一种稳定的多西他赛亚微乳注射剂及冻干乳剂的制备方法

专利名称：：一种稳定的多西他赛亚微乳注射剂及冻干乳剂的制备方法
技术领域：
：本发明属于医药制剂
技术领域：
，涉及多西他赛亚微乳注射剂及冻干乳剂的制备方法。
背景技术：
：多西他赛(Docetaxel)又名多烯紫杉醇，属紫杉烷类化合物，化学名为[2aR-(2aa，4β，4αβ，6β，9α，(aR*，βS*)，11α，12α，12aα，12bα)]-β-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-α-羰基苯丙酸[12b-乙酰氧-12-苯甲酰氧_2a，3，4，4a，5，6，9，10，11，12，12a，12b-十二氢-4,6,11-三羟基-4a,8,13，13-四甲基~5~氧代-7，11-亚甲基-IH-环癸五烯并[3,4]苯并[1,2-b]氧杂丁环-9-基]酯；其分子式为=C43H53NO14；分子量807.89。是由欧洲浆果紫杉针叶中提取的无活性化合物，再经半合成得到的产物。1994年由法国罗纳普克乐安公司开发成功，用作乳腺癌、非小细胞肺癌的化疗药物。1995年首次在墨西哥、南非、加拿大上市。1996年获得美国FDA批准，用于化疗失败的转移性乳腺癌和钼类治疗失败的转移性非小细胞肺癌的治疗，随后在英、法、意、德、日等33个国家上市，成为治疗转移性乳腺癌和非小细胞性肺癌最有效的单剂、首选化疗药物。2006年3月美国FDA批准用于治疗晚期胃癌。2002年起，我国也出现多家企业仿制该品。多西他赛本身为抗肿瘤药物，其毒副作用较大，又因多西他赛在水中的溶解度极小，只有0.006mg/ml，限制了其在体内的生物利用度。为了增大溶解度，目前，多西他赛市售制剂多以吐温-80为增溶剂，临床应用时，以配有的13%乙醇溶液稀释，静脉滴注。吐温-80具有溶血性，且静脉注射会加重患者的过敏反应，使患者出现呼吸困难、血管性水肿、低血压、风疹等过敏样反应以及休克等严重不良反应，甚至出现死亡。故多西他赛注射剂在临床应用前和应用过程中，要口服、肌注大量激素类药物进行脱敏干预，如此，仍然有相当比例的患者会发生过敏反应，给患者造成了极大的痛苦。目前，有较多的有关多西他赛亚微乳及冻干乳剂的文献和专利申请，有些专利申请处方所用的油相对多西他赛的溶解能力有限，使制剂规格达不到临床的一次最小使用剂量，即制剂载药量小；在稳定性方面，如中国专利公开号为CN1709236A的专利申请，乳剂最终在110-12(TC流通蒸汽灭菌，这样的灭菌工艺，会导致主药多西他赛含量大幅下降，乳滴聚集，粒径增大，甚至发生乳剂分层、产生沉淀的现象，制剂稳定性差。因此，仍有必要开发新的乳剂组合物及采用新的除菌工艺来满足临床需求。
发明内容本发明的优点在于，避免使用能加重过敏反应的增溶剂辅料，找到了对多西他赛有较大溶解度的油相，筛选出能减少过敏反应且增大乳剂稳定性的乳化剂，从而制备出稳定的、高载药量、供静脉注射的多西他赛亚微乳注射剂剂及冻干乳剂。同时，发现了现有技术中流通蒸汽灭菌导致乳剂不稳定的缺陷，采用了微孔滤膜过滤除菌的灭菌方式，保证了乳剂的稳定性，虽然该灭菌方式是现有技术已知的，但是本申请的贡献在于发现了改变灭菌方式可以改善乳剂稳定性这一技术问题，并取得了良好的技术效果。本发明涉及一种治疗肿瘤疾病的含有多西他赛的亚微乳注射剂及冻干乳剂的制备方法，亚微乳注射剂的组分及含量为多西他赛l-10mg/ml注射用油50-200mg/ml乳化剂10_50mg/ml稳定剂2-10mg/ml等渗调节剂10_25mg/mlpH值调节剂适量，调节至4.5-6.0注射用水至适量。在上述注射剂中加入冻干支持剂100-300mg/ml，常规方法冻干即获得冻干乳剂。所述亚微乳注射剂或冻干乳剂复溶后的乳剂平均粒径为100-200nm。所述注射用油为油酸乙酯、辛酸癸酸脂肪酸甘油三酯、油酸聚乙二醇甘油酯、精制大豆油中的一种或几种。所述乳化剂为泊洛沙姆、大豆磷脂、卵磷脂PC-98T中的一种或几种。所述稳定剂为油酸。所述等渗调节剂为丙三醇、氯化钠、葡萄糖中的一种或几种。所述冻干支持剂为甘露醇、山梨醇、乳糖、麦芽糖、海藻糖中的一种或几种。所述pH值调节剂为枸橼酸、乳酸、枸橼酸钠、碳酸氢钠中的一种或几种。本发明制备方法如下1)将多西他赛、乳化剂加入到注射用油中，加热、搅拌，使溶解，温度控制在50-70°C，加入稳定剂，得油相；2):将等渗调节剂加入到一定量的注射用水中，加热，温度控制在50-60°C，得水相；3)在高速搅拌下，将上述油相加入上述水相中，继续搅拌3-5分钟，得初乳，控制平均粒径为2-5μπι；补充适量注射用水至初乳中，调节pH值至4.5-6.0；所得初乳加入超高压均质机，控制压力lOOOMpa，均质2_4次，得多西他赛亚微乳注射剂，乳剂的平均粒径为100-150nm。4)所得多西他赛亚微乳注射剂用0.22μm的除菌级微孔滤膜过滤器过滤除菌，灌装，制成注射剂产品；或者将冻干支持剂加入到上述多西他赛亚微乳注射剂中，重新调节pH值至4.5-6.0；用0.22μm的微孔滤膜过滤器过滤除菌后灌装，冻干，制成冻干乳剂，制得的冻干乳剂复溶后，平均粒径为150-200nm。具体实施例方式实施例1多西他赛Ig辛酸癸酸脂肪酸甘油三酯50g大豆磷脂25g油酸4g丙三醇25g枸橼酸调节pH值至5.0注射用水至IOOOml油相将多西他赛、大豆磷脂加入辛酸癸酸脂肪酸甘油三酯中，加热、搅拌，使溶解，温度控制在50-70°C，加入油酸，得油相。水相将丙三醇加入800ml的注射用水中，加热，温度控制在50_60°C，得水相。在高速搅拌下，将上述油相加入上述水相中，继续搅拌3-5分钟，得初乳，平均粒径为2.Ομ。将注射用水加入初乳中至1000ml，调节pH值至5.O初乳加入超高压均质机，控制压力IOOOMPa左右，均质3次，得多西他赛亚微乳剂。用0.22μm的除菌级微孔滤膜过滤器过滤除菌，灌装，即得多西他赛亚微乳剂。实施例2多西他赛2g大豆油50g油酸乙酯50g卵磷脂PC-98T35g油酸4.8g丙三醇25g枸橼酸调节pH值至5.O注射用水至IOOOml制备步骤同实施例1.实施例3多西他赛5g大豆油50g辛酸癸酸脂肪酸甘油三酯IOOg卵磷脂PC-98T25g泊洛沙姆25g油酸4.8g丙三醇25g枸橼酸调节pH值至5.O注射用水至IOOOml制备步骤同实施例1.实施例4多西他赛IOg辛酸癸酸脂肪酸甘油三酯50g油酸乙酯IOOg卵磷脂PC-98T50g油酸4.8g丙三醇25g枸橼酸调节pH值至5.0注射用水至IOOOml制备步骤同实施例1.实施例5多西他赛IOg油酸聚乙二醇甘油酯IOOg油酸乙酯50g卵磷脂PC-98T25g泊洛沙姆25g油酸4.8g丙三醇25g枸橼酸调节pH值至5.0注射用水至IOOOml制备步骤同实施例1.实施例6多西他赛Ig辛酸癸酸脂肪酸甘油三酯50g大豆磷脂25g油酸4.8g丙三醇25g枸橼酸调节pH值至5.0注射用水至IOOOml油相将多西他赛、大豆磷脂加入辛酸癸酸脂肪酸甘油三酯中，加热、搅拌，使溶解，温度控制在60_70°C，加入油酸，得油相。水相将丙三醇加入800ml的注射用水中，加热，温度控制在60°C，得水相。在高速搅拌下，将上述油相加入上述水相中，继续搅拌3-5分钟，得初乳，平均粒径为:2.Ομο将注射用水加入初乳中至1000ml，调节pH值至5.0初乳加入超高压均质机，控制压力IOOOMPa左右，均质3次，得多西他赛亚微乳剂。加入冻干支持剂，用0.22μm的除菌级微孔滤膜过滤器过滤除菌，灌装，冻干，即得多西他赛冻干乳剂。实施例7处方同实施例2，制备步骤同实施例6。实施例8处方同实施例3，制备步骤同实施例6。实施例9处方同实施例4，制备步骤同实施例6。实施例10处方同实施例5，制备步骤同实施例6。实施例11将本实施例1和例7制得的多西他赛亚微乳剂及冻干乳剂与市售制剂在25°C贮存条件下，考察性状、含量、粒径，得出稳定性结论。考察结果如表1:表1<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>结论本实施例1和例7制得的多西他赛亚微乳剂及冻干乳剂在考察期内制剂稳定，质量可控。实施例12本实施例1和例7制得的多西他赛亚微乳剂及冻干乳剂与市售制剂的溶血性实验家兔耳缘静脉采血，以竹签搅拌去纤维蛋白后，用生理盐水洗涤后离心(2000rpm)，除掉上清液，再以生理盐水反复洗涤数次(均离心弃去上清液)直至上清液无红色，然后按体积比用生理盐水配成2%红细胞混悬液备用。取试管17只，按表2所示，各管分别加入不同体积的药液和相同体积的红细胞混悬液，其中第16管不加药，为0.9%氯化钠注射液空白对照，第17管加蒸馏水作为完全溶血对照(阳性对照管)。各管轻轻摇勻后，置37°C水浴中温孵4小时，观察0.25小时至4.O小时内各管是否有溶血及红细胞聚集现象，结果见表2.表2<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>-表示无溶血；士表示部分溶血；+表示全溶血。结论本实施例1和例7制得的多西他赛亚微乳剂及冻干乳剂无溶血作用。实施例13本实施例1和例7制得的多西他赛亚微乳剂及冻干乳剂与市售制剂的过敏性实验取豚鼠30只，雌雄各半，体重250-300g，随机分为5组，每组6只。三组实验组分别腹腔注射多西他赛亚微乳剂、冻干乳剂、市售制剂的溶液，0.5ml/只，空白对照组注射相同体积的0.9%氯化钠注射液，阳性对照组注射2%新鲜蛋清0.5ml/只。隔日一次，共三次。首次给药后14天、21天，每组随机取3只，实验组分别由股静脉注射多西他赛亚微乳剂、冻干乳剂、市售制剂的溶液1.Oml/只，空白对照组和阳性对照组分别由股静脉注射0.9%氯化钠注射液和2%新鲜蛋清1.Oml/只，给药后立即观察动物有无喷嚏、搔鼻(1级)、干呕或咳嗽、竖毛(2级)、抽搐、呼吸困难(3级)、大小便失禁、休克和死亡(4级)等过敏反应，观察1小时。实验结果见表3。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>(-)表示无过敏反应；(+)表示有过敏反应。结论本实施例1和例7制得的多西他赛亚微乳剂及冻干乳剂无明显的过敏反应。权利要求一种多西他赛亚微乳注射剂，成分及含量为多西他赛1-10mg/ml注射用油50-200mg/ml乳化剂10-50mg/ml稳定剂2-10mg/ml等渗调节剂10-25mg/mlpH值调节剂适量调节至4.5-6.0注射用水适量。2.根据权利要求1所述的多西他赛亚微乳注射剂，其中所用注射用油为油酸乙酯、辛酸癸酸脂肪酸甘油三酯、油酸聚乙二醇甘油酯、精制大豆油中的一种或几种。3.根据权利要求1-2中任一项所述的多西他赛亚微乳注射剂，其中所用乳化剂为泊洛沙姆、大豆磷脂、卵磷脂PC-98T中的一种或几种。4.根据权利要求1-3中任一项所述的多西他赛亚微乳注射剂，其中所用稳定剂为油酸。5.根据权利要求1-4中任一项所述的多西他赛亚微乳注射剂，其中所用等渗调节剂为丙三醇、氯化钠、葡萄糖中的一种或几种。6.根据权利要求1-5中任一项所述的多西他赛亚微乳注射剂，其中所用PH调节剂为枸橼酸、乳酸、枸橼酸钠、碳酸氢钠中的一种或几种。7.根据权利要求1-6中任一项所述的多西他赛亚微乳注射剂的制备方法，包括如下步骤1)将多西他赛、乳化剂加入到注射用油中，加热、搅拌，使溶解，温度控制在50-70°C，加入稳定剂，得油相；2)将等渗调节剂加入到一定量的注射用水中，加热，温度控制在50-60°C，得水相；3)在高速搅拌下，将上述油相加入上述水相中，继续搅拌3-5分钟，得初乳，控制平均粒径为:2-5ym；补充适量注射用水至初乳中，调节PH值至4.5-6.O；所得初乳加入超高压均质机中，控制压力lOOOMpa，均质2-4次，得多西他赛亚微乳注射剂。8.权利要求7所述的制备方法，其中所得亚微乳注射剂的平均粒径为100-150nm。9.一种多西他赛冻干乳剂，其特征在于向权利要求1-6中任一项所述的多西他赛亚微乳注射剂中加入冻干支持剂100-300mg/ml，冻干获得。10.根据权利要求9所述的多西他赛冻干乳剂，其中所用冻干支持剂为甘露醇、山梨醇、乳糖、麦芽糖、海藻糖中的一种或多种。11.根据权利要求9所述的多西他赛冻干乳剂的制备方法，包括如下步骤1)将多西他赛、乳化剂加入到注射用油中，加热、搅拌，使溶解，温度控制在50-70°C，加入稳定剂，得油相；2)将等渗调节剂加入到一定量的注射用水中，加热，温度控制在50-60°C，得水相；3)在高速搅拌下，将上述油相加入上述水相中，继续搅拌3-5分钟，得初乳，控制平均粒径为:2-5μπι；补充适量注射用水至初乳中，调节PH值至4.5-6.O；所得初乳加入超高压均质机中，控制压力lOOOMpa，均质24次，得多西他赛亚微乳注射剂；4)将冻干支持剂加入到上述多西他赛亚微乳注射剂中，重新调节pH值至4.5-6.0；5)冻干，即得多西他赛冻干乳剂。12.权利要求11所述的制备方法，其中冻干乳剂复溶后，粒径为150-200nm。13.权利要求7或权利要求11的制备方法，其中多西他赛亚微乳注射剂用0.22μm的微孔滤膜过滤器过滤除菌后灌装，多西他赛冻干乳剂冻干前用0.22μm的微孔滤膜过滤器过滤除菌，灌装，冻干。全文摘要本发明公开了一种稳定的、高载药量的供静脉注射用多西他赛亚微乳注射剂及冻干乳剂的制备方法。亚微乳主要活性成分为多西他赛，辅料为注射用油、乳化剂、稳定剂、等渗调节剂、冻干支持剂及注射用水。多西他赛的含量为1-10mg/ml。本发明的乳剂粒径小，亚微乳注射剂及冻干乳剂复溶后的粒径范围为100-200nm。本发明通过选择合适的油相和乳化剂，优化制备工艺，使制得的多西他赛亚微乳剂及冻干乳剂具有载药量高、稳定性好、易于工业化生产、临床适用性强等特点。文档编号A61K9/19GK101810574SQ20091017702公开日2010年8月25日申请日期2009年9月17日优先权日2009年9月17日发明者冯仲异,史朝晖,陈容申请人:海南碧凯药业有限公司