猕猴桃碱作为制备治疗动脉粥样硬化药物的应用的制作方法

专利名称：：猕猴桃碱作为制备治疗动脉粥样硬化药物的应用的制作方法
技术领域：
：本发明涉及猕猴桃碱的应用方法，尤其是在制备治疗动脉粥样硬化药物中的应用方法。
背景技术：
：猕猴桃碱(Actinidine)，属于天然化合物，其分子式C10H13N，分子量147.219。猕猴桃碱广泛存在于猕猴桃科多种植物中，在天然产物中，其一般以(s)-型存在。(s)-型猕猴桃碱的CAS登录号524-03-8，结构式如下猕猴桃为猕猴桃科植物猕猴桃ActinidiachinensisPlanch.的果实。动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是动脉硬化中最常见和重要的类型；是动脉壁细胞、细胞外基质、血液成分(特别是单核细胞、血小板、和低密度脂蛋白)、局部血流动力学、环境和遗传等诸多因素综合作用的结果；是许多心、脑血管缺血性疾病的病理学基础和主要病因。AS的病理特点是受累动脉内膜有类脂质沉着，复合糖类积聚，既而纤维组织增生和钙沉着，并伴有动脉中层病变。主要累及大中型肌弹力动脉，常导致管腔闭塞或管壁破裂、出血等严重后果。发病机制目前尚未完全清楚，主要有脂肪浸润学说、损伤应答学说，炎症感染学说等。AS是严重危害人类健康的常见病、多发病之一。我国近年有明显增长趋势，并随年龄增长而增，例如在40-49的人群中，检出率分别为58.36%和88.31%。高脂血症是指血浆TC和/或TG水平升高，实际是某一类或某几类脂蛋白异常的表现，包括LDL-C的升高和HDL-C水平过低；HDL-C中胆固醇酯与极低密度脂蛋白内的TG交换增多，使HDL-C下降，从而使HDL-C与高脂血症呈负相关，故HDL-C比重降低时会促进AS病变发展。病理学研究发现AS斑块主要由脂质积聚而成，诸多研究也表明，控制AS、降低狭窄率的首要目标就是改善血脂。N0是体内最重要的血管舒张因子之一，具有强大的扩张血管作用，可抑制血小板聚集、血管平滑肌细胞增殖、单核细胞黏附和黏附分子表达，从而防止AS的发生和血栓形成，是衡量内皮细胞功能的一个重要指标。各种原因导致的内皮功能损伤均可导致N0分泌能力下降，N0/ET-1平衡失调，加速AS的发展。ET-1是目前已知的由血管内皮细胞分泌的最强的血管收縮因子，是NO的反向调节物，能促进血小板、炎细胞的积聚，是血栓形成、炎症发生的重要细胞因子。研究表明血浆ET-1水平与AS的严重程度呈明的正相关关系。当ET-1增高到一定程度时，引起冠状动脉痉挛从而损害内皮细胞，促进AS的形成，并通过剌激平滑肌细胞增殖的作用，进一步加重AS的发展。现有技术中尚未有猕猴桃碱作为制备治疗动脉粥样硬化药物的应用披露。
发明内容本发明要解决的技术问题就是应用猕猴桃碱制备治疗动脉粥样硬化的药物，制成的药物能显著降低血脂，提高血清NO含量、降低ET-1含量，并抑制斑块进展。为了解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案猕猴桃碱作为制备治疗动脉粥样硬化药物的应用。本发明用于制备治疗动脉粥样硬化药物时，其口服或非口服给药均是安全有效的。口服给药可以制成任何常规剂型，如散剂、颗粒、胶囊、片、口崩片、滴丸、软胶囊等；非口服给药，可制成各种常规剂型，如注射液等。本发明用于制备治疗动脉粥样硬化药物时，其辅料及制备方法可选用任何药学可接受的形式。本发明的剂量可根据服用方式、病人的年龄、病情严重程度等因素而改变，成人口服剂量为l-200mg/日，成人注射剂量为l-50mg/日。本发明用于制备治疗动脉粥样硬化药物时，可以与具有降血脂作用的西药或中药联用。猕猴桃碱治疗动脉粥样硬化的效果，是通过下列试验体现的试验例猕猴桃碱对实验性动脉粥样硬化兔的影响1、材料动物健康新西兰兔，体重2.0-2.5kg，雌雄各半，5月龄，由中国药科大学实验动物中心提供。药物与试剂猕猴桃碱，从猕猴桃科植物猕猴桃ActinidiachinensisPlanch.的果实中提取，(S)-型，纯度为99.8X。辛伐他汀片，广州南新制药有限公司。甘油三酯(TG)测定试剂盒、总胆固醇(TC)测定试剂盒、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)测定试剂盒、NO测定试剂盒，南京建成生物工程研究所；ET-1测定试剂盒，北京东亚免疫技术研究所。仪器LX20自动生化分析仪；酶标仪，日本BI0-R0D550;石蜡切片机，德国莱卡LD2150。2、方法家兔AS模型的建立取健康新西兰兔只，雌雄各半，颗粒饲料平衡喂养1周后，随机取io只作为正常对照组，用普通饲料喂养，其余为高脂造模组，给予高脂饲料喂养(按1%胆固醇、5%猪油、10%蛋黄粉、84%普通饲料比例制作)，各组每兔每天进食总量相等，限制为150g，自由饮水。12周后高脂造模组取2只实验家兔处死，光镜下观察主动脉内膜明显增厚，伴有大量泡沫细胞，内皮细胞排列紊乱、不连续，大量平滑肌细胞迁移内膜，视为造模成功。动物分组及给药将高脂造模组家兔随机分组，每组10只模型组、猕猴桃碱高剂量组、中剂量组、低剂量组、阳性对照组。除正常对照组仍然喂养普通饲料外，其余各组喂养上述高脂饲料。猕猴桃碱组分别灌胃给予1.0、2.0、4.Omg/Kg;辛伐他汀组灌胃给予辛伐他汀2.2mg/Kg;其余组给予相应量生理盐水。所有动物自由饮水，每天给药1次给药共8周。所有动物在给药8周后空腹抽取耳静脉血5mL，供检测各组家兔血清TC、TG、LDL、HDL、N0、ET-1使用；抽血结束后以空气栓塞法处死所有实验动物，无菌取出主动脉根部至主动脉穿膈肌处动脉段作为标本，清除外膜附着组织，沿动脉长轴剪开，取斑块最显著部位动脉段lcm，置于10X福尔马林溶液中浸泡固定后修剪成约lcmX0.15cmX0.15cm的组织块，用于病理组织学观察。检测指标及测定方法采用酶法测定血清TC、TG、LDL、HDL水平；NO测定采用硝酸还原酶法；ET-1采用放射免疫分析法。测量斑块面积病理组织块经切片机按4iim的厚度切割，采用HE染色制作病理切片，计算斑块面积占整条主动脉面积的百分比。按以下规定进行病变分级①0级无病变；②I级病变占125%;③II级病变占2650%;III级病变占5175%;⑤IV级病变占76100%。记分方法①0级计0分；②I级计1分；③II级计2分；III级计3分；⑤IV级计4分。3、数据处理计量资料以X±S表示。试验数据进行组间t检验。4、结果4.1对AS模型兔血脂的影响试验结果见表l，结果表明，与空白组相比，模型组的TC、TG、LDL明显升高(P<0.01)、HDL明显降低(P<0.01)，表明造模成功。与模型组相比，阳性对照组、猕猴桃碱各剂量组能显著降低AS模型兔血中TC、TG、LDL水平(P<0.05、0.01);升高AS模型兔血中HDL水平(P<0.05、0.01)。表1猕猴桃碱对AS模型兔血脂的影响G±S，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>与模型组比较*P<0.05，**P<0.01(下表同)4.2对AS模型兔NO、ET-1的影响试验结果见表2，结果表明，与模型组相比，阳性对照组、猕猴桃碱各剂量组能显著降低AS模型兔血中ET-1水平，提高NO水平，且均具有显著性意义(P<0.05、0.01)。表2猕猴桃碱对AS模型兔N0、ET_1的影响G±S，n=10)组别剂量(g/Kg)N0(nmol/L)ET-1(ng/L)空白组98.32±25.25**82.34±24.54**模型组42.36±27.38177.25±34.56阳性2.292.15±28.66**101.23±38.25**低剂量组1.072.15±24.32*143.45±31.17*中剂量组2.083.33±23.19**123.49±28.96**高剂量组4.090.10±24.34**108.70±27.40**4.3对AS模型兔动脉斑块的影响试验结果见表3，结果表明，与模型组相比，阳性对照组、猕猴桃碱各剂量组能显著降低AS模型兔斑块面积(P<0.05、0.01)。表3猕猴桃碱对AS模型兔动脉斑块的影响G±S，n=10)组别剂量(g/Kg)斑块记分空白组模型组3.4±0.84阳性2.21.5±0.85**低剂量组1.02.3±0.95*中剂量组2.01.7±0.95**高剂量组4.01.2±0.92**综上所述，猕猴桃碱能明显降低血脂、提高血清NO含量、降低ET-1含量，并抑制斑块进展，上述作用是其治疗动脉粥样硬化的药理学基础。具体实施方式实施例1片剂猕猴桃碱25g，淀粉175g，制粒，压片制成1000片。服用方法成人一次1片，一日2次。实施例2胶囊猕猴桃碱25g，微晶纤维素175g，混匀，制成1000粒。服用方法成人一次1粒，一日2次。权利要求猕猴桃碱作为制备治疗动脉粥样硬化药物的应用。全文摘要本发明涉及猕猴桃碱在制备治疗动脉粥样硬化药物中的应用方法。应用猕猴桃碱制备治疗动脉粥样硬化的药物，制成的药物能明显降低血脂、提高血清NO含量、降低ET-1含量，并抑制斑块进展，效果显著。文档编号A61P9/00GK101756969SQ20091018355公开日2010年6月30日申请日期2009年9月23日优先权日2009年9月23日发明者王琳,范淦彬申请人:苏州派腾生物医药科技有限公司