热淋清浸膏及其制备方法和用途的制作方法

专利名称：：热淋清浸膏及其制备方法和用途的制作方法热淋清浸骨及其制备方法和用途才W赋械明涉及中药4赋*^言,械明涉及娜賴膏及其牵恪方法kX^i根膏作为药辆拥逸總沐头^(ft4go,aptoftwBudV"HaniexDI)on);l^f牛^i^直物，为多卑生草本别名四季红、石粹、石#膝7K4^求、i^t^丁、》'彰衫工等。在中国贵州、云南、广西、四川、西藏、湖北、湖辆江西等地区i械分布，主##山坡、山^^^富^^錄的沙页岩i錄。全^W清热if4、、*^功氣据1963年《广西中药志》第二删饿，头一t^主要用亍治疗恥显痛；1977年《中药大辞典》上断饿，头;S^主要用亍治疗痢疾、肾炎、膀胱炎和#石等。民间-^lf^t^用7K煎服，治疗岁踩t^交明显，^^阴不方H中国专利申请^^i兑明书CN1054899A中7請了-^f^^灵冲剂、糖^_产工艺，该方法是将中草药头繊至煎煮鄉虑，；4^宿成膏状，再用鴻是取2-3次，真空棘鹏曼膏，期争是膏分别命J^^H戈冲剂。该生产工艺^Zi舌菔煮、农宿、提取、再农宿^"骤，工艺复杂，而且，该方法得到的;^Jt^灵冲剂的药效学岁i^^射是高。我们贵州威门药財1^/^]长4;于中草药头;^勺开发利用鹏，我^ll^^n^煎煮两;^^逸虑i^宿制成热i^青茅辩立，该制剂7/Hf在中华A^^和国卫生部药典委员会1998賴的中华A^^和国卫生部〈銜。。4和佳--中药^^制剂》(第十七册)中，<统^"嗽的不邮^^,^C明/d5见，1998賴的中华A^^和国卫生部《药品标雄--中药^"制剂》(第十七册)中的^^^青茅Mi的命l^工艺中，^R^4'賴'J方法J^v^好各，t^、该工艺，将1000克头花蓼煎煮，不可能帝威400拔膏婉立，即1^口Aitf^嫩，制成800克娜青颗抵这种热沐會茅嫩制剂由f射M^t低其药理学岁i^差。械B月Aif浙中草药头^fii行长^f发顺，辨吉合药理学逸^^现，通iit^^耳^4'转'J工艺，得到的头4t^t是fyf勿的药您舌性明显提高，并发5iiLii种头^t^树4fi^"賴々疗^
发明内容因》匕，^^明的目的^i是供了^H^^彰旻膏；^^明的另一发明目的^^供了^t帝J^^彰曼膏的方法；^^明的另一发明目的是提供了*^彰曼膏用于命洛抗菌、抗炎、科'鹏药物的用逸^^明的另一发明目的是提供了含有^^明^^彰旻膏的药4Ma^勿。极明的目的是通itT列方法实现的。;^^明人分另树头;^勺不同药用柳iii行了舰，对头;ftf"全草、头^^iLh粉、叶、种子、茎械粉别进行了提耳沐刮^,极明嫂现，头繊衬、种子、茎械4,药彰封生是有别的，抗i^封:4^i^^勿为最佳抗菌活|"生的强弱;'11^是#">。1>茎>根^!^A^^—发现中得到启示，用头^^^kJ^[^a^^充使用的头^^全草进^^S^这才弁无^#高了提取旻膏的药学活性，又敏翻头緣银部。由于头錄是賴直物，W钏期艮部，可^€^采集头^将期艮省,,这样，头銶可以私既w了樹猜源，有銜户了厕直被，劍称资源械樹睹重要意义*^言，极日服供了-^t娜緣膏，糊硪于由头緣全草的^誠干品用水分1-3次煎煮，每次1-2小时，*煎瓶顿棘至85。C时賴时密颜1.05-1.25、1~1.2，更舰l.2时，得到浸膏，然后经够千燥，得到浸膏粉。^!明的另"H;fc^^支^C方^l在i^l:"^^^1t力口A^^书定:^,伊淑口入重量比5%的丰^K定粉。械明的另-^i^M^^^其中头^f^D其:l4Jl吾盼，其中头^f^Jl吾l^是叶、花和茎。;^^明的药4Ma^t勿可以帝威片剂、茅辩立剂、丸剂、月自'、^#"剂、^4t剂、$絲'、栓剂、滴丸剂、射寸、搭傳j、贝^寸、月鼓'J、纸型剂、〉瓦悬剂、西a'J、干沣唐叙'J、；^J^片、石更膏剂、4欠膏剂、才唐叙'J、吝'L^寸、糊、緩释、控糊剂及輩响制剂，舰制颠嫩剂。一、提*>洛^^明的热^j争旻膏是通itr列方法得到的才財居国家食品药品监"f"fS^的有^M^，以命械品量1000g为^i^计算头^^材的用量。才財居原标碓中头jt^药材的用量，i^5角定帝J^热沐青颗农(含^T唐)1000g，热沐青颗恭(^FM)500g戶赠头4t^艘为1250g。娜青婉aW飾錄有明榭耽干默法。财千駄繊亍了術脱热淋漸旻膏原主^M^辩g千M方式主要有常温千J^^a干聚其中，^f]常温干J^j^i干燥的方法，不姻树长浸膏干驗为块状物，还需进4賴沐砂卜，鰣后浸膏粉易口魏雄不利于保存。后辆的喷雾干燥生产工艺简使可实现头;^^是耳5^辆々瞬间干騰其均匀4Mrt^量辦统，干激斤得妳曼膏4斜S^甜，同时，瑜絲'J成。口^^青颗4i^质量。实施例1:常温干燥(编号W-l)取头花蓼220Kg，加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20±0.05(85°〇)的清膏，滤过，常温干燥。实施例2:减压干燥(编号W-2)取头花蓼220Kg，加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为120士0.05(85。C)的清膏，滤过，减压干燥。实施例3:喷雾干燥(编号W-3)取头花蓼220Kg，加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.10士0.05(85X:)的清膏,滤过，喷雾干燥。实施例4:浸膏加5%的可溶性淀粉喷雾干燥(编号W-4)取头花蓼220Kg,加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20士0.05(85。C)的清膏，滤过，加重量比5%可溶性淀粉混匀，喷雾干燥。实施例5:浸膏加10%的可溶性淀粉喷雾干燥(编号W-5)取头花蓼220Kg,加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为U0士0.05(85。C)的清膏，滤过，加重量比10%可溶性淀粉混匀，喷雾干燥。实施例6:浸膏加5%的糊精喷雾干燥(编号W-6)取头花蓼220Kg,加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为U0i0.05(8rC)的清膏，滤过，加重量比5%糊精混匀，喷雾干燥。<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>可以看出，热淋清浸膏采用直接喷雾干燥或先加5%的可溶性淀粉与浸膏混合后再喷雾干燥两种方式均可，但采用加入淀粉较不加淀粉所得的浸膏粉性质更加稳定，其制成品的含量也较方法1所得浸膏制成品的含量为高。喷雾干燥较传统蒸发操作与减压干燥工艺相比耗时短、干燥质量好、省去蒸发、粉碎等工序。大大提高了生产效率，同时又能相对提高干燥成品热淋清浸膏的质量，因喷雾干燥所得的热淋清浸膏粉为粉末状，较传统干燥成品的流动性好，含水量小，质地均匀，溶解性好。喷雾干燥具传热快，水分蒸发迅速，瞬间干燥的特点，所得的热淋清浸膏质量好，质地松脆，溶解性能也好，改善了成品制剂热淋清颗粒的溶出速率。以上试验结果也表明采用喷雾干燥所得的样品收率较高，水份含量均勾，浸膏粉溶化性好，总黄酮及没食子酸含量较高，稳定性好，同时，采用喷雾干燥还可大大缩短干燥时间，节约成本。故确定采用喷雾千燥。其中，釆用常规喷雾干燥，与采用浸膏加5%可溶性淀粉喷雾所得的浸膏就有效成分的含量及稳定性而言，以后者更好。二药效^^t对上述提取物w-3、w-4进行药效学研究发现，具有良好的抗菌、抗炎、镇痛、利尿、排石、治疗肾盂肾炎等药理活性。具体实验内容及结果如下试验一热淋清浸骨粉抗炎作用试验1.热淋清浸骨粉对角叉菜胶诱起的大鼠足跖肺胀的影响样品配制方法受试药物热淋清浸膏粉w-3、w-4系头花蓼水提取粉，深棕色粉末，临用时用蒸馏水研磨配成所需浓度。阳性药物氢化可的松原料，系白色粉末。试剂角叉菜胶临用时用生理盐水配成1%浓度。实验方法64只大鼠，随机均分8组，每组8只，雌雄各半，按表l-l设计剂量给药，每天灌服给药一次，连续6次，但氢化可的松在第6天给药，只给一次。末次给药后立即用外径千分尺测所有大鼠右前肢足跖外直径。末次给药后1小时所有大鼠右前肢足跖处皮下注射1。/。角叉菜胶溶液0.1ml/只，注射角叉菜胶后l、2、3、4及6小时测所有大鼠右前肢足跖处直径，所测得的各值减去相应的用药前测得的右前肢足跖处直径作为肿胀程度，各用药组平均肺胀程度与对照组进行比较。结果见表l-l。_表l-l大鼠灌服热淋清浸膏对角叉菜胶添g的足媒肿胀的影响_^剂量x次~~^致炎后不同时间大鼠足跖胂胀程度(单位mm~数(g原生药/kg)数(只)1hr2hr±SD)3hr4hr6hr热淋清浸膏粉组(w-3)52.4x680.55±0.33A0.89±0.31.35±0.51A1.46±0.35AA1.34±0.37A热淋清浸膏粉组(w-3)26.2x680.89±0.311.24±0.37A1.59±0.26A1.68±0.27A1.58±0.22A热淋清浸膏粉组(w-3.)13.1x680.95±0.231.55±0.181.84±0.12.02±0.271.89±0.41淋清浸膏粉组(w陽4)5诊680.54±0.37A0.87±0.25AA1.35±0.27A1.47±0.39A厶1.33±0.42A热淋清浸膏粉组(w-4)25.8x680.90±0.241.23±0.38A1.56±0.32A1说±0.21A1.56±0.22A热淋清浸膏粉组(w-4)12.9x680.96±0.211.55±0.431.82±0.232.00±0.431.91±0.21氬化可的松组40mgx180.36±0.18A厶0.42±0.19厶厶0.65±0.24AA0.81±0.27AA0.77±0.27AA对照组蒸馏水x681.12±0.341.69±0.351.99±0.312.18±0.312.01±0.38用注"A""AA"表示与对照組比较p0.05,pO.Ol,如表1-1所示热淋清浸膏粉w-3、w-4对角叉菜胶诱起的大鼠足跖肿胀有明显抗炎作其抗炎作用与剂量有4交好的量效关系。2.热淋清浸骨粉对大鼠棉球肉芽肿的影响样品配制方法受试药物热淋清浸膏粉w-3、w-4系头花蓼水提取粉，深棕色粉末，临用时用蒸馏水研磨配成所需浓度。试验方法动物在戊巴比妥钠麻醉下，右下腋手术放入消毒棉球10mg,术后24小时按表l-2分组灌服给药，每天一次，连续10天，末次给药后次日处死大鼠，将棉球连同周围结締组织一起取出，剔除脂肪组织，放烘箱中7(TC烘干，称重。将称得重量减去10mg棉球重量作为肿胀程度，并用药组与对照组进行比较。结果见表l-2。表l-2大鼠灌服热淋清浸骨粉对棉球肉芽肿的影响组别剂量x给药次数(g原生药/kg)动物数肉芽肿干重(mg)热淋清浸膏粉组(w-3)热淋清浸膏粉组(w-3)热淋清浸膏粉组(w-4)热淋清浸膏粉组(w-4)氢化可的松组对照组52.4x1026.2x1051.6x1025.8"0翻g/Kgx1蒸馏水x108988947.7土4.7AA59.9±10.647.5土5.7AA50.2±11.244.5土12.6AA62.9±12.6注"A""AA，，表示与对照组比较p0.05，pO.Ol,由表l-2所示大鼠灌服热淋清浸膏粉52.4g原生药/kg/d,连续10天，以及热淋清浸膏粉(w-4)51.6g原生药/kg/d,连续10天，均对棉球引起的肉芽肿有明显抗炎作用。3.热淋清浸骨粉对小鼠耳肿胀的影响样品配制方法受试药物热淋清浸膏粉w-3、w-4系头花蓼水提取粉，深棕色粉末，临用时用蒸馏水研磨配成所需浓度。致炎剂巴豆油，药用级，临用时用V乙醇V水V乙醚=25:5:70混合溶剂配成1%浓度。试验方法每次试验88只小鼠，随机均分8组，每组ll只，具体分组见下表动物数剂量浓度给药量x给药次数组别(只)(g原生药/kg)(mg样品/ml)(ml/20gx次)对照组11蒸馏水-0.5x5氬化可的^^组1150mg/kg40.4x5热淋清浸膏粉1117.4800.5x5(w國3)热淋清浸膏粉1134.81600.5x5(w-3)热淋清浸膏粉1169.63200.5x5(w-3)热淋清浸膏粉1117.278.50.5x5(w-4)热淋清浸膏粉1134.31570.5x5(w-4)热淋清浸膏粉1168.63140.5x5(w-4)所有小鼠在末次给药后30分钟于右耳涂上致炎剂0.03ml,4小时后，处死动物，剪下左右两耳，用直径为9mm的打孔器沿耳缘于同一部位沖下两耳片，精确称重。以肿胀度和肿胀抑制率作为检测指标。结果见表1-3。表1-3小鼠灌服热淋清浸骨粉对巴豆油引起的耳肿胀的影响组别动物数(g原生药/kg)(只)热淋清浸膏粉组(w-3)热淋清浸膏粉组(w-3)热淋清浸膏粉组(w-3)热淋清浸膏粉组(w-4)热淋清浸膏粉组(w-4)热淋清浸膏粉组(w-4)氢化可的+>组对照组热淋清浸膏粉组(w-3)热淋清浸膏粉组(w-3)热淋清浸膏粉组(w-3)热淋清浸膏粉组(w-4)热淋清浸膏粉组(w隱4)热淋清浸膏粉组(w-4)氢化可的松组对照组69.634.817.468.634.317.2翻g/kg蒸馏水69.634.817.468.634.317.240mg/kg蒸馏水平均肝胀度(mg)肺胀抑制率(％)12.5±5.6**48.614.5±5.6**40.320.9±5.114.013.1±5.1**46.114.5±7.2**40.321.5±5.511.510.4±5.1**57.224.3±5.7-9.0±5.8**60,613.8±6.3**40.323.5±8.7-1.79.9±7.2**57.114.8±5.3**35.922.6±7.92.110.5±5.7**54.523.1±5.6注**表示与对照组比较pO.Ol,试验结果小鼠灌服热淋清浸膏粉(w-3)34.8和69.6原生药g/kg剂量，连续5天，可明显抑制巴豆油引起的耳肿胀，最高肿胀抑制率可达60.6%,并与剂量呈一定的量效关系。此外，小鼠灌服热淋清浸膏粉(w-4)34.3和68.6原生药g/kg剂量，连续5天，可明显抑制巴豆油引起的耳肿胀，最高肿胀抑制率可达57.1%，并与剂量呈一定的量效关系。可见热淋清浸膏粉(w-3、w-4)对巴豆油引起的炎性反应有较好的抗炎作用。综上所述，热淋清浸骨粉具有良好的抗炎活性。试验二热淋清浸骨粉镇痛作用试验l.扭体法镇痛试验样品制备受试药物热淋清浸膏粉w-3、w-4临用时用蒸馏水研磨配成所需浓度。阳性药物罗通定片临用时用0.50/。CMC配制，由四川天策药业有限公司生产。试验方法每次试验80只小鼠，随机均分8组，每組10只，雌雄各半。热淋清浸膏粉w-3、w-4各三组,w-3剂量分别为17.4、34.8、69.6g原生药/kg，w-4剂量分别为17.2、34.3、68.6g原生药/kg,—组罗通定片，剂量50mg/kg/d,另一组为对照灌服等体积的蒸馏水。每天灌服给药一次，连续六天，末次给药后1小时小鼠腹腔注射0.5%水醋酸溶液0.2m1/只，立即观察记录20分钟内动物扭体次数，计算各组动物平均扭体次数。用药组分别与对照组进行比较。结果见表2-1。表2-l小鼠灌服热淋清浸骨粉的镇痛作用(扭体法)_组别剂量x给药次数(g原生药/kg)动物数(只)平均Ja体次数热淋清浸膏粉组(w-3)热淋清浸膏粉组(w-3)热淋清浸膏粉組(w-3)热淋清浸膏粉组(w-4)热淋清浸膏粉组(w隱4)热淋清浸膏粉组(w-4)罗通定片组对照组热淋清浸膏粉组(w隱3)热淋清浸膏粉组(w-3)热淋清浸膏粉组(w-3)热淋清浸膏粉组(w-4)热淋清浸膏粉组(w-4)热淋清浸膏粉组(w-4)罗通定片组对照组69.6x634.8x617.4x668.6x634.3x617.2x650mg/kgx&蒸馏水x669.6x634.8x617.4x668.6x634.3x617.2x650mg/kgx6蒸馏水x6109.8土12.9厶A109.8土13.2AA1014.1士9.1A109.8土12.9AA109.8土13.2AA1014.1土9.1A105.6士6.1AA1027.3±8.61014.9土14.2AA1021.2士18.2A1033.1±12.4109.8土12.9AA109.8土13.2AA1014.1土9.1A1013.5士13.4AA1037.4±15.7如表2-l所示头热淋清浸膏粉对冰醋酸诱发的小鼠疼痛有明显镇痛作用。其镇痛作用强弱与剂量有较好的量效关系。2.热辐射法镇痛试验试验方法(l)测正常痛阈值，筛选合格小鼠150只小鼠于给药前测定两次痛阈值，以甩尾作为疼痛指标，筛选痛阈值在3-10秒的小鼠用于试验，取其两次平均痛阈值作为正常值。(2)剂量设置与分组将筛选出的合格小鼠分为5组，按下表进行给药组别动物数(只)剂量(g原生药/kg)浓度(mg样品/ml)给药量x给药次数(ml/20gx次)对照组14蒸馏水-0.5x6罗痛定组1350mg/kg2.50.4x6热淋清浸膏1317.4800.5x6粉组(w-3)热淋清浸膏1334.81600.5x6粉组(w-3)热淋清浸膏1369.63200.5x6粉组(w隱3)热淋清浸膏1317.278.50.5x6粉组(W"4)热淋清浸膏1334.31570.5x6粉组(w-4)热淋清浸膏1368.63140.5x6粉组(w-4)(3)检测指标分别于给药后3天和6天测定各组小鼠的痛阔值，超过30秒者按30秒计。然后进行自身对照和组间对照，并计算镇痛百分率(镇痛百分率(％)_给药组平均痛阈值-对照组平均痛阈值xl00%)。结果见表2-2。惧涌曰^羊对照组平均痛阈值_表2-2小鼠灌服热淋清浸骨粉的镇痛作用(热刺激法)_痛阈值(s,±SDg动物数剂量(g原给药前给药后3d给药后6d(只)生药/kg)(镇痛百分率)(镇痛百分率)对照组148.50±1.1811.4±6.5010.7±3.87罗痛定组热淋清浸膏粉(w-3)低剂131350mg/kg17.48.65±0.778.46±0.9917.2±6.73***A(50.9%)11.1±3.04*20.5士8.09"A△(91.6%)13.5±楊**(26.2%)热淋清浸膏粉(w-3)中剂1334.88.54±1.2810.2±3.6312.5±5.14*(16.8%)热淋清浸膏粉(w-3)高剂1369.68.54±1.5515.0±6.65**(31.6%)16.4±6.56**(53.3%)热淋清浸膏粉(w-4)低剂1317.28.66±1.1212.3±2.98*13.9±4.15**(29.9%)热淋清浸膏粉(w-4)中剂1334.38.42±0.8910.9±3.3313.1±4.84'(22.4%)热淋清浸膏粉(w-4)高剂1368.68.54±1.0814.9±5.83**(30.7%)16.3±4.87**(52.3%)注*表示与给药前自身对照，PO.05;**表示与给药前自身对照，PO.01;A表示与同期对照组比较，PO.05;厶厶表示与同期对照组比较，P<0.01由表2-2结果显示，罗痛定组动物在给药3d和6d时，其平均痛阈值的自身对照及同对照組的組间对照均有显著性差异(PO.Ol)，镇痛百分率分别达50.9%和91.6%。说明罗痛定的镇痛作用是有效可靠的，本试验方法是可行的。分别对于热淋清浸膏粉w-3、w-4三个剂量组，给药3天时，两个高剂组自身对照均有显著性差异(PO.01);给药6天时，各组自身对照均有显著性差异，以高剂组效果最佳(PO.OOl)，但与对照组比较，均无显著性差异。热淋清浸膏粉w-3高剂组在给药3d和6d时的镇痛百分率分别为31.6%和53.3%;热'淋清浸膏粉w-4高剂组在给药3d和6d时的镇痛百分率分别为29.9%和52.3%。实验三热淋清浸骨粉的利尿作用试验1.热淋清浸骨粉对麻醉家兔的利尿作用(导尿管集尿法)样品配制方法受试药物热淋清浸膏粉w-3、w-4临用时分别用蒸馏水研磨配成所需浓度。P曰性药速尿(呋塞米片)。麻醉剂乌来糖(Urethame)配成25%浓度备用。试验方法将家兔按体重随机分组，设立空白对照组，阳性药组(速尿8mg/kg)及热淋清浸膏粉(w-3)34.8、17.4、8.7g原生药/kg、热淋清浸膏粉(w-4)34.3、17.2、8.6g原生药/kg各三剂量。将家兔麻醉后30分钟，背位固定于手术台上，用温水浸润过的14号导尿管轻而慢插入尿道。经膀胱括约肌进入膀胱后有尿液滴出，表示插入成功，插入深度约812cm。用胶布固定导尿管于兔体。轻轻挤压兔下腹部，排尽膀胱内尿液。然后按公斤体重灌服37。C温生理盐水40ml/kg,随后分别记录0.5、1.0、1.5、2.0、2.5小时尿液排泄量，直至灌服的生理盐水量排泄80~90%后再进行第二次灌服，此时用药组开始给药。热淋清浸膏粉根据兔子体重分别称取一定样品重量后用40ml/kg生理盐水调配后灌服。第二次灌服后同第一次类同操作，记录0.5-2.5小时时间内尿液量。比较给药组与对照组在第二次灌服后的尿量差异。及对用药后0.5、l.O二时间点尿量排泄百分率(％)进行比较。结果见表3-l。<table>tableseeoriginaldocumentpage0</column></row><table>注""表示与生理盐水组比较p0.05,"""表示与生理盐水组比较pO.Ol。'_表3-2热淋清浸骨粉对^醉家兔的利尿作用(艰泄百分率％)组别样本数对照组速尿组热淋清浸膏粉(w-3)热淋清浸膏粉(w-3)热淋清浸膏粉(w-3)热淋清浸膏粉(w-4)热淋清浸膏粉(w-4)热淋清浸膏粉(w-4)5555555剂量(g原生药/kg)0.5小时1小时生理盐水8mg/kg9.8±5.924.0±4.8**15.4±6.625.4±4.4*34.86.9±3.120.9±4.117.420.0±5.4**38.9±8.2**8.76.4±3.819.8±3.134.38.8±3.226.1±3.9*17.223.7±4.9**45.1±6.8**8.67.7±3.823.0±4.5注""表示与生理盐水组比较p0.05,"""表示与生理盐水组比较pO.Ol由表3-l可见热淋清浸膏粉w-3中剂量17.4g原生药/kg及w-4中剂量17.2g原生药/kg,在用药后0.5小时即呈现出利尿作用，与同时间点生理盐水组比较有显著性差异(p<0.01)。用药后1.0小时低，中剂量组同样表现出差异(与生理盐水比较)，排泄尿量显著性超过生理盐水小组(分别p<0.05,PO,Ol)。阳性药也显示出明显的利尿作用。但热淋清浸膏粉(w-3)34.8g原生药/kg剂量组及热淋清浸膏4分(w-4)34.3g原生药/kg剂量组在本次试验中没有出现明显药效作用，即未呈量效关系，推测是否由于过多的药粉吸收了灌服水份所致。从给药后0.5、1.0小时的尿量排泄百分率(％)(表3-2)来看，阳性药速尿的利尿强度最大。0.5小时已排出24.00/o的尿量，热淋清浸膏粉w-3的17.4g原生药/kg剂量组及w-4的17.2g原生药/kg剂量组也呈现较强的利尿作用，从表中可看出中药热淋清浸膏粉的利尿起效时间不如西药速尿，相对要延后些。2.热淋清浸骨粉对正常大鼠的利尿作用试验试验方法(1)筛选合格动物所有大鼠先禁食18小时，然后灌服生理盐水5ml/100g体重，以2小时内排尿量达30。/。者为合格动物用于试验，共筛选出大鼠76只。(2)剂量设置与分组热淋清浸膏粉以34.8g原生药/kg作为起始剂量进行预试，根据试验结果逐步降低剂量17.4、8.7、4.4g原生药/kg;热淋清浸膏粉w-4以34.3g原生药/kg作为起始剂量进行预试，根据试验结果逐步降低剂量17.3、8.6、4.3g原生药/kg药液，在灌服前均37。C水浴温热片刻。具体分组见下表组别动物数(只)剂量(g原生药/kg)浓度(mg样品/ml)给药量(m画g)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>(3)方法和指标每只动物给药后即投入代谢笼中，开始计时收集尿液。每隔1小时测量尿量一次，纪录给药后1-4小时内的排尿情况，计算每只大鼠各时间点的排尿百分率(排尿百分率(%)=各时间点排尿量)作为判断标准，以观察利尿情况。动物灌服药液体积(ml)_表3-2热淋清浸膏粉对正常大鼠的利尿作用(排泄百分率％)_<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>注"""表示与对照组比较pO.Ol由表3-2结果显示，热淋清浸膏粉8.7g原生药/kg剂量在给药后0-2小时内有明显的利尿作用，与同时间点对照组比较PO.Ol。而热淋清浸膏粉(w-4)8.6g原生药/kg剂量在给药后0-2小时内有明显的利尿作用，与同时间点对照组比较PO.Ol。与阳性药速尿比较，热淋清浸膏粉(w-3)8.7g原生药/kg及热淋清浸膏粉(w-4)8.6g原生药/kg的利尿作用均呈现出起效时间慢、作用强度亦较弱的特点。而两组的其它各剂量均未显出明显的利尿作用。实验四对大鼠肾盂肾炎模型的疗效试验样品配制方法受试药物热淋清浸膏粉(w-3、w-4)临用时用蒸馏水研磨配成所需浓度。氟哌酸，临用前以生理盐水配成悬液。菌林大肠埃希氏菌ATCC25922,普通肉汤37。C培养12小时后，菌量达107/ml,用于动物感染。实验方法大鼠200250g,腹腔注射戊巴妥钠(配成15mg/ml浓度，按0.2ml/100g体重给药)30mg/kg麻醉。俯卧固定，背侧切开，充分暴露右肾，采用0.25ml容量卡介苗注射器(4#针头)于肾实质部，分三处接种10々ml菌液50W。术后置于代谢中单独饲养。收集术后24小时的新鲜尿样，以血球计数板显微镜下检查尿样中的白细胞数，每立方毫米尿样中的白细胞数在100个以上者，视为肾盂肾炎模型成功。将模型鼠按尿液中的白细胞值及性别随机分为6组热淋清浸膏粉(w-3)52.32和26.16g生药/kg组，热淋清浸膏粉(w-4)51.6和25.8g生药/kg组，氟哌酸(0.03g/kg)及模型组，同时设正常对照组(未感染细菌者)，动物分组完毕后，即灌胃给予相应受试药物，模型组i.g.生理盐水，连续给药7天，每天给药前收集尿样，计数尿样中的白细胞数。分别收集受试各组动物给药后1、2、3、5、7天的尿样，釆用日本MA-4210型尿分析仪对尿样以下指标作半定量测定糖(GLU)、尿蛋白(PRO),隐血(BLD)、酮体(KET)、胆红质(BIL)以及尿胆原(URO)。尿分析的结果转化为分值"_"计1分，"+"计2分，"++"计3分，"+++"计4分，"++++"计5分，求出各組的平均分值，采用非参法进行统计分析；尿液中的白细胞统计采用t检验比较给药组与模型組的差异。上述统计均采用SPSS软件进行。结果见表4-l。_表4-l热淋清浸骨粉对肾盂肾炎大鼠尿液白劍赵的影响(X±SD,个/mm3)_剂量(g分组生药给药前给药后(天)/kg)_0_^__^_^_567560±319528±289448±239392±195277±146191±11310:±778±516594±327509±264372±209263±122146±97*63±52*29±3115±14*586±336512±316422±238325±227227±174139±10989±6859±43595±331513±285383±212256，」63132±89*75±61*30±3317±13*596±338515±298495±243318±217208±124119±9576±5249±38588±321338±，*217*士*1441，*44±35**22±13**5±7**4±3**3±4**3±3**2±2**2±3**3±4**2±2**3±4**3±4**注给药各组、模型组进行比较，"""表示pO.Ol,""表示p0.05由上表可知试验中的大鼠肾盂肾炎能自行恢复，而热淋清浸膏粉52.32g生药/kg/kg组及热淋清浸膏粉(w-4)51.6g生药/kg两组的恢复要明显优于模型组，给药后第2、3、4、5、6、7天，该组大鼠尿液中的白细胞数量明显少于模型组(p<0.01，0.05),但其作用不及氟哌酸，热淋清浸膏粉(w-3)26.16g生药/kg及热淋清浸膏粉(w-4)25.8g生药/kg模型组(w-3)(w-4)氟哌酸正常对照052.3226.1651.625.80.03两组对肾盂肾炎大鼠尿液中的白细胞没有明显影响。对肾盂肾炎大鼠尿液生化指标的影响试验表明热淋清浸膏粉52.32g生药/kg及热淋清浸膏粉(w-4)51.6g生药/kg两组于给药后2和3天与模型相比，隐血明显减少(p0.05)。尿液中的其余各项指标，给药各组及模型组均无明显差异。综上所述，i.g.热淋清浸膏粉52.32g生药/kg或热淋清浸膏粉(w-4)5L6g生药/kg对大鼠肾盂肾炎有一定的疗效，连续给药3天后能显著减少肾盂肾炎大鼠尿液中的白细胞数量和尿中的隐血量，i.g.热淋清浸膏粉26.16g生药/kg及热淋清浸膏粉(w-4)25.8g生药/kg对大鼠肾盂肾炎没有明显治疗作用。实验五体内外抗菌作用(一)体外抗菌作用1、样品配制方法受试药物热淋清浸膏粉w-3、w-4临用时用蒸馏水研磨配成所需浓度。没食子酸含量98%。盐酸环丙沙星试验时用无菌水溶液配制，制备成终浓度为256、128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、1、0.5、0.25、0.125、0.06ug/mi的系列含药平皿待用。头孢三。秦钠氟哌酸胶囊洁尔阴洗液氟康唑片2、试验菌林试验时配制方法同盐酸环丙沙星'试验时配制方法同盐酸环丙沙星<规祐"120ml/瓶，1g原生药/ml。试^r时配制方法同盐酸环丙沙星。革兰阳性菌101林包括金黄色葡萄球菌20抹表皮葡萄球菌20林卡他氏球菌20抹淋球菌20林革兰阴性菌100抹:变形杆菌属20抹绿假单孢菌20林真菌26抹白色念i朱菌20林红色毛癣菌2抹厌氧菌21才朱脆弱拟杆菌10林A型溶血性链球菌10林滕黄八叠球菌l林C群链球菌10抹大肠埃希菌20抹痢疾杆菌20抹肺炎克雷伯菌20林铜石膏样小孢子菌2抹石膏样癣菌2林消化3求菌3才朱消化链球菌3林痤痴丙酸杆菌3林颗粒丙酸杆菌2林共计248抹，均经常规方法鉴定后使用。质控菌抹金黄色葡萄球菌ATCC25923大肠埃希菌ATCC25922铜绿假单孢菌ATCC278533、培养基及其培养MM-H培养基中国药品生物制品检定所产品，M-H肉汤培养基称取25g加1000ml蒸馏水，加热溶解，分装,高压灭菌，116°C20分钟。M-H固体培养基称取36g,加1000ml蒸馏水，高压灭菌，116。C20分钟，用于革兰阳性、阴性需氧菌的药敏试验。链球菌属培养基中加10%的脱纤维羊血。淋球菌使用淋球菌专用培养基，35°C,5%C02环境中培养48小时观察结果。(英国oxiod公司产品)。白色念珠菌及其他真菌用真菌专用培养基(沙氏培养基)，28。C培养，48h-72h观察结果。^^菌培养；^^L菌专用i^^基^f^不竟，35。C培养48h观察结果。4、试验方法(1)最1氐4中菌浓度(MIC)的测定采用琼脂二倍稀释法分别测定热淋清浸膏粉w-3、w-4的最低抑菌浓度(MIC)。用多点接种仪将细菌接种于含不同药物浓度的琼脂平皿表面，每点含菌量约为105CFU/ml，37。C孵育18小时(淋球菌孵育48小时)观察结果，以无细菌生长平皿培养基中所含药物的最低浓度为药物对该菌的最低抑菌浓度(MIC值)。每皿中所含热淋清浸膏粉w-3的终浓度分别为400,200,100，50,25,12.5，6.25，3.12,1.56,0.78,0.39,0.2，0.1,0.05,0.025,0.0125，0.006mg原生药/ml。每皿中所含热淋清浸膏粉w-4的终浓度分别为400,200,100，50,25，12.6,6.3,3.15,1.58，0.79,0.40,0.2，0.1,0.05,0.025,0.012,0.006mg原生药/ml。(2)最低杀菌浓度(MBC)的测定先用液体二倍稀释法测定出热淋清浸膏粉w-3、w-4对试验菌林的MIC值后，再吸取未见细菌生长管的培养液O.lml于无药的琼脂平皿表面，用灭菌玻棒推匀后，37。C继续培养18-20小时，仍无细菌生长的药物最低浓度为最低杀菌浓度(MBC,MininalBactericidalConctntraion)。(3)不同影响因素对热淋清浸青粉的抑菌作用(MIC)的影响改变培养基PH值(5.0、7.0、9.0)，改变接种菌量(105、107、109CFU/ml),改变培养基中血清浓度(O,10，25,50%)，再测定其MIC值。5、试验结果接表5-1热淋清浸骨粉的体外抗菌语MIC值细菌(菌号)热淋清浸膏粉w-3(mg原生药/ml)热淋清浸膏粉w-4(mg原生药/ml)没i子环丙沙(mi)星(叩加)头孢三。秦钠(|jg/mi)洁尔阴(mg原生药/ml)氟康唑(|jg/ml)淋球菌130.050.050.010.0150.00152Nt19(l)对临床分离致病菌的体外作用，结果见表5-l、表5-2、表5-3。表5-l热淋清浸骨粉的体外抗菌镨_MIC值_热淋清浸膏热淋清浸膏没食子环丙沙头孢三——洁尔阴粉w-3(mg原粉w-4(mg原酸星((jg/ml)嗪钠(mg原生生药/ml)生药/ml)(mg/ml)(pg/ml)药/ml)痢疾杆菌铜绿假单孢菌994肺炎克雷伯菌9938肺炎克雷伯菌9939大肠埃希菌992大肠埃希菌993大肠埃希菌ATCC25922变形4干菌993变形杆菌994滕黄八叠球菌金黄色葡萄球菌209P金黄色葡萄球菌9981金黄色葡萄球菌9982金黄色葡萄球菌9983表葡球菌994表葡球菌995表葡球菌9916卡他氏球菌3C群链球菌A型溶血性链球菌1001002525256.2525252512.56.2512.512.512.56.2512.56.2540040040012.512.512.56.253.123.126.2512.512.512.512.512.56.256.2512.512.56,2512.512.512.54>128Nt'4>128Nt4>128Nt464Nt0.5128Nt0.54Nt0.50.03Nt16>128Nt162Nt44Nt0.54Nt48Nt48Nt0.58Nt88Nt1>128Nt14Nt2>128Nt0.5>128Nt_J_^_0細50.786.2580.0150細580.780.001562.50.780細531.50.396.25160.01250.0015160.0150.012580.0150.001540.786.2540.786.2510.780.391§§5553555R3RR3R3gww685858555-88570707000r^77-3555535533？l13553553.,11o—-_rjrjT3T-—-，~菌菌菌菌菌菌菌菌菌菌菌菌求求求求求求求求求&求求淋淋淋淋淋淋淋淋淋淋淋淋*Nt=Nottested表5-2热淋清浸骨粉对临床分离221林菌林的体外抗菌活性比较细菌(抹数)热淋清浸膏w-3(mg原生药/ml)热淋清浸w-4(mg原生药/ml)没食子酸(mg/ml)环丙沙星头孢三。秦钠(pg/ml)洁尔阴(mg原生药/ml)氟康唑金黄MIC5012.512.612.50.5162.50.010.011.560.390.390.780.7825252512.525255012.512.512.5252512.56.2512.525256.2512.5250.01250.01256.250.00150.1250.050.39128>128>128>128>128>128>128>128128>128128>128>128>128>128>128128128>128>12812818431.2516831.254431.25862.581284462.5462.581644814151617181920白色念珠菌011白色念珠菌012白色念珠菌013白色念珠菌014白色念珠菌015白色念珠菌016白色念珠菌017白色念J朱菌018白色念珠菌019白色念珠菌0110白色念珠菌0111白色念珠菌0112白色念珠菌0113白色念珠菌0114白色念珠菌0115白色念珠菌0116白色念珠菌0117白色念珠菌0118白色念珠菌0119白色念珠菌01202o211冗sssSSSo3ooooooooo0,1sl丄4:^isSwwooooooooooo1CC000444442224444424oooooo<uooo巧巧11巧沿巧oooooo;!;00000444442oooooooooooooooooooooo0curl;n0丄06KK11K1u116111。13611&COO>>1>1>>>>>1>>>NNNNNNN555^52252菌菌菌菌菌菌菌淋淋淋淋淋淋淋MIC90MICR3ng6MIC50MIC90MICRangeMIC50MIC90MICRange12.512.612.562.5Nt3.12-12.53.15-12.63.12-12.50.25-41-831.25-12.'6.256.312.5121612.512.6254862.56.25-256.3-256.25-250.5-82->1288-1254004001.522250400400.524250200-400200-4006.25-12.50.5-21-4125-250NtNtA型溶血性链球菌(10)c群链球菌(10)MIC50MOOMICRangeMIC50MIC90MICR3门g640040040040012.512.5200-400200-4006.25-2540040040040012.512.5120.5-40.50.5200-400200-4006.25-12.50.25-1240.5-16120.5-212512562.5-250NtNtNt大肠MIC50埃，MIC9050506.2511NtNt菌MIC(20)Range25253.120.50.550506.25116.25-506.鄉3.12-12.50.5-10.5-1细菌(林数)铜绿假单孢菌(20)痢疾杆菌接表5-2热淋清浸骨粉对临床分离221林菌林的体外抗菌活性比较(mg原生药/ml)Nt热淋清浸热淋清没食子酸环丙沙头孢三,膏w-3(mg浸膏(mg/ml)星钠,ml)原生药w-4(mg原(pg/ml)/ml)生药/ml)MIC5020020025416MOO400400508128MICRan100-400100-40012.5-1002-84-128geMIC50100湖12.524MIC9020020025464氟康峻(pg/ml)NtNtNtMIC50MOOMICRangeNt=Nottested252512.5216505012.54>128Nt12.5-5012.6-506.25-251-82->128Nt黄叠菌腠八球皮萄菌s他球M表葡球"卡氏断炎雷菌o肺克伯s细菌(菌号)MIC值热淋清浸膏粉w-3(mg原生药/ml)热淋清浸膏粉w-4(mg原生药/ml)洁尔阴(mg原生药/ml)石膏样小孢子菌1湖1008(濕)*石膏样小孢子菌2■1008(1/64)石膏样癣菌1505016(1/32)石膏样癣菌2■■Nt红色毛裤菌15050Nt红色毛癣菌22525Nt脆弱拟杆菌1100100Nt脆弱拟杆菌25050250(1/4)脆弱拟杆菌3200200125(1/8)脆弱拟杆菌4■■500(1/2)脆弱拟杆菌55050250(1/4)脆弱拟杆菌65050125(1/8)脆弱拟杆菌75050125(1/8)脆弱拟杆菌82525125(1/8)脆弱拟杆菌9100■250(1/4)脆弱拟杆菌10■100250(1/4)消化球菌15050125(1/8)消化球菌2100100250(1/4)消化球菌3200200500(1/2)消化链球菌1200200500(1/2J消化链球菌25050500(1/2)消化链球菌32525250(1/4)痤疮丙酸杆菌15050250(1/4)痤疮丙酸杆菌22525250(1/4)MICRan50-40050-4006.25-251國81-128淋j泉MIC500.050.050.390.20.01258^MIC900.390.400.780.786.2531.25Nt，、MICRan0.025>3.120.02M.150.05"1.560.001&O.0.001&6.251-31.25(20)ge78变形MIC50杆菌MIC90属MICRan(20)ge12.582501616NtNt12.W002-160.5->128MIC5040040012.5>128>12880.5MIC9040040025>128>12862.54MICRan200，胁4006'25-5032國>128128國>1284-62.50.03-8(20)ge*Nt-隨ested表53热淋清浸骨粉对27抹^^菌、鄉菌的MICS25^5o125cl,色珠白念菌痤疮丙酸杆菌312.5颗粒丙酸杆菌125颗粒丙酸杆菌2_*()内为洁尔阴洗液稀释度Nt=Nottested试验结果表明热淋清浸膏粉对所试金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌具有一定的抗菌作用，MICRange为3.12~25mg/ml,MICso各为12.5和6.25mg/ml;对卡他氏球菌，A型溶血性链球菌、C群链球菌抗菌作用差，MICRange为200~400mg/ml;对淋球菌呈现较强的抗菌活力，MICRange为0.025-3.12mg/ml，MIC50，MICw分别是0.05和0.39mg/ml,与没食子酸的抗菌活力相当。热淋清浸膏粉对淋球菌、金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌等的抗菌作用强于洁尔阴。热淋清浸膏粉对革兰阴性菌中的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、变形杆菌亦呈现一定的抗菌活力，MICRange为6.25~100mg/ml;对铜绿假单孢菌和痢疾杆菌的抗菌活力差，MICRange为50~400mg/ml;对白色念珠菌的抗菌活力差，MICRange在200-400mg/ml;对石膏样小孢子菌、石膏样裤菌和红色癣菌的MIC为25~100mg/ml。热淋清浸膏粉对白色念珠菌的抗菌活力比洁尔阴弱。热淋清浸膏粉对所试厌氧菌中的脆弱拟杆齊、消化球菌、消化链球菌和痤疮丙酸杆菌、颗粒丙酸杆菌呈现一定的抗菌活力，MIC值为25~200mg/ml。而热淋清浸膏粉w-4同样对所试金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌具有一定的抗菌作用，MICRange为3.15~25mg/ml，MIC50各为12.6和6.3mg/ml;对卡他氏球菌，A型溶血性链球菌、C群链球菌抗菌作用差，MICRange为200~400mg/ml;对淋球菌呈现较强的抗菌活力，MICRange为0.025~3.12mg/ml,MIC50，MIC卯分别是0.05和0.40mg/ml,与没食子酸的抗菌活力相当。热淋清浸膏粉w-4对淋球菌、金黄色葡萄球菌，表皮葡萄球菌等的抗菌作用强于洁尔阴。热淋清浸膏粉w-4对革兰阴性菌中的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、变形杆菌亦呈现一定的抗菌活力，MICRange为6.3~100mg/ml;对铜绿假单孢菌和痢疾杆菌的抗菌活力差，MICRange为50~400mg/ml;对白色念珠菌的抗菌活力差，MICRange在200~400mg/ml;对石膏样小孢子菌、石膏样裤菌和红色癣菌的MIC为25~100mg/ml。热淋清浸膏粉w-4对白色念珠菌的抗菌活力比洁尔阴弱。热淋清浸膏粉w-4对所试厌氧菌中的脆弱拟杆菌、消化球菌、消化链球菌和痤疮丙酸杆菌、颗粒丙酸杆菌呈现一定的抗菌活力，MIC值为25~200mg/ml。12.6125(1/8)25250(1/4)■250(1/4)(2)PH值，接种菌量，血清浓度对热淋清浸膏粉的MIC值的影响表S4冊值、^tg量、ifc^^熱淋清浸骨粉的MICtf^^)MlC值(mg原生药/ml)细菌(菌号)PH值接种菌量(CFU/ml)血清浓度(％)5.07.09.01051071090102550金黄色葡萄球菌0.23.1212.51.561.563.121.561.561.563.12ATCC25923金黄色葡萄球菌2001-3未长12.50.786.256.2512.56.256.2512.525金黄色葡萄球菌2001-4未长6.250.783.126.256.256.256.256.2512.5金黄色葡萄球菌2001-50.212.56.256.2512.512.512.512.512.525大肠埃希氏菌00412.5252512.5252525255050大肠埃希氏菌0056.25252512.5255025505050大肠埃希氏菌0063.126.256.253.126.2512.512.512.512.512.5大肠埃希氏菌0071.563.126.253.123.126.253.123.123.126.25淋球菌01010.20.391.560.390.781.561.563.123.123.12淋球菌01020.781.563.121.561.563.121.561.561.563.12淋球菌01030.20.391.560.783.123.123.123.126.256.25淋球菌01040.20.783.121.563.123.123.123.123.123.12錄54PH值、^m量、ii^m&^淋清浸骨粉w4的MC<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>由上表可知，培养基PH值改变，则热淋清浸膏粉的MIC值也有所改变，在酸性或中性(PH5.0,PH7.0)环境中，其MIC值低于碱性环境(PH9.0)中的MIC值。接种菌量改变(由103增加至109CFU/ml),热淋清浸膏粉的MIC值随之增加2-4倍，表明接种菌量对其MIC值有一定影响；血清浓度改变(0,10%,25%,50%)对热淋清浸膏粉的抑菌作用无显著影响(见表5-4)。(3)热淋清浸骨粉的MIC,MBC比较<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>由上表可知，热淋清浸膏粉在2MIC值浓度呈现一定的杀菌作用(见表5-5)。(二)体内保护作用1、样品配制方法受试药物热淋清浸膏粉临用时用蒸馏水研磨配成所需浓度。氟哌酸胶囊试验时用无菌水溶液配制。2、实验菌种用于感染动物的细菌为金黄色葡萄球菌MSSA43、大肠埃希菌994、变形杆菌993、淋球菌14系2000年从成都地区收集的临床分离致病菌。经重新鉴定后使用。3、实验方法(1)试验菌液的制备挑取试验菌的2-3个单菌落接种于M-H肉汤中，37。C培养18小时，用5%灭菌干酵母液适当稀释备用。(2)最小致死菌量(MLD)的测定取健康昆明种小鼠，体重18-22克，均匀分组，每组5只小鼠，雌雄兼用，吸取上述不同稀释度的菌液分别腹腔注射入小鼠体内，每鼠0.5ml,感染后连续观察7天，并记录小鼠死亡数，以引起小鼠100%死亡的最低菌量作为最小致死菌量(MLD)。用该菌量作为体内保护试验的感染菌量。(3)药液的配制试验用药均用0.5%CMC配制，热淋清浸膏粉以口服途径的给药剂量为金葡球菌MSSA43、大肠埃希氏菌994、变形杆菌感染小鼠的给药剂量是30.00、19.50、12.68、8.24、5.36和3.48原生药g/kg(浓度为1.2、0.78、0.51、0.32、0.21、0.14g原生药/ml);淋球菌14感染小鼠的给药剂量是20.00、13.00、8.45、5.49、3.57g原生药/kg(浓度为0.80、0.52、0.34、0.22、0.14g原生药/ml)。氟哌酸胶囊以口服途径给药的剂量为金葡球菌MSSA43是75.74、49.23、32.00、20.80、13.52和8.79mg/kg(浓度为3.03、1.97、1.28、0.83、0.54、0.35mg/ml);大肠埃希菌994是120.00、78.00、50.70、32.96、21.42和13.92mg/kg(浓度为4.80、3.12、2.03、1.32、0.85、0.55mg/m)；变形杆菌993是50.00、32.50、21.13、13.73、8.93、5.80mg/kg(浓度为2.00、1.30、0.85、0.55、0.36、0.23mg/ml);淋球菌14的剂量是12.00、7.80、5.07、3.29、2.14、1.39mg/kg(浓度为0.48、0.31、0.20、013、0.08、0.05mg/ml)。试验用药均用0.5%CMC配制，热淋清浸膏粉w-3以口服途径的给药剂量为金葡球菌MSSA43、大肠埃希氏菌994、变形杆菌感染小鼠的给药剂量是29.60、19.22、12.48、8.10、5.26和3.42原生药g/kg(浓度为1.18、0.77、0.50、0.32、0.21、0.14g原生药/ml);淋球菌14感染小鼠的给药剂量是19.22、12.48、8.10、5.26和3.42原生药g/kg(浓度为1.18、0.77、0.50、0.32、0.21、0.14g原生药/ml)。氟哌酸胶囊以口服途径给药的剂量为金葡球菌MSSA43是76,40、49.61、32.21、20.92、13.58和8.82mg/kg(浓度为3.05、1.98、1.29、0.84、0.55、0.36mg/ml);大肠埃希菌994是116.76、75.82、49.23、31.97、20.76和13.46mg/kg(浓度为4.68、3.04、1.97、1.28、0.83、0.54mg/ml);变形杆菌993是51.卯、33.70、21.88、14.21、9.23、5.99mg/kg(浓度为2.08、1.35、0.88、0.57、0.37、0.24mg/ml);淋球菌14的剂量是11.96、7.77、5.05、3.28、2.13、1.38mg/kg(浓度为0.49、0.32、0.21、014、0.09、0.06mg/ml)。(4)感染及治疗实验方法将实验动物按性别、体重均匀分组，每组10只小鼠，雌雄各半。小鼠灌胃热淋清浸膏粉,每日一次，0.5ml/20g鼠重,预先连续给药3天,于第3天给药后各组小鼠腹腔感染受试菌液，每鼠感染菌量为0.5ml(1MLD),氟哌酸胶嚢于感染菌液后即刻及4小时各灌胃给药一次，同时设感染对照组及药物对照组(不感染菌)，记录感染后七天内小鼠存活数，根据感染后七天动物存活数计算其半数有效剂量(ED5G)及其95%可信限。(5)实验数据处理热淋清浸膏粉与对照药氟哌酸胶嚢对金黄色葡萄球菌MSSA43、大肠埃希菌994、变形杆菌993、淋球菌14感染小鼠的体内保护作用的半数有效剂量ED5o及其95。/。可信限，均按Bliss法运用中国医学科学院编制的程序软件，使用计算机进行计算和统计学处理。结果见表5-6-5-10。表5-6小鼠灌服热淋清浸骨粉的体内保护作用的EDs。值<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>氟9^l嫂口服120.001000.000.04278.0010220.00(0.033-0.054)50.7010440.0032.9610660.0021.4210990.0013.9210101画_感染对照组腹腔-_1010画o*氟<^^*给药剂量为mg/Kg。表5-9热淋清浸骨粉对小鼠体内感染变形杆菌的EDso给药给药剂量'动物数死亡数死亡率ED50药物途径(g原生药/kg)(只)(只)(％)(g原生药/kg)娜可傻艮)CFU/ml)氟9^MJ:口服50.001000.000.018菌994粉w-3热淋清浸膏口服粉w-410660.00108訓0108訓0109訓010101画10101画37.87(17.48-82.03)36.76(25.19-494.70)热淋清鹏口服30.0010619.5010912.681098.2410105.3610103.481010变形杆菌热淋清浸膏口服993粉w-3热淋清浸膏口服粉w-41010101010102799101010101010101026991010热淋清颗在口服30.0010419.5010812.681098.2410105.3610103.48101022.08(17.20-33.82)20.95(16.15-27.17)27.13(21.11-52.61)林林感量%<号染8911§468p234§^防136R4:R23400001"330851332799KK3ooSowooowQ699K1K<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>IW^^A给药剂量为mg/Kg。表5-10热淋清浸貪粉对小鼠体内感染淋球菌的EDS0<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>*氟。J^^A给药剂量为mg/Kg。体内保护试验结果表明，热淋清浸膏粉w-3口服给药，对小鼠由金黄色葡萄球菌MSSA43、大肠埃希菌9914、变形杆菌993和淋球菌14所致小鼠全身感染的半数有效剂量ED50值分别为11.85g原生药/kg、37.84g原生药/kg、22.08g原生药/kg、10.14g原生药/kg;热淋清浸膏粉w-4口服给药，对小鼠由金黄色葡萄球菌MSSA43、大肠埃希菌9914、变形杆菌993和淋球菌14所致小鼠全身感染的半数有效剂量EDso值分别为11.82g原生药/kg、37.87g原生药/kg、20.95g原生药/kg、9.31g原生药/kg。结果表明热淋清浸膏粉w-3、w-4对所试菌林具有一定的体内保护作用。综上所迷经体外抗菌试验结果证明热淋清浸膏粉呈现出一定的体外抗菌活力，尤其是对临床分离淋球菌显示出较强的抗菌活力，其次对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、痢疾杆菌、变形杆菌和肺炎克雷伯菌也呈现出抗菌活力。但对白色念珠菌的抗菌活力较弱。对浅表毛癣菌如石膏样孢子菌、石膏样癣菌也呈现一定的抗菌活力，其次对于厌氧菌中的脆弱拟杆菌，消化球菌、消化链球菌和痤疮丙酸杆菌、颗粒丙酸杆菌等均具有一定的抗菌作用。体内试验结果也表明，热淋清浸膏粉对淋球菌、金黄色葡萄球菌、变形杆菌、大肠埃希菌感染小鼠具有一定的保护作用，其半数致死剂量EDs()分别为10.14、11.85、22.08、37.84原生药g/kg，w-4半数致死剂量ED50分别为9.31、11.82、20.95、37.87原生药g/kg。因此，用热淋清浸膏粉制成的热淋清颗粒具有清热解毒，利尿通淋的作用。用于湿热蕴结，小便黄赤、淋漓涩痛之症，尿路感染，肾盂肾炎及上述证候者。权利要求1.一种热淋清浸膏，其特正在于由头花蓼全草的鲜品或干品用水分1-3次煎煮，每次1-2小时，合并煎煮液，过滤浓缩至85℃时的相对密度为1.05～1.25时，得到浸膏，然后经喷雾干燥，得到浸膏粉。2.极顺耍求"繊娱膏，期桐雄f^千燥前加入槲悔分。3.才財斜M'耍求l-2之一^曼膏，^4射雄1^#干"加入重量比5°"辨*^定粉。4.才財斜X^'虔求1—2之一^曼膏，逸應^宿至85。C时6祐时密JL^1.1~1.2。5.樹鹏恢求l-2之-"^憂膏，糊i^虑棘至85。C时樹时密^1.2。6.才財斜幼虔求l-2妳曼膏，其中知t^ffl其i4Ji^^。7.樹網懊求l-2之,是膏，期争棘于头繊磁敝叶、#茎。8.^^'虔求1-7的浸膏用于帝洛抗菌药物的用逸9.才財斜幼虔求8的用逸其中抗菌药物是^#^摘药物。10.纟5^慎求1-7妳曼膏用于命洛抗麟物的用逸11.*^虔求1-7沐旻膏用于弗'mfei药4辆々用逸12.树'棘1-7的浸膏用于弟恪矛尿药綱用逸13.;f5Uf'漆求1-7的浸膏用于命洛治疗泌尿系乡衫吉石的药4辆々用逸14."^t飾緣膏组^4勿，絲有树恢求1-7喊膏和可药用樹牛。15.才財斜X^']^求14的组^4勿，其可以制M剂、茅颠立剂、丸剂、月嫩'J、^#剂、；Mf剂、；^'J、^t^剂、滴丸剂、射'j、撤'J、贝^f'j、月鼓'J、纸型剂、';f"悬剂、附'J、^f唐叙'J、；^t片、石更膏剂、專欠膏剂、糖ji好'、导L^J、緩释、^:^'剂^le^制剂。16.樹鹏'棘14的组她其可以制綱立剂。全文摘要本发明涉及热淋清浸膏及其制备方法和用途，还涉及含有该浸膏的药物组合物。本发明用水对头花蓼进行了提取制得热淋清浸膏并进行了活性研究，本发明工艺得到的热淋清浸膏在抗菌、抗炎、镇痛和利尿等方面具有明显的效果。文档编号A61K36/704GK101664446SQ200910177179公开日2010年3月10日申请日期2009年9月28日优先权日2009年9月28日发明者唐靖雯,张丽艳,李孟林,斌梁,梅潘,君罗,宇谢申请人:贵州威门药业股份有限公司