸激醉的血小板衍生生长闳子(PDGF)家族，如PDGFou PDGFp和集落剌激S子1 (CSF1)受体.
还已知某些酷A酸激味属于非受体錄A酸激錄类，其位于细胞内并且涉及生化信号的传速，例如影响肿袖细胞逸动、传播和扩散以及随后转移性肿病生长的那些(UHrich等人，Cell, 1990, 61, 203-212,Bolen等人，FASEBJ" 1992, 6, 3403-3409， BHckeH等人,CriticalReviews in Oncogenesis, 1992, 3, 401-406, Boblen等人，Oncogene,1993, 8， 2025-2031, Courtneidge等人，S棚in, Cancer Bio，" 1994，5, 239-246, Lauffenburger等人，Cell, 1996, 84, 3S9-369, Hanks等人，BioEssays, 1996， 19, 137-145, Parsons等人,Current Opinionin Cell Biology, 1997, 9， 187-192， Brown等人,Biochimica et BiophysicaActa, 1996, 1287, 121-149和Schlaepfer等人,Progress in Biophysicsand Molecular Biology, 1999， 71, 435-478).己知多种类型的非受体錄A酸，其包括Src家族，如Src、 Lyn、 Fyn和Yes膝A酸激ll, AW家族，如Abl和Arg,以及Jak家族，如Jakl和Tyk2,
己知非受体路A酸激味的Six家族在正常细胞中是高度调节的，并且在缺乏细胞外刺激时保持无活性形态.然而，在常见的癌症，如胃肠痛症，例如結肠、直肠和胃癌(Cartwrigbt等人，Proc,Na , Acad.Sci, USA, 1990， 87, 和Mao等人，Oncogene, 1997, IS,
3083-3090)和乳線痛(Muthuswumy等人，Oncogene, 1995， 11，1801-1810)中， 一些Six家族成贝，例如c-Src酷氛酸激錄经常被显著激活(当与正常细胞水平相比时)，还可以在其它常见的人类癌症，如非小细胞肺痛(NSCLCs)中发现非受体路氛酸激降的Src家族，其中包括包括肺的腺痛和扁平细胞癌(Mazurenko等人，EuropeanJourmil of Cancer, 1992， 28， 372-7)、榜耽痛(Fanning等人,CancerResearch, 1992, S2， 1457-62)、食管癌(Jankowski等人，Gut, 1992，33， 1033-8)、前列腺痛、印巢癌(Wiener等人，CHn. Cancer Research,1999, 5， 2164-70)和狭緣痛(Lutz等人,Bioch咖.am) Biophys, Res.Com鹏.，1998， 243 , 503-8).随着在更多人类肿瘤组织中对非受体酷氛酸激錄的Src家族的检測，人们期望能够证实其广泛的普遍性.
进一步已知，c-Src非受体酷氨酸激雖的主要作用是通过与大重胞质蛋白质包括例如粘着斑激峰和桩蛋白相互作用来调控粘着斑复合物的集錄.另外c-Src与限制促进细胞运动性的肌动發由细胞骨架的信号路径相结合.同样，c-Src、 c-Yes和c-Fyn非受体錄我酸激醉在整联蛋
白介导的信号中和在分裂钙粘着蛋白依賴性细胞-细胞连接中起重要的作用(Owens等人，Mokculur Biology of the Cell, 2000， 11, Sl-64和
KIinghoffer等人，EMBO Journal, 1999, 18， 24S9-2471 ).对于局部肿病发展到分散至血流中、便入其他组织和开始转移性肿病生长的阶段，必然需要细胞的运动性.例如，己经证实結肠胂講由局部性发展到散布性的優入转移性疾病与c-Src非受体膝A酸激味活性有关(Bruiiton等人，Oncogene, 1997, 14, 283-293, Fincham等人，EMBOJ, 1998， 17, 81-92 and Verbeek等人，Exp. CeU Research, 1999, 248,531-S37).
相应的，人们已经认识到这种非受体路我酸激雄柙制刑作为胂瘤细胞运动性的选择性抑制刑和作为导致转移性肿病生长抑制作用的哺乳动物痛细胞的扩散和伥入的选摔性抑制剂应该是很有价值的.特別是逸种非受体齡A酸激錄抑制刑作为用于抑制和/或治疗实体肿病疾病的抗使入活性剂应该是有价值的.
如在国际专利申请WO 01/94341和WO 02/163S2中所述，其中所
6公开的Six激醉抑制刑可以以单独治疗的方式给药，或可以包括除该 发明的喹唑啉衍生物之外的常規手术或放射疗法或化学疗法.所迷的 这样的化学疗法包括一种或多种下列种类的批肿癧活性刑
(i) 其它抗侵入活性刑(例如金属蛋白錄抑制刑，例如马立马司 他和尿激醉纤溶錄原激活物受体功能的抑制剂)；
(ii) 抗增殖/抗肿瘤药与其组合，在医学肿瘤学中仗用，例如汰化 刑(例如顺铂、卡铂、环磷Wt肤、氣芥、美法仑、苯丁酸氣芥、马利 兰和亚硝基脲)；代谢拮抗刑(例如抗叶酸物例如象尿嗜嚷和替加氣、 雷替曲塞、氛甲嚷呤、阿棘胞苷和羟基脲，或例如一种在专利申请No. S62734中公开的优选的抗代谢拮抗刑，例如(2S)-2-(邻-象-对-IN-(2,7-二甲基-4-氣代-3,4-二氣喹唑淋-6-基甲基}-！^ (丙-2-块基)氛基l苯甲酰 IUM-备(四唑-S-基)丁酸)；批肿病批生素(例如葱环雷机生素，例 如阿審素、争光審紊，亚槺利審素、柔毛審素、表乘霉素、表乘比星、 去甲氧乘红審素、丝裂審素-C、放线菊素和光神審素)；抗有丝分裂 刑(例如长春花生物械例如长春新械、长春械、去乙耽长春8b胺和长 春瑞舆和紫杉坑类例如紫杉盼和泰索帝)；和拓朴异构錄押制刑(例 如表鬼臼脂素，例如鬼臼亚乙苷和表鬼臼毒豕吩精普、安吖啶、拓朴
替康和喜树威)；
(iH)细胞生长押制刑例如抗雌激素(例如三革氣胺，枸槺酸托瑞 朱芬、雷诺普盼、屈落普芬和iodoxyfene)、抗雄激素(例如比卡魯胜、 象他胺、尼鲁米特和6酸塞普龙)、LHRH拮机刑或LHRH激动刑(例 如戈舍瑞林、亮丙瑞林和布舍瑞林)、孕激素雷(例如甲地孕拥)、 芳香峰抑制剂(例如阿那曲唑、来曲唑、vora幼le和依西美坦)和Sa-
还原錄徒抑制刑例如非那雄按；
(iv)生长因子功能抑制刑，例如此类抑制剂包括生长因子抗体、
生长因子受体抗体、齡IL酸激酶抑制剂和丝教酸-苏氨酸激錄抑制刑， 例如表皮生长W子家族的押制刑(例如EGFR路氨酸激峰抑制刑N-( 3-氣-4-象苯基)-7-甲氣基-6- (3-吗啉代丙氣基)全唑啉-4 胺(ZD1839), N- (3-乙炔基苯基)-6，7-二 ( 2-甲氣基乙氧基)喹唑啉-4-胺(CP 358774) 和6-丙沐酰氛基-N. (3-氣4象苯基)-7- (3.'马啉代丙氣基)全唑啉-4-肤(C1 1033)),例如血小板衍生生长因子家族的抑制刑和例如肝细 應生长罔子家族的押制刑；和
7(V)抗血管生成素刑，例如抑制血管内皮细胞生长因子的活性剂
例如在国际专利申请WO 97/22596、 WO 97/30035、 WO 97/32856和 WO 98/13354中公开的化合物以及通过其它机理起作用的活性刑(例 如利诺胺，整联蛋白avp3功能抑制刑和血管他丁). 抗雄激素和Src押桐拥AZD0S30的组合
孔房的早期和晚期癌病通常是激素依賴性的，并且因此对经由雄 激素受体的雄激素駆动的生长信号敏感.通过手术去势可以实现去除 雌激素.优选的，雄激素的影响也可以通过仗用批雄激素治疗进行抑 制，例如使用非甾类抗雌激素如三苯氣胺、枸櫸酸托瑞米芬、*诺普 酚、屈落昔芬和iodoxyfene,特別是使用三苯氣梭.雄激素的影响可以 使用其它抗砵激素治疗来抑制，例如使用裕类雌激素受体下调因子如 氣维司群.
还发现某些其它癌症如肺痛的生长可以是激素依賴性的.例如， 在肺肿瘤组织中发现了雄激素受体.这些癌症闳而可以是对经由雄激 素受体的由雄激素媒动的生长倌号敏感.
然而，对激素治疗的抗性是孔腺痛治疗中的主要陣碍.袭初对抗
激素治疗应答的肿痛随后在肸病的发展中产生抗性.近年来，正在开 展用以更多了解在乳腺和前列腺痛中对激素治疗和疾病发展产生抗性 的机理的研究.己经建立了用于反映孔脉痛中对批激素活性剂的抗 性，特別是三笨IL胺批性的体外棋型.其显示在MCF7人类乳腺痛细 胞中对抗雄激素三苯氣胺的抗性部分是由EGFR信号途径的组分的表 达提高和活化所介导的(KnowMen等人，Endocrinology, 2003, 144, 1032-1044),还显示生长因子受体如EGFR通过振馆涉及分裂原激活 蛋白激醉(MAPK)信号途径的诱导的机理剌激细胞迁移(Price等人， Cell. Commun. Adhesion, 2002, 9, 87-102),影响痛症患者死亡率的 最重要的因子是在他们肿瘤中具有使入表型的癌细胞的发展，这些细 胞显示増强的细胞可动性和便入性，是体内疾病发展的反映.
由国际专利申请WO 01/94341可知，某些S位取代的会唑啉衍生 物具有Src激峰抑制活性，并且是在治疗包括扎腺痛在内的各种痛症 中有用的抗仗入活性刑.在其实施例l4中以化合物No."公开了化合 物4-( 6-氣-2，3-亚甲二氣基笨胺基)-7-〖2-(备甲基哌嚷-l-基)乙氣基，-S-四氣吡喃-4-基氣基喹唑啉.该化合物是有效的Src激味抑制剂，并且被表示为编号AZD0530.
发明内容
在本发明中，Src激酶的活性被増加，并且其是控制抗激素抗性细 胞增强的便入能力的主要途径.Src激味的押制导致细應優入减少，其 进一步表明在该抗性细胞中Src激錄信号的重要作用.意想不到的是， 发现从国际专利申请WO 01/94341和WO 02/163S2中提到的联合治疗 的一般公开内容中的一种具体选挣是非常有效的.特別是抗雄激素和 Src激睐抑制刑或其药学可接受的盐的组合产生休人的有 效结果.更具体的说，抗雄激素和Src激錄抑制刑AZD0S30的组合产 生比由抗雄激素或Src激醉押制刑AZD0S30羊独給药所达到的效果更 好.
虽然在頃际专利申请WO 01/94341和WO 02/163S2中表示其所记栽
的Src激醉押制剂可以与抗雄激素(例如三苯氣胺、枸樣酸托瑞米芬、
雷诺普酚、屈落昔芬(屈洛甘芬和iodoxyfene)联合仗用，但其中并没
有具体记栽抗雌激素与Six激錄抑制刑AZDOS30的联合使用，或任何该
组合产品的令人俅讶的有效結果.
按照本发明，提供了适合用于乳腺癌的协同治疗的组合，其包括
抗雌激素和Src激峰抑制剂AZD0530，或其药学可接受的盐.
应了解术语"组合"是指，组合中的組分是同时、賴序或分开给
药的.在本发明的一方面，"组合"是指批雄激素和Src抑制刑的同
时給葯.在本发明的另一方面，"组合"是指这些活性剂的顺序给筠.
在本发明的另一方面，"组合"是指这些活性剂的分开給药.在这些
活性射的给药是瓶序或分开时，第二种组分延迟給筠将不会使联合治
疗的协同作用丧失.因此，为了遊免疑惑，本发明提供包含抗雌激素
和Src激酵抑制剂AZDS030或其药学可接受的盐，在乳腺癌的协^)治
疗中同时、顺序或分开使用，或在乳腺癌发展的协同延援中同时、順 序或分开使用的组合.
抗雌激素是例如非磁类批雄激素，如三苯氣胜、枸棘酸托瑞米芬、 雷诺普盼、屈落昔芬和iodwcyfeiie,特别是三笨氧肤，或裕类雌激素受 体下调罔子，如象雏司群.优选的抗雄激素是三幕氣胺或象維司群. 更优选的抗雌歉素是三苯氧胺.抗雄激素三笨氣肤(AstraZeneca的商 品名为"Nolvadex")是1- ( p-2-二甲基A基6氣苯基)-1,2-二苯基丁 -l-蜂的反式异构体，其公开于美頃专利4,536,516中.三笨氧梭的另一
9个名字是(Z) -2-1对-(1,2-二笨基丁小蜂基)苯氣基j乙基二甲胺.
甾类抗雄激素象堆司群(AstraZeneca的商品名为"Faslodex"， 编号ICI 1S2, 780)是有效的純抗雌激素的新类中的笫一个，其完全 没有与传统抗雄激素如三苯氣胺有关的部分枯抗、类雄激素活性，该 化合物为雄激素受体下调西子.象堆司群已经在对经三笨氣胺治疗后 乳腺癌已发展的妇女的临床试脍中显示出了效果.象堆司群的化学名 称为7-a-l9- (4，4，5，5，5 五氣戊基亚橫酰基)壬基，雄-1,3，5 (10)-三蜂-3，np-二醇，欧洲专利申请0138S04的实施例35和权利要求4中记栽 了该化合物.
此外，合适的抗堆激素包括，例如非甾类芳香醉抑制刑如阿那曲 唑、来曲唑、法锯唑、vorazole和氨基笨6哌梵鹏或tt类芳香睐抑制刑 如依西美坦和1-甲基-1，4-雄三秌-3，17-二拥.优选的机雄激素芳香酶抑 制刑是阿那曲唑、来曲唑或依西美坦.更优逸的批雄激素芳香醉抑制 刑是阿那曲唑或来曲唑.例如，阿那曲唑(商品名为"Arimidex") 具有作为活性成分的化合物2，2，-|S- (lH-l，2,4-三唑-l-基甲基)-1，3-亚 苯基l二 (2-甲基-丙腈)，其公开于美国重新发行的专利36,617中.阿 那曲唑的另一个名字是2，2，-二甲基-2，2，-5- (lH-l，2，4-三唑-l-基甲基) -1，3-亚笨基1二 (丙精)，
AZD0530的令适的药学可接受的盐是，例如药学可接受的酸加成 盐，例如与无机或有机酸例如盐酸、氣溴酸、碟酸、三象6酸、柠樣 酸、马来酸或窗马酸，如单-或双-富马酸的酸加成盐，
如上文所述，本发明的包含抗潍激素和Src激味抑制刑AZD0530 的组合在肺痛的协同治疗中也是有用的，因为在肺胂病组织中发现的 蚱激素受体.
本发明的痛症治疗包括批肿瘤效果，其可以通过常规方法例如应 答率、疾病发展时间和/或存活芈来评定.本发明的抗肸瘤效果包括但 不陷于抑制肿病生长、延緩肿瘤生长、肿痛的消落、肿瘤的缩小、 增加停止治疗后肿病的再生时间和延緩疾病的发展.例如，可以预期 当给需要对涉及实体病的痛症进行治疗的湿血动物例如人类給药本发 明的组合时，这种治疗效果会产生可通过例如一种或多种以下麥数来 测定的效果抗肿瘤的程度、应答率、疾病发展的时间和存活率.
如上丈所迷，本发明的組合在扎腺痛的协同治疗和预防中特别有用.按照本发明，如果在常規刑量下通过例如应答租度、应答率、疾 病发展时间或生存时间測量的效果在治疗学上优于给药联合治疗的一 种或其它组分可以获得的效果，则联合治疗被定义为产生了协同效
果.例如，如果效果在治疗学上优于羊独使用抗雄激素或Src激峰抑制 刑AZD0S30所能获得的效果，則联合治疗的效果是协同的.另外，如 果在对单独的抗雄激素或Src激醉抑制刑AZD0S30不应答(或很少应 答〉的一组患者中获得有益效果，則联合治疗的效果是协同的.另外， 如果一种組分以常規刑量给药且另外的组分以减少的刑量給药，而通 过例如应答程度、应答率、疾病发展时间或生存时间測量的效果等同 于或好于以常规刑量給药联合治疗的任何一种组分所可以获得的效 果，則联合治疗的效果被定义为产生了协两效果.特別的，如果可以 减少批雄激素或Src激游押制刑AZD0S30的常规刑l:而不損害应答租 度、应答率、疾病发展时间或生存数振的一种或多种，特別是没有損 害应答的时间，但是却具有比使用每个组分的常規刑量时所出现的更 少和/或更小的讨厌的財作用，則认为存在协同作用.
本发明的治疗性组合可以以合适的药物组合物的形式给药.按照 本发明的这方面，提供了速合用于治疗或预防乳腺痛的药物组合物， 其包括如在上文中所定义的、与葯学可接受的赋形刑或我体联合的组 合.
本文中描述的组合物可以是迭合于口服给药的形式，例如片刑或 胶囊，适合于肠胃外注射(包括静脉、皮下、肌肉、血f或输液)的 形式，例如无瓣溶液、悬浮液或乳液，适合于局部給药的形式，例如 油奮或乳骨刑，适合于直肠给药的形式，例如栓祸，或者給药途径可 以是通过直接注射到肿痛，或通过区域進送或局部遂送.在本发明的 其他实施方案中，联合治疗的Src激H抑制刑可以经皮肤、静脉内或 皮下，或通过内诊镜或向气管、損伤、腹痰或肿病内速逸，通常本文 中所描述的组合物可以使用本领域熟知的賦形剂或栽体，以常規的方 式来制备.
用于片刑制剂的合适的药学可接受的赋形刑或栽体包括，例如積 性的赋形刑如乳糖、碳酸钠、辨酸钙或壤酸钙，造粒和崩解刑如玉米 淀粉或海条酸'，粘合刑如凝狡或淀粉；润滑剂如硬脂酸祺、硬脂酸或 滑石粉；防應刑如6基或丙碁40羟基苯甲酸翻，和抗氧化剂如抗坏血
ii酸，片刑制刑可以是无包衣的或包衣的，以或者改善他们的分解和随
后在ir脉道中活性组分的吸收，或者改養它们的穗定性和/或外现，两 种情况都使用常規的包被刑和本领域公知的方法.
用于口服的组合物可以为硬胶囊的形式，其中活性组分与恃性罔 体赋形刑例如壤酸钙、磷酸钙或高岭土混合，或者为软胶囊的形式， 其中活性組分与水或油例如花生油、液体石堵或歡視油混合.
本发明的组合物可以方便的以单位刑量的形式表示.
抗雌激素组分可以按照己知的伸床实践给药，例如在晚期孔腺痛
的治疗中，可以仗用O.S和IOO mg之间的三苯IL胺的每日口服刑重， 适宜使用S和30 mg之间的每日刑重.如果使用抗雄激素的芳香醉， 其可以按照已经的临床实践給药.例如可以使用0,00S和2Smg之间的 阿那曲唑的每日口服刑量，适宜使用0,S和5 rag之间的刑量.例如可 以使用S和200 mg之间的依西美坦的每日口脹刑量，迭宜使用10和 40mg之间的刑重.
如果使用象维司群，其通常以給予有效、无毒的刑重给筠，刑量 的大小根据給药患者的途径而自然不同.通常使用氧維司群的常規刑 量，更具体的，每日给药的剂量在例如从约10mg到Sg,优选从约IO mg到1 g，更优选从约10mg到300mg化合物(即约0,2 mg/kg到100 mg/kg体重，优逸从约0.2 mg/kg到20 mg/kg体重，更优选从约0.2 mg/kg 到6 mg/kg体重)的范围内，如果需要的话以分开的刑量給予，方便的， 象堆司群的给药刑量足以在病患中获得疾病应答，使用的氣维司群的 刑重包括可以以短期作用制刑给药1到15 mg每日，根振給药的形式 而定，或以长期作用制剂相当于每月200到300mg化合物.优选的给 药途径是通过肌肉注射.给药的剂量使得产生S到20 ng/ml的象維司 群的血清水平.优选的制剂是将适剂重例如2S0ing的象维司群溶解在 5ml包含10。/。w/v 6醇、HT/。w/v笨甲醉和lS。/。 w/v苯甲酸苄錄的蓖 麻油样品中.该制刑将被肌肉注射，并将提供大约28天的治疗水平的 象堆司群.
通常给共Src激醉抑制刑AZD0S30以获得在例如0,1 mg/kg到7S mg/kg体重范圃内的每日刑量，如果需要的话以分开的刑重给予.通常 当利用肠胃外途径给药时将给药较低的刑量.闳此，例如，对于静脉 给药，通常使用例如0.1 mg/kg到30 mg/kg体重范頃内的刑量.类似的，对于吸入给药，可使用例如0.05 mg/kg到2S mg/kg体重范两内的刑量. 然而优逸口服給药，特別时片刑形式.通常对于口厥给药，使用例如 0,1 mg/kg到20mg/kg体重范田内的刑量.特别的，使用0.2 mg/kg到 10 mg/kg体重范田的口服刑量；更特別的，使用O.S rog/kg到5 mg/kg 体重的口服刑量.典型的，羊位剂量形式将包舍约O.S mg到O.S g的 Src激蘇押制刑；更特別的，单位剂量形式将包含约2S mg到2S0mg 的Src激睐抑制刑.
在上文所述的刑量和时间表可以根振患者的具体疾病状况和总体 条件进行改变.例如，为减少毒性，减少上迷联合治疗組分的剂重可 能是必要或希望的.时间表可以由治疗任一具体病患的医生使用其专 业技术和知识来确定.
应理解按照本发明的药物组合物包括包含批雄激素和Src激醉抑 制剂AZD0530的組合以及药学可接受的赋形刑或我体，该组合物方便 的提供了用于在乳腺癌的协同治疗中同时給药的本发明的治疗性組合 产品.
按照本发明的该方面，提供了适合在乳腺癌的协两治疗中使用的 药物組合物，其包含抗雄激素、Src激珠抑制刑AZD0S30或其药学可
接受的盐，以及药学可接受的赋形刑或栽体.
本发明的药物组合物还包括分开的组合物，其包括，包舍抗雄激 素和药学可接受的赋形刑或栽体的第一组合物，以及包舍Src激錄抑
争J剂AZD0S30或其药学可接受的盐以及药学可接受的赋形刑或我体的
笫二组合物.该组合物方便的提供了用于在孔腺癌的协同治疗中顺序
或分开给药的本发明的治疗性组合物，但是该分开的组合物也可以同
时给药.
方便的，本发明的该药物组合物包含药盒，其中包括具有包含抗 雄激素的合适组合物的第 一容器，和具有包舍Src激錄抑制刑AZD0S30 的合适组合物的第二容器.按照本发明的这个方面，提供了在孔腺癌 的协同治疗中使用的药盒，其包括-
a) 抗雌激素与药学可接受的赋形刑或栽体，以第一单位刑重形式 (如片刑或胶囊)；
b) Src激醉抑制刑AZD0S30或其药学可接受的盐，与葯学可接受
的赋形刑或我体，以第二羊位刑量形式；和C)用于包含所迷第一和第二羊位刑量形式的容器. 按照本发明的另一方面，提供了如前文所定义的用于乳腺癌协同 治疗的组合.
按照本发明的该方面，还提供了用于扎腺痛的协两治疗的药物组 合物，其包含如前文所定义的、与药学可接受的赋形剂或栽体联合的 组合，
本发明的特別令人俅讶的益处在于能够用本发明的组合治疗的乳 腺痛不仅可以是还没有用抗雄激素治疗的患者的乳線痛，还可以是已 经用抗雌激素治疗过但对这种疗法没有应答或是在最初能用该疗法治 疗后已经产生抗性的乳珠癌.
按照本发明的另一方面，提供如上文所定义的组合在制备用于给 药湿血动物以协同治疗乳腺癌的药物中的应用.
按照本发明的另一方面，提供如上文所定义的组合在制备用于给 药湿血动物以协同治疗抗雄激素抗性乳脉癌的药物中的应用.
按照本发明的另一方面，提供协同治疗乳腺痛的方法，其包括給 药需要这种治疗的湿血动物有效重的如上文所定义的组合的组分.
按照本发明的另一方面，提供协两治疗批雄激素机性乳珠痛的方 法，其包括给药需要这种治疗的湿血动物有效重的如上文所定义的組 合的组分.
按照本发明的该方面，还提供协两治疗乳腺癌的方法，其包括在
给药有效重的Src激峰抑制刑AZD0530或其药学可接受的盐之前、同时 或之后給药需要这种治疗的湿血动物有效量的如上文所定义的抗雄激 素.
按照本发明的这个方面，还提供协同治疗乳腺癌的方法，其包括 同时、順序或分开給药需要这种治疗的豕血动物有效量的如上文所定 义的組合的组分.
按照本发明的这个方面，还提供协两治疗孔缘痛的方法，其包括 给药需要这种治疗的温血动物有效重的如上文所定义的雄激素，并同 时、顺序或分开給药有效量的Src激錄抑制刑AZD0S30或其药学可接
受的盐，
本发明还涉及用于延緩扎腺癌从激素应答到激素无应答状态的发 展，即抑制孔脉癌细胞从激素依賴、非侵入的状态到激素非依赖、更加侵入的状态的转化的包含抗雄激素和Src激醉抑制刑AZD0S30或其 药学可接受盐的组合物.闳此，该组合对疾病发展的时间和存活率有 有益的效果.
按照本发明的这个方面，还提供用于延緩乳缘痛从激素应答到激 素无应答状态的发展的包含抗雄激素和Src激鋒抑制刑AZD0S30或其 药学可接受盐的組合.
在另一方面，本发明涉及该组合在押制孔腺细胞转化为癌细胞中 的应用，即化合物的组合提供乳脉癌化学预防效果.
在停经前妇女的正常人孔腺上皮细胞中，细胞具有标准大小和标 准染色质水平的核.已知当癌变发展时正常孔腺上皮细胞的外观出现 一系列的变化.在正常的上皮組织中，雄激素刺激正常生长并谦导孕 酮受体的表达，其使得孕W介导孔腺上皮细胞生长.因此该上皮细應 的生长包括细胞的非雄激素依賴性基线转換.在停经前妇女中，通常 当核的大小开始变大并且染色质水平开始増加时，乳腺上皮组织疾病 的病症开始显现.这些是癌变前的改变，在这个阶段该状况被(似非 而可能是的)称为原位管癌(DCIS) 随着疾病发展和DCIS细胞被 转变为悉性细胞，细胞明显具有増大的细胞核或核仁以及明显增加的 染色质水平，
我们已经发现，本发明的组合意想不到的不仅对己转变的乳腺癌 细胞的生长，而且对乳腺中的正常细胞和非悉性、异常细胞的基本生 长都具有效果.本发明的組合闳此被用于减少、优逸抑制扎腺细胞向 悉性状态的转变.本发明的抗雄激素和Src激游抑制刑AZD0530的组 合能够抑制正常细胞向DC1S状态的转变.所迷组合物也能够抑制 DCIS细胞向悉性細胞的转变.
进一步期望该組合在防止遣传上傾向患有该疾病的妇女中乳腺癌 的发作中具有有i效果.
按照本发明的这个方面，提供用于减少，优选押制正常乳腺细胞 向DCIS状态转变的包舍批雌激素和Src激錄抑制剂AZD0S30或其药 学可接受盐的组合.
依瓶本发明的这个方面，还提供用于减少，优逸抑制正常乳腺细 胞或DCIS细胞向悉性状态转变的包含抗雌激素和Src激酶抑制刑 或其葯学可接受盐的组合.
15上文所定义的本发明的联合治疗可以作为羊独治疗施行，或者可 以附加包括手术或放射性治疗或给药化疗刑.手术可以包括部分或完全切除肿瘤的步錄，在施行本发明的联合 治疗之前、期间或之后进行.可选与本发明的联合治疗一起使用的化疗刑可以包括，例如下列治疗剂种类(i)在医药肿摻血中使用的抗增值/批肿病药和其组合(例如卡铂 和顺铂)；细胞抑制刑，例如生长因子功能的抑制刑如生长因子抗体、 生长因子受体抗体(例如抗erbB2抗体曲妥羊抗和Bl抗体西妥普单 抗)、酪氨激鋒抑制剂(例如表皮生长因子家族的抑制剂)、11类受 体路我酸激酶押制刑(例如胰岛素生长因子家族的押制刑如1GF1受体 抑制刑，其如例如Chakravarti等人，Cancer Research, 2002，62,200-207 所记我)、丝氛酸/苏氛酸激睐抑制刑、法呢基转移鋒抑制剂和血小板 衍生的生长西子抑制剂；(iii) 抗血管生成素刑，例如押制血管内皮生长因子效果的那些(例 如抗血管内皮细胞生长困子批体贝伐单批和VEGF受体路A酸激酶抑 制剂如4- (4-澳-2-氧笨胺基)-6-甲氣基-7- U-甲基哌关-4-基甲氣基) 全唑淋(ZD6474; WO 01/32651中实施例2) , 4- (4-象-2-甲基吲哚-5-基氧基)-6-甲氣基-7- (3-吡咯秌小基丙氣基)全唑啉(AZD2171; WO 00/47212中)，vatalanib (PTK787; WO 98/3S98S)和SU11248(WO 01/60814));(iv) 血管損伤刑如頃际专利中请WO外/02166, WO 00/40529， WO 00/41669, WO 01/92224, WO 02/04434和WO 02/08213中公开的化合物；(v) 生物学反应调节因子(例如干扰素)；和(vi) 二鱗酸盐如脊普ll酸、英卡H酸、利塞JH酸、唑来膦酸、氣 聘酸、奈立辑酸、帕米脚酸和阿仑麟酸.例如，施用所定义的抗雄激素、Src激味抑制刑AZD0S30或其药学 可接受的盐以及电离轴射可以产生抗癌效果，如抗肸痛效果，其优于 行电离插射所获得的效果.根据本发明的这个方面，还提供了协同治疗孔脉癌的方法，其包16括在治疗有效量的Src激酵抑制刑AZD0S30或其药学可接受的盐之 前、同时或之后和在有效量电离辐射之前、同时或之后給药需要这种 治疗的湿血动物如人类有效重的抗雄激素.可以在给药如上丈所定义的本发明的组合一用之前至一周之后的 时间内对所述湿血动物如人类实施电离插射.放射疗法可以按瓶巳知的临床放射疗法中的实战来实施.电离械射的刑重是在临床放射疗法中已知的.所使用的放射治疗包括例如使 用Y-射线、X-射线和/或来自放射性同位素的扭射的直接遂送.其他形 式的DNA損伤罔子也包括在本发明中，例如擻波和紫外线照射.例如 X-射线可以以1.8-2.0Gy的日刑量給予， 一用S天，保持5-6周.通常 分次刑量的总和在45-60 Gy范围内.单一较大的刑量，例如S-IO Gy 可以以放射疗法的一个历租的一部分来给予.可以在手术中給予单一 剂量，可以使用超分割放射疗法，由此小刑量的X-射线可以在一段时 期内有规則地給予，例如在若干天内酵小时給予0.1 Gy.放射性同位 素的刑童范围可在很大程度上改变，取决于同位素的半袭期，强度和 发出梯射的类型，并取决于细胞的吸收量.按照本发明的另一方面，提供如上文所定义的组合在制备用于給 葯正在进行电离械射治疗的湿血动物如人类以提供孔缘痛的协同治疗 的葯物中的应用.EGFR TKI和Src抽桐拥AZD0S30的组会本发明还涉及包含表皮生长两子受体膝氛酸激蜂抑制刑(下迷 "EGFR TKI")和Src家族非受体酷A酸激峰的特定押制刑的組合.本发明的该組合在治疗癌症的方法中是有用的.在大量人类肿病中广泛出现EGFR的高表达水平，该增加的表达可 能与患者的疾病发展和不良预后有关(Nkholson等人，Breast Cancer Research Treatment, 1994， 29, 117-125和Europeiin Journal of Cancer, 2001, 37， Supplements S9-1S) 例如已显示在MCF7人类孔腺痛细 胞中对抗雄激素三笨氣胜的机性部分是由EGFR传号途径的组分的表 达提离和活化所介导的(KnowWen等人，Endocrinology, 2003， 1"， 1032-1044).其还显示基本的和TGFa刺激的三苯氣梭机性MCF7扎腺 癌细胞的生长都可以被EGFR TKI ZD1M9押制 可用本发明该方面的组合治疗的痛症包括食f痛、骨號癌、肝癌、成神经细胞病、卡波西肉瘤、印巢癌、 乳腺癌、结肠直肠癌、前列腺癌、膀耽癌、X素痛、肺痛包括非小细 胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)l、胃痛、头颈部癌、脑痛、 肾癌、淋巴病和白血病.更具体的，本发明的该组合在乳腺癌、结肠 直脉癌、前列腺癌、NSCLC和头類部癌的治疗中或在延緩这些癌症发 展的方法中是有用的.依照本发明的这个方面，提供适合用于痛症(特別是乳腺痛、结 肠直炀癌、前列珠痛、非小细胞肺痛和头劲部癌)的协同治疗的组合， 其包括EGFR TKI或其药学可接受的盐，以及Src激錄抑制刑AZD0S30 或其药学可接受的盐.应当理解术语"组合"表明同时、顺序或分开餘药如上文所述的 組合的組分.巳知1类激睐如受体路氨缺激酶的EGF家族经常在一般的人类上 皮癌如前列腺痛中出现(Visakorpi等人,Hi"och柳，J., 1992, 24, 481).因此认为受体路A酸激睐的抑制刑具有作为前列腺癌生长的选 摔性抑制刑的价值.由欧洲专利申请No. 0566226和頃际专利申请WO 96/33980和WO 97/30034可知某些在4-位具有苯胺替代的喹唑啉衍生物具有EGFR路 A酸激味抑制刑活性，并且是包括前列腺痛在内的痛组织増殖的抑制 剂，J R Woodburn等人in Proc, Amer， Assoc, Cancer Research, 1997, 38, 633和Pharmacol. Ther" 1999, 82， 241-250公开了化合物N-(3-氣-4-氧笨基)-7-甲|1基-6 (3-，马啉代丙氣基)喹唑啉-4-胺(又称为 gefitinib和AstraZeneca的商品名"lressa" ) 该化合物是有效的EGFR TKI,在下文中用编号ZD1839表示.由国际专利申请WO 96/30347可进一步得知某些在备位具有笨肤 替代的结构相关的喹唑啉衍生物也具有EGFR膝A酸激醉抑制刑活 性.在WO 99/SS683中还公开了化合物N- (3-乙炔基苯基)-6，7-二 ( 2-甲氣基6氣基)喹唑啉-4-肤或其药学可接受的盐(链接到编号CP 3S8774和OSI-774)是EGFR TKI,该化合物还被称为erlo"nib,并在 下文中用编号OSl-774表示.由頃际专利申请WO 97/38卯3可进一步得知某些在备位具有笨肤 替代的其它结构相关的喹唑啉衍生物也具有EGFR路我酸激醉抑制刑活性.在J,Med, Ch柳"1999， 42,1803-1815和WO 00/31048中己经 公开了化合物6 丙烯酰氨基-1^ (3-氣4氣苯基)-7- (3-吗琳代丙氣基) 喹唑啉-4-肢(链接到编号PD 18380S和Cl 1033)是EGFR TKI.该化 合物在下文中用编号CU033表示).由頃际专利申请WO 97/02266可进一步得知某些其它结构相关的 杂环衍生物也具有EGFR醇氛酸激味押制刑活性.例如化合物4-(1R)小苯基乙基我基H" (4^fe基苯基)-7仏吡咯并2,3- 11嗜突(链 接到编号PKM66、 CGP 7S166和CGP S9326)是EGFR TKI.该化合 物在下丈中用编号PKI-166表示.由欧洲专利申倩No. 0787722和頃际专利申请WO 98/50038 、 WO 99/09016和WO 99/24037可进一步得知某些在4-位具有笨肤替代的其 它结构相关的喻唑啉衍生物也具有EGFR酵A酸激雄押制刑活性.例 如，化合物(3-溴苯換基)全唑啉-6-基l丁-2-炔耽梭(链接为编 号CL-3877M和EKB-785)是EGFR TKI.该化合物在下文中用编号 CL-387785表示.由Nature Medicine, 2000， 6, 1024-1028和美国专利No, 6,002,008 可进一步得知某些在4-位具有苯胜替代的其它结构相关的喹唑啉衍生 物也具有EGFR路A酸激錄押制刑活性.例如，化合物4- (3-氣4-象 苯胜基)-3-氛基-6- M-二甲基氛基丁-2 (E)-烯Bt氛基)-7-6氣基喹 啉(下丈中表示为编号EKB-S69)是EGFRTKI.在本发明的合适的組合中，EGFR TKI逸自例如ZD1839、 OSI-774、 C11033、 PKI-166、 CL08778S和EKB-569.优逸EGFRTKI组分 是ZD1839或OSI-774.更优选EGFR TKI组分是ZD1839.如上文所述，AZD0S30的合适的药学可接受的盐是，例如药学可 接受的酸加成盐，例如与无机或有机酸例如盐酸、氣溴酸、碟酸、三 氣G酸、柠樣酸、马来酸或富马酸的酸加成盐.类似的可以使用本发 明这个方面的EGFRTKI组分的药学可接受的盐.如上文所迷，本发明包含EGFR TKI和Src激H抑制剂AZD0S30 的组合在痛症的协同治疗中是有用的.本发明的癌症治疗包括批肿病 效果，其可以通过上文所迷的常規方法进行评測.如果使用类似的标准其效果在治疗学上优于上丈所迷的那些，刺 本发明的联合治疗被定义为产生了协岡效果.依照本发明的这个方面，优选的组合包舍EGFR TKI ZD1839或其 药学上可接受的盐，以及Src激錄押制刑AZD0530或其共学上可接受的 盐.依照本发明的这个方面，进一步优选的紐令包舍EGFR TKI OSI-774或其药学可接受的盐，以及Src激昧押制刑AZD0S30或其药学上可 接受的盐.本发明这个方面的治疗性組合可以以合适的药物组合物的形式給 药.按照本发明的这方面，提供了适合用于协同治疗癌症的葯物组合 物，其包含与葯学可接受的赋形刑或栽体联合的包含EGFR TKI或其 药学可接受盐以及Six激雖抑制刑AZD0S30或其药学可接受盐的组 合.本发明这个方面中所述的组合物可以为任何合迭的形式，如上文 所迷的形式.优选的适合用于癌症协两治疗的药物组合物包舍与药学可接受的 赋形剂或我体联合的包舍EGFR TKI ZD1839或其药学可接受盐以及 Src激蘇抑制剂AZDOS30或其药学可接受盐的组合.进一步优逸的适合用于痛症协同治疗的药物组合物包食与药学可 接受的赋形刑或我体联合的包含EGFR TKI OSI-774或其药学可接受 盐以及Src激醉抑制剂AZDOS30或其药学可接受盐的组合.对于EGFRTKI組分，用于口服给诉的片刑或胶囊剂通常包舍，例 如从约20rog到l g的活性成分.当EGFRTKI是ZD1839，包含SO mg、 100 rog、 250 rog或500 mg活性成分的常規片刑可以被用于口厥给药 方便的，ZD1839的每日口服刑重超过40mg，例如在50到750 mg的范田 内，优选在IOO到SOO mg的范围内，更优选在200到S00 mg的范两内. 当EGFRTKI是OSI-TM，包含2S rog, 100 mg或l邻mg活性成分的常规 片刑被用于口尿給药.方便的，OSI-7W的每日口服刑量在S0到300rog 的范闺内，优选在邻到200mg的范田内，更优选在100到lS0mg的范田 内.通常使用如上文所述类似的童和途径給药Src激味抑制刑 AZD0S30,上文所述的刑量和时间表可以根振患者的具体疾病状况和总体条 件进行汰变.例如，为减少每性，减少上述联合治疗组分的刑量可能时必要或可希望的.風药时间安排可以由治疗任一具体病患的医生使 用其专业技术和知识来确定.应理解按照本发明的葯物组合物包括包含EGFR TKI和Src激峰 抑制刑AZD0530的組合物以及药学可接受的赋形刑或栽体.该组合物方便的提供了用于在癌症协同治疗中同时给葯的本发明的治疗性姐合 产品.依照本发明的这个方面，提供适合用于癌症协同治疗的药物组合 物，其包含EGFRTKI或其药学可接受的益、Src激醉押制刑AZD0S30 或其药学可接受的盐以及药学可接受的賦型刑或栽体.依照本发明的药物组合物也包括分开的组合物，其包括，包舍 EGFR TKI或其药学可接受的盐以及药学可接受的赋形刑或栽体的第 一组合物，和包含Src激酶抑制刑AZD0S30或其药学可接受的盐以及 药学可接受的赋形刑或栽体的第二组合物.该组合物方便的提供了用 于在痛症的协同治疗中顺序或分开給药的本发明的治疗性组合物，但 是该分开的組合物也可以同时给药.方便的，本发明的该药物组合物包舍药盒，其中包括具有包含 EGFR TKI的合适组合物的第一容器，和具有包含Src激酶抑制刑 AZD0530的合适组合物的第二容器.按照本发明的这个方面，提供了 在癌症的协同治疗中使用的药盒，其包括a) EGFRTKI或其药学可接受的盐，与葯学可接受的赋形刑或我 体，在第一单位刑型中；b) Src激錄抑制剂AZD0S30或其葯学可接受的盐，与药学可接受 的赋形刑或我体，在第二单位刑型中；和c) 用于包舍所述笫一和笫二单位射型的容器. 按瓶本发明的另一方面，提供了如上文所定义的用于癌症协同治疗的組合.按照本发明的该方面，还提供了用于痛症协同治疗的药物組合 物，其包含如前文所定义的组合与药学可接受的赋形刑或栽体.本发明的特別令人体讶的益处在于能够用本发明的组合治疗的癌 症不仅可以是还没有用生长因子押制刑治疗的患者的癌症，还可以是 己经用生长罔子抑制刑，例如用EGFR TKI治疗过但对这种疗法没有 应答或是在最初能用该疗法治疗后已经产生抗性的癌症.21按照本发明的另一方面，提供如上文所定义的组合在制备用于給药湿血动物以协两治疗癌症的药物中的应用.
按照本发明的另一方面，提供如上文所定义的组合在制备用于给
药湿血动物以治疗EGFRTKI抗性癌症的药物中的应用.
按照本发明的另一方面，提供协同治疗痛症的方法，其包括给药
需要这种治疗的a血动物有效量的如上文所定义的組合的组分，
按照本发明的另一方面，提供治疗EGFRTKI批性痛症的方法，其包括给药需要这种治疗的温血动物有效量的如上文所定义的组合的组分.
按照本发明的这个方面，还提供协同治疗痛症(包括EGFR TKI抗性痛症)的方法，其包括在給药有效量的Src激睥抑制剂AZD0S30或
其药学可接受的盐之前、同时或之后給药需要这种治疗的溫血动物有效量的如上文所定义的EGFRTKI或其药学可接受的盐，
按照本发明的这个方面，还提供协同治疗癌瘅(包括EGFR TKI抗性癌症)的方法，其包括同时、順序或分开給药需要这种治疗的溫血动物有效量的如上文所定义的组合的組分.
按沐本发明的这个方面，还提供协^治疗痛症(包括EGFR TKI抗性痛症)的方法，其包括給药需要这种治疗的豕血动物有效量的如上文所定义的EGFRTKI或其药学可接受的盐，并同时、順序或分开给药有效量的Src激味抑制刑AZD0S30或其药学可接袭的盐.
上文所定义的本发明的联合治疗可以作为单独治疗施行，或者可以附加包括手术或放射性治疗或给药如上文所述的化疗刑
抗錄激壹、EGFR TK1和Src押制祸AZD0S30的组合
本发明还涉及三部分組合，其包含抗雄激素、EGFR酷A酸激錄抑制剂和Src家族非受体激錄的特定抑制刑.本发明的该组合在治疗癌
症，尤其是扎腺痛的方法中是有用的.
如上文所迷，在MCF7人类乳腺癌细胞中对抗雄激素三笨氧胜的抗性部分是由EGFR信号途径的组分的表达提高和活化所介导的.其还表明基本的和TGFa刺激的三笨氣胺抗性MCF7孔腺癌细胞的生长都可以被EGFR錄A酸激醉押制刑ZD1839押制.
按照本发明的这个方面，捉供了适合用于孔脉痛的协同治疗的三部分組合，其包含抗雄激素、EGFR TKI或其药学可接受的盐和Src激醉押制刑AZD0S30或其药学可接受的盐.
应当理解术语"組合"表明岡时、艰序或分开给药如上丈所述的组合的组分.
适当的抗雄激素具有所有上文所定义的含义.
适当的EGFR TKI具有所有上文所定义的含义.在本发明的适当的由三部分组合中，EGFRTKI选自，例如ZD1839、 OSI-774、 CI1033、PKM66、 CL087785和EKB-569,优逸本发明的三部分組合的EGFRTKI组分是或OSI-774.更优选本发明的三部分组合的EGFRTKI组分是ZD1839.
如上文所述，EGFRTKI或AZD0S30的药学可接受的盐是，例如药学可接受的酸加成盐，例如与无机或有机酸例如盐酸、氣溴酸、碟酸、三象乙酸、柠樣酸、马来酸或富马酸的酸加成盐.
如上文所述，本发明的三部分组合在孔腺痛的协两治疗中是有用的.本发明的痛症治疗包括抗肿病效果，其可以通过上文所述的常規方法进行评測.
如果使用类似的标准其效果在治疗学上优于上文所述的那些，则本发明的三部分联合治疗被定义为产生了协同效果.
依照本发明的这个方面，优选的三部分组合包含批雄激素、EGFRTKI ZD1839或其药学上可接受的盐，以及Src激錄抑制刑AZD0S30或其药学上可接受的盐.
依照本发明的这个方面，进一步优逸的三部分组合包含批雄激素、EGFR TKI OSK774或其药学可接受的盐，以及Src激珠抑制刑AZD0S30或其药学上可接受的盐.
本发明的三部分组合在肺癌的协同治疗中也是有用的，闳为在肺肿橹組织中发现了砵激素受体.
本发明这个方面的三部分組合可以以令速的药物组合物的形式給药，按照本发明的这方面，提供了适合用于协两治疗乳缘癌的药物组合物，其包含与药学可接受的赋形刑或我体联合的，抗雄激素、EGFRTKI或其药学可接受盐以及Src激味抑制剂AZD0S30或其药学可接受盐的组合.
本发明的这个方面中所述的组合物可以为任何迭当的形式，例如上丈所述的形式.优选的适合用于乳腺癌的协同治疗的药物組合物包括与药学可接
受的赋形剂或栽体联合的，抗雄激素、EGFRTKIZD1839或其葯学可接受盐以及Src激酶抑制刑AZD0S30或其葯学可接受盐的组合.
进一步优选的适合用于孔腺癌的协同治疗的药物组合物包括与葯学可接受的赋形剂或栽体联合的，抗雄激素、EGFROSI-774或其药学可接受盐以及Src激睐抑制剂AZD0S30或其药学可接受盐的组合.
抗雌激素组分、EGFR TKI组分和Src激聘押制刑AZD0S30中的每个通常都使用如上文所述的类似的董和途径給药.
上文所迷的剂量和时间表可以根据患者的具体疾病状况和总体条件进行改变.例如，为减少毒性，减少上迷联合治疗组分的刑童可能时必要或可希望的，厥爽时间安排可以由治疗任一具体病患的医生使用其专业技术和知识来确定.
应理解按照本发明的药物组合物包括包含批雄激素、EGFR TKI和Src激醉抑制刑AZD0S30'的组合以及药学可接受的赋形剂或栽体.该组合物方便的提供了用于在乳腺癌协同治疗中同时给药的本发明的治疗性組合产品.
依照本发明的这个方面，提供速合用于乳腺痛协同治疗的药物組合物，其包舍抗雄激素、EGFRTKI或其药学可接受的盐、Src激峰抑制刑AZDOS30或其药学可接受的盐以及药学可接受的赋型刑或栽体.
依照本发明的药物組合物也包括分开的组合物，其包括，包舍抗雌激素以及药学可接受的赋形剂或我体的第一組合物、包舍EGFRTKI
或其药学可接受的盐以及药学可接受的赋形刑或栽体的第二组合物、
和包含Src激蘇抑制剂AZD0S30或其药学可接受的盐以及药学可接受
的赋形刺或栽体的第三组合物.该组合物方便的提供了用于在痛症的
协同治疗中顺序或分开给药的本发明的治疗性组合物，但是该分开的
組合物也可以同时给药.
方便的，本发明的该药物组合物包舍葯盒，其中包括、具有包舍抗雄激素的适当组合物的笫一容器、具有包含EGFR TKI的适当组合物的第二容器、和具有包含Src激酶抑制刑AZD0S30的适当组合物的第三容器.按照本发明的这个方面，提供了在乳脒癌的协同治疗中使用的药盒，其包括-
a)抗雄激素与药学可接受的赋形刑或我体，以第一单位剂重形式(如片刑或脱囊)；
b) EGFRTKI或其药学可接受的盐，与药学可接受的賦形刑或栽 体，以第二单位刑量形式；
c) Src激錄抑制刑AZD0S30或其药学可接受的盐，与药学可接受 的赋形刑或我体，以第三羊位刑量形式；和
d) 用于包含所迷笫一、第二和第三羊位刑量形式的容器. 还需要理解，为了方便，三部分组合的任意两种组分可以共同以
笫一单位刑量形式而笫三组分以第二羊位刑量形式产生，
按照本发明的另一方面，提供了上文所定义的用于乳線痛的协同 治疗的三部分組合.
根振本发明的这个方面，还提供了用于乳腺痛的协同治疗的药物 组合物，其包含与药学可接受的赋形刑或栽体联合的上丈所定义的三 部分组合.
如上所迷，对乳腺癌的激素治疗的抗性走主要问趙.最初对抗激 素治疗应答的肺病在肿瘤的发展中产生了抗性.类似的，也会产生对 使用EGFR TKI的乳脉癌疗法的抗性.己经建立了反映孔腺癌细胞对 抗激素治疗，如三苯氣肤的抗性，和对EGFRTKI治疗的抗性获得的 体外细應橫型，现在已经显示在三苯氧梭抗性MCF7人类乳腺癌细胞 中对EGFR TKI ZD1839的批性部分是由Src激酵信号途径的组分的表 达提高和活化所介导的，其导致具有侵入性表形的癌细胞的发展.这 些细胞显示増强的细胞可动性和侵入性，其是体内疾病发展的反映.
本发明这个方面的特別令人体讶的益处在于能够用本发明的三部 分組合治疗的乳缘癌不仪可以是还没有进行机雄激素治疗或EGFR TKI治疗的患者的乳脉癌，还可以是已经用抗雄激素和EGFR TKI之 一或共同治疗过但对这种疗法没有应答或是在最初能用该疗法治疗后 已经产生抗性的乳腺癌，
按照本发明的另一方面，提供如上文所定义的三部分组合在制备 用于给药湿血动物以协同治疗乳脒癌的药物中的应用.
按照本发明的另一方面，提供如上文所定义的王部分组合在制备 用于给药湿血动物以治疗批雉激素批性乳腺癌的药物中的应用.
按照本发明的考一方面，提供如上丈所定义的三部分组合在制备 用于给药湿血动物以治疗EGFRTKI抗性扎缘癌的药物中的应用.
25按照本发明的另一方面，提供如上文所定义的三部分组合在制备
用于給药溫血动物以治疗对批雄激素和EGFR TKI都具有抗性的乳腺 癌的药物中的应用.
按照本发明的另一方面，提供协同治疗乳腺痛的方法，其包括给 药需要这种治疗的湿血动物有效重的如上文所定义的三部分组合的组 分.
按照本发明的另一方面，提供治疗抗雄激素批性乳腺癌的方法， 其包括给药需要这种治疗的溪血动物有效量的如上文所定义的三部分 组合的组分.
按照本发明的另一方面，提供治疗EGFRTKI抗性乳腺痛的方法， 其包括給药需要这种治疗的湿血动物有效量的如上文所定义的三部分 组合的组分，
按照本发明的另一方面，提供治疗对批雄激素和EGFRTKI治疗都 具有抗性的乳脉癌的方法，其包括給药需要这种治疗的湿血动物有效 量的如上文所定义的三部分组合的组分.
按照本发明的这个方面，还提供协同治疗乳脒癌的方法，其包括 在给药有效量的如上文所定义的EGFR TKI或其药学可接受的盐之 前、同时或之后，以及在给药有效量的Src激醉抑制刑AZD0530或其药 学可接受的盐之前、同时或之后給药需要逸种治疗的湿血动物有效重 的抗雄激素.
按照本发明的这个方面，还提供协同治疗孔腺癌的方法，其包括 同时、順序或分开给药需要这种治疗的湿血动物有效量的如上文所定 义的三部分组合的組分.
按照本发明的这个方面，还提供协同治疗扎腺癌的方法，其包括
給药需要这种治疗的a血动物有效量的如上文所定义的雄激素，同
时、順序或分开給药有效量的如上文所定义的EGFR TKI或其药学可 接受的盐，并同时、順序或分开給药有效重的Src激味抑制刑AZD0530
或其葯学可接受的盐.
本发明还涉及用于延援乳腺痛从激素应答到激素无应答状态的发 展，即抑制乳腺癌细胞从激素依賴、非侵入的状态到激素非依賴、更 加侵入的状态的转化的三部分组合，其包含抗雄激素、EGFR TKI或 其药学可接受的盐，以及Src激酶抑制刑AZDOS30或其药学可接受的盐，因此，该三部分组合对疾病发展的时间和存活率有有益的效果.
按照本发明的这个方面，还提供用于延援乳腺癌从激素应答到激
素无应答状态的发展的三部分组合，其包舍抗雌激素、EGFR或其葯 学可接受的盐，以及Src激錄抑制剂AZD0530或其药学可接受的盐.
在另一方面，本发明涉及该三部分组合在抑制孔脉细胞转化为癌 细胞中的应用，即化合物的组合提供乳珠癌化学预防效果.
我们已经发现，本发明的三部分组合意想不到的不仅对己转变的 乳腺痛细胞的生长，而且对扎珠中的正常细胞和非悉性、异常细胞的 基本生长都具有效果.本发明的三部分组合园此被用于减少、优选抑 制乳腺细胞向悉性状态的转变.本发明的抗雌激素、EGFRTKI和Src 激醉抑制刑AZD0S30的三部分组合能够押制正常细應向DC1S状态的 转变.所迷三部分组合物也能够抑制DC1S细胞向悉性状态的转变.
进一步期望该三部分组合在防止遣传上傾向患有该疾病的妇女中 乳腺痛的发作中具有有益效果.
按照本发明的这个方面，提供用于减少，优选抑制正常乳腺细胞 向DC1S状态转变的包含批雄激素、EGFR TK1或其药学可接受盐和 Src激峰抑制刑AZD0S30或其药学可接受盐的三部分组合.
按照本发明的这个方面，还提供用于减少，优逸抑制正常乳腺细 胞或DCIS细胞向恶性状态转变的包含抗雄激素、EGFRTKI或其药学
可接受盐和Src激醉抑制剂AZD0S30或其药学可接受盐的组合.
上文所定义的本发明的三部分联合治疗可以作为单独治疗施行，
或者可以附加包括手术或放射性治疗或给葯上丈所定义的化疗刑.具体实施方式
生物学试脍方法
下列试脍方法可用于显示当与机雄激素和/或EGFRTKI联合使用
时Src激跨柙制浙AZD0530的活性. (a)细胞生长研究
各种试搶方法由Knowlden等人在Endocrinology, 2003, 144, 1032-1044中作出描述，其包括一种或多种的-
(i) 三苯氣胺应答的"野生型"MCF7人类孔腺痛细胞；
(ii) 该MCF7乳脒癌细胞的对激素不敏感的变体，其被表示为 "Ta加-R"(三苯氣胺抗性)；和
(Hi)该"TAM-R"细胞的变体，其对用EGFR TKI ZD1839的
27治疗也不敏感，其被表示为"Tam/TKI-R",
三笨氣胺应答的"野生型"MCFT乳線细胞通常培养在补入S。/。胎 牛血清加青審素UOHJ/ml)、链審素U0蹄/ml)和两性審素B (2.S 绍/ml)的无盼红RPMI培养基中.培养物于371C保持在包舍S。/。C02 的湖湿空气中.当在下迷试脍中用于试脍分析时，细胞保持在补入5% 活性炭吸附的、去类闳醉胎牛血清、上迷抗生素和谷耽胜(200加M) 的无酚红RPMI培养基中.
"Tam-R" MCF7乳腺癌细胞保持在补入5%活性炭吸附的、去类 闺醉胎牛血清、上述抗生素、谷酰胺(200mM)和4^E基三苯氧胺(6 醉中1(V7M)的无盼红RPMI培养基中，
通过连续将"Tam-R" MCF7乳腺癌细胞暴塞在ZD1W9 (10>6M) 中U个月获得"Tam/TKI-R" MCF7孔腺癌细胞.
使用Nunc (RoskHde, Denmark)组织培养蹇料器皿.
单细胞层于无血清生长因子DCCM培养基中在存在遲增浓度的上 迷组合物的组分或组合物本身的情况下生长7天.通过单细應A的胰 蛋白珠消化法评估细胞群体生长，使用Beckman Coulter计数器(可从 Beckman Coulter Limited, Luton, GB购得)測量细胞的數量，所有
的细胞生长试检都一式三份.
(b) 细胞运动性的时延分析
细胞培养于6孔组织培养皿中，使其达到对数生长阶段.平皿被 转移到热的倒置显徵镜的镜台上，细胞培养物用矿物油復羞以在细胞 逸动性分析时最小化培养基中的pH改变 使用与时延录影系统连接的 樣影机记乘细胞迳动性6个小时.为定重细胞运动性，在乘像重放的 过程中以IO分钟为间隔获取田像，使用Optimas困像分析软件(Media Cybernetics UK, Finchampstead, BerksWre, GB)追踪至少10个细 應个体的移动，以细胞位置(x轴位置对y轴位置)或迁移的总距离 (^m)作为时间函数烩制细胞的移动.为确定细胞逸动性的定向持续， 餘制细胞的轨迹使得所有的轨迹始于原点.
(c) 损伤禽合试脍
收集指数生长细胞，平亚培养于24孔培养瓜上.产生单层培养物 后，通过用吸液管尖端手动刮擦損伤细胞，并用磷酸盐緩冲血清(PBS) 洗涂.加入包含速当生长闳子、抑制剂化合物(或抑制刑化合物的组合)的新鲜培养基.36小时后，细胞用4%甲》 定，用结晶紫(PBS 中0,5%)染色，以20倍的放大比例对損伤拍照. 一些孔在损伤后立即 (t-O小时时间点)被闳定和染色以用于计算損伤禽合百分率. (d)纤维粘连蛋白细胞移动试狯
TransweU小窒的聚壤酸豳滤獲(6.S mro直径，8,0 孔大小，来 自Costarlnc" Cambridge, MA， USA)被铺在具有50將/m，纤维粘 连蛋白的膜下倒，无血清RPMI中371C下2小时.用PBS漂洗聚破酸 錄膜.收集细胞，以无血清RPMI中每毫升Sxl0S细胞的浓度悉浮. 试样量的细胞(100 5 x 104细胞)被接种到加入有SOO pl试搶培 养基的每个孔中.在对照试狳中，让细胞向膜下桐移动20小时.在測 试试验中，加入适当浓度的押制剂化合物(或抑制刑化合物的组合)， 让细胞向膜下倒移动20小时.用棉签除去胜上倒的未移动细胞，附着 在煤下倒的移动细胞用4%甲瞎 定，在宜湿下用0,5%结*紫染色10 分钟.使用倒里显徵镜以20倍的放大率计算移动细胞的数量.
(e >细胞侵入性试脍
先前由Hiscox等人(Breast Cancer Research Treatment, 2000, 59， 245-2S4)描迷的改进的方法倍用于研究乳缘痛细胞的伥入本性.
将TransweU聚破酸醋滤膜插入物(6.Smm直径，8pm孔大小， 来自Costar Inc.)置于24孔组轵培养平孤中,用Matrige， (0.4 pg/ml) 包被在室湿下于无錄培养革中过夜.37X3下用无血清RPMI再水合1 小时后，以104细胞/孔将细胞接种到具有或不具有速当浓度的押制 刑化合物(或抑制刑化合物的组合)的腹插入物上，加入600 ^培养 基以浸入腹插入物.孔在37TC下培养72小时，之后用棉答从孔内部除 去未便入细胞和Matrigel.用4%甲睡闳定己经便入到爽下側的细胞， 使用解刮刀刀刃将多孔獲从侵入宜移出，安放在包舍核染色刑DAPI 的显稞镜承物玻璃片上(使用来自Molecular Probes, Eug棚e, Oregon, USA的Vectasbield ).用爽光显樣铣通过以2倍的放大率现察每块媒 上5个分开的区域并计算每个区域中的细胞数重来量度细胞侵入.根 据每区域的平均细胞或相对于对照的便入百分率标绘数振. (f)细胞粘着试验
用基质胶(SO叫/孔)包被96孔平亚的孔，在无錄组织培养革中 风干过夜.收集对数期生长的细胞，在包舍速当浓度柙制刑化合物(或
29抑制刑化合物的組合)的培养基中调节浓度为每毫升2 x10s个细胞. 试样重的细胞(2><104细胞)被接种到每个孔中，平皿在371C下培养 30分钟.在每孔加入150 pl的MTT溶液(无血清培养基中O.S mg/ml) 前，用PBS洗孔两次以除去未结合的细胞.371C下进一步培养平亚4 个小时以使得四唑晶体在细胞中发展.从孔中除去MTT溶液，4TC下 用10% TX-100溶液提取染料过夜.用装备有540 nro滤光器的Titerteck Multiskan EL1SA平亚读数器(Flow Laboratories, UK)測量吸光率. 响应治疗的细胞粘着被计算为在对照(未处理)孔中粘着的细胞的百 分比.
(g)体外c-Src转染NIH 3T3 (c-豕rc 3T3)成纤堆细應增殖试验 该试检測定測试化合物(或測试化合物的组合)抑制用人c-Src的 活化突变体(Y530F)穗定转染的美国全国卫生研究所(NIH)小鼠3T3 成纤维细胞増殖的能力.
使用类似于Shalloway等人，Cell, 1987, 49, 65^73所迷的方法， 用人c-Src的活化突变体(Y530F)转染N1H 3T3细應.获得的c-Src 3T3 细胞一舦以每孔1,5>004个接种到96孔组织培养物处理的清洁的试脍 平亚(Costar)中，其每个包含含有Dulbecco，s改良的Eagk，s培养基 (DMEM; Sigma )加上0.9%氣化钠水溶液中0.5%胎牛血清(FCS)、 2 mM谷酰胺、100羊位/ml青審素和0.1 mg/ml链審素的试验培养基 平皿在漸湿 (7.5%0>2:95%空气)的培养器中37TC下培养过夜.
经測试化合物溶解到DMSO中以形成10 mM贮存溶液，用上迷 DMEM培养基稀释试样量的贮存溶液并加入到适当的孔中.进行连续 稀释以产生测试浓度的范两.每个平i都包括没有加入測试化合物的 对照孔.平亚在湘湿(7.5%0)2:95%空气)的培养器中""下培养过夜.
在包含0.5% FCS的DMEM培养基中以1:100的系数稀释BrdU 标记试剂(Boeh"nger Mannheim Catalogue No, 647 229),加入试样 量(20 MU到每个孔中以产生10pM的终浓度).平皿37C下培养2 小时.轻轻倒出培养基.加入变性溶液(FixDenatsolution, Boehringer Mannheim Catalogue No. 647 229; 50^1)到每个孔中，平亚在室湿下 直于平皿接晃器上45分钟.轻轻倒出上清液，用PBS洗孔(每孔200 Ml).在包含1% BSA和0.025%千脱脚扎(Marvd(注册商标)，PremierBeverages, Stafford, GB)的PBS中以1:100的系数稀释抗-BrdU-过 氣化物味溶浪(Boebringer Mannheim Catalogue No. 647 229)，加入
试样量uoo的获得的溶液到每个孔中.平瓜在室a下置于平皿接
晃器上90分钟.用PBS (xS)洗孔以保证除去未錄合的抗体共耗物. 吸干平皿，向每孔中加入四甲基对二氛基联苯(Boehringer Mannheim Catalogue No. 647 229; 100 .平皿在平皿採晃器上轻轻的接动， 在10到20分钟的时间中逐步显示出颜色.在6卯nm測量孔的吸光率. 測定在每个測试化合物(或測试化合物的组合)在浓度范田中对细胞 増殖的抑制程度，导出抗增殖的ICw值. (h)体外徵滴迁移试狯
该试狳測定測试化合物(或測试化合物的组合)抑制粘着的喷乳 动物细乾系，如人肿痛细胞系AS49迁移的能力.
水浴加热包含10°/。 FCS、 1%卜谷酰胜和0.3%沐脂棘(Difco Ca德gue No, 0142-01)的RPMI培养基(Sigma)到37" 离压灭瓣 贮存的2%沐脂水溶液，42TC保存.即将使用前将试样重(l.S ml)琼 脂溶液加入到RPMI培养基(10 ml)中.以2 x 107细胞/m，的浓度将 AS49细胞(编号No. ATCC CCL185)悬浮于培养基中，保持在37X3 的湿度下.
用吸移管将小滴(2nU细胞/球脂糖混合物转移到许多96孔，平 底的未用组织培养物处理的徵重平皿(BU)by Sterilin Catalogue No. 642000)的每个孔的中心.平皿暂时置于水上以加速含沐脂糖小滴的 凝胶化.冷至4TC的试样量(90nl)的培养基被转移到每个孔中，注意 不要扰乱徵滴.使用上迷的RPMI培养基从DMSO中10 mM贮存溶 液稀释测试化合物.转移试样量(10 nl)稀释的測试化合物到孔中， 再次注意不要扰乱橄滴.平皿在湘湿(7.5%0)2:95%空气)的培养審 中37C下培养幼小时.
直现评估迁移，測量回到琼脚小滴边缘的迁移距离.通过标绘与 測试化合物浓度成对照的平均迁移測量值获得迁移抑制ic". (O体内异种移植物生长试脍
这个试脍測定本发明的组合产品抑制生长为无胸腺棵鼠中肿痛的 人和/或小氣肿病生长的能力 适合用于注射的癌细胞包括人MCF7扎 脒癌细胞(可获自American Type Culture Collection, 10801 UniversityBoulevard, Manassas, VA 20110>2209; Cat, No. HTB-22、 c-Src特染 小鼠3T3成叶维癌细胞(通过ShaUoway等人，Cell, 1987， 49， 65-73所述的类似的方法用人c-Src的活化突变体(Y530F)梓染)、人 LoVo结脉直肠癌细胞(可获自European CoHection of Cell Cultures, ECACC, CAMR， Salisbury, Wi，tsWre, SP4 0JG， UK; Cat.No.CCL 229 )、人CaLu-6肺癌细胞(ATCC Cat, No, HTB-S6 )和人A549 NSCLC 癌症细胞(ATCCCat,No,CCL18S).
在0.1 ml的基质欣(Beckton Dickinson Catalogue No, 40234)和 Eagle's MiiUmuin Essential Medium ( EMEM; Gibco Catalogue No 21090-022)的1:1混合物中的总共大约1 x 106个人类痛细胞被皮下注 射到每个測试小鼠的側腹，让所产生的肿痛生长约IO天.挑选动物以
获得平均胂摻体积大致两等的对照和治疗组，将每个组合产品制备为 1%聚山梨醇據中的球磨悉浮液-80栽体(以适当的拥试剂量每10 g体 重O.l roU ，每日口服一次从第10天开始进行约28天的时间.每周使 用卡尺測量两次肿病大小，计算理论体积.评估对肿瘤生长的效果.
通常，在一个或多个上述试脍中当单独使用时Src激錄抑制刑 AZD0530所具有的活性可以在下列浓度或刑重显示-
试搶(a ):-在例如0,1-5 nM范 中的ICM;
试松(b):-在例如(U-l 范闺中的ICM;
试验(d):-对大约0.lMM的"Taro-R"细胞ICS0;
试胗(e):-对大约0，1 的"Tam-R"细胞IC幼；
试搶(f):-在例如0.1-1 nM范田中的ICso;
试验(g):-在例如0.1-5 pM范田中有活性；
试验(h):-在例如O,l-SpM范田中有活性；
试脍(i) : - activity in the range, for example, 1-200 mg/kg/day,
通常，当Src激錄押制刑AZD0S30在一个或多个上迷试检中与抗 雄激素和/或EGFR TKI联合使用时，可以塞示超过单独AZD0530所 示的増加的活性.可选的，在一个或多个上述试搶中当与抗雄激素和/ 或EGFR TKI联合使用时Src激醉抑制刑AZD0S30所具有的活性可以
在更低的浓度或刑重显示.
例如，当AZD0530 ((U pM)和ZD1839 ( 1 pM)的組合被用于
"Tam-R"细胞，可以显示下列活性-试狳(d) : 大约IC"效果； 试验(e):-大约IC^效果；
并且当AZD0S30( 1 )和ZD1839( 1 )的組合被用于"Tam-R 细胞，可以显示下列活性-
试验(d):-大约ICw效果； 试验(e) : 大约IC7o效果.
权利要求
1.适合用于协同治疗乳腺癌的组合，其包括抗雌激素和Src激酶抑制剂AZD0530或其药学可接受的盐。
2. 适合协同治疗乳腺癌的药物組合物，其包含权利要求1所述的 组合与药学可接受的赋形刑或栽体.
3. 权利要求2所述的药物组合物，其包含抗雌激素、Src激醉抑制 刑AZD0S30或其药学可接受的盐，和药学可接受的赋形刑或栽体.
4. 权利要求2所述的药物组合物，其包括，包含抗雌激素和葯学 可接受的赋形刑或栽体的第一组合物，和包含Src激醉抑制刑AZD0530 或其药学可接受的盐和药学可接受的赋形刑或栽体的笫二組合物.
5. 权利要求1所述組合在制备用于给药温血动物以协同治疗乳腺 癌的药物中的应用，
6. 权利要求1所述组合在制备用于给药温血动物以治疗抗雌激素 抗性乳腺癌的药物中的应用.
7. 用于延緩乳腺癌从激素应答向激素无应答状态发展的权利要求 1所述的包含抗雌激素和Src激醉抑制刑AZD0530或其药学可接受盐 的組合.
8. 用于减少正常乳腺细胞向DCIS状态转变的权利要求1所述的 包含抗雌激素和Src激醉抑制刑AZD0S30或其药学可接受盐的组合.
9. 用于减少正常乳腺细胞或DCIS细胞向恶性状态转变的权利要 求1所迷的包含抗雄激素和Src激醉抑制刑AZD0530或其药学可接受 盐的组合.
10. 适合用于协同治疗乳腺癌的三部分组合，其包括抗蟀激素、 EGFR TKI或其药学可接受的盐，和Six激蘇抑制刑AZD0530或其药学 可接受的盐.
11. 适合用于协同治疗乳腺癌的药物組合物，其包含权利要求10 所述的三部分组合与药学可接受的赋形刑或栽体.
12. 适合用于协同治疗乳腺癌的药物組合物，其包含权利要求10 所述的抗雌激素、EGFR TKI或其药学可接受的盐和Src激醉抑制刑 AZD0530或其药学可接受的盐的组合与药学可接受的赋形刑或栽体.
13. 如权利要求11所述的药物組合物，其包括，包舍抗雄激素和 药学可接受的赋形刑或栽体的笫一組合物、包含EGFR TKI或其葯学可接受的盐和药学可接受的赋形刑或栽体的笫二组合物，和包含Six 激酵抑制刑AZD0530或其药学可接受的盐和药学可接受的赋形刑或栽 体的笫三组合物.
14. 权利要求10所述的三部分组合在制备用于给药温血动物以协 同治疗乳腺癌的药物中的应用.
15. 权利要求10所述的三部分组合在制备用于给药温血动物以治 疗抗雌激素抗性乳腺癌的药物中的应用.
16. 权利要求10所述的三部分组合在制备用于给药温血动物以治 疗EGFRTKI抗性乳腺癌的药物中的应用.
17. 权利要求10所述的三部分组合在制备用于给药温血动物以治 疗对抗雌激素和EGFR TKI治疗都具有抗性的乳腺癌的药物中的应 用.
18. 用于延緩乳腺癌从激素应答向激素无应答状态发展的权利要 求10所述的三部分组合，其包舍抗雌激素、EGFR TKI或其药学可接 受的盐和Src激睐抑制刑AZD0530或其药学可接受的盐.
19. 用于减少正常乳腺细胞向DCIS状态转变的权利要求10所述 的三部分组合，其包含抗雌激素、EGFR TKI或其药学可接受的盐和 Src激醉抑制刑AZD0530或其药学可接受的盐.
20. 用于减少正常乳腺细胞或DCIS细胞向恶性状态转变的权利要 求10所述的三部分组合，其包含抗雌激素、EGFR TKI或其药学可接 受的盐和Src激酶抑制刑AZD0530或其药学可接受的盐.
全文摘要
本发明涉及包含抗雌激素和Src激酶抑制剂AZD0530的用于协同治疗乳腺癌的组合，包含EGFR TKI和Src激酶抑制剂AZD0530的用于协同治疗癌症的组合，以及包含抗雌激素、EGFR TKI和Src激酶抑制剂AZD0530的用于协同治疗乳腺癌的三部分组合。
文档编号A61K45/00GK101664554SQ20091017316
公开日2010年3月10日 申请日期2005年5月26日 优先权日2004年5月29日
发明者T·P·格林 申请人:阿斯利康(瑞典)有限公司
技术领域：
在第一方面，本发明涉及包含抗雄激素和非受体酪氨酸激醉的Src家族的特定抑制刑的组合.本发明的组合在治疗癌症，尤其是乳腺癌的方法中或在延緩该癌症发展的方法中是有用的.本发明还涉及包含该组合的药物组合物及其在制备用于治疗癌症的药物或制备用于延緩癌症发展的药物中的应用.
在另一方面，本发明涉及包含表皮生长因子受体(EGFR)酪氨酸激酶(TK)抑制刑和非受体酪氨酸激醉的Src家族的特定抑制刑的组合.本发明的该组合在治疗癌症，尤其是乳腺癌、结肠直炀癌、前列腺癌、非小细胞肺癌和头颈部癌的方法中或在延緩这些癌症发展的方法中是有用的.本发明的该方面还涉及包含该组合的药物组合物及其在制备用于治疗癌症，尤其是肺癌、结肠直肠癌、乳腺癌、前列腺癌和头颈部癌的药物或制备用于延緩这些癌症发展的药物中的应用.
在另一方面，本发明涉及包含抗雌激素、EGFRTK抑制刑和非受体酪氨酸激酶的Src家族的特定抑制刑的组合.本发明的该组合在治疗癌症，尤其是乳腺癌的方法中或在延緩该癌症发展的方法中是有用的，本发明的该方面还涉及包含该组合的药物组合物及其在制备用于治疗癌症的药物或制备用于延緩癌症发展的药物中的应用.
背景技术：
现在治疗癌症的逸择包括外科切除、外粒子束放射治疗和/或全身化疗.这些在癌症的一些形式中获得了某种程度的成功，但是在其他的形式中则很少成功.明显需要治疗癌症的新的疗法.
目前许多用于细胞增殖疾病，如癌症的治疗方法都使用押制DNA合成的化合物.这些化合物通常具有细胞毒性，但是它们对于快速分裂的细胞，如肺难细胞的毒性作用可能是有益的.其它不通过抑制DNA合成机理而发挥作用的抗肿瘤刑方法具有增强的作用选择性.
近年来发现，通过将其DNA的一部分转化为致癌基因，即在激活时导致恶性肿痏细胞形成的基因可以导致细胞癌化(Bradshaw,Mutagenesis, 1986， 1, 91).几种这样的致癌基罔会引起作为生长因子受体的肽的产生.生长因子受体复合物的激活随后导致细胞增殖增加.已知几种致痛基闳编码酷A酸激酶，某些生长困子受体也是路A
酸激峰(Yarden等人，Ann. Rev, Biochem,, 1988， S7, 443; Larsen等人,Ann. R印orts in Med. Chem" 1989, Chpt. 13) 首批被识別的路氛酸激眯来自这些病毒性致痛基阁，例如pp60vSrc *氨酸激醉(又被称为v-Src)和在正常细胞中的相应路我酸激味，例如pp60c-Src酵我酸激酶(又被称为c-Src).
受体路氨酸激醉在引发细胞复制的生化信号传速中是重要的，它们是跨越细胞胰的较大的峰并且具有用于与生长西子如表皮生长困子(EGF)结合的细胞外结合区和作为激跨鱗酸化蛋白质中的路A酸并阁此影响细胞增殖的细胞内部分.根据与不同受体路氛酸激睥结合的生长因子家族，己知多种类型的受体路我酸激酵(WiHw， AdvancesinCancer Research, 1993， 60, 43-73).该分类包括I类受体錄氛酸激錄，其包括受体酵A酸激II的EGF家族，如EGF, TGFa, Neu和erbB受体，II类受体膝氨酸激味，其包括受体路氨酸激錄的胰岛素家族，如胰島素和1GF1受体以及胰岛素相关受体(IRR)，和III类受体錄A酸歉跨，其包舍受体酷泉酸激醉的血小板衍生生长闳子(PDGF)家族，如PDGFou PDGFp和集落剌激S子1 (CSF1)受体.
还已知某些酷A酸激味属于非受体錄A酸激錄类，其位于细胞内并且涉及生化信号的传速，例如影响肿袖细胞逸动、传播和扩散以及随后转移性肿病生长的那些(UHrich等人，Cell, 1990, 61, 203-212,Bolen等人，FASEBJ" 1992, 6, 3403-3409， BHckeH等人,CriticalReviews in Oncogenesis, 1992, 3, 401-406, Boblen等人，Oncogene,1993, 8， 2025-2031, Courtneidge等人，S棚in, Cancer Bio，" 1994，5, 239-246, Lauffenburger等人，Cell, 1996, 84, 3S9-369, Hanks等人，BioEssays, 1996， 19, 137-145, Parsons等人,Current Opinionin Cell Biology, 1997, 9， 187-192， Brown等人,Biochimica et BiophysicaActa, 1996, 1287, 121-149和Schlaepfer等人,Progress in Biophysicsand Molecular Biology, 1999， 71, 435-478).己知多种类型的非受体錄A酸，其包括Src家族，如Src、 Lyn、 Fyn和Yes膝A酸激ll, AW家族，如Abl和Arg,以及Jak家族，如Jakl和Tyk2,
己知非受体路A酸激味的Six家族在正常细胞中是高度调节的，并且在缺乏细胞外刺激时保持无活性形态.然而，在常见的癌症，如胃肠痛症，例如結肠、直肠和胃癌(Cartwrigbt等人，Proc,Na , Acad.Sci, USA, 1990， 87, 和Mao等人，Oncogene, 1997, IS,
3083-3090)和乳線痛(Muthuswumy等人，Oncogene, 1995， 11，1801-1810)中， 一些Six家族成贝，例如c-Src酷氛酸激錄经常被显著激活(当与正常细胞水平相比时)，还可以在其它常见的人类癌症，如非小细胞肺痛(NSCLCs)中发现非受体路氛酸激降的Src家族，其中包括包括肺的腺痛和扁平细胞癌(Mazurenko等人，EuropeanJourmil of Cancer, 1992， 28， 372-7)、榜耽痛(Fanning等人,CancerResearch, 1992, S2， 1457-62)、食管癌(Jankowski等人，Gut, 1992，33， 1033-8)、前列腺痛、印巢癌(Wiener等人，CHn. Cancer Research,1999, 5， 2164-70)和狭緣痛(Lutz等人,Bioch咖.am) Biophys, Res.Com鹏.，1998， 243 , 503-8).随着在更多人类肿瘤组织中对非受体酷氛酸激錄的Src家族的检測，人们期望能够证实其广泛的普遍性.
进一步已知，c-Src非受体酷氨酸激雖的主要作用是通过与大重胞质蛋白质包括例如粘着斑激峰和桩蛋白相互作用来调控粘着斑复合物的集錄.另外c-Src与限制促进细胞运动性的肌动發由细胞骨架的信号路径相结合.同样，c-Src、 c-Yes和c-Fyn非受体錄我酸激醉在整联蛋
白介导的信号中和在分裂钙粘着蛋白依賴性细胞-细胞连接中起重要的作用(Owens等人，Mokculur Biology of the Cell, 2000， 11, Sl-64和
KIinghoffer等人，EMBO Journal, 1999, 18， 24S9-2471 ).对于局部肿病发展到分散至血流中、便入其他组织和开始转移性肿病生长的阶段，必然需要细胞的运动性.例如，己经证实結肠胂講由局部性发展到散布性的優入转移性疾病与c-Src非受体膝A酸激味活性有关(Bruiiton等人，Oncogene, 1997, 14, 283-293, Fincham等人，EMBOJ, 1998， 17, 81-92 and Verbeek等人，Exp. CeU Research, 1999, 248,531-S37).
相应的，人们已经认识到这种非受体路我酸激雄柙制刑作为胂瘤细胞运动性的选择性抑制刑和作为导致转移性肿病生长抑制作用的哺乳动物痛细胞的扩散和伥入的选摔性抑制剂应该是很有价值的.特別是逸种非受体齡A酸激錄抑制刑作为用于抑制和/或治疗实体肿病疾病的抗使入活性剂应该是有价值的.
如在国际专利申请WO 01/94341和WO 02/163S2中所述，其中所
6公开的Six激醉抑制刑可以以单独治疗的方式给药，或可以包括除该 发明的喹唑啉衍生物之外的常規手术或放射疗法或化学疗法.所迷的 这样的化学疗法包括一种或多种下列种类的批肿癧活性刑
(i) 其它抗侵入活性刑(例如金属蛋白錄抑制刑，例如马立马司 他和尿激醉纤溶錄原激活物受体功能的抑制剂)；
(ii) 抗增殖/抗肿瘤药与其组合，在医学肿瘤学中仗用，例如汰化 刑(例如顺铂、卡铂、环磷Wt肤、氣芥、美法仑、苯丁酸氣芥、马利 兰和亚硝基脲)；代谢拮抗刑(例如抗叶酸物例如象尿嗜嚷和替加氣、 雷替曲塞、氛甲嚷呤、阿棘胞苷和羟基脲，或例如一种在专利申请No. S62734中公开的优选的抗代谢拮抗刑，例如(2S)-2-(邻-象-对-IN-(2,7-二甲基-4-氣代-3,4-二氣喹唑淋-6-基甲基}-！^ (丙-2-块基)氛基l苯甲酰 IUM-备(四唑-S-基)丁酸)；批肿病批生素(例如葱环雷机生素，例 如阿審素、争光審紊，亚槺利審素、柔毛審素、表乘霉素、表乘比星、 去甲氧乘红審素、丝裂審素-C、放线菊素和光神審素)；抗有丝分裂 刑(例如长春花生物械例如长春新械、长春械、去乙耽长春8b胺和长 春瑞舆和紫杉坑类例如紫杉盼和泰索帝)；和拓朴异构錄押制刑(例 如表鬼臼脂素，例如鬼臼亚乙苷和表鬼臼毒豕吩精普、安吖啶、拓朴
替康和喜树威)；
(iH)细胞生长押制刑例如抗雌激素(例如三革氣胺，枸槺酸托瑞 朱芬、雷诺普盼、屈落普芬和iodoxyfene)、抗雄激素(例如比卡魯胜、 象他胺、尼鲁米特和6酸塞普龙)、LHRH拮机刑或LHRH激动刑(例 如戈舍瑞林、亮丙瑞林和布舍瑞林)、孕激素雷(例如甲地孕拥)、 芳香峰抑制剂(例如阿那曲唑、来曲唑、vora幼le和依西美坦)和Sa-
还原錄徒抑制刑例如非那雄按；
(iv)生长因子功能抑制刑，例如此类抑制剂包括生长因子抗体、
生长因子受体抗体、齡IL酸激酶抑制剂和丝教酸-苏氨酸激錄抑制刑， 例如表皮生长W子家族的押制刑(例如EGFR路氨酸激峰抑制刑N-( 3-氣-4-象苯基)-7-甲氣基-6- (3-吗啉代丙氣基)全唑啉-4 胺(ZD1839), N- (3-乙炔基苯基)-6，7-二 ( 2-甲氣基乙氧基)喹唑啉-4-胺(CP 358774) 和6-丙沐酰氛基-N. (3-氣4象苯基)-7- (3.'马啉代丙氣基)全唑啉-4-肤(C1 1033)),例如血小板衍生生长因子家族的抑制刑和例如肝细 應生长罔子家族的押制刑；和
7(V)抗血管生成素刑，例如抑制血管内皮细胞生长因子的活性剂
例如在国际专利申请WO 97/22596、 WO 97/30035、 WO 97/32856和 WO 98/13354中公开的化合物以及通过其它机理起作用的活性刑(例 如利诺胺，整联蛋白avp3功能抑制刑和血管他丁). 抗雄激素和Src押桐拥AZD0S30的组合
孔房的早期和晚期癌病通常是激素依賴性的，并且因此对经由雄 激素受体的雄激素駆动的生长信号敏感.通过手术去势可以实现去除 雌激素.优选的，雄激素的影响也可以通过仗用批雄激素治疗进行抑 制，例如使用非甾类抗雌激素如三苯氣胺、枸櫸酸托瑞米芬、*诺普 酚、屈落昔芬和iodoxyfene,特別是使用三苯氣梭.雄激素的影响可以 使用其它抗砵激素治疗来抑制，例如使用裕类雌激素受体下调因子如 氣维司群.
还发现某些其它癌症如肺痛的生长可以是激素依賴性的.例如， 在肺肿瘤组织中发现了雄激素受体.这些癌症闳而可以是对经由雄激 素受体的由雄激素媒动的生长倌号敏感.
然而，对激素治疗的抗性是孔腺痛治疗中的主要陣碍.袭初对抗
激素治疗应答的肿痛随后在肸病的发展中产生抗性.近年来，正在开 展用以更多了解在乳腺和前列腺痛中对激素治疗和疾病发展产生抗性 的机理的研究.己经建立了用于反映孔脉痛中对批激素活性剂的抗 性，特別是三笨IL胺批性的体外棋型.其显示在MCF7人类乳腺痛细 胞中对抗雄激素三苯氣胺的抗性部分是由EGFR信号途径的组分的表 达提高和活化所介导的(KnowMen等人，Endocrinology, 2003, 144, 1032-1044),还显示生长因子受体如EGFR通过振馆涉及分裂原激活 蛋白激醉(MAPK)信号途径的诱导的机理剌激细胞迁移(Price等人， Cell. Commun. Adhesion, 2002, 9, 87-102),影响痛症患者死亡率的 最重要的因子是在他们肿瘤中具有使入表型的癌细胞的发展，这些细 胞显示増强的细胞可动性和便入性，是体内疾病发展的反映.
由国际专利申请WO 01/94341可知，某些S位取代的会唑啉衍生 物具有Src激峰抑制活性，并且是在治疗包括扎腺痛在内的各种痛症 中有用的抗仗入活性刑.在其实施例l4中以化合物No."公开了化合 物4-( 6-氣-2，3-亚甲二氣基笨胺基)-7-〖2-(备甲基哌嚷-l-基)乙氣基，-S-四氣吡喃-4-基氣基喹唑啉.该化合物是有效的Src激味抑制剂，并且被表示为编号AZD0530.
发明内容
在本发明中，Src激酶的活性被増加，并且其是控制抗激素抗性细 胞增强的便入能力的主要途径.Src激味的押制导致细應優入减少，其 进一步表明在该抗性细胞中Src激錄信号的重要作用.意想不到的是， 发现从国际专利申请WO 01/94341和WO 02/163S2中提到的联合治疗 的一般公开内容中的一种具体选挣是非常有效的.特別是抗雄激素和 Src激睐抑制刑或其药学可接受的盐的组合产生休人的有 效结果.更具体的说，抗雄激素和Src激錄抑制刑AZD0S30的组合产 生比由抗雄激素或Src激醉押制刑AZD0S30羊独給药所达到的效果更 好.
虽然在頃际专利申请WO 01/94341和WO 02/163S2中表示其所记栽
的Src激醉押制剂可以与抗雄激素(例如三苯氣胺、枸樣酸托瑞米芬、
雷诺普酚、屈落昔芬(屈洛甘芬和iodoxyfene)联合仗用，但其中并没
有具体记栽抗雌激素与Six激錄抑制刑AZDOS30的联合使用，或任何该
组合产品的令人俅讶的有效結果.
按照本发明，提供了适合用于乳腺癌的协同治疗的组合，其包括
抗雌激素和Src激峰抑制剂AZD0530，或其药学可接受的盐.
应了解术语"组合"是指，组合中的組分是同时、賴序或分开给
药的.在本发明的一方面，"组合"是指批雄激素和Src抑制刑的同
时給葯.在本发明的另一方面，"组合"是指这些活性剂的顺序给筠.
在本发明的另一方面，"组合"是指这些活性剂的分开給药.在这些
活性射的给药是瓶序或分开时，第二种组分延迟給筠将不会使联合治
疗的协同作用丧失.因此，为了遊免疑惑，本发明提供包含抗雌激素
和Src激酵抑制剂AZDS030或其药学可接受的盐，在乳腺癌的协^)治
疗中同时、顺序或分开使用，或在乳腺癌发展的协同延援中同时、順 序或分开使用的组合.
抗雌激素是例如非磁类批雄激素，如三苯氣胜、枸棘酸托瑞米芬、 雷诺普盼、屈落昔芬和iodwcyfeiie,特别是三笨氧肤，或裕类雌激素受 体下调罔子，如象雏司群.优选的抗雄激素是三幕氣胺或象維司群. 更优选的抗雌歉素是三苯氧胺.抗雄激素三笨氣肤(AstraZeneca的商 品名为"Nolvadex")是1- ( p-2-二甲基A基6氣苯基)-1,2-二苯基丁 -l-蜂的反式异构体，其公开于美頃专利4,536,516中.三笨氧梭的另一
9个名字是(Z) -2-1对-(1,2-二笨基丁小蜂基)苯氣基j乙基二甲胺.
甾类抗雄激素象堆司群(AstraZeneca的商品名为"Faslodex"， 编号ICI 1S2, 780)是有效的純抗雌激素的新类中的笫一个，其完全 没有与传统抗雄激素如三苯氣胺有关的部分枯抗、类雄激素活性，该 化合物为雄激素受体下调西子.象堆司群已经在对经三笨氣胺治疗后 乳腺癌已发展的妇女的临床试脍中显示出了效果.象堆司群的化学名 称为7-a-l9- (4，4，5，5，5 五氣戊基亚橫酰基)壬基，雄-1,3，5 (10)-三蜂-3，np-二醇，欧洲专利申请0138S04的实施例35和权利要求4中记栽 了该化合物.
此外，合适的抗堆激素包括，例如非甾类芳香醉抑制刑如阿那曲 唑、来曲唑、法锯唑、vorazole和氨基笨6哌梵鹏或tt类芳香睐抑制刑 如依西美坦和1-甲基-1，4-雄三秌-3，17-二拥.优选的机雄激素芳香酶抑 制刑是阿那曲唑、来曲唑或依西美坦.更优逸的批雄激素芳香醉抑制 刑是阿那曲唑或来曲唑.例如，阿那曲唑(商品名为"Arimidex") 具有作为活性成分的化合物2，2，-|S- (lH-l，2,4-三唑-l-基甲基)-1，3-亚 苯基l二 (2-甲基-丙腈)，其公开于美国重新发行的专利36,617中.阿 那曲唑的另一个名字是2，2，-二甲基-2，2，-5- (lH-l，2，4-三唑-l-基甲基) -1，3-亚笨基1二 (丙精)，
AZD0530的令适的药学可接受的盐是，例如药学可接受的酸加成 盐，例如与无机或有机酸例如盐酸、氣溴酸、碟酸、三象6酸、柠樣 酸、马来酸或窗马酸，如单-或双-富马酸的酸加成盐，
如上文所述，本发明的包含抗潍激素和Src激味抑制刑AZD0530 的组合在肺痛的协同治疗中也是有用的，因为在肺胂病组织中发现的 蚱激素受体.
本发明的痛症治疗包括批肿瘤效果，其可以通过常规方法例如应 答率、疾病发展时间和/或存活芈来评定.本发明的抗肸瘤效果包括但 不陷于抑制肿病生长、延緩肿瘤生长、肿痛的消落、肿瘤的缩小、 增加停止治疗后肿病的再生时间和延緩疾病的发展.例如，可以预期 当给需要对涉及实体病的痛症进行治疗的湿血动物例如人类給药本发 明的组合时，这种治疗效果会产生可通过例如一种或多种以下麥数来 测定的效果抗肿瘤的程度、应答率、疾病发展的时间和存活率.
如上丈所迷，本发明的組合在扎腺痛的协同治疗和预防中特别有用.按照本发明，如果在常規刑量下通过例如应答租度、应答率、疾 病发展时间或生存时间測量的效果在治疗学上优于给药联合治疗的一 种或其它组分可以获得的效果，则联合治疗被定义为产生了协同效
果.例如，如果效果在治疗学上优于羊独使用抗雄激素或Src激峰抑制 刑AZD0S30所能获得的效果，則联合治疗的效果是协同的.另外，如 果在对单独的抗雄激素或Src激醉抑制刑AZD0S30不应答(或很少应 答〉的一组患者中获得有益效果，則联合治疗的效果是协同的.另外， 如果一种組分以常規刑量给药且另外的组分以减少的刑量給药，而通 过例如应答程度、应答率、疾病发展时间或生存时间測量的效果等同 于或好于以常规刑量給药联合治疗的任何一种组分所可以获得的效 果，則联合治疗的效果被定义为产生了协两效果.特別的，如果可以 减少批雄激素或Src激游押制刑AZD0S30的常规刑l:而不損害应答租 度、应答率、疾病发展时间或生存数振的一种或多种，特別是没有損 害应答的时间，但是却具有比使用每个组分的常規刑量时所出现的更 少和/或更小的讨厌的財作用，則认为存在协同作用.
本发明的治疗性组合可以以合适的药物组合物的形式给药.按照 本发明的这方面，提供了速合用于治疗或预防乳腺痛的药物组合物， 其包括如在上文中所定义的、与葯学可接受的赋形刑或我体联合的组 合.
本文中描述的组合物可以是迭合于口服给药的形式，例如片刑或 胶囊，适合于肠胃外注射(包括静脉、皮下、肌肉、血f或输液)的 形式，例如无瓣溶液、悬浮液或乳液，适合于局部給药的形式，例如 油奮或乳骨刑，适合于直肠给药的形式，例如栓祸，或者給药途径可 以是通过直接注射到肿痛，或通过区域進送或局部遂送.在本发明的 其他实施方案中，联合治疗的Src激H抑制刑可以经皮肤、静脉内或 皮下，或通过内诊镜或向气管、損伤、腹痰或肿病内速逸，通常本文 中所描述的组合物可以使用本领域熟知的賦形剂或栽体，以常規的方 式来制备.
用于片刑制剂的合适的药学可接受的赋形刑或栽体包括，例如積 性的赋形刑如乳糖、碳酸钠、辨酸钙或壤酸钙，造粒和崩解刑如玉米 淀粉或海条酸'，粘合刑如凝狡或淀粉；润滑剂如硬脂酸祺、硬脂酸或 滑石粉；防應刑如6基或丙碁40羟基苯甲酸翻，和抗氧化剂如抗坏血
ii酸，片刑制刑可以是无包衣的或包衣的，以或者改善他们的分解和随
后在ir脉道中活性组分的吸收，或者改養它们的穗定性和/或外现，两 种情况都使用常規的包被刑和本领域公知的方法.
用于口服的组合物可以为硬胶囊的形式，其中活性组分与恃性罔 体赋形刑例如壤酸钙、磷酸钙或高岭土混合，或者为软胶囊的形式， 其中活性組分与水或油例如花生油、液体石堵或歡視油混合.
本发明的组合物可以方便的以单位刑量的形式表示.
抗雌激素组分可以按照己知的伸床实践给药，例如在晚期孔腺痛
的治疗中，可以仗用O.S和IOO mg之间的三苯IL胺的每日口服刑重， 适宜使用S和30 mg之间的每日刑重.如果使用抗雄激素的芳香醉， 其可以按照已经的临床实践給药.例如可以使用0,00S和2Smg之间的 阿那曲唑的每日口服刑量，适宜使用0,S和5 rag之间的刑量.例如可 以使用S和200 mg之间的依西美坦的每日口脹刑量，迭宜使用10和 40mg之间的刑重.
如果使用象维司群，其通常以給予有效、无毒的刑重给筠，刑量 的大小根据給药患者的途径而自然不同.通常使用氧維司群的常規刑 量，更具体的，每日给药的剂量在例如从约10mg到Sg,优选从约IO mg到1 g，更优选从约10mg到300mg化合物(即约0,2 mg/kg到100 mg/kg体重，优逸从约0.2 mg/kg到20 mg/kg体重，更优选从约0.2 mg/kg 到6 mg/kg体重)的范围内，如果需要的话以分开的刑量給予，方便的， 象堆司群的给药刑量足以在病患中获得疾病应答，使用的氣维司群的 刑重包括可以以短期作用制刑给药1到15 mg每日，根振給药的形式 而定，或以长期作用制剂相当于每月200到300mg化合物.优选的给 药途径是通过肌肉注射.给药的剂量使得产生S到20 ng/ml的象維司 群的血清水平.优选的制剂是将适剂重例如2S0ing的象维司群溶解在 5ml包含10。/。w/v 6醇、HT/。w/v笨甲醉和lS。/。 w/v苯甲酸苄錄的蓖 麻油样品中.该制刑将被肌肉注射，并将提供大约28天的治疗水平的 象堆司群.
通常给共Src激醉抑制刑AZD0S30以获得在例如0,1 mg/kg到7S mg/kg体重范圃内的每日刑量，如果需要的话以分开的刑重给予.通常 当利用肠胃外途径给药时将给药较低的刑量.闳此，例如，对于静脉 给药，通常使用例如0.1 mg/kg到30 mg/kg体重范頃内的刑量.类似的，对于吸入给药，可使用例如0.05 mg/kg到2S mg/kg体重范两内的刑量. 然而优逸口服給药，特別时片刑形式.通常对于口厥给药，使用例如 0,1 mg/kg到20mg/kg体重范田内的刑量.特别的，使用0.2 mg/kg到 10 mg/kg体重范田的口服刑量；更特別的，使用O.S rog/kg到5 mg/kg 体重的口服刑量.典型的，羊位剂量形式将包舍约O.S mg到O.S g的 Src激蘇押制刑；更特別的，单位剂量形式将包含约2S mg到2S0mg 的Src激睐抑制刑.
在上文所述的刑量和时间表可以根振患者的具体疾病状况和总体 条件进行改变.例如，为减少毒性，减少上迷联合治疗組分的剂重可 能是必要或希望的.时间表可以由治疗任一具体病患的医生使用其专 业技术和知识来确定.
应理解按照本发明的药物组合物包括包含批雄激素和Src激醉抑 制剂AZD0530的組合以及药学可接受的赋形刑或我体，该组合物方便 的提供了用于在乳腺癌的协同治疗中同时給药的本发明的治疗性組合 产品.
按照本发明的该方面，提供了适合在乳腺癌的协两治疗中使用的 药物組合物，其包含抗雄激素、Src激珠抑制刑AZD0S30或其药学可
接受的盐，以及药学可接受的赋形刑或栽体.
本发明的药物组合物还包括分开的组合物，其包括，包舍抗雄激 素和药学可接受的赋形刑或栽体的第一组合物，以及包舍Src激錄抑
争J剂AZD0S30或其药学可接受的盐以及药学可接受的赋形刑或我体的
笫二组合物.该组合物方便的提供了用于在孔腺癌的协同治疗中顺序
或分开给药的本发明的治疗性组合物，但是该分开的组合物也可以同
时给药.
方便的，本发明的该药物组合物包含药盒，其中包括具有包含抗 雄激素的合适组合物的第 一容器，和具有包舍Src激錄抑制刑AZD0S30 的合适组合物的第二容器.按照本发明的这个方面，提供了在孔腺癌 的协同治疗中使用的药盒，其包括-
a) 抗雌激素与药学可接受的赋形刑或栽体，以第一单位刑重形式 (如片刑或胶囊)；
b) Src激醉抑制刑AZD0S30或其药学可接受的盐，与葯学可接受
的赋形刑或我体，以第二羊位刑量形式；和C)用于包含所迷第一和第二羊位刑量形式的容器. 按照本发明的另一方面，提供了如前文所定义的用于乳腺癌协同 治疗的组合.
按照本发明的该方面，还提供了用于扎腺痛的协两治疗的药物组 合物，其包含如前文所定义的、与药学可接受的赋形剂或栽体联合的 组合，
本发明的特別令人俅讶的益处在于能够用本发明的组合治疗的乳 腺痛不仅可以是还没有用抗雄激素治疗的患者的乳線痛，还可以是已 经用抗雌激素治疗过但对这种疗法没有应答或是在最初能用该疗法治 疗后已经产生抗性的乳珠癌.
按照本发明的另一方面，提供如上文所定义的组合在制备用于给 药湿血动物以协同治疗乳腺癌的药物中的应用.
按照本发明的另一方面，提供如上文所定义的组合在制备用于给 药湿血动物以协同治疗抗雄激素抗性乳脉癌的药物中的应用.
按照本发明的另一方面，提供协同治疗乳腺痛的方法，其包括給 药需要这种治疗的湿血动物有效重的如上文所定义的组合的组分.
按照本发明的另一方面，提供协两治疗批雄激素机性乳珠痛的方 法，其包括给药需要这种治疗的湿血动物有效重的如上文所定义的組 合的组分.
按照本发明的该方面，还提供协两治疗乳腺癌的方法，其包括在
给药有效重的Src激峰抑制刑AZD0530或其药学可接受的盐之前、同时 或之后給药需要这种治疗的湿血动物有效量的如上文所定义的抗雄激 素.
按照本发明的这个方面，还提供协同治疗乳腺癌的方法，其包括 同时、順序或分开給药需要这种治疗的豕血动物有效量的如上文所定 义的組合的组分.
按照本发明的这个方面，还提供协两治疗孔缘痛的方法，其包括 给药需要这种治疗的温血动物有效重的如上文所定义的雄激素，并同 时、顺序或分开給药有效量的Src激錄抑制刑AZD0S30或其药学可接
受的盐，
本发明还涉及用于延緩扎腺癌从激素应答到激素无应答状态的发 展，即抑制孔脉癌细胞从激素依賴、非侵入的状态到激素非依赖、更加侵入的状态的转化的包含抗雄激素和Src激醉抑制刑AZD0S30或其 药学可接受盐的组合物.闳此，该组合对疾病发展的时间和存活率有 有益的效果.
按照本发明的这个方面，还提供用于延緩乳缘痛从激素应答到激 素无应答状态的发展的包含抗雄激素和Src激鋒抑制刑AZD0S30或其 药学可接受盐的組合.
在另一方面，本发明涉及该组合在押制孔腺细胞转化为癌细胞中 的应用，即化合物的组合提供乳脉癌化学预防效果.
在停经前妇女的正常人孔腺上皮细胞中，细胞具有标准大小和标 准染色质水平的核.已知当癌变发展时正常孔腺上皮细胞的外观出现 一系列的变化.在正常的上皮組织中，雄激素刺激正常生长并谦导孕 酮受体的表达，其使得孕W介导孔腺上皮细胞生长.因此该上皮细應 的生长包括细胞的非雄激素依賴性基线转換.在停经前妇女中，通常 当核的大小开始变大并且染色质水平开始増加时，乳腺上皮组织疾病 的病症开始显现.这些是癌变前的改变，在这个阶段该状况被(似非 而可能是的)称为原位管癌(DCIS) 随着疾病发展和DCIS细胞被 转变为悉性细胞，细胞明显具有増大的细胞核或核仁以及明显增加的 染色质水平，
我们已经发现，本发明的组合意想不到的不仅对己转变的乳腺癌 细胞的生长，而且对乳腺中的正常细胞和非悉性、异常细胞的基本生 长都具有效果.本发明的組合闳此被用于减少、优逸抑制扎腺细胞向 悉性状态的转变.本发明的抗雄激素和Src激游抑制刑AZD0530的组 合能够抑制正常细胞向DC1S状态的转变.所迷组合物也能够抑制 DCIS细胞向悉性細胞的转变.
进一步期望该組合在防止遣传上傾向患有该疾病的妇女中乳腺癌 的发作中具有有i效果.
按照本发明的这个方面，提供用于减少，优选押制正常乳腺细胞 向DCIS状态转变的包舍批雌激素和Src激錄抑制剂AZD0S30或其药 学可接受盐的组合.
依瓶本发明的这个方面，还提供用于减少，优逸抑制正常乳腺细 胞或DCIS细胞向悉性状态转变的包含抗雌激素和Src激酶抑制刑 或其葯学可接受盐的组合.
15上文所定义的本发明的联合治疗可以作为羊独治疗施行，或者可 以附加包括手术或放射性治疗或给药化疗刑.手术可以包括部分或完全切除肿瘤的步錄，在施行本发明的联合 治疗之前、期间或之后进行.可选与本发明的联合治疗一起使用的化疗刑可以包括，例如下列治疗剂种类(i)在医药肿摻血中使用的抗增值/批肿病药和其组合(例如卡铂 和顺铂)；细胞抑制刑，例如生长因子功能的抑制刑如生长因子抗体、 生长因子受体抗体(例如抗erbB2抗体曲妥羊抗和Bl抗体西妥普单 抗)、酪氨激鋒抑制剂(例如表皮生长因子家族的抑制剂)、11类受 体路我酸激酶押制刑(例如胰岛素生长因子家族的押制刑如1GF1受体 抑制刑，其如例如Chakravarti等人，Cancer Research, 2002，62,200-207 所记我)、丝氛酸/苏氛酸激睐抑制刑、法呢基转移鋒抑制剂和血小板 衍生的生长西子抑制剂；(iii) 抗血管生成素刑，例如押制血管内皮生长因子效果的那些(例 如抗血管内皮细胞生长困子批体贝伐单批和VEGF受体路A酸激酶抑 制剂如4- (4-澳-2-氧笨胺基)-6-甲氣基-7- U-甲基哌关-4-基甲氣基) 全唑淋(ZD6474; WO 01/32651中实施例2) , 4- (4-象-2-甲基吲哚-5-基氧基)-6-甲氣基-7- (3-吡咯秌小基丙氣基)全唑啉(AZD2171; WO 00/47212中)，vatalanib (PTK787; WO 98/3S98S)和SU11248(WO 01/60814));(iv) 血管損伤刑如頃际专利中请WO外/02166, WO 00/40529， WO 00/41669, WO 01/92224, WO 02/04434和WO 02/08213中公开的化合物；(v) 生物学反应调节因子(例如干扰素)；和(vi) 二鱗酸盐如脊普ll酸、英卡H酸、利塞JH酸、唑来膦酸、氣 聘酸、奈立辑酸、帕米脚酸和阿仑麟酸.例如，施用所定义的抗雄激素、Src激味抑制刑AZD0S30或其药学 可接受的盐以及电离轴射可以产生抗癌效果，如抗肸痛效果，其优于 行电离插射所获得的效果.根据本发明的这个方面，还提供了协同治疗孔脉癌的方法，其包16括在治疗有效量的Src激酵抑制刑AZD0S30或其药学可接受的盐之 前、同时或之后和在有效量电离辐射之前、同时或之后給药需要这种 治疗的湿血动物如人类有效重的抗雄激素.可以在给药如上丈所定义的本发明的组合一用之前至一周之后的 时间内对所述湿血动物如人类实施电离插射.放射疗法可以按瓶巳知的临床放射疗法中的实战来实施.电离械射的刑重是在临床放射疗法中已知的.所使用的放射治疗包括例如使 用Y-射线、X-射线和/或来自放射性同位素的扭射的直接遂送.其他形 式的DNA損伤罔子也包括在本发明中，例如擻波和紫外线照射.例如 X-射线可以以1.8-2.0Gy的日刑量給予， 一用S天，保持5-6周.通常 分次刑量的总和在45-60 Gy范围内.单一较大的刑量，例如S-IO Gy 可以以放射疗法的一个历租的一部分来给予.可以在手术中給予单一 剂量，可以使用超分割放射疗法，由此小刑量的X-射线可以在一段时 期内有规則地給予，例如在若干天内酵小时給予0.1 Gy.放射性同位 素的刑童范围可在很大程度上改变，取决于同位素的半袭期，强度和 发出梯射的类型，并取决于细胞的吸收量.按照本发明的另一方面，提供如上文所定义的组合在制备用于給 葯正在进行电离械射治疗的湿血动物如人类以提供孔缘痛的协同治疗 的葯物中的应用.EGFR TKI和Src抽桐拥AZD0S30的组会本发明还涉及包含表皮生长两子受体膝氛酸激蜂抑制刑(下迷 "EGFR TKI")和Src家族非受体酷A酸激峰的特定押制刑的組合.本发明的该組合在治疗癌症的方法中是有用的.在大量人类肿病中广泛出现EGFR的高表达水平，该增加的表达可 能与患者的疾病发展和不良预后有关(Nkholson等人，Breast Cancer Research Treatment, 1994， 29, 117-125和Europeiin Journal of Cancer, 2001, 37， Supplements S9-1S) 例如已显示在MCF7人类孔腺痛细 胞中对抗雄激素三笨氣胜的机性部分是由EGFR传号途径的组分的表 达提离和活化所介导的(KnowWen等人，Endocrinology, 2003， 1"， 1032-1044).其还显示基本的和TGFa刺激的三苯氣梭机性MCF7扎腺 癌细胞的生长都可以被EGFR TKI ZD1M9押制 可用本发明该方面的组合治疗的痛症包括食f痛、骨號癌、肝癌、成神经细胞病、卡波西肉瘤、印巢癌、 乳腺癌、结肠直肠癌、前列腺癌、膀耽癌、X素痛、肺痛包括非小细 胞肺癌(NSCLC)和小细胞肺癌(SCLC)l、胃痛、头颈部癌、脑痛、 肾癌、淋巴病和白血病.更具体的，本发明的该组合在乳腺癌、结肠 直脉癌、前列腺癌、NSCLC和头類部癌的治疗中或在延緩这些癌症发 展的方法中是有用的.依照本发明的这个方面，提供适合用于痛症(特別是乳腺痛、结 肠直炀癌、前列珠痛、非小细胞肺痛和头劲部癌)的协同治疗的组合， 其包括EGFR TKI或其药学可接受的盐，以及Src激錄抑制刑AZD0S30 或其药学可接受的盐.应当理解术语"组合"表明同时、顺序或分开餘药如上文所述的 組合的組分.巳知1类激睐如受体路氨缺激酶的EGF家族经常在一般的人类上 皮癌如前列腺痛中出现(Visakorpi等人,Hi"och柳，J., 1992, 24, 481).因此认为受体路A酸激睐的抑制刑具有作为前列腺癌生长的选 摔性抑制刑的价值.由欧洲专利申请No. 0566226和頃际专利申请WO 96/33980和WO 97/30034可知某些在4-位具有苯胺替代的喹唑啉衍生物具有EGFR路 A酸激味抑制刑活性，并且是包括前列腺痛在内的痛组织増殖的抑制 剂，J R Woodburn等人in Proc, Amer， Assoc, Cancer Research, 1997, 38, 633和Pharmacol. Ther" 1999, 82， 241-250公开了化合物N-(3-氣-4-氧笨基)-7-甲|1基-6 (3-，马啉代丙氣基)喹唑啉-4-胺(又称为 gefitinib和AstraZeneca的商品名"lressa" ) 该化合物是有效的EGFR TKI,在下文中用编号ZD1839表示.由国际专利申请WO 96/30347可进一步得知某些在备位具有笨肤 替代的结构相关的喹唑啉衍生物也具有EGFR膝A酸激醉抑制刑活 性.在WO 99/SS683中还公开了化合物N- (3-乙炔基苯基)-6，7-二 ( 2-甲氣基6氣基)喹唑啉-4-肤或其药学可接受的盐(链接到编号CP 3S8774和OSI-774)是EGFR TKI,该化合物还被称为erlo"nib,并在 下文中用编号OSl-774表示.由頃际专利申请WO 97/38卯3可进一步得知某些在备位具有笨肤 替代的其它结构相关的喹唑啉衍生物也具有EGFR路我酸激醉抑制刑活性.在J,Med, Ch柳"1999， 42,1803-1815和WO 00/31048中己经 公开了化合物6 丙烯酰氨基-1^ (3-氣4氣苯基)-7- (3-吗琳代丙氣基) 喹唑啉-4-肢(链接到编号PD 18380S和Cl 1033)是EGFR TKI.该化 合物在下文中用编号CU033表示).由頃际专利申请WO 97/02266可进一步得知某些其它结构相关的 杂环衍生物也具有EGFR醇氛酸激味押制刑活性.例如化合物4-(1R)小苯基乙基我基H" (4^fe基苯基)-7仏吡咯并2,3- 11嗜突(链 接到编号PKM66、 CGP 7S166和CGP S9326)是EGFR TKI.该化合 物在下丈中用编号PKI-166表示.由欧洲专利申倩No. 0787722和頃际专利申请WO 98/50038 、 WO 99/09016和WO 99/24037可进一步得知某些在4-位具有笨肤替代的其 它结构相关的喻唑啉衍生物也具有EGFR酵A酸激雄押制刑活性.例 如，化合物(3-溴苯換基)全唑啉-6-基l丁-2-炔耽梭(链接为编 号CL-3877M和EKB-785)是EGFR TKI.该化合物在下文中用编号 CL-387785表示.由Nature Medicine, 2000， 6, 1024-1028和美国专利No, 6,002,008 可进一步得知某些在4-位具有苯胜替代的其它结构相关的喹唑啉衍生 物也具有EGFR路A酸激錄押制刑活性.例如，化合物4- (3-氣4-象 苯胜基)-3-氛基-6- M-二甲基氛基丁-2 (E)-烯Bt氛基)-7-6氣基喹 啉(下丈中表示为编号EKB-S69)是EGFRTKI.在本发明的合适的組合中，EGFR TKI逸自例如ZD1839、 OSI-774、 C11033、 PKI-166、 CL08778S和EKB-569.优逸EGFRTKI组分 是ZD1839或OSI-774.更优选EGFR TKI组分是ZD1839.如上文所述，AZD0S30的合适的药学可接受的盐是，例如药学可 接受的酸加成盐，例如与无机或有机酸例如盐酸、氣溴酸、碟酸、三 氣G酸、柠樣酸、马来酸或富马酸的酸加成盐.类似的可以使用本发 明这个方面的EGFRTKI组分的药学可接受的盐.如上文所迷，本发明包含EGFR TKI和Src激H抑制剂AZD0S30 的组合在痛症的协同治疗中是有用的.本发明的癌症治疗包括批肿病 效果，其可以通过上文所迷的常規方法进行评測.如果使用类似的标准其效果在治疗学上优于上丈所迷的那些，刺 本发明的联合治疗被定义为产生了协岡效果.依照本发明的这个方面，优选的组合包舍EGFR TKI ZD1839或其 药学上可接受的盐，以及Src激錄押制刑AZD0530或其共学上可接受的 盐.依照本发明的这个方面，进一步优选的紐令包舍EGFR TKI OSI-774或其药学可接受的盐，以及Src激昧押制刑AZD0S30或其药学上可 接受的盐.本发明这个方面的治疗性組合可以以合适的药物组合物的形式給 药.按照本发明的这方面，提供了适合用于协同治疗癌症的葯物组合 物，其包含与葯学可接受的赋形刑或栽体联合的包含EGFR TKI或其 药学可接受盐以及Six激雖抑制刑AZD0S30或其药学可接受盐的组 合.本发明这个方面中所述的组合物可以为任何合迭的形式，如上文 所迷的形式.优选的适合用于癌症协两治疗的药物组合物包舍与药学可接受的 赋形剂或我体联合的包舍EGFR TKI ZD1839或其药学可接受盐以及 Src激蘇抑制剂AZDOS30或其药学可接受盐的组合.进一步优逸的适合用于痛症协同治疗的药物组合物包食与药学可 接受的赋形刑或我体联合的包含EGFR TKI OSI-774或其药学可接受 盐以及Src激醉抑制剂AZDOS30或其药学可接受盐的组合.对于EGFRTKI組分，用于口服给诉的片刑或胶囊剂通常包舍，例 如从约20rog到l g的活性成分.当EGFRTKI是ZD1839，包含SO mg、 100 rog、 250 rog或500 mg活性成分的常規片刑可以被用于口厥给药 方便的，ZD1839的每日口服刑重超过40mg，例如在50到750 mg的范田 内，优选在IOO到SOO mg的范围内，更优选在200到S00 mg的范两内. 当EGFRTKI是OSI-TM，包含2S rog, 100 mg或l邻mg活性成分的常规 片刑被用于口尿給药.方便的，OSI-7W的每日口服刑量在S0到300rog 的范闺内，优选在邻到200mg的范田内，更优选在100到lS0mg的范田 内.通常使用如上文所述类似的童和途径給药Src激味抑制刑 AZD0S30,上文所述的刑量和时间表可以根振患者的具体疾病状况和总体条 件进行汰变.例如，为减少每性，减少上述联合治疗组分的刑量可能时必要或可希望的.風药时间安排可以由治疗任一具体病患的医生使 用其专业技术和知识来确定.应理解按照本发明的葯物组合物包括包含EGFR TKI和Src激峰 抑制刑AZD0530的組合物以及药学可接受的赋形刑或栽体.该组合物方便的提供了用于在癌症协同治疗中同时给葯的本发明的治疗性姐合 产品.依照本发明的这个方面，提供适合用于癌症协同治疗的药物组合 物，其包含EGFRTKI或其药学可接受的益、Src激醉押制刑AZD0S30 或其药学可接受的盐以及药学可接受的賦型刑或栽体.依照本发明的药物组合物也包括分开的组合物，其包括，包舍 EGFR TKI或其药学可接受的盐以及药学可接受的赋形刑或栽体的第 一组合物，和包含Src激酶抑制刑AZD0S30或其药学可接受的盐以及 药学可接受的赋形刑或栽体的第二组合物.该组合物方便的提供了用 于在痛症的协同治疗中顺序或分开給药的本发明的治疗性组合物，但 是该分开的組合物也可以同时给药.方便的，本发明的该药物组合物包舍药盒，其中包括具有包含 EGFR TKI的合适组合物的第一容器，和具有包含Src激酶抑制刑 AZD0530的合适组合物的第二容器.按照本发明的这个方面，提供了 在癌症的协同治疗中使用的药盒，其包括a) EGFRTKI或其药学可接受的盐，与葯学可接受的赋形刑或我 体，在第一单位刑型中；b) Src激錄抑制剂AZD0S30或其葯学可接受的盐，与药学可接受 的赋形刑或我体，在第二单位刑型中；和c) 用于包舍所述笫一和笫二单位射型的容器. 按瓶本发明的另一方面，提供了如上文所定义的用于癌症协同治疗的組合.按照本发明的该方面，还提供了用于痛症协同治疗的药物組合 物，其包含如前文所定义的组合与药学可接受的赋形刑或栽体.本发明的特別令人体讶的益处在于能够用本发明的组合治疗的癌 症不仅可以是还没有用生长因子押制刑治疗的患者的癌症，还可以是 己经用生长罔子抑制刑，例如用EGFR TKI治疗过但对这种疗法没有 应答或是在最初能用该疗法治疗后已经产生抗性的癌症.21按照本发明的另一方面，提供如上文所定义的组合在制备用于給药湿血动物以协两治疗癌症的药物中的应用.
按照本发明的另一方面，提供如上文所定义的组合在制备用于给
药湿血动物以治疗EGFRTKI抗性癌症的药物中的应用.
按照本发明的另一方面，提供协同治疗痛症的方法，其包括给药
需要这种治疗的a血动物有效量的如上文所定义的組合的组分，
按照本发明的另一方面，提供治疗EGFRTKI批性痛症的方法，其包括给药需要这种治疗的温血动物有效量的如上文所定义的组合的组分.
按照本发明的这个方面，还提供协同治疗痛症(包括EGFR TKI抗性痛症)的方法，其包括在給药有效量的Src激睥抑制剂AZD0S30或
其药学可接受的盐之前、同时或之后給药需要这种治疗的溫血动物有效量的如上文所定义的EGFRTKI或其药学可接受的盐，
按照本发明的这个方面，还提供协同治疗癌瘅(包括EGFR TKI抗性癌症)的方法，其包括同时、順序或分开給药需要这种治疗的溫血动物有效量的如上文所定义的组合的組分.
按沐本发明的这个方面，还提供协^治疗痛症(包括EGFR TKI抗性痛症)的方法，其包括給药需要这种治疗的豕血动物有效量的如上文所定义的EGFRTKI或其药学可接受的盐，并同时、順序或分开给药有效量的Src激味抑制刑AZD0S30或其药学可接袭的盐.
上文所定义的本发明的联合治疗可以作为单独治疗施行，或者可以附加包括手术或放射性治疗或给药如上文所述的化疗刑
抗錄激壹、EGFR TK1和Src押制祸AZD0S30的组合
本发明还涉及三部分組合，其包含抗雄激素、EGFR酷A酸激錄抑制剂和Src家族非受体激錄的特定抑制刑.本发明的该组合在治疗癌
症，尤其是扎腺痛的方法中是有用的.
如上文所迷，在MCF7人类乳腺癌细胞中对抗雄激素三笨氧胜的抗性部分是由EGFR信号途径的组分的表达提高和活化所介导的.其还表明基本的和TGFa刺激的三笨氣胺抗性MCF7孔腺癌细胞的生长都可以被EGFR錄A酸激醉押制刑ZD1839押制.
按照本发明的这个方面，捉供了适合用于孔脉痛的协同治疗的三部分組合，其包含抗雄激素、EGFR TKI或其药学可接受的盐和Src激醉押制刑AZD0S30或其药学可接受的盐.
应当理解术语"組合"表明岡时、艰序或分开给药如上丈所述的组合的组分.
适当的抗雄激素具有所有上文所定义的含义.
适当的EGFR TKI具有所有上文所定义的含义.在本发明的适当的由三部分组合中，EGFRTKI选自，例如ZD1839、 OSI-774、 CI1033、PKM66、 CL087785和EKB-569,优逸本发明的三部分組合的EGFRTKI组分是或OSI-774.更优选本发明的三部分组合的EGFRTKI组分是ZD1839.
如上文所述，EGFRTKI或AZD0S30的药学可接受的盐是，例如药学可接受的酸加成盐，例如与无机或有机酸例如盐酸、氣溴酸、碟酸、三象乙酸、柠樣酸、马来酸或富马酸的酸加成盐.
如上文所述，本发明的三部分组合在孔腺痛的协两治疗中是有用的.本发明的痛症治疗包括抗肿病效果，其可以通过上文所述的常規方法进行评測.
如果使用类似的标准其效果在治疗学上优于上文所述的那些，则本发明的三部分联合治疗被定义为产生了协同效果.
依照本发明的这个方面，优选的三部分组合包含批雄激素、EGFRTKI ZD1839或其药学上可接受的盐，以及Src激錄抑制刑AZD0S30或其药学上可接受的盐.
依照本发明的这个方面，进一步优逸的三部分组合包含批雄激素、EGFR TKI OSK774或其药学可接受的盐，以及Src激珠抑制刑AZD0S30或其药学上可接受的盐.
本发明的三部分组合在肺癌的协同治疗中也是有用的，闳为在肺肿橹組织中发现了砵激素受体.
本发明这个方面的三部分組合可以以令速的药物组合物的形式給药，按照本发明的这方面，提供了适合用于协两治疗乳缘癌的药物组合物，其包含与药学可接受的赋形刑或我体联合的，抗雄激素、EGFRTKI或其药学可接受盐以及Src激味抑制剂AZD0S30或其药学可接受盐的组合.
本发明的这个方面中所述的组合物可以为任何迭当的形式，例如上丈所述的形式.优选的适合用于乳腺癌的协同治疗的药物組合物包括与药学可接
受的赋形剂或栽体联合的，抗雄激素、EGFRTKIZD1839或其葯学可接受盐以及Src激酶抑制刑AZD0S30或其葯学可接受盐的组合.
进一步优选的适合用于孔腺癌的协同治疗的药物组合物包括与葯学可接受的赋形剂或栽体联合的，抗雄激素、EGFROSI-774或其药学可接受盐以及Src激睐抑制剂AZD0S30或其药学可接受盐的组合.
抗雌激素组分、EGFR TKI组分和Src激聘押制刑AZD0S30中的每个通常都使用如上文所述的类似的董和途径給药.
上文所迷的剂量和时间表可以根据患者的具体疾病状况和总体条件进行改变.例如，为减少毒性，减少上迷联合治疗组分的刑童可能时必要或可希望的，厥爽时间安排可以由治疗任一具体病患的医生使用其专业技术和知识来确定.
应理解按照本发明的药物组合物包括包含批雄激素、EGFR TKI和Src激醉抑制刑AZD0S30'的组合以及药学可接受的赋形剂或栽体.该组合物方便的提供了用于在乳腺癌协同治疗中同时给药的本发明的治疗性組合产品.
依照本发明的这个方面，提供速合用于乳腺痛协同治疗的药物組合物，其包舍抗雄激素、EGFRTKI或其药学可接受的盐、Src激峰抑制刑AZDOS30或其药学可接受的盐以及药学可接受的赋型刑或栽体.
依照本发明的药物組合物也包括分开的组合物，其包括，包舍抗雌激素以及药学可接受的赋形剂或我体的第一組合物、包舍EGFRTKI
或其药学可接受的盐以及药学可接受的赋形刑或栽体的第二组合物、
和包含Src激蘇抑制剂AZD0S30或其药学可接受的盐以及药学可接受
的赋形刺或栽体的第三组合物.该组合物方便的提供了用于在痛症的
协同治疗中顺序或分开给药的本发明的治疗性组合物，但是该分开的
組合物也可以同时给药.
方便的，本发明的该药物组合物包舍葯盒，其中包括、具有包舍抗雄激素的适当组合物的笫一容器、具有包含EGFR TKI的适当组合物的第二容器、和具有包含Src激酶抑制刑AZD0S30的适当组合物的第三容器.按照本发明的这个方面，提供了在乳脒癌的协同治疗中使用的药盒，其包括-
a)抗雄激素与药学可接受的赋形刑或我体，以第一单位剂重形式(如片刑或脱囊)；
b) EGFRTKI或其药学可接受的盐，与药学可接受的賦形刑或栽 体，以第二单位刑量形式；
c) Src激錄抑制刑AZD0S30或其药学可接受的盐，与药学可接受 的赋形刑或我体，以第三羊位刑量形式；和
d) 用于包含所迷笫一、第二和第三羊位刑量形式的容器. 还需要理解，为了方便，三部分组合的任意两种组分可以共同以
笫一单位刑量形式而笫三组分以第二羊位刑量形式产生，
按照本发明的另一方面，提供了上文所定义的用于乳線痛的协同 治疗的三部分組合.
根振本发明的这个方面，还提供了用于乳腺痛的协同治疗的药物 组合物，其包含与药学可接受的赋形刑或栽体联合的上丈所定义的三 部分组合.
如上所迷，对乳腺癌的激素治疗的抗性走主要问趙.最初对抗激 素治疗应答的肺病在肿瘤的发展中产生了抗性.类似的，也会产生对 使用EGFR TKI的乳脉癌疗法的抗性.己经建立了反映孔腺癌细胞对 抗激素治疗，如三苯氣肤的抗性，和对EGFRTKI治疗的抗性获得的 体外细應橫型，现在已经显示在三苯氧梭抗性MCF7人类乳腺癌细胞 中对EGFR TKI ZD1839的批性部分是由Src激酵信号途径的组分的表 达提高和活化所介导的，其导致具有侵入性表形的癌细胞的发展.这 些细胞显示増强的细胞可动性和侵入性，其是体内疾病发展的反映.
本发明这个方面的特別令人体讶的益处在于能够用本发明的三部 分組合治疗的乳缘癌不仪可以是还没有进行机雄激素治疗或EGFR TKI治疗的患者的乳脉癌，还可以是已经用抗雄激素和EGFR TKI之 一或共同治疗过但对这种疗法没有应答或是在最初能用该疗法治疗后 已经产生抗性的乳腺癌，
按照本发明的另一方面，提供如上文所定义的三部分组合在制备 用于给药湿血动物以协同治疗乳脒癌的药物中的应用.
按照本发明的另一方面，提供如上文所定义的王部分组合在制备 用于给药湿血动物以治疗批雉激素批性乳腺癌的药物中的应用.
按照本发明的考一方面，提供如上丈所定义的三部分组合在制备 用于给药湿血动物以治疗EGFRTKI抗性扎缘癌的药物中的应用.
25按照本发明的另一方面，提供如上文所定义的三部分组合在制备
用于給药溫血动物以治疗对批雄激素和EGFR TKI都具有抗性的乳腺 癌的药物中的应用.
按照本发明的另一方面，提供协同治疗乳腺痛的方法，其包括给 药需要这种治疗的湿血动物有效重的如上文所定义的三部分组合的组 分.
按照本发明的另一方面，提供治疗抗雄激素批性乳腺癌的方法， 其包括给药需要这种治疗的溪血动物有效量的如上文所定义的三部分 组合的组分.
按照本发明的另一方面，提供治疗EGFRTKI抗性乳腺痛的方法， 其包括給药需要这种治疗的湿血动物有效量的如上文所定义的三部分 组合的组分，
按照本发明的另一方面，提供治疗对批雄激素和EGFRTKI治疗都 具有抗性的乳脉癌的方法，其包括給药需要这种治疗的湿血动物有效 量的如上文所定义的三部分组合的组分.
按照本发明的这个方面，还提供协同治疗乳脒癌的方法，其包括 在给药有效量的如上文所定义的EGFR TKI或其药学可接受的盐之 前、同时或之后，以及在给药有效量的Src激醉抑制刑AZD0530或其药 学可接受的盐之前、同时或之后給药需要逸种治疗的湿血动物有效重 的抗雄激素.
按照本发明的这个方面，还提供协同治疗孔腺癌的方法，其包括 同时、順序或分开给药需要这种治疗的湿血动物有效量的如上文所定 义的三部分组合的組分.
按照本发明的这个方面，还提供协同治疗扎腺癌的方法，其包括
給药需要这种治疗的a血动物有效量的如上文所定义的雄激素，同
时、順序或分开給药有效量的如上文所定义的EGFR TKI或其药学可 接受的盐，并同时、順序或分开給药有效重的Src激味抑制刑AZD0530
或其葯学可接受的盐.
本发明还涉及用于延援乳腺痛从激素应答到激素无应答状态的发 展，即抑制乳腺癌细胞从激素依賴、非侵入的状态到激素非依賴、更 加侵入的状态的转化的三部分组合，其包含抗雄激素、EGFR TKI或 其药学可接受的盐，以及Src激酶抑制刑AZDOS30或其药学可接受的盐，因此，该三部分组合对疾病发展的时间和存活率有有益的效果.
按照本发明的这个方面，还提供用于延援乳腺癌从激素应答到激
素无应答状态的发展的三部分组合，其包舍抗雌激素、EGFR或其葯 学可接受的盐，以及Src激錄抑制剂AZD0530或其药学可接受的盐.
在另一方面，本发明涉及该三部分组合在抑制孔脉细胞转化为癌 细胞中的应用，即化合物的组合提供乳珠癌化学预防效果.
我们已经发现，本发明的三部分组合意想不到的不仅对己转变的 乳腺痛细胞的生长，而且对扎珠中的正常细胞和非悉性、异常细胞的 基本生长都具有效果.本发明的三部分组合园此被用于减少、优选抑 制乳腺细胞向悉性状态的转变.本发明的抗雌激素、EGFRTKI和Src 激醉抑制刑AZD0S30的三部分组合能够押制正常细應向DC1S状态的 转变.所迷三部分组合物也能够抑制DC1S细胞向悉性状态的转变.
进一步期望该三部分组合在防止遣传上傾向患有该疾病的妇女中 乳腺痛的发作中具有有益效果.
按照本发明的这个方面，提供用于减少，优选抑制正常乳腺细胞 向DC1S状态转变的包含批雄激素、EGFR TK1或其药学可接受盐和 Src激峰抑制刑AZD0S30或其药学可接受盐的三部分组合.
按照本发明的这个方面，还提供用于减少，优逸抑制正常乳腺细 胞或DCIS细胞向恶性状态转变的包含抗雄激素、EGFRTKI或其药学
可接受盐和Src激醉抑制剂AZD0S30或其药学可接受盐的组合.
上文所定义的本发明的三部分联合治疗可以作为单独治疗施行，
或者可以附加包括手术或放射性治疗或给葯上丈所定义的化疗刑.具体实施方式
生物学试脍方法
下列试脍方法可用于显示当与机雄激素和/或EGFRTKI联合使用
时Src激跨柙制浙AZD0530的活性. (a)细胞生长研究
各种试搶方法由Knowlden等人在Endocrinology, 2003, 144, 1032-1044中作出描述，其包括一种或多种的-
(i) 三苯氣胺应答的"野生型"MCF7人类孔腺痛细胞；
(ii) 该MCF7乳脒癌细胞的对激素不敏感的变体，其被表示为 "Ta加-R"(三苯氣胺抗性)；和
(Hi)该"TAM-R"细胞的变体，其对用EGFR TKI ZD1839的
27治疗也不敏感，其被表示为"Tam/TKI-R",
三笨氣胺应答的"野生型"MCFT乳線细胞通常培养在补入S。/。胎 牛血清加青審素UOHJ/ml)、链審素U0蹄/ml)和两性審素B (2.S 绍/ml)的无盼红RPMI培养基中.培养物于371C保持在包舍S。/。C02 的湖湿空气中.当在下迷试脍中用于试脍分析时，细胞保持在补入5% 活性炭吸附的、去类闳醉胎牛血清、上迷抗生素和谷耽胜(200加M) 的无酚红RPMI培养基中.
"Tam-R" MCF7乳腺癌细胞保持在补入5%活性炭吸附的、去类 闺醉胎牛血清、上述抗生素、谷酰胺(200mM)和4^E基三苯氧胺(6 醉中1(V7M)的无盼红RPMI培养基中，
通过连续将"Tam-R" MCF7乳腺癌细胞暴塞在ZD1W9 (10>6M) 中U个月获得"Tam/TKI-R" MCF7孔腺癌细胞.
使用Nunc (RoskHde, Denmark)组织培养蹇料器皿.
单细胞层于无血清生长因子DCCM培养基中在存在遲增浓度的上 迷组合物的组分或组合物本身的情况下生长7天.通过单细應A的胰 蛋白珠消化法评估细胞群体生长，使用Beckman Coulter计数器(可从 Beckman Coulter Limited, Luton, GB购得)測量细胞的數量，所有
的细胞生长试检都一式三份.
(b) 细胞运动性的时延分析
细胞培养于6孔组织培养皿中，使其达到对数生长阶段.平皿被 转移到热的倒置显徵镜的镜台上，细胞培养物用矿物油復羞以在细胞 逸动性分析时最小化培养基中的pH改变 使用与时延录影系统连接的 樣影机记乘细胞迳动性6个小时.为定重细胞运动性，在乘像重放的 过程中以IO分钟为间隔获取田像，使用Optimas困像分析软件(Media Cybernetics UK, Finchampstead, BerksWre, GB)追踪至少10个细 應个体的移动，以细胞位置(x轴位置对y轴位置)或迁移的总距离 (^m)作为时间函数烩制细胞的移动.为确定细胞逸动性的定向持续， 餘制细胞的轨迹使得所有的轨迹始于原点.
(c) 损伤禽合试脍
收集指数生长细胞，平亚培养于24孔培养瓜上.产生单层培养物 后，通过用吸液管尖端手动刮擦損伤细胞，并用磷酸盐緩冲血清(PBS) 洗涂.加入包含速当生长闳子、抑制剂化合物(或抑制刑化合物的组合)的新鲜培养基.36小时后，细胞用4%甲》 定，用结晶紫(PBS 中0,5%)染色，以20倍的放大比例对損伤拍照. 一些孔在损伤后立即 (t-O小时时间点)被闳定和染色以用于计算損伤禽合百分率. (d)纤维粘连蛋白细胞移动试狯
TransweU小窒的聚壤酸豳滤獲(6.S mro直径，8,0 孔大小，来 自Costarlnc" Cambridge, MA， USA)被铺在具有50將/m，纤维粘 连蛋白的膜下倒，无血清RPMI中371C下2小时.用PBS漂洗聚破酸 錄膜.收集细胞，以无血清RPMI中每毫升Sxl0S细胞的浓度悉浮. 试样量的细胞(100 5 x 104细胞)被接种到加入有SOO pl试搶培 养基的每个孔中.在对照试狳中，让细胞向膜下桐移动20小时.在測 试试验中，加入适当浓度的押制剂化合物(或抑制刑化合物的组合)， 让细胞向膜下倒移动20小时.用棉签除去胜上倒的未移动细胞，附着 在煤下倒的移动细胞用4%甲瞎 定，在宜湿下用0,5%结*紫染色10 分钟.使用倒里显徵镜以20倍的放大率计算移动细胞的数量.
(e >细胞侵入性试脍
先前由Hiscox等人(Breast Cancer Research Treatment, 2000, 59， 245-2S4)描迷的改进的方法倍用于研究乳缘痛细胞的伥入本性.
将TransweU聚破酸醋滤膜插入物(6.Smm直径，8pm孔大小， 来自Costar Inc.)置于24孔组轵培养平孤中,用Matrige， (0.4 pg/ml) 包被在室湿下于无錄培养革中过夜.37X3下用无血清RPMI再水合1 小时后，以104细胞/孔将细胞接种到具有或不具有速当浓度的押制 刑化合物(或抑制刑化合物的组合)的腹插入物上，加入600 ^培养 基以浸入腹插入物.孔在37TC下培养72小时，之后用棉答从孔内部除 去未便入细胞和Matrigel.用4%甲睡闳定己经便入到爽下側的细胞， 使用解刮刀刀刃将多孔獲从侵入宜移出，安放在包舍核染色刑DAPI 的显稞镜承物玻璃片上(使用来自Molecular Probes, Eug棚e, Oregon, USA的Vectasbield ).用爽光显樣铣通过以2倍的放大率现察每块媒 上5个分开的区域并计算每个区域中的细胞数重来量度细胞侵入.根 据每区域的平均细胞或相对于对照的便入百分率标绘数振. (f)细胞粘着试验
用基质胶(SO叫/孔)包被96孔平亚的孔，在无錄组织培养革中 风干过夜.收集对数期生长的细胞，在包舍速当浓度柙制刑化合物(或
29抑制刑化合物的組合)的培养基中调节浓度为每毫升2 x10s个细胞. 试样重的细胞(2><104细胞)被接种到每个孔中，平皿在371C下培养 30分钟.在每孔加入150 pl的MTT溶液(无血清培养基中O.S mg/ml) 前，用PBS洗孔两次以除去未结合的细胞.371C下进一步培养平亚4 个小时以使得四唑晶体在细胞中发展.从孔中除去MTT溶液，4TC下 用10% TX-100溶液提取染料过夜.用装备有540 nro滤光器的Titerteck Multiskan EL1SA平亚读数器(Flow Laboratories, UK)測量吸光率. 响应治疗的细胞粘着被计算为在对照(未处理)孔中粘着的细胞的百 分比.
(g)体外c-Src转染NIH 3T3 (c-豕rc 3T3)成纤堆细應增殖试验 该试检測定測试化合物(或測试化合物的组合)抑制用人c-Src的 活化突变体(Y530F)穗定转染的美国全国卫生研究所(NIH)小鼠3T3 成纤维细胞増殖的能力.
使用类似于Shalloway等人，Cell, 1987, 49, 65^73所迷的方法， 用人c-Src的活化突变体(Y530F)转染N1H 3T3细應.获得的c-Src 3T3 细胞一舦以每孔1,5>004个接种到96孔组织培养物处理的清洁的试脍 平亚(Costar)中，其每个包含含有Dulbecco，s改良的Eagk，s培养基 (DMEM; Sigma )加上0.9%氣化钠水溶液中0.5%胎牛血清(FCS)、 2 mM谷酰胺、100羊位/ml青審素和0.1 mg/ml链審素的试验培养基 平皿在漸湿 (7.5%0>2:95%空气)的培养器中37TC下培养过夜.
经測试化合物溶解到DMSO中以形成10 mM贮存溶液，用上迷 DMEM培养基稀释试样量的贮存溶液并加入到适当的孔中.进行连续 稀释以产生测试浓度的范两.每个平i都包括没有加入測试化合物的 对照孔.平亚在湘湿(7.5%0)2:95%空气)的培养器中""下培养过夜.
在包含0.5% FCS的DMEM培养基中以1:100的系数稀释BrdU 标记试剂(Boeh"nger Mannheim Catalogue No, 647 229),加入试样 量(20 MU到每个孔中以产生10pM的终浓度).平皿37C下培养2 小时.轻轻倒出培养基.加入变性溶液(FixDenatsolution, Boehringer Mannheim Catalogue No. 647 229; 50^1)到每个孔中，平亚在室湿下 直于平皿接晃器上45分钟.轻轻倒出上清液，用PBS洗孔(每孔200 Ml).在包含1% BSA和0.025%千脱脚扎(Marvd(注册商标)，PremierBeverages, Stafford, GB)的PBS中以1:100的系数稀释抗-BrdU-过 氣化物味溶浪(Boebringer Mannheim Catalogue No. 647 229)，加入
试样量uoo的获得的溶液到每个孔中.平瓜在室a下置于平皿接
晃器上90分钟.用PBS (xS)洗孔以保证除去未錄合的抗体共耗物. 吸干平皿，向每孔中加入四甲基对二氛基联苯(Boehringer Mannheim Catalogue No. 647 229; 100 .平皿在平皿採晃器上轻轻的接动， 在10到20分钟的时间中逐步显示出颜色.在6卯nm測量孔的吸光率. 測定在每个測试化合物(或測试化合物的组合)在浓度范田中对细胞 増殖的抑制程度，导出抗增殖的ICw值. (h)体外徵滴迁移试狯
该试狳測定測试化合物(或測试化合物的组合)抑制粘着的喷乳 动物细乾系，如人肿痛细胞系AS49迁移的能力.
水浴加热包含10°/。 FCS、 1%卜谷酰胜和0.3%沐脂棘(Difco Ca德gue No, 0142-01)的RPMI培养基(Sigma)到37" 离压灭瓣 贮存的2%沐脂水溶液，42TC保存.即将使用前将试样重(l.S ml)琼 脂溶液加入到RPMI培养基(10 ml)中.以2 x 107细胞/m，的浓度将 AS49细胞(编号No. ATCC CCL185)悬浮于培养基中，保持在37X3 的湿度下.
用吸移管将小滴(2nU细胞/球脂糖混合物转移到许多96孔，平 底的未用组织培养物处理的徵重平皿(BU)by Sterilin Catalogue No. 642000)的每个孔的中心.平皿暂时置于水上以加速含沐脂糖小滴的 凝胶化.冷至4TC的试样量(90nl)的培养基被转移到每个孔中，注意 不要扰乱徵滴.使用上迷的RPMI培养基从DMSO中10 mM贮存溶 液稀释测试化合物.转移试样量(10 nl)稀释的測试化合物到孔中， 再次注意不要扰乱橄滴.平皿在湘湿(7.5%0)2:95%空气)的培养審 中37C下培养幼小时.
直现评估迁移，測量回到琼脚小滴边缘的迁移距离.通过标绘与 測试化合物浓度成对照的平均迁移測量值获得迁移抑制ic". (O体内异种移植物生长试脍
这个试脍測定本发明的组合产品抑制生长为无胸腺棵鼠中肿痛的 人和/或小氣肿病生长的能力 适合用于注射的癌细胞包括人MCF7扎 脒癌细胞(可获自American Type Culture Collection, 10801 UniversityBoulevard, Manassas, VA 20110>2209; Cat, No. HTB-22、 c-Src特染 小鼠3T3成叶维癌细胞(通过ShaUoway等人，Cell, 1987， 49， 65-73所述的类似的方法用人c-Src的活化突变体(Y530F)梓染)、人 LoVo结脉直肠癌细胞(可获自European CoHection of Cell Cultures, ECACC, CAMR， Salisbury, Wi，tsWre, SP4 0JG， UK; Cat.No.CCL 229 )、人CaLu-6肺癌细胞(ATCC Cat, No, HTB-S6 )和人A549 NSCLC 癌症细胞(ATCCCat,No,CCL18S).
在0.1 ml的基质欣(Beckton Dickinson Catalogue No, 40234)和 Eagle's MiiUmuin Essential Medium ( EMEM; Gibco Catalogue No 21090-022)的1:1混合物中的总共大约1 x 106个人类痛细胞被皮下注 射到每个測试小鼠的側腹，让所产生的肿痛生长约IO天.挑选动物以
获得平均胂摻体积大致两等的对照和治疗组，将每个组合产品制备为 1%聚山梨醇據中的球磨悉浮液-80栽体(以适当的拥试剂量每10 g体 重O.l roU ，每日口服一次从第10天开始进行约28天的时间.每周使 用卡尺測量两次肿病大小，计算理论体积.评估对肿瘤生长的效果.
通常，在一个或多个上述试脍中当单独使用时Src激錄抑制刑 AZD0530所具有的活性可以在下列浓度或刑重显示-
试搶(a ):-在例如0,1-5 nM范 中的ICM;
试松(b):-在例如(U-l 范闺中的ICM;
试验(d):-对大约0.lMM的"Taro-R"细胞ICS0;
试胗(e):-对大约0，1 的"Tam-R"细胞IC幼；
试搶(f):-在例如0.1-1 nM范田中的ICso;
试验(g):-在例如0.1-5 pM范田中有活性；
试验(h):-在例如O,l-SpM范田中有活性；
试脍(i) : - activity in the range, for example, 1-200 mg/kg/day,
通常，当Src激錄押制刑AZD0S30在一个或多个上迷试检中与抗 雄激素和/或EGFR TKI联合使用时，可以塞示超过单独AZD0530所 示的増加的活性.可选的，在一个或多个上述试搶中当与抗雄激素和/ 或EGFR TKI联合使用时Src激醉抑制刑AZD0S30所具有的活性可以
在更低的浓度或刑重显示.
例如，当AZD0530 ((U pM)和ZD1839 ( 1 pM)的組合被用于
"Tam-R"细胞，可以显示下列活性-试狳(d) : 大约IC"效果； 试验(e):-大约IC^效果；
并且当AZD0S30( 1 )和ZD1839( 1 )的組合被用于"Tam-R 细胞，可以显示下列活性-
试验(d):-大约ICw效果； 试验(e) : 大约IC7o效果.
权利要求
1.适合用于协同治疗乳腺癌的组合，其包括抗雌激素和Src激酶抑制剂AZD0530或其药学可接受的盐。
2. 适合协同治疗乳腺癌的药物組合物，其包含权利要求1所述的 组合与药学可接受的赋形刑或栽体.
3. 权利要求2所述的药物组合物，其包含抗雌激素、Src激醉抑制 刑AZD0S30或其药学可接受的盐，和药学可接受的赋形刑或栽体.
4. 权利要求2所述的药物组合物，其包括，包含抗雌激素和葯学 可接受的赋形刑或栽体的第一组合物，和包含Src激醉抑制刑AZD0530 或其药学可接受的盐和药学可接受的赋形刑或栽体的笫二組合物.
5. 权利要求1所述組合在制备用于给药温血动物以协同治疗乳腺 癌的药物中的应用，
6. 权利要求1所述组合在制备用于给药温血动物以治疗抗雌激素 抗性乳腺癌的药物中的应用.
7. 用于延緩乳腺癌从激素应答向激素无应答状态发展的权利要求 1所述的包含抗雌激素和Src激醉抑制刑AZD0530或其药学可接受盐 的組合.
8. 用于减少正常乳腺细胞向DCIS状态转变的权利要求1所述的 包含抗雌激素和Src激醉抑制刑AZD0S30或其药学可接受盐的组合.
9. 用于减少正常乳腺细胞或DCIS细胞向恶性状态转变的权利要 求1所迷的包含抗雄激素和Src激醉抑制刑AZD0530或其药学可接受 盐的组合.
10. 适合用于协同治疗乳腺癌的三部分组合，其包括抗蟀激素、 EGFR TKI或其药学可接受的盐，和Six激蘇抑制刑AZD0530或其药学 可接受的盐.
11. 适合用于协同治疗乳腺癌的药物組合物，其包含权利要求10 所述的三部分组合与药学可接受的赋形刑或栽体.
12. 适合用于协同治疗乳腺癌的药物組合物，其包含权利要求10 所述的抗雌激素、EGFR TKI或其药学可接受的盐和Src激醉抑制刑 AZD0530或其药学可接受的盐的组合与药学可接受的赋形刑或栽体.
13. 如权利要求11所述的药物組合物，其包括，包舍抗雄激素和 药学可接受的赋形刑或栽体的笫一組合物、包含EGFR TKI或其葯学可接受的盐和药学可接受的赋形刑或栽体的笫二组合物，和包含Six 激酵抑制刑AZD0530或其药学可接受的盐和药学可接受的赋形刑或栽 体的笫三组合物.
14. 权利要求10所述的三部分组合在制备用于给药温血动物以协 同治疗乳腺癌的药物中的应用.
15. 权利要求10所述的三部分组合在制备用于给药温血动物以治 疗抗雌激素抗性乳腺癌的药物中的应用.
16. 权利要求10所述的三部分组合在制备用于给药温血动物以治 疗EGFRTKI抗性乳腺癌的药物中的应用.
17. 权利要求10所述的三部分组合在制备用于给药温血动物以治 疗对抗雌激素和EGFR TKI治疗都具有抗性的乳腺癌的药物中的应 用.
18. 用于延緩乳腺癌从激素应答向激素无应答状态发展的权利要 求10所述的三部分组合，其包舍抗雌激素、EGFR TKI或其药学可接 受的盐和Src激睐抑制刑AZD0530或其药学可接受的盐.
19. 用于减少正常乳腺细胞向DCIS状态转变的权利要求10所述 的三部分组合，其包含抗雌激素、EGFR TKI或其药学可接受的盐和 Src激醉抑制刑AZD0530或其药学可接受的盐.
20. 用于减少正常乳腺细胞或DCIS细胞向恶性状态转变的权利要 求10所述的三部分组合，其包含抗雌激素、EGFR TKI或其药学可接 受的盐和Src激酶抑制刑AZD0530或其药学可接受的盐.
全文摘要
本发明涉及包含抗雌激素和Src激酶抑制剂AZD0530的用于协同治疗乳腺癌的组合，包含EGFR TKI和Src激酶抑制剂AZD0530的用于协同治疗癌症的组合，以及包含抗雌激素、EGFR TKI和Src激酶抑制剂AZD0530的用于协同治疗乳腺癌的三部分组合。
文档编号A61K45/00GK101664554SQ20091017316
公开日2010年3月10日 申请日期2005年5月26日 优先权日2004年5月29日
发明者T·P·格林 申请人:阿斯利康(瑞典)有限公司
最新回复(0)